Tách chiết hợp chất ecdysteroid từ thông đỏ taxus wallichiana và thử nghiệm khả năng gây lột xác trên cua scylla paramamosain

ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CHƢƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Tách chiết hợp chất ecdysteroid từ thông đỏ (Taxus wallichiana) thử nghiệm khả gây lột xác cua (Scylla paramamosain) Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Trung Tâm Sâm Dƣợc Liệu Tp.HCM Chủ nhiệm nhiệm vụ: Th.S Bùi Thế Vinh Thành phố Hồ Chí Minh - 2019 ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CHƢƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ Tách chiết hợp chất ecdysteroid từ thông đỏ (Taxus wallichiana) thử nghiệm khả gây lột xác cua (Scylla paramamosain) (Đã chỉnh sửa theo kết luận Hội đồng nghiệm thu ngày 8/05/2019) Chủ nhiệm nhiệm vụ: (ký tên) Bùi Thế Vinh Cơ quan chủ trì nhiệm vụ (ký tên đóng dấu) Thành phố Hồ Chí Minh - 2019 TRUNG TÂM SÂM VÀ DƢỢC LIỆU TP HCM Nghiên cứu triển khai CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc ., ngày tháng năm 200 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KH&CN I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu khả gây lột xác cua (scylla paramamosain) hợp chất ecdysteroid chiết xuất từ thông đỏ Thuộc: Chƣơng trình/lĩnh vực (tên chương trình/lĩnh vực): Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Bùi Thế Vinh Năm sinh: 1984 Học vị: Thạc sĩ Chức danh khoa học: Nam/Nữ: Nam Chuyên ngành: Hóa sinh Năm đạt học vị: 2010 Chuyên ngành: Năm đƣợc phong chức danh: Chức vụ (nếu có): Phó trƣởng mơn Tên quan công tác: Trung tâm Sâm Dƣợc liệu Tp HCM Địa quan: 41 Đinh Tiên Hoàng, Q1, Tp HCM Điện thoại quan: 38292646 Fax: 38292646 Địa nhà riêng: 011 lơ C, Thanh Đa, Q Bình Thạnh, TPHCM Điện thoại nhà riêng: ĐTDĐ:0918091864 E-mail: buithe_vinh@yahoo.com.vn Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Sâm Dƣợc liệu Tp HCM Điện thoại: 38292646 Fax: 38292646 E-mail: vinaginseng@hcm.fpt.vn Website: Địa chỉ: 41 Đinh Tiên Hoàng, Q.1, Tp HCM Họ tên thủ trƣởng tổ chức: Lê Văn Minh Số tài khoản: 3713.0.1057304.00000 Tại kho bạc nhà nƣớc, Q1, Tp HCM Tên quan chủ quản đề tài: Trung tâm Sâm Dƣợc liệu Tp HCM II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng ký kết từ tháng 05 năm 2017đến tháng 05 năm 2019 - Thực tế thực hiện: từ tháng 05 năm 2017 đến tháng 05 năm 2019 - Đƣợc gia hạn (nếu có): - Lần từ tháng… năm… đến tháng… năm… - Lần … Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 690 triệu đồng, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học: 690 triệu đồng + Kinh phí từ nguồn khác: ……………….tr.đ b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Thực tế đạt Theo kế hoạch Ghi đề Thời gian Kinh phí Thời gian Kinh phí (Số (Tháng, (Tr.đ) (Tháng, năm) (Tr.đ) tốn) nghị năm) 5/2017 345 5/2017 345 5/2018 269 03/2019 sử dụng … c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đối với đề tài: Đơn vị tính: Triệu đồng S TT khoản chi T Trả công lao động (khoa học, Thực tế đạt Theo kế hoạch Nội dung Tổng NSKH Nguồn khác 241,5281 241,5281 Tổng NSKH Nguồn khác phổ thông) Nguyên, vật liệu, 388,2219 388,2219 lƣợng Thiết bị, máy móc Xây dựng, sửa chữa nhỏ Chi khác Tổng cộng 60,250 60,250 690 690 - Lý thay đổi (nếu có): Các văn hành trình thực đề tài/dự án: (Liệt kê định, văn quan quản lý từ cơng đoạn xét duyệt, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực có); văn tổ chức chủ trì nhiệm vụ (đơn, kiến nghị điều chỉnh có) S Số Số, thời gian ban T hành văn Tên văn Ghi TT 10/05/2017 Hợp đồng thực nhiệm vụ nghiên cứu khoa học công nghệ số 59/2017/HĐ-SKHCN 10/05/2017 Quyết định việc phê duyệt nhiệm vụ khoa học công nghệ số 313/ QĐ- SKHCN … Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: (Ngƣời tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, không 10 ngƣời kể chủ nhiệm) TT Tên cá nhân S đăng ký theo Tên cá nhân Thuyết minh Bùi Thế Vinh tham gia thực Bùi Thế Vinh Sản Nội dung tham gia Điều phối chung nghệ chiết tách ecdysteroid βecdysone kỹ thuật truyền thống Nghiên cứu chế tạo sản phẩm Trần Ngọc Hùng Nghiên cứu công nghệ chiết tách ecdysteroid βecdysone kỹ thuật truyền thống Võ Văn Phẳng Võ Văn Phẳng Thử nghiệm khả kích thích lột xác cua chế phẩm ecdysteroid Nguyễn Nhƣ Nguyễn Văn Trí Nhứt Xây dựng quy trình đánh giá chất lƣợng sản phẩm Lâm Bích Thảo Lâm Bích Thảo Ghi chủ yếu chú* đạt Nghiên cứu công Trần Ngọc Hùng phẩm Thử nghiệm khả kích thích lột xác cua chế phẩm ecdysteroid Cao Ngọc Giang Cao Ngọc Giang Tham gia hỗ trợ thực nội dung - Lý thay đổi ( có): Tình hình hợp tác quốc tế: TT Theo kế hoạch Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, S địa điểm, tên tổ chức hợp tác, (Nội dung, thời gian, kinh phí, số đồn, số lượng người tham số đoàn, số lượng người tham gia ) gia ) địa điểm, tên tổ chức hợp tác, Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: TT Thực tế đạt Theo kế hoạch S (Nội dung, thời gian, kinh phí, (Nội dung, thời gian, địa điểm ) kinh phí, địa điểm ) - Lý thay đổi (nếu có): Ghi chú* Tóm tắt nội dung, cơng việc chủ yếu: (Nêu mục 15 thuyết minh, không bao gồm: Hội thảo khoa học, điều tra khảo sát nước nước ngồi) Thời gian T TT Các nội dung, cơng việc (Bắt đầu, kết thúc Người, chủ yếu - tháng … năm) quan (Các mốc đánh giá chủ yếu) Theo kế Thực tế đạt hoạch đƣợc Nội dung 1: Chiết tách, tinh 05-09/2017 β-ecdysone từ dịch chiết 05-09/2017 thực Bùi Thế Vinh, Trung tâm Sâm vả Dƣợc liệu Nội dung 2: Nghiên cứu quy 09-12/2017 trình chiết xuất ecdysteroid chiết 500 g cao ecdysteroid bán thành phẩm quy mô pilot 09-12/2017 Nội dung 3: Nghiên cứu phối 01-04/2018 trộn chế phẩm chứa ecdysteroid bổ sung vào thức ăn cho cua 01-04/2018 Nội dung 4: Xây dựng tiêu 04-06/2018 chuẩn sở kiểm nghiệm cao bán thành phẩm chế phẩm phối trộn 04-07/2018 Nội dung 5: Khảo sát hoạt tính 07-12/2018 kích thích lột xác cua 08/2018 - Lý thay đổi (nếu có): Trần Ngọc Hùng Nguyễn Văn Trí Nguyễn Văn Trí, Nguyễn Nhƣ Nhứt 04/2019 – Võ Phẳng Văn III SẢN PHẨM KH&CN CỦA NHIỆM VỤ Sản phẩm KH&CN tạo ra: a) Sản phẩm Dạng I: TT Tên sản phẩm S tiêu chất lượng chủ yếu Cao Đơn Số lượng vị đo chiết gram 500 gam Theo kế Thực tế hoạch đạt 500 500 ecdysteroid β-ecdysone mg Đạt ≥ 95% tinh 5 khiết - Lý thay đổi (nếu có): b) Sản phẩm Dạng II: Yêu cầu khoa học S TT Tên sản phẩm cần đạt Theo kế hoạch Ghi Thực tế đạt đƣợc Quy trình cơng nghệ chiết Đơn giản, hiệu Quy trình chiết tách ecdysteroid quy mô quả, thân thện tách thu nhận 20g/mẻ môi trƣờng ecdysreroid quy mô 20 g cao/mẻ Tiêu chuẩn sở kiểm Đơn giản, Tiêu chuẩn nghiệm nguyên liệu, cao xác, độ sở bán thành phẩm chế nhạy cao nghiệm phẩm chứa ecdysteroid bán kiểm cao thành phẩm chế phẩm chứa ecdysteroid Đăng ký sở hữu trí tuệ hay Đạt theo quy giải pháp hữu ích định cục sở hữu trí tuệ Việt Nam - Lý thay đổi (nếu có): c) Sản phẩm Dạng III: T TT Tên sản phẩm Bài báo Yêu cầu khoa học Số lượng, nơi cần đạt công bố Theo Thực tế (Tạp chí, nhà kế hoạch đạt đƣợc xuất bản) Đã gửi đăng Tạp 1-2 bài chí chuyên ngành - Lý thay đổi (nếu có): d) Kết đào tạo: T Cấp đào tạo, Chuyên ngành đào tạo TT Đại học Thạc sỹ Tiến sỹ - Lý thay đổi (nếu có): Số lượng Theo kế hoạch 2 Ghi Thực tế đạt (Thời gian kết đƣợc thúc) TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt [1] Nguyễn Thị Thanh Bình, Phùng Thị Bích Thủy, Nguyễn Thành Minh, Mai Văn Trì, Nguyễn Văn Hùng (2000), Kết thu nhận ecdysteroid ứng dụng sản xuất tơ kén, Báo cáo khoa học Hội nghị sinh học quốc gia: Những vấn đề nghiên cứu sinh học, Năm 2000 [2] Võ Văn Chi(1999) Từ điển thuốc Việt Nam NXB Y học [3] Trần Ngọc Hải, Nguyễn Thanh Phƣơng, Nguyễn Anh Tuấn, Phạm Minh Đức, (2006), Nuôi cua lột (Scylla sp.) hệ thống tuần hoàn với loại thức ăn mật độ khác [4] Nguyễn Đức Tố Lƣu, Philip Ian Thomas(2004) Cây kim Việt Nam NXB Thế Giới [5]2 Đồn Qn, (2012), Ni ghẹ lột thƣơng phẩm, Bài báo tạp chí Thủy sản Việt Nam [6] Lê Xuân Tùng, Trần Văn Tiến(1999) Thông tin khoa học công nghệ Lâm Đồng Trung tâm Nghiên cứu lâm sinh Lâm Đồng [7] Nguyễn Thị Bích Thủy, (2003), Nghiên cứu phƣơng pháp kích thích đồng loạt ghẹ xanh (Portunus pelagicus) thƣơng phẩm, Đề nghiên cứu cấp Bộ, Viện Nghiên cứu Nuôi trồng thủy sản III Nha Trang Tài liệu tiếng nƣớc [8] Andras Simon, Attila Vanyolos, Zoltan Beni, Miklos Dekany, Gabor Toth, Maria Bathori, (2001), Ecdysteroids from Polypodium vulgare L., Steroids 76 (2011), page 1419-1424 [9] Bandara, B.M.A., Jayasinghe, L., Karunaratne, V., Wannigama, G.P., Bokel, M., Kraus, W., Sotheeswaran 1989 Ecdysterone from stem of Diploclicia glaucescens Phytochemistry [10] Bjarne Styrishave, Torben Lund and Ole Andersen, (2008), Ecdysteroid in female shore crabs Carcinus maenas during the moulting cycle and ooctyte development, Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom, 2008, 88(3), page 575–581 64 [11] Dipankar Ghosh, K S Laddha, (2006), Extraction and monitoring of phytoecdysteroid through HPLC, Journal of Chromatographic Science, Vol 44, 01/2006, page 22-26 [12] Ernest S Chang, (1993), Comparative endocrinology of molting and reproduction: insects and crustaceans, Annu Rev Entomo1 38 (1993), page 161180 [13] Gene Bruno, (2001), 20-hydroxyecdysone: the pro-anabolic, plant steroid, Huntington College of Health Science [14] GM Cragg and DJ Newman(2005) Plants as a Source of Anti-Cancer Agents Journal of Ethnopharmacology [15] Hampshire, R., Horn., (1966), Structure of crustecdysone, a crustacean moulting hormone Chem Commun, page 37-38 [16] H Rufaie, Munshi, NA, Sharma, RK, Ganie, NA and Malik, GN(2012) Effect of phytoecdysteroid ( β -ecdysone) on synchronization of maturation in silkworm bombyx moril International Journal of Advanced Biological Research (IJABR) [17] Kizelsztein P, et al (2009) 20-Hydroxyecdysone decreases weight and hyperglycemia in a diet-induced obesity mice model Am J Physiol Endocrinol Metab [18] Kyung Hwang Boo, Doseung Lee, Gyeong Lyong Jeon, Seung Hee Ko, Somi K Cho, Jae Hoon Kim, Se Pill Park, (2010), Distribution and biosynthesis of 20Hydroxyecdysone in Plant of Achyranthes japonica Nakai, Biosci Biotachnol Biochem, 74(11), page 2226 – 2231 [19] Lafont R., Dinan L., (2003), Practical uses for ecdysteroids in mammals including humans: and update Journal of Insect Science 3:7(2003) [20] Laurence Dinan, (2001), Phytoecdysteroids: biological aspects, Phytochemistry 57, page 325–339 [21] Matsuda H, Kawaba T, Yamamoto Y(1970) Pharmacological studies of insect metamorphotic steroids Nihon Yakurigaku Zasshi [22] Maria Bathori, Alajos Kalman, Gyula Argay, Hba Kalasz, (2000), The analysis and crystallography characterization of 20-Hydroxyecdysone, Current Medical Chemistry 2000, 7, page 1305-1312 65 [23] M.N Azra , J Safiah , A.B Abol-Munafi and M Ikhwanuddin, Effects of 20Hydroxyecdysone on Early Larval Stages of Blue Swimming Crab’s, Portunus pelagicus (Linnaeus, 1758), Institute of Tropical Aquaculture, Faculty of Fisheries and AquaIndustries, Universiti Malaysia Terengganu, KualaTerengganu, Terengganu, Malaysia [24] Mansury M.A et al, (2010), A review of the metabolism enhancing phytoecdysteroids with optimization of its extraction and purication process Jounal of Global Pharma Technology Vol.2 Page 1-7 [25] Nguyen Anh Tuan Tran Ngoc Hai, 1997 Culture mud crab scylla serrata in the Mekong Delta, Vietnam Paper presented at the First International Conference, Kuala Terrenganu, Malaysia [26] Parr MK1, et al(2014) Estrogen receptor beta is involved in skeletal muscle hypertrophy induced by the phytoecdysteroid ecdysterone Mol Nutr Food Res [27] Zia H Rufaie, Munshi, Sharma, R K Khursheed Ahmad, Malik, G N and Raja, (2011), Occurrence of insect moulting hormone (β-ecdysone) in some locally available plants, T.A.I.J.A.B.R, Vol.1(1) 2011, page 104 – 107 [28] Yoshida, T., Otaka, T., Uchiyama, S (1971) Effect of ecdysterone on hyperglycemia in experimental animals Biochemical Pharmacology 66 Phụ lục Phổ 1H- NMR Phổ 1H- NMN ecdysone phân đoạn V 67 Phụ lục Phổ 13C- NMR Phổ 13C- NMR ecdysone phân đoạn V Phụ lục Phổ 1H – 1H COSY Phổ 1H – 1H COSYcủa ecdysone phân đoạn V Phụ lục Phổ HMQC Phổ HMQC ecdysone phân đoạn V Phụ lục Phổ HMBC Phổ HMBC ecdysone phân đoạnV Phụ lục 6: Tiêu chuẩn sở cao nguyên liệu thông đỏ STT Phƣơng pháp thực Chỉ tiêu Độ ẩm Độ tro TCCS DĐVN V phụ lục 9.6