Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm và sự đáp ứng miễn dịch của gà, vịt đối với vaccine h5n1 tại tỉnh thái nguyên

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VŨ THỊ TUYẾT NHUNG Tên đề tài: “NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ SỰ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐỐI VỚI VACXIN H5N1 TẠI TỈNH THÁI NGUYÊN” LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP CHUYÊN NGÀNH: THÚ Y Mã ngành: 60 62 50 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Tô Long Thành TS Nguyễn Quang Tính Thái Ngun - 2011 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VŨ THỊ TUYẾT NHUNG Tên đề tài: “NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH CÚM GIA CẦM VÀ SỰ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH CỦA GÀ, VỊT ĐỐI VỚI VACXIN H5N1 TẠI TỈNH THÁI NGUYÊN” LUẬN VĂN THẠC SỸ KHOA HỌC NƠNG NGHIỆP Thái Ngun - 2011 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Bệnh cúm gia cầm thể độc lực cao (HPAI) bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, có tốc độ lây lan nhanh với tỉ lệ gây chết cao đàn gia cầm nhiễm bệnh Bệnh virus cúm typ A thuộc họ Orthomyxoviridae với nhiều phân typ khác gây nên Virus gây bệnh cho gà, vịt, ngan, ngỗng, đà điểu, lồi chim cịn gây bệnh cho ngƣời Với tính chất nguy hiểm bệnh, Tổ chức Thú y Thế giới (OIE) xếp bệnh vào Bảng A - Bảng danh mục bệnh truyền nhiễm nguy hiểm Bệnh xảy khắp nơi giới, gây thiệt hại nặng nề kinh tế, ảnh hƣởng đến tình hình trị xã hội Virus cúm gia cầm virus ARN phân mảnh có kháng nguyên bề mặt H (từ H1 đến H16) N (từ N1 đến N9) có vai trị quan trọng sinh bệnh học miễn dịch học (Tô Long Thành cs, 2009)[39] Hiện nay, dịch cúm gia cầm mối quan tâm điều đáng lo ngại phạm vi tồn cầu, đến có 50 nƣớc giới xuất dịch, dịch có chiều hƣớng diễn biến phức tạp Tại Việt Nam, dịch cúm gia cầm xuất bất ngờ vào cuối năm 2003, chăn nuôi gia cầm chủ yếu rải rác nông hộ Đây loại bệnh dịch mới, lây lan nhanh Sau dịch cúm gia cầm xảy nƣớc ta, Ban Chỉ đạo Phòng chống dịch Quốc gia nghiên cứu, áp dụng nhiều biện pháp, có biện pháp tiêm phòng vaccine cho đàn gia cầm nƣớc Việc áp dụng tiêm phòng vaccine cho đàn gia cầm đƣợc coi nhƣ giải pháp, công cụ hỗ trợ tích cực để ngăn chặn, khống chế tốn bệnh cúm gia cầm vùng Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn bị nhiễm bệnh Theo quan điểm OIE, FAO, WHO, vaccine nên sử dụng nhƣ biện pháp chiến lƣợc toàn diện phòng chống bệnh cúm gia cầm Trong năm 2010, Thái Nguyên sử dụng vaccine H5N1 Trung Quốc để tiêm phịng cho đàn gia cầm tồn tỉnh Nhiều kết nghiên cứu cho thấy, với loại vaccine nhƣng tiêm phòng đại trà địa phƣơng khác cho đáp ứng miễn dịch với đàn gia cầm khác Vì vậy, nghiên cứu khả đáp ứng miễn dịch gia cầm với vaccine H5N1 thực địa tỉnh Thái Nguyên để biết hiệu phòng bệnh vaccine, tỷ lệ bảo hộ độ dài miễn dịch gia cầm, từ xác định thời gian tiêm nhắc lại phù hợp nhằm nâng cao hiệu vaccine cần thiết Xuất phát từ yêu cầu cấp bách thực tiễn sản xuất, tiến hành đề tài: “Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm đáp ứng miễn dịch gà, vịt vaccine H5N1 tỉnh Thái Nguyên” Mục tiêu đề tài - Xác định đƣợc số đặc điểm bệnh cúm gia cầm tỉnh Thái Nguyên - Đánh giá đƣợc khả đáp ứng miễn dịch gà vịt đƣợc tiêm vaccine H5N1 tỉnh Thái Nguyên Ý nghĩa khoa học thực tiễn - Các kết nghiên cứu Thái Nguyên nhằm cung cấp, bổ sung hoàn thiện thông tin bệnh cúm gia cầm Việt Nam - Có biện pháp tổ chức tiêm vaccine cúm gia cầm đại trà cho đàn gia cầm tỉnh Thái Nguyên để đạt đƣợc kết cao Từ rút đƣợc kinh nghiệm tiêm phịng thực tế cho tỉnh nói riêng cho nƣớc nói chung Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn - Xây dựng kế hoạch tiêm phòng vaccine cúm địa bàn tỉnh thời gian Địa điểm nghiên cứu Phòng virus- Trung tâm Chẩn đoán Thú y TW, Trung tâm Thú y vùng Hà Nội, sở hộ chăn nuôi gia cầm tỉnh Thái Nguyên, Trạm thú y tỉnh Thái Nguyên, Chi Cục Thú y tỉnh Thái Nguyên Thời gian Từ tháng 10 năm 2010 đến tháng 10 năm 2011 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU CHUNG VỀ BỆNH CÚM GIA CẦM Bệnh cúm gia cầm - bệnh cúm gà (Avian influenza), bệnh truyền nhiễm gây virus cúm typ A thuộc họ Orthomyxoviridae với nhiều subtyp khác (Ito Kawoaka, 1998) [56] Trƣớc bệnh đƣợc gọi bệnh dịch tả gà (Fowl plague), nhƣng từ Hội nghị Quốc tế lần thứ bệnh cúm gia cầm Beltsville (Mỹ), năm 1981 thay tên tên bệnh cúm động lực cao gia cầm (Highly Pathogenic Avian Influenza viết tắt HPAI) để virus cúm typ A có độc lực cao (Cục Thú y, 2004) [6] Bệnh cúm gia cầm HPAI bệnh truyền nhiễm nguy hiểm, có tốc độ lây lan nhanh với tỉ lệ chết cao đàn gia cầm nhiễm bệnh Virus gây bệnh cúm gia cầm chủ yếu loại H5, H7 H9, gây bệnh cho gà, vịt, ngan, ngỗng, đà điểu, loại chim Virus gây bệnh cho ngƣời thành đại dịch, bệnh cúm gia cầm ngày trở nên nguy hiểm hết (Cục Thú y, 2005) [7], (Lê Văn Năm, 2004) [28] 1.2 LỊCH SỬ BỆNH CÚM GIA CẦM Năm 412 trƣớc công nguyên, Hippocrate mô tả bệnh gà nhƣ bệnh cúm Năm 1680 vụ đại dịch cúm đƣợc mô tả kỹ từ đến xảy 31 vụ đại dịch Trong 100 năm qua xảy vụ đại dịch cúm vào năm 1889, 1918, 1957, 1968 (Cục Thú y, 2004) [6] Năm 1878 Italy xảy bệnh gây tử vong cao đàn gia cầm đƣợc gọi bệnh dịch tả gia cầm (Fowl plague), bệnh lần đƣợc Porroncito mơ tả ơng nhìn nhận cách sáng suốt tƣơng lai Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn bệnh quan trọng nguy hiểm Năm 1901, Centanni Savunozzi đề cập đến ổ dịch xác định đƣợc nguyên siêu nhỏ qua lọc (Filterable agent) yếu tố gây bệnh Đến năm 1955, Achafer xác định đƣợc nguyên gây bệnh thuộc nhóm virus cúm typ A thông qua kháng nguyên bề mặt H7N1 H7N7 gây chết nhiều gà, gà tây chim hoang Bắc Mỹ, Nam Mỹ, Châu Phi, Trung Cận Đông (Lê Văn Năm, 2004) [28] Năm 1963, virus cúm typ A đƣợc phân lập từ gà tây Bắc Mỹ loài thuỷ cầm di trú dẫn nhập virus vào đàn gà Cuối thập kỷ 60, phân typ H1N1 thấy lợn có liên quan đến ổ dịch gà tây Mối liên hệ lợn gà tây dấu hiệu virus cúm động vật có vú lây nhiễm gây bệnh cho gia cầm Những nghiên cứu cho virus cúm typ A phân typ H1N1 lợn truyền cho gà tây, phân typ H1N1 vịt truyền cho lợn (Cục Thú y, 2004) [6] Năm 1971, Beard mô tả kỹ virus gây bệnh đặc điểm bệnh lý lâm sàng gà ổ dịch cúm gà, gà tây lớn xảy Mỹ mà chủng gây bệnh H7N1 Từ năm 1960 - 1979 bệnh đƣợc phát Canada, Mehico, Achentina, Braxin, Nam Phi, Ý, Pháp, Anh, Hà Lan, Australia, Hồng Kông, Nhật Bản, nƣớc vùng Trung Cận Đông, nƣớc thuộc liên hiệp Anh Liên Xô (Đào Yến Khanh, 2005) [24] Các cơng trình nghiên cứu có hệ thống bệnh cúm gia cầm lần lƣợt đƣợc công bố Australia năm 1975, Anh năm 1979, Mỹ năm 1983 1984, Ailen năm 1983 - 1984 đặc điểm sinh học, bệnh học dịch tễ học, phƣơng pháp chẩn đốn miễn dịch biện pháp phịng chống bệnh (Đào Yến Khanh, 2005) [24] Sự lây nhiễm từ chim hoang dã sang gia cầm có chứng từ trƣớc năm 1970 nhƣng đƣợc công nhận xác định đƣợc tỉ lệ nhiễm virus cúm cao số loài thuỷ cầm di trú (Cục Thú y, 2004) [6] Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn Từ sau phát virus cúm typ A, nhà khoa học thấy virus cúm có nhiều lồi chim hoang dã gia cầm nuôi vùng khác giới Bệnh xảy nghiêm trọng với gia cầm thuộc phân typ H5 H7 nhƣ Scotland năm 1959 H5N1, Mỹ năm 1983 - 1984 H5N2 (Cục Thú y, 2004) [6] Đến nay, dịch cúm gia cầm xảy khắp châu lục với mức độ ngày nguy hiểm loài gia cầm sức khoẻ cộng đồng, thúc Hiệp hội nhà chăn nuôi gia cầm tổ chức hội thảo chuyên đề bệnh cúm gà Hội thảo lần tổ chức vào năm 1981, lần thứ Ailen năm 1987, lần thứ Ailen năm 1992 Từ đến hội nghị dịch tễ giới, bệnh cúm gia cầm nội dung đƣợc coi trọng (Lê Văn Năm, 2004) [28] 1.3 TÌNH HÌNH DỊCH CÚM GIA CẦM TRÊN THẾ GIỚI VÀ TRONG NƢỚC 1.3.1 Tình hình dịch cúm gia cầm giới Virus cúm gia cầm phân bố khắp tồn cầu, dịch bệnh xảy nhiều nƣớc giới Năm 1983 - 1984 Mỹ, dịch cúm gà xảy chủng virus H5N2 bang Pensylvania, Virginia, Newtersey làm chết tiêu huỷ 19 triệu gà (Phạm Sỹ Lăng, 2004) [25] Cũng thời gian Ireland ngƣời ta phải tiêu huỷ 270 nghìn vịt khơng có triệu chứng lâm sàng nhƣng phân lập đƣợc virus cúm chủng độc lực cao (HPAI) để loại trừ bệnh cách hiệu quả, nhanh chóng Năm 1977 Minesota phát dịch gà tây chủng H7N7 Năm 986 Australia dịch cúm gà xảy bang Victoria chủng H5N2 Năm 1997 Hồng Kông dịch cúm gà xảy virus cúm typ A subtyp H5N1 Toàn đàn gia cầm lãnh thổ bị tiêu diệt gây tử vong cho ngƣời (Cục Thú y, 2004) [6] Nhƣ lần virus cúm Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn gia cầm vƣợt “rào cản loài” để lây cho ngƣời Hồng Kơng làm cho 18 ngƣời nhiễm bệnh, có ngƣời chết Năm 2003, Hà Lan dịch cúm gia cầm xảy với quy mô lớn chủng H7N7 gây ra, 30 triệu gia cầm bị tiêu huỷ, 83 ngƣời lây nhiễm ngƣời chết, gây thiệt hại kinh tế nghiêm trọng (Phạm Sỹ Lăng, 2004) [26] Từ cuối năm 2003 - 2005 có 11 nƣớc vùng lãnh thổ xuất dịch cúm gia cầm H5N1 gồm Hàn Quốc, Nhật Bản, Thái Lan, Campuchia, Lào, Indonesia, Trung Quốc, Malaysia, Hồng Kông Việt Nam Ngồi có nƣớc vùng lãnh thổ khác có dịch cúm gia cầm chủng khác Pakistan, Hoa Kỳ, Canada, Nam Phi, Ai Cập, Cộng hoà Dân chủ Nhân dân Triều Tiên Đài Loan Vào cuối tháng 3/2005 Myanmar phát hàng ngàn gà chết nghi bệnh cúm gia cầm Tính đến nay, có tổng cộng 55 nuớc vùng lãnh thổ bùng phát dịch cúm làm 250 triệu gia cầm bị chết tiêu hủy bắt buộc Bệnh cúm lây sang ngƣời với 258 trƣờng hợp nhiễm bệnh 154 ngƣời chết (Lê Văn Năm, 2004) [27] 1.3.2 Tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam Cuối năm 2003, dịch cúm gia cầm phát trại gà giống Công ty C.P (Thái Lan) xã Thuỷ Xuân Tiên, huyện Chƣơng Mỹ, tỉnh Hà Tây, gây ốm chết 8.000 gà ngày Ngày 02/01/2004, Công ty tiến hành tiêu huỷ 100.000 gà Dịch nhanh chóng lay lan hầu hết tỉnh nƣớc Để thuận lợi cho việc đánh giá dịch tễ học chia q trình dịch từ xuất vào cuối năm 2003 đến thành đợt dịch nhƣ sau: * Đợt dịch thứ từ tháng 12/2003 đến 30/3/2003: Cuối năm 2003, dịch cúm gia cầm thể độc lực cao với tác nhân gây bệnh virus cúm H5N1 xảy Việt nam Đây lần lịch sử nƣớc ta dịch cúm gia cầm xuất Hà Tây, Long An Tiền Giang, đƣợc coi Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn bệnh gia cầm Dịch lây lan cách nhanh chóng lúc nhiều địa phƣơng khác nhau, gây thiệt hại lớn cho ngƣời chăn nuôi gia cầm Chỉ vòng tháng, đến ngày27/02/2004 dịch xuất 2.574 xã, phƣờng (chiếm 24,6%) thuộc 381 huyện, quận, thị xã (chiếm 60%) 57 tỉnh, thành phố nƣớc Tổng số gia cầm bị mắc bệnh, chết tiêu hủy 43,9 triệu con, chiếm 16,8% tổng đàn, gà 30,4 triệu con; thủy cầm 13,5 triệu Ngồi cịn có 14,76 triệu chim cút loại chim khác bị chết bị tiêu huỷ * Đợt dịch thứ hai từ tháng đến tháng 11 năm 2004: Dịch cúm gia cầm thể độc lực cao tái xuất vào tháng năm 2004 số tỉnh thuộc Đồng sông Cửu Long Bệnh chủ yếu xuất hộ chăn nuôi nhỏ lẻ hầu nhƣ trại chăn ni qui mơ lớn bị nhiễm bệnh Dịch có khuynh hƣớng xuất vùng có chăn ni nhiều thủy cầm Dịch xảy 46 xã phƣờng 32 quận, huyện, thị xã thuộc 17 tỉnh Thời gian cao điểm tháng sau giảm dần, đến tháng 11 nƣớc có điểm phát dịch Tổng số gia cầm bị tiêu huỷ thời gian 84.078 con, có 55.999 gà, 8.132 vịt 19.947 chim cút * Đợt dịch thứ từ tháng 12/2004 đến tháng 5/2005: Trong thời gian dịch xuất 670 xã 182 huyện thuộc 36 tỉnh, thành phố (15 tỉnh phía Bắc, 21 tỉnh phía Nam) Dịch xuất nhiều vào tháng 1/2005 với 143 ổ dịch xảy 31 tỉnh thành phố, số gia cầm tiêu hủy 470.495 gà, 825.689 vịt, ngan 551.029 chim cút Bệnh xuất tất tỉnh, thành phố thuộc vùng Đồng sông Cửu Long (Ban đạo quốc gia phòng chống dịch cúm, 2004-2005) [3] * Đợt dịch thứ từ 01/10/2005 đến 15/12/2005: Từ đầu tháng 10/2005 đến 15/12/2005 dịch tái phát 285 xã, phƣờng, thị trấn thuộc 100 quận, huyện 24 tỉnh, thành phố Số gia cầm ốm, chết tiêu hủy 3.735.620 con, Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn 86 Nam giải pháp phòng chống, Khoa học kỹ thuật Thú y, tập XV số 4- 2008, tr.87-91 32 Tô Long Thành (2004), Bệnh cúm loài chim, Khoa học Kỹ thuật Thú y, 11(2), tr 53-58 33 Tô Long Thành (2004), Thông tin cập nhật tái xuất bệnh cúm gia cầm nước Châu Á, Khoa học Kỹ thuật Thú y, 11(4), tr 87- 93 34 Tô Long Thành (2005), Một số thông tin bệnh cúm gia cầm, Khoa học Kỹ thuật Thú y, 12(1), tr 84-91 35 Tơ Long Thành (2005), Kinh nghiệm phịng chống dịch cúm gia cầm sử dụng vaccine cúm gia cầm Trung Quốc, Khoa học Kỹ thuật Thú y, 12(3), tr 87-90 36 Tô Long Thành (2006), Thông tin cập nhật bệnh cúm gia cầm vaccine phòng chống, Khoa học Kỹ thuật Thú y, 13(1), tr 66-76 37 Tô Long Thành (2007), Các loại vaccine cúm gia cầm đánh giá hiệu tiêm phịng, Tạp chí KHKT Thú y, Tập XVI số 2- 2007, tr84-90 38 Tô Long Thành cộng (2007), Hiệu sử dụng liều vaccine vơ hoạt tồn thân virus H5N2 vaccine tái tổ hợp H5 có chất bổ trợ vật nuôi, Khoa học kỹ thuật thú y- Tập XIV- số 4-2007 Tr 6-14 39 Tô Long Thành Đào Yến Khanh (2009), Kiểm nghiệm vaccine cúm gà H5N2 nhập từ Hà Lan Trung Quốc Khoa học Kỹ thuật Thú y Số 1- 2009 Tập XVI 40 Tô Long Thành Đào Yến Khanh (2009), Khảo nghiệm thực địa vaccine cúm gia cầm H5N2 nhập từ Hà Lan Trung Quốc Phần 1: Độ an toàn vaccine đáp ứng miễn dịch gà sau tiêm phòng, Khoa học kỹ thuật thú y, Tập XVI, số 1- 2009, tr10-18 41 Tô Long Thành Đào Yến Khanh (2009), Khảo nghiệm thực địa vaccine cúm gia cầm H5N2 nhập từ Hà Lan Trung Quốc Phần II: Phân bố hiệu giá kháng thể gà thời điểm sau tiêm Khoa học kỹ thuật thú y, Tập XVI, số 2- 2009, tr 23- 31 42 Trung tâm Chẩn đoán Thú y Trung ƣơng (2004), Tài liệu tập huấn Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn 87 chẩn đoán bệnh cúm bệnh lở mồm long móng, Hà Nội 43 Đỗ Ngọc Thúy dịch (2008), Tin khoa học kỹ thuật cúm gia cầm Số 4-2008, tr 92- 94 II TÀI LIỆU TIẾNG ANH 44 Alexander D.J (1993) Orthomyxovirus Infections In: Viral Infections of Vertebrates, Volume 3: Viral Infections of Birds McFerran J.B & McNulty M.S., eds Horzinek M.C., Series editor Elservier, Amsterdam, The Netherlands, 287-316 45 Alexander D J (2000), A review of avian in different bird species Vet Microbiol, 74: 3-13 46 Biswas S K and D P Nayak (1996), Influenza virus polymerase basic protein interacts with influenza virus polymerase basic protein at multiple sites J Virol 70: 6716-6722 47 Bosch F X, M Orlich, H D Klenk and R Rott (1979), The structure of the hemagglutinin, a determinant for the pathogenicity of influenza viruses Virology 95: 197-207 48 Buckler White and B R Muphy (1998), Nucleotide sequence analysis of the nucleoprotein gene of an avian and a human influenza virus strain identifies two classes of nucleoproteins, Virology 155: 345-355 49 Capua I., Maragon S., Dalla Pozza M., Santucci U (2000) Vaccination for Avian Influenza in Italy Vet Rec., 147, 751 50 Castrucci M R and Y Kawaoka (1993), Biologic importance of neuramidase stalk length in influenza A virus, J.Virology, 67: 759-764 51 Collins RA, Ko LS, So KL, Ellis T, Lau LT, Yu AC (2002), Detection of hyghly pathogenic avian influenza subtype H5(Euracian lineage) using NASBA, J Virology Methods, 103(2): 213-215 52 Holsinger, L J, D Nichani, L H Pinto and R A Lamb (1994), Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn 88 Influeza A virus M2 ion chanel protein: a structurefunction analysis, J Virology, 68: 1551-1563 53 Horimoto T and Kawaoka Y (1995), Direct reverse transcriptase PCR to determine virulence potential of influenza A viruses in birds, J Clin Microbiol, 33(3): 748-751 54 Horimoto T and Kawaoka Y (2001), Pandemic threat posed by avian influenza viruses, Clind Microbiol Rev, 14(1): 129-149 55 Ito, T and Y Kawaoka (1998), Avian influenza, p 126-136 In K G Nicholson, R G Webster, and A J Hay (ed.) Textbook of influenza Blackwell Sciences Ltd, Oxford, United Kingdom 56 Ito T, J N Couceiro, S Kelm, L G Baum, S Krauss, M R Castrucci, I Donatelli, H Kida, J C Pauson, R G Webter, and Y Kawoaka (1998), Molecular basic for the generation in pigs of influenza A viruses with pandemic potential, J Virology, 72: 7367-7373 57 Kawaoka Y (1991), Difference in receptor specificity among influenza A viruses from different species of animals, J Vet Med Sci, 53: 357-358 58 Kawaoka (1988), Is the gene pool of influenza viruses in shorebirds and gulls different from that in wild ducks? Virology, 179:759-767 59 Kingrbuy (1985), Protective immunity against avian influenza induced by a fowlpox virus recombinant Virology, Raven press NewYork, 1157-1178 60 Lu X, T M Tumpey, T Morken, S R Zaki, N J Cox, and J M Katz (1999), A mouse model for the evaluation of pathogenesis and immunity to influenza A (H5N1) viruses isolated from human, J Virology, 73: 5903-5911 61 Luong G and Palese P (1992), Genetic analysis of influenza virus, Curr Opinion Gen Develop 2: 77-81 62 Luschow D., Werner O., Mettenleiter T.C & Fuchs W.(2001) Protection of chickens from lethal avian influenza A virus infection by live-virus vaccination with infectious laryngotracheitis virus recombinants expressing the heamagglutinin (H5) gene Vaccine, 19, 4249-4259 63 Mo I P, M Brugh, O J Fletcher, G N Rowland, and D E Swayne Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn 89 (1997), Comparative pathology of chickens experimentaly inoculated with avian influenza viruses of low and high pathogenicity, Avian Dis, 41: 125-136 64 Muphy B R and R G Webter (1996), Orthomyxoviruses, p 13971445 In B N Fields, D M Knipe, P M Howley et al (ed.), Fields Virology, 3rd ed Lippincott-Raven Pblishers, Philadenphia, Pa 65 OIE, Council of European Communities (1992), Council Directive 92/40/EEC of 19 th May 1992 introducing Community measures for the control of avian influenza, Official Journal of Eropean Communities, L167, 1-15 66 Seo S and R G Webter (2001), Cross-reactive cell-mediated immunity and protection of chickens from lethal H5N1 influenza virus infection in the HongKong poultry markets, J Virology, 75: 2516-2525 67 Suarez D L, M L Perdue, N Cox, T.Rowe, C Bender, J Huang, and D E Swayne (1998), Comparisons of highly virulent H5N1 influenza A viruses isolated from humans and chickens from Hong Kong, J Virology, 72: 6678-6688 68 Swayne D E & Suarez D.L (2000) Highly pathogenic avian influenza Rev sci tech Off Int epiz., 20: 463-482 69 Vey M, M Orlich, S Adle, H D Klenk, R Rott and W Garten (1992), Hemagglutinin activation of pathogenic avian influenza viruses of serotype H7 requires the protease recognition motif R-X-K/R-R, Virology, 188: 408-413 70 Webster R G, W J Bean, O T Gorman, T M Chambers and Y Kawaoka (1992), Evolution and ecology of influenza A viruses, Microbiol Rev, 56: 152-179 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn i 90 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng: Các kết nghiên cứu luận văn trực tiếp nghiên cứu dƣới hƣớng dẫn PGS.TS Tơ Long Thành, TS.Nguyễn Quang Tính giúp đỡ chân tình chú, anh chị: phịng virus - Trung tâm Chẩn đoán thú y Trung ƣơng, Chi Cục Thú y tỉnh Thái Nguyên Các số liệu kết trình bày luận văn hồn tồn trung thực, đƣợc rút từ tình hình thực tế tỉnh Thái Nguyên năm qua chƣa đƣợc sử dụng để bảo vệ học vị Mọi giúp đỡ cho việc thực luận văn đƣợc cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn đƣợc rõ nguồn gốc Thái Nguyên, tháng 10 năm 2011 Tác giả luận văn Vũ Thị Tuyết Nhung Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn ii 91 LỜI CẢM ƠN Trong suốt năm học tập, với nỗ lực thân, nhận đƣợc giúp đỡ, hƣớng dẫn tận tình nhiều cá nhân tập thể, đến luận văn tơi đƣợc hồn thành Nhân dịp này, cho phép tơi đƣợc tỏ lịng biết ơn cảm ơn chân thành tới: PGS TS Tơ Long Thành - Giám đốc Trung tâm Chẩn đốn Thú y trung ƣơng TS Nguyễn Quang Tính - Trƣởng phịng Cơng tác trị Học sinh sinh viên Những ngƣời thầy uyên bác, mẫu mực, tận tình chu đáo cổ vũ tinh thần, động viên, hƣớng dẫn bảo cho tơi suốt q trình nghiên cứu hoàn thành luận văn Ban Giám hiệu Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, khoa Sau Đại học, khoa Chăn nuôi - Thú y, Trung tâm Chẩn đốn Thú y Trung ƣơng, thầy giáo giúp đỡ, tạo điều kiện để học tập, tiếp thu kiến thức trƣơng trình học Các cán thuộc phịng Virus, Trung tâm Chẩn đốn Thú y Trung ƣơng Ban Lãnh đạo toàn thể cán Chi Cục Thú y, đồng nghiệp làm việc lĩnh vực Chăn nuôi - Thú y tỉnh Thái Nguyên Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi đƣợc gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, ngƣời thân bạn bè động viên giúp đỡ vƣợt qua khó khăn suốt q trình học tập, nghiên cứu, thực đề tài Một lần tơi xin đƣợc bày tỏ lịng biết ơn, cảm ơn chân thành tới tập thể, cá nhân tạo điều kiện giúp đỡ tơi hồn thành chƣơng trình học tập Thái Nguyên, tháng 10 năm 2011 Tác giả Vũ Thị Tuyết Nhung Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn iii 92 MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài Ý nghĩa khoa học thực tiễn Địa điểm nghiên cứu Thời gian Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 GIỚI THIỆU CHUNG VỀ BỆNH CÚM GIA CẦM 1.2 LỊCH SỬ BỆNH CÚM GIA CẦM 1.3 TÌNH HÌNH DỊCH CÚM GIA CẦM TRÊN THẾ GIỚI VÀ TRONG NƢỚC 1.3.1 Tình hình dịch cúm gia cầm giới 1.3.2 Tình hình dịch cúm gia cầm Việt Nam 1.4 ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA VIRUS CÚM TYP A 11 1.4.1 Đặc điểm cấu trúc chung virus thuộc họ Orthomyxoviridae 11 1.4.2 Đặc điểm hình thái, cấu trúc virus cúm typ A 12 1.4.3 Đặc tính kháng nguyên virus cúm typ A 14 1.4.4 Thành phần hóa học virut 16 1.4.5 Quá trình nhân lên tác động gây bệnh virus 17 1.4.6 Độc lực virus 17 1.4.7 Danh pháp 19 1.4.8 Phân loại virus 20 1.4.9 Nuôi cấy lƣu giữ virus cúm gà 21 1.4.10 Miễn dịch chống bệnh cúm gia cầm 21 1.5 DỊCH TỄ HỌC BỆNH CÚM GIA CẦM 26 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn iv 93 1.5.1 Phân bố dịch 26 1.5.2 Động vật cảm nhiễm 26 1.5.3 Động vật mang virus 27 1.5.4 Sự truyền lây 28 1.5.5 Sức đề kháng virus cúm 29 1.5.6 Mùa vụ phát bệnh 30 1.6 TRIỆU CHỨNG, BỆNH TÍCH CỦA BỆNH CÚM GIA CẦM 30 1.6.1 Triệu chứng lâm sàng bệnh cúm gia cầm 30 1.6.2 Bệnh tích đại thể bệnh cúm gia cầm 31 1.6.3 Bệnh tích vi thể 31 1.7 CHẨN ĐOÁN BỆNH 32 1.8 KIỂM SOÁT BỆNH 33 1.9 VACCINE PHÒNG BỆNH CÚM GIA CẦM 34 1.10 NGHIÊN CỨU TRONG NƢỚC VỀ BỆNH CÚM GIA CẦM 39 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 42 2.1 ĐỐI TƢỢNG, THỜI GIAN, ĐỊA ĐIỂM VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU 42 2.1.1 Đối tƣợng 42 2.1.2 Phạm vi nghiên cứu đề tài 42 2.1.3 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 42 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 42 2.2.1 Thực trạng chăn nuôi gia cầm tỉnh Thái Nguyên Error! Bookmark not defined 2.2.2 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh cúm gia cầm 42 2.2.3 Sự đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch đàn gà, đàn vịt đƣợc tiêm vaccine H5N1 năm 2011 43 2.3 NGUYÊN LIỆU NGHIÊN CỨU 45 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn 94 v 2.4 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 45 2.4.1 Phƣơng pháp xử lý mẫu 46 2.4.2 Phƣơng pháp phát kháng nguyên 47 2.4.3 Xử lý số liệu 51 Chƣơng KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 52 3.1 MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ CỦA BỆNH CÚM GIA CẦM Ở TỈNH THÁI NGUYÊN 52 3.1.1 Tình hình bệnh cúm gia cầm từ năm 2008 đến 52 3.1.2 Biến động tỷ lệ bệnh cúm gia cầm theo mùa 53 3.1.3 Biến động tỷ lệ bệnh cúm gia cầm theo loại gia cầm 54 3.1.4 Biến động tỷ lệ mắc bệnh theo phƣơng thức chăn nuôi 55 3.1.5 Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm theo quy mô đàn gia cầm 57 3.2 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ ĐÁP ỨNG MIỄN DỊCH VÀ ĐỘ DÀI MIỄN DỊCH CỦA ĐÀN GÀ, VỊT ĐƢỢC TIÊM VACCINE CÚM H5N1 58 3.2.1 Kết tiêm phòng vaccine cúm cho đàn gia cầm tỉnh Thái Nguyên năm 2010 2011 58 3.2.2 Kết giám sát lâm sàng đàn gia cầm sau tiêm phòng vaccine 59 3.2.3 Giám sát huyết học đàn gà sau đƣợc tiêm phòng vaccine .60 3.2.4 Khảo sát đáp ứng miễn dịch độ dài miễn dịch vịt đƣợc tiêm vaccine H5N1 Trung Quốc Thái Nguyên năm 2011 71 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 81 5.1 Kết luận 81 5.2 Đề nghị 82 TÀI LIỆU THAM KHẢO 83 I TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT 83 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn 95 II TÀI LIỆU TIẾNG ANH 87 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn vi 96 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT TN : Thí nghiệm ARN : Acid ribonucleic cADN : Complementary ADN GMT : Geographic Mean Titre - Hiệu giá kháng thể trung bình HA : Hemagglutination test HI : (Hemagglutination inhibitory test) - Phản ứng ngăn trở ngƣng kết hồng cầu HPAI : (High Pathogenicity Avian Influenza) - Virus cúm thể độc lực cao KN : (Antigene) - Kháng nguyên KT : (Antibody) - Kháng thể LPAI : (Low Pathogenicity Avian Influenza) - Virus cúm thể độc lực thấp OIE : (Office Internationale des Epizooties) - Tổ chức thú y giới PBS : Phosphate- Buffered- Saline Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn vii 97 DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 3.1 Tỷ lệ gia cầm mắc bệnh cúm tình từ năm 2008- 2011 52 Bảng 3.2 Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm theo mùa vụ 53 Bảng 3.3: Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm theo loại gia cầm 55 Bảng 3.4: Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm gia cầm theo phƣơng thức chăn nuôi 56 Bảng 3.5: Biến động tỷ lệ mắc bệnh cúm theo quy mô đàn gia cầm 57 Bảng 3.6: Kết tiêm phòng vaccine cúm cho đàn gia cầm tỉnh Thái Nguyên đợt năm 2010 đợt năm 2011 58 Bảng 3.7: Kết theo dõi độ an toàn vaccine H5N1 đàn gia cầm 59 Bảng 3.8: Hiệu giá kháng thể trung bình gà đƣợc tiêm vaccine H5N1 61 Bảng 3.9: Tần số phân bố mức kháng thể gà đƣợc tiêm vaccine H5N1 64 Bảng 3.10: Hiệu giá kháng thể độ dài miễn dịch đàn gà thí nghiệm 68 Bảng 3.11: Hiệu giá kháng thể trung bình, tỷ lệ bảo hộ đàn gà thí nghiệm đàn gà tỉnh 70 Bảng 3.12: Hiệu giá kháng thể trung bình vịt đƣợc tiêm vaccine H5N1 72 Bảng 3.13: Phân bố hiệu giá kháng thể đàn vịt tỉnh đƣợc tiêm vaccine qua thời điểm 73 Bảng 3.14: Hiệu giá kháng thể độ dài miễn dịch đàn vịt thí nghiệm 77 Bảng 3.15: Hiệu giá kháng thể trung bình, tỷ lệ bảo hộ đàn vịt TN đàn vịt tỉnh 79 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn viii 98 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 3.1: Đồ thị biến động hiệu giá kháng thể gà đƣợc tiêm vaccine H5N1 63 Hình 3.2: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết gà thời điểm sau tiêm 30 ngày 66 Hình 3.3: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết gà thời điểm sau tiêm 60 ngày 66 Hình 3.4: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết gà thời điểm sau tiêm 90 ngày 67 Hình 3.5: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết gà thời điểm sau tiêm 120 ngày 67 Hình 3.6: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết gà thời điểm sau tiêm 150 ngày 68 Hình 3.7: Đồ thị biến động hiệu giá kháng thể đàn gà thí nghiệm đƣợc tiêm vaccine H5N 69 Hình 3.8: Đồ thị so sánh hiệu giá kháng thể đàn gà thí nghiệm gà thực địa tỉnh Thái Nguyên 71 Hình 3.9: Đồ thị biến động hiệu giá kháng thể vịt đƣợc tiêm vaccine H5N1 73 Hình 3.10: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết vịt thời điểm sau tiêm vaccine 30 ngày 74 Hình 3.11: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết vịt thời điểm sau tiêm vaccine 60 ngày 75 Hình 3.12: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết vịt thời điểm sau tiêm vaccine 90 ngày 75 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn ix 99 Hình 3.13: Biểu đồ phân bố hiệu giá kháng thể huyết vịt thời điểm sau tiêm vaccine 120 ngày 76 Hình 3.14: Đồ thị biến động hiệu giá kháng thể đàn vịt thí nghiệm đƣợc tiêm vaccine H5N1 78 Hình 3.15: Đồ thị so sánh hiệu giá kháng thể trung bình đàn vịt thí nghiệm với đàn vịt tỉnh 80 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc-tnu.edu.vn 100 MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA CHO ĐỀ TÀI Ảnh 1: Lấy mẫu máu gia cầm Ảnh 2: Làm phản ứng PCR Ảnh 3: Kết phản ứng PCR Ảnh 4: Kết phản ứng HA Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN Ảnh 5: Kết phản ứng HI http://www.lrc-tnu.edu.vn