Thông tin tài liệu
Bộ giáo dục đào tạo đại học quốc gia hà nội báo cáo tổng kết đề tài kh&cn cấp nhà nớc Nghiên cứu chất có hoạt tính sinh học từ nấm Linh chi đa niên, nấm đa niên góp phần phòng chống điều trị số bệnh ung th, tim mạch tiết niệu Chủ trì đề tài: GS TSKH Trịnh Tam Kiệt 7053 26/12/2008 hà nội - 2008 Báo cáo tóm tắt Tên đề tài: " Nghiên cứu chất có hoạt tính sinh học từ nấm Linh chi đa niên, nấm đa niên góp phần phòng chống điều trị số bệnh ung th, tim mạch tiết niệu" Mà số: KHDA Chủ trì đề tài: GS TSKH Trịnh Tam Kiệt Danh sách ngời thực STT Họ tên Chức vụ GS TSKH Trịnh Tam Kiệt Chủ trì đề tài GS TS Lê Đình Lơng TS Đàm Bạch Dơng CN Hoàng Văn Vinh CN Vũ Thị Kim Ngân Ths Trần Thị Lan TS Ngô Anh Chủ trì đề tài nhánh Cán bé NC C¸n bé NC C¸n bé NC C¸n bé NC Cán NC PGS TS Lê Xuân Thám Cán NC 10 11 Ths Tạ Bích Thuận Ths Đoàn Văn Vệ CN Trịnh Tam Bảo Cán NC Cán NC Cán NC Cơ quan TTCNSH §HQGHN nt nt nt nt nt §H HuÕ TT Sinh học phóng xạ ĐH KHTN nt nt Mục tiêu nội dung nghiên cứu 4.1 Mục tiêu - Xác định tên khoa học nấm Linh chi đa niên nấm đa niên có khả dùng làm dợc liệu - Xác định số nhóm chất có hoạt tính sinh học nấm Linh chi đa niên nấm đa niên dự kiến sử dụng liệu pháp nấm góp phần tăng cờng khả miễn dịch phòng chống ung th, điều trị bênh tim mạch, tiết niệu bảo vệ sức khoẻ cộng đồng 4.2 Néi dung - TiÕn hµnh thu mÉu nÊm Linh chi đa niên nấm đa niên số vùng sinh thái Việt Nam biên giới Trung Quốc, Lào, Campuchia Định loại loài nấm thu đợc đặc điểm hình thái sinh học phân tử số loài quan trọng - Phân lập khiết giống gốc nấm để bảo tồn quỹ gen Xác định khả thu nhận sinh khối nấm để cung cấp nguyên liệu nấm ổn định - Tách chiết, sàng lọc, nghiên cứu số hợp chất tự nhiên số chất có hoạt tính sinh häc chÝnh ë mét sè chđng nÊm q hiÕm X¸c định cấu trúc vài chất quan trọng - Nghiên cứu khảo nghiệm tác dụng nấm đa niên liệu pháp nấm góp phần tăng cờng khả miễn dịch phòng chống ung th, điều trị bệnh tim mạch tiết niệu Các kết đạt đợc - Nghiên cứu xác định loài nấm đa niên cđa ViƯt Nam thc c¸c hä Ganodermataceae (2 chi, 13 loµi); Hymenochaetaceae (3 chi, 24 loµi); Coriolaceae ( chi, 15 loài) Các đặc điểm hình thái hiển vi số loài quan trọng đà đợc mô tả - Xác định đợc quy trình tách chiết ADN từ nấm Linh chi đơn niên Đà nghiên cứu sử dụng enzyme giới hạn cắt gen Mn SOD để phân loại nhận dạng nấm linh chi đơn niên nấm linh chi đa niên Gau - Đà nghiên cứu mọc hình thành thể chủng nấm đa niên Toh, E1, H1, Gs C1 Sự hình thành bảo tử vô tính nh thể chủng đà đợc mô tả - Các nhóm chất có hoạt tính sinh học chủng E1, Toh, H1, C1, N1 đà đợc nghiên cứu phơng pháp sắc kí cho thấy chúng giàu chất có hoạt tính sinh học - Tất các dịch chiết chủng nấm đa niên nh hỗn hợp chúng không gây độc dòng tế bào đẫ thử nghiệm Sau đợc xử lí với dịch chiết nớc cồn đà quan sát thấy ức chế trình tăng sinh tế bào ung th phụ thuộc vào nồng độ Việc ứng dụng dịch chiết nấm cho bệnh nhân tự nguyện bớc đầu đà cho kết khả quan - Góp phần đào tạo nghiên cứu sinh cử nhân khoa học tài theo hớng nghiên cứu đề tài - Đà có 02 báo cáo Hội nghị quốc tế, 03 báo cáo Hội nghị quốc gia 07 báo đăng Tạp chí chuyên ngành Tình hình kinh phí - Kinh phí đợc cấp: 600 triệu đồng - Kinh phí đà sử dụng: 600 triệu đồng Trung tâm Công nghệ Sinh học Chủ nhiệm Đề tài Giám đốc TS Dơng Văn Hợp GS TSKH Trịnh Tam Kiệt Cơ quan chủ trì đề tài Đại học Quốc gia Hà Nội Summary The title project: Study of perennial Ganoderma, polypores mushroom, their main bioactive compounds for health protection and pufification recombinant Taq polymerase for biotechnological research Code number: KHDA Prject Coordinator: Prof Dr Sc Trinh tam kiet Project members: - Prof Dr Sc Trinh Tam Kiet - Center of Biotechnology, VNU - Prof Dr Le Dinh Luong - Center of Biotechnology, VNU - Dr Dam Bach Duong - Center of Biotechnology, VNU - BA Hoang Van Vinh - Center of Biotechnology, VNU - BA Nguyen Thi Kim Ngan - Center of Biotechnology, VNU - BA Trinh Thi Tam Bao - Center of Biotechnology, VNU - BA Nguyen Xuan Hung - Center of Biotechnology, VNU - MSC Tran Thi Lan - Center of Biotechnology, VNU - MSC Doan Van Ve – College of Science, VNU - MSC Ta Bich Thuan - College of Science, VNU - Dr Le Xuan Tham – Center of Radio biotechnology The objectives and research contents 4.1 The objectives - Research and identifycation the perennial Ganoderma, polypores mushroom base on morphological and molecular characteristica - Research on main bioactive compounds for health protection (stimulation immune system and antitumor) 4.2 The research contents - Research and identifycation the perennial Ganoderma, polypores mushroom base on morphological and molecular characteristica and maintaining the strains on culture collection - Research on main bioactive compounds and method to exstract the main bioactive compounds from some important specices - Study using the abouv exstractions to stimulation immune system and antitumor traitement Main results - There are about 52 specices of the perennial Ganoderma, polypores mushroom had been found (Ganodermataceae – genus, 13 species, Hymenochaetaceae – genus, 24 species, Coriolaceae – genus, 15 species) - The morphological and micropic characteristica of some importan species are discribed and maintaining the strains on culture collection - Finding the method to extraction DNA of anual Linzi and identification Ganoderma using PCR – RFLP analysis of Mn SOD gene - The growing and fruiting of the perenial linzhi and polypores strains Toh, E1, H1, Gs and C were studied on Agar medium and Substrat - The main bioaactive compounds of the strains E1,Toh, H1, N1, C1 were identificative by chromatography methods: MS, HPLC, TLC - All extracts and their mixtures not exhibit cytotoxic effect against the tested cell lines Upon treatement with ethanolic and aqueous extracts, a concentration-dependent inbibition of cell proliferation was abserved The exstractions were using to treatement of the free willing patients and give the good results - Six papers have been published and three presentations on National congress and two in Japan and Germany - Two graduate students is being under the research direction of the project Center of Biotechnology, VNU Director Prject Coordinator Dr Duong Van Hop Prof Dr Sc Trinh Tam Kiet Project implementing organization Vietnam National University, Hanoi I Më đầu Số lợng loài nấm đà đợc định danh 80060 loài (Từ điển nấm, Kirk et al, 2001) Trong đó, số lợng loài nấm lớn (Marcro fungi) có thể nhìn thấy mắt thờng khoảng 14 nghìn loài lên tới 22 nghìn loài (Hawkworth, 2001) đó, khoảng 50% loài ăn đợc mức độ khác nhau, 2000 loài an toàn (cả hợp chất tế bào hợp chất trao đổi thứ cấp có tính sinh kháng nguyên yếu không gây phản ứng phụ ) khoảng 700 loài đợc cho có đặc tính dợc liệu Các số liệu có cho thấy nấm lớn nguồn tài nguyên vô tận ẩn chứa hợp chất có trọng lợng phân tử lớn nh: Polysaccharide, Polaccharide- Protein, đặc biệt giàu sản phẩm trao đổi chất thứ cấp có trọng lợng phân tử nhỏ hơn.ít có 651 loài dới loài thuộc 182 chi Nấm có đảm đa bào (Heterobasidiomycetes) Nấm có đảm đơn bào (Holobasidiomycetes) chứa Polysaccharide có tác dụng dợc liệu (Reshetnikov et al., 2001) Chúng hầu hết Glucan với nhiều loài liên kết Glycoside khác nh -1->3, -1->6 β - 1->3) nh−ng mét sè thùc sù lµ Hecteroglucan Một số polysaccharide liên kết với gốc protein nh phức hợp PSP (Krestin) chiết xuất từ nấm Vân chi (Ttrametes versicolor) Các chất có tác dụng chủ yếu chống ung th, nhng nằm vách tế bào nấm, thờng che lấp thành phần nấm kitin Bên cạnh đó, từ nấm lớn hàng trăm chất có hoạt tính sinh học có trọng lợng phân tử nhỏ đa đợc tách chiết, sàng lọc, nghiên cứu cấu trúc nh hoạt tính sinh học chúng Trớc hết phải kể đến Terpenoit nh ganoderic axit, lucideric axit, ganoderiol, ganodermodiol từ loài Ganoderma nh lanostal, sterol, phenol từ hàng loạt loài nấm lớn khác Hoạt tính chống ung th, điều hòa hệ miễn dịch, antioxydan, chống viêm nhiễm, chống virus, vi khuẩn, nấm; làm giảm lợng choresterol, mỡ, đờng máu đợc nghiên cứu tích cực nhiều nớc có công nghiệp phát triển [8, 10, 14, 15, 16, 17] Những nghiên cứu thành phần loài nấm lớn Việt Nam đà đợc Trịnh Tam Kiệt tác giả khác tiến hành [1, 2, 4, 11, 18, 19] thống kê toàn vao năm 2001 [2], bao gồm khoảng 1200 loài tổng số 2250 loài nấm đợc định tên khoa học Trong có số loài đợc ghi nhận có tác dụng dợc liệu nhng cha đặc điểm sinh học nh tác dụng dợc học chúng Một số chủng nấm dợc liệu khác nh Linh chi, Vân chi, Nấm đầu khỉ, Nấm lỗ đợc nhập nội nuôi trồng thử nghiệm số sở nghiên cứu nuôi trồng nấm Việt Nam Một số sản phẩm nấm nh linh chi khô nguyên cắt lát, bột nấm, chè linh chi đợc sản xuất thử nghiệm cung ứng cho ngời tiêu dùng Tuy nhiên, nghiên cứu kỹ lỡng thành phần loài, phân bố, trữ lợng, khả đa vào nuôi trồng loài nấm dợc liệu mọc tự nhiên Việt Nam nh xác định chất lợng tác dụng dợc lí cha đợc làm sáng tỏ Trong khuôn khổ dự án hợp tác với CHLB Đức: Nghiên cứu chất có hoạt tính sinh học Việt Nam Các chất có hoạt tính sinh học gần 100 loài nấm lớn đà đợc nghiên cứu, 50 chất đà đợc xác định tới cấu trúc phân tử, có khoảng 30 chÊt cã cÊu tróc míi cho khoa häc ®· đợc mô tả [14] Một số chất có hoạt tính cao, kìm hÃm hoạt động tế bào ung th, tăng khả miễn dịch thể, kháng vi sinh vật gây bệnh, chống viêm có khả ứng dụng lớn dợc phẩm, mỹ phẩm [12] Đặc biệt gần Cổ linh chi (thc xác nấm linh chi đa niên nấm đa niên) đà đợc đặc biệt lu ý Vì việc nghiên cứu tích cực thành phần loài , định loại mô tả đặc điểm sinh học chúng thiên nhiên nh phân lập thuân khiết dể bảo tồn nguồn gen, bớc đầu định loại chúng sinh học phân tử, nghiên cứu môi trờng nuôi cấy, xác định nhóm chất chất có hoạt tính sinh học số loài nấm quan träng, kh¶o nghiƯm viƯc sư dơng qu¶ thĨ cđa loài liệu pháp nấm đa niên II phơng pháp nghiên cứu - Thu thập, xử lý, phân lập bảo quản nấm theo Trịnh Tam Kiệt (1981), Ryvarden & Gilberson (1986) - Nghiên cứu đặc điểm sinh học phân tử loài Ganoderma theo Lê ỡnh Lơng cộng (2004-2005) - Nghiên cứu hoá hp chất tự nhiên theo U Graefer cộng (1991) III Kết nghiên cứu 3.1 Thu mẫu nấm số vùng sinh thái Việt Nam bao gồm: Lào Cai Sapa, Lai Châu, Sơn La, Yên Bái, Tam Đảo, Ba Vì, Cúc Phơng, Thanh Hoá, Nghệ An, Hà Tĩnh, Quảng Bình, Thừa Thiên Huế, Đà Nẵng, KonTum, Đắc Lắc, Đắc Nông Tổng số mẫu thu đợc khoảng 500 mẫu + Các mẫu vật đà đợc xử lý, sấy khô bảo quản Bảo tàng Nấm Trung tâm Công nghệ Sinh học - Đại học Quốc gia Hà Nội 3.2 Nghiên cứu thành phần loài, định loại mô tả loài quan trọng Việt Nam + Nghiên cứu đặc điểm hình thái thể, sợi, bào tử dới kính hiển vi quang học kính hiển vi điện tử quét khoảng 15 chủng + Bớc đầu định loại mô tả loài thờng gặp Các số liệu nghiên cứu cho thấy tập đoàn nấm Cổ linh chi nấm Đa niên chủ yếu Việt Nam phong phú: * Thành phần loài nấm đa niên ghi nhận Việt Nam (Theo Ainsworth & Bisby’: “Dictionary of the Fungi” 1995 Trịnh Tam Kiệt tác giả khác: “Checklist of plant species of Vietnam”, Fungi p.51 – 393, 2001) Ngµnh Basidiomycota Lớp Basidiomycetes Dưới lớp Holobasidiomycetidae Bộ Ganodermatales Họ Ganodermataceae ( Donk) Donk, 1948 Chi Ganoderma Karst., 1881 Dưới chi Elfvingia (12 species) Ganoderma annulare (Fr.) Gilbn G applanatum (Pers.) Pat G australe (Fr.) Pat G cf brownii (Murr.) Gilbn G gibbosum (Blume & Nees, Fr.) Pat G lobatum (Schw.) Atk G oroflavum (Lloyd) Humph G philippii (Bres & Henn.) Bres G tornatum (Pers.) Bres 10.G cf triangulum Zhao & Xu 11 G cf ungulatum Zhao & Zhang 12 Ganoderma sp.1 13.Ganoderma sp.2 Chi Tomophagus Murr., 1905 Tomophagus collossus Murr Bộ Hymenochaetales Họ Hymenochaetaceae Imazeki & Toki, 1954 Chi Phellinus Quell., 1886 (22 species) Phellinus adamantinus (Berk.) Ryv Ph bambusinus (Pat.) Pat Ph cf conchatus (Pers.: Fr.) Pat Ph contignus (Pers.: Fr) Pat Ph extensus (Lev.) Pat Ph fastuosus (Lev.) Ryv Ph gilvus (Schw.: Fr.) Pat Ph hartigii (Allesch et Schnabl.) Pat Ph igniarius (L.: Fr.) Quel 10 Ph lamaensis (Murr.) Pat 11 Ph linteus (Berk et Curt.) Teng 12 Ph nilgheriensis (Mont.) Cunn - Chủng Gs hình thnh qu th phôi thai màu trắng xám, sau hình thành l mu hng tht nhng cha h×nh thành thể thành thục - Chủng Toh h×nh thành thể màu vàng chăm sãc tốt s cho qu th thnh thc với mặt mũ màu vàng sáng sau chuyển thành vàng đạm, nhẵn bóng tơng tự màu sắc thể tự nhiên Phía dới hình thành ống nấm điển hình 2-3 ống mm Trên lớp bào tầng hình thành bào tử nấm thành thục Thời gian hình thành thể thành thục điều kiện thuận lợi 40 - 60 ngày Trên giá thể mùn ca có bổ sung dinh dỡng, chủng Toh nhanh chóng mọc kín giá thể sợi mỏng hình thành thể thành thục sau tuần kể từ nuôi cấy Khả thu nhận sinh khối chủ động chủng nấm khả quan - Chng E1 phát trin tạo thành thể thành thục, h×nh thành ống nấm in hình mu trng v bo t giá điển hình.Thời gian hình thành thể thành thục dài tới 120-140 ngày Sự hình thành thể Ganoderma 19 Sự hình thành thể Tormorphagus Cng nh trờn mụi trường thạch khoai tây, mọc hình thành thể chủng nấm lỗ nhiều năm giá thể mùn cưa bị ảnh hưởng bëi nhiều nhân tố mơi trường, lấy ví dụ ánh sáng, chế độ khí, nhiệt độ, độ ẩm điều kiện dinh dưỡng Trong số đó, ánh sáng nhiệt độ hai nhân tố tối quan trọng phân hố vùng sinh dưỡng sinh sản Q trình tạo bào tử non, q trình phân hố mũ chịu ảnh hưởng tích cực ánh sáng nhiệt độ mọc sợi điều kiện có ánh sáng nhiệt độ tương đối cao lại bị ức chế cách rõ rệt 3.5 Nghiªn cøu mét sè nhãm chÊt cã ho¹t tÝnh sinh häc chÝnh cđa số loài quan trọng Quả thể chủng nấm Cổ linh chi nấm Đa niên đà đợc tách chiết dung môi hữu Tỷ lệ nhóm hoạt chất tách chiết đợc khoảng từ 2.5 4.5% trọng lợng khô thể nấm Các nhóm chất tự nhiên chủ yếu đà đợc nghiên cứu sắc ký cột, sắc ký mỏng, sắc ký khí nghiên cứu khối phổ cho thÊy c¸c chÊt chiÕt cđa nÊm Cỉ linh chi nấm Đa niên giàu hoạt chất Ngoài chất có trọng lợng phân tử lớn nh: Polysaccharide, Polysaccharide-peptide, Peptaibol chủng nghiên cứu chứa nhiều Steroid (esgosterin), Tepenoid Đáng kể colossolacton (đợc gọi chung colossin) từ Ganoderma colossum; aplanostanoic, poricoic, tumuloic axit tõ Wolfiporia cocos ; Ganoderic acid, aplanic acid, 20 Egosterol tõ Ganoderma sp.; Hispolon, Hispidin, Inotilone tõ Inonotus sp vµ Phellinus sp Quả thể khơ vài loài nấm đa niên quan trọng chiết suất nhằm mục đích nghiên cứu nhóm hợp chất có hoạt tính sinh học Các chủng nấm nghiên cứu tách chiết theo quy trình sau: - Làm sạch, cắt thành miếng (1 x cm), sấy khô để bảo quản - Chiết suất nước đun sôi lần lần cồn thực phẩm 90o - Lọc dịch chiết, đông khô thăng hoa, thẩm tích, sấy đơng khơ sản phẩm Khèi phỉ cđa dÞch chiÕt cån cđa E1 Khèi phỉ cđa dÞch chiÕt nớc E1 21 Sắc kí lớp mỏng dịch chiÕt cån E1 Qua thấy dịch chiết nước cồn mẫu nấm đa niên chứa vô nhiều hợp chất tự nhiên Để nghiên cứu tiếp nhóm chất, phải tách chiết, sàng lọc kỹ ứng dụng phương pháp nghiên cứu đại sâu nghiên cứu cấu trúc phân tử chúng 22 CÊu tróc ph©n tư cđa Colossolactons (Tomophagus) CÊu tróc ph©n tư cđa Terpenoid (Wolfiporia) 23 CÊu tróc ph©n tư cđa hợp chất tách chiết từ H1 3.6 Nghiên cứu tác dụng dịch chiết nấm Linh chi đa niên nấm đa niên lên tế bào nuôi cấy Invitro cđa ng−êi vµ khØ * Chuẩn bị dịch chiết để làm thí nghiêm ảnh hưởng dịng tế bào người động vật Chúng sử dụng mẫu có nguồn gốc từ lồi nấm lỗ đa niên Việt Nam, kí hiệu H1, H3, E1, N1, P1 Để chiết suất, lấy 300g thể khô từ mẫu Đun sôi với nước lần, lần Sau đó, hoà dịch chiết ba lần lại làm một, tiếp tục đun, đặc ta có chừng 25 – 30 ml Dịch chiết sau sấy đơng khơ, hồ tan trở lại với nước Phần nguyên liệu lại sau chiết với nước đem chiết với cồn Sau 24 giờ, cất quay tiếp hồ tan trở lại cồn * Ảnh hưởng độc tế bào kìm hãm tăng sinh tế bào dịch chiết nước cồn nấm lỗ đa niên tế bào người Hiện tại, điều tra ảnh hưởng dịch chiết nước cồn số nấm lỗ lên sinh trưởng số dòng tế bào Phải kể đến, 24 Hela (tế bào ung thư cổ tử cung), Vero-B4 (tế bào thận loài khỉ xanh châu Phi), Hep-G2 (tế bào ung thư gan), CLS-354 (ung thư tế bào hình vảy miệng) MDA-MB 436 (tế bào ung thư vú người) (Các chủng nấm kí hiệu H1, H3, E1, N1, P1) Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Aqueous Extract H1 100 Control Vero-B4 Hep-G2 50 CLS-354 HeLa MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Aqueous Extract H3 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) 25 Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Mixture of Aqueous Extracts Relative Cell Amount (% vs Control) 100 Control HeLa 50 Vero-B4 Hep-G2 CLS-354 1000 MDA-MB 436 Concentration (µg/ml) Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Aqueous Extract N1 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Aqueous Extract E1 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) 26 Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Aqueous Extract P1 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Ethanolic Extract N1 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Ethanolic Extract E1 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) 27 Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Ethanolic Extract H3 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Ethanolic Extract H1 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Ethanolic Extract P1 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) 28 Relative Cell Amount (% vs Control) Antiproliferative and Cytotoxic Effect of Mixture of Ethanolic Extracts 100 Control HeLa Vero-B4 50 Hep-G2 CLS-354 MDA-MB 436 1000 Concentration (µg/ml) Tất dịch chiết hỗn hợp chúng ảnh hưởng độc tế bào dòng tế bào thử nghiệm Sau bị xử lý với dịch chiết nước cồn, quan sát thấy ức chế phụ thuộc nồng độ dịch chiết lên trình tăng sinh tế bào Ở nồng độ cao, số dịch chiết biểu tác dụng kìm hãm trỡnh tng sinh ca t bo 3.7 Bớc đầu nghiên cøu sư dơng dÞch chiÕt nÊm thùc tiƠn ViƯc nghiên cứu công nghệ tách chiết chế phẩm đà đợc tiến hành Chế phẩm kem chống viêm da dỡng da đà đợc sản xuất từ hàng chục kg bột tinh chất nấm Một sản phẩm ban đầu đà đợc khảo nghiệm ngời Bệnh viện Da liễu, Đại học Tổng hợp Jena cho kết tốt Quy trình công nghệ tách chiết hoạt chất loài nấm Cổ linh chi nấm Đa niên khác bớc đầu đà đợc khảo nghiệm Việc sử dụng Liệu pháp nấm Cổ linh chi nấm Đa niên để điều trị cho bệnh nhân tự nguyện bị bệnh ung th, tim mạch tiểu đờng đợc khảo nghiệm cho kết khả quan Các bệnh nhân tự nguyện sau sử dụng dịch chiết nấm Linh chi đa niên nấm đa niên tăng cờng thể lực, tăng cân, tiêu tế bào máu nh hệ miễn dịch đợc tăng cờng Những khối u nhỏ bị tiêu giảm, khối u lớn đợc giữ nguyên kích thớc tăng chậm có hoá vôi Dịch chiết nấm làm giảm lợng Cholesterol máu, mỡ máu lợng đờng cao bệnh nhân bị bệnh tim mạch tiết niệu Dịch chiết nấm có tác dụng đáng kể việc hạ thấp tiêu sinh hoá điểm khối u cho loại khối u điều trị riêng rẽ kết hợp với liệu pháp khác y học đại 29 iv Các sản phẩm khoa học đ hoàn thành 4.1 Các công trình đ công bố tạp chí khoa học: Các công trình đà công bố tạp chí khoa học Quốc gia: + Nghiên cứu dới chi Elfwingia chi Tomophagus ë ViƯt Nam T¹p chÝ Di trun & øng dơng Chuyên san Công nghệ Sinh học 2003 2004 + Nghiên cứu chi Phellinus Việt Nam Tạp chí Di truyền & ứng dụng Chuyên san Công nghệ Sinh học 2003 2004 + Nghiên cứu thành phần lòai Nấm đa niên thuộc họ Coriolaceae Tạp chí Di truyền & ứng dụng Chuyên san Công nghệ Sinh học 2003 2004 + Nghiên cứu mọc hình thành thể nấm linh chi Hải miên Tomophagus colossus Tạp chí Di truyền & ứng dụng Chuyên san Công nghệ Sinh học 2003 2004 + Nghiên cứu mọc hình thành thể nấm linh chi đa niên (cổ linh chi) Ganoderma australe T¹p chÝ Di trun & øng dơng – Chuyên san Công nghệ Sinh học 2003 - 2004 +Trịnh Tam Bảo, Trịnh Tam Kiệt, H.-M Dahse and H.P Saluz, Cytotoxic and antiproliferative effects of aquaeous and ethanolic extracts of Vietnamese perennial Polypores on human cells T¹p chÝ Di trun häc vµ øng dơng, T34-41, Sè 2, 2005 + Hilaire V Kemami Wangun, Albert Hartl, Trinh Tam Kiet and Christian Hertweck Inotilone and Related Phenylpropanoid Polyketides from Inonotus sp And their indentification as Potent COX and XO Inhibitors Org Biomol Chem., 2006, 4, 2545-2548 4.2 C¸c b¸o c¸o khoa häc hội nghị: 4.2.1 Các báo cáo khoa học hội nghị Quốc tế: - Báo cáo tậi héi nghÞ khoa häc Quèc tÕ Innovative Roles of Biological Resource Centers: New and interesting macrofungi of Vietnam and theirs bioactive compounds - Trịnh Tam Bảo, Trịnh Tam Kiêt, H P Saluz, Specific molecular pathways in human cells treated with bioactive extracts of Vietnamese 30 mushrooms, Héi nghÞ tỉng kÕt 10 năm hợp tác Đức - Việt Posdam - Hà Nội, 2006 4.2.2 Các báo cáo khoa học héi nghÞ Qc gia: - TrÞnh Tam KiƯt, TrÞnh Tam Bảo, Nghiên cứu thành phần loài nấm đa niên Việt Nam Những vấn đề nghiên cứu khoa học sống, Nhà xuất KHKT, 2005 - Lê Xuân Thám, Trịnh Tam Kiệt, Loài nấm Linh chi đỏ (Ganoderma thanglongenese), Những vấn đề nghiên cứu khoa học sống, Nhà xuất KHKT, 2005 - Phạm Thùy Trang, Nguyễn Hoài Giang, Lê Đình Lơng (2005), Nghiên cứu sử dụng enzyme giới hạn cắt gen Mn SOD để phân loại nhận dạng Ganoderma, Hội nghị KH toàn quốc CNSH hớng 8.2, 151 156 Kết đào tạo 4.3.1 Thạc Sỹ - Cử nhân KHTN: Trịnh Thị Tam Bảo, Research on taxonomy of the main perennial polypores and biological characteristics on some imporortant species in Vietnam.” Graduation dissertation honor programme biology Hanoi – Jena 4.3.2 TiƠn Sü: 1/ Ng« Anh, Nghiên cứu thành phần loài nấm lớn vùng Thừa Thiên Huế 2/ Trịnh Tam Bảo, Specific molecular pathways in human cells treated with bioactive extracts of Vietnamese mushrooms (®ang tiÕn hành HKI Jena CHLB Đức) v Về tài §· tiÕp nhËn toµn bé kinh phÝ lµ: 600 triƯu (VNĐ) tiến hành chi tiêu theo quy định hành Nhà nớc VI NGH Chúng xin bày tỏ lòng cảm ơn chân thành tới lnh đạo Bộ KHCN, Vụ chức năng; lnh đạo ĐHQGHN ban đ tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ đề tài đợc triển khai thuận lợi Để áp dụng kết 31 nghiên cứu thực tiễn quy mô lớn hơn, thấy cần thiết phải đợc tiếp tục triển khai đề tài với hợp tác đồng nghiệp CHLB Đức đồng nghiệp Việt Nam lĩnh vực sinh y dợc với nguồn kinh phí lớn ViI Tài liệu tham khảo Tiếng Việt Kit, T T (1981), Nấm lớn Việt Nam 1, Nhà xuất Khoa học kĩ thuật, Hà Nội Kiệt, T T tác giả khác (2001), Danh lc nm ln ca Vit Nam, Nhà xut bn Nông nghip, Hà Nội Thám, L X., Kiệt, T T (1995), "Chuyên san nấm Linh chi Ganodermataceae", Tạp chí Dược học (235), 5-203 Nguyễn Hoài Giang, Nguyễn Xuân Hùng, Lê Đình Lơng (2005), Nghiên cứu phân loại Ganoderma mồi PCR đặc hiệu cho gen Superoxide dismutase, Tạp chí DT & ¦D sè – 2005, – English Ainsworth, Bisby’s (2001), Dictionary of the Fungi, University Press, Cambridge Trịnh Tam Bảo, Trịnh Tam Kiệt, H.-M Dahse and H.P Saluz, Cytotoxic and antiproliferative effects of aquaeous and ethanolic extracts of Vietnamese perennial Polypores on human cells T¹p chÝ Di trun häc vµ øng dơng, T34-41, Sè 2, 2005 97: 1-197 Corner, E J H (1983) “Ad Polyporaceaes VI”, Beih Nova Hedw Dahse, H –M., Schlegel, B., Graefe, U (2001), „Differentiation between inducers of apoptosis and nonspecific cytotoxic drugs by means of cell analyzer and immunoassay”, Pharmazie 56 (6), 489-491, Germany Graefe U et al (2001), “Colossolactones, New Triterpenoid Metabolites from a Vietnamese Mushroom Ganoderma colossum”, J Nat Prod 64(2), 236-239 32 10 Hawksworth, D L (1993), „The tropical fungal biota: census, pertinence, prophylaxis and prognosis“ In: Isaac, S Frankland, J C., Watling, T., Whalley, A J S (eds) Aspects of tropical mycology, Cambridge University Press, Cambridge 11 Kiet, T T (1998), „Preliminary checklist of macrofungi of Vietnam“ Feddes Repertorium 109 (3-4), 257-277 12 Kiet, T T., Doerfelt H., Graefe U (2004), ”New and interesting macrofungi of Vietnam and their bioactive compounds”, In: Makoto, M W., Ken-ichiro, S., Tatsuji, S., Innovative Roles of Biological Resource Centers, 169172, Chiba 13 Kleinwaechter P., Anh, N., Kiet, T T., Schlegel B., Dahse H –M., Härtel, A., Graefe U (2001), „Colossolactones, new triterpenoid metabolites from a Vietnamese mushroom Ganoderma colossum“, J Nat Prod 64(2), 236239 14 Reshetnikov, S V., Wasser, S P., Tan, K K (2001), “Higher Basidiomycota as a source of antitumor and immunostimulating polysaccharides”, Int J Med Mushrooms 3, 361-394 15 Germany Timm, A (1997), Fungal Biotechnology, Chapman & Hall, 16 Wasser, S P (2002), “Medicinal mushrooms as a source of antitumor and immunomodulating polysaccharides”, Appl Microbiol Biotechnol 60, 258-274 17 Zjawiony, J K (2004), “Biologically active compounds from Aphyllophorales (Polypore) Fungi”, J Nat Prod 67, 300-310 French 21 Patouillard N (1890), „Contributions la flore mycologique du Tonkin“, J Bot (Paris) 11, 335-349, 367-374 German 22 Kiet, T T (1998), „Charakteristika der Grosspilzflora – Vietnam“, Feddes Repertorium 109 (3-4), 249-255, Berlin 33
Ngày đăng: 04/10/2023, 21:11
Xem thêm:
