(Luận Văn) Ứng Dụng Phương Pháp Mã Vạch Dna Trong Kiểm Định Thành Phần Chính Của Các Sản Phẩm Thảo Dược Từ Giảo Cổ Lam.pdf

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - a lu PHAN THỊ MY n va n Tên đề tài: p ie gh tn to ỨNG DỤNG PHƢƠNG PHÁP MÃ VẠCH DNA TRONG KIỂM ĐỊNH THÀNH PHẦN CHÍNH CỦA CÁC SẢN PHẨM THẢO DƢỢC TỪ GIẢO CỔ LAM oa nl w d KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC f an nv a lu oi lm ul at Chuyên ngành : Chính quy nh Hệ đào tạo : Cơng nghệ sinh học z : CNSH - CNTP z Khoa @ : 2011- 2015 om l.c gm Khóa học an Lu Thái nguyên, năm 2015 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - PHAN THỊ MY a lu n Tên đề tài: n va ỨNG DỤNG PHƢƠNG PHÁP MÃ VẠCH DNA TRONG KIỂM ĐỊNH THÀNH p ie gh tn to PHẦN CHÍNH CỦA CÁC SẢN PHẨM THẢO DƢỢC TỪ GIẢO CỔ LAM d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC f an nv a lu : Chính quy Chuyên ngành : Công nghệ sinh học Khoa : CNSH - CNTP oi lm ul Hệ đào tạo nh : K43 - CNSH at Lớp z : 1.TS Dƣơng Văn Cƣờng gm @ Giảng viên hƣớng dẫn : 2011- 2015 z Khóa học PGS.TS Ngơ Xn Bình om l.c an Lu Thái nguyên, năm 2015 n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập nghiên cứu để hồn thành đƣợc khóa luận tốt nghiệp ngồi nỗ lực cá nhân, tơi nhận đƣợc hƣớng dẫn, giúp đỡ, bảo động viên thầy cơ, bạn bè gia đình Nhân dịp hồn thành luận văn: Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo: TS Dƣơng Văn Cƣờng giảng viên Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm – Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, ThS Ma Thị Trang cán Bộ môn Sinh học Phân tử Công nghệ Gene – Viện Khoa học Sự sống – Đại học Thái Nguyên a lu ngƣời tận tình bảo, trực tiếp hƣớng dẫn giúp đỡ suốt thời gian n n va thực đề tài nhƣ q trình hồn chỉnh luận văn tốt nghiệp tn to Tôi xin chân thành cảm ơn ban lãnh đạo Viện Khoa học Sự sống – Đại Học Thái Nguyên, ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm p ie gh – Trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, cán bộ, anh chị làm việc Bộ môn Sinh học Phân tử Công nghệ Gene – Viện Khoa học Sự sống – Đại học Thái oa nl w Nguyên giúp đỡ, tạo điều kiện để học tập nghiên cứu Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, bạn bè d a lu ngƣời động viên, chia sẻ giúp đỡ để vƣợt qua khó khăn f an nv trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn! ul oi lm Thái nguyên, tháng 06 năm 2015 Sinh viên at nh z z gm @ Phan Thị My om l.c an Lu n va ac th si ii DANH MỤC CÁC BẢNG a lu n n va p ie gh tn to Bảng 2.1 Tình hình nghiên cứu ứng dụng cơng nghệ DNA mã vạch giới 18 Bảng 2.2 Tình hình nghiên cứu ứng dụng cơng nghệ mã vạch DNA Việt Nam 20 Bảng 3.1 Danh sách sản phẩm trà Giảo Cổ Lam túi lọc, trà Giảo Cổ Lam khô thuốc thảo dƣợc Giảo Cổ Lam dạng viên nén đƣợc thƣơng mại hóa thi trƣờng sử dụng nghiên cứu 23 Bảng 3.2 Hình ảnh mẫu trà túi lọc, trà Giảo Cổ Lam khô thuốc thảo dƣợc dạng viên nén đƣợc thƣơng mại hóa thị trƣờng 24 Bảng 3.3 Danh sách sản phẩm trà thảo dƣợc Giảo Cổ Lam khô 26 Bảng 3.4 Hình ảnh mẫu trà Giảo Cổ Lam khô 26 Bảng 3.5 Thơng tin trình tự cặp mồi ITS2 rbcLa 28 Bảng 3.6 Các thiết bị sử dụng nghiên cứu 29 Bảng 3.7 Thành phần dung dịch CTAB buffer sử dụng tách chiết DNA từ trà Giảo Cổ Lam khô 30 Bảng 3.8 Thành phần dung dịch đệm CTAB sử dụng tách chiết DNA từ mẫu trà túi lọc 30 Bảng 3.9 Thành phần dung dịch chiết đồng mẫu sử dụng tách chiết DNA từ thuốc thảo dƣợc dạng viên nén 30 Bảng 3.10 Thành phần dung dịch CTAB buffer sử dụng tách chiết DNA từ thuốc thảo dƣợc dạng viên nén 31 Bảng 3.11 Thành phần dung dịch TE ( 10 : 0.1) 31 Bảng 3.12 Thành phần phản ứng PCR 36 Bảng 4.1 Các thơng số thay đổi quy trình tách chiết DNA tổng số từ mẫu trà Giảo Cổ Lam khô 40 Bảng 4.2 Kết đo OD mẫu trà Giảo Cổ Lam khơ tách chiết theo quy trình sửa đổi 42 Bảng 4.3 Các thơng số thay đổi quy trình tách chiết DNA tổng số từ mẫu trà túi lọc 43 Bảng 4.4 Kết đo OD mẫu trà túi lọc tách chiết theo quy trình sửa đổi 44 Bảng 4.5 Tổng hợp kết phản ứng khuếch đại trình tự DNA mã vạch 49 Bảng 4.6 Tỷ lệ tƣơng đồng trình tự mẫu trà Giảo Cổ Lam với trình tự mã vạch 56 d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th si iii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Hình ảnh Giảo Cổ Lam mọc tự nhiên Giảo Cổ Lam Hình 3.1: Chu trình nhiệt phản ứng PCR khuếch đại đoạn gen rbcLa 36 Hình 3.2: Chu trình nhiệt phản ứng PCR khuếch đại đoạn gen ITS2 37 Hình 4.1 Hình ảnh so sánh kết tách chiết DNA tổng số từ mẫu trà Giảo Cổ Lam khô tiến hành theo hai quy trình 41 Hình 4.2 Hình ảnh so sánh kết tách chiết DNA tổng số từ mẫu trà túi lọc Giảo Cổ Lam tiến hành theo quy trình trƣớc sau sửa đổi 43 a lu Hình 4.3 Kết PCR khuếch đại đoạn gen rbcLa từ DNA mẫu trà Giảo Cổ Lam khô n n va 45 tn to Hình 4.4 Kết khuếch đại đoạn gen ITS2 từ mẫu trà Giảo Cổ Lam khơ 46 Hình 4.5 Kết khuếch đại đoạn gen rbcLa từ DNA khuôn tách mẫu trà túi lọc 47 p ie gh Hình 4.6 Kết khuếch đại đoạn gen ITS2 từ mẫu trà túi lọc số 48 Hình 4.7 Kết tinh sản phẩm PCR mẫu trà Giảo Cổ Lam khô trà túi lọc oa nl w 50 Hình 4.8 Chất lƣợng tín hiệu giải trình tự theo giá trị Quality Valu (hình a-e thể chất d a lu lƣợng tín hiệu trình tự theo giá trị QV mẫu lần lƣợt trà Giảo Cổ Lam túi lọc số 1, f an nv 2, trà Giảo Cổ Lam khố số 6) 52 Hình 4.9 Hình ảnh thể vùng bị nhiễu trình tự mẫu trà Giảo Cổ Lam túi ul oi lm lọc số 54 nh Hình 4.10 Hình ảnh thể tạp nhiễm DNA lồi có quan hệ gần gũi at trình tự mẫu trà Giảo cổ Lam khô số 54 z Hình 4.11 Hình ảnh thể tạp nhiễm DNA lồi khác trình tự z @ gm mẫu trà túi lọc số 55 om l.c Hình 4.12 Kết so sánh trình tự rbcLa mẫu trà túi lọc số với trình tự cơng bố ngân hàng gen 57 Hình 4.13 Hình ảnh thể mức độ thu hồi DNA từ dạng chiết xuất nguyên liệu an Lu thảo dƣợc 59 n va ac th si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam iv DANH MC CC T VIT TT a lu n n va : Basic Local Alignment Search Tool DNA : Deoxyribonucleic Acid DMSO : Dimethylsulfoxide dNTP : Deoxyribonucleotide Triphosphate dATP : DeoxyAdenine Triphosphate dGTP : DeoxyGuanine Triphosphate dCTP : DeoxyCytosine Triphosphate dTTP : DeoxyThymine Triphosphate EDTA : Etilendiamin tetraaxetic acit Kb : Kilo base – Kilo bazơ nitơ NCBI : Nation Cetrer for Biotechnology Information (Trung tâm Quốc gia p ie gh tn to BLAST Thông tin Công nghệ sinh học) ddNTP ddATP : Polymerase Chain Recation : Dideoxynucleotide Triphosphate oa nl w PCR : DideoxyAdenine Triphosphate d : DideoxyGuanine Triphosphate ddCTP : Dideoxycytosine Triphosphate ddTTP : DideoxyThymine Triphosphate cpDNA : Chloroplast (DNA lục lạp) mtDNA : Mitochondrial (DNA ty thể) f an nv a lu ddGTP oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam v MC LC PHN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu công nghệ mã vạch DNA a lu 2.2 Các tiêu chí để lựa chọn trình tự để sử dụng làm DNA mã vạch điểm n cần lƣu ý tạo thƣ viện mã vạch n va 2.3 Mã vạch DNA sử dụng xác định loài động vật thực vật tn to 2.3.1 Mã vạch DNA động vật p ie gh 2.3.2 Mã vạch DNA thực vật 2.4 Các sản phẩm thảo dƣợc nguy tiềm ẩn sức khỏe ngƣời tiêu oa nl w dùng .10 2.5 Các phƣơng pháp thị sử dụng xác định nguyên liệu thảo dƣợc 11 d a lu 2.5.1 Phƣơng pháp dựa thị phân tích giải phẫu học 11 f an nv 2.5.2 Các phƣơng pháp dựa thị hóa học 12 ul 2.5.3 Phƣơng pháp dựa vào thị DNA 13 oi lm 2.6 Ƣu điểm phƣơng pháp DNA mã vạch so với phƣơng pháp khác nh xác định nguyên liệu thảo dƣợc 16 at 2.7 Lựa chọn sử dụng vùng DNA mã vạch xác định thành phần z z nguyên liệu thảo dƣợc 16 @ gm 2.8 Tình hình nghiên cứu, ứng dụng phƣơng pháp DNA mã vạch kiểm định, om l.c đánh giá chất lƣợng sản phẩm thảo dƣợc nƣớc giới .17 2.8.1 Tình hình nghiên cứu giới 17 an Lu 2.8.2 Tình hình nghiên cứu nƣớc 19 n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam vi PHN I TNG, NI DUNG V PHNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 3.1 Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 22 3.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 22 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu 28 3.1.3 Phạm vi nghiên cứu 28 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 28 3.2.1 Địa điểm nghiên cứu 28 3.2.2 Thời gian nghiên cứu 28 a lu 3.3 Thiết bị, hóa chất nghiên cứu 28 n 3.3.1 Thiết bị nghiên cứu 28 n va 3.3.2 Hóa chất nghiên cứu 29 tn to 3.4 Nội dung nghiên cứu 32 p ie gh 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 32 3.5.1 Phƣơng pháp tách chiết DNA tổng số 32 oa nl w 3.5.2 Phƣơng pháp điện di gel agarose 35 3.5.3 Phƣơng pháp PCR 36 d a lu 3.5.4 Phƣơng pháp tinh sản phẩm PCR 37 f an nv 3.5.5 Phƣơng pháp xác định trình tự nucleotide 38 oi lm ul 3.5.6 Phƣơng pháp so sánh trình tự gen tách đƣợc từ sản phẩm với trình tự DNA mã vạch 39 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 40 nh at 4.1 Kết 40 z 4.1.1 Kết tách chiết DNA từ mẫu trà túi lọc, trà Giảo Cổ Lam khô thuốc thảo dƣợc dạng viên nén 40 z gm @ 4.1.2 Kết PCR khuếch đại gen rbcLa ITS2 445 om l.c 4.1.3 Kết tinh sản phẩm PCR 49 4.1.4 Kết giải trình tự đoạn gen rbcLa ITS2 51 an Lu 4.2 Thảo luận 58 n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam vii PHN KT LUN V KIN NGH 62 5.1 Kết luận 62 5.2 Kiến nghị 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO 64 a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam PHN M U 1.1 t vấn đề Các thuốc thảo dƣợc đƣợc sử dụng từ lâu đời y học cổ truyền Hiện nay, thuốc thảo dƣợc đƣợc sử dụng nhiều việc chữa trị bệnh Với xu hƣớng sống ngày hài hòa thiên nhiên, việc sử dụng a lu nguyên liệu thảo dƣợc để bảo vệ sức khỏe điều trị bệnh ngày gia tăng Hàng n ngàn loài thực vật động vật có đặc tính dƣợc lý đƣợc dùng làm ngun liệu thuốc n va [28] Việt Nam quốc gia có nguồn tài nguyên thực vật phong phú Theo thống tn to kê Bộ y tế năm Việt Nam tiêu thụ khoảng 30 - 50 nguyên liệu thảo dƣợc để p ie gh sử dụng y học cổ truyền xuất nƣớc Các lồi thảo dƣợc dùng trực tiếp làm tác nhân điều trị làm nguyên liệu ban đầu cho trình tổng hợp loại thuốc Hiện nay, Việt Nam khai thác sử dụng khoảng 200 oa nl w loại dƣợc liệu [1], có số lồi đƣợc thƣơng mại hóa dƣới dạng d sản phẩm thảo dƣợc nhƣ Sâm Ngọc Linh, trà Tam Thất Xạ Đen, trà Giảo Cổ Lam, trà a lu Nấm Linh Chi Các sản phẩm thảo dƣợc ngày đa dạng với hình thức mẫu nv f an mã, nhãn hiệu khác chứa thành phần kết hợp oi lm ul nhiều thành phần Việc liệt kê xác thành phần sản phẩm thảo dƣợc quan trọng ngƣời tiêu dùng, song thành phần khơng thể nh dễ dàng xác định hình thức trực quan [32] at Giảo Cổ Lam (Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Markino đƣợc sử dụng z rộng rãi nhƣ loại thuốc dân gian trà thảo dƣợc nƣớc châu Á bao z gm @ gồm Đài Loan, Trung Quốc, Nhật Bản Hàn Quốc [50] Giảo Cổ Lam cịn có nhiều tên gọi khác, tiếng Trung gọi "Jiao Gu Lan", tiếng anh đƣợc om l.c gọi Nhân Sâm Năm Lá, Việt Nam thƣờng gọi Giảo Cổ Lam Bổ Đắng Trong "Compendium of Materia Media" tác giả Li Shi – Zhen xuất an Lu năm 1578 nói đến Giảo Cổ Lam đƣợc sử dụng iu tr nhiu loi bnh n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam 18 Hebert, Ratnasingham, deWaard (2003) "Barcoding animal life: cytochrome c oxidase subunit divergences among closely related species." Proc Biol Sci 270 Suppl 1, S96-99 19 Hebert, Stoeckle, Zemlak, Francis (2004) "Identification of Birds through DNA Barcodes." PLoS Biol (10), 312 20 Hellberg (2006) "No variation and low synonymous substitution rates in coral mtDNA despite high nuclear variation." BMC Evol Biol 6, 24 21 Hollingsworth, Andra Clark, Forrest, Richardson, Pennington, Long, Cowan, Chase, Gaudeul (2009) "Selecting barcoding loci for plants: evaluation of a lu seven candidate loci with species-level sampling in three divergent groups n n va of land plants." Mol Ecol Resour (2), 439 - 457 tn to 22 Huyen VT, Phan DV, Thang P, Ky PT, Hoa NK, Ostenson CG (2012) "Antidiabetic Effects of Add-On Gynostemma pentaphyllum Extract p ie gh Therapy with Sulfonylureas in Type Diabetic Patients." Evid Based Complement Alternat Med 2012, 452313 oa nl w 23 Jacque Keele, Jamie Carmon, Sherri F Pucherelli, Denise Hosler (2014) "Identification of Unknown Organisms by DNA Barcoding: A Molecular d a lu Method for Species Classification." Research and Development Office f an nv Invasive Mussels 24 Jesse H Ausubel (2003) "Barcode of Life Draft Scientific Rationale and ul oi lm Strategy." Rockefeller University 25 Kazi, Hussain, Bremner, Slater, Howard (2013) "The application of a DNA- nh at based identification technique to over-the-counter herbal medicines." z Fitoterapia 87, 27 - 30 z gm @ 26 Kress, Wurdack, Zimmer, Weigt, Janzen (2005) "Use of DNA barcodes to identify flowering plants." Proc Natl Acad Sci U S A 102 (23), 8369 - 8374 om l.c 27 Lo YT, Li M, Shaw PC (2015) "Identification of constituent herbs in ginseng decoctions by DNA markers." Chin Med 10 (1), an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam 28 Lou, Wong, Li, But, Tsui, Shaw (2010) "An integrated web medicinal materials DNA database: MMDBD (Medicinal Materials DNA Barcode Database)." BMC Genomics 11, 402 29 Luo, Zhang, Ho, Xu, Zhang, Shi, Cameron, Zhu (2011) "Potential efficacy of mitochondrial genes for animal DNA barcoding: a case study using eutherian mammals." BMC Genomics 12, 84 30 M.j asif and charles H Cannon (2005) "DNA Extraction From Processed Wood: A Case Study for the Identification of an Endangered Timber Species (Gonystylus bancanus)." Biological Sciences, Texas Tech a lu University, Main and Flint Streets, Lubbock, 180 – 187 n n va 31 Vitor Hugo Maia, Camila Souza da Mata, Luciana Ozório Franco, Mônica Aires tn to Cardoso, Sérgio Ricardo Sodré Cardoso, Adriana Silva Hemerly, Paulo Cavalcanti Gomes Ferreira (2012) "DNA barcoding Bromeliaceae: p ie gh achievements and pitfalls." PLoS One (1), 29877 32 Mark Y Stoeckle, Catherine C Gamble, Rohan Kirpekar, Grace Young, Selena oa nl w Ahmed, Damon P Little (2011) "Commercial Teas Highlight Plant DNA Barcode Identification Successes and Obstacles." Scientific Reports d a lu 33 Ming Li , Hui Cao, Paul Pui-Hay But, Pang-Chui Shaw (2011) "Identification f an nv of herbal medicinal materials using DNA barcodes." State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources in West China (CUHK), Institute of ul oi lm Chinese Medicine, The Chinese University of Hong Kong, Shatin, N.T., Hong Kong, China, 271 – 283 nh at 34 Newmaster, Grguric, Shanmughanandhan, Ramalingam, Ragupathy (2013) z "DNA barcoding detects contamination and substitution in North American z gm @ herbal products." BMC Med 11, 222 35 Pang-Chui Shaw, Fai-Ngor Ngan, Paul Pui-Hay But, Jun Wang (2002) Publishing Co Pte Ltd om l.c "Molecular Markers in Chinese Medicinal Materials." World Scientific an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam 36 Pang, Shi, Song, Chen, Chen (2013) "Use of the potential DNA barcode ITS2 to identify herbal materials." J Nat Med 67 (3), 571 - 575 37 Paul D N Hebert, Alina Cywinska, Shelley L Ball, Jeremy R deWaard (2003) "Biological identifications through DNA barcodes." biological science, 313 – 321 38 R N Mishra and Dharnidhar Joshi (2011) "Jiao Gu Lan (Gynostemma pentaphyllum): The Chinese Rasayan- Current Research Scenario." International Journal of Research in Pharmaceutical and Biomedical Sciences 470228 a lu 39 Rai, Bellampalli, Dobriyal, Agarwal, Satyamoorthy, K, Narayana (2012) n n va "DNA barcoding of authentic and substitute samples of herb of the family tn to Asparagaceae and Asclepiadaceae based on the ITS2 region." J Ayurveda Integr Med (3), 136 - 140 p ie gh 40 Ran, Wang, Zhao, Wang (2010) "A test of seven candidate barcode regions from the plastome in Picea (Pinaceae)." J Integr Plant Biol 52 (12), 1109 - 1126 oa nl w 41 Robba, Russell, Barker, Brodie (2006) "Assessing the use of the mitochondrial cox1 marker for use in DNA barcoding of red algae (Rhodophyta)." Am J d a lu Bot 93(8): 1101-1108 f an nv 42 S.G Newmaster, A.J.Fazekas, S.Ragupathy (2006) "DNA barcoding in land plants: evaluation of rbcL in a multigene tiered approach." Biodiversity of ul Canada 84, 335 - 341 oi lm Ontario, Department of Integrative Biology, University of guelph, Guelph, nh at 43 Seifert, Samson, Dewaard, Houbraken, Levesque, C A, Moncalvo, Louis-Seize, z Hebert (2007) "Prospects for fungus identification using CO1 DNA barcodes, z 3906 Pang-Chui Shaw, Ka-Lok Wong, Albert Wai-Kit om l.c 44 gm @ with Penicillium as a test case." Proc Natl Acad Sci U S A 104 (10), 3901 - Chan, Wai-Cheong Wong, Paul Pui-Hay But (2009) "Patent applications for using DNA an Lu technologies to authenticate medicinal herbal material." Chin Med 4, 21 n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam 45 Shneer (2009) "DNA barcoding is a new approach in comparative genomics of plants." Genetika 45 (11), 1436 - 1448 46 Smith, Poyarkov, Hebert (2008) "DNA barcoding: CO1 DNA barcoding amphibians: take the chance, meet the challenge." Mol Ecol Resour (2), 235 - 246 47 Stoeckle, Gamble, Kirpekar, Young, Ahmed, Little (2011) "Commercial teas highlight plant DNA barcode identification successes and obstacles." Sci Rep 1, 42 48 Sunil Kumar Sahu, Muthusamy Thangaraj, Kandasamy Kathiresan (2012) "DNA Extraction Protocol for Plants with High Levels of Secondary a lu Metabolites and Polysaccharides without Using Liquid Nitrogen and n n va Pheno." Centre of Advanced Study in Marine Biology, Faculty of Marine tn to Sciences, Annamalai University, Tamil Nadu 49 Techen, Parveen, Pan, Khan (2014) "DNA barcoding of medicinal plant p ie gh material for identification." Curr Opin Biotechnol 25, 103 - 110 50 Tsui, Chiang, Wang, Lin, Chao, Chen, Lu (2014) "Flavonoids from oa nl w Gynostemma pentaphyllum exhibit differential induction of cell cycle arrest in H460 and A549 cancer cells." Molecules 19 (11), 17663 - 17681 d a lu 51 Ward, Zemlak, Innes, Last, Hebert (2005) "DNA barcoding Australia's fish f an nv species." Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 360 (1462), 1847 - 1857 52 Waugh, J (2007) "DNA barcoding in animal species: progress, potential and ul oi lm pitfalls." Bioessays 29 (2), 188 - 197 53 Wenpan Dong, Han Liu, Chao Xu, Yunjuan Zuo, Zhongjian Chen, Shiliang nh at Zhou (2014) " A chloroplast genomic strategy for designing taxon specific z DNA mini-barcodes: a case study on ginsengs" BMC Genomics z 54 "Automated DNA Sequencing Chemistry Guide." gm @ III Tài liệu tham khảo Internet I_Seq_Ref_Guide.pdf om l.c http://www.bioscienceresearch.co.nz/downloads/files/DNA_sequencing/AB an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam 55 "Barrington Laboratory Protocols DNA Extraction." http://www.uvm.edu/~dbarring/protocols.htm 56 "DNA Barcoding Decoding nature." http://www.oafe.org/LinkClick.aspx?fileticket=af6hrPG8C4%3D&tabid=7 9&mid=457 57 " DNA sequencing core in case of trouble" http://seqcore.brcf.med.umich.edu/ 58 "DNA Template Preparation for BigDye Sequencing" http://www.udel.edu/ a lu 59 "Sanger DNA Sequencing: Troubleshooting n n va http://seqcore.brcf.med.umich.edu/ tn to 60 "Using DNA Barcodes To Identify And Classify Living Things" http://www.dnabarcoding101.org/introduction.html p ie gh 61 "What is DNA Barcoding?" d oa nl w http://ibol.org/about-us/what-is-dna-barcoding f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam Ph lc a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z @ om l.c gm Hình Kết giải trình tự đoạn gen rbcLa mẫu trà túi lọc số an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z gm @ om l.c Hình Kết giải trình tự đoạn gen rbcLa mẫu trà túi lc s an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z @ om l.c gm Hình Kết giải trình tự đoạn gen rbcLa mẫu trà túi lọc số an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z gm @ om l.c Hình Kết giải trình tự đoạn gen rbcLa mẫu trà Giảo Cổ Lam khô số an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu Hình Kết giải trình tự đoạn gen rbcLa mẫu trà Giảo Cổ Lam khụ s n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam a lu n n va (1) (1) (1) (1) (1) TK3 TK6 TL1 TL2 TL4 (81) (81) (81) (81) (81) TK3 TK6 TL1 TL2 TL4 (161) (161) (161) (161) (161) TK3 TK6 TL1 TL2 TL4 (237) (241) (237) (237) (237) TK3 TK6 TL1 TL2 TL4 (316) (319) (316) (316) (317) TK3 TK6 TL1 TL2 TL4 (391) (396) (391) (392) (393) p ie gh tn to TK3 TK6 TL1 TL2 TL4 (471) (476) (467) (470) (472) d oa nl w TK3 TK6 TL1 TL2 TL4 80 GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA 81 160 CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAACTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGGG CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG 161 240 TGGACCGATGGGC-TTACCAATCTTGAT-CCTTACAAAGGACGATGCTACGACATCAAGC CTGTTTCTGGAAAAAAAA TGGACCGATGGGGGTTACCCATATCTTTACCCTACAAAGGGAGAAACCTGGTAATTAAAAAACCGTTCTTGGAAAAGAAA TGGACCGATGGGC-TTACCAGTCTTGAT-CGTTACAAAGGACGATGCTACGACATCGAGC CTGTTGCTGGAGAAGAAA TGGACCGATGGGC-TTACCAGTCTTGAT-CCTTACAAAGGACGATGCTACGACATCAAGC CTGTTGCTGGAAAAAAGA TGGACCGATGGGC-TTACCAGTCTTGAT-CGTTACAAAGGACGATGCTACGACATCGAGC CTGTTGCTGGAGAAAAAA 241 320 GTCAAGTTATTGCTTATATAACTTATACCTTAAATTTTTTTTAAAAAAAGGGGC-TGATTGTCATATCTTCTTCCTTTGT AAAGGTTTATCGTTTATGTCCCTTA-ACCTTAATTCCTTTTCGAACAACGTGCA-TGTTTGTCATACAATCACCTTTTTT GTCAATTTATTGCTTATGTAGCTTATCCCTTAGA-CCTTTTTGAAGAAGGTTCTGTTACTAACATGTTTACTTCCATTGT TTTAAGGTATAGCTTATGTAACCAATAAATTGATTTTTTTTTCAAGAACAGGGT-TCGATGTCGTAGCTTCTTCCTTTGT GTCAATTTATTGCTTATGTAGCTTATCCCTTAAATCTTTTTGAAGAAAGTTGGTGTTATTGACATGTTTTCTTCCTTTGT 321 400 GGGGAT-AAAGGT-GGTAGGCCCATCGGCCCACCCAGTTGTCCATGTGCCAG-TTAAAAAATCC GCAGCTACAGGGGC GACGGGTAAAGACTGGGAAGCCCAACGGTCCAAAAAGTTGGCCATTTTCCAG-TAAAAAAATCC ACCACCTCCGGGGG GGGTA ATGTATTTGGGTTCAA-GGCCCTGCGCGCTCTACGTCTGGAGGATTTGCGAATCCCTACTGCTTATACTAA AACGAT-CAAGATTGGTAAGCCCATCGGTCCACACAGTTGTCCATGTACCAG-TAGAAAATTCA GCAGCTACAGCGGC GGGGA AAAGATTTGTAAGCCCAACGGTCCCCACAGTTGTCCATGTGCCAGGTAAAAAATTCC GCAACTTCCGGGGC 401 480 CCCTGGTTCCTCGGGTGGAACTCCGGGGTTAAGAATTTCCCCGAATGGCTGCCAAGAAATAAGGACCTTCGGTTTCGGGA CCCTGGTTCCTTGGGGGGAACCTCCGGGTTGAGAATTTACTCGAAATGCTGCCAAGATATCAGGTATATTGGTTTCGTAA AACT TTCCAAGGCCCG CCTCATGGTATCCAAGTTGATAGAGATAAATTGAACAAGTATGGCCGCCCCCTAGTGGGA CCCTGCTTCCTCGGGTGGAACTCCGGG-TTGAGGAGTTCCTCGAAATGTTGCCA-GAAATAGGAACCTTGGGTTTCGAGA CCCTGGTTCCTCGGGTGGAACCTCGGGTTTAAGAATTTCCCCGAAAGGTGGCCAAAAAATAAGAACGTTGGCTATCG-GA 481 550 TGAGGAGTTTAACAAGCCAAGTGATAATCTTTAAA-GAAGCTGGGAAACCAACACTTGATTGTTCC -TCTGGTGTATAATAAGTCTTGTTATTATCTTTAAAACAATTTTGGAAGAGAACTTTTGGA -TGTACTAGTAAACCAAAATTGGGATTAACCGCTAA-CAACCATGGTTGAGAAACCAATGAATGTTTGCTC TGAGGAGTTAAAAAAGCAATGTTATAATCTTTAAA-CAATTTTG-AAATCCACACTTTGTTTGTCTAA-TGCGGAGTTAAACAAGCAATGTGATAATCTGAAAA-CAATCTTGGAAACCAGCT-TTTGATTGTCT a lu Hình Kết so sánh trình tự mẫu trà Giảo Cổ Lam f an nv TK3: Trà Giảo Cổ Lam khô số TL1: Trà túi lọc số at nh TL2: Trà túi lọc số oi lm ul TK6: Trà Giảo Cổ Lam khô số z TL4: Trà túi lọc số z om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam Hỡnh Hỡnh ảnh thể tín hiệu trình tự bị nhiễu a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu Hình Hình ảnh thể tín hiệu trình tự bị nhiễu tạp nhiễm từ loài khác oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu Hình Hình ảnh thể tín hiệu trình tự bị nhiễu tạp nhiễm từ lồi có quan h gn gi n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam S TL1 S TL1 S TL1 S TL1 S TL1 S TL1 S TL1 a lu S TL2 n S TL2 va n S TL2 S TL2 p ie gh tn to S TL2 S TL2 80 (1) GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA (1) GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA 81 160 (81) CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG (81) CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG 161 240 (161) TGGACCGATGGGCTTACCAGTCTTGATCGTTACAAAGGACGATGCTACGACATCGAGCCTGTTGCTGGAGAAGAAAGTCA (161) TGGACCGATGGGCTTACCAGTCTTGATCGTTACAAAGGACGATGCTACGACATCGAGCCTGTTGCTGGAGAAGAAAGTCA 241 320 (241) ATTTATTGCTTATGTAGCTTATCCCTTAGACCTTTTTGAAGAAGGTTCTGTTACTAACATGTTTACTTCCATTGTGGGTA (241) ATTTATTGCTTATGTAGCTTATCCCTTAGACCTTTTTGAAGAAGGTTCTGTTACTAACATGTTTACTTCCATTGTGGGTA 321 400 (321) ATGTATTTGGGTTCAAGGCCCTGCGCGCTCTACGTCTGGAGGATTTGCGAATCCCTCCTGCTTATTCTAAAACTTTCCAA (321) ATGTATTTGGGTTCAAGGCCCTGCGCGCTCTACGTCTGGAGGATTTGCGAATCCCTACTGCTTATACTAAAACTTTCCAA 401 480 (401) GGCCCGCCTCATGGTATCCAAGTTGAGAGAGATAAATTGAACAAGTATGGCCGCCCCCTATTGGGATGTACTATTAAACC (401) GGCCCGCCTCATGGTATCCAAGTTGATAGAGATAAATTGAACAAGTATGGCCGCCCCCTAGTGGGATGTACTAGTAAACC 481 535 (481) AAAATTGGGATTATCCGCTAAGAATTATGGTAGAGCAGTTTATGAATGTTTACGC (481) AAAATTGGGATTAACCGCTAACAACCATGGTTGAGAAACCAATGAATGTTTGCTC S TL2 at nh z z S TL4 oi lm S TL4 ul S TL4 f an S TL4 nv S TL4 a lu S TL4 80 (1) GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA (1) GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA 81 160 (81) CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG (81) CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG 161 240 (161) TGGACCGATGGGCTTACCAGTCTTGATCGTTACAAAGGACGATGCTACGACATCGAGCCTGTTGCTGGAGAAGAAAGTCA (161) TGGACCGATGGGCTTACCAGTCTTGATCGTTACAAAGGACGATGCTACGACATCGAGCCTGTTGCTGGAGAAAAAAGTCA 241 320 (241) ATTTATTGCTTATGTAGCTTATCCCTTAGACCTTTTTGAAGAAGGTTC-TGTTACTAACATGTTTACTTCCATTGTGGGT (241) ATTTATTGCTTATGTAGCTTATCCCTTAAATCTTTTTGAAGAAAGTTGGTGTTATTGACATGTTTTCTTCCTTTGTGGGG 321 400 (320) AATGTATTTGGGTTCAAGGCCCTGCGCGCTCTACGTCTGGAGGATTTGCGAATCCCTCCTGCTTATTCTAAAACTTTCCA (321) AAAAGATTTG -TAAGCCCAACGGTCCCCACAGTTGTCC-ATGTGCCAGGTAAAAA -ATTCCGCAACCT CG 401 480 (400) AGGCCCGCCTCATGGTATCCAAGTTGAGAGAGATAAATTGAACAAGTATGGCCGCCCCCTATTGGGATGTACTATTAAAC (388) GGTGGAACCTCGGGTTTAAGAATTTCCCCGAAAGGTGGCCAAAAAATAAGAACGTTGGCTATCGG-ATGCGGAGTTAAAC 481 536 (480) CAAAATTGGGATTATCCGCTAAGAATTATGGTAGAGCAGTTTATGAATGTTTACGC (467) AAGCAATGTGATAATCTGAAAACAATCTTGG-AAACCAGCTTTTGATTGTCTCCGC d S TL4 oa nl w 80 (1) GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA (1) GTGTTAAGATTATAAATTGACTTATTATACTCCTGACTATGAAACCAAAGATACTGATATCTTGGCAGCATTCCGAGTAA 81 160 (81) CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG (81) CTCCTCAACCCGGAGTTCCACCCGAGGAAGCAGGGGCCGCTGTAGCTGCTGAATCTTCTACTGGTACATGGACAACTGTG 161 240 (161) TGGACCGATGGGCTTACCAGTCTTGATCGTTACAAAGGACGATGCTACGACATCGAGCCTGTTGCTGGAGAAGAAAGTCA (161) TGGACCGATGGGCTTACCAGTCTTGATCCTTACAAAGGACGATGCTACGACATCAAGCCTGTTGCTGGAAAAAAGATTTA 241 320 (241) ATTTATTGCTTATGTAGCTTATCCCTT-AGACCTTTTTGAAGAAGGTTCTGTTACTAACATGTTTACTTCCATTGTGGGT (241) AGGTATAGCTTATGTAACCAATAAATTGATTTTTTTTTCAAGAACAGGGT-TCGATGTCGTAGCTTCTTCCTTTGTAACG 321 400 (320) AATGTATTTGGGTTCAAGGCCCTGCGCGCTCTACGTCTGGAGGATTTGCGAATCCCTCCTGCTTATTCTAAAACTTTCCA (320) A-TCAAGATTGGT AAGCCCATCGGTCCACACAGTT GTCCATGTACCAGTAGAAAATTCAGCAGCTACAGCGGCCCC 401 480 (400) AGGCCCGCCTCATGGTA-TCCAAGTTGAG-AGA -GATAAATTGA-ACAAGTATGGCCGCCCCCTATTGGGATGTAC (395) TGCTTCCTCGGGTGGAACTCCGGGTTGAGGAGTTCCTCGAAATGTTGCCAGAAATAGGAACCTTGGGTTTCGAGATGAGG 481 544 (472) TATTAAACCAAAATTGGGATTATCCGCTAAGAATTATGGTAGAGCAGTTTATGAATGTTTACGC (475) AGTTAAAAAAGCAATGTTATAATCTTTAAACAATTTTGAAATC-CACACTTTGTTTGTCTAACA om l.c gm @ an Lu n va th (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam ac si (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam (Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam(Luỏưn.vn).ỏằâng.dỏằƠng.phặặĂng.phĂp.mÊ.vỏĂch.dna.trong.kiỏằm.ỏằnh.thnh.phỏĐn.chưnh.cỏằĐa.cĂc.sỏÊn.phỏâm.thỏÊo.dặỏằÊc.tỏằô.giỏÊo.cỏằã.lam