Nghiên cứu một số đặc tính sinh vật học của vi khuẩn escherichia coli, listeria monocytogenes và salmonella spp nhiễm trên thịt lợn tiêu thụ tại địa bàn thành phố lạng sơn, đề xuất biện pháp phòng chống

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HÀ VĂN QUANG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH VẬT HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI, LISTERIA MONOCYTOGENES VÀ SALMONELLA SPP NHIỄM TRÊN THỊT LỢN TIÊU THỤ TẠI ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ LẠNG SƠN, ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y THÁI NGUYÊN - 2016 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! http://www.lrc.tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM HÀ VĂN QUANG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH VẬT HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI, LISTERIA MONOCYTOGENES VÀ SALMONELLA SPP NHIỄM TRÊN THỊT LỢN TIÊU THỤ TẠI ĐỊA BÀN THÀNH PHỐ LẠNG SƠN, ĐỀ XUẤT BIỆN PHÁP PHÒNG CHỐNG Chuyên ngành: THÚ Y Mã số: 60 64 01 01 LUẬN VĂN THẠC SĨ THÚ Y Người hướng dẫn khoa học: PGS TS ĐẶNG XUÂN BÌNH THÁI NGUYÊN - 2016 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu cá nhân tơi trực tiếp thực với đồng nghiệp Bộ môn Vệ sinh - Viện Thú y Quốc gia Mẫu vật thu thập chợ khu vực thành phố Lạng Sơn; số liệu kết nghiên cứu trình bày Luận văn trung thực, xác, chưa cơng bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan thơng tin trích dẫn Luận văn rõ nguồn gốc Mọi giúp đỡ để hoàn thành Luận văn cảm ơn Thái Nguyên, tháng năm 2016 TÁC GIẢ Hà Văn Quang Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực tập thực đề tài này, nhận quan tâm, bảo, hướng dẫn, giúp đỡ tận tình thầy giáo, đồng nghiệp, bạn bè động viên khích lệ gia đình Nhân dịp tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới: Thầy giáo PGS TS Đặng Xuân Bình trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình suốt q trình nghiên cứu hồn thành Luận văn Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo, Ban chủ nhiệm khoa thầy cô giáo Khoa Chăn nuôi Thú y - Trường Đại học Nông lâm - Đại học Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ suốt q trình học tập Tơi xin trân trọng cảm ơn chủ quầy bán thịt lợn chợ Đông Kinh, chợ Kỳ Lừa chợ Giếng Vuông tạo điều kiện cho lấy mẫu thực đề tài Xin trân trọng cảm ơn môn Vệ sinh - Viện Thú y Quốc gia giúp trình xét nghiệm mẫu thực đề tài Cuối Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc ủng hộ, động viên, giúp đỡ gia đình, bạn bè đồng nghiệp suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành tốt Luận văn Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN .ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG BIỂU viii DANH MỤC HÌNH, ĐỒ THỊ x MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học đề tài 1.1.1 Ngộ độc thực phẩm (NĐTP) 1.1.2 Thịt tươi dạng hư hỏng thịt 1.1.3 Đặc điểm sinh học vi khuẩn E coli 1.1.4 Đặc điểm sinh học vi khuẩn Salmonella 11 1.1.5 Đặc điểm sinh học vi khuẩn L monocytogenes gây nhiễm thịt 14 1.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 16 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nước 16 1.2.2 Tình hình nghiên cứu giới 19 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 25 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 25 2.1.2 Vật liệu, hóa chất dụng cụ nghiên cứu 25 2.2 Địa điểm, thời gian nghiên cứu 25 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn iv 2.3 Nội dung nghiên cứu 26 2.3.1 Khảo sát tình hình giết mổ tiêu thụ thịt lợn khu chợ nghiên cứu địa bàn TP Lạng Sơn 26 2.3.2 Nghiên cứu tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí nhiễm thịt lợn tươi 26 2.3.3 Khảo sát tiêu vi khuẩn E coli, Salmonella spp Listeria monocytogenes nhiễm thịt lợn bán chợ 26 2.3.4 Xác định mức độ nhiễm vi khuẩn E coli, Salmonella spp., L monocytogenes thịt lợn theo thời gian lấy mẫu 26 2.3.5 Giám định số đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn E coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập 26 2.3.6 Xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập 26 2.3.7 Xác định yếu tố gây bệnh chủng E coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập 26 2.3.8 Xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh hóa dược chủng E coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập 26 2.3.9 Đề xuất số biện pháp khống chế 26 2.4 Phương pháp nghiên cứu 26 2.4.1 Phương pháp điều tra 26 2.4.2 Phương pháp lấy mẫu 26 2.4.3 Phương pháp xác định tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí có thịt tươi 27 2.4.4 Phương pháp xác định tiêu vi khuẩn E coli thịt lợn 27 2.4.5 Phương pháp phát Salmonella 27 2.4.6 Các phương pháp phát Listeria monocytogenes 30 2.4.7 Phương pháp xác định độc lực vi khuẩn E coli, Salmonella Listeria phân lập 31 2.4.8 Phương pháp xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh vi khuẩn E coli, Salmonella Listeria phân lập 31 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn v 2.4.9 Phương pháp xác định độc tố đường ruột (Enterotoxin) phương pháp khuếch tán da thỏ 32 2.5 Phương pháp xử lý số liệu 33 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 34 3.1 Khảo sát tình hình giết mổ tiêu thụ thịt lợn khu chợ nghiên cứu địa bàn TP Lạng Sơn 34 3.2 Nghiên cứu tiêu tổng số vi khuẩn hiếu khí nhiễm thịt lợn tươi 35 3.3 Khảo sát tiêu vi khuẩn E coli, Salmonella spp L monocytogenes nhiễm thịt lợn bán chợ 38 3.3.1 Xác định tiêu vi khuẩn E coli, Salmonella spp., Listeria monocytogenes thịt lợn bán chợ nghiên cứu 38 3.3.2 Xác định tiêu vi khuẩn E coli, Salmonella spp., Listeria monocytogenes nhiễm thịt lợn theo thời gian lấy mẫu ngày 40 3.4 Xác định mức độ nhiễm vi khuẩn Escherichia coli, Salmonella spp., Listeria monocytogenes thịt lợn chợ nghiên cứu 43 3.4.1 Xác định mức độ ô nhiễm vi khuẩn E coli thịt lợn 43 3.4.2 Xác định mức độ ô nhiễm vi khuẩn Salmonella spp thịt lợn 45 3.4.3 Xác định mức độ ô nhiễm vi khuẩn L monocytogenes thịt lợn 47 3.5 Giám định số đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn Escherichia coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập 49 3.5.1 Giám định số đặc tính sinh vật, hóa học chủng vi khuẩn Escherichia coli phân lập 49 3.5.2 Giám định số đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn Salmonella spp phân lập 50 3.5.3 Giám định số đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn Listeria monocytogenes phân lập 51 3.6 Xác định độc lực chủng vi khuẩn E coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập 52 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn vi 3.7 Xác định yếu tố gây bệnh chủng E coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập 54 3.7.1 Xác định khả sản sinh độc tố đường ruột (Enterotoxin) vi khuẩn E coli, Salmonella spp “Phản ứng khuếch tán da thỏ” 54 3.7.2 Xác định ADN mang gen mã hóa yếu tố gây bệnh Listeriolysin (hly A) vi khuẩn Listeria monocytogenes phản ứng PCR 55 3.8 Xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh hóa dược chủng E coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập 56 3.8.1 Xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh hóa dược chủng E coli phân lập 57 3.8.2 Xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh hóa dược chủng Salmonella spp phân lập 59 3.8.3 Xác định tính mẫn cảm với số loại kháng sinh hóa dược chủng L monocytogenes phân lập 61 3.9 Đề xuất số biện pháp khống chế tình trạng nhiễm vi sinh vật thịt lợn bán chợ địa bàn thành phố Lạng Sơn 63 3.9.1 Trong hoạt động giết mổ sở giết mổ lợn 63 3.9.2 Các giải pháp quản lý 63 3.9.3 Các giải pháp kinh tế - xã hội 63 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 65 Kết luận 65 Đề nghị 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO 67 PHỤ LỤC ẢNH 77 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn vii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VIẾT TẮT - : Đến % : Tỷ lệ phần trăm Cs : Cộng E coli : Escherichia coli L monocytogenes : Listeria monocytogenes NĐTP : Ngộ độc thực phẩm Nxb : Nhà xuất TCVN : Tiêu chuẩn Việt Nam QCVN : Quy chuẩn Việt Nam Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn viii DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1: Đánh giá kết cảm quan thịt (Nguyễn Vĩnh Phước, 1976 Bảng 1.2 Độc lực chủng E coli (Sabra A., 2002) 10 Bảng 1.3 Đặc điểm sinh hóa số loài Listeria (TCVN 7700-1:2007 15 Bảng 2.1 Bảng phân biệt loài Listeria 30 Bảng 3.1 Thời gian hoạt động, ình hình tiêu thụ thịt lợn ta ̣i khu chợ lớn địa bàn TP Lạng Sơn 34 Bảng 3.2 Kết xác định tiêu tổng số VKHK nhiễm thịt lợn 36 Bảng 3.3 Tình hình nhiễm khuẩn E coli, Salmonella spp., Listeria monocytogenes thịt lợn 38 Bảng 3.4 Nhiễm khuẩn E coli, Salmonella spp., Listeria monocytogenes thịt lợn theo thời gian lấy mẫu ngày 41 Bảng 3.5 Mức độ nhiễm E coli thịt lợn 43 Bảng 3.6 Mức độ nhiễm Salmonella spp thịt lợn 45 Bảng 3.7 Mức độ nhiễm Listeria monocytogenes thịt lợn 47 Bảng 3.8 Đặc tính sinh vật, hóa học vi khuẩn E coli phân lập 49 Bảng 3.9 Đặc tính sinh vật, hóa học chủng vi khuẩn Salmonella spp phân lập 51 Bảng 3.10 Đặc tính sinh vật, hóa học chủng vi khuẩn L monocytogenes phân lập 52 Bảng 3.11 Độc lực vi khuẩn E coli, Salmonella spp Listeria monocytogenes phân lập 53 Bảng 3.12 Khả sản sinh độc tố đường ruột (Enterotoxin) vi khuẩn E coli, Salmonella spp 54 Bảng 3.13 Xác định ADN mang gen mã hóa sản sinh Listeriolysin (hly A) vi khuẩn Listeria monocytogenes phân lập 55 Bảng 3.14 Kết thử tính mẫn cảm với số loại kháng sinh hóa dược chủng vi khuẩn E coli phân lập 57 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 65 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận - Khối lượng thịt lợn giết thịt trung bình chợ (Đông Kinh, Kỳ Lừa Giếng Vuông) từ 14,63 - 35,05 con/ngày, tương đương 1,14 - 2,87 thịt; tổng lượng thịt lợn tiêu thụ chợ khoảng tấn/ngày; quầy bán thịt lợn kiểm dịch thú y chủ yếu cảm quan - Có 53,70% mẫu thịt lợn có tiêu tổng số VKHK không đạt tiêu chuẩn kỹ thuật (theo TCVN 7046-2002) - Thịt lợn bán chợ khu vực thành phố Lạng Sơn có từ 40 - 50% số mẫu không đạt tiêu chuẩn vệ sinh tiêu E coli; từ 16,6 - 26,6% tiêu Salmonella spp.; từ 10 - 16,6% tiêu L monocytogenes Tỷ lệ vi khuẩn nhiễm thịt lợn bán chợ có khác theo thời gian lấy mẫu ngày có xu hướng tăng mức độ ô nhiễm - Các chủng vi khuẩn E coli, Salmonella spp., L monocytogenes phân lập có đặc tính sinh vật hóa học phù hợp với mơ tả tài liệu kinh điển - Đã xác định 37,50% số chủng vi khuẩn E coli 60,00% số chủng vi khuẩn Salmonella spp có khả sản sinh độc tố đường ruột Tỷ lệ chủng vi khuẩn L monocytogenes phân lập mang gen mã hóa sản sinh yếu tố gây bệnh Listeriolysin chiếm 11,11% - Vi khuẩn phân lập có độc lực mạnh với chuột thí nghiệm thể qua thời gian số lượng chuột chết; E coli gây chết 91,6% chuột thí nghiệm; Salmonella spp gây chết 95,0% L monocytogenes gây chết 93,3% chuột thí nghiệm 37,5% số chủng E coli 60% số chủng Salmonella spp sản sinh độc tố đường ruột (Enterotoxin) Có 11,1% số chủng L monocytogenes mang gen mã hóa sản sinh yếu tố gây dung huyết Listeriolysin (hly A) - Vi khuẩn E coli mẫn cảm mạnh với ceftazidime (65,0%), mẫn cảm trung bình với trimethoprim/sunfamethoxazole, gentamicin spectinomycin; 100% kháng lại amoxicilline 90,0% kháng streptomycin Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 66 - Vi khuẩn Salmonella kháng lại hầu hết loại kháng sinh (streptomycin 100,%, trimethoprim/sunfamethoxazole 85,0%, amoxicilline 80,0% spectinomycin 70,0%) Mẫn cảm trung bình với gentamicin 80,0% ceftazidime 30,0% - Vi khuẩn L monocytogenes mẫn cảm mạnh với loại kháng sinh thông thường (amoxicilline 100%, erythrommycin 100%) 55,0% mẫn cảm trung bình với streptomycin Đề xuất số biện pháp nhằm khơng chế tình trạng ô nhiễm vi sinh vật vào thân thịt nhằm đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm Đề nghị Do kinh phí có hạn nên kết nghiên cứu đề tài cịn hạn chế Vì vậy, chúng tơi đề nghị cần tiếp tục có nghiên cứu phạm vi rộng hơn, tăng thêm số tiêu, cụ thể sau: Tiếp tục có nghiên cứu ô nhiễm vi khuẩn E coli, L monocytogenes Salmonella phân lập từ thịt lợn Xác định yếu tố nguy cơ, nguồn lây nhiễm vi khuẩn vào thịt lợn qua trình giết mổ, phân phối, lưu thông, bày bán, từ dụng cụ, trang thiết bị, quần áo bảo hộ tay người tham gia giết mổ, người kinh doanh thịt Nghiên cứu thêm đặc tính sinh học, yếu tố độc lực, tính mẫn cảm với kháng sinh hóa dược chủng vi khuẩn khuẩn E coli, L monocytogenes Salmonella phân lập từ thịt lợn Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO I TIẾNG VIỆT Đỗ Ngọc Ánh (2011), Bệnh vi khuẩn Listeria monocytogenes - Nguy hiểm phụ nữ mang thai, Học viện quân y Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật y học, Nhà xuất Y học Cục Vệ sinh an toàn thực phẩm - Bộ Y tế (2009), Số liệu vụ ngộ độc 2009 Cục Vệ sinh an toàn thực phẩm - Bộ Y tế (2010), Số liệu ngộ độc năm 2010 Cục Vệ sinh an toàn thực phẩm - Bộ Y tế (2011), Số liệu ngộ độc năm 2011 Cục Vệ sinh an toàn thực phẩm - Bộ Y tế (2012), Số vụ ngộ độc thực phẩm năm 2012 Cục Vệ sinh an toàn thực phẩm - Bộ Y tế (2013), Số vụ ngộ độc thực phẩm năm 2013 Cục Vệ sinh an toàn thực phẩm - Bộ Y tế (2014), Số vụ ngộ độc thực phẩm năm 2014 Cục Vệ sinh an toàn thực phẩm - Bộ Y tế (2015), Số vụ ngộ độc thực phẩm năm 2015 10 Đỗ Bích Duệ (2012), Nghiên cứu số đặc điểm sinh học vi khuẩn Escherichia coli thịt lợn bán thành phố Thái Nguyên, Luận Văn thạc sĩ Công nghệ sinh học, Thái Nguyên, tr 53 - 55 11 Hà Thị Anh Đào (2005), Khảo sát tình trạng nhiễm Salmonella, E coli, Campylobacter thực phẩm nguyên liệu bếp ăn trường mầm non Hà Nội năm 2004, Báo cáo đề tài nghiên cứu khoa học Viện Dinh dưỡng 12 Trần Thị Hương Giang, Huỳnh Thị Mỹ Lệ (2012), “Xác định tỷ lệ nhiễm độc lực vi khuẩn Escherichia coli phân lập từ thịt (lợn, bò, gà) số huyện ngoại thành Hà Nội”, Tạp chí khoa học phát triển 2012 - Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội, 10 (2), tr 295 - 300 13 Nguyễn Thị Hiền, Phan Thị Kim, Trương Thi Hoà, Lê Thị Lan Chi (2003), Vi sinh vật nhiễm tạp lương thực thực phẩm, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 14 Đỗ Văn Hiệp (2007), Khảo sát thực trạng hoạt động giết mổ lợn trâu bò huyện Quốc Oai - Hà Tây, Luận văn thạc sĩ khoa học Nông nghiệp, Đại học Nông nghiệp - Hà Nội, tr 51 - 56 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 68 15 Cầm Ngọc Hoàng, Nguyễn Thị Thanh Thủy, Nguyễn Bá Tiếp (2014), “Đánh giá thực trạng giết mổ ô nhiễm vi khuẩn thịt lợn sở giết mổ thuộc tỉnh Nam Định”, Tạp chí Khoa học Phát triển, 12 (4), tr 549 - 557 16 Vũ Thị Huyền (2012), Nghiên cứu phức hợp hạt nano - kháng thể nhằm phát vi khuẩn gây ngộ độc thực phẩm Listeria monocytogenes, Luận văn Thạc sĩ Công nghệ Nano - Sinh học, Đại học Quốc Gia Hà Nội 17 Nguyễn Viết Không, Phạm Thị Ngọc, Đinh Xuân Tùng, Lapar Ma Lucila, Fred Unger, Nguyễn Việt Hùng, Phạm Đức Phúc, Phạm Thị Nga, Gilbert Jeffrey cộng (2012), “Ô nhiễm Salmonella điểm giết mổ gia cầm quy mô nhỏ huyện ngoại Hà Nội”, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn, kỳ tháng 12, tr 60 - 67 18 Phạm Thị Ngọc Lan, Ngô Thị Tuyết Mai (2012), “Khảo sát ô nhiễm vi sinh vật số thực phẩm địa bàn thành phố Huế năm 2010 - 2011”, Tạp chí khoa học, Đại học Huế, 73 (4), tr 137 - 145 19 Lê Thị Lành (2015), Nghiên cứu chế tạo vàng nano số ứng dụng, Luận án Tiến sĩ Hóa Học, Đại học Huế 20 Chu Văn Mẫn, Đào Hữu Hồ (2002), Thống kê sinh học, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội, tr 171 - 176 21 Vũ Bình Minh, Cù Hữu Phú (1999), “Kết phân lập vi khuẩn E coli Salmonella lợn mắc bệnh tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hố học chủng vi khuẩn phân lập được”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, Hội thú y Việt Nam, Hà Nội, tr 32 - 36 22 Phùng Văn Mịch (2008), Khảo sát thực trạng hoạt động giết mổ ô nhiễm vi khuẩn thịt lợn số sở giết mổ địa bàn quận nội thành - thành phố Hải Phòng, Luận văn Thạc sĩ Nông nghiệp 23 Phạm Thị Ngọc, Nguyễn Tiến Thành, Trần Thị Hạnh, Nguyễn Việt Hùng (2013), “Tỷ lệ nhiễm Salmonella lợn số trang trại lò mổ thuộc tình phía Bắc Việt Nam”, Tạp chí Y học dự phòng, 23 (4), tr 59 - 66 24 Lương Đức Phẩm (2000), Vi sinh vật học an tồn vệ sinh thực phẩm, Nxb Nơng nghiệp, Hà Nội tr 89 - 106 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 69 25 Nguyễn Vĩnh Phước (1976), Vi sinh vật thú y, tập 3, Nxb Đại học Trung học chuyên nghiệp, Hà Nội 26 QCVN 8-3:2012/BYT (2012), Thông tư ban hành quy chuẩn kỹ thuật quốc gia ô nhiễm vi sinh vật thực phẩm, Bộ Y tế 27 Lê Văn Tạo, Nguyễn Thị Vui (1994),“Phân lập định type vi khuẩn Salmonella gây bệnh cho lợn”, Tạp chí Nơng nghiệp, cơng nghiệp thực phẩm,(11), Hà Nội, tr 430 - 431 28 Nguyễn Thị Bích Thanh (2015), Nghiên cứu nhiễm vi khuẩn Escherichia coli Staphylococcus aureus thịt gà bán chợ khu vực Hà Đông, Hà Nội, đề xuất biện pháp khống chế, Luận văn Thạc sĩ Thú y, ĐH Thái Nguyên 29 Tô Liên Thu (2006), Nghiên cứu trạng ô nhiễm số vi khuẩn thịt lợn, gà Hà Nội áp dụng biện pháp hạn chế phát triển chúng, Luận án Tiến sỹ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc gia Hà Nội, tr 45 - 57 30 Đỗ Ngọc Thúy (2006), “Đánh giá tình hình nhiễm số loại vi khuẩn gây bệnh thịt tươi địa bàn Hà Nội”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y, 13(3) 31 Đào Thị Thanh Thủy (2012), Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella số đặc điểm Salmonella thịt lợn tươi khu vực thành phố Thái Nguyên, Luận văn Thạc sĩ Công Nghệ sinh học, ĐH Thái Nguyên 32 Nguyễn Thị Thanh Thủy, Đỗ Ngọc Thúy, Lưu Thị Hải Yến, Nguyễn Bá Hiên (2011), “Xác định tỷ lệ vi khuẩn Verotoxigenic E coli (VTEC) mẫu thịt chợ, lò mổ địa bàn Hà Nội”, Tạp chí Khoa học Phát triển, (6), tr 972 - 977 33 Dương Quốc Tiến (2015), Nghiên cứu ô nhiễm vi khuẩn Listeria Salmonella thịt lợn bán chợ thành phố Thái Nguyên, đề xuất biện pháp khống chế, Luận văn Thạc sĩ Thú y, ĐH Thái Nguyên 34 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 5153:1990 thịt sản phẩm thịt, phương pháp phát Salmonella, Ủy ban Khoa học Nhà nước ban hành 35 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 5155:1990 Thịt sản phẩm thịt Phương pháp phát đếm số Escherichia coli Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 70 36 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 5667:1992 thịt sản phẩm thịt - phương pháp xác định tổng số vi khuẩn khí 37 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 4833-2:2002 thịt sản phẩm thịt - Lấy mẫu chuẩn bị mẫu thử - phần 2: chuẩn bị mẫu thử để kiểm tra vi sinh vật Bộ Khoa học Công nghệ ban hành 38 Tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 4835:2002 (ISO 2917:1999), Thịt sản phẩm thịt - Đo độ pH - Phương pháp chuẩn 39 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 7700-1:2007 Vi sinh vật thực phẩm thức ăn chăn nuôi - Phương pháp phát định lượng Listeria monocytogenes - Phần 1: Phương pháp phát 40 Tiêu chuẩn quốc gia TCVN 7925:2008 Vi sinh vật thực phẩm thức ăn chăn nuôi - Phương pháp lấy mẫu thân thịt tươi để phân tích vi sinh vật 41 Tiêu chuẩn Quốc gia TCVN 7046:2009 thịt tươi - Yêu cầu kỹ thuật 42 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Giáo trình vi sinh vật thú y, Nxb Nông Nghiệp Hà Nội 43 Trịnh Quang Tuyên, Nguyễn Ngọc Phụng, Lê Văn Tạo, Cù Hữu Phú, Lê Thế Tuấn (2004), “Phân lập xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli từ lợn bị tiêu chảy nuôi trại lợn Tam Điệp”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tr 22 - 28 44 Đào Thị Xuân (2014), Nghiên cứu số đặc tính sinh học vi khuẩn Salmonella tác dụng chế phẩm Biovet đến khả sinh trưởng, phịng bệnh thương hàn gà ni huyện n Lạc - tỉnh Vĩnh Phúc, Luận Văn Thạc sĩ Thú y, ĐH Thái Nguyên II TIẾNG NƯỚC NGOÀI 45 Adeyanju G T., Ishola O (2014), “Salmonella and Escherichia coli contamination of poultry meat from a processing plant and retail markets in Ibadan, Oyo State, Nigeria”, Springerplus, 12, pp - 139 46 Akya A., Najafi A., Moradi J., Mohebi Z., Adabagher S (2013) “Prevalence of food contamination with Listeria spp in Kermanshah, Islamic Republic of Iran”, East Mediterr Health J., 19(5), pp 474 - 477 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 71 47 Althaus D., Lehner A., Brisse S., Maury M., Tasara T., Stephan R (2014), “Characterization of Listeria monocytogenes Strains Isolated During 2011-2013 from Human Infections in Switzerland”, Foodborne Pathogens and Disease 48 Bai X., Wang H., Xin Y., Wei R., Tang X., Zhao A., Sun H., Zhang W., Wang Y., Xu Y., Zhang Z., Li Q., Xu J., Xiong Y (2015), “Prevalence and characteristics of Shiga toxin-producing Escherichia coli isolated from retail raw meats in China”, Int J Food Microbiol, (20), pp 31 - 38 49 Bardon J., Ondrušková J., Ambrož P (2016), “Prevalence of Salmonella in meat and meat products in Moravia in 2010-2015”, Klin Mikrobiol Infekc Lek, 22(2), pp 48 - 53 50 Barlik M., Seremak-Mrozikiewicz A., Drews K (2014), “Listeriosis in pregnancy-case report”, Ginekol Pol, 85(4), pp 309 - 313 51 Biggerstaff G K (2014), “Improving Response to Foodborne Disease Outbreaks in the United States: Findings of the Foodborne Disease Centers for Outbreak Response Enhancement (FoodCORE), 2010-2012”, J Public Health Manag Pract 52 Bukvički D., Stojković D., Soković M., Vannini L., Montanari C., Pejin B., Savić A., Veljić M., Grujić S., Marin P D (2014), “Satureja horvatii essential oil: in vitro antimicrobial and antiradical properties and in situ control of Listeria monocytogenes in pork meat”, Meat Science, pp 1355 - 1360 53 Centers for Disease Control and Prevention (2006), “Human salmonellosis associated with animal-derived pet treats United States and Canada, 2005” W R Morb Mortal Wkly Rep, pp 702 - 705 54 Choi M J., Jackson K A., Medus C., Beal J., Rigdon C E., Cloyd T C., Forstner M J., Ball J., Bosch S., Bottichio L., Cantu V., Melka D C., Ishow W., Slette S., Irvin K., Wise M., Tarr C., Mahon B., Smith K E., Silk B J (2013), “Notes from the field: multistate outbreak of listeriosis linked to soft-ripened cheese-United States, 2013”, M M W R Morb Mortal Wkly Rep, 63(13), pp 294 - 295 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 72 55 Cielecka - Piontek J., Szymanowska - Powałowska D., Paczkowska M., Lysakowski P., Zalewski P., Garbacki P (2014), “Stability, compatibility and microbiological activity studies of meropenem-clavulanate potassium”, The Journal of Antibiotics (Tokyo) 56 Cox L A., Jr & Ricci P F (2008), “Causal regulations vs political will: why human zoonotic infections increase despite precautionary bans on animal antibiotics”, Environment Internation, 34(4), pp 459 - 475 57 Crim S M., Iwamoto M., Huang J Y., Griffin P M., Gilliss D., Cronquist A B., Cartter M., Tobin-D'Angelo M., Blythe D., Smith K., Lathrop S., Zansky S., Cieslak P R., Dunn J., Holt K G., Lance S., Tauxe R., Henao O L (2014), “Incidence and trends of infection with pathogens transmitted commonly through food Foodborne Diseases Active Surveillance Network, 10 U.S sites, 2006-2013”, M M W R Morb Mortal Wkly Rep, 63(15), pp 328 - 332 58 Cuiwei Zhao, Beilei Ge, Juan De Villena, Robert Sudler, Emily Yeh, Shaohua Zhao, David G White, David Wagner and Jianghong Meng (2001), “Prevalence of Campylobacter spp., Escherichia coli and Salmonella serovars in retail chicken, turkey, pork and beef from the Greater Washington, D.C., Area”, Environmental Microbiology, pp 5431 - 5436 59 Cynthia A Roberts (2001), The food safety information handbook, Greenwood Publishing Group, pp 116 - 118 60 Dan S D., Tăbăran A., Mihaiu L., Mihaiu M (2015), “Antibiotic susceptibility and prevalence of foodborne pathogens in poultry meat in Romania”, J Infect Dev Ctries, (1), pp 35 - 41 61 Donado-Godoy P., Byrne B A., León M., Castellanos R., Vanegas C., Coral A., Arevalo A., Clavijo V., Vargas M., Romero Zuñiga J J., Tafur M., PérezGutierrez E., Smith W A (2015), “Prevalence, resistance patterns, and risk factors for antimicrobial resistance in bacteria from retail chicken meat in Colombia”, J Food Prot, 78(4), pp 751 - 759 62 Elliot T Ryser Elmer H Marth (2007), Listeria, listeriosis and food safety, CRC Press Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 73 63 Ellin Doyle M (2001), “Virulence characteristics of Listeria monocytogenes”, FRI Briefings, pp - 64 Falkow S (1975), Plasmid which contribute to pathogenity In infection multile drug resistance Pion Ltd London 65 Fox Maggie (2009), Salmonella outbreak linked to peanut butter Yahoo News Fri Jan 66 Hyg J (Lond) (1934), Epidemiology and Infection, Journal list 67 Jamali H., Radmehr B., Ismail S (2014), “Prevalence and antimicrobial resistance of Listeria, Salmonella, and Yersinia species isolates in ducks and geese”, Poult Sci., 93(4), pp 1023 - 1030 68 Korsak N., Jacob B., Groven B., Etienne G., China B., Ghafir Y., Daube G (2003), “Salmonella contamination of pigs and pork in an integrated pig production system”, Journal of Food Protection, 66(7), pp 1126-1133 69 Lado B., Yousef A E (2007), Characteristics of Listeria monocytogenes important to food processors Ch In: Ryser ET, Marth EH (eds) Listeria, listeriosis and food safety, CRC Press Taylor & Francis Group, Boca Raton, pp 157 - 213 70 Le Bas C., Tran T H., Nguyen T T (2006), “Prevalence and epidemiology of Salmonella spp in small pig abattoirs of Hanoi, Vietnam”, Ann N Y Acad Sci, pp 269 - 272 71 Linke K., Rückerl I., Brugger K., Karpiskova R., Walland J., Muri-Klinger S., Tichy A., Wagner M., Stessl B (2014), “Reservoirs of listeria species in three environmental ecosystems”, Applied and Environmental Microbiology 72 Martín B., Perich M., Aymerich A., Gómez T (2014), D., Yangüela “Diversity and J., Rodríguez distribution A., Garriga of Listeria monocytogenes in meat processing plants”, Food Microbiol, pp 119 - 127 73 Meloni D., Piras F., Mureddu A., Fois F., Consolati S G., Lamon S., Mazzette R (2013), “Listeria monocytogenes in five Sardinian swine slaughterhouses: prevalence, serotype, and genotype characterization”, Journal of food protection Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 74 74 Mengesha D., Zewde B M., Toquin M T., Kleer J., Hildebrandt G., Gebreyes W A (2009), “Occurrence and distribution of Listeria monocytogenes and other Listeria species in ready-to-eat and raw meat products”, Berl Munch Tierarztl Wochenschr 75 Meyer C., Fredriksson-Ahomaa M., Sperner B., Märtlbauer E (2011), “Detection of Listeria monocytogenes in pork and beef using the VIDAS® LMO2 automated enzyme linked immunoassay method”, Meat Science, pp 594 596 76 Nimri L., Abu Al-Dahab F., Batchoun R (2014), “Foodborne bacterial pathogens recovered from contaminated shawarma meat in northern Jordan”, J Infect Dev Ctries., (11), pp 1407 - 1414 77 Nyachuba D G (2010), “Foodborne illness: is it on the rise?”, Nutrition Reviews, 68(5), pp 257 - 269 78 Ochiai Y., Yamada F., Batmunkh O., Mochizuki M., Takano T., Hondo R., Ueda F (2010), “Prevalence of Listeria monocytogenes in retailed meat in the Tokyo metropolitan area”, Journal of Food Protection, pp 1688 - 1693 79 Odwar J A., Kikuvi G., Kariuki J N., Kariuki S (2014), “A cross-sectional study on the microbiological quality and safety of raw chicken meats sold in Nairobi, Kenya”, BMC Res Notes, 10, pp 507:627 80 Ohshima C., Takahashi H., Phraephaisarn C., Vesaratchavest M., Keeratipibul S., Kuda T., Kimura B (2014), “Establishment of a Simple and Rapid Identification Method for Listeria spp by Using High-Resolution Melting Analysis, and Its Application in Food Industry”, PLoS One 81 Priyanka singh, Alka Prakash (2008), “Isolation of Escherichia coli, Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes from milk products sold under market conditions at agra region”, Acta agriculturae Slovenica, (92), pp 83 - 88 82 Quinn P J., Carter M E., Markey B K., Carter G R (1994), Clinical Veterinary Microbiology, Wolfe publishing Mosby-Year Book Europe Limited, pp 199 - 202 Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 75 83 Robertson K., Xanh A., Allen L., Ihry T., White P., Chen W S., Douris A., Levine J (2016), “Foodborne Outbreaks Reported to the U.S Food Safety and Inspection Service, Fiscal Years 2007 through 2012”, J Food Prot, 79(3), pp 442 - 447 84 Sabra A (2002), “Escherichia coli subtypes EPEC, ETEC, EAEC, EHEC, EIEC, and DAEC in acute diarrhea”, J Pediatr (Rio J), 78(1), pp - 85 Sanderfur P D., Peterson J W (1976), Neutralization of Salmonella toxininduced elongation of chinese-hanster-ovary cells cholerae antitoxin Ibid, V15, pp 972 - 988 86 Schoder D., Strauß A., Szakmary-Brändle K., Stessl B., Schlager S., Wagner M (2014), “Prevalence of major foodborne pathogens in food confiscated from air passenger luggage”, International Journal of Food Microbiology, pp 401 - 402 87 Shekarforoush S S., Basiri S., Ebrahimnejad H., Hosseinzadeh S (2015), “Effect of chitosan on spoilage bacteria, Escherichia coli and Listeria monocytogenes in cured chicken meat”, Int J Biol Macromol, 28 (76), pp 303 - 309 88 Siriken B., Türk H., Yildirim T., Durupinar B., Erol I (2015), “Prevalence and Characterization of Salmonella Isolated from Chicken Meat in Turkey”, J Food Sci 89 Sutherland P S., Miles D W., Laboyrie D A (2003), Listeria monocytogenes, Ch 13 In: Hocking AD (ed) Foodborne microorganisms of public health significance 6th ed, Australian Institute of Food Science and Technology (NSW Branch), Sydney, pp 381 - 443 90 Syne S M., Ramsubhag A., Adesiyun A A (2013), “Microbiological hazard analysis of ready-to-eat meats processed at a food plant in Trinidad, West Indies”, Infect Ecol Epidemiol 91 Vally H., Glass K., Ford L., Hall G., Kirk M D., Shadbolt C., Veitch M., Fullerton K E., Musto J., Becker N (2014), “Proportion of Illness Acquired by Foodborne Transmission for Nine Enteric Pathogens in Australia: An Expert Elicitation”, Foodborne Pathogens and Disease Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 76 92 Yu T., Jiang X., Zhou Q., Wu J., Wu Z (2014), “Antimicrobial resistance, class integrons, and horizontal transfer in Salmonella isolated from retail food in Henan, China”, J Infect Dev Ctries, 8(6), pp 705 - 711 93 Zarfel G., Galler H., Luxner J., Petternel C., Reinthaler F F., Haas D., Kittinger C., Grisold A J., Pless P., Feierl G (2014), “Multiresistant bacteria isolated from chicken meat in Austria”, Int J Environ Res Public Health, 11(12) 94 Wall and Aclark G D Roos, Lebaigue S., Douglas C (1998), Comprehensive outbreak survellence, The key to understanding the changing epidemiology of foodborne disease, pp 212 - 224 95 Walter Chaim David A Eschenbach (2014), “Specific bacterial infections: Listeria”, The international Federation of Gynecology and Obstetrics Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 77 PHỤ LỤC ẢNH Ảnh 1: Xử lý mẫu Ảnh 2: Cấy láng môi trường đặc hiệu Ảnh 3: Khuẩn lạc E coli môi trường đặc hiệu Brillance E.coli/Coliform selective Medium Ảnh 4: Khuẩn lạc Salmonella môi Ảnh 5: Thử phản ứng lysine âm tính trường rambach (dung dịch từ màu tím chuyển sang màu vàng) Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 78 Ảnh 6: Khuẩn lạc Salmonella môi Ảnh 7: Khuẩn lạc Salmonella môi trường MSRV trường XLT4 (Mod semi-solid rap vass) (Xylose Lactose Tergitol™ 4) Ảnh 8, 9: Vi khuẩn Salmonella môi trường kligler agar Ảnh 10: Phản ứng dung giải hồng cầu Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn 79 Ảnh 11: Khuẩn lạc L monocytogenes Ảnh 12: Khuẩn lạc L monocytogenes môi trường Palcam mơi trường Oxford Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN http://www.lrc.tnu.edu.vn