(Luận văn) đánh giá đa dạng di truyền một số giống sả việt nam

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM DƯƠNG HỮU TRƯỜNG Tên đề tài: ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN lu MỘT SỐ GIỐNG SẢ VIỆT NAM an va n KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Ngành/chun ngành: Cơng nghệ sinh học Khoa: Cơng nghệ sinh học cơng nghệ thực phẩm Khóa học: 2017 - 2021 Thái Nguyên – năm 2021 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM DƯƠNG HỮU TRƯỜNG Tên đề tài: ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN lu MỘT SỐ GIỐNG SẢ VIỆT NAM an va n KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo: Chính quy Ngành/chuyên ngành: Công nghệ sinh học Lớp: K49 - CNSH Khoa: Công nghệ sinh học công nghệ thực phẩm Khóa học: 2017 - 2021 Người hướng dẫn: TS Bùi Tri Thức Thái Nguyên – 2021 i LỜI CẢM ƠN Được sự đồng ý của Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ Sinh học và Công nghệ Thực phẩm, thời gian thực tập tốt nghiệp em đã thực hiện đề tài: “Đánh giá đa dạng di truyền số giống sả Việt Nam” Trước hết em xin gửi tới Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học và Công nghệ thực phẩm cùng các thầy cô giáo Khoa lời chúc sức khỏe lời cảm ơn sâu sắc, với sự bảo, quan tâm và đã tạo điều kiện thuận lợi cho em hoàn thành đề tài nghiên cứu này Đặc biệt em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy giáo TS Bùi Tri Thức, giảng viên khoa Công nghệ Sinh học và Công nghệ Thực phẩm đã bảo, quan tâm giúp đỡ và hướng dẫn em hồn thành tớt q trình thực hiện đề tài Đồng thời, em xin cảm ơn các giảng viên khoa Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm đã hướng dẫn tạo điều kiện tốt cho em suốt thời gian thực hiện đề tài tốt nghiệp lu Cuối cùng, em xin cảm ơn gia đình đã tạo điều kiện vật chất và là chỗ dựa an tinh thần cho em suốt thời gian thực tập, cảm ơn bạn bè đã hết lòng động viên, va giúp đỡ và đồng hành với śt thời gian qua n Trong q trình thực tập, làm báo cáo thực tập với điều kiện thời gian kinh nghiệm cịn hạn chế khơng thể tránh được sai sót Em mong nhận được sự bảo, đóng góp ý kiến của thầy bạn để em có điều kiện bổ sung, nâng cao ý thức của mình để đề tài được hồn thiện và phục vụ tớt công tác thực tế sau Sau cùng, em xin kính chúc q thầy, nhà trường, khoa Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm dồi sức khỏe, tiếp tục sứ mệnh cao đẹp của truyền đạt kiến thức cho hệ sau Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày… tháng ….năm 2021 Sinh viên thực Dương Hữu Trường ii DANH MỤC TỪ VÀ THUẬT NGỮ VIẾT TẮT Nghĩa đầy đủ từ, thuật ngữ Từ, thuật ngữ viết tắt (cả tiếng Anh tiếng Việt) RAPD Random Amplified Polymorphic DNA AFLP Amplified Fragment Length Polymorphism ISSR Inter simple sequence repeats SSLP Single Sequence Length Polymorphism Cs Cộng sự PCR Polymerase Chain Reaction NL Nhắc lại DNA Deoxyribonucleic acid CT Công thức lu an va n iii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thành phần hoá học tinh dầu sả Bảng 2.2.Thành phần hoạt tính sinh học sả .5 Bảng 3.1 Trình tự mời được sử dụng nghiên cứu 13 Bảng 3.2 Các thiết bị sử dụng nghiên cứu 14 Bảng 3.3 Các hoá chất sử dụng nghiên cứu .14 Bảng 3.4 Các mẫu sả nghiên cứu .16 Bảng 3.5 Thang điểm đánh giá màu sắc bẹ .17 Bảng 3.6 Tổng thời gian sử dụng phenol chloroform isoamyl alcohol .19 Bảng 3.7 Số lần sử dụng phenol chloroform isoamyl alcohol 20 Bảng 3.8 Thành phần PCR 20 Bảng 3.9 Chu trình phản ứng của RAPD 21 Bảng 4.1 Kết sưu tầm mẫu sả tại các địa phương .22 lu an Bảng 4.2 Kết nghiên cứu động thái tăng trưởng chiều cao mẫu sả 23 va Bảng 4.3 Kết nghiên cứu đặc điểm bẹ sả .24 n Bảng 4.4 Kết nghiên cứu hình thái 26 Bảng 4.5 Kết nghiên cứu tạo sinh khối mẫu sả 28 Bảng 4.6 Kết nghiên cứu hàm lượng tinh dầu tổng số của mẫu sả 29 Bảng 4.7 Tỷ lệ mẫu hiện DNA thực hiện thí nghiệm tổng thời gian sử dụng phenol chloroform isoamyl alcohol trình tách mẫu 30 Bảng 4.8 Tỷ lệ mẫu hiện DNA thực hiện thí nghiệm sớ lần sử dụng phenol chloroform isoamyl alcohol trình tách mẫu 31 iv DANH MỤC HÌNH Hình 4.1 Kết nghiên cứu động thái tăng trưởng chiều cao mẫu sả 23 Hình 4.2 Kết nghiên cứu đặc điểm bẹ sả 25 Hình 4.3 Kết nghiên cứu hình thái 27 Hình 4.4 Kết phương pháp tách chiết DNA tổng số từ mẫu sả và điện di gel 32 Hình 4.5 Kết điện di kiểm tra PCR với mẫu sả SAN 34 Hình 4.6 Kết điện di kiểm tra PCR với mẫu sả SHN 35 Hình 4.7 Kết điện di kiểm tra PCR với mẫu sả SĐL 36 Hình 4.8 Kết điện di kiểm tra PCR với mẫu sả SBS 37 Hình 4.9 Kết điện di kiểm tra PCR với mẫu sả SBD 38 Hình 4.10 Kết điện di kiểm tra PCR với mẫu sả SATT 39 Hình 4.11 Kết điện di kiểm tra PCR với mẫu sả STH 40 lu an Hình 4.12 Kết điện di kiểm tra PCR với mẫu sả SAX 41 va Hình 4.13 Sơ đồ hình mơ tả quan hệ di trùn của mẫu sả nghiên cứu 42 n v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC TỪ VÀ THUẬT NGỮ VIẾT TẮT ii DANH MỤC BẢNG iii DANH MỤC HÌNH .iv MỤC LỤC v Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu của đề tài 1.2.1 Mục tiêu tổng quát 1.2.2 Mục tiêu cụ thể 1.3.Ý nghĩa khoa học thực tiễn 1.3.1 Ý nghĩa khoa học của đề tài lu an 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn của đề tài va Phần TỔNG QUAN TÀI LIỆU n 2.1 Giới thiệu về sả 2.1.1 Đặc điểm sả 2.1.2 Phân bố 2.1.3 Phân loại 2.1.4 Giá trị của sả 2.2 Các kĩ thuật sinh học phân tử đánh giá đa dạng di truyền 2.2.1 Giới thiêụ sơ lược về kỹ thuật RAPD 2.2.2 Giới thiệu về kỹ thuật ISSR 2.2.3 Một số kĩ thuật khác 2.3 Tình hình nghiên cứu sả nước giới 2.3.1 Tình hình nước 2.3.2 Tình hình giới Phần ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .13 3.1 Đối tượng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 13 vi 3.1.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 13 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu 13 3.1.3 Thiết bị nghiên cứu 14 3.1.4 Hoá chất 14 3.1.5 Phạm vi, địa điểm thời gian nghiên cứu 15 3.2 Nội dung nghiên cứu 15 3.2.1 Sưu tầm mẫu sả tại Việt Nam .15 3.2.2 Nghiên cứu đặc điểm hình thái của mẫu sả Việt Nam .15 3.2.3 Nghiên cứu đa dạng di truyền kiểu gen mẫu sả Việt Nam 16 3.3 Phương pháp nghiên cứu 16 3.3.1 Sưu tầm mẫu sả tại Việt Nam .16 3.3.2 Nghiên cứu đặc điểm hình thái mẫu sả Việt Nam 17 3.4 Nghiên cứu đa dạng di truyền kiểu gen mẫu sả Việt Nam 18 3.4.1 Nội dung : Tối ưu quy trình tách DNA từ mẫu .18 lu an 3.4.2 Nội dung : Lựa chọn cặp mồi đánh giá đa dạng di truyền sả 20 va 3.5 Nội dung : Phương pháp PCR - RAPD và phương pháp xây dựng n phân loại 20 3.5.1 Phương pháp PCR - RAPD .20 3.5.2 Phương pháp xây dựng phân loại 21 3.6 Phương pháp xử lý số liệu 21 Phần KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN .22 4.1 Kết sưu tầm mẫu sả tại các địa phương 22 4.2 Kết nghiên cứu đặc điểm hình thái mẫu sả .22 4.2.1 Kết nghiên cứu động thái tăng trưởng chiều cao mẫu sả 22 4.2.2 Kết nghiên cứu đặc điểm thân giả của sả 24 4.2.3 Kết nghiên cứu hình thái 26 4.2.4 Kết nghiên cứu tạo sinh khối mẫu sả 28 4.3 Kết nghiên cứu hàm lượng tinh dầu tổng số của mẫu sả 29 4.4 Kết tối ưu quy trình tách DNA từ mẫu 30 vii 4.4.1 Kết ảnh hưởng thời gian sử dụng phenol chloroform isoamyl alcohol trình tách mẫu .30 4.4.2 Kết ảnh hưởng số lần sử dụng phenol chloroform isoamyl alcohol trình tách mẫu .31 4.4.3 Kết phương pháp tách chiết DNA tổng số từ mẫu sả và điện di gel 32 4.5 Kết lựa chọn cặp mồi đánh giá đa dạng di truyền sả 33 4.6 Kết phương pháp PCR - RAPD xây dựng phân loại 34 4.6.1 Kết phương pháp PCR - RAPD 34 4.6.2 Kết phương pháp xây dựng phân loại 41 Phần KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .43 5.1 Kết luận 43 5.2 Kiến nghị 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 lu an va n Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Cây Sả (Cymbopogon nardus Rendl) thuộc họ lúa (Poaceae) được trồng nhiều Việt Nam theo tính chất gia đình, giới phân bố tại Indonesia, Xrilanca, Ấn Độ, Trung Quốc Rễ toàn thân sả được sử dụng làm nguyên liệu nấu ăn và là một vị thuốc dân gian Tinh dầu sả được dùng một loại nguyên liệu phục vụ cho y học hiện đại, thành phần tạo nước hoa [6] Đối với người dân, lá và thân được dùng để nấu ăn Cây xả được dùng để xông hơi, lá sả dùng làm thuốc pha nước ́ng cho mát tiêu, củ xả có tác dụng thông tiểu tiện, mồ hôi, chữa cảm sốt [6] Đối với ngành công nghiệp y học, tinh dầu xả có cơng dụng đa dạng Tuy nhiên, loại sả thành phần hoạt chất của tinh dầu thay đổi có giá trị khác tinh dầu sả từ sả Cymbopogon nardus (L.) Rendl (sả Xrilanca) lu an Cymbopogon winterianus Jowitt (sả Java) có từ 20 đến 40% geraniola va citronellola, 40 đến 60% xitronellala Sả chanh Cymbopogon fexuosus Cymbopogon n citratus chứa từ 70 đến 80% xitral [6] Một số nghiên cứu dịch tế học đã chứng minh mợt sớ chất có sả có khả chớng lại được mợt sớ hoạt đợng chớng oxy hóa, tăng sinh, chớng viêm ngành cơng nghiệp mỹ phẩm [16], [21] Vì nhu cầu về tinh dầu sả giới khoảng 3.000 – 4.000 tấn/ năm đáp ứng đủ nhu cầu cho thị trường Trên giới giá trị của tinh dầu sả là 6,48 USD tương đương 149,688 đồng, tinh dầu sả chanh có giá 7,50 USD tương đương 173,250 đồng [6], [20] Thực tế, số lượng mẫu sả đa dạng và phong phú được phân bố rợng khắp Việt Nam Có mẫu sả đã được cơng bớ sử dụng phục vụ nhiều mục đích cho nhiều tinh dầu, làm th́c, thức ăn Nhưng, nhiều mẫu sả khác chưa được nghiên cứu cụ thể, thơng tin đặc điểm hình thái, sự đa dạng di truyền chưa được biết đến CT2-CT5 28.50 CT5-CT6 11.87 CT2-CT6 40.37 CT5-CT7 17.63 CT2-CT7 10.87 CT5-CT8 15.73 CT2-CT8 12.77 CT6-CT7 29.50 CT6-CT8 27.60 CT7-CT8 1.90 2.1 Xử lý số liệu số lượng bẹ SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 25 8.333333333 0.333333 SHN 28 9.333333333 0.333333 SĐL 29 9.666666667 0.333333 SBS 20 6.666666667 0.333333 SBD 23 7.666666667 0.333333 SATT 20 6.666666667 0.333333 STH 23 7.666666667 0.333333 SAX 25 8.333333333 0.333333 lu SAN an va 8.041666667 n ANOVA Source of Variation SS Between Groups 25.625 df MS F 3.660714286 10.98214 Within Groups 5.3333333 16 0.333333333 Total 30.958333 23 Total 364.1 26 CV% 7.17949 LSD0,05 0.99938 t0,01 sự sai khác các công thức 1.00 CT1-CT2 CT1-CT3 1.33 2.12 sd P-value F crit 4.55E05 2.657197 0.4714 CT3-CT4 3.00 1 CT3-CT5 2.00 CT1-CT4 1.67 CT3-CT6 3.00 CT1-CT5 0.67 CT3-CT7 2.00 CT1-CT6 1.67 CT3-CT8 1.33 CT1-CT7 0.67 CT4-CT5 1.00 CT1-CT8 0.00 CT4-CT6 0.00 CT2-CT3 0.33 CT4-CT7 1.00 CT2-CT4 2.67 CT4-CT8 1.67 CT2-CT5 1.67 CT5-CT6 1.00 CT2-CT6 2.67 CT5-CT7 0.00 CT2-CT7 1.67 CT5-CT8 0.67 CT2-CT8 1.00 CT6-CT7 1.00 CT6-CT8 1.67 CT7-CT8 0.67 2.2 Xử lý số liệu chiều dài thân giả Count Average 21.76666667 22.56666667 22.8 19.73333333 19.53333333 18.56666667 21.86666667 21.53333333 21.04583333 Total 67.31958 23 Total 364.1 26 CV% 4.8086 LSD0,05 1.7518 t0,01 df n SS 50.93292 16.38667 va ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups an 3 3 3 3 Sum 65.3 67.7 68.4 59.2 58.6 55.7 65.6 64.6 lu SUMMARY Groups SAN SHN SĐL SBS SBD SATT STH SAX MS 7.276130952 16 1.024166667 Variance 0.253333 0.723333 0.63 1.853333 1.003333 0.303333 0.303333 3.123333 F P-value F crit 7.10444 0.000596 2.657197 2.12 sd 0.8263 sự sai khác các công thức 0.80 CT1-CT2 CT3-CT4 3.07 CT1-CT3 1.03 CT3-CT5 3.27 CT1-CT4 2.03 CT3-CT6 4.23 CT1-CT5 2.23 CT3-CT7 0.93 CT1-CT6 3.20 CT3-CT8 1.27 CT1-CT7 0.10 CT4-CT5 0.20 CT1-CT8 0.23 CT4-CT6 1.17 CT2-CT3 0.23 CT4-CT7 2.13 CT2-CT4 2.83 CT4-CT8 1.80 CT2-CT5 3.03 CT5-CT6 0.97 CT2-CT6 4.00 CT5-CT7 2.33 CT2-CT7 0.70 CT5-CT8 2.00 CT2-CT8 1.03 CT6-CT7 3.30 CT6-CT8 2.97 CT7-CT8 2.3 Xử lý số liệu đường kính thân giả 0.33 lu SUMMARY Count an Groups Sum Average Variance va 4.1 1.366666667 0.003333 SHN 5.4 SĐL 6.8 2.266666667 0.043333 SBS 4.9 1.633333333 0.003333 SBD 4.6 1.533333333 0.013333 SATT 4.4 1.466666667 0.013333 STH 3.4 1.133333333 0.023333 SAX 4.9 1.633333333 0.003333 n SAN 1.8 0.04 1.604166667 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 2.342917 Within Groups 0.286667 df MS F 0.334702381 18.68106 16 0.017916667 P-value F crit 1.37E06 2.657197 Total 2.629583 23 Total 364.1 26 CV% 8.3441 LSD0,05 0.2317 t0,01 sự sai khác các công thức 0.43 CT1-CT2 2.12 sd 0.1093 CT3-CT4 0.63 0.90 CT3-CT5 0.73 CT1-CT4 0.27 CT3-CT6 0.80 CT1-CT5 0.17 CT3-CT7 1.13 CT1-CT6 0.10 CT3-CT8 0.63 CT1-CT7 0.23 CT4-CT5 0.10 CT1-CT8 0.27 CT4-CT6 0.17 CT2-CT3 0.47 CT4-CT7 0.50 CT2-CT4 0.17 CT4-CT8 0.00 CT2-CT5 0.27 CT5-CT6 0.07 CT2-CT6 0.33 CT5-CT7 0.40 CT2-CT7 0.67 CT5-CT8 0.10 CT2-CT8 0.17 CT6-CT7 0.33 CT6-CT8 0.17 CT7-CT8 0.50 lu CT1-CT3 an va n 2.4 Thang điểm màu sắc thân giả Thang điểm màu sắc bẹ Tím Xanh SAN SHN SĐL SBS SBD SATT STH SAX Xử lý số liệu hình thái 3.1 Xử lý số liệu số SUMMARY Groups Count Sum Average Variance SAN 23 7.666666667 0.333333 SHN 28 9.333333333 0.333333 SĐL 27 SBS 19 6.333333333 0.333333 SBD 19 6.333333333 1.333333 SATT 17 5.666666667 0.333333 STH 22 7.333333333 0.333333 SAX 23 7.666666667 0.333333 7.416666667 ANOVA Source of Variation SS df MS F 35.16667 Within Groups 8.666667 16 0.541666667 Total 43.83333 23 Total 364.1 26 CV% 9.9233 an va 1.274 t0,01 sự sai khác các công thức 1.67 CT1-CT2 n LSD0,05 F crit 5.023809524 9.274725 0.000128 2.657197 lu Between Groups P-value 2.12 sd 0.6009 CT3-CT4 2.67 CT1-CT3 1.33 CT3-CT5 2.67 CT1-CT4 1.33 CT3-CT6 3.33 CT1-CT5 1.33 CT3-CT7 1.67 CT1-CT6 2.00 CT3-CT8 1.33 CT1-CT7 0.33 CT4-CT5 0.00 CT1-CT8 0.00 CT4-CT6 0.67 CT2-CT3 0.33 CT4-CT7 1.00 CT2-CT4 3.00 CT4-CT8 1.33 CT2-CT5 3.00 CT5-CT6 0.67 CT2-CT6 3.67 CT5-CT7 1.00 CT2-CT7 2.00 CT5-CT8 1.33 CT2-CT8 1.67 CT6-CT7 1.67 CT6-CT8 2.00 CT7-CT8 3.2 Xử lý số liệu chiều dài phiến 0.33 SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 225.7 75.23333333 5.773333 SHN 310.4 103.4666667 14.60333 SĐL 303.7 101.2333333 27.58333 SBS 289.9 96.63333333 69.00333 SBD 223.6 74.53333333 31.57333 SATT 186.2 62.06666667 18.80333 STH 276.5 92.16666667 30.33333 SAX 269.8 89.93333333 61.40333 lu SAN an va n 86.90833333 ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 4551.945 Within Groups 518.1533 16 32.38458333 Total 5070.098 23 Total 364.1 26 CV% 6.548 LSD0,05 9.8505 t0,01 P-value F crit 650.2778571 20.07986 8.33E-07 2.657197 2.12 sd 4.6465 sự sai khác công thức 28.23 CT3-CT4 4.60 CT1-CT3 26.00 CT3-CT5 26.70 CT1-CT4 21.40 CT3-CT6 39.17 CT1-CT5 0.70 CT3-CT7 9.07 CT1-CT6 13.17 CT3-CT8 11.30 CT1-CT7 16.93 CT4-CT5 22.10 CT1-CT8 14.70 CT4-CT6 34.57 CT2-CT3 2.23 CT4-CT7 4.47 CT2-CT4 6.83 CT4-CT8 6.70 CT2-CT5 28.93 CT5-CT6 12.47 CT2-CT6 41.40 CT5-CT7 17.63 CT2-CT7 11.30 CT5-CT8 15.40 CT2-CT8 13.53 CT6-CT7 30.10 CT6-CT8 27.87 an 2.23 lu CT1-CT2 CT7-CT8 va 3.3 Xử lý số liệu chiều rộng phiến n Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average 2.1 Variance SAN 6.3 SHN 4.4 1.466666667 0.023333 SĐL 4.7 1.566666667 0.063333 SBS 4.1 1.366666667 0.023333 SBD 4.3 1.433333333 0.023333 SATT 1.333333333 0.023333 STH 6.7 2.233333333 0.023333 SAX 2.333333333 0.043333 1.729166667 ANOVA 0.01 Source of Variation SS Between Groups 3.682917 Within Groups 0.466667 16 0.029166667 Total 4.149583 23 Total 364.1 26 CV% 9.8766 LSD0,05 0.2956 t0,01 df MS F 0.526130952 18.03878 sự sai khác các công thức 0.63 CT1-CT2 2.12 sd P-value F crit 1.75E06 2.657197 0.1394 CT3-CT4 0.20 0.53 CT3-CT5 0.13 CT1-CT4 0.73 CT3-CT6 0.23 CT1-CT5 0.67 CT3-CT7 0.67 CT1-CT6 0.77 CT3-CT8 0.77 CT1-CT7 0.13 CT4-CT5 0.07 CT1-CT8 0.23 CT4-CT6 0.03 CT2-CT3 0.10 CT4-CT7 0.87 CT2-CT4 0.10 CT4-CT8 0.97 CT2-CT5 0.03 CT5-CT6 0.10 CT2-CT6 0.13 CT5-CT7 0.80 CT2-CT7 0.77 CT5-CT8 0.90 CT2-CT8 0.87 CT6-CT7 0.90 CT6-CT8 1.00 CT7-CT8 0.10 lu CT1-CT3 an va n Xử lý số liệu tạo sinh khối SUMMARY Groups Count Sum Average Variance SAN 958 319.3333333 797.1633 SHN 1549 516.3333333 2103.023 SĐL 1234 411.3333333 1387.743 SBS 640 213.3333333 431.5433 SBD 782 260.6666667 25.01333 SATT 634 211.3333333 109.0233 STH 1249 416.3333333 1506.093 SAX 1265 421.6666667 3405.963 346.2916667 ANOVA Source of Variation SS df MS Between Groups 263045.6 Within Groups 19531.13 16 Total 282576.8 23 Total 364.1 26 CV% 10.089 LSD0,05 60.478 t0,01 37577.94643 30.78404 P-value F crit 3.95E08 2.657197 1220.695833 2.12 sd 28.527 lu an sự sai khác các công thức 197.00 CT1-CT2 F CT3-CT4 va 198.00 150.67 92.00 CT3-CT5 CT1-CT4 106.00 CT3-CT6 200.00 CT1-CT5 58.67 CT3-CT7 5.00 CT1-CT6 108.00 CT3-CT8 10.33 CT1-CT7 97.00 CT4-CT5 47.33 CT1-CT8 102.33 CT4-CT6 2.00 CT2-CT3 105.00 CT4-CT7 203.00 CT2-CT4 303.00 CT4-CT8 208.33 CT2-CT5 255.67 CT5-CT6 49.33 CT2-CT6 305.00 CT5-CT7 155.67 CT2-CT7 100.00 CT5-CT8 161.00 CT2-CT8 94.67 CT6-CT7 205.00 CT6-CT8 210.33 5.33 n CT1-CT3 CT7-CT8 Xử lý số liệu hàm lượng tinh dầu tổng số SUMMARY Groups Count Sum Average Variance SAN 2065 688.3333333 108.33333 SHN 1495 498.3333333 358.33333 SĐL 1565 521.6666667 58.333333 SBS 1415 471.6666667 108.33333 SBD 1375 458.3333333 108.33333 SATT 1295 431.6666667 108.33333 STH 2105 701.6666667 108.33333 SAX 2060 686.6666667 58.333333 557.2916667 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 277215.6 Within Groups 2033.333 df MS F 39602.23214 311.62412 P-value 6.9E-16 2.657197 16 127.0833333 Total 364.1 26 CV% 2.0228 LSD0,05 19.513 t0,01 va 23 an 279249 lu Total n sự sai khác các công thức 190.00 CT1-CT2 2.12 sd F crit 9.2045 CT3-CT4 50.00 CT1-CT3 166.67 CT3-CT5 63.33 CT1-CT4 216.67 CT3-CT6 90.00 CT1-CT5 230.00 CT3-CT7 180.00 CT1-CT6 256.67 CT3-CT8 165.00 CT1-CT7 13.33 CT4-CT5 13.33 CT1-CT8 1.67 CT4-CT6 40.00 CT2-CT3 23.33 CT4-CT7 230.00 CT2-CT4 26.67 CT4-CT8 215.00 CT2-CT5 40.00 CT5-CT6 26.67 CT2-CT6 66.67 CT5-CT7 243.33 CT2-CT7 203.33 CT2-CT8 188.33 CT5-CT8 228.33 1 CT6-CT7 270.00 CT6-CT8 255.00 15.00 CT7-CT8 6.1 Xử lý thời gian sử dụng phenol chloroform isoamyl alcohol SUMMARY Groups Count Sum Average Variance CT1 0 CT2 11 3.666666667 0.333333 CT3 19 6.333333333 0.333333 CT4 22 7.333333333 0.333333 4.333333333 ANOVA Source of Variation df MS F 128.8889 96.666667 32.22222222 an lu Between Groups SS Total 98.666667 11 Total 121.73333 14 CV% 11.5385 LSD0,05 0.86549 t0,01 Within Groups P-value 4.12E07 0.25 va n sự sai khác các công thức 3.67 CT1-CT2 2.12 sd CT1-CT3 6.33 CT1-CT4 7.33 CT2-CT3 2.67 CT2-CT4 3.67 1.00 CT3-CT4 6.2 Xử lý số lần sử dụng phenol chloroform isoamyl alcohol SUMMARY 0.4082 F crit 4.066181 Groups Count Sum Average Variance CT1 0 CT2 14 4.666666667 0.333333 CT3 22 7.333333333 0.333333 CT4 23 7.666666667 0.333333 4.916666667 ANOVA Source of Variation Between Groups SS df 112.91667 Within Groups MS F 37.63888889 150.5556 Total 114.91667 11 Total 121.73333 14 CV% 10.1695 LSD0,05 0.86549 t0,01 0.25 2.12 sd lu an CT1-CT3 7.33 CT1-CT4 7.67 CT2-CT3 2.67 CT2-CT4 3.00 CT3-CT4 0.33 n va sự sai khác các công thức 4.67 CT1-CT2 P-value F crit 2.24E07 4.066181 0.4082 PHỤ LỤC 99 SAN SHN SĐL SBD va 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 0 n 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 an 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 SBS lu 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 SATT 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 STH 0 0 0 0 0 1 0 0 0 1 1 0 0 0 0 0 0 0 SAX 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 va 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 n 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 an 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 1 1 0 0 0 0 1 lu 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 1 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 XÁC NHẬN ĐÃ SỬA CHỮA THEO GÓP Ý CỦA HỘI ĐỒNG Thái Nguyên ngày… tháng….năm… Người hướng dẫn (chữ ký ghi rõ họ tên) chữ ký ghi rõ họ tên) lu Người nhận xét phản biện an va n