tiểu luận phân tích công cụ các phương pháp xác định hàm lượng vitamin trong thực phẩm

WWW.DAYKEMQUYNHON.COM TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA, ĐHQG TP HCM KHOA KỸ THUẬT HỐ HỌC TIỂU LUẬN PHÂN TÍCH CƠNG CỤ CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG VITAMIN TRONG THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH, THÁNG 12/2013 WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON WWW.DAYKEMQUYNHON.COM Tiểu Luận Môn Học CÁC PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG VITAMIN TRONG THỰC PHẨM I Giới thiệu chung họ Vitamin thực phẩm Phân loại Vitamin thực phẩm – phản ứng sinh hóa vitamin Vitamin ghép hai chữ: “vita” “amine” “Vita” gốc Latinh có nghĩa sống, “amine” acid amin Vitamin acid amine cần thiết cho sống Cơ thể người cần lượng nhỏ Vitamin thiếu chúng thể mắc bệnh Hiện người ta nghiên cứu phân lập 30 loại vitamin khác nhau, đồng thời nghiên cứu thành phần, cấu tạo tác dụng sinh lý chúng Người ta tổng hợp số lượng lớn vitamin tổng hợp hoá học phịng thí nghiệm Căn vào tính hồ tan vitamin mà ngày người ta chia vitamin làm hai nhóm 1.1 Các vitamin tan nước Vitamin tan nước chủ yếu tham gia làm nhiệm vụ xúc tác trình sinh học gắn liền với giải phóng lượng ( phản ứng oxi hoá - khử, phân giải hợp chất hữu ) nghĩa chúng hoàn thành chức năng lượng nhóm Vitamin B1 (tiamin), Vitamin B2 (riboflavin), Vitamin B3 (axit pantotenic), Vitamin B5 (nicotinamit), Vitamin B6 (piridoxin), Vitamin B7 (biotin), Vitamin B10 (axit folic), vitamin B12 (các cianocobalamin), vitamin B15 (axit pangaminic), vitamin C, vitamin P (citrin), vitamin U (S-metyl-metionin), Vitamin C,… 1.2 Các vitamin tan chất béo ( dầu mỡ) Vitamin hoà tan chất béo (trong dầu mỡ) tham gia vào phản ứng tạo nên chất, tạo nên cấu trúc, quan mô thể, nghĩa chúng hoàn thành chức tạo nhóm Vitamin A (A1, A2), D, K, E Phân bố WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON WWW.DAYKEMQUYNHON.COM Tiểu Luận Mơn Học Thực phẩm chứa nhiều loại vitamin, điển - Vitamin A có nhiều gan, cá, sữa Tiền tố vitamin A có nhiều cà rốt, rau xanh, mơ, dưa chột, đào có - màu vàng, ngơ Vitamin D có nhiều cá, gan, lòng đỏ trứng, thịt lợn, chất béo sữa Vitamin E có nhiều bột mì, hạnh nhân Vitamin C có nhiều cam, chanh, bưởi, rau xanh, cải bắp, cải xoong, xoài, - củ cải, hành tây, ớt ngọt, rau mùi, ổi Vitamin B1 có nhiều gạo, bột mì, bột đậu xanh, thịt gà, nấm Vitamin B6 có nhiều gan bê, ruốc thịt, thịt gà, ngơ Vitamin B9 (hay cịn gọi axit pholic) có nhiều măng tây, rau xanh, đậu - rau xanh, gan, thịt gà, trứng Vitamin B12 có nhiều mát làm từ thịt dê thịt cừu, cá, hạnh nhân, cải xoong, dưa bắp cải, sữa tươi, sữa bột, sữa chua, sữa đậu nành, nước khống Cấu tạo, tính chất, trạng thái cảm quan Vitamin B1 WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM Vitamin B2 WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM Tiểu Luận Môn Học Vitamin B3 Vitamin B5 Vitamin B6 Vitamne B7 Vitamin B9 Vitamin B12 WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham Tiểu Luận Môn Học WWW.DAYKEMQUYNHON.COM Vitamin C WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM Tiểu Luận Môn Học Các vitamin khác tính chất vật lý, tính chất hóa học Trong tự nhiên, vitamin tồn dạng rắn dạng keo Ví dụ - Vitamin B: nhóm vitamin B tan tốt nước, thường dạng tinh thể Vitamin B1 tinh thể trắng hình kim hay dạng vẩy, thường có mùi đặc trưng Khi tiếp xúc với khơng khí, chế phẩm khan nhanh chóng hút ẩm - (khoảng 4% nước) Vitamin B1 có tính axit, hồ tan tốt mơi trường nước, axit acetic, khó tan ethanol 96% methanol, không tan ete, benzen hay cloroform chịu nhiệt nên không bị phân huỷ nấu nướng Vitamin B1 - nóng chảy 2330C-2520C Vitamin B1 bền mơi trường axit, cịn mơi trường kiềm dễ bị - phân huỷ đun nóng Vitamin B2 dạng tinh thể màu vàng, có vị đắng, dễ bị phân hủy ánh nắng mặt trời, nhiệt độ cao khơng ổn định với tia cực tím Trong vùng UV Vitamin B2 hấp thu bước sóng 223,3 268,0nm Vitamin B2 hoà tan nước, ổn định môi trường axit, chịu nhiệt, phân huỷ nhanh mơi trường kiềm Nó bền vững đơng lạnh, trạng thái khô Vitamin - B2 bền với nhiệt axit Vitamin B6 tinh thể không màu, vị đắng, hòa tan tốt nước rượu, chịu nhiệt, nhạy cảm với ánh sáng, pyridoxin bazơ có nhiệt độ nóng chảy 1600C, pyridoxin hydrochloric nóng chảy 204-206 0C, bền vững đun nóng Bền đun sôi axit hay kiềm, không bền mơi trường có tính oxy hóa Vitamin B6 nhạy cảm với ánh sáng Chúng phân hủy nhanh chiếu sáng mơi trường kiềm hay trung tính, cịn mơi trường axit pyridoxin, - pyridoxan pyridoxamin bền Vitamin C kết tinh không màu vàng, dễ tan nước (300g/lít) Dung dịch nước 5% có pH=3 Có dùng dạng muối natri dễ tan nước - (900g/lít) Vitamin A tồn tự nhiên gồm dạng: WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham Tiểu Luận Mơn Học WWW.DAYKEMQUYNHON.COM • Retinol: dạng hoạt động vitamin A, đồng hố trực tiếp • thể Tiền vitamin A: tiền chất vitamin A biết đến nhiều tên bêta-caroten Tiền chất chuyển hoá ruột - thành vitamin A để thể sử dụng Vitamin E: tồn tự nhiên với dạng khác nhau, chất dầu lỏng, khơng màu, hịa tan tốt dầu thực vật, rượu etylic kết tinh chậm rượu metylic giữ nhiệt đọ thấp tới -35 oC Vitamin E bền với nhiệt, không bền với tia tử ngoại Tầm quan trọng Vitamin Thông thường vitamin nhóm có tác dụng bổ sung, hồn thiện, làm tăng tác dụng Các nhóm đại diện tác dụng gồm có: - Nhóm vitamin làm tăng khả chống lại viêm nhiễm gồm có vitamin A, - B1, B2, C, D, H, P Nhóm vitamin bảo đảm cho hệ thần kinh hoạt động hồn hảo gồm vitamin - A, B1, B2, C Nhóm vitamin khởi động việc tạo máu gồm có vitamin A, B2, B12, axit - folic, C, D Nhóm vitamin chi phối tới việc tạo mô xương gồm có vitamin A, B1, C, D Nhóm vitamin chi phối tới hoạt động sinh dục gồm có A, C, E Nhóm trợ giúp tăng trưởng: gồm tất vitamin trừ vitamin H Việc lạm dụng Vitamin hậu - Vitamin phần lớn không tổng hợp thể mà phải có thức ăn nguồn gốc động vật thực vật Việc thiếu vitamin gây nhiều rối loạn cho - thể Nhiều người cho uống vitamin giúp tăng cường sức khỏe, khoa - học điều khơng hồn tồn đúng, dùng q liều Các vitamin thiết yếu với thể người, việc dùng vitamin liều gây tác động bất lợi, làm suy giảm hệ miễn dịch thể Nhiều người tiêu dùng “thoải mái” sử dụng loại vitamin thực WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM Tiểu Luận Môn Học phẩm bổ sung vitamin nghĩ “thừa cịn thiếu” mà đến - tác hại việc sử dụng vitamin liều Các chuyên gia dinh dưỡng nói cách tốt để thể hấp thụ vitamin thông qua chế độ ăn uống lành mạnh với nhiều trái rau Mọi người nên dùng vitamin bổ sung họ bổ sung đủ vitamin qua thực phẩm có nhu cầu thêm, nên tham khảo ý kiến bác sĩ chuyên gia dinh dưỡng uy tín liều để dùng II Các phương pháp phân tích xác định hàm lượng Vitamin thực phẩm Các vitamin nhà khoa học phát nghiên cứu từ lâu Đi kèm với việc nghiên cứu vitamin phương pháp phân tich hóa lý, y sinh dùng để xác định hàm lượng vitamin từ nguồn gốc khác phát triển đầy đủ chi tiết Trong phạm vi tiểu luận này, xin liệt kê phương pháp xác định hàm lượng vitamin thực phẩm theo nhóm vitamin tan nước dầu Dựa vào cấu trúc hóa học, trạng thái tồn vitamin, hàm lượng vitamin có mẫu cần phân tích điều kiện thiết bị, hóa chất có phịng thí nghiệm, vitamin xác định nhiều cách khác từ phương pháp phân tích cổ điển đến phương pháp phân tích đại A Định lượng nhóm Vitamin tan nước Như nêu trên, Vitamin thuộc nhóm bao gồm Vitamin B, Vitamin C… Đặc điểm chung nhóm có cấu trúc phân cực, tan nhiều nước Các phương pháp xác định hàm lượng nhóm Vitamin bao gồm: Phương pháp cực phổ a) Nguyên lý: Các Vitamin nhóm B Vitamin C hợp chất phân cực Vitamin nhóm B B1, B3, B6, B9, Vitamin C thực phẩm phân tích phương phấp cực phổ thiết bị METROHM 797 VA COMPUTRACE hãng METROHM (Thụy Sỹ) WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM Tiểu Luận Môn Học b) Tiến hành: Cân – 10(g) mẫu đồng vào becher 250ml, thêm vào 100ml HCl 0,1N, đun sôi cách thủy 40-45 phút, để nguội, chỉnh pH 4÷4,5 CH 3COONa 2,5M Sau đưa lên tới vạch 250ml nước cất, lọc qua giấy lọc, thu dịch mẫu qua lọc đem xác định máy đo cực phổ Nền tối ưu cho phương pháp đệm Acetate pH 6,5 - Chương trình chạy: - Dựng đường chuẩn Đo mẫu: Hút 10ml đệm Acetate pH 6,5 + 0,5ml mẫu + 0,5ml Triton X-100 vào cell đo đem xác định thiết bị cực phổ METROHM 797 VA COMPUTRACE WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 10 Tiểu Luận Môn Học - Nền đệm axetat, pH=6,5 Kết luận: Phương pháp cực phổ phương pháp phân tích hữu nhanh đạt độ xác cao, ngồi chi phí cho máy móc thiết bị hoá chất phù hợp với điều kiện phịng thí nghiệm Việt Nam Phương pháp chuẩn độ Iot xác định Vitamin C a) Nguyên tắc: xây dựng nguyên tắc phản ứng oxy hóa khử Iốt tương đối không tan nước, điều cải thiện cách pha trộn iốt với iođua hình thành triiođua: I2 + I- < > I3Triiođua oxy hóa vitamin C tạo acid dehydroascorbic: C6H8O6 + I3- + H2O > C6H6O6 + 3I- + 2H+ Vitamin C cịn diện dung dịch, triiotđua chuyển thành ion iođua nhanh chóng WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 22 Tiểu Luận Môn Học bơ lớp dưới,cho vào 1g Na2SO4 khan.Dung dịch rượu khan chứa thiỏcom cho vào dãy ống nghiệp khác.Ta dãy màu tiêu chuẩn bền 2-3 ngày c) Tiến hành: - Cân 5-10g mẫu, nghiền cối sứ với 10-15ml H 2SO4 0.1N.Chuyển vào bình định mức cỡ 100ml,thêm H2SO4 đến 75ml - Đặt bình vào nồi cách thủy sơi 45 phút ,lắc điều, để nguội vào thêm chế phẩm photphataza vào( 1g mãu cần 0.03g khuẩn ti khô)bằng cách:cân khuẩn ti,đem nghiền cối với 2-3ml natri axetat 30% chuyển vào bình định mức, thêm natri axetat đến pH=5 - Đặt bình vào máy ổn nhiệt 40 oC 12 giờ.Sau lấy bình ra,thêm nước cất đến bình định mức,lắc kỹ,lọc - Hút lấy 5ml nước lọc cho vào phiễu chiết,thêm 10ml rượu butylic,lắc mạnh 1-2 phút,chiết tách bỏ lớp rượu Thêm vào 1ml dung dịch K 3Fe(CN)6 1% 3ml NaOH 15% ,lắc nhanh thêm 10ml rượu butylic.Lắc,tách bỏ lớp nước.Lọc lớp rượu qua giấy lọc chứa NaOH khan.Chuyển dung dịch vào ống nghiệm - Đo cường độ huỳnh quang mẫu thí nghiệm so với dãy dung dịch thiamim chuẩn máy quang phổ ánh sáng tử ngoại đèn thạch anh,thủy ngân TIK-4,kính lọc màu đen(kích thước 432ml nm,sự phát xạ 545nm) d) Tính kết quả: Hàm lượng vitamim B1(mg%)được tính theo cơng thứ sau: WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 23 Tiểu Luận Mơn Học Trong đó: a-Lượng vitamim có ống nghiệm chuẩn có màu huỳnh quang trùng với mẫu ống nghiệm (γ) V-dung tích bình định mức(ml) V1- thể tích dung dịch thí nghiệm lấy để oxi hóa(ml) w- khối lượng mẫu(g) 1000-chuyển từ γ mg Định lượng vitamin nhóm B vitamin C thực phẩm sắc ký lỏng ghép đầu dò UV a) Nguyên tắc: Vitamine B C chiết khỏi mẫu hỗn hợp Acetonitril : H 3PO4 0.05% (80:20) định lượng sắc ký lỏng kết nối với đầu dò UV Chuẩn làm việc: - Chuẩn gốc dạng bột rắn , độ tinh khiết 99.2%, Dr Ehrenstorfer hay tương đương Dung dịch chuẩn gốc (1000 mg/l) Cân 10,0 mg chuẩn rắn định mức 10 ml Acetonitril: H3PO4 0.05% (80:20) - Dung dịch chuẩn thứ cấp : Dung dịch chuẩn thứ cấp (500 mg/l) : hút ml dung dịch chuẩn gốc định mức 10ml Acetonitril: H3PO4 0.05% (80:20) WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 24 Tiểu Luận Môn Học Dung dịch chuẩn thứ cấp (200 mg/l) : hút ml dung dịch chuẩn gốc định mức 10ml Acetonitril: H3PO4 0.05% (80:20) Dung dịch chuẩn thứ cấp (100 mg/l) : hút ml dung dịch chuẩn gốc định mức 10ml Acetonitril: H3PO4 0.05% (80:20) - Dãy chuẩn làm việc có nồng độ 1.0; 2.0; 5.0; 10; 20; 50 mg/L Hút 0.1; 0.2; 0.5; 1.0; 2; ml dung dịch chuẩn thứ cấp (100mg/L) cho vào bình định mức 10ml, định mức đến vạch Acetonitril: H 3PO4 0.05% (80:20) ta dãy chuẩn có nồng độ 1; 2; 5; 10; 20; 50 mg/L Nồng độ dãy chuẩn thay đổi cho phù hợp với hàm lượng chất phân tích có mẫu b) Tiến Hành Phân Tích - Chuẩn bị mẫu: Mẫu phân tích tiến hành đồng trước phân tích:  Nếu mẫu phân tích có khối lượng 200 – 500 g, tiến hành đồng tồn mẫu phương pháp thích hợp ( mẫu lỏng tiến hành lắc trộn đều, mẫu rắn, sệt…tiến hành xay nhuyễn) Mẫu sau đồng phân làm 02 phần (phần chuyển cho phòng thí nghiệm, phần lưu trữ khu vực lưu trữ mẫu )  Nếu mẫu phân tích có khối lượng > 500 g, tiến hành phân chia mẫu phương pháp thích hợp cho đơn vị mẫu : lấy ½ đơn vị mẫu trộn ( mẫu chai lọ lấy ½ số chai đem đồng nhất, mẫu dạng viên lấy ½ khối lượng đem xay nhuyễn…) Toàn mẫu sau đồng chuyển xuống phịng thí nghiệm - Tiến hành phân tích mẫu:  Mẫu kiểm soát: WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham Tiểu Luận Môn Học - WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 25 Cân khoảng gam (hút ml) mẫu cần phân tích vào óng nhựa 15 ml, tiến hành thêm chuẩn nồng độ thích hợp (kết sau phân tích phải nằm khoảng nồng độ dãy chuẩn làm việc) vào mẫu phân tích, vortex mẫu, để n vịng 15 phút  Mẫu phân tích: - Cân khoảng gam (hút ml) mẫu đồng vào ống 15mL Tiền hành phân tích tương tự bước phía cho hai mẫu kiểm soát mẫu phân tích - Thêm vào 10 ml hỗn hợp Acetonitril : H3PO4 0.05% (80:20) - Vortex cho mẫu, đánh siêu âm phút nhiệt độ phòng - Ly tâm phút, 5000 vòng/phút - Sau ly tâm mẫu xong ta tiến hành chuyển phần dung dịch vào bình định mứt 25ml - Tiến hành chiết mẫu thêm lần, tương tự bước B.3, B.4, B.5 B.6 - Gợp toàn dung dịch chiết vào bình định mứt 25 ml định mứt đến vạch Pha loãng mẫu cần thiết - Sau lọc mẫu qua màng lọc 13mm, 0.45µm - Thu dịch lọc cho vào vial - Tiến hành đo máy HPLC/UV - Tiến hành đo máy HPLC/UV  Điều kiện phân tích Cột sắc ký: Cột sắc ký lỏng pha thuận Phenomenex Luna 5µ NH 100A (250 x 4.6 mm x 5µm) cột bảo vệ hay tương đương WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 26 Tiểu Luận Mơn Học Bước sóng :Vitamine B1 (254 nm) • • • • • • • • Vitamin B2 (475nm) Vitamin B3 (261nm) Vitamin B5 (211nm) Vitamin B6 (290nm) Vitamin B7 (211nm) Vitamin B9 (283nm) Vitamin B12 (361nm) Vitamin C (254nm) Pha động : ACN : dung dịch H3PO4 0.05% Cụ thể sau: - (B7, B9, B12): (B2): (C,B1, B3, B5, B6): ACN/H3PO4 0.05% / 10:90 ACN/H3PO4 0.05% / 15:85 ACN/H3PO4 0.05% / 5:95 Tốc độ dòng : 1.0 ml/min Thể tích tiêm: 10µl c) Tính Kết Quả Hàm lượng Vitamine B C (mg/kg) có mẫu tính theo công thức sau: C  P C =  ×  m  100 x V x f Trong đó: - C: hàm lượng Vitamine có mẫu, tính theo mg/kg - Co: hàm lượng Vitamine dịch chiết thông qua đường chuẩn, mg/L - m: lượng cân ( thể tích) mẫu thử, g (ml) - P: độ tinh khiết chất chuẩn, % - V: thể tích định mức mẫu - f: hệ số pha lỗng (nếu có) WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham Tiểu Luận Mơn Học WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 27 Sắc ký đồ đánh giá độ lặp lại thiết bị chuẩn Vitamine B2 Phương pháp trắc quang xác định hàm lượng vitamin C thuốc thử 2,6 Diclophenolindophenol a) Nguyên tắc: Vitamin C (axit ascorbic) hòa tan nước, dễ bị phân hủy tác dụng chất oxi hóa bền mơi trường axit Vì người ta thường chiết axit ascorbic mẫu phân tích dung dịch axit axit axetic 5%, axit metaphôtphoric 2% Phương pháp dựa nguyên tắc axit ascorbic có khả oxi hóa khử thuận nghịch chất thị 2,6 - diclophenol - inodophenol – DPIP Dựa vào lượng chất thị tiêu tốn tính lượng axit ascorbic có mẫu phân tích Chất thị có khả chuyển màu PH môi trường thay đổi từ kiềm sang axit, có màu tím khoảng PH từ đến có màu hồng PH < WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 28 Tiểu Luận Môn Học b) Hóa chất : • Dung dịch HCl 1% CH3COOH 5% • Dung dịch axit metaphosphoric (HPO3) 2% hay axit axetic 1% • Dung dịch amoni oxalate (C2H8N2O4) bão hịa • Tinh thể KI • Dung dịch H2SO4 2% • Axit ascorbic (Vitamin C) tinh khiết ( bảo quản kín lọ màu tối) • Dung dịch hồ tinh bột 1% • Dung dịch thuốc thị DPIP 0.001N: cân 0.15g DPIP cho vào bình định mức dung tích 500 ml, them 350ml nước cất, cho tiếp dung dịch đệm phơtphat PH = 6,9 đến 7,0 đến vạch mức nước, thuốc thử bị phá hủy nhanh nên pha với dung dịch đệm Thuốc thử DPIP bảo quản bình có màu nơi tối ( khơng ngày) • Dung dịch đệm phosphate PH = 6.9 đến 7,0: trộn thể tích KH 2PO4 (9,075 gam KH2PO4 lit nước cất) thể tích Na 2HPO4 (11,867 gam Na2HPO4.2H2O lit nước cất) với trước đem dùng c) Tiến hành: - Cân 10 đến 50 g rau tươi đến 10 g sản phẩm đóng hộp, tùy theo hàm lượng Vitamin C có lọ nguyên liệu Cho mẫu vào cối sứ WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 29 Tiểu Luận Môn Học - Cho thêm 4,5 ml HCl 1% (hoặc CH3COOH 5%) vào cối (ngập kín mẫu) Khi lấy mẫu tránh dung dụng cụ sắt đồng Nghiền mẫu không 10 phút - Cho dịch nghiền vào bình định mức 100 ml Cho thêm 25 ml axit metaphosphoric 2% ( chì axetat 5%) để loại bỏ protein Lắc đều, tiếp tục cho thêm HCl 1% (hoặc axit oxalic 1%) để tráng cối thêm đến vạch mức Khi thí nghiệm với mẫu động vật dùng axit tricloaxetic (CCl 3COOH) 20%, cho nồng độ đạt 5% dung dịch (25 ml) Trong trường hợp khơng có axit metaphosphoric (HPO3) oxalic (C2H2O4) dùng HCl 1% CH3COOH 5% Lắc để yên 10 phút, lọc - Dùng pipet lấy ml dịch chiết lọc cho vào bình nón 50 ml, thêm ml dung dịch amoni oxalate bão hòa, 10 ml nước cất chuẩn độ dung dịch DPIP xuất màu hồng bền ( không màu 10 phút) Trong truờng hợp dùng axit oxalic khơng cẩn cho thêm amoni oxalate Song song làm thí nghiệm kiểm tra với hóa chất sử dụng Chú ý: Khi xác định Vitamin C mẫu thí nghiệm phải phân tích mẫu, mẫu bình thí nghiệm Kết chuẩn độ lần không sai khác 0,03 ml DPIP 0,001N Thời gian chuẩn độ không phút lượng thuốc thử DPIP dung để chuẩn độ khoảng từ đến ml (khơng q ml ml) d) Tính kết quả: Hàm lượng Vitamin C (mg %) tính theo cơng thức WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 30 Tiểu Luận Mơn Học Trong đó: a – Số ml dung dịch DPIP 0,001N dung chuẩn độ bình thí nghiệm, b – Số ml dụng dịch DPIP 0,001N dung chuẩn độ bình kiểm tra, f – hệ số dung dịch chuẩn, V – Thể tích dịch chiết Vitamin C (ml), w – khối lượng mẫu thí nghiêm (g) Xác định hệ số f : hòa tan đến 1,5 mg axit ascorbic vào 50 ml H 2SO4 2% Lấy ml dung dịch chuẩn độ dung dịch DPIP 0,001N màu hồng bền lấy vào bình định mức khác ml dung dịch axit ascorbic trên, thêm tinh thể KI (3 – mg) giọt hồ tinh bột 1% Chuẩn độ dung dịch KIO 0,001N xuất màu xanh Hệ số f tính theo cơng thức: Trong đó: 0,088 – số mg axit ascorbic ứng với 1ml dung dịc KIO 0,001N (giống với 1ml dung dịch DPIP 0,001N) a – số ml dung dịch KIO3 0,001N dùng để chuẩn độ ml dung dịch axit ascorbic b – số ml dung dịch DPIP 0,001N để chuẩn độ ml dung dịch axit ascorbic B Định lượng nhóm Vitamin tan dầu WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 31 Tiểu Luận Môn Học Hiện nay, phương pháp sắc ký lỏng (HPLC) với đầu dò UV phương pháp tối ưu để định lượng vitamin tan dầu Định lượng vitamin A, D, E, K thực phẩm phương pháp sắc ký lỏng ghép đầu dò UV a) Nguyên tắc: Vitamin A, D, E, K sau xà phịng hóa chiết khỏi mẫu hỗn hợp dietyl ete:hexan định lượng sắc ký lỏng kết nối với đầu dò UV Chuẩn làm việc: - Chuẩn gốc dạng bột Retinylacetate (vitamin A) BYT hay tương đương DL-alpha_Tocopherylacetate (độ tinh khiết > 98%) (vitamin E) Dr.Ehrenstafu hay tương đương - Dung dịch chuẩn gốc (1000 mg/l): Cân 10,0 mg chuẩn rắn, chiết tương tự mẫu, định mức 10 ml ACN - Dung dịch chuẩn thứ cấp: Dung dịch chuẩn thứ cấp (100 mg/l): Hút ml dung dịch chuẩn gốc (1000 mg/l) vào bình định mức 10 ml, định mức đến vạch ACN - Dãy chuẩn làm việc có nồng độ 1.0; 2.0; 5.0; 10.0; 20.0; 50.0; 100; 200; 250 mg/l Hút 0.1 ml; 0.2 ml; 0.5 ml; 1.0 ml; 2.0 ml dung dịch chuẩn thứ cấp (100 mg/l) vào bình định mức 10 ml, định mức đến vạch ACN ta dãy chuẩn có nồng độ 1.0; 2.0; 5.0; 10; 20 mg/l Hút 0.5 ml; ml; ml; ml; ml; 2.5 ml dung dịch chuẩn gốc (1000 mg/l) vào bình định mức 10 ml, định mức đến vạch ACN ta dãy chuẩn có nồng độ 50; 100; 200; 250 mg/l WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 32 Tiểu Luận Môn Học - Nồng độ dãy chuẩn thay đổi cho phù hợp với hàm lượng chất phân tích có mẫu (trong khoảng – 250 mg/L) b) Tiến Hành Phân Tích - Chuẩn bị mẫu  Đồng mẫu: Mẫu phân tích phải có khối lượng 200 g Tiến hành xay nhuyễn toàn bộ, chia toàn phần xay nhuyễn thành phần (1 phần chuyển cho phịng thí nghiệm để phân tích, phần lưu trữ)  Chuẩn bị mẫu: • Mẫu kiểm soát: mẫu chưa thêm chuẩn Cân khoảng g mẫu cho vào ống 50 ml, tiến hành thêm chuẩn nồng độ thích hợp (kết phân tích nằm khoảng nồng độ dãy chuẩn làm việc) vào mẫu, vortex mẫu, để yên khoảng 15 phút • • Mẫu phân tích: cân khoảng g mẫu đồng vào ống 50 ml Thêm vào ống mẫu g KOH, 0.5 g acid ascorbic 30 ml EtOH 96 0, vortex phút Đun sơi cách thủy 900C h • Chuyển dung dịch sau xà phịng hóa vào phễu chiết, rửa ống ly tâm khoảng lần nước cất tập trung nước rửa vào phiễu chiết • Vitamin từ dung dịch xà phịng hóa chiết lần hỗn hợp dung môi dietyl ete:hexan (tỷ lệ 1:3), lần 30 ml Cho tồn dung mơi chiết thu vào phễu chiết thứ rửa nước cất khơng cịn vết kiềm (thử với giấy pH) • Thu lớp dung mơi sau loại kiềm cho vào bình cầu, quay đến cạn WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 33 Tiểu Luận Mơn Học • Hịa tan phần quay ml ACN, lắc Lọc qua màng lọc 0.45 µm thu dịch lọc vào vial Tiến hành phân tích HPLC/UV - Điều kiện phân tích • Cột sắc ký: Cột sắc ký lỏng pha đảo C 18 (250 x 2.1mm, 5àm) v ct bo v hay ã tng đương Bước sóng: Vitamin A: 325 nm Vitamin E: 289 nm Vitamin D: 265 nm Viatmin K: 254 nm • • • Pha động: ACN : H2O (90:10) Tốc độ dịng: 0.3 ml/min Thể tích tiêm: 20µl c) Tính Kết Quả Hàm lượng Vitamin tan dầu có mẫu tính theo cơng thức sau:  C0 C = m mau     × P × Vdm × f × k  Trong đó: C: hàm lượng Vitamin có mẫu, tính theo mg/Kg Co: hàm lượng Vitamin dịch chiết thông qua đường chuẩn, mg/L mmau: lượng cân (thể tích) mẫu thử, g (ml) P: độ tinh khiết chất chuẩn Vdm: thể tích định mức mẫu k: hệ số chuyển đổi (nếu có) WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 34 Tiểu Luận Môn Học f: hệ số pha lỗng (nếu có) 300 200 10 15 20 100 0 Minutes 10 Sắc ký đồ chuẩn vitamin E 100 mg/L Sắc ký đồ chuẩn vitamin E 500 mg/L 20 15.173 449062 20 mAU 15 Minutes 10 10 mAU 25 mAU mAU 25 15.573 30657012 50 15.627 6135234 mAU 50 0 10 15 20 Minutes Sắc ký đồ phân tích Vitamin E mẫu thức ăn chăn nuôi WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham 20 tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham WWW.DAYKEMQUYNHON.COM 35 1000200 100 0 8.400 124212186 200 mAU 1500300 mAU 300 8.267 24955024 100 500 10 Minutes 10 Minutes Sắc ký đồ chuẩn vitamin A 50 mg/L Sắc ký đồ chuẩn vitamin A 250 mg/L 1000 8.347 51508630 1000 m AU 500 0 500 m AU mAU Tiểu Luận Môn Học 10 Minutes Sắc ký đồ phân tích Vitamin A mẫu thực phẩm C Tài liệu tham khảo 1) Merck Index, 10th ed.; Windholz, Martha Ed.; Merck: Rathway, N.J., 1983; p1180 WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham tieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.phamtieu.luan.phan.tich.cong.cu.cac.phuong.phap.xac.dinh.ham.luong.vitamin.trong.thuc.pham