Nghiên cứu thành phần loài, phân bố, vai trò truyền bệnh của muỗi anopheles và ứng dụng lưới zerofly® phòng chống véc tơ sốt rét tại khu bảo tồn thiên nhiên ea sô, đắk lắk (2020 2023)

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN SỐT RÉT - KÝ SINH TRÙNG - CÔN TRÙNG TRUNG ƯƠNG -* - PHẠM VĂN QUANG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LOÀI, PHÂN BỐ, VAI TRÒ TRUYỀN BỆNH CỦA MUỖI ANOPHELES VÀ ỨNG DỤNG LƯỚI ZeroFly® PHỊNG CHỐNG VÉC TƠ SỐT RÉT TẠI KHU BẢO TỒN THIÊN NHIÊN EA SÔ, ĐẮK LẮK (2020-2023) LUẬN ÁN TIẾN SỸ SINH HỌC Hướng dẫn khoa học: PGS TS Trần Thanh Dương TS Nguyễn Văn Dũng Hà Nội – Năm 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ VIỆN SỐT RÉT - KÝ SINH TRÙNG - CÔN TRÙNG TRUNG ƯƠNG -* - PHẠM VĂN QUANG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN LỒI, PHÂN BỐ, VAI TRỊ TRUYỀN BỆNH CỦA MUỖI ANOPHELES VÀ ỨNG DỤNG LƯỚI ZeroFly® PHỊNG CHỐNG VÉC TƠ SỐT RÉT TẠI KHU BẢO TỒN THIÊN NHIÊN EA SÔ, ĐẮK LẮK (2020-2023) Chuyên ngành: Côn trùng học Mã số: 942 01 06 LUẬN ÁN TIẾN SỸ SINH HỌC CÁN BỘ HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS Trần Thanh Dương TS Nguyễn Văn Dũng Hà Nội – Năm 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu tơi Các số liệu kết nghiên cứu trình bày luận án trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khác Tác giả luận án Phạm Văn Quang LỜI CẢM ƠN Trước tiên xin trân trọng cảm ơn PGS TS Trần Thanh Dương, TS Nguyễn Văn Dũng tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi q trình hồn thành luận án Trân trọng cảm ơn Ban Lãnh đạo Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng trung ương tạo điều kiện cho tơi hồn thành luận án Chân thành cảm ơn PGS TS Cao Bá Lợi, Trưởng Phòng Khoa học Đào tạo, cán Phòng giúp đỡ suốt thời gian học tập Trân trọng cảm ơn TS Lê Trung Kiên, TS Vũ Việt Hưng, ThS Trần Thị Huyền, CN Nguyễn Anh Tuấn, anh, chị em Khoa Hóa thực nghiệm Khoa Cơn trùng giúp đỡ thu thập số liệu tạo điều kiện tốt cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu luận án Cảm ơn Trung tâm Kiểm soát Bệnh tật tỉnh Đắk Lắk, Trung tâm Y tế huyện Ea Kar, Trạm y tế xã Ea Sô, Ban quản lý khu bảo tồn Ea Sô giúp tơi q trình thu thập số liệu thực địa Trân trọng cảm ơn PGS TS Vũ Đức Chính, PGS TS Nguyễn Văn Quảng, thầy cô giáo, đồng nghiệp Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Cơn trùng Trung ương đóng góp nhiều ý kiến có giá trị khoa học thời gian hồn chỉnh luận án Chân thành cảm ơn gia đình, anh chị em, bạn bè khuyến khích, động viên, giúp đỡ suốt thời gian học tập, nghiên cứu, hoàn chỉnh luận án Phạm Văn Quang i DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết Viết đầy đủ tiếng Anh tắt Viết đầy đủ tiếng Việt BĐTN Bẫy đèn nhà BĐNN Bẫy đèn nhà Bẫy kép sử dụng mồi người BMKTN nhà Bẫy kép sử dụng mồi người BMKNN nhà Bệnh nhân sốt rét BNSR DDT Dichloro-diphenyl-trichloroethane DEET N, N-Diethyl-m-toluamide Hóa chất DEET Entomological Inoculation Rate Chỉ số lan truyền côn trùng Enzyme - Linked Immunorbent Thử nghiệm miễn dịch liên kết Assay enzyme EIR ELISA Ký sinh trùng sốt rét KSTSR LLINs LLIHN Long-lasting insecticidal treated nets Màn tẩm hóa chất tồn lưu lâu Long-lasting insecticidal hammock Võng tẩm hóa chất tồn lưu nets lâu MĐ PCR Mật độ Polymerase chain reaction Phản ứng chuỗi Polymerase PCSR Phòng chống sốt rét SCGS Soi chuồng gia súc SC Suspension concentrate Huyền phù đậm đặc Véc tơ sốt rét VTSR World health Organization Tổ chức Y tế giới WP Wettable Powder Bột tan nước WG Wettable granules Hóa chất dạng hạt tan nước WHO ii MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tình hình sốt rét giới, Việt Nam điểm nghiên cứu .3 1.1.1 Tình hình sốt rét giới 1.1.2 Tình hình sốt rét Việt Nam 1.1.3 Tình hình sốt rét tỉnh Đắk Lắk điểm nghiên cứu 1.2 Thành phần loài, phân bố, vai trò truyền bệnh muỗi Anopheles 1.2.1 Thành phần loài, phân bố muỗi Anopheles giới 1.2.2 Thành phần loài, phân bố muỗi Anopheles Việt Nam 1.2.3 Thành phần loài, phân bố muỗi, bọ gậy An dirus, An minimus khu bảo tồn thiên nhiên Ea Sô 12 1.3 Vai trò truyền bệnh sốt rét muỗi Anopheles 13 1.3.1 Tỷ lệ nhiễm ký sinh trùng sốt rét muỗi Anopheles .14 1.3.2 Một số đặc tính sinh thái liên quan đến vai trị truyền bệnh sốt rét muỗi Anopheles 18 1.3.3 Vai trò truyền bệnh sốt rét số véc tơ phụ Việt Nam .23 1.4 Nghiên cứu độ nhạy cảm muỗi Anopheles với hố chất diệt trùng 23 1.4.1 Độ nhạy cảm véc tơ sốt rét với hóa chất diệt côn trùng giới 24 1.4.2 Độ nhạy cảm véc tơ sốt rét với hóa chất diệt côn trùng Việt Nam 25 1.5 Các biện pháp phịng chống véc tơ sốt rét .27 1.5.1 Biện pháp phun tồn lưu .28 1.5.2 Biện pháp sử dụng tẩm hóa chất 30 1.5.3 Sử dụng chất xua côn trùng 31 1.5.4 Sử dụng võng tẩm hóa chất 32 1.5.5 Biện pháp sử dụng lưới ZeroFly® phịng chống muỗi Anopheles 32 Chương ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 40 iii 2.1 Mục tiêu 1: Xác định thành phần loài, phân bố, số đặc tính sinh thái vai trị truyền bệnh muỗi Anopheles Khu Bảo tồn thiên nhiên Ea Sô, Đắk Lắk 2020-2021 .40 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 40 2.1.2 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 40 2.1.3 Phương pháp nghiên cứu 42 2.1.4 Nội dung nghiên cứu 44 2.1.5 Phương pháp xác định biến số, đo lường, số đánh giá 45 2.1.6 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 47 2.2 Mục tiêu 2: Đánh giá hiệu ứng dụng lưới ZeroFly® phịng chống muỗi truyền bệnh sốt rét phịng thí nghiệm thực địa .55 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 55 2.2.2 Thời gian, địa điểm nghiên cứu 55 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu 56 2.2.4 Nội dung nghiên cứu 57 2.2.5 Phương pháp xác định biến số, đo lường, số đánh giá 58 2.2.6 Các kỹ thuật sử dụng nghiên cứu 61 2.3 Phương pháp kiểm soát nhiễu, sai số .64 2.4 Công cụ thu thập số liệu nghiên cứu 65 2.5 Xử lý phân tích số liệu .65 2.6 Đạo đức nghiên cứu 65 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 67 3.1 Thành phần loài, phân bố, số đặc tính sinh thái vai trị truyền bệnh muỗi Anopheles khu bảo tồn thiên nhiên Ea Sô, tỉnh Đắk Lắk 67 3.1.1 Thành phần loài, phân bố muỗi Anopheles, số đặc tính sinh thái véc tơ sốt rét khu bảo tồn thiên nhiên Ea Sô .67 3.1.2 Vai trò truyền bệnh véc tơ sốt rét điểm nghiên cứu .83 3.2 Hiệu ứng dụng lưới ZeroFly® phịng chống muỗi truyền bệnh sốt rét phịng thí nghiệm thực địa 92 iv 3.2.1 Độ nhạy cảm với hóa chất diệt côn trùng muỗi Anopheles điểm nghiên cứu 93 3.2.2 Hiệu lực diệt muỗi lưới ZeroFly® phịng thí nghiệm thực địa 94 3.2.3 Hiệu lực phòng chống muỗi đốt người lưới ZeroFly® 96 3.2.4 Tác dụng không mong muốn chấp nhận người sử dụng lưới ZeroFly® .97 Chương BÀN LUẬN 101 4.1 Bàn luận thành phần lồi, phân bố, số đặc tính sinh thái vai trò truyền bệnh véc tơ sốt rét khu bảo tồn thiên nhiên Ea Sô, tỉnh Đắk Lắk 101 4.1.1 Thành phần loài, phân bố muỗi truyền bệnh sốt rét 101 4.1.2 Vai trò truyền bệnh muỗi truyền sốt rét điểm nghiên cứu 113 4.2 Bàn luận hiệu ứng dụng lưới ZeroFly® phịng chống muỗi truyền bệnh sốt rét phịng thí nghiệm thực địa 123 4.2.1 Độ nhạy cảm muỗi truyền sốt rét với số hố chất diệt trùng điểm nghiên cứu 123 4.2.2 Hiệu lực diệt muỗi Anopheles lưới ZeroFly® phịng thí nghiệm thực địa 125 4.2.3 Hiệu lực phòng chống muỗi đốt người lưới ZeroFly® 128 4.2.4 Tác dụng không mong muốn chấp nhận người sử dụng lưới ZeroFly® 129 4.3 Hạn chế đề tài 130 KẾT LUẬN 132 KIẾN NGHỊ 134 TÍNH KHOA HỌC, TÍNH MỚI 135 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU ĐÃ CƠNG BỐ CĨ LIÊN QUAN ĐẾN NỘI DUNG ĐỀ TÀI 136 v DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Đặc tính kỹ thuật lưới ZeroFly® 33 Bảng 2.1 Biến số phương pháp xác định mục tiêu 45 Bảng 2.2 Hệ mồi đầu dò cho kỹ thuật realtime PCR 54 Bảng 2.3 Thành phẩn phản ứng qPCR 55 Bảng 2.4 Các bước điều kiện phản ứng qPCR 55 Bảng 2.5 Biến số phương pháp xác định mục tiêu 59 Bảng 2.6 Ma trận thử nghiệm hiệu lực phịng chống muỗi lưới ZeroFly® bẫy kép sử dụng mồi người bắt muỗi 63 Bảng 3.1 Thành phần loài, phân bố muỗi Anopheles theo sinh cảnh khu vực Khu bảo tồn thiên nhiên Ea Sô năm 2020-2021 67 Bảng 3.2 Số lượng, tỷ lệ cá thể loài muỗi thu khu dân cư năm 2020-2021 69 Bảng 3.3 Số lượng, tỷ lệ cá thể loài muỗi thu bìa rừng năm 2020-2021 70 Bảng 3.4 Số lượng, tỷ lệ cá thể loài muỗi thu rừng năm 2020-2021 72 Bảng 3.5 Số lượng, mật độ loài muỗi Anopheles thu vào đầu cuối mùa mưa khu dân cư xã Ea Sô năm 2020 74 Bảng 3.6 Số lượng, mật độ loài muỗi Anopheles đầu mùa mưa đầu mùa khô khu dân cư năm 2021 75 Bảng 3.7 Số lượng, mật độ loài Anopheles thu theo mùa bìa rừng xã Ea Sơ năm 2020 - 2021 76 Bảng 3.8 Số lượng, mật độ loài Anopheles theo mùa sinh cảnh rừng xã Ea Sô năm 2020-2021 78 Bảng 3.9 Số lượng tỷ lệ bọ gậy thủy vực khu vực khu bảo tồn thiên nhiên Ea Sô năm 2020-2021 80 Bảng 3.10 Tỷ lệ bọ gậy Anopheles sinh cảnh khu vực khu bảo tồn thiên nhiên Ea Sô năm 2020-2021 82 Bảng 3.11 Tỷ lệ véc tơ nhiễm loài ký sinh trùng sốt rét xã Ea Sô phương pháp PCR 84 Bảng 3.12 Tỷ lệ véc tơ nhiễm ký sinh trùng sốt rét theo sinh cảnh 85 vi Bảng 3.13 Chỉ số lan truyền sốt rét An dirus xã Ea Sô thời điểm điều tra năm 2020 năm 2021 86 Bảng 3.14 Kết xác định máu vật chủ muỗi truyền sốt rét xã Ea Sô năm 2021 87 Bảng 3.15 Mật độ trung bình véc tơ sốt rét đốt mồi rừng theo năm 2020 88 Bảng 3.16 So sánh mật độ An dirus đốt mồi rừng theo mùa năm 2020 88 Bảng 3.17 Hoạt động đốt mồi muỗi truyền sốt rét rừng tháng 12/2021 90 Bảng 3.18 So sánh mật độ An dirus đốt mồi rừng theo mùa năm 2021 92 Bảng 3.19 Kết thử nhạy cảm An dirus chủng phịng thí nghiệm với hóa chất diệt trùng 93 Bảng 3.20 Kết thử nhạy cảm quần thể An dirus rừng xã Ea Sơ với hóa chất diệt côn trùng năm 2020-2021 94 Bảng 3.21 Hiệu lực diệt An dirus lưới ZeroFly® chủng phịng thí nghiệm thực địa 95 Bảng 3.22 So sánh mật độ An dirus thu phương pháp bẫy kép sử dụng mồi người phòng thử nghiệm đối chứng 96 Bảng 3.23 Hiệu lực phịng chống An dirus lưới ZeroFly®) thực địa 97 Bảng 3.24 Bảng tổng hợp kết vấn tác dụng khơng mong muốn ZeroFly®) với người trực tiếp thử nghiệm 98 Bảng 3.25 Bảng tổng hợp kết vấn tác dụng không mong muốn lưới ZeroFly®) với người sống trạm can thiệp 99 Bảng 3.26 Sự chấp nhận người sử dụng lưới ZeroFly®) thực địa 100 Phụ lục 3: Bảng tổng hợp Danh sách lồi muỗi Anopheles xã Ea Sơ STT Tên loài muỗi I Phân giống Anopheles Meigen,1818 An argyropus (Swellengrebel, 1914) An barbirostris Van der Wulp, 1884 An crawfordi Reid, 1953 An peditaeniatus (Leicester, 1908) An separatus Leicester, 1908 An sinensis Wiedemann, 1882 II Phân giống Cellia Theobald,1902 An aconitus Donitz, 1902 An dirus Peyton et Harrison, 1979 An jamesi Theobald, 1901 10 An jeyporiensis James, 1902 11 An karwari (James, 1903) 12 An kochi Doenitz, 1901 13 An maculatus Theobald, 1901 14 An minimus Theobald, 1901 15 An philippinensis Ludlow, 1902 16 An sawadwongporni Rattanarithikul et Green, 1986 17 An splendidus Koidzumi, 1920 18 An tessellatus Theobald, 1901 19 An vagus Doenizt, 1902 159 Phụ lục 4: Biểu mẫu KẾT QUẢ ĐIỀU TRA MUỖI ANOPHELES BẰNG PHƯƠNG PHÁP BẪY MÀN KÉP SỬ DỤNG MỒI NGƯỜI Họ tên người mồi bắt muỗi: Thời gian: Ngày tháng năm Địa điểm: Thôn xã huyện tỉnh Điểm đặt bẫy màn: Trong nhà Khu dân cư □ Ngoài nhà Khu dân cư □ Bìa rừng □ Trong rừng □ Tọa độ: N E Đặc điểm nơi điều tra: Cách rừng m; Cách suối m Tên loài muỗi Tổng Số lượng muỗi bắt Tổng 18- 19- 20- 21- 22- 23- 24- 01- 02- 03- 04- 05- 06- 07- 08- 09- 10- 11- 12- 13- 14- 15- 16- 1719h 20h 21h 22h 23h 24h 01h 02h 03h 04h 05h 06h 07h 08h 09h 10h 11h 12h 13h 14h 15h 16h 17h 18h 160 KẾT QUẢ ĐIỀU TRA MUỖI ANOPHELES BẰNG PHƯƠNG PHÁP SOI CHUỒNG GIA SÚC BAN ĐÊM Biểu mẫu Họ tên người điều tra: Thời gian: Ngày tháng năm Địa điểm: Thôn Xã huyện, , tỉnh Họ tên chủ hộ: Tọa độ: N E Đặc điểm nơi điều tra: Cách rừng m; Cách suối m TT Loài muỗi 19h-20h Số lượng muỗi thu thập theo 20h-21h 21h-22h 22h-23h 23h-24h Tổng số 161 KẾT QUẢ ĐIỀU TRA MUỖI ANOPHELES BẰNG PHƯƠNG PHÁP BẪY ĐÈN Biểu mẫu Họ tên người treo bẫy: Thời gian: Ngày tháng năm Địa điểm: Thôn Xã huyện, , tỉnh Điểm đặt bẫy: Trong nhà Khu dân cư □ Bìa rừng □ Trong rừng □ Tọa độ: N E Đặc điểm nơi điều tra: Cách rừng m; Cách suối m TT Tên loài muỗi Trạng thái sinh lý Đói No máu Bán chửa Chửa Tổng số 162 KẾT QUẢ ĐIỀU TRA MUỖI ANOPHELES BẰNG PHƯƠNG PHÁP SOI TRONG NHÀ BAN NGÀY Biểu mẫu Họ tên người điều tra: Thời gian: Ngày tháng năm Địa điểm: Thôn Xã huyện, , tỉnh Họ tên chủ hộ: Tọa độ: N E Đặc điểm nơi điều tra: Cách rừng m; Cách suối m TT Tên loài muỗi Độ cao trú đậu Nơi trú dậu Quần áo Vách nhà Khác