Nghiên cứu đặc điểm hình thái, đặc điểm vi học, thành phần hóa học cây hoàng sin cô

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHALINAR SAIPASEUTH NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, ĐẶC ĐIỂM VI HỌC, THÀNH PHẦN HĨA HỌC CÂY HỒNG SIN CƠ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2021 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI PHALINAR SAIPASEUTH Mã sinh viên: 1601667 NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI, ĐẶC ĐIỂM VI HỌC, THÀNH PHẦN HĨA HỌC CÂY HỒNG SIN CƠ KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: DS.NCS Nguyễn Thanh Tùng ThS Phạm Ngọc Vinh Nơi thực hiện: Bộ môn Dược liệu HÀ NỘI - 2021 LỜI CẢM ƠN Để hồn thành đề tài này, nhận nhiều giúp đỡ quý báu hữu ích từ thầy cô, bạn bè chuyên gia Tôi trân trọng hiểu thực thân khơng thể hồn thành đề tài trọn vẹn thiếu lời khuyên giúp đỡ từ người Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới DS.NCS Nguyễn Thanh Tùng- giảng viên môn Dược liệu, người thầy trực tiếp giao cho em đề tài này, định hướng, tận tình bảo em giá suốt trình thực nghiên cứu Những kinh nghiệm, học quý giá tư mà thầy truyền cho em luôn hành trang thiếu quy trình nghiên cứu khoa học trường công tác sau Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ThS Phạm Ngọc Vinh - Viện khoa học nông lâm nghiệp công nghệ cao, cung cấp dược liệu cho để thực nghiên cứu đề tài Tôi xin chân thành cám ơn tới GS.TS Phan Kế Lộc - Khoa Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội, cung cấp cho tài liệu q báu mơ tả hình thái tài liệu phân loại thực vật, hướng dẫn mô tả đặc điểm hình thái mẫu nghiên cứu tư vấn cho tơi q trình xác định tên khoa học mẫu nghiên cứu Ngồi ra, tơi xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô, bạn em môn Dược liệu đồng hành giúp đỡ tơi q trình thực khóa luận Cuối lời cảm ơn chân thành sâu sắc nhất, muốn gửi tới gia đình bạn bè, người ln ủng hộ động viên học tập sống Hà Nội, tháng năm 2021 Sinh viên Phalinar SAIPASEUTH MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan thực vật 1.1.1 Vị trí phân loại chi Smallanthus Mack ex Small 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố chi Smallanthus Mack ex Small 1.2 Tổng quan thành phần hoá học 1.2.1 Thành phần hóa học rễ củ Hồng Sin Cơ 1.2.2 Thành phần hóa học Hồng Sin Cô 1.2.3 Thành phần hóa học thân Hồng Sin Cơ 1.3 Tác dụng dược lý 1.4 Tác dụng không mong muốn 13 1.5 Công dụng, cách dùng 14 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Đối tượng phương tiện nghiên cứu 15 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 15 2.1.2 Phương tiện nghiên cứu 15 2.2 Nội dung nghiên cứu 16 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.2.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật 16 2.2.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 16 2.3 Phương pháp nghiên cứu 17 2.3.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật 17 2.3.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 17 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 28 3.1 Nghiên cứu đặc điểm thực vật 28 3.1.1 Đặc điểm hình thái thực vật 28 3.1.2 Đặc điểm vi phẫu 31 3.1.3 Đặc điểm bột 33 3.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 37 3.2.1 Định tính nhóm chất dược liệu phản ứng hóa học 37 3.2.2 Định tính Hồng Sin Cơ sắc ký lớp mỏng 39 3.3 Định lượng polyphenol toàn phần dược liệu 44 CHƯƠNG BÀN LUẬN 46 4.1 Về đặc điểm thực vật 46 4.2 Về đặc điểm vi học 46 4.3 Về thành phần hóa học 46 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 49 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Từ viết tắt Chữ đầy đủ (giải nghĩa) ABTS Acid 2,2′-Azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic) DCM Dicloromethan DĐVN V Dược điển Việt Nam V DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl FOS Fructooligosaccharid GAE Gallic Acid Equivalent (đương lượng acid gallic) GC-MS Gas chromatography- Mass Spectrometry (Sắc ký khí ghép nối khối phổ) HDFn Nguyên bào sợi da người bình thường HDL High density lipoprotein (lipoprotein tỷ trọng cao) HepG2 Tế bào ung thư biểu mô tế bào gan người HT-29 Tế bào ung thư trực tràng IC50 Inhibitory concentration 50% (nồng độ ức chế 50% phát triển) LDL Low density lipoprotein (lipoprotein tỷ trọng thấp) MCF-7 Tế bào ung thư vú NF-κB Nuclear factor – kappa B (yếu tố nhân kappa B) NP/PEG Natural products/ Polyethylenglyco PGE2 Prostaglandin E2 SKLM Sắc ký lớp mỏng STZ Streptozotocin TG Triacylglycerol TNF-α Yếu tố hoại tử khối u TT Thuốc thử VLDL Very low density lipoprotein (lipoprotein tỷ trọng thấp) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Phân bố số loài chi Smallanthus Mack.ex Small Bảng 1.2 Một số hợp chất phenolic phân lập từ Hồng Sin Cơ Bảng 3.1 Kết định tính rễ củ Hồng Sin Cơ phản ứng hóa học 37 Bảng 3.2 Kết SKLM dịch chiết Hồng Sin Cơ triển khai với hệ dung môi (II) ethyl acetat- acid formic- nước (8:1:1) quan sát UV 366 nm sau phun thuốc thử NP/PEG 40 Bảng 3.3 Kết SKLM dịch chiết Hồng Sin Cơ chất chuẩn triển khai hệ dung môi toluen - ethyl acetat- acid formic (14:10:1) quan sát UV 366 nm sau phun thuốc thử NP/PEG 42 Bảng 3.4 Kết đo độ hấp thụ dãy dung dịch chuẩn 45 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cơng thức số đường rễ củ Hồng Sin Cơ Hình 3.1 Mẫu tiêu Hồng Sin Cơ 29 Hình 3.2 Đặc điểm hoa Hồng Sin Cô 30 Hình 3.3 Đặc điểm vi phẫu thân Hồng Sin Cô 32 Hình 3.4 Đặc điểm vi phẫu Hồng Sin Cơ 33 Hình 3.5 Một số đặc điểm bột hoa Hồng Sin Cơ 34 Hình 3.6 Một số đặc điểm bột Hồng Sin Cơ 35 Hình 3.7 Một số đặc điểm bột thân Hồng Sin Cơ 36 Hình 3.8 Một số đặc điểm bột rễ củ Hồng Sin Cơ 37 Hình 3.9 Sắc ký đồ dịch chiết Hồng Sin Cơ triển khai với hệ dung mơi (II) ethyl acetat- acid formic- nước (8:1:1) quan sát ở: (a) UV 254 nm trước phun thuốc thử NP/PEG, (b) UV 366 nm trước phun thuốc thử NP/PEG, (c) UV 366 nm sau phun thuốc thử NP/PEG 39 Hình 3.10 Sắc ký đồ dịch chiết Hồng Sin Cơ chất chuẩn triển khai với hệ dung môi (I) toluen - ethyl acetat- acid formic (14:10:1) quan sát ở: (a) UV 254 nm trước phun thuốc thử NP/PEG, (b) UV 366 nm trước phun thuốc thử NP/PEG, (c) UV 366 nm sau phun thuốc thử NP/PEG 41 Hình 3.11 Sắc ký đồ dịch chiết củ Hồng Sin Cơ quan sát ở: (a) UV 254 nm trước phun thuốc thử acid sulfuric 10%, (b) UV 366 nm trước phun thuốc thử acid sulfuric 10%, (c) ánh sáng thường sau phun thuốc thử acid sulfuric 10% 43 Hình 3.12 Đồ thị biểu diễn diện tích pic sắc ký dịch chiết củ Hồng Sin Cơ 44 Hình 3.13 Đồ thị biểu diễn mối tương quan độ hấp thụ 45 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ĐẶT VẤN ĐỀ Chi Smallanthus Mack ex Small thuộc họ Cúc, gồm 23 loài phân bố trải dài từ đông nam Hoa Kỳ đến miền trung Argentina, đa dạng Peru Mexico Hầu hết lồi chi sống mơi trường ẩm ướt rừng mưa, khu vực có bóng râm, đầm lầy Một số lồi mọc khu vực khơ khe núi, sườn núi Các lồi chi sử dụng để làm thực phẩm làm thuốc [43] Hồng Sin Cơ, hay cịn gọi Yacon, Khoai sâm, Địa đàng thiên, Tuyết liên quả… dược liệu có nguồn gốc từ vùng núi Andes, trồng nhiều Brazil, Cộng hòa Séc, Ecuador, Newzeland, Nhật Bản, Đức…[26] Tại Việt Nam, Hồng Sin Cơ đưa vào trồng thử nghiệm trạm nghiên cứu thuốc Sapa từ năm 2000, sau trồng nhiều tỉnh miền núi phía Bắc (Lào Cai, Tam Đảo…) Từ lâu, người vùng Andes biết sử dụng Hồng Sin Cơ để làm thức ăn hay dùng để phòng chữa bệnh, nâng cao sức khỏe [19] Củ Hồng Sin Cơ mát, thành phần chủ yếu nước hàm lượng cao fructooligosaccharid khơng tiêu hóa nên thường sử dụng thực phẩm ăn kiêng, chất làm tự nhiên, siro Bên cạnh đó, Hồng Sin Cơ cịn dược liệu có tiềm việc giảm cân, hỗ trợ tiêu hóa, hỗ trợ điều trị tiểu đường Tuy nhiên thơng tin đặc điểm thực vật, thành phần hóa học Hồng Sin Cơ trồng Việt Nam cịn hạn chế Vì vậy, nhằm mục đích so sánh với Hồng Sin Cơ trồng giới cung cấp liệu đặc điểm hình thái, thành phần hóa học Hồng Sin Cơ trồng Việt Nam làm sở xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm, khóa luận “Nghiên cứu đặc điểm hình thái, đặc điểm vi học, thành phần hóa học Hồng Sin Cô” thực với mục tiêu sau: - Mơ tả đặc điểm hình thái, vi học mẫu nghiên cứu, giám định tên khoa học - Định tính thành phần hóa học Hồng Sin Cơ phản ứng hóa học sắc ký lớp mỏng - Định lượng polyphenol toàn phần dược liệu Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan thực vật 1.1.1 Vị trí phân loại chi Smallanthus Mack ex Small Theo hệ thống phân loại Takhtajan (2009), chi Smallanthus Mack ex Small có vị trí phân loại tóm tắt sau [40]: Giới: Plantae (Thực vật) Ngành: Magnoliophyta (Ngọc lan) Lớp: Magnoliopsida (Ngọc lan) Phân lớp: Asteradae (Cúc) Bộ: Asterales (Cúc) Họ: Asteraceae (Cúc) Chi: Smallanthus Mack ex Small 1.1.2 Đặc điểm thực vật phân bố chi Smallanthus Mack ex Small 1.1.2.1 Đặc điểm hình thái chi Smallanthus Mack ex Small Cây thảo, bụi sống lâu năm, cao 1,5-3 m Thân mọc thẳng hình trụ rỗng, phần thân rễ phân nhánh không đều, thường tạo củ hình trục dài 100200 mm, đường kính 30-80 mm Rễ phát triển từ hệ thống thân chia nhỏ hình thành thân rễ Vỏ rễ củ có màu nâu, hồng, tía, màu kem trắng ngà, mỏng (l-2 mm) chứa ống dẫn nhựa chứa đầy tinh thể màu vàng [19] Lá đơn, mọc đối, phía hình trứng hình mác, khơng có thùy, phía thấp hình trứng rộng, đỉnh có hình chóp, phần gốc cắt cụt mép có cưa Cuống có cánh xếp thành rãnh chồng lên nhau, thường tụ gốc Kích thước trung bình dài 17 cm [22] Cụm hoa đầu đầu tận nhánh, gồm 1-5 trục, trục có đầu chùm, cuống có nhiều lông tơ Hoa màu vàng cam, hoa xung quanh vịng trịn hoa, cánh hoa hình lưỡi có răng, dài 12 mm, rộng mm Các hoa nhỏ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Bên cạnh đó, vị trí Rf = 0,20 có vết tương đồng màu sắc vị trí sắc ký đồ củ, hoa thân Sắc ký đồ hoa cho nhiều vết với màu sắc khác nhau, cường độ vết đậm Như vậy, nhìn chung sắc ký đồ dịch chiết lá, củ, hoa thân Hồng Sin Cơ triển khai với hệ dung mơi ethyl acetat- acid formic- nước (8:1:1) có vài vết tương đồng, hầu hết vết khác về màu sắc, vị trí, cường độ vết ❖ Với hệ dung môi (I) toluen - ethyl acetat- acid formic (14:10:1), chất đối chiếu acid caffeic luteolin sử dụng Sắc ký đồ sau triển khai chụp ảnh bước sóng 254 nm 366 nm, sau màu thuốc thử NP/PEG chụp ảnh bước sóng 366 mn (Hình 3.10) Kết phân tích trình bày bảng 3.3 (a) (b) (c) Hình 3.10 Sắc ký đồ dịch chiết Hồng Sin Cơ chất chuẩn triển khai với hệ dung môi (I) toluen - ethyl acetat- acid formic (14:10:1) quan sát ở: (a) UV 254 nm trước phun thuốc thử NP/PEG, (b) UV 366 nm trước phun thuốc thử NP/PEG, (c) UV 366 nm sau phun thuốc thử NP/PEG ( L: dịch chiết lá, C: dịch chiết củ, Ca: acid caffeic, Lu: luteolin, H: dịch chiết hoa, T: dịch chiết thân ) 41 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Bảng 3.3 Kết SKLM dịch chiết Hồng Sin Cơ chất chuẩn triển khai hệ dung môi toluen - ethyl acetat- acid formic (14:10:1) quan sát UV 366 nm sau phun thuốc thử NP/PEG Mẫu Lá Số Rf màu sắc huỳnh quang vết 0,01; 0,33 (xanh lam); 0,4; 0,5 (xanh) Củ Hoa Thân Acid caffeic 0,007; 0,07; 0,33 (xanh lam); 0,5; 0,81 (xanh) 0,008; 0,03; 0,09; 0,15; 0,33 (xanh lam); 0,42; 0,93 (đỏ); 0,6 (vàng) 0,01; 0,07; 0,3 (xanh); 0,32 (vàng); 0,34; 0,42; 0,7 (đỏ); 0,82 (xanh) 0,33 (xanh lam) Luteolin 0,32 (vàng) Chất xác định Acid caffeic Acid caffeic Acid caffeic Luteolin Nhận xét Trên sắc ký đồ bước sóng 366 nm sau phun thuốc thử, dịch chiết mẫu quan sát thấy vết tách rõ Tại vị trí Rf = 0,33, sắc ký đồ dịch chiết lá, củ, hoa có vết tương đồng với vết acid caffeic chuẩn, cường độ vết acid caffeic sắc ký đồ hoa đậm Trên sắc ký đồ dịch chiết thân xuất vết phát huỳnh quang màu vàng, có vị trí tương đồng với vết luteolin chuẩn Rf = 0,32 Qua quan sát sắc ký đồ thấy lá, củ hoa có xuất acid caffeic, thân có xuất luteolin Ngồi ra, sắc ký đồ củ có nhiều điểm tương đồng, nhiên cường độ vết đậm Sắc ký đồ hoa thân có nhiều vết tương đồng 42 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ❖ Kết sắc ký lớp mỏng củ Hoàng Sin Cô với hệ dung môi ethyl acetatpropanol- nước- acid acetic băng (1:1:0.5:0.5) trình bày hình 3.11 Sắc ký đồ sau triển khai chụp ảnh bước sóng 254 nm 366 nm, sau màu thuốc thử acid sulfuric 10% chụp ảnh ánh sáng thường (Hình 3.11) (a) (b) (c) Hình 3.11 Sắc ký đồ dịch chiết củ Hồng Sin Cô quan sát ở: (a) UV 254 nm trước phun thuốc thử acid sulfuric 10%, (b) UV 366 nm trước phun thuốc thử acid sulfuric 10%, (c) ánh sáng thường sau phun thuốc thử acid sulfuric 10% Nhận xét Sắc ký đồ sau phun thuốc thử acid sulfuric 10% quan sát ánh sáng thường cho vết tách rõ Dịch chiết củ cho vết màu nâu đen Rf = 0,07; 0,09; 0,11; 0,15; 0,20; 0,25; 0,35; 0,50; 0,56 Trong đó, với Rf lớn cường độ vết đậm Các vết hợp chất đường biết củ Hồng Sin Cơ Tuy nhiên chưa có chất đối chiếu nên tạm thời chưa xác định thành phần đường cụ thể 43 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.12 Đồ thị biểu diễn diện tích pic sắc ký dịch chiết củ Hồng Sin Cơ 3.3 Định lượng polyphenol toàn phần dược liệu Xây dựng đường chuẩn định lượng Lần lượt lấy ml dung dịch chuẩn acid gallic nồng độ 20 µg/ml, 40 µg/ml, 60 µg/ml, 80 µg/ml, 100 µg/ml cho vào bình định mức 10ml Sau thêm 2,5 ml thuốc thử Folin- Ciocalteu 10% để phản ứng phút Thêm 1ml nước cất lắc đều, thêm ml dung dịch Na2CO3 7,5%, định mức nước cất Lắc thu dãy chuẩn G1 đến G5 có nồng độ µg/ml, µg/ml, µg/ml, µg/ml, 10 µg/ml Sau 60 phút phản ứng nhiệt độ phòng, xác định độ hấp thụ máy đo quang phổ bước sóng 745,5 nm Mẫu trắng chuẩn bị song song Kết độ hấp thụ dãy dung dịch chuẩn (Bảng 3.2) đồ thị tuyến tính độ hấp thụ nồng độ acid gallic chuẩn (Hình 3.12) sau: 44 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Bảng 3.4 Kết đo độ hấp thụ dãy dung dịch chuẩn Dung dịch G1 G2 G3 G4 G5 chuẩn (2µg/ml) (4µg/ml) (6µg/ml) (8µg/ml) (10µg/ml) Độ hấp thụ A trung bình 0,183 0,381 0,543 0,76 0,917 y = 0.0923x + 0.0027 R² = 0.9979 0.9 0.8 Độ hấp thụ A 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 10 12 Nồng độ acid gallic chuẩn (μg/ml) Hình 3.13 Đồ thị biểu diễn mối tương quan độ hấp thụ nồng độ acid gallic chuẩn Kết định lượng Có phụ thuộc tuyến tính độ hấp thụ nồng độ acid gallic chuẩn với hệ số tương quan R2= 0,9979 Dựa vào phương trình hồi quy tuyến tính: y = 0,0923x + 0,0027 mdl = 1,0023 g; mật độ quang A = 0,650; hàm ẩm a = 6,40 %; hệ số pha lỗng K= 20; thể tích V = 50 ml ta xác định hàm lượng polyphenol toàn phần 7,475 (mg GAE/g dược liệu khô) 45 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƯƠNG BÀN LUẬN 4.1 Về đặc điểm thực vật Các đặc điểm hình thái nghiên cứu, so sánh với đặc điểm mô tả dựa theo tài liệu Qua phân tích, nhóm nghiên cứu xác định mẫu nghiên cứu có tên khoa học Smallanthus sonchifolius (Poepp.) H.Rob., họ Cúc (Asteraceae) Một số đặc điểm thực vật bật lồi: thân mọc thẳng hình trụ, có lơng bao phủ; gốc hình mác, chóp nhọn, mép có cưa, hai mặt có lơng; thân rễ phân nhánh, củ hình trụ; cụm hoa ngù đầu gồm 7-8 cụm hoa đầu, màu vàng cam Từ đặc điểm thực vật nghiên cứu góp phần tạo sở liệu để kiểm nghiệm dược liệu phân biệt Hồng Sin Cơ với lồi khác chi 4.2 Về đặc điểm vi học - Đặc điểm vi phẫu thực vật: thân có lơng che chở đa bào bao phủ bên ngồi, ngồi cịn có lơng tiết phiến có mạch dẫn - Đặc điểm bột: tương tự vi đặc điểm vi phẫu, bột dược liệu có lơng tiết lơng che chở Ngồi ra, bột cịn có tinh thể canxi oxalat hình trụ, bột thân có tinh thể canxi oxalat hình cầu gai mảnh mang màu Bột hoa có hạt phấn hoa hình cầu, bề mặt có gai; bột rễ củ có nhiều hạt tinh bột Qua trình thực nghiệm cho kết hình ảnh mơ tả chi tiết vi phẫu thực vật đặc điểm bột, nhằm cung cấp sở liệu việc phân biệt xây dựng tiêu chuẩn kiểm kiệm dược liệu 4.3 Về thành phần hóa học Kết nghiên cứu định tính dược liệu phản ứng hóa học sơ cho thấy dịch chiết Hồng Sin Cơ có saponin, flavonoid, đường khử, acid hữu cơ, acid amin, polysaccharid Dựa vào mức độ phản ứng thấy thành phần chủ yếu dược liệu flavonoid đường khử Kết thu phù hợp với nghiên cứu thành phần hóa học đề cập phần tổng 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an quan Do nhóm nghiên cứu tiến hành định tính sắc ký lớp mỏng định lượng hàm lượng polyphenol toàn phần dược liệu Polyphenol chất chuyển hóa thứ cấp thực vật, có liên quan đến nhiều tác dụng sinh học dược liệu Theo nghiên cứu trước cho thấy polyphenol Hồng Sin Cơ có tác dụng chống oxy hóa, chống tăng đường huyết Trong nghiên cứu này, polyphenol toàn phần định lượng phương pháp đo quang UV-Vis, hợp chất phenol cho phản ứng lên màu với Folin – Ciocalteu Đây phương pháp đơn giản, dễ thực phổ biến, nhiều nghiên cứu Kết định lượng cho thấy hàm lượng polyphenol toàn phần Hoàng Sin Cô 7,475 (mg GAE/g dược liệu khô) Kết bước đầu góp phần vào việc xây dựng tiêu chuẩn cho mẫu nghiên cứu, định hướng cho nghiên cứu hóa học sâu Bên cạnh đó, nhóm nghiên cứu tiến hành định tính thành phần hóa học phương pháp sắc ký lớp mỏng Đây phương pháp thường quy dùng kiểm nghiệm dược liệu Qua trình khảo sát số hệ dung mơi, nhóm nghiên cứu nhận thấy hệ có khả tách, bao gồm hệ I: toluen-ethyl acetat- acid formic (14:10:1) hệ II: ethyl acetat - acid formic – nước (8:1:1) Từ kết sắc ký đồ cho thấy phân biệt sắc ký đồ lá, thân, củ, hoa dựa vào số lượng, vị trí, màu sắc vết Tuy nhiên thấy sắc ký đồ củ có nhiều vết tương đồng sắc ký đồ hoa thân có nhiều vết tương đồng vị trí, màu sắc Ngồi ra, so sánh với chất chuẩn cho vết có màu sắc, vị trí tương đồng với chất chuẩn Từ thấy xuất acid caffeic dịch chiết lá, củ luteolin thân Hồng Sin Cơ Acid caffeic biết đến nhiều với tác dụng chống oxy hóa, giảm stress oxy hóa loại bỏ gốc tự gây cảm ứng bệnh tiểu đường Luteolin hợp chất có nhiều tác dụng sinh học chống viêm, chống dị ứng, chống oxy hóa, có hoạt tính chống ung thư Tác dụng chống oxy hóa Hồng Sin Cơ liên quan đến xuất acid caffeic luteolin Rễ củ Hồng Sin Cơ 47 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an dự trữ lượng lớn carbohydrat, thành phần carbohydrat oligofructan fructooligosaccharid, ngồi cịn có glucose, fructose sucrose [18] Nhóm nghiên cứu tiến hành sắc ký lớp mỏng riêng dịch chiết củ để sơ xác định đường Hồng Sin Cơ Qua tham khảo số tài liệu, lựa chọn cách chiết củ Hồng Sin Cơ nghiên cứu Zhen-Yuan cộng [47], sử dụng hệ dung môi ethyl acetat- propanol- nước- acid acetic băng (1:1:0.5:0.5) [34] Kết sắc ký cho thấy có nhiều vết, thể dịch chiết củ Hồng Sin Cơ có nhiều loại carbohydrat Do điều kiện đề tài khơng có chất chuẩn đối chiếu nên chưa thể xác định chất tương ứng với vết Bên cạnh đó, với vết có Rf lớn cường độ vết đậm, dự đốn đường có tính phân cực hàm lượng cao 48 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Sau thời gian thực nghiệm, khóa luận thu số kết sau: ❖ Về đặc điểm thực vật - Đã mô tả phân tích đặc điểm hình thái mẫu nghiên cứu Căn vào đặc điểm hình thái, mẫu nghiên cứu giám định tên khoa học Smallanthus Sonchifolius (Poepp.) H.Rob (tên thường gọi Hoàng Sin Cô, Yacon, Khoai Sâm…), thuộc họ Cúc (Asteraceae) - Đã mô tả đặc điểm vi phẫu thân, vi phẫu lá, đặc điểm bột góp phần vào tiêu chuẩn hóa kiểm nghiệm dược liệu sau ❖ Về thành phần hóa học - Đã định tính nhóm chất hữu thường gặp phản ứng hóa học, kết sơ cho thấy mẫu nghiên cứu có chứa: flavonoid, saponin, đường khử, acid hữu cơ, acid amin polysaccharid - Đã định tính dịch chiết phận lá, củ, hoa thân Hồng Sin Cơ sắc ký lớp mỏng so sánh với chất chuẩn acid caffeic luteolin - Đã định tính sơ carbohydrat dịch chiết củ Hồng Sin Cơ - Đã định lượng hàm lượng tổng polyphenol toàn phần dịch chiết dược liệu cho kết 7,475 (mg GAE/g dược liệu khô) Kiến nghị Trong điều kiện thời gian khả cho phép, bước đầu đề tài thu số kết quả, góp phần xây dựng sở liệu Hồng Sin Cơ Việt Nam Để đầy đủ hơn, Hồng Sin Cơ cần nghiên cứu thành phần hóa học tác dụng sinh học Nhóm nghiên cứu đề xuất số ý kiến cho đề tài sau: - Nghiên cứu sâu thành phần hóa học phân lập hợp chất có hoạt tính sinh học Hồng Sin Cơ - Nghiên cứu định lượng thành phần đường củ Hồng Sin Cơ 49 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an - Nghiên cứu tác dụng sinh học Hồng Sin Cơ tác dụng hạ đường huyết, tác dụng chống oxy hóa, chống viêm… 50 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Tài liệu tham khảo Tài liệu Tiếng Việt Lê Đình Bích, Trần Văn Ơn (2016), Thực vật dược, NXB Y học, tr 17-423 Bộ môn Dược liệu (2019), Thực tập dược liệu, Trung tâm thư viện Đại học Dược Hà Nội, tr 64-133 Đỗ Quyên (2015), Chiết xuất phân lập hợp chất từ thiên nhiên, NXB Giáo dục Việt Nam, Hà Nội, tr 21-59 Nguyễn Viết Thân (2020), Cây thuốc Việt Nam thuốc thường dùng, NXB Y Học, Hà Nội, tr 234 Nguyễn Viết Thân (2003), Kiểm nghiệm dược liệu phương pháp hiển vi, NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, tr 13-21 Tài liệu Tiếng Anh Aybar Manuel, Riera Alicia, et al (2001), "Hypoglycemic effect of the water extract of Smallanthus sonchifolius (Yacon) leaves in normal and diabetic rats", Journal of Ethnopharmacology, 74, pp 125-132 Baroni Silmara, Rocha Bruno, et al (2016), "Hydroethanolic extract of Smallanthus sonchifolius leaves improves hyperglycemia of streptozotocin induced neonatal diabetic rats", Asian Pacific Journal of Tropical Medicine, 9, pp 432-436 Baroni Silmara, Suzuki-Kemmelmeier Fumie, et al (2008), "Effect of crude extracts of leaves of Smallanthus sonchifolius (yacon) on glycemia in diabetic rats", Revista Brasileira De Ciencias Farmaceuticas - RBCF, 44, pp 522-527 Cao Y., Ma Z F., et al (2018), "Phytochemical Properties and Nutrigenomic Implications of Yacon as a Potential Source of Prebiotic: Current Evidence and Future Directions", Foods, 7(4), pp 2-11 10 De Andrade Eriel Forville, Leone Roberta de Souza, et al (2014), "Phenolic profile and antioxidant activity of extracts of leaves and flowers of yacon (Smallanthus sonchifolius)", Industrial Crops and Products, 62, pp 499-506 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 11 de Oliveira R B., de Paula D A., et al (2011), "Renal toxicity caused by oral use of medicinal plants: the yacon example", J Ethnopharmacol, 133(2), pp 434-41 12 Dou D Q., Tian F., et al (2008), "Structure elucidation and complete NMR spectral assignments of four new diterpenoids from Smallantus sonchifolius", Magn Reson Chem, 46(8), pp 775-9 13 Gasparoto Thais Helena (2013), "Topical anti-inflammatory activity of yacon leaf extracts", Revista Brasileira de Farmacognosia, pp 497-505 14 Genta S B., Cabrera W M., et al (2005), "Subchronic 4-month oral toxicity study of dried Smallanthus sonchifolius (yacon) roots as a diet supplement in rats", Food Chem Toxicol, 43(11), pp 1657-65 15 Genta S B., Cabrera W M., et al (2010), "Hypoglycemic activity of leaf organic extracts from Smallanthus sonchifolius: Constituents of the most active fractions", Chem Biol Interact, 185(2), pp 143-52 16 Genta Susana, Habib Natalia, et al (2009), "Yacon syrup: Beneficial effects on obesity and insulin resistance in humans", Clinical nutrition (Edinburgh, Scotland), 28, pp 182-7 17 Goto Keiichi, Fukai Katsuhiko, et al (1995), "Isolation and Structural Analysis of Oligosaccharides from Yacon (Polymnia sonchifolia)", Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 59(12), pp 2346-2347 18 Graefea S., Hermannb M., et al (2003), "Effects of post-harvest treatments on the carbohydrate composition of yacon roots in the Peruvian Andes", Field Crops Research, 86(2004), pp 157-165 19 Grau A., Rea J (1997), "Yacon Smallanthus sonchifolius(Poepp & Endl.) H Robinson", Andean roots and tubers: Ahipa, arracacha, maca and yacon, IPGRI, Rome, 174, pp 199-256 20 Guo Bao, Shu Ju Flora of China, pp 867 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 21 Habib Natalia, Honoré Stella, et al (2011), "Hypolipidemic effect of Smallanthus sonchifolius (yacon) roots on diabetic rats: Biochemical approach", Chemico-biological interactions, 194, pp 31-9 22 Honoré Stella, Genta Susana, et al (2015), "Smallanthus sonchifolius (Yacon) leaves: an emerging source of compounds for diabetes management", Journal of Research in Biology, 5, pp 21-42 23 Honoré Stella, Genta Susana, et al (2012), "Protective effect of yacon leaves decoction against early nephropathy in experimental diabetic rats", Food and chemical toxicology : an international journal published for the British Industrial Biological Research Association, 50, pp 1704-15 24 Jingwei Li, Jian Liu, et al (2009), "GC-MS analysis of the chemical constituents of the essential oil from the leaves of yacon (Smallanthus sonchifolia)", Frontiers of Agriculture in China, 3(1), pp 40 25 Kakuta Hideo, Seki Takuhiko, et al (1992), "Ent-kaurenic Acid and Its Related Compounds from Glandular Trichome Exudate and Leaf Extracts of Polymnia sonchifolia", Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 56(10), pp 1562-1564 26 Khajehei F., Merkt N., et al (2018), "Yacon (Smallanthus sonchifolius Poepp & Endl.) as a Novel Source of Health Promoting Compounds: Antioxidant Activity, Phytochemicals and Sugar Content in Flesh, Peel, and Whole Tubers of Seven Cultivars", Molecules, 23(2), pp 278 27 Lachman Jaromir, Fernández Eloy, et al (2003), "Yacon [Smallanthus sonchifolia (Poepp et Endl.) H Robinson] chemical composition and use - A review", Plant, Soil and Environment, 49(6), pp 283-290 28 Lin F., Hasegawa M., et al (2003), "Purification and identification of antimicrobial sesquiterpene lactones from yacon (Smallanthus sonchifolius) leaves", Biosci Biotechnol Biochem, 67(10), pp 2154-9 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 29 Mendoza Rachelle, Vidar Warren, et al (2018), "In vitro Cytotoxic Potential of Yacon (Smallanthus sonchifolius) Against HT-29, MCF-7 and HDFn Cell Lines", Journal of Engineering and Applied Sciences, 13, pp 3683-3691 30 Myint Phyu, Dao Thien, et al (2019), "Anticancer Activity of Smallanthus sonchifolius Methanol Extract against Human Hepatocellular Carcinoma Cells", Molecules, 24, pp 3054 31 Oliveira PM, Coelho RP, et al (2016), "Supplementation with the yacon root extract (Smallanthus sonchifolius) improves lipid, glycemic profile and antioxidant parameters in wistar rats hypercholesterolemic", World J Pharm Pharm Sci, 5, pp 2284-2300 32 Padla Eleanor, Solia Ludivina, et al (2012), "Antibacterial and antifungal properties of ent-kaurenoic acid from Smallanthus sonchifolius", Chinese Journal of Natural Medicines, 10, pp 408-414 33 Pereira Juciane, Teixeira Meryene, et al (2016), "Total antioxidant activity of yacon tubers cultivated in Brazil", Ciência e Agrotecnologia, 40(5), pp 596-605 34 Phuong Nguyen Thi, Tuyet Hoang Thi, et al (2018), "HPTLC Densitometry Method for the Quantification of Nystose in Radix Morindae officinalis Collected from Different Regions in Vietnam", Journal of Medicinal Materials, 23(3), pp 131136 35 Russo D., Malafronte N., et al (2015), "Antioxidant activities and quali- quantitative analysis of different Smallanthus sonchifolius [(Poepp and Endl.) H Robinson] landrace extracts", Nat Prod Res, 29(17), pp 1673-7 36 Scheid M M., Genaro P S., et al (2014), "Freeze-dried powdered yacon: effects of FOS on serum glucose, lipids and intestinal transit in the elderly", Eur J Nutr, 53(7), pp 1457-64 37 Simonovska B., Vovk I., et al (2003), "Investigation of phenolic acids in yacon (Smallanthus sonchifolius) leaves and tubers", J Chromatogr A, 1016(1), pp 89-98 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn