Báo cáo tìm hiểu và làm thí nghiệm lá trà xanh

Trang 1 Báo cáo tìm hiểu và làm thí nghiệm Trang 6 Nghiên cứu thành phần hóa học và đánh giá khả năng chống oxi hóa của một số cao chiết từ lá trà xanh -Camellia sinensis L, lá mơ tím -

Báo cáo tìm hiểu và làm

thí nghiệm Nguyễn Ngọc Nam

MỞ ĐẦU

Lá trà xanh

Lá mơ tím

Nghiên cứu thành phần hóa học và đánh giá khả năng chống oxi hóa của một số cao chiết từ lá trà xanh - Camellia sinensis L, lá mơ tím - Paederia foetida L

- Tách chiết cao, phân tích định lượng thành phần hóa

học trong cao chiết lá trà xanh và lá mơ tím

- Thử nghiệm khả năng chống oxi hóa của cao chiết lá trà xanh và cao chiết lá mơ tím trên mô hình invivo, invitro

Tổng quan

01

Gốc tự do

o Gốc tự do là những phân tử hoặc ion có chứa một hoặc nhiều electron độc thân không ghép đôi

o Gốc tự do vừa có thể là tác nhân khử cho điện

tử, vừa có thể là tác nhân oxy hóa lấy điện tử

Nguồn gốc

Nội sinh

Nguồn gốc

Ngoại sinh

Ảnh hưởng lên cơ thể

Stress oxi hóa và quá trình viêm

Nghiên cứu về stress oxi hóa

Chất chống oxi hóa tự nhiên

o Vitamin C: cần thiết cho việc chuyển đổi procollagen thành

collagen khi có khả năng oxy hóa proline dư thành

hydroxyproline

o Vitamin E: là loại vitamin có thể hòa tan trong chất béo, trong đó

vitamin E ở dạng alpha - tocopherol sẽ có hoạt tính chống oxy

hóa mạnh nhất

o Nhóm hợp chất polyphenol (phenolic, flavonoid, tannin), hợp

chất alkaloid,

o Polyphenol là chất chuyển hóa thứ cấp

của thực vật

o Polyphenol có thể làm giảm hoạt tính xúc

tác của các enzym tham gia vào quá trình

tạo ROS

o Tương tác của polyphenol với hoạt

động tổng hợp oxit nitric (NOS) có thể

điều chỉnh việc sản xuất NO

Polyphenol

Alkaloids

o Hợp chất alkaloid đã được chứng

minh có các công dụng trong việc

điều trị nhiều loại bệnh

o Hiện nay có khoảng 2000 loại

alkaloid đã được tìm ra, một số

trong số chúng có vai trò quan

trọng trong việc ngăn ngừa và điều

trị

Alkaloids

Colchicine là một alkaloid được phân lập từ

Colchicum autumnale có tác dụng chống

bệnh gút và chống viêm

Colchicine cũng có thể làm gián đoạn chu

kỳ lắng đọng tinh thể monosodium urate

trong các mô khớp, do đó cũng ngăn chặn

phản ứng viêm do kết quả

Lá trà xanh -Camellia sinensis L

Ngăn ngừa ung thư và các bệnh tim mạch,

chống viêm, của trà xanh và các thành phần

trà xanh cô lập đang được nghiên cứu

Nhiều tác dụng có lợi nói trên của trà

xanh là do catechin dồi dào nhất, (-) -

epigallocatechin-3-gallate (EGCG)

Lá trà xanh -Camellia sinensis L

o Thành phần hóa học của trà xanh rất

phức tạp: protein (15-20% trọng lượng

khô), mà các enzym của chúng chiếm

một phần quan trọng; axit amin

o Trà xanh có chứa polyphenol, bao

gồm flavanol, flavandiols, flavonoid và

axit phenolic; các hợp chất này có thể

chiếm tới 30% khối lượng khô Hầu

hết các polyphenol trong trà xanh

(GTPs) là flavonols, thường được gọi

là catechin

Lá trà xanh -Camellia sinensis L

Các nghiên cứu sử dụng mô hình động vật cho thấy

rằng các catechin trong trà xanh cung cấp một số biện

pháp bảo vệ chống lại các bệnh thoái hóa

Các thành phần trong trà có tác dụng chống oxy hóa,

kháng mô, chống ung thư và có thể bảo vệ con người

chống lại nguy cơ ung thư bởi các tác nhân môi trường

Ở người, Hirasawa và Takada [ 49 ] đã nghiên cứu hoạt

tính kháng nấm của catechin trà xanh chống lại nấm

Candida albicans

Lá mơ tím - Paederia foetida L

o Cây mơ là loài thực vật được trồng khá

nhiều ở nước ta Chúng được dùng như

một loại rau gia vị ăn kèm với một số loại

thịt khác nhau hay được dùng như vị

thuốc

o Nguồn gốc của loại cây này được là

phương Đông và Nam Á

Lá mơ tím - Paederia foetida L

o Iridoid glycoside: hoạt chất chính tạo

nên các hoạt tính dược lý của cây

Bao gồm 3 chất chính là

asperuloside, paederoside and

scandoside

o Tinh dầu: có mùi rất hăng là một

chất chứa sulfur, đây là chất gây ra

mùi hôi của cả cây

Lá mơ tím - Paederia foetida L

Qui trình thí nghiệm

02

Phần dung dịch Lọc bã bảo

quản ở 4OC

Phần bã

1 (g) bã + 10 ml ethanol 80o

Thu dịch bảo quản ở 4oC

Qui trình bay hơi tạo cao

Dịch chiết

Bay hơi, 25°CMáy cất quay chân không RV-10

Cao chiết, bảo quản 4°C

5 ml dịch chiết bay hơi còn 2 ml

Cao chiết

Đánh giá khả năng chống oxi hóa

Mô hình gây viêm MSU (MDA-TBA)

Mô hình chống oxy hóa in vivo trên chuột Swiss bị gây viêm

bằng MSU

Kí hiệu các cá thể

chuột

Tiêm MSU (25mg/ml)

Sau 24h Uống Colchicine 0.5mg/kg

Cao chiết nồng độ 500 (mg/kg thể trọng)

Tiến hanh thu mẫu máu,

mô cơ đùi, mô gan và mô

thận

Sau 24h

Xác định hàm lượng MDA

Đánh giá khả năng chống oxi hóa invivo

Trước khi tiêm 1h

Trước khi uống cao 1h

Sau khi uống cao

24h

Đánh giá khả năng chống oxy hóa in vivo

Kết quả

03

Khả năng chống oxi hóa

MSU+MT500

0 1 2 3 4

Trước khi tiêm 1h Sau khi uống 24hĐường kích khớp chân trái

Trước khi tiêm 1h Trước khi uống 1h Sau khi uống 24h

Cân nặng chuột

Khả năng chống oxi hóa mô

thận trái thận phải thận trái thận phải thận trái thận phải

MSU MSU+TX500 MSU+MT500

m MDA (mg MDA/kg mẫu)

MSU MSU+TT500 MSU+MT500 0

5 10 15

Đo MDA mô gan chuột (mg MDA/ kg

mẫu)

m MDA (mg MDA/ kg mẫu)

Khả năng chống oxi hóa trong máu

blank MSU MSU+TX500 0

0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4 0.45 0.5

0.113

0.231

0.475

f(x) = 0.181 x − 0.089 R² = 0.961184133317686

Kết luận

Tạo được cao chiết chứa nhóm hợp chất Phenolic từ loại lá trà xanh tuy

nhiên nồng độ cao chiết thu được chưa cao

Thí nghiệm invivo trên mô hình gây viêm MSU, các cao chiết thí nghiệm đều hiệu quả trong khả năng chống oxi hóa tuy nhiên do lượng mẫu

nhỏ chưa thể kết luận chính xác

Định hướng cho các thí nghiệm tiếp theo

Tăng thời gian bay hơi cao để tạo được cao chiết có nồng độ cao hơnCải thiện kĩ thuật đo đường kính khớp chuột, tiêm cho chuột và đo nồng

độ protein trong máu

Tìm hiểu và làm thí nghiệm phương pháp sắc kí bản mỏng, xác định hàm lượng polyphenol tổng số được xác định bằng phương pháp Folin-Ciocalteu và định lượng khả năng chống oxy hóa tổng số bằng phướng

pháp quét gốc tự do DPPH