Tổng quan về aptamer và ứng dụng trong trị liệu ung thư

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HIỀN TỔNG QUAN VỀ APTAMER VÀ ỨNG DỤNG TRONG TRỊ LIỆU UNG THƯ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2021 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THỊ HIỀN MSV: 1601249 TỔNG QUAN VỀ APTAMER VÀ ỨNG DỤNG TRONG TRỊ LIỆU UNG THƯ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Thị Lập TS Đào Thị Thanh Hiền Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa sinh – Đại học Dược Hà Nội HÀ NỘI - 2021 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, cho phép gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Thị Lập - Bộ mơn Hóa sinh TS Đào Thị Thanh Hiền – Bộ môn Dược học cổ truyền, trường Đại học Dược Hà Nội tận tình giúp đỡ, bảo tạo điều kiện tốt cho học tập, nghiên cứu hồn thiện khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ Đại học Tôi xin cảm ơn thầy cơ, giáo vụ mơn Hóa sinh – Đại học Dược Hà Nội quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện cho tơi hồn thành khóa luận Lĩnh vực đề cập khóa luận hướng nghiên cứu giới, song tìm tịi, khơi gợi từ 30 năm trước phát triển mạnh mẽ Do vậy, tổng quan khơng thể tránh khỏi sai sót Tơi mong nhận đóng góp, phê bình thầy bạn để luận hồn chỉnh Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến bố mẹ, gia đình bạn bè ln ln bên cạnh khích lệ động viên học tập sống Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên Nguyễn Thị Hiền MỤC LỤC Trang bìa Trang bìa phụ Lời cảm ơn MỤC LỤC Trang DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN VỀ APTAMER VÀ CÔNG NGHỆ SELEX…… 1.1 Định nghĩa…………………………………………………………………… 1.2 Đặc điểm aptamer……………………………………………………… 1.2.1 Cấu trúc chức aptamer……………………………………… 1.2.2 Phân loại aptamer…………………………………………………………… 1.2.2.1 Aptamer ARN ……………………………………………………………………… 1.2.2.2 Aptamer ADN …………………………………………………………………… 1.2.2.3 Peptid aptamer…………………………………………………………………… 1.3 Công nghệ SELEX tạo aptamer ………………………………………… 1.3.1 Nguyên tắc………………………………………………………………… 1.3.2 Quy trình…………………………………………………………………… 1.3.2.1 Tạo thư viện aptamer ban đầu………………………………………………… 1.3.2.2 Sàng lọc…………………………………………………………………………… 1.3.2.2.1 Dựa protein tinh khiết …………………………………………………… 1.3.2.2.2 Dựa toàn tế bào……………………………………………………… 10 1.3.2.2.3 Dựa động vật……………………………………………………………… 11 CHƯƠNG 2: ỨNG DỤNG APTAMER TRONG ĐIỀU TRỊ UNG THƯ…… 13 2.1 Đặc điểm khối u ung thư khó khăn, thách thức điều trị… 13 2.2 Ứng dụng aptamer phân phối thuốc………………………………… 14 2.2.1 Aptamer hóa trị liệu ………………………………………………… 15 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.2.2 Aptamer liệu pháp gen……………………………………………… 19 2.2.3 Aptamer xạ trị………………………………………………………… 27 2.3 Aptamer liệu pháp miễn dịch………………………………………… 28 2.3.1 Aptamer nhắm mục tiêu màng tế bào……………………………………… 29 2.3.1.1 Aptamer tăng cường đáp ứng miễn dịch…………………………………… 30 2.3.1.2 Aptamer công nghệ chuyển tế bào nuôi………………………………… 30 2.3.2 Aptamer tăng nhớ miễn dịch tế bào…………………………………… 32 2.4 Aptamer thuốc điều trị……………………………………………… 33 CHƯƠNG 3: NHỮNG THÁCH THỨC TRONG PHÁT TRIỂN APTAMER HIỆN NAY………………………………………………………………………… 36 3.1 Ưu điểm aptamer………………………………………………………… 36 3.2 Những thách thức giải pháp phát triển liệu pháp aptamer… 37 3.2.1 Ổn định aptamer…………………………………………………………… 37 3.2.2 Thải trừ qua thận………………………………………………………… 37 3.2.3 Độc tính aptamer……………………………………………………… 38 3.2.4 Một số nhược điểm phân phối thuốc……………………………… 38 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN………………………………………………………… 40 4.1 Về cấu trúc, chức aptamer phương pháp tạo aptamer…… 40 4.1.1 Về cấu trúc, chức aptamer……………………………………… 40 4.1.2 Về công nghệ SELEX……………………………………………………… 41 4.2 Về ứng dụng aptamer điều trị ung thư……………………………… 42 4.3 Về thành tựu điều trị ung thư hướng phát triển tương lai aptamer…………………………………………………………………… KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT TÀI LIỆU THAM KHẢO Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 44 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Tiếng Anh Tiếng Việt ADN Deoxyribonucleic acid Acid deoxyribonucleic ACT Adoptive cell transfer Công nghệ chuyển tế bào nuôi ALCL Anaplastic large cell lymphoma U Lympho tế bào lớn thoái sản ALK Anaplastic lymphoma kinase Anaplastic lymphoma kinase ALL Acute lymphocytic leukemia Bệnh bạch cầu tăng lympho bào cấp tính AML Acute myelogenous leukemia Bệnh bạch cầu cấp tính dịng tế bào tủy xương ApDC Aptamer-drug conjugates Liên hợp thuốc-aptamer ARN Ribonucleic acid Acid ribonucleic Cab Cabazitaxe Cabazitaxe CLL Chronic lymphocytic leukemia Bệnh bạch cầu mạn tính dịng Lympho Clustered regularly interspaced Nhóm đoạn ngắn đối xứng short palindromic repeats lặp lại thường xuyên Cytotoxic T-lymphocyte Tế bào lympho T gây độc liên associated protein kết với protein Dox Doxorubicin Doxorubicin EGFRvIII Epidermal growth factor receptor Biến thể III thụ thể yếu tố tăng variant III trưởng biểu bì EpCAM Epithelial cell adhesion molecule Phân tử kết dính tế bào biểu mô FDA Food and drug administration Cơ quan quản lý Thực phẩm CRISPR CTLA4 Dược phẩm Hoa Kỳ Ung thư biểu mô tế bào gan HCC Hepatocellular carcinoma HER2 Human epidermal growth factor Yếu tố tăng trưởng biểu bì HER3 Human epidermal growth factor Yếu tố tăng trưởng biểu bì IFP Interstitial fluid pressure Áp lực dịch kẽ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MEAR BNL 1ME A.7R.1 cell Tế bào MEAR miARN Micro ARN ARN nhỏ khơng mã hóa mTOR Mammalian or mechanistic target Protein mTOR of rapamycin MUC1 Mucin Mucin NCL Nucleolin Nucleolin NF-kB Nuclear factor kappa-light-chain- Yếu tố hạt nhân chuỗi nhẹ enhancer of activated B cells kappa tăng cường tế bào B hoạt hóa NSCLC Non-small cell lung cancer Ung thư phổi không tế bào nhỏ PD-1 Programmed death receptor I Receptor chết theo chương trình I PDGF Platelet derived growth factor Yếu tố tăng trưởng có nguồn gốc tiểu cầu Platelet derived growth factor Thụ thể yếu tố tăng trưởng có receptor β nguồn gốc tiểu cầu β PD-L1 Programmed death ligand I Phối tử chết theo chương trình I PLGA-b- ( D,L lacticcoglycolic acid) block ( D,L lacticcoglycolic acid) PEG poly (ethylene glycol) block poly (ethylene glycol) PSMA Prostate specific membrane Kháng nguyên đặc hiệu màng tế antigen bào tuyến tiền liệt Systematic evolution of ligands Sự phát triển có hệ thống by exponential enrichment phối tử làm giàu theo cấp PDGFRβ SELEX số nhân SEM Scanning Electron Microscope Kính hiển vi điện tử quét shARN Small hairpin ARN ARN kẹp tóc nhỏ siARN Small interfering ARN ARN can thiệp nhỏ ssADN Single-stranded Deoxyribonucleic Acid deoxyribonucleic chuỗi acid đơn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an RISC ARN-induced silencing complex Phức hợp gây ức chế biểu ARN RT-PCR TAA Reverse transcription Polymerase Phản ứng chuỗi polymerase chain reaction phiên mã ngược Tumor-associated antigens Kháng nguyên liên quan đến khối u TALEN Transcription activator-like Công nghệ sử dụng enzym phân effector nucleases cắt acid nucleic giống yếu tố hoạt hóa phiên mã TIM-3 T cell immunoglobulin-3 Immunoglobulin-3 tế bào T TNF Tumor Necrosis Factors Yếu tố hoại tử khối u VEGF Vascular endothelial growth Yếu tố tăng trưởng nội mô factor mạch máu Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Tên Trang Một số phân tử ApDC nhắm mục tiêu tế bào ung thư liệu 22 pháp gen 2.2 Một số aptamer sử dụng để làm phân tử điều trị Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 34 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình Tên Trang 1.1 Cấu trúc bậc Aptamer ARN A30 1.2 Mô tả cấu trúc bậc bậc số loại AS1411 1.3 Quy trình sàng lọc aptamer dựa protein tinh khiết 1.4 Quy trình Cell-SELEX 10 1.5 Quy trình sàng lọc aptamer dựa động vật sống (in vivo SELEX) 11 2.1 Thuốc liên kết với aptamer hóa trị liệu 16 2.2 Cấu trúc liên hợp Dox với aptamer sau biến đổi gắn 17 thêm đuôi giàu GC 2.3 Aptamer liên kết với phân tử mang thuốc khác 19 2.4 Liên kết aptamer siARN liệu pháp gen 21 2.5 Cấu trúc liên hợp Aptamer A10 – siARN 24 2.6 Quy trình mang giải phóng Dox, siARN phức hợp nano 25 protamine-aptamer-siARN-Dox 2.7 Khả liên kết màng tế bào khả nội bào hóa 26 phức hợp nano protamine-aptamer-siARN-Dox 2.8 Sơ đồ minh họa tế bào NK liên kết với aptamer nhắm mục tiêu tế bào HepG2 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 31 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an từ vài nM đến vài pM Các Kd tương đương với Kd kháng thể đơn dòng đảm bảo khả liên kết chặt chẽ với mục tiêu Ví dụ, gefitinib (Iressa ®, AstraZeneca), liên kết với kinase EGFR với Kd 53,5 nM, Kd cetuximab (Erbitux ®, ImClone, Branchburg), kháng thể đơn dịng ức chế EGFR có Kd với mục tiêu nhỏ nhiều (2,3 nM) Bên cạnh đó, aptamer ARN chứa 2'-fluoropyrimidin kháng nuclease, đặt tên CL4 aptamer kháng EGFR sửa đổi 2'-fluoropyrimidin so sánh với kháng thể, tương ứng 10 nM 2,4 nM [92] Chỉ số Kd giám sát trình chọn lọc aptamer SELEX, vòng lặp sau Kd nhỏ dần Bên cạnh kiểm soát số Kd, nhà khoa học cần quan tâm đến Kon Koff [57] Các phân tử mục tiêu aptamer phong phú từ phân tử tế bào (ADN/ARN, coenzym, acid amin, carbohydrat) đến phân tử tế bào, với loại mục tiêu có phương pháp liên kết riêng Ví dụ, aptamer liên kết với nucleotid cấu trúc tương tự nucleotid cách liên kết với ATP, aptamer liên kết với Coenzym chủ yếu qua liên kết với adenosine, … [74] Các liên kết aptamer phân tử thuốc đề cập luận, nhiên liên kết aptamer phân tử mục tiêu chưa làm rõ chúng tơi nghĩ hướng nghiên cứu thú vị cần bàn luận sâu 4.1.2 Về công nghệ SELEX SELEX công nghệ chủ yếu để sàng lọc aptamer ARN/ADN, trình bày phần 1.3, SELEX dựa protein tinh khiết, tế bào tồn mơ Tuy nhiên phương pháp có ưu, nhược điểm định Đầu tiên, công nghệ SELEX dựa protein, công nghệ áp dụng cho nhiều loại protein protein bề mặt tế bào, tế bào chí protein bên ngồi tế bào, khơng thể áp dụng cho protein chưa biết đến (chưa biết đặc tính vật lý, hóa lý protein đó), protein khơng hòa tan, protein hoạt động cấu trúc tự nhiên phức hợp đa protein Trong số trường hợp, aptamer tạo thông qua SELEX dựa protein tinh khiết nhận protein mục tiêu bề mặt tế bào [42] Thêm nữa, trình tinh chế protein cần sử dụng tác nhân vật lý hóa học khác nhau, điều làm ảnh hưởng đến cấu trúc, đặc tính chí số protein cịn bị biến tính bất hoạt Một protein chiết tách khơng cịn đặc tính 41 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an chúng tồn tế bào trình sàng lọc aptamer xác chí khơng cịn ý nghĩa Thứ hai, kỹ thuật sàng lọc aptamer dựa động vật sống, phát triển để aptamer xâm nhập trực tiếp vào mô tế bào thể, với nhiều ưu điểm như: sàng lọc phân tử protein mục tiêu hoạt động thể sống mà không hoạt động ống nghiệm; mục tiêu protein bên tế bào đánh giá ảnh hưởng tế bào khác lên aptamer tế bào mục tiêu Tuy nhiên công nghệ SELEX dựa động vật sống chưa sử dụng phổ biến chi phí cao việc tách aptamer sau lựa chọn khỏi tế bào, mô, quan tương đối khó khăn Bên cạnh đó, sử dụng động vật để sản xuất thuốc gặp vấn đề đạo đức xã hội Thứ ba, công nghệ CELL-SELEX có nhược điểm việc ni cấy tế bào ống nghiệm phức tạp, nhiều protein tế bào sau khỏi thể hoạt động thời gian ngắm Thêm nữa, việc sử dụng loại tế bào lành để đối chiếu giảm tối đa độc tính thuốc tế bào lành khác thể [91] Tuy có số hạn chế, song Cell-SELEX có nhiều tính ưu việt so với SELEX truyền thống như: ổn định, bị ảnh hưởng tác nhân vật lý hóa học, tốn kém, thực với dấu ấn sinh học loại trừ aptamer ảnh hưởng đến tế bào lành Ưu điểm CELL SELEX so với SELEX dựa động vật sống ấn tượng chi phí sản xuất thấp, việc sàng lọc thực tách chuỗi oligonucleotid khỏi mô, tế bào mục tiêu đơn giản Vì ưu điểm so với hai kỹ thuật lại mà Cell-SELEX sử dụng phổ biến để sàng lọc aptamer cho ứng dụng chẩn đoán trị liệu bệnh 4.2 Về ứng dụng aptamer điều trị ung thư Các phương pháp điều trị ung thư truyền thống hóa trị, xạ trị, gen trị liệu gặp phải thách thức liên quan đến vận chuyển thuốc mục tiêu Hạn chế làm cho phương pháp gây tác dụng không mong muốn tế bào lành (đặc biệt tế bào cịn non biệt hóa), hiệu chưa cao tỷ lệ kháng thuốc lớn Kháng thể đơn dòng phát triển vào năm 1975 đến có khoảng 20 loại cấp phép điều trị giải vấn đề mang thuốc nhắm mục tiêu hiệu Tuy nhiên kháng thể đơn dịng lại gặp thách thức khác Do kích thước lớn (khoảng 42 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 160 kDa) nên kháng thể khó tiếp cận tế bào mục tiêu Các kháng thể đơn dòng hầu hết có chất glycoprotein nên thường nhạy cảm với nhiệt độ, pH biến tính protein không thuận nghịch nên việc bảo quản phức tạp Chi phí sản xuất lớn kháng thể đơn dịng có tính sinh miễn dịch nhược điểm mà nhóm thuốc gặp phải Các aptamer đời giải nhược điểm kháng thể đơn dòng Bên cạnh lực với mục tiêu tương tự kháng thể đơn dòng aptamer cịn có mục tiêu đa dạng nhiều, chúng hướng tới mục tiêu phân tử nhỏ, gen, protein tế bào chí tế bào Aptamer tổng hợp phương pháp hóa học dễ sửa đổi nên tích hợp nhiều loại phân tử thuốc khác liên hợp với aptamer Điều giúp tối đa hóa việc mang thuốc, liên hợp thuốc có nhiều chế tác dụng khác tăng hiệu điều trị ung thư Bên cạnh đó, việc liên kết với phân tử khác không ảnh hưởng đến cấu trúc không gian aptamer nên lực với mục tiêu không bị thay đổi Hiện có nhiều nghiên cứu chứng minh ưu aptamer so với kháng thể đơn dịng, số nghiên cứu Dongxi cộng chứng minh khả xâm nhập khối u aptamer ưu việt so với kháng thể đơn dịng có mục tiêu EpCAM [83] Kết quả, aptamer EpCAM có mặt vị trí trung tâm khối u 15 phút sau tiêm lưu giữ 24 giờ, kháng thể EpCAM xâm nhập vào đến trung tâm khối u sau 240 phút tiêm gần khơng cịn tồn khối u sau Điều chứng minh aptamer EpCAM có khả xâm nhập lưu lại khối u vượt trội so với kháng thể EpCAM Tuy có ưu điểm vượt trội vai trò phân tử mang thuốc, xong chưa có thử nghiệm lâm sàng liên quan đến vai trò aptamer Hiện có tổng aptamer ARN aptamer ADN đưa vào thử nghiệm lâm sàng cho điều trị nhiều bệnh khác thối hóa điểm vàng, viêm, ung thư; song chúng phân tử có khả ức chế mục tiêu mà khơng đóng vai trò mang thuốc điều trị [42] Aptamer mang thuốc nội bào chủ yếu nhờ chế vận chuyển tích cực, khả nội bào hóa đáng hy vọng kích thước phân tử nhỏ nhiên tỷ lệ thuốc vào đến tế bào chất có thực mong đợi? Một nghiên cứu cho thấy có khoảng 1% thuốc hóa trị đưa đến tế bào chất liên hợp với aptamer [71] Hơn nữa, trình chuyển hóa loại bỏ khỏi tế 43 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an bào aptamer chưa nghiên cứu rõ ràng Nguyên nhân dẫn tới tỷ lệ nội bào hóa thuốc thực tế thấp, cách khắc phục hạn chế chế loại bỏ aptamer khỏi tế bào cần nghiên cứu rộng sâu thời gian tới Bên cạnh đó, phân tử chọn lọc tế bào mục tiêu, loại trừ tế bào lành cấu trúc monome thân thiện với thể người, song có độc tính liên quan đến aptamer tăng men gan, tăng thời gian chảy máu độc tính liên quan đến PEG báo cáo 4.3 Về thành tựu điều trị ung thư hướng phát triển tương lai aptamer Hiện phân tử aptamer có vai trị điều trị biết tới phổ biến rộng rãi, điển hình Pegaptanib - aptamer nhắm mục tiêu VEGF FDA cấp phép vào năm 2011 điều trị thối hóa điểm vàng tuổi ban đầu nghiên cứu để ứng dụng điều trị ung thư Những nghiên cứu phân tử thuốc aptamer điều trị ung thư đạt nhiều kết khả quan Điển hình phân tử AS1411 – aptamer đưa vào thử nghiệm lâm sàng Với kết đầy hứa hẹn đánh giá lâm sàng ban đầu, thử nghiệm giai đoạn II tiến hành bệnh nhân ung thư biểu mô tế bào thận kháng trị, di căn, nhận thấy thuốc có hoạt tính hạn chế bệnh nhân Chỉ có bệnh nhân (trong tổng số 33 bệnh nhân chọn) có đáp ứng Tuy nhiên đáp ứng bệnh nhân lớn, bệnh nhân giảm 84% kích thước khối u sau chu kì điều trị khơng tái phát sau năm [43], [92] Mặc dù tiếp tục tiến hành thử nghiệm lâm sàng giai đoạn III dược động học thuốc chưa tối ưu hiệu aptamer giai đoạn II chưa chứng minh rõ ràng, AS1411 cịn nghiên cứu nhiều bệnh ung thư khác ung thư bạch cầu, ung thư phổi không tế bào nhỏ, ung thư biểu mô tế bào gan liên hợp với Gemcitabine điều trị ung thư tuyến tụy hướng tới thuốc có hiệu nhiều loại ung thư khác Tuy nhiên, việc tối ưu thông số dược động học AS1411 cần nghiên cứu cẩn thận việc đánh giá hiệu cần khách quan Các nghiên cứu aptamer phong phú đa dạng, hầu hết phương pháp điều trị ung thư có mặt phân tử aptamer Tuy nhiên, nghiên cứu lâm sàng thuốc aptamer điều trị ung thư hạn chế (mới có 44 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an aptamer đến thử nghiệm giai đoạn II kết chưa kì vọng, dẫn tới phải ngừng sớm thử nghiệm lâm sàng giai đoạn tiếp theo) đưa nhiều thách thức việc nghiên cứu kĩ biomarker bệnh ung thư mục tiêu aptamer hướng đến, đồng thời cải thiện thông số dược động học khả nội bào hóa cần đánh giá cẩn thận Ngồi phương pháp điều trị, thành công liệu pháp điều trị ung thư phụ thuộc nhiều vào giai đoạn bệnh Một số loại ung thư có tỷ lệ tử vong sau năm lớn ung thư biểu mô tế bào gan (HCC), ung thư tuyến tụy, … đặt vấn đề cấp thiết lâm sàng để phát hiện, sàng lọc ung thư sớm [82]? Aptamer khơng có vai trị điều trị mà cịn ứng dụng chẩn đốn sớm số loại ung thư Ví dụ với bệnh bạch cầu có nhiều aptamer sử dụng để chẩn đoán, chẳng hạn aptamer Siglec-5 liên kết với mục tiêu AML, aptamer Sgc8 liên kết với mục tiêu ALL, aptamer AP1 liên kết với mục tiêu CLL Aptamer liên kết với phân tử huỳnh quang kết hợp với công cụ chẩn đốn thơng thường khác chẩn đốn sớm bệnh ung thư [35], [91], [96] Ngồi aptamer cịn ứng dụng điều trị nhiều bệnh khác viêm, nhiễm khuẩn, nhiễm virus, rối loạn đơng máu, thối hóa điểm vàng tuổi, … Tuy nhiên, khn khổ khóa luận này, chúng tơi đề cập đến vai trò aptamer nghiên cứu điều trị bệnh ung thư, ứng dụng khác phân tích kỹ nghiên cứu 45 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT KẾT LUẬN Qua thời gian nghiên cứu đề tài, đạt kết theo mục tiêu nghiên cứu đề tài đề sau: Đã tổng hợp phân tích cấu trúc, chức phân loại aptamer; công nghệ tạo aptamer, nguyên tắc quy trình sàng lọc aptamer Đã tổng hợp phân tích ứng dụng aptamer điều trị ung thư nay: aptamer hỗ trợ mang thuốc liệu pháp điều trị ung thư cổ điển hóa trị liệu, gen trị liệu, xạ trị; aptamer phương pháp miễn dịch trị liệu aptamer thuốc điều trị Đã phân tích ưu, nhược điểm công nghệ aptamer bao gồm thách thức biện pháp giải thách thức việc phát triển aptamer, đưa aptamer vào trị liệu ĐỀ XUẤT Sau nghiên cứu tổng quan aptamer ứng dụng điều trị ung thư, chúng tơi có đưa số đề xuất sau: Tiếp tục nghiên cứu biện pháp khắc phục nhược điểm aptamer, tăng cường độ ổn định aptamer, kéo dài thời gian bán thải tăng cường khả vận chuyển thuốc vào mô khối u rắn aptamer Nghiên cứu sâu liên kết aptamer phân tử mục tiêu, ưu điểm, nhược điểm liên kết kiểu hướng nghiên cứu để khắc phục nhược điểm Mở rộng nghiên cứu ứng dụng aptamer chẩn đoán ung thư điều trị số bệnh lý khác viêm, nhiễm khuẩn, nhiễm virus, … 46 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt [1] Bộ Y Tế (2018), Điểm tin y tế ngày 29/8/2018 [2] Nguyễn Bá Đức (2001), Bài giảng ung thư học, Nhà xuất Y học, Hà Nội Tiếng Anh [3] Aakhin V.L et al (2013), "Aptamers: Problems, Solutions and Prospects", Acta Naturae, 5(4), pp 34–43 [4] Akdim F et al (2010), "Efficacy and safety of mipomersen, an antisense inhibitor of apolipoprotein B, in hypercholesterolemic subjects receiving stable statin therapy", J Am Coll Cardiol, 55(15), pp 1611-1618 [5] Ana C.A et al (2016), "Lag-3, Tim-3, and TIGIT co-inhibitory receptors with specialized functions in immune regulation ", Immunity, 44(5), pp 89–1004 [6] Askarian S et al (2015), "Biointerfaces Cellular delivery of shRNA using aptamerconjugated PLL-alkyl-PEI nanoparticles ", Colloids Surf B Biointerfaces, 136, pp 355– 364 [7] Ayatollahi S et al (2017), "Aptamer-targeted delivery of Bcl-xL shRNA using alkyl modified PAMAM dendrimers into lung cancer cells", Int J Biochem Cell Biol, 92, pp 210–217 [8] Bandekar A et al (2014), " Anti-prostate-specific membrane antigen liposomes loaded with 225Ac for potential targeted antivascular α-particle therapy of cancer ", J Nucl Med, 55(1), pp 107-14 [9] Berezhnoy A et al (2014), "Aptamer-targeted inhibition of mTOR in T cells enhances antitumor immunity Find the latest version: Aptamer-targeted inhibition of mTOR in T cells enhances antitumor immunity", J Clin Investig, 124, pp 188–197 [10] Berezhnoy A, et al (2014), "A clinically useful approach to enhance immunological memory and antitumor immunity", Oncoimmunology, 3, pp e28811 [11] Bin Zhu, et al (2015), "Synthesis of 2′-Fluoro ARN by Syn5 ARN polymerase", Nucleic Axits Res, 43(14), pp e94 [12] British Medical Association (2018), British national formulary: BNF 76, pp 900 47 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [13] Bujpo U.S et al (2011), "Prostate-targeted radiosensitization via aptamer-shARN chimeras in human tumor xenografts", J Clin Investig, 121, pp 2383–2390 [14] Cai S et al (2018), "Investigations on the interface of nucleic axit aptamer and binding targets ", Analyst, 143(22), pp 5317-5338 [15] Calin GA et al (2006), "MicroARN signatures in human cancers", Nat Rev Cancer, 6(11), pp 857–866 [16] Carl H et al (2004), "High interstitial fluid pressure - an obstacle in cancer therapy", Nature Reviews Cancer, 4, pp 806–813 [17] Carlos E.B et al (2017), "Aptamer delivery of siARN, radiopharmaceutics and chemotherapy agents in cancer", International Jouarnl of Pharmaceutics, 525(2), pp 334342 [18] Catuogno S et al (2015), "Selective delivery of therapeutic single strand antimiRs by aptamer-based conjugates", J Control Release, 210, pp 147–159 [19] Cibiel A1 et al (2012), "In vivo uses of aptamer selected against cell surface biomarkers for therapy and molecular imaging", Biochimie, 94(7), pp 1595-1606 [20] Cibran P et al (2016), "Fluorescence-Based Strategies to Investigate the Structure and Dynamics of Aptamer-Ligand Complexes ", Front Chem, 4, pp 33 [21] Cy A Stein1 and Daniela Castanotto (2017), "FDA-Approved Oligonucleotit Therapies in 2017 ", Mol Ther, 25(5), pp 1069–1075 [22] Dassie J.P et al (2009), "Articles Systemic administration of optimized aptamersiARN chimeras promotes regression of PSMA-expressing tumors", Nat Biotechnol, 27, pp 839 [23] Ellington AD et al (1990), "In vitro selection of ARN molecules that bind specific ligands", Nature Reviews Cancer, 346(6287), pp 818-822 [24] Esposito C.L et al (2018), "STAT3 Gene Silencing by Aptamer-siARN Chimera as Selective Therapeutic for Glioblastoma", Mol Ther Nucleic Axits, 10, pp 398–411 [25] Esposito C.L et al (2016), "De A combined microARN-based targeted therapeutic approach to eradicate glioblastoma stem-like cells", J Control Release, 238, pp 43–57 [26] Esposito C.L et al (2014), "Multifunctional Aptamer-miARN Conjugates for Targeted Cancer Therapy ", Mol Ther, 22, pp 1151–1163 48 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [27] Evangelos S Gragoudas et al (2004), "Pegaptanib for Neovascular Age-Related Macular Degeneration", N Engl J Med, 51, pp 2805-2816 [28] Farhana L et al (2016), "In vitro evolution of chemically-modified nucleic axit aptamer: Pros and cons, and comprehensive selection strategies", ARN Biol, 13(12), pp 1232–1245 [29] Gilboa-Geffen A et al (2015), "Gene Knockdown by EpCAM Aptamer-siARN Chimeras Suppresses Epithelial Breast Cancers and Their Tumor-Initiating Cells", Mol Cancer Ther, 14, pp 2279–2291 [30] Gilboa E1 et al (2015), "Reducing Toxicity of Immune Therapy Using AptamerTargeted Drug Delivery", Cancer Immunol Res, 3(11), pp 1195-200 [31] Gold L et al (1995), "Diversity of oligonucleotit functions ", Annu Rev Biochem, 64, pp 763-797 [32] Gold L et al (1990), "Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: RNA ligands to bacteriophage T4 DNA polymerase", Science, 249(4968), pp 505–510 [33] Guizhi Zhu et al (2018), "Aptamer-based targeted therapy.", Adv Drug Deliv Rev, 134, pp 65–78 [34] Guizhi Zhu et al (2013), "Self-assembled, aptamer-tethered ADN nanotrains for targeted transport of molecular drugs in cancer theranostics ", Proc Natl Acad Sci USA, 110(20), pp 7998–8003 [35] Guo-Qing Zhang et al (2019), "Screening of aptamer and their potential application in targeted diagnosis and therapy of liver cancer", World J Gastroenterol, 25(26), pp 3359– 3369 [36] Herandez FJ et al (2012), "Degradation of nuclease-stabilized ARN oligonucleotits in Mycoplasma-contaminated cell culture media", Nucleic Axit Ther, 22(1), pp 58-68 [37] Herrmann A et al (2015), "CTLA4 aptamer delivers STAT3 siARN to tumorassociated and malignant T cells", J Clin Invest, 125(6), pp 2547 [38] Inga N et al (2019), "Elimination of HER3-expressing breast cancer cells using aptamer-siRNA chimeras", Exp Ther Med, 18(4), pp 2401–2412 [39] Jaison J et al (2020), "Advancing Aptamer as Molecular Probes for Cancer Theranostic Applications-The Role of Molecular Dynamics Simulation", Biotechnol J, 15(3), pp 1-65 49 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [40] Jake C et al (2017), "A review of the development of tumor vasculature and its effects on the tumor microenvironment", Hypoxia (Auckl), 5, pp 21-32 [41] James O et al (2006), "Cell type–specific delivery of siRNAs with aptamersiRNA chimeras", Nat Biotechnol, 24(8), pp 1005-15 [42] Jiehua Zhou et al (2017), "Aptamer as targeted therapeutics: current potential and challenges", Nat Rev Drug Discov, 16(3), pp 181–202 [43] Jonathan E.R et al (2014), "A phase II trial of AS1411 (a novel nucleolin-targeted DNA aptamer) in metastatic renal cell carcinoma", Clinical Trial, 32(1), pp 178-87 [44] Jonathan K.T et al (1999), "Penetration of anticancer drugs through solid tissue: a factor that limits the effectiveness of chemotherapy for solid tumors", Clin Cancer Res, 5(6), pp 1583-6 [45] Ksong M, et al (2012), "Aptamer and their biological applications", Sensors (Basel, Switzerland), 12, pp 612-631 [46] Kim E et al (2010), "Biomaterials Prostate cancer cell death produced by the codelivery of Bcl-xL shARN and doxorubicin using an aptamer-conjugated polyplex", Biomaterials, 31, pp 4592–4599 [47] Kotula J.W et al (2012), "Aptamer-Mediated Delivery of Splice-Switching Oligonucleotits to the Nuclei of Cancer Cells ", Nucleic Axit Ther, 22(3), pp 187-195 [48] Kylan Szeto et al (2013), "RAPID-SELEX for Aptamer ARNs", PLoS One, 8(12), pp e82667- [49] Laboni M et al (2016), "Aptamer-miARN-212 Conjugate Sensitizes NSCLC Cells to TRAIL ", Mol Ther Nucleic Axits, 5(3), pp 1-12 [50] Ling M et al (2012), "Targeted Delivery of Chemotherapy Agents Using a Liver Cancer-Specific Aptamer", PLoS One, 7(4), pp e33434 [51] Liu J et al (2020), "ARN-based therapeutics for colorectal cancer: Updates and future directions", Pharmacol Res, 152, pp 104550 [52] Mario M Soldevilla et al (2018), "Aptamer-iRNAs as Therapeutics for Cancer Treatment", Pharmaceuticals (Basel), 11(4), pp 108 [53] McNamara J.O et al (2006), "Cell type-specific delivery of siARNs with aptamersiARN chimeras ", Nat Biotechnol, 24, pp 1005–1015 50 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [54] Mi J1 et al (2010), "In vivo selection of tumor-targeting ARN motifs", Nat Chem Biol, 6(1), pp 22-4 [55] Minhee Kim et al (2018), "Applications of Cancer Cell-Specific Aptamer in Targeted Delivery of Anticancer Therapeutic Agents", Molecules, 23(4), pp 830 [56] Mostafa K et al (2015), "Cancer immunotherapy via nucleic acid aptamers", Int Immunopharmacol, 29(2), pp 926-936 [57] Naznin A et al (2012), "Development of a Novel DNA Aptamer Ligand Targeting to Primary Cultured Tumor Endothelial Cells by a Cell-Based SELEX Method", PLoS One, 7(12), pp e50174 [58] Nithya S et al (2012), "Target-specific delivery of doxorubicin to retinoblastoma using epithelial cell adhesion molecule aptamer", Mol Vis, 18, pp 2783–2795 [59] P J Bates et al (2009), "Discovery and development of the G-rich oligonucleotit AS1411 as a novel treatment for cancer", Experimental and molecular pathology, 86, pp 151-164 [60] Pastor F et al (2010), "Induction of tumour immunity by targeted inhibition of nonsense-mediated mARN decay", Nature, 465, pp 227–230 [61] Paula J.B et al (2016), "G-quadruplex oligonucleotide AS1411 as a cancer-targeting agent: Uses and mechanisms", Biochim Biophys Acta Gen Subj, 1861(5 Pt B), pp 14141428 [62] Puplampu -Dove Y et al (2018), "Potentiating tumor immunity using aptamer-targeted ARNi to render CD8+ T cells resistant to TGFβ inhibition ", Oncoimmunology, 7, pp e1349588- [63] Q Zhu et al (2015), "Aptamer ADNs in the Diagnosis and Treatment of Human Diseases", Molecules (Basel, Switzerland), 20, pp 20979-20997 [64] Rajagopalan A et al (2017), "Aptamer-Targeted Attenuation of IL-2 Signaling in CD8+ T Cells Enhances Antitumor Immunity", Mol Ther, 25, pp 54–61 [65] Robertson DL and Joyce GF (1990), "Selection in vitro of an ARN enzyme that specifically cleaves single-stranded ADN", Nature, 344(6265), pp 467-468 [66] Rohde J.-H et al (2015), "A Universal Aptamer Chimera for the Delivery of Functional microARN-126", Nucleic Axit Ther, 25, pp 141–151 51 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [67] RuoWen Wang et al (2014), "Automated Modular Synthesis of Aptamer–Drug Conjugates for Targeted Drug Delivery", J Am Chem Soc, 136(7), pp 2731–2734 [68] Sandra Hervas-Stubbs et al (2016), "Identification of TIM3 2′-fluoro oligonucleotit aptamer by HT-SELEX for cancer immunotherapy ", Oncotarget, 7(4), pp 4522–4530 [69] Sandrine Faivre et al (2006), "Current development of mTOR inhibitors as anticancer agents", Nature Reviews Drug Discovery, 5, pp 671–688 [70] Sergey R et al (2015), "Peptide Aptamers: Development and Applications", Curr Top Med Chem, 15(12), pp 1082–1101 [71] Silvia N et al (2019), "Potential and Challenges of Aptamers as Specific Carriers of Therapeutic Oligonucleotides for Precision Medicine in Cancer", Cancers (Basel), 11(10), pp 1521 [72] Soldevilla M.M et al (2015), "2-fluoro-ARN oligonucleotit CD40 targeted aptamer for the control of B lymphoma and bone-marrow aplasia", Biomaterials, 67, pp 274–285 [73] Soundararajan S et al (2008), "The nucleolin targeting aptamer AS1411 destabilizes Bcl-2 messenger ARN in human breast cancer cells", Cancer Res, 68(7), pp 2358-2365 [74] Sven K (2006), The Aptamer handbook_ Functional Oligonucleotits and their Applications, WILEY-VCH Verlag GmbH & Co KGaA, Weinheim, pp 3-11 [75] Tanno T et al (2017), "An aptamer-based targeted delivery of miR-26a protects mice against chemotherapy toxicity while suppressing tumor growth", Blood Adv, 1(15), pp 1107-1119 [76] TaoWang et al (2019), "Three decades of nucleic axit aptamer technologies: Lessons learned, progress and opportunities on aptamer development", Volume, 37(1), pp 28-50 [77] Tian Tian et al (2019), "mTOR Signaling in Cancer and mTOR Inhibitors in Solid Tumor Targeting Therapy ", Int J Mol Sci, 20(3), pp 755 [78] Tucker CE et al (1999), "Detection and plasma pharmacokinetics of an anti-vascular endothelial growth factor oligonucleotit-aptamer (NX1838) in rhesus monkeys", J Chromatogr B Biomed Sci Appl, 732(1), pp 203-212 [79] Tuerk C et al (1990), "Systematic evolution of ligands by exponential enrichment: ARN ligands to bacteriophage T4 ADN polymerase", Science, 249(4968), pp 505-510 52 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [80] U.S Food and Drug Administration (FDA) (2018), "What is Gene Therapy", Retrieved, from [81] US National Library of Medicine Cancer Chemotherapy Definitions, pp [82] WHO (2018), "Statistics of deaths due to cancer", Cancer [83] Xiang D et al (2015), "Superior Performance of Aptamer in Tumor Penetration over Antibody: Implication of Aptamer-Based Theranostics in Solid Tumors", Theranostics, 5(10), pp 1083-97 [84] Xing-Jie L et al (2011), "Circumventing Tumor Resistance to Chemotherapy by Nanotechnology ", Methods Mol Biol, 596, pp 467–488 [85] Xingmei Z et al (2018), "Effects of Aptamer to U87-EGFRvIII Cells on the Proliferation, Radiosensitivity, and Radiotherapy of Glioblastoma Cells", Mol Ther Nucleic Axits, 10, pp 438–449 [86] Xu Wu et al (2015), "Aptamer: Active Targeting Ligands for Cancer Diagnosis and Therapy", Theranostics, 5(4), pp 322–344 [87] Yan X et al (2004), "Isolation and characterization of 2'-amino-modified Aptamer ARN s for human TNFalpha", Genomics Proteomics Bioinformatics, 2(1), pp 32-42 [88] Yang Z et al (2019), "Recent Advances in Aptamer Discovery and Applications", Molecules, 24(5), pp 941 [89] Yasen M et al (2019), "Novel Insights into the Role of Aptamer in the FightAgainst Cancer ", J Cancer Res Clin Oncol, 145(4), pp 797-810 [90] Yi S et al (2014), "Stable ARN nanoparticles as potential new generation drugs for cancer therapy ", Adv Drug Deliv Rev, pp 74–89 [91] YiZhong et al (2020), "Advances of aptamer screened by Cell-SELEX in selection procedure, cancer diagnostics and therapeutics ", Volume, 598, pp 113620 [92] Yoshihiro M et al (2018), "Aptamer Therapeutics in Cancer: Current and Future", Cancers (Basel), 10(3), pp 80 [93] Yoshihiro M et al (2016), "E-selectin Targeting PEGylated-thioaptamer Prevents Breast Cancer Metastases", Mol Ther Nucleic Acids, (12), pp e399 [94] Yu-Fen H et al (2009), "Molecular Assembly of an Aptamer-Drug Conjugate for Targeted Drug Delivery to Tumor Cells", Chembiochem, 10(5), pp 862–868 53 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an [95] Yu X et al (2018), "Targeting EGFR/HER2 HER3 with a Three-in-One AptamersiARN Chimera Confers Superior Activity against HER2 + Breast Cancer", Mol Ther Nucleic Axits, 10, pp 317–330 [96] Yuan T et al (2019), "Nucleic Axit Aptamer: A Novel Potential Diagnostic and Therapeutic Tool for Leukemia", Onco Targets Ther, 12, pp 10597–10613 [97] Yun-Ling L et al (2011), "Release of Photoactivatable Drugs from Plasmonic Nanoparticles for Targeted Cancer Therapy", ACS Nano, 5(10), pp 7796–7804 [98] Yuri C et al (2016), " Modified AS1411 Aptamer Suppresses Hepatocellular Carcinoma by Up-Regulating Galectin-14", PLoS One, 11(8), pp e0160822 [99] Yuzhu C et al (2019), "Cabazitaxel liposomes with aptamer modification enhance tumor-targeting efficacy in nude mice", Mol Med Rep, 19(1), pp 490–498 [100]Zhang D et al (2020), "Equipping Natural Killer Cells with Specific Targeting and Checkpoint Blocking Aptamer for Enhanced Adoptive Immunotherapy in Solid Tumors", Angew Chem Int Ed Engl, 59(29), pp 12022-12028 [101]Zihua Z et al (2020), "Aptamer-Equipped Protamine Nanomedicine for Precision Lymphoma Therapy", Cancers, 12(4), pp 780 54 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn