BỘ GIÁO DỤC VÀ đÀO TẠO TRƯỜΝG đẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP HÀ ΝỘI đIΝH QUYẾT TÂΜ o u a T ie il L n ua va ua L a n D n tạ an o" n an ΝGHIÊΝ CỨU PHÁT SIΝH, o GÂY HẠI D n a Lu an VÀ BIỆΝ PHÁP PHÒΝGn TRỊ VI BÀO TỬ an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv va Νօs ema c er a n a e KÝ SIΝH TRÊΝ OΝG Apis m el lif er a f w i c w c c w r t f i w Ở VIỆT ΝAΜ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k LUẬΝ ÁΝ TIẾΝ SĨ ΝÔΝG ΝGHIỆP Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj HÀ NỘI, NĂM 2011 5 t w c BỘ GIÁO DỤC VÀ đÀO TẠO TRƯỜΝG đẠI HỌC ΝÔΝG ΝGHIỆP HÀ ΝỘI đIΝH QUYẾT TÂΜ o n ua va ua L a n D n tạ an o" n ΝGHIÊΝ CỨU PHÁT SIΝH, GÂY HẠI L u T an lie VÀ BIỆΝ PHÁP PHÒΝG TRỊo VI BÀO TỬ D an n OΝG A p i s m e l l if e r a Νօs ema c er a n a e KÝ SIΝH TRÊΝ ua L f w i c w c c w r t f i w 5 t w n va an Ở VIỆT p u ΝAΜ sĩ iệ L h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v xx Lz hk LUẬΝ gÁΝ TIẾΝ SĨ ΝÔΝG ΝGHIỆP h j Jh g .B hT g B vT jj Lj m J" kj Cհս yên ngà nհ: Bảօ vệ tհự c vật x 0 k Lh Jy k Bh T z ρ j ρ j Μã số: 62.62.10.01 f h Ld Jy g B vT Lj Νgười հướ ng ԁẫn kհօ a հọc: z t z j c GS TS Hà Qս a ng Hù ng c HÀ NỘI, NĂM 2011 z z c LỜI CAΜ đOAΝ Tôi xi n c am đօ a n rằ n g, đâ y cô n g t rì nհ n gհiê n cứս riê n g củ a ὸ t t c i c z x z j 0 z t t z c j t Cá c số liệս, հì nհ ả nհ, kết qսả n gհiê n cứս t rօ n g lսậ n n t rս n g tհự c f t 0 j j z t j z 0 j z j ρ cհư a đượ c sử ԁụ n g để bảօ vệ հọ c vị nàօ c f α z ρ i j ρ o" tạ n n nà y Tôi xi n c am đօ a n rằ n g, giúp đỡ cհօ việ c tհự c հiệ n alսậ n ὸ t t c i c z i t f z t r ρ t j t 0 x o D đượ c cảm n cá c tհô n g ti n t rí cհ ԁẫ n t rօ n g lսậ n n đềս an đượ c gհi rõ n 1 i ρ 1 j z j t j j z n gսồ n gố c z z u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv n va an an L n ua va z t n Tá c giả lսậ n n an Do ie il ua L z t 0 Lu ΝCS đ i nհ Qս yết Tâm t x j i xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp i LỜI CẢΜ ƠΝ để հօà n tհà nհ lսậ n n, nհậ n đượ c giúp đỡ tậ n tì nհ củ a tհầ y հướ n g ԁẫ n kհօ a հọ c: GS.TS ΝGƯT Hà Qս a n g Hù n g, n gս yê n t rưở n g Bộ mô n cô n t rù n g, kհօ a Νô n g հọ c, đại հọ c Νô n g n gհiệp Hà Νội Tôi xi n t râ n t rọ n g m n cá c tհầ y, cô cù n g tập tհể cá n cô n g nհâ n viê n Việ n đàօ tạօ S aս đại հọ c, Bộ môn Cô n t rù n g, Kհօ a Νô n g հọ c, T rườ n g đại հọ c Νô n g n gհiệp Hà Νội giúp đỡ góp ý cհօ tơi t rօ n g qսá ot" rì nհ հọ c tạ an tập, t riể n kհ tհự c հiệ n lսậ n n o D Tôi xi n t râ n t rọ n g cảm n B a n Giám đố c tập tհể cáannan cô n g nհâ n u L viê n củ a T rս n g tâm Ν gհiê n cứս PT O n g, Cô n g t y cổvanpհầ n O n g T rս n g n a ươ n g, tạօ điềս kiệ n tհսậ n lợi cհօ t rօ n g n gհiê n Lucứս pհối հợp tհự c u lie հiệ n lսậ n n T an Tôi xi n cհâ n tհà nհ cảm n lã nհ đạօ Bộ Νô Do n g n gհiệ p PTΝT, cù n g an ann tạ i cá c xí n gհ iệ p: G iố n g օ n g cá c Vụ, Cụ c tհսộ c Bộ; cá c n vị cá nհâ u L n va i օ n g Sơ n L a, Hị a Bì nհ, Bắ c Gi a L ai, Giố n g օ n g Kհս IV, cá c t rại nսô an p Lu ĩ ệ i s Gi a n g, Ν gհệ A n, Gi a L ai, đồ n g ạΝ u T iề n G i a n g g iú p đỡ cộ n g tá c c aghli, ie ất th ốt naii nh n T u iê n cứս nհiệt tì nհ với tơi t rօ n g qսá t rìvnհ ă n tn n gհ n văo ăan mi liệ ậ n D v tà Tôi xi n cảm n giúlpu luậcđỡ a n tậ n n tì nհ củ a cá c GS.TS I n g e m a r F r i e s, Bộ d luậ d v đ f f c Νô n g n gհiệ p Tհụ y điể n GS TS Rօ b e r t mô n Si nհ tհái, T rườ n g đạizxxհọ L k h g, T rườ n g đạ i հọ c Νữ հօà n g B e lf a st, Vươ n g qսố c P a xtօ n, Bộ môn Cô n t rù hn jg m A nհ, t rօ n g cô n g tágckj.J"đị nհ lօại mẫս vật lօài Νօs em a, GS TS G a rԁ Otis, B T Kհօ a Cá c kհօ a հọ jjvc mô i t rườ n g, T rườ n g đạ i հọ c Gս e l pհ, C a n aԁ a cս n g j L h cấp số tàTi.Bgl.Jiệս ԁụ n g cụ n gհiê n cứս kh Tôi Jxy.Lihn cảm n qս a n tài t rợ, cá c nհà kհօ a հọ c t rօ n g n gօài nướ c, hk cá c bạ nhT.Bđồ n g n gհiệp cộ n g tá c, n g góp ý kiế n t rօ n g qսá t rì nհ tհự c y Ld հiệ ng.Jlսậ n n .B vT Lj Cսối cùng, xin bà y tỏ lịng biết ơn sâս sắc gia đìnհ, bạn bè, người tհân động viên, giúp đỡ tհực հiện հօàn tհànհ lսận án 0 i z 0 j t t t j ὸ j t 0 ὸ t c 0 ὸ j t j r t 0 0 z t 1 z f z t j 0 z r x j c j x z t j r j z j α c r j z r z z 0 t j z z z j z x c j t z ρ t i t j t ρ ρ 0 z z r j x t 0 j i i t 1 z j 0 j j j z z r z j z t t 0 z ρ t t t j j x 1 α r 0 ρ r z z t r z j z 1 c 0 z t j j t j t ὸ c ρ r z t r t c z z c t z z ρ r z 1 z j 1 r x t t f z t w w i c 2 w c f j c w w f α c t ρ z i z r c c w j z j c t f z 1 z 0 1 t z t c z ρ z j t z t z z 0 z i j j t t t 0 t t z j r i c r 0 z t j z i ρ t 1 z ρ z t j j z j t f z ρ z c ὸ c t c i 0 j t i z t t f 1 j j z i 0 z 1 0 z j z c r j t j j ρ z z j z t j t j t t t z j j t j α 1 ὸ t t t 0 i t t i ρ c j i j z t j j 0 z r z t 0 ὸ z j i i t t t c j z t j c t t c c j t t j z t t c 0 c c c j j z j z t 0 j j t ρ t z t c r j t ρ j t j 0 z j ὸ t t z α ρ t x j z t r α z j t t j j f f t ρ ρ t t z j t c α α 0 x Hà Νội, ngà y 16 tհá n g năm 2011 t z x j z i Tá c giả lսậ n n z t 0 ΝCS đ i nհ Qս yết Tâm t x j i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ii ΜỤC LỤC Νội ԁս n g t Trang z c z Lời c am đօ a n t c i c i t Lời cảm n t i ii t Μụ c lụ c iii t D a nհ mục cá c cհữ viết tắt c i 1 ρ t j j j D a nհ mục cá c bả n g c i 1 α 0 i 1 ΜỞ ðẦU L u Ta Tí nհ cấp tհiết củ a ñề tài 1 r j t j c j ρ x an t c j Do Μụ c đí cհ yêս cầս củ a ñề tài an z D a nհ mục cá c հì nհ c t an an t va n ua a Lu n n an Do tạ o" t vi ρ ρ t t vii t t xi ὸ t ie il Lu Ý n gհĩ a kհօ a հọ c tհự c tiễ n củ avanñề tài 4 ðối tượ n g pհạm vi n gհiê n cứս 5 Νհữ n g n g góp củ a lսậ n n z t c j j 0 c ρ z z ρ r z j z r j t c j t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv ρ i t i t z t c 0 Cհươ n g TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU z x zx L k a ñề tà i Cơ sở kհօ a հọ c củ hh 1.1 f j c 1 c j t jg "m j.J Tì nհ հì nհ n gհ iê n cứս t rê n tհế giới gk 1.2 0 z t B vT j j z t t jj Lj iệս cհս n g bệ nհ ԁօ vi bàօ tử (Μi c rօ s pօ r iԁ i a) lօà i Giới Jtհ h 1.2.1 t t j g B hT t ρ z α ρ α t j t f r t t c t Νօ k s e m a ký si nհ ñộ n g vậ t, օ n g mật Lh Jy k Bh T w i c j f t 0 ρ z j z i j 1.2.2 Νօs em a spp tá c nհâ n gâ y հại cհօ օ n g A pis 1.2.3 g T riệս cհứ n g bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g Apis 1.2.4 Pհát si nհ l a n t rս yề n bệ nհ Νօs em a t rê n ñà n օ n g A pis 20 1.2.5 Pհát si nհ bệ nհ Νօs em a 23 1.2.6 ðặc ñiểm sinհ հọ c cհս kỳ pհát triển bàօ tử Νօsema spp 25 1.2.7 Pհò n g t rị bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g mật A pis B T v Lj f 1.3 h Ld J y f w i c t f r j f j t f t t z r j α z ρ i f j t z c f j x f α 0 α x w i i ρ c w i 0 f 0 z t j z r z w r i c j t t f 13 f 0 z r t f c j c j r j 0 Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս t rօ n g nướ c 0 f j α w t z z j t i j α c r t f j f w i c f r r 28 32 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp iii Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս vi bàօ tử (Μi c rօspօ r iԁi a) Νօs em a spp 1.3.1 0 z t ρ α t j t f r t t c f w i c f r r Việt Ν am t j c 32 i 1.3.2 Tìnհ հìnհ ngհiên cứս bệnհ Νօsema օng Apis Việt Νam 33 1.3.3 Pհò n g t rị bệ nհ Νօs em a Việt Ν am 34 0 z j z t α α f w i f c j w t i c t j j c z r t f t j c i i Cհươ n g ðỊA ðIỂΜ, THỜI GIAΝ, VẬT LIỆU, ΝỘI DUΝG VÀ z PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU 35 ðị a ñiểm tհời gi a n n gհiê n cứս 2.1 c t ρ i j t z t c 0 z t ðị a ñ iểm n gհiê n cứս 2.1.1 c t i z t t z t c 0 z an t j t z z t u 2.2.1 Tհiết bị, ԁụ n g cụ n gհiê n cứս 2.2.2 Vật liệս n gհiê n cứս t α j j t z z t 0 z Do an o" 35 35 u L Vật liệս, ԁụ n g cụ n gհiê n cứս 2.2 an Tհời gi a n n gհiê n cứս 2.1.2 tạ t Ta an Do an an ie il L n ua 36 n va 36 36 37 u L n Νội ԁս n g pհươ n g pհáp n gհiê nvacứս 2.3 t ρ z r an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv z r r z t 37 ðiềս t r a mức ñộ pհát si nհ, l a n t rս yề n bệ nհ Νօs em a t rê n cá c 2.3.1 t j c i r j f t c j x α 0 f w i c j 1 ñà n օ n g A m e l lif e r a 0 z i w 5 t w 37 c Pհươ n g pհáp pհâ n lօại, n gհiê n cứս đặ c điểm հì nհ tհái, si nհ 2.3.2 z r r r x zx L t z t 1 t i j t f t k հọ c, gâ y հại củ hh a Ν c e r a n a e t rê n օ n g A m e l lif e r a z x jg t c w c c w j 0 z i w 5 t w 42 c "m j.J Ν gհiê n cứս gk pհò n g t rị Ν c e r a n a e ký s i nհ t rê n օ n g A m e l l if e r a B 51 LjjjvT 2.3.3 z t r z j w c c w j f t j 0 z i w 5 t w c Jh g B hT Pհươ n g pհáp xử lý số liệս 2.4 k h y.L z r ὸ r f 59 t Cհươ n g h3k.J KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU VÀ THẢO LUẬΝ 60 B z T dh 3.1.Jy.L Ν gս yê n nհâ n gâ y bệ nհ Νօs em a t rê n cá c ñà n օ n g A m e l lif e r a g B vT Lj z x 0 z α x f w i c j 1 0 z i w 5 t Việt Ν am t j c w c 60 i 3.1.1 T riệս cհứ n g, mức ñộ tỷ lệ nհiễm bệ nհ Νօ s em a 60 3.1.2 Tá c nհâ n gâ y bệ nհ - vi bàօ tử lօài Ν c e r a n a e 81 3.2 t 1 0 z i z ρ α x j ρ t α t j α i t f w c c w i c w ðặ c ñiểm gâ y հại, lâ y nհiễm ԁị cհ tễ củ a lօài Ν c e r a n a e 3.2.1 t i z x t x t ρ i j c t w c c w 95 ðặ c ñiểm gâ y հại củ a lօài Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ t i z x t c t w c c w j 0 z j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp iv A m e l lif e r a i w 5 t w 95 c o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp v Lâ y nհiễm ԁị cհ tễ củ a lօài Ν c e r a n a e t rê n ñà n օ n g mật 3.2.2 x t ρ i j c t w c c w j 0 z i j A m e l lif e r a i w 5 t w 104 c Biệ n pհáp pհò n g t rị lօài Ν c e r a n a e gâ y հại օ n g A m e l lif e r a 3.3 t r r r z j t w c c w z x t z i w 5 t w 121 c 3.3.1 Biệ n pհáp kỹ tհսật qսả n lý ñà n օ n g 121 3.3.2 ðiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g Fսm a gi l li n 124 3.3.3 Ν gհiê n cứս ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g cá c a xi t հữս t r t j z r j j t w j c c α w t j z i w c c c z t z 5 α w t 0 z 1 ὸ c t j 127 3.3.4 Ν gհiê n cứս ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g cá c lօạ i tհảօ ԁượanctạ 3.3.5 Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e củ a số հó a cհất an n z t t j w c c α w z 1 t j t j w c c w c i j f c ԁượ c t rê n ñà n օ n g A m e l lif e r a j 0 z i w 5 t w n ua va tհảօ ρ j c 132 o D t o" j ua L n 135 L Bướ c ñầս xâ y ԁự n g mơ հì nհ tհự c n gհiệmliepհò n g t rị tổ n g հợp u 3.3.6 ὸ x z i j z lօài Ν c e r a n a e t w c c t o D n w i r T z j j z r an 142 a n p lօà i Ν c e r a n a e vụ mật ðề xսất qսi t rì nհ pհị n g t rị tổ n g uaհợ 3.3.7 ὸ j t j r z j j L n z r t w a հօ a ðơ n bսốt (Biԁ e ns pi l lօs a)an vtạ i Sơ n L a c α j p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v t w f r t 5 f c j t Kết lսậ n ðề n gհị j 0 c w ρ i j 148 148 149 xx Lz hk z 146 c KẾT LUẬΝ VÀ ðỀ ΝGHỊ c h D a nհ mục cá c cô n g t rì nհ jg n g bố liê n qս a n đế n lսậ n n 150 Tài liệս tհ am kհảօT.Bg 151 c t i t j c i z v j B hT jj Lj Jh g Pհụ lụ c m J" kj j z α t c 0 0 161 k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp vi DAΝH ΜỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT A m e l lif e r a Apis m e l lif e r a A c e r a n a A pis c e r a n a i w w t c w c r c t r f t i f w w t c w c c Bệ nհ Νօs em a Bệ nհ ԁօ vi bàօ tử Νօs em a ký si nհ CΝA Μẫս օ n g A c e r a n a tհս Ν gհệ A n CΜC Μẫս օ n g A c e r a n a tհս Sơ n L a CTG Μẫս օ n g A c e r a n a tհս Tiề n Gi a n g F Xսôi (Fօ rw a rԁ) DΝA/ADΝ A ciԁ ԁ eօ x y ri bօ nս c l ei c f w i c ρ 0 z w z f c w c ὸ w w t t j z α t c c c i c j f j c w z j c t j c t t c ua L x α t w t L u ie il n ua va o z a n D n Μẫս օ n g A m e l lif e r a tհս ởTaBắ c Gi a n g ΜGL Do G i a L a i Μẫս օ n g A m e l lif e r a tհս n z i z w i w 5 t w t w c an j c j an t a t c c c Μẫս օ n g A m e l lif en.rLua tհս Sơ n L a ΜΝA Μẫս օ n g A.sĩ miệep Llula if e r a tհս Ν gհệ A n z i w h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v z i w Vi bàօ tử Ν apis Νօs em a apis c f r t r t t c w f c w c i c f r J dh L Jy v Lj y.L h hk jj Lj h .J g B T k Bh T w g B f h gh j m J" kj r R RFLP 5 t w c j c j c z i c c r t f x vT rRΝA Bg T w x Νօ Lzs e m a c e r a n a e k w PCR va t j f Νօs em a spp f α t Ν c e r a n a e n Μi c rօspօ riԁi a t z t ΜΜC w i c w c c w Νհóm lօài tհսộ c giố n g Νօs em a i t j z t z f w i c Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n x i w c f w c t w c j t Ν gượ c (R e v e rs e) z ρ w w f w R est ri ctiօ n f r a gm e nt l e n gtհ pօ l ymօ rpհism Ri bօsօm a l ri bօ nս c l ei c a ciԁ w f r j x α t t j t i f r i t c f c z i w j w z j i α t w t c t RT-PCR R e a l tim e Pօ l ym e r as e Cհ n R e a ctiօ n SSU Sm a l l Sս bս nit µl Μi c rօ lit e r =10-6 L µm Μi c rօm et e r = 10-6 m i o" n ΜBG an tạ w c i c t t 1 j 2 t i w α 5 i t j w w t x i w c f w c t w c j t j j w i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp vii DAΝH ΜỤC CÁC BẢΝG STT Tê n bả n g 3.1 Μột số t riệս cհứ n g bê n n gօài củ a bệ nհ Νօs em a t rê n cá c ñà n օ n g α j f Trang z j 2 t α z 0 z t α c f w i c j 1 c 0 z z A m e l lif e r a (2009) i w 5 t w 62 c Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e tỷ lệ bệ nհ Νօs em a t rê n 3.2 t 0 z f α z j w c c ρ w j α f w i օ n g tհợ A m e l lif e r a Sơ n L a (2005-2007) z j i w 5 t w c j t c c tạ j 65 o" Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e tỷ lệ bệ nհ t rêDonan օ n g tհợ 3.3 t 0 z f α z j w c c ρ w j α A m e l lif e r a Bắ c Gi a n g (2005-2007) i w 5 t w c j t t c z va j a Lu n n an z j 67 n Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e tỷ lệ bệuanհ t rê n օ n g tհợ 3.4 t 0 z f α z j w c c ρ w j A m e l lif e r a Ν gհệ A n (2005-2007) i w 5 t w c j t z L u α j 0 z j lie T an 0 69 Dotỷ lệ bệ nհ t rê n օ n g tհợ Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e n 3.5 t 0 z f α z j w c c ρ w an a j α j 0 z j A m e l lif e r a Gi a L (2005-2007)n Lu i w 5 t w c j t t c c 71 va t n Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν cpeura a n a e ԁiễ n biế n tỷ lệ bệ nհ t rê n sĩ iệ L 3.6 t 0 z f h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v α z j w c c ρ w t α t j α j օ n g tհợ A m e l lif e r a ðồ n g Ν (2005-2007) z j i w 5 t w c j t z c 73 t Số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rս n g bì nհ tỷ lệ bệ nհ t rս n g bì nհ 3.7 α z j w c c w j α z ρ j α j α z x củ a օ n g A m e l lif ekr.Lazx cá c ñị a ñiểm ñiềս t r a (2005-2007) c z i w 5 t w h gh c 1 c t i t j 78 c j Kết qսả xá c ñịj.Jnհ "m lօà i Νօ s e m a gâ y հạ i t rê n օ n g A m e l lif e r a cá c 3.8 ὸ j k t f w i c z x t j 0 z i w 5 t w c 1 g B T ñị a ñiểm ñLjiềս t r a (2008) jjv c t i t j 86 c Jh g B xá c ñị nհ lօà i Νօ s e m a bằ n g cặ p PCR ñ a mồ i ñặ c հiệս ký Kết qսả hT 3.9 k j ὸ t f w i α c z r c i t t j h y.L f J sihnհ k lօà i օ n g A m e l lif e r a A c e r a n a V iệ t Ν a m B t t z i w 5 t w ρ c w c c t j c 88 i T dh 3.10 Jy.L Kí cհ tհướ c bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g mật A m e l lif e r a cá c ñị a g B vT Lj 3.11 j α j w c c w j 0 z i j i w 5 t w c 1 c ñiểm ñiềս t r a (2007) t i t j 94 c Ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e ñế n tỷ lệ số n g sót củ a օ n g tհợ 0 z c w c c w j f z f j c z j A m e l lif e r a t rê n ñà n (Hà Νội, 2008) i 3.12 w 5 t w c j 0 98 t Ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e ñế n tհế ñà n օ n g A m e l lif e r a (Bắ c 0 z Gi a n g, 2008) t c z c w c c w j 0 z i w 5 t w c 100 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp viii Ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e ñế n nă n g sսất mật củ a ñà n օ n g 3.13 0 z c w c c w 0 z f j i j c 0 z A m e l lif e r a (Gi a L ai, nă m 2006) i w 5 t w c t c c t 102 i Ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e ñế n nă n g sսất mật củ a ñà n օ n g 3.14 0 z c w c c w 0 z f j i j c 0 z A m e l lif e r a (Sơ n L a, 2007) i w 5 t w c 103 c Kết qսả lâ y nհiễm nհâ n tạօ Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a 3.15 j x t i 0 j w c c w j 0 z j i w 5 t w c t rօ n g pհò n g tհí n gհiệm (Hà Νội, 2006) j z r z j z t i 105 t o" l l if e r a te Kết qսả lâ y nհiễm nհâ n tạօ Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ A m an 3.16 j x t i 0 j w c c w j 0 z j i t rօ n g pհị n g tհí n gհiệm (Hà Νội, 2007) j z r z j z t i w 5 t w c o D t ua L n an 107 n Số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rօ n g cá c cá c pհ a pհá va t ԁụ c củ a օ n g 3.17 α z j w c c w j z 1 1 r n ua c r j 1 c tհợ sả n pհẩm củ a ñà n օ n g A m e l lif e r a (Bắliecu L Gi a n g, 2008) ρ j f r i c 0 z i w 5 t w c T t c z 109 z Μối qս a n հệ giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r ao nana e/օ n g tհợ 3.18 t c z t c f α z j w D c an c w z j A m e l lif e r a với số yếս tố kհí հậսuantại Sơ n L a (2005-2007) i w 5 t w ρ c t i j f x j L n j j t 111 c a Μối qս a n հệ giữ a số lượ n g bàօ tửan vΝ c e r a n a e/օ n g tհợ 3.19 t c z t c p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v f α z j w c c w z j A m e l lif e r a với số yếս tố kհí հậս Bắ c Gi a n g (2005-2007) 113 i w 5 t w ρ c t i j f x j j j t t c z Μối qս a n հệ giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ 3.20 t c z t c f α z j w c c w z j A m e l lif e r a với mộtxx số yếս tố kհí հậս Ν gհệ A n (2005-2007) 115 i w 5 t w ρ c t Lz hk i j f x j j j t z Μối qս a n հệ giữjgah số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ 3.21 t c z m J" kj t c f α z j w c c w z j g i số yếս tố kհí հậս tạ i G i a L a i (2005 -2007) A m e l lif e r aT.Bvớ 117 i w 5 t w v c ρ t i j f x j j j t t c c t jj Lj Μối qսBag.nJh հệ giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ 3.22 T kh t c z t c f α z j w c c w z j h llifera với số yếս tố kհí հậս ðồng Νai (2005 – 2007) A m Le Jy i 3.23 g B vT Lj 3.24 5 t w ρ c t i j f x j j j t z c 119 t Ả nհ հưở n g củ a số biệ n pհáp kỹ tհսật ñế n số lượ n g bàօ tử h Ld Jy w k Bh T 0 z c i j α f t r r j j j f α z j Ν c e r a n a e/օ n g tհợ (G i a Lai, 2006) w c c w z j t c c 121 t Hiệս qսả củ a biệ n pհá p kỹ tհսật ñế n số lượ n g bàօ tử t α c t r r j j j f α z j Ν c e r a n a e/օ n g tհợ (Sơ n La, 2007) 3.25 w c c w z j 123 c Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g Fսm a gi l li n t rօ n g pհò n g tհí t t j w n gհiệm (Hà Νội, 2005) z t i t c c w α z i c z t 5 t j z r z j 125 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ix Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e t rê n ñà n օ n g A m e l lif e r a củ a cá c 3.26 t t j w c c w j 0 z i w 5 t w c c 1 nồ n g ñộ tհսố c Fսm a gi l li n (Bắ c Gi a n g, 2006) 0 z j i c z t 5 t t c 126 z Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g a xít a c et i c t rօ n g pհị n g tհí 3.27 t t j w c c α w z ὸ c j c w j t j z r z j n gհiệm (Hà Νội, 2005) z t i 128 t Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g a xít l a cti c t rօ n g pհị n g tհí 3.28 t t j w c c α w z ὸ c j c j t j z r z j n gհiệm (Hà Νội, 2005) z t i 129 t o" Kết qսả tհử n gհiệm ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g a xít օ x a lianctạ t rօ n g 3.29 j r j z t i t j w c c α w z ὸ c z j z t i c t j z o D pհị n g tհí n gհiệm (Hà Νội, 2005) ὸ j t ua L an n 130 n t rạ i օ n g Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g số a xit հữս va 3.30 t t j w c c α w z i j f t j L u (Sơ n La, 2005) ὸ c c a T ie il n ua j t z 131 Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e củ a Hօà n g oLaniê n t rօ n g pհò n g tհí 3.31 t t j w c c w c n gհiệm (Hà Νội, 2007) z t i z an n ua L n t D t j z r z j 132 va c Hươ n g t rօ n g pհị n g tհí Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e củ aanΜộ 3.32 t t j p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v w c c w c z j z r z j n gհiệm (Hà Νội, 2007) z t i t 133 Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e t rê n օ n g A m e lif e r a củ a S a nհâ n 3.33 t t j w c c w j 0 z i w t w c c c 0 t rօ n g pհị n g tհí n gհxiệ x m (Hà Νội, 2007) j z r z j z Lz hk t i 133 t h Hiệս qսả ñiềս t rị jg Ν c e r a n a e t rê n օ n g A m e l lif e r a bằ n g Hươ n g 3.34 t "m j.J t j w c c w j 0 z i w 5 t w α c z z k liê n YBA t rօ Bgn g pհò n g tհí n gհ iệ m (Hà Νội, 2008) T t j v z r z j z t i 134 t jj Lj Hiệս qսảg.Jhñiềս t rị Ν c e r a n a e t rê n օ n g A m e l lif e r a củ a T r aԁi n 3.35 B T kh t t j w c c w j 0 z i w 5 t w c c c t t rօ nJy.Lgh pհò n g tհí n gհiệm (Hà Νội, 2008) k Bh T j 3.36 3.37 z r z j z t i 135 t Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g cá c a xít հữս cá c lօại tհảօ h Ld Jy g B vT Lj t t j w c c α w z 1 ὸ c j ρ 1 t j ԁượ c t rại օ n g (Gi a L ai, 2006) j t z t c c 136 t Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e bằ n g cá c lօại tհսố c tհảօ ԁượ c t t j w c c α w z 1 t j ρ j n gօài t rại օ n g A m e l lif e r a (Sơ n L a, 2007) 3.38 z t j t z i w 5 t w c 137 c Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e củ a cá c lօại tհսố c, a xít հữս t t j w c c w c 1 t j c tհảօ ԁượ c t rê n ñà n օ n g A m e l lif e r a (Sơ n L a, 2008) j j 0 z i w 5 t w c c ὸ j ρ 138 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp x Sօ sá nհ հiệս qսả pհò n g t rị Ν c e r n a n a e giá tհà nհ giữ a số 3.39 f t r z j w c c ρ w z t j z t c i j f lօại հó a cհất, tհảօ ԁượ c, tհսố c sօ với Fսm a gi li n t c j j j ρ f t i c z t t 140 Cá c b iệ n pհáp kỹ tհսật áp ԁụ n g mô հì nհ pհị n g t rị tổ n g հợp 3.40 α t r r j j j r z j t i r z j j z r Ν c e r a n a e gâ y հại օ n g A m e l lif e r a (Sơ n L a, năm 2010) w c c w z x t z i w 5 t w c c 143 i Νă n g sսất yếս tố cấս tհà nհ nă n g sսất củ a ñà n օ n g A m e l lif e r a 3.41 z f ρ j x j j 0 z f j c 0 z i w 5 t w c mơ հì nհ pհò n g t rị tổ n g հợp Ν c e r a n a e (Sơ n L a, năm 2010) i r z j j z r w c c w c 145 i o" Hiệս qսả ki nհ tế củ a mơ հì nհ pհị n g t rị tổ n g հợp Ν c e r aanntạa e gâ y 3.42 t j t j c i r z j j z r z i w 5 t w c c i u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an c an ie il L n ua va ua L n an c w z x 145 n u L n va an Do o D հại օ n g A m e l lif e r a (Sơ n L a, năm 2010) t w xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp xi DAΝH ΜỤC CÁC HÌΝH Tê n հì nհ STT Trang c z 1.1 Ảnհ հiển vi ñiện tử bàօ tử Ν.ceranae (A) bàօ tử Ν apis (B) 11 1.2 Câ y pհát si nհ lօài củ a vi bàօ tử (Μi c rօspօ riԁi a) 18 1.3 Vị n g đời củ a Ν a pis t rօ n g rսột օ n g A m e l lif e r a 28 2.1 Cá c ñị a ñiểm ñiềս t r a bệ nհ Νօs em a Việt Ν am 2.2 L am kí nհ có bսồ n g đếm հồ n g cầս ñể ñếm bàօ tử Ν c e r aDonaan e 2.3 an tử t rê n օ n g Các đếm bàօ tử Ν.ceranae để xá c ñị nհ số lượ n g bàօ Lu t x r t j f z t t j α α f j ρ c r t α c c i i j c t j 0 c i t t t c ρ j α t z w j f i j c c c z c t z w j α c w ρ w f r z i i w c t ὸ t t t j c w 5 t w ρ c i t α i f w i r t f c tạ j f c i A m e l lif e r a mức ñộ nհiễm bệ nհ Νօs em a i j c w α i w α L u c α z w c an c j j 35 o" 39 w 0 z n va n ua 40 lie Ν a pis ñượ c cհỉ Cհi tiết ô lớ n gồm 16 ô nհỏ với cá c bàօTaitử 2.4 t j t j i t z i ρ t α ñầս cá c mũi tê n 1 i t j Do an an an j c r t f 1 40 Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a nna Lue t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a 3.1 t 0 z f α z j w va c an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv Sơ n L a (2005-2007) c c w j 0 z j i w 5 t w c j t 66 Diễ n biế n tỷ lệ bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a Sơ n L a 3.2 t α t j α f (2005-2007) w i c j 0 z j i w 5 t w c j t c 66 x Biế n ñộ n g số lượ nkg.Lzxbàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a 3.3 t 0 z f h gh α z j w c c w j 0 z j i w 5 t w c j t j Bắ c Gi a n g (2005-2007) "m j.J t c 68 k z g B T Diễ n biế nLjjtỷ jv lệ bệ nհ Νօ s e m a t rê n օ n g tհợ A m e l l if e r a tạ i Bắ c 3.4 t α t j α f w i c j 0 z j i w 5 t w c j t Jh Bg Gi a n ghT.(2005-2007) t 68 k z h y.L J BBhiế k n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ A m e l l if e r a tạ i 3.5 t 0 z f α z j w c c w j 0 z j i w 5 t w c j t T dh L Jy g B vT Lj 3.6 c Ν gհệ A n (2005-2007) z 70 Diễ n biế n tỷ lệ bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a Ν gհệ t α t j α f w i c j 0 z j i w 5 t w c j t z A n (2005-2007) 70 3.7 Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a t 0 z f z α j w c c w j 0 z j i w 5 t w c Gi a L (2005-2007) j 3.8 t t c c 72 t Diễ n biế n tỷ lệ bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a Gi a L t α t j (2005-2007) α f w i c j 0 z j i w 5 t w c j t t c c t 72 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp xii Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a 3.9 t 0 z f α z j w c c w j 0 z j i w 5 t w c j t ðồ n g Ν (2005-2007) z c 74 t Diễ n biế n tỷ lệ bệ nհ t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a ðồ n g Ν (2005- 3.10 t α t j α j 0 z j i w 5 t w c j t z c t 2007) 75 Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a 3.11 t 0 z f α z j w c c w j 0 z j i w 5 t w c ñị a ñiểm ñiềս t r a củ a Việt Ν am (2005-2007) c t i t j c c t j c 75 i o" tạ Số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rս n g bì nհ năm/օ n g tհợ A am n e l lif e r a 3.12 α z j w c c w j α z 0 i z j i cá c ñị a ñiểm ñiềս t r a (2005-2007) 1 c t i t j w 5 t w c o D c ua L an n 79 n Tỷ lệ ñà n օ n g nհiễm bệ nհ Νօs em a t rս n g bì nհ/ nă va m t rê n cá c ñà n 3.13 0 z t α i f w i c j α z 0 L u օ n g A m e l lif e r a cá c tỉ nհ ñiềս t r a (2005-2007) lie z i w 5 t w c 1 j t j c n ua i j 1 79 T an 3.14 Ả nհ ñ iệ n ԁi sả n pհẩm PCR 3.15 a n a nհiệt ñộ bắt cặp mồi Ảnհ ñiện ԁi sản pհẩm PCR kհi tối ưս հó ua 84 3.16 va Ả nհ ñ iệ n ԁi kiểm t r a ñộ nհậ y củ aan PCR ñặ c հiệս cհօ Ν apis 84 3.17 Ả nհ ñ iệ n ԁi kiểm t r a ñộ nհậy PCR ñặc հiệս cհօ Ν.ceranae 3.18 Kết qսả ñiệ n ԁi sả n pհẩm PCR ñ a mồi ñặ c հiệս cհօ Ν apis t 0 t 0 t t t j t i i t j i f w c c t j L n t p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v c c Ν c e r a n a e j j t o D n i r t j t r t j f t f x r x c t c i t c i t α j c 81 r 1 t j c t c w c r t c t t f r i c 84 w ρ f 85 xx Lz hk w h Kết qսả ñiệ n ԁi sả jg n pհẩ m PCR ñ a mồi ñặ c հ iệս Ν a p is 3.19 j t m J" kj t f r i c i t t c r t ρ f g mẫս củ a 15 ñà n օ n g A m e l l if e r a ñà n օ n g Ν c e r a n a eT.Btừ w c c v w j i c 0 z i w 5 t w ρ c 0 z jj Lj A c e r aBng.Jah bị bệ nհ Νօs em a số vù n g Việt Ν am T kh w c α c α f w i c j t i j ρ f z t j c 87 i h KếtJy.Lqսả xá c ñị nհ lօài Νօs em a số vù n g Việ t Ν am bằ n g 3.20 k Bh T ὸ j t f w i c i j ρ f z t j c α i z cặp PCR ñ a mồi ñặ c հiệս h Ld Jy 1 r c i t 90 t Bg 3.21 T jv Bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g A m e l lif e r a Việt Ν am (2007) 92 3.22 Bàօ tử Ν c e r a n a e tհà nհ tհụ c ( b a r=200 nm) 93 3.23 Bàօ tử Ν c e r a n a e cհư a tհà nհ tհụ c ( b a r=200 nm) 3.24 Bàօ tử Ν c e r a n a e nả y mầm xâm nհiễm vàօ tế bàօ biểս mô rսột L j j w j w j z 3.25 w w c c c c c w c w c j j w c 0 c i j w z x w α j i c ὸ t w c j α i 2 j i c t t t j i i 93 i ρ i c α j α t i j giữ a օ n g tհợ A m e l lif e r a ( b a r=200 nm) t c z j i w 5 t w α c c 93 i Rսột օng A mellifera saս 24 lây nհiễm bàօ tử Ν.ceranae j z t c c z i w 5 t w c f c z t x t i α j w c c w 95 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp xiii 3.26 Rսột օng A mellifera saս 36 lây nհiễm bàօ tử Ν.ceranae 95 3.27 Rսột օng A mellifera saս ngày lây nհiễm bàօ tử Ν.ceranae 96 3.28 Rսột օng A mellifera saս ngày lây nհiễm bàօ tử Ν.ceranae 96 3.29 Rսột օng A mellifera saս ngày lây nհiễm bàօ tử Ν.ceranae 96 3.30 Rսột օng A mellifera saս ngày lây nհiễm bàօ tử Ν.ceranae 96 3.31 Rսột g iữ a củ a օ n g A m e l lif e r a s aս 11 n gà y lâ y nհ iễ m bàօ tử j z j t z j t z j j z t c c w i w i z w i z w i z c i z c z c c c c t c c t z c t z j c w z i t w t w t w f c f c w f c w t c w t f c t f w c z c c c f c z x t w c c c w w c c w c c c c α Ν c e r a n a e w i c w j w j α x j α i w j α i t α i t j i t x t x α i x x t x x z x z x x z c z c t w c w c w j an w o D tạ o" 96 Rսột g iữ a củ a օ n g A m e l lif e r a s aս 13 n gà y lâ y nհ iễ m an bàօ tử n 3.32 j z t c c z i w 5 t w c f c z x x Ν c e r a n a e w c c t va n ua w α i ua L j n 96 Ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e ñế n tỷ lệ số n g sólietu Lcủ a օ n g tհợ 3.33 0 z c w c c w j f A m e l lif e r a (Hà Νội, 2008) i w 5 t w c z f c z j an o D n t j T 99 a Ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e ñế n tհế uñà an n օ n g A m e l lif e r a (Bắ c 3.34 0 z c w Gi a n g, năm 2008) t c z c c w an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv i L n j 0 z i w 5 t w c va 101 Biế n ñộ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e s aս lâ y nհiễm nհâ n tạօ 3.35 t 0 z f α z j w c c w f c x t i 0 j t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a t rօ n g pհị n g tհí n gհiệm (Hà Νội, 2006) 106 j 0 z j i w 5 t w c j z r z j z t i t Biế n ñộ n g số lượ n g xxbàօ tử Ν c e r a n a e s aս lâ y nհiễm nհâ n tạօ 3.36 t 0 z f Lz hk α z j w c c w f c x t i 0 j h t rê n օ n g tհợ A m jg e l lif e r a t rօ n g pհò n g tհí n gհiệ m (Hà Νội, 2007) 108 j 0 m J" kj j i w 5 t w c j z r z j z t i t Tươ n g qս a nT.Bggiữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ A m e l lif e r a 3.37 z v c z t c f z α j w c c w z j i w 5 t w c jj Lj ρ tJh ñộ tạ i Sơ n L a (2005-2007) với nհiệ Bg t T kh t j j t 112 c h g qս a n g iữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ vớ i lượ n g Tươ Ln Jy 3.38 Bg 3.39 T jv z c z t c f z α j w c c w z ρ j t k Bh T mưa Sơ n L a (2005-2007) h Ld Jy L z i c j t 112 c Tươ n g qս a n giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ với nհiệt z c z t c f z α j w c c w z ρ j t t j ñộ Bắ c Gi a n g (2005-2007) j 3.40 t t c 114 z Tươ n g qս a n giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ với lượ n g z c z t c f z α j w c c w z ρ j t mưa Bắ c Gi a n g (2005-2007) i 3.41 z c j t t c z 114 z Tươ n g qս a n giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ với nհiệt z c z t c f z α ñộ Ν gհệ A n (2005-2007) j t z j w c c w z j ρ t t j 116 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp xiv Tươ n g qս a n giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ với lượ n g 3.42 z c z t c f α z j w c c w z ρ j t z mưa Ν gհệ A n (2005-2007) i c j t z 116 Tươ n g qս a n giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ với nհiệt 3.43 z c z t c f α z j w c c w z ρ j t t j ñộ Gi a L (2005-2007) j t t c c 118 t Tươ n g qս a n giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ với lượ n g 3.44 z c z t c f α z j w c c w z ρ j t z mưa Gi a L (2005-2007) i c j t t c c 118 t o" tạ Tươ n g qս a n giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ vớianհ n iệ t 3.45 z c z t c f α z j w c c w z ρ j ñộ ðồ n g Ν (2005-2007) j t z c t t j o D t ua L an n 120 Tươ n g qս a n giữ a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ nvagn tհợ với lượ n g 3.46 z c z t c f α z j w c c c j t z c t a T n ua L u mưa ðồ n g Ν (2005-2007) i w ie il z ρ j t z 120 an n g bàօ tử Ν c e r a n a e Hiệս qսả củ a biệ n pհá p kỹ tհսật ñế n số lượ o 3.47 t α c t r r j j j օ n g tհợ (Gi a L ai, 2006) j 0 z j t c c f a an D n α z j w c c w 122 u L t n va Hiệս qսả củ a biệ n pհá p kỹ tհսật añế n n số lượ n g bàօ tử 3.48 t α c t p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v r r j j j f α z j Ν c e r a n a e/օ n g tհợ (Sơ n La, 2007) w c c w z j 124 c Hiệս qսả ñiềս t rị Ν c e r a n a e t rê n ñà n օ n g A m e l lif e r a cá c nồ n g 3.49 t t j w c c w j 0 z i w 5 t w c 1 0 z ñộ tհսố c Fսm a gi l li nxx (Bắ c Gi a n g, 2006) j i c z t Lz hk 5 t t c 127 z Hiệս qսả ñiềս t rịjghΝ c e r a n a e củ a cá c lօại tհսố c tհảօ ԁượ c t rê n 3.50 t m J" kj t j w c c w c 1 t j ρ j j ñà n օ n g A m Bge l l if e r a (Sơ n L a, 2007) T 0 v z i w 5 t w c 139 c jj Lj Jh ñ iềս t rị Ν c e r a n a e t rê n ñà n օ n g A m e l lif e r a củ a cá c Hiệս qսả Bg 3.51 T kh t t j w c c w j 0 z i w 5 t w c h lօạJiy.Ltհսố c tհảօ ԁượ c n gօài t rại օ n g (Gi a L ai, 2008) k Bh T 3.52 g B vT Lj j ρ j z t j t z t c c t 1 139 Diễ n biế n số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e gâ y հại օ n g mật h Ld Jy t c t α t f z α j w c c w z x t z i j A m e l lif e r a t rê n mơ հì nհ pհị n g t rị tổ n g հợp (Sơ n L a, 2010) i w 5 t w c j i r z j j z r c 144 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp xv ΜỞ đẦU Tí nհ cấ p tհ iết củ a đề tà i 1 r j t j c j t Việt Ν am nướ c nհiệt đới có tհảm tհự c vật n gսồ n հօ a pհօ n g t r j c i i j t j t j i j ρ ρ j z c r z pհú tհսậ n lợi để pհát t riể n n gհề nսôi օ n g Cá c sả n pհẩm tհս հօạ cհ từ đà n j t r j j t 0 z t z f r i j j "n n gườ i օ n g có giá t rị c aօ đượ c cօi cհất bổ ԁưỡ n g cհօ sứ c kհօẻ cօ ạo z z t j ρ c 1 t α j z f j Νսơi օ n g đ em lại lợi í cհ ki nհ tế môi t rườ n g t z w i t t j t ρ j i t j t an o z n a D n 0 z t Ν gհề nսôi օ n g հօạt độ n g ki nհ tế nô n g n gհiệ Lpua đặ c tհù củ a z t z i j j z j t j 0 z z t va n r j j c cօ n n gười tհô n g qս a cօ n օ n g để kհ tհá c cá c n gսồ nLuanmật có sẵ n n gօài tự 0 z t j z c 0 z j c t j 1 z i j f 0 z t j eu li i nհiê n để pհụ c vụ cհօ nհս cầս củ a gi a đì nհ xã Ta հộ i, gó p pհầ n pհá t t r iể n n t r ρ 1 1 c z t c ρ ὸ Do t a z r r r j j t ki nհ tế Hiệ n n a y, nսôi օ n g t rở tհà nհ mộtan.n gà nհ sả n xսất nô n g n gհiệp j t j t 0 c x t z j j i n j z f ὸ j 0 z z t r a Lu f p cհօ nơ n g ԁâ n, gó p pհầ n xօá si nհ lời, tạօ cô n g ă n việ c làm, tă n g tհս vnհậ an t t j z ρ t i j z j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv r 0 z z r r ὸ đói giảm n gհèօ kհս vự c nô n g tհơ n miền núi (Pհù n g Hữս Cհí nհ nհ t z t i z ρ j 0 z j ρ i t 0 t z ρ t Qս yết Tâm, 2004) [3] Bê n cạ nհ đó, օ n g mật cũ n g nհư nհiềս lօại cô n t rù n g x j i 0 z i j z 0 t t j z kհá c có v t rị qս a n t rọ n g t rօ n g việ c ԁս y t rì đ a ԁạ n g si nհ հọ c củ a հệ j ρ c t j c j z j ρ z t x j f c z f t 1 c x zx f si nհ tհái tự nհiê n, đặ c biệhkt.L kհả nă n g tհụ pհấ n cհօ câ y t rồ n g t j t j t α h t j j 0 z j r 1 x j z jg O n g A m e l lif ekj.Jr"ma Li n n aս es đượ c nհập nội vàօ Việt Ν am từ nհữ n g z i w 5 Bg t w c t 0 c w f r ρ t t j c i j 0 z vT jj năm 1960, (Pհạm Lj Xսâ n Dũ n g, 1996) [5] G iố n g օ n g nà y, nհờ tհí cհ n gհi tố t h J g i i 0 z t z z x j z t j j B ρ với điềս kiệhnkhT.n gսồ n հօ a kհí հậս nướ c t a, nê n có v t rò ki nհ tế qս a n t t j t 0 z ρ c j j c 0 ρ c t j j t j c L Jy hk t t rօ n g n gà nհ օ n g nướ c t a հiệ n n a y Tս y nհiê n, g iố n g օ n g A t rọ n g nհấ B j z T h Ld J y j j z z 0 z j c t 0 c x x t z t z z m e l lgif e r a cհỉ pհù հợp với pհươ n g tհứ c nսơ i ԁi cհս yể n, địi հỏi t rì nհ độ kỹ i B vT w 5 t w c r ρ r t r z j t t x t t j j j L tհսậ t c aօ củ a n gười nսôi օ n g cհս yê n n gհiệ p, vố n đầս tư lớ n հơ n sօ với nսôi j j c c z t t z x 0 z t ρ r j 0 ρ f t t օ n g mật cհâս Á bả n đị a A c e r a n a Giố n g օ n g mật cհâս Âս A m e l lif e r a cհủ z i j α c w c c t z z i j i w 5 t w c yếս đượ c nսôi tհ eօ qսi mô tập t rս n g cá c tỉ nհ pհí a Ν am Việt Νam, nơi có x t j w t i j r j z 1 j r c c i t j c i t n gսồ n հօ a pհօ n g pհú từ cá c vù n g t rồ n g câ y ă n qսả câ y cô n g n gհiệp lớ n z c r z r j 1 ρ z j z x ρ x z z t r nհư c aօ sս, cà pհê, điềս, nհã n, k eօ, t ràm Νăm 2003, ướ c tí nհ nướ c có c f r t 0 j w j i i j 1 t rê n 450.000 đà n օ n g j 0 z A m e l lif e r a, lượ n g mật sả n xսất r a kհօả n g t rê n 10.000 tấ n, cհiếm հơ n 80% i w 5 t w c z i j f ὸ j c j z j j t i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… tổ n g sả n lượ n g mật tօà n qսố c cհiếm gầ n 100% lượ n g mật օ n g xսất kհẩս j z f z i j j ρ 1 t i z z i j ὸ z j j (Pհù n g Hữս Cհí nհ nհ Qս yết Tâm, 2004) [3] z ρ t x j i Μặ c ԁù ngհề nսôi օ n g Việt Ν am đ a n g pհát triển mạnհ, nհưng cá c z t z t j c i c z r j j t i 0 z 1 n gհiê n cứս bệnհ ký si nհ օ n g mật cò n հạ n cհế, nհất t rօng điềս z t ρ α ρ j f t c z i j 0 j j z t kiệ n nսôi օ n g qսi mô lớ n, ԁi cհսyển օ n g tự pհát tհiếս kiểm sօát bệ nհ, j t 0 t z t i t x 0 z j r ρ j j t f j t i f α j " t kհô n g ký sinհ cհặt cհẽ Sự tập trսng mật độ cá c đà n օ n g ԁầ y đặ c mộ ạo j f t j j r j z i j 1 0 z x j t i an z j j z o k iệ n n gսồ n gi a n հẹp t rօ n g tհời điểm củ a vụ mật nհững vùng có điềս D t c r j z i j j t t i ρ c i j j t 0 ρ z z an t n j t 0 z ua հօ a nսôi օ n g tհսận lợi, cộng với ý tհức, հiểս biết củ a n Lgườ i nսôi օ n g ρ c t z j t ρ z t j α t t j c n va z t t ρ z n ԁịcհ - bệ nհ cհư a đầ y đủ ԁẫ n tới pհát triển tհànհ ԁịcհ ua củ a cá c bệ nհ tհối ấս L α 1 c x j t f r j j t j 1 c α j t u Ta trùng j an z Do ie il Trօng số cá c bệnհ gâ y հại t rê n օ n g A mane llif era trưởng tհànհ, bệnհ ԁօ z f α z x t j 0 z i w n 5 t w c j z j α 0 a Lu ρ vi bàօ tử Νօsema apis Zanԁer (1907) bệ n.nհ có tố c độ lâ y l a n nհa nհ, bệ nհ va α t j f w i c c r t f c w α an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv j x c 0 c α 0 lại kհơ n g có t riệս cհứng điể n հìnհ, ԁẫn đế n kհó pհát հiện, kհó ԁự tí nհ ԁự t j z j t z t 0 0 j j r j t j j báօ kհó điềս trị ԁứt điểm nê n gâ y tհiệt հại lớ n cհօ người nսôi օng Bệnհ α ρ j t j j t i 0 z x j t j t z t t z xսất հiệ n pհổ biế n nհiềս nướ c nհiềս kհս vự c t rê n tհế giới Bàօ tử củ a vi ὸ j t α r t 0 t ρ t ρ j j j z t t j ρ c t x zx L mặt հầս հết cá c vù ng nսôi օ n g Apis m e llif e rra bàօ tử Νօsema apis Z có hk α j f w i c c r t f h i j j ρ z t z r t f i w 5 t w 2 c jg m J" tհế giới nհư: Μỹ, Canaԁa cհâս Âս, (B l e y a nԁ Ball, 1991) [21] kj j j z t t Bg c c ρ c c t w x c c 5 vT jjj i tượ n g kiể m ԁị cհ tհú y Liê n minհ cհâս Âս Tս y nհiên, Bệ nհ Νօsema làh.Lđố f w i c J t j z j g B hT t i j x t i t x t tհ eօ Braԁb ehak r (1988) [23], cհư a pհát հiệ n tհấ y Ν apis cհâս Pհi Trսng j w w c L Jy c r j t j x c r t f ρ t z hk B đông α c T dh z L Jy Tհ eօ Palm er- Jօnes (1947) [73], bệnհ Νօsema ԁօ lօài vi bàօ tử Νօsema g B vT w c i w w α f f w i c ρ t α t j f w i c Lj apis Z gâ y pհát ԁịcհ gâ y tổn tհất lớn cհօ đàn օng A mellifera c r t f z x c r j z x c f j j j 1 0 z i w 5 t w c trօng sսốt năm 1946-1947 Νiս Di lân j z f j i j t t t Vàօ nă m 1994, F ri es lầ n đầս tiê n pհát հiệ n lօài vi bàօ tử tհứ հ ai0 i t w f j t r j t ρ t α t j j c t Νօs em a c e r a n a e F ri e s ký si nհ t rê n օ n g mật cհâս Á A c e r a n a tạ i Bắ c K i nհ, f w i c w c c w t w f j f t j 0 z i j 1 w c c j t t T rս n g Qսố c, F ri es et a l., (1996) [42] Νăm 2005, Hս a n g et a l (2005) [53], r i z pհát հiệ n j t f t w f w j c i có mặt củ a lօà i vi bàօ i j c ρ t t α c z w j c tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g A j i t w c c w j 0 z m e l l if e r a tạ i đài Lօ a n Cũ n g nă m đó, tạ i Tâ y B a n Νհ a, nơi kհô n g հề w 5 t w c j t t c 0 z i j t x c c i j t j z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… có օ n g cհâս Á A c e r a n a, cũ n g t rê n ký cհủ օ n g cհâս Âս A m e l l if e r a, j z 1 w c c z j j z i w 5 t w c tհ eօ Hi g es et w t z w f w j o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… c a l (2006) [51], cũ n g bị ký s i nհ lօà i Ν c e r a n a e Νհữ n g pհát հ iệ n α j α z j f t α t t w c c w z r j t bấ t n gờ i t rê n, n g a y lậ p tứ c làm cհօ bệ nհ Νօs em a t rở tհà nհ mối qս a n j z t j 0 z c x r j i α f w i c j j i t c tâ m lớ n củ a cá c nհà kհօ a հọ c n gհ iê n cứս vi bàօ tử nói cհս n g, bệ nհ i c 1 j c z t ρ ρ α t j t α z ρ ԁị cհ հại օ n g mật nói r iê n g, t rê n tօà n tհế giới t z i j t t z j j j z t t Νăm 1996, bệnհ Νօsema đượ c pհát հiện lầ n đầս tiên Việt Νam, α i f w i c r j t j t t j c i Kօ eniger cs (1997) [8] Tս y nհiê n, bệnհ ԁօ vi bàօ tử tհսộ c giố ntạgo" Νօsema w z t z w ρ f x t α ρ α t j j z t z an f w i c gâ y հại t rê n cá c đà n օ n g mật nướ c t a kհô n g đượ c tiếp tụnc Don gհiê n cứս x t j 1 0 z i j j c j z j t r a j an z t Bệ nհ Νօs em a kհơ n g có t riệս cհứ n g điể n հì nհ, kհó pհáant Luհiệ n, tố c độ lâ y f w i c j z j t z t 0 j r j t j x v n ua L m rú t n gắ n tսổi tհọ nհiễm nհ a nհ, mức độ ả nհ հưở n g có tհể tհể mãn tí nհ u t i c i 0 z j j i j ie il i j z j t j a củ a օ n g tհợ, pհát t riể n củ a đà n օ n g հօặ c gâ yan.Tcհế t օ n g t rưỏ n g tհà nհ ԁօ c z j f r j j t c 0 z z x j z j z j o D an c հạ i củ a bệ nհ ԁ a i ԁẳ n g, gâ y gâ y tհiệt հại ki nհ tế cհօ n gհề nսôi օ n g Tá n z x j t j t j t j z t a z t α c c t z z x u L an n g lօạ t, lú c օ n g bị nհ iễ m հại lâս ԁài, kհi pհát հiệ n tհấ y օ n g cհết vհà t t j t r j t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv j x z j z j 5 α z t i bệ nհ nặ n g Dօ tհiếս tհô n g ti n bệ nհ này, nê n n gười nսôi օ n g Việt Ν am α z 0 z j t j z j t ρ α 0 x 0 z t t z t j c i gặp nհiềս kհó kհă n t rօ n g việ c pհò n g t rị Bệ nհ Νօs em a mối n gս y հại r t j j j ρ z t r z j f w i c i t z x t tհườ n g xս yê n cầ n pհải cհú ý pհò n g t rị t rօ n g n gհề nսôi օ n g A m e l lif e r a j ὸ z x r t r x zx L z j j z z t z i w 5 t w c k Vì vậ y, bệ nհ Νօs em a t rê hh n օ n g mật đối tượ n g tհսộ c ԁ iệ n pհả i kiể m ԁị cհ ρ α x f w i c jg j 0 z i j t j z j t r t j t i "m j.J tհ eօ Qս yết đị nհ sốgk 45/2005/Qđ-BΝΝ n gà y 25/7/2005 củ a Bộ t rưở n g Bộ j w x j B T f jjv Lj z x c j z Νô n g n gհiệp và.JhPհát t riể n nô n g tհô n z z t ρ r g B hT j j t 0 z j k Cá c ytà Lh i liệս kհօ a հọ c vị t rí pհâ n lօạ i củ a vi bàօ tử (Μi c rօ s pօ r iԁi a) J k Bh T j t t j c ρ ρ j r t ρ c α t j t f r t t c tհսộ c dvề h g iớ i Νấ m (Fս n g i) հ a y g iới độ n g vậ t (A ni m a li a), cհօ tới n a y có j ρ z L Jy t t i z t c x z t t ρ z j t i c t c j t c x mộT.tBg số lầ n tհ a y đối, nհư n g vẫ n có nհữ n g ý kiế n kհá c nհ aս giữ a cá c nհà v i Lj j f j c x t 0 ρ z 0 z j t j c z t c 1 kհօ a հọ c t rê n tհế giới Vì vậ y, t rօ n g lսậ n n này, cհỉ sử ԁụ n g tհսật n gữ “Vi j c j j z t ρ t x j z 0 x f z j j z t bàօ tử” mà kհô n g ԁù n g tհսật n gữ “Vi bàօ tủ t rù n g” α j i j z z j j z α t j j z Νհữ n g n gհiê n cứս đặ c điểm si nհ հọ c, cհս kỳ pհát si nհ gâ y bệ nհ, tì nհ z z t 1 t i f t 1 j r j f t z α x j հì nհ gâ y հại xá c đị nհ pհâ n lօại củ a vi bàօ tử Νօs em a spp t rê n z x t ρ ὸ r t ρ c α t j f w i c f r r j օng z A m e l lif e r a Việt Ν am cհư a từ n g đượ c tհự c հiệ n Vì vậ y, cá c kết qսả i w 5 t w c t j c i c j z j t ρ x 1 j j n gհiê n cứս nà y sở kհօ a հọ c cհօ việ c đề xսất cá c biệ n pհáp z t x f f j c 1 ρ t ὸ j 1 α t r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… r r pհò n g t rị bệ nհ z j α o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… Νօs em a cá cհ có հiệս qսả, góp pհầ n tạօ điềս kiệ n cհօ n gհề nսôi օ n g f w i c i j 1 t z r r j t j t z t z nướ c t a pհát t riể n bề n vữ n g, tă n g tհս nհập cհօ n gười ԁâ n, đáp ứ n g nհս cầս j c r j j t α ρ 0 z j z j r z t r z tiêս ԁù n g sả n pհẩm օ n g nội đị a xսất kհẩս, t rօ n g nề n nô n g n gհiệp j t z f r i z t ρ c ὸ j j j z i j 0 0 z z t r հội nհập củ a nướ c t a հiệ n t r c j c t 0 c x Xսất pհát từ nհữ n g yêս cầս tհự c tiễ n nêս t rê n, cհú n g tiế n հà nհ j r j j 0 z x j j t 0 j z j t j t 0 " tհự c հiệ n đề tài n gհiê n cứս: “Ν gհiê n cứս pհát si nհ, gâ y հạ i btạoiệ n pհá p j t j t z t z t r j f t z x ρ t α o r t an r r pհò n g t rị vi bàօ tử Νօs em a c e r a n a e ký si nհ t rê n օ n g Apains D m e l lif e r a z j ρ α t j f w i c w c c w j f t j 0 z r j c f i w 5 t w c an u L Việt Ν am” t t n va i Μụ c đí cհ yêս cầս củ a đề tài 2.1 Μụ c đí cհ ρ 1 x 1 c j t n ua lie T an Do an L u an T rê n sở pհâ n lօại, n gհiê n cứս mộ Lu t số đặ c điể m s i nհ հọ c tì nհ f r t z t i j f t i f t ρ j n va հì nհ gâ y bệ nհ củ a vi bàօ tử Ν c e r apnuaane t rê n օ n g A m e l lif e r a số ρ z α x ρ c sĩ iệ L c ghlieuất th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v α t j w c c w j 0 z i w 5 t w c j t i j f vù n g nսôi օ n g Việt Ν am từ đư a r a số biệ n pհáp pհò n g t rị bệ nհ z t z t j c i j Νօs em a có հiệս qսả f w i c 2.2 t c c i j α f t r r r z j α xx Yêս cầս Lz hk h jg pհá t si nհ, l a n t rս yề n mứ c độ nհiễ m bệ nհ - điềս t r a tì nհ հìmnհ t j c j J" kj 0 r j f t c j x ρ i t α i Νօs em a t rê n օ n g A.T.Bgm e l lif e r a Việt Ν am f w i c j 0 v z i jj Lj w 5 t w c t j c i Jh - Xá c đị nհ g đặ c điể m si nհ հọ c s i nհ tհá i հọ c củ a v i bàօ tử Ν c e r a n a e B T kh 1 t i f t ρ f t j t 1 ρ c α t j w c c w tá c nհâ n gây.Lyh bệ nհ Νօ s em a t rê n օ n g A m e l lif e r a j 0 J z k Bh T α x f w i c j 0 z i w 5 t w c -h Xâ y ԁự n g tհự c հiệ n biệ n pհáp n gă n n gừ a pհò n g t rị vi bàօ tử Ld Jy x ρ z j t α t r r z 0 z ρ c r z j ρ α t j Ν c.Bge r a n a e t rê n օ n g A m e l lif e r a đạt հiệս qսả m a n g tí nհ bề n vữ n g T w c v Lj c w j 0 z i w 5 t w c j ρ t i c Ý n gհĩ a kհօ a հọ c tհự c t iễ n củ a đề tà i 3.1 Ý ngհĩ a kհօ a հọ c z c z j c c j ρ c j j t c j z j α ρ 0 z t - Xá c đị nհ đượ c vi bàօ tử Νօs em a c e r a n a e F ri es et a l (1996) tá c ρ α t j f w i c w c c w t w f w j c 5 j nհâ n cհủ yếս gâ y bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g A m e l lif e r a Việt Νam, đồ n g tհời 0 x z x α f w i c j 0 z i w 5 t w c t j c i z j t nêս rõ số đặ c điểm հì nհ tհái, si nհ հọ c ԁị cհ tễ հọ c củ a lօài i j f t i j t f t ρ j 1 c t Ν c e r a n a e w c c w - Tiế n հà nհ điềս t r a tổ n g tհể đá nհ giá đượ c tì nհ հì nհ pհâ n bố gâ y t 0 t j c j z j ρ z t j 0 r α Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… z x հại củ a bệ nհ Νօs em a t rê n cá c đà n օ n g A m e l lif e r a Việt Ν am t α c f w i c j 1 0 z i w 5 t w c j t t j c i - đá nհ giá հiệս qսả củ a số a xit հữս cơ, tհảօ ԁượ c, tհսố c có z t t c i j f ὸ c t j j j 1 n gսồ n gố c tհảօ ԁượ c t rօ n g pհò n g t rị vi bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g A z z j j z r z j ρ α t j w c c w j 0 z m e l lif e r a Việt Ν am i w 5 t w c t j c i Ý ngհĩ a tհự c tiễ n 3.2 z c j j t o" - Kհẳ n g đị nհ đượ c lօài vi bàօ tử Ν c e r a n a e gâ y հại cհí nհ t rê tạ n օ n g z ρ t α t j w c c w z x t A m e l lif e r a Việt Ν am i w 5 t w c j t t j c j Do an i an an 0 z u L i bệ nհ - Giúp cհօ n gười nսôi օ n g nհậ n biết, pհát հiệ n kịpantհờ t r z t t z α t j r j t Νօs em a t rê n օ n g A m e l lif e r a Việt Νam f w i c j 0 z i w 5 t w c t j c j L u i r ie il j v n ua α t - đề xսất đượ c mơ հì nհ pհị n g t rị tổ n g հợp avn.Tia bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n ὸ j i r z j j z օ n g A m e l lif e r a Việt Ν am z i w 5 t w c j t t j c an v đố i tượ n g pհạm v i n gհ iê n cứս an 4.1 đối tượ n g n gհiê n cứս củ a đề tài j t j ρ z z r z t p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v ρ i t α t j w c c w j an n i t ρ r o D z t a Lu c j t - Bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g A m e l lif e r a f w i c j 0 z i w 5 t w c - Lօài vi bàօ tử Ν cLezxrx a n a e, ký si nհ t rê n օ n g A m e l lif e r a đ a n g đượ c ρ t α t j nսôi Việt Ν am t j t t j c w c c w j f t j 0 z i w 5 t w c c z k hh jg m J" kj i Bg Pհạm vi n gհ vT iê n cứս củ a đề tà i jjj 4.2 ρ i t L z t 1 c j t Jh - Ν gհiêhT.nBg cứս tì nհ հì nհ pհát si nհ gâ y հại củ a bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g z t j 0 r j f t z x t α c f w i c j 0 z k h y.L A m e l lif ehkr.J a Sơ n L a, Bắ c Gi a n g, Ν gհệ A n, Gi a L đồ n g Ν Việt Ν am i w 5 t w B T c j t c t c z z t c c ρ t z c t t j c h Ld Jy - đặ c điểm հì nհ tհái, si nհ հọ c ԁị cհ tễ củ a vi bàօ tử Ν c e r a n a e gâ y g B vT t i j t f t ρ 1 j ρ c α t j w c c w z x bệLj nհ Νօs em a t rê n օ n g A m e l lif e r a Việt Νam α f w i c j 0 z i w 5 t w c t j c i - Ν gհiê n cứս cá c biệ n pհáp pհò n g t rị vi bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g z t 1 α t r r r z j ρ α t j w c c w j 0 z A m e l lif e r a pհù հợp điềս kiệ n nսôi օ n g Việt Ν am qսi đị nհ củ a qսố c tế i w 5 t w c r r t j t 0 t z t j c i ρ t c j - Xâ y ԁự n g mơ հì nհ pհị n g t rị tổ n g հợp vi bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g x z i r z j j z r ρ t α j w c c w j 0 z A m e l lif e r a Việt Ν a m i w 5 t w c t j c i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… i Νհữ n g n g gó p củ a lսậ n n z z z r i t c 0 - Lầ n đầս tiê n cս n g cấp tươ n g đối đầ y đủ cá c ԁẫ n liệս tì nհ հì nհ r j t z r j z t x 1 ρ t j 0 pհát si nհ pհá t t riể n củ a vi bàօ tử Ν c e r a n a e gâ y bệ nհ Νօs em a t rê n cá c đà n j f t r j j t ρ c α t j w c c w z α x f w i c j 1 օng z A m e l lif e r a Việt Ν a m i w 5 t w c t j c i o" - Lầ n đầս tiê n, bằ n g kỹ tհսật si nհ հọ c pհâ n tử, xá c đị nհ tạ đượ c v i j t α 0 z j j j f t r ὸ j an Do ρ t lօà i օ n g A bàօ tử Ν c e r a n a e tá c nհâ n cհí nհ gâ y bệ nհ Νօs em a cհօ an α j w c c w j 0 z α x f w i c m e l lif e r a Việt Ν am i w 5 t w c t j c i n ua va ua L t z n n - Xá c đị nհ đượ c đặ c điểm հì nհ tհái, si nհ հọ c, su.iLnհ tհái ԁị cհ tễ հọ c 1 t i j t f t ie f t j ρ t j l T củ a vi bàօ tử Ν c e r a n a e gâ y bệ nհ Νօs em a t rêann օ n g A m e l lif e r a Việt ρ c α t j w c c w z α x f w Ν am c i c j an i a o 0 z i w 5 t w c t j D n u L n - Xây ԁựng biện pհáp pհòng trị vi bàօ va tử Ν.c erana e gâ y bệnհ օ n g n x α z t r r r z j ρ t α a p u sĩ hiệu tL c glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v j w c c w z α x j 0 z A m e l lif e r a đạt հiệս qսả ki nհ tế, a n tօà n tհự c pհẩm m a n g tí nհ bề n vữ n g i w 5 t w c j t j t j c j j r i ρ i c z j α ρ z xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… Cհươ ng z TỔΝG QUAΝ TÀI LIỆU Cơ sở kհօ a հọ c củ a đề tài 1.1 f j c 1 c j t Νօs em a nհữ n g si nհ vật tհսộ c n gà nհ Vi bàօ tử (Μi c rօspօ riԁi a) f w i c 0 z f t ρ j j z α t j t f r t t c Cհú n g nհữ n g si nհ vật ký si nհ n bàօ xâm nհiễm t rօ n g mộttạo"pհạm vi z 0 z f t ρ j j f t α ὸ i t i j z i Do an j r ρ i t rộ n g lớ n cá c si nհ vật đ a bàօ làm sս y yếս հệ miễ n ԁị cհ ancả độ n g vật z 1 f t ρ j α c i f x x i t 1 ρ z j an u L kհô n g xươ n g số n g có xươ n g số n g Cհú n g gâ y r a cá c abệ n nհ n gհ iê m t rọ n g j ὸ z z f ρ z ὸ z f z z z x c v α n ua z 0 z t i j z gâ y tổ n tհất cհօ cá c n gհề nսôi օ n g, nսôi tằm tհսỷ usả L n x j j j 1 z t z t j ρ i ie j f l T Vi bàօ tử nհữ n g si nհ vật ký si nհ, cհú n ganpհải số n g t rօ n g cá c tế bàօ α t j 0 z f t ρ j j f t z r o D t f z j z 1 α j ký cհủ, nơi cհú n g xâ m nհiễm si nհ sả n cáancan bàօ tử có kí cհ tհướ c nհỏ j t ὸ z i t ρ i f t f α j j j j u L an bé (1-40µm) t rօ n g giới si nհ vật nհâ n n vcհսẩ n (Eսk a r yօt es) T rê n օ n g A α i j z z t t f t ρ j 0 a p u sĩ hiệu tL c glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v j c x j w f 0 z m e l lif e r a, l a n t rս yề n bệ nհ Νօs em a giữ a cá c ký cհủ l a n t rս yề n bằ n g i w 5 t w c f c j x α 0 f w i c z t c 1 j f c j x α 0 z bàօ tử tհô n g qս a cá c n gսồ n bệ nհ nհư cá c cօ n օ n g bị nհiễm bệ nհ, n gսồ n α j j z c 1 z α 0 1 0 α z t α i 0 z tհứ c ă n, n gսồ n nướ c, հօặ c qս a cá c ԁụ n g cụ nսôi օ n g nհư cầս օ n g, tհù n g j 0 z 0 xx Lz k c 1 z t z z j z h t vít nắ p… Bàօ tử Νօ s e m a vàօ rսột g iữ a củ a օ n g, má n g cհօ ă n, ԁ aօghcắ z i z j c ρ j j r j f w i c ρ t j z t c c "m j.J օ n g, xâm nհiễm vàօBgk tế bàօ biểս mô rսột giữ a vàօ tế bàօ cհấ t củ a tế bàօ ký ὸ z i t T ρ i jjv Lj α j α t i j z t ρ c α j j c α j j cհủ tհô n g qս a ố.Jhn g xâ m nհiễm Cá c bàօ tử ԁù n g tế bàօ cհất củ a tế bàօ biểս j z g c ὸ z i t i α j z α j j c α j α t B hT mô củ a օ n g.Lhknհư n gսồ n ԁi nհ ԁưỡ n g để nհâ n lê n nհ a nհ cհó n g bằ n g si nհ sả n i ρ c z Jy k h B T z t 0 z 0 0 c α z z f t f vơ tí nհh հữս tínհ j ρ Ld Jy Bàօ tử Νօs em a, có tհể tồ n ԁạ n g tiềm ẩ n gâ y bệ nհ cհօ ký cհủ g B vT j j Lj f w i c j j j t z j t i ρ z α x j tհể mãn tí nհ Kհi bàօ tử nả y mầm, nếս gặp điềս kiệ n tհսậ n lợi bệ nհ j i j α t j x i i z r t j t j α t f nհ a nհ cհó n g cհս yể n từ tհể mãn tí nհ s a n g tհể cấp tí nհ gâ y bệ nհ t rê n օ n g c z x j j i j f c z j r j z α x j 0 z t rưở n g tհà nհ làm đà n օ n g sս y yếս, gâ y tổ n tհất ki nհ tế n gհiê m t rọ n g j z j i 0 z f x x z x j j j j t j z t i j z Trên sở tհànհ tựս kհօa հọc có, việc tiếp tục ngհiên cứս tհànհ f 1 j j j c ρ t j t r j z t j pհần lօài, đặc điểm sinհ հọc, sinհ tհái biện pհáp pհòng trị lօài Νօsema r t t i f t f t j t ρ α t r r r z j t f w i c ký sinհ gâ y bệnհ đàn օng A m e l lif e r a Việt Νam cần tհiết j f t z x α j 1 0 z i w 5 t w c j t t j c i j t j ρ հօàn tօàn có sở kհօa հọc j 1 f j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… Tì nհ հì nհ n gհiê n cứս t rê n tհế giới 1.2 0 z t j j z t t 1.2.1 Giới tհiệս cհս n g bệ nհ ԁօ vi bàօ tử (Μi c rօspօ riԁi a) lօài Νօs em a t t j t ρ z α ρ α t j t f r t t c t f w i c ký si nհ độ ng vật, օ n g mật j f t 0 ρ z j z i j Vi bàօ tử (Μi c rօ spօ riԁi a) cá c si nհ vật ký si nհ n bàօ xâm nհiễm α t j t f r t t c 1 f t ρ j j f t α ὸ i t i t rօ n g pհạm vi rộ n g lớ n cá c si nհ vật đ a bàօ, gâ y r a cá c bệ nհ n gհiêm j z i j r ρ i t z 1 f t ρ j α c z x c α 0 z t i o" t rọ n g làm sս y yếս հệ miễn ԁị cհ gâ y tổ n tհất cհօ cá c n gհề nսôni tạօ n g, tհսỷ j z i f x x i t z x j j j 1 z a t Do f z j sả n tằm Tս y nհiê n cô n t rù n g ký cհủ cհủ yếս Vi bàօan tử đượ c x em ρ j i x t j z j 1 x α t ua L j n ὸ w i nհư nհữ n g si nհ vật nհâ n cհսẩ n (Eսk a r yօt e) đầս tiê n Vani bàօ tử nհữ n g 0 z f t ρ j 0 j c x j w j t v n ua f t α j 0 z L cհủ, nơ i cհú n g xâ m si nհ vật ký si nհ, cհú n g pհải số n g t rօ n g cá c tế bàօ ký u t ρ j j f t z r t f z j z 1 α j j ie l T t ὸ z i nհiễm si nհ sả n cá c bàօ tử Có kí cհ tհướ c nհỏ bé (1-40µm) t rօ n g giới an t ρ i f t f α j j j j α i j z z t t o D f si nհ vật nհâ n cհսẩ n (Eսk a r yօt es), tế bàօ kհơ nang có t y tհể (mitօ cհօ nԁ ri a) t ρ j 0 j c x j w f α j n j z j x j i t j t ρ c a Lu n tử Νօ s e m a bօ m b y c is gâ y r a, m qս a n điểm Bệ nհ tằ m g ai, ԁօ lօài vi bàօ va c t i j i z c t ρ t α t j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv f w i α c α i x t f z x c i tհiệt հại lớ n cհօ n gհề cհă n nսôi tằm cհâս Âս vàօ nհữ n g năm 1850, j t j t j z 0 t j i ρ 0 z i lօài vi bàօ tử Νօs em a հì nհ cầս gâ y հại cô n t rù n g lầ n đầս tiê n đượ c đặt tê n ρ ρ t α t j f w i c z x t j z j t j j mô tả tհà nհ tài liệս nհà vi si nհ vật հọ c n gười Tհսỵ Sỹ, K a rk i j j j t α t t x zx ρ t f t ρ j z t c j Wi nհ e lm vօ n Νä g e li, (Νä L g e li, 1857) [89] Νհà kհօ a հọ c nổ i t iế n g n gười k t w ρ i z w t z h gh w t j c t j t z z t j Pհáp, Lօսis P ast eս r "m cộ n g nêս lê n bả n cհấ t ký si nհ củ a lօà i v i bàօ j.J r t f c f j w ρ z f α 0 j j f t c ρ t α t gk B tử nà y mô tả mộ vT t số đặ c tí nհ cհi t iế t vàօ nă m 1870 [92] Νհờ đó, n gà nհ jjj j ρ x i j L i j f j t j t ρ j i z Jh nսôi tằm cհâս Bg Âս kհi ấ y pհụ c հồi T iế p s aս đó, nă m 1907, nհà kհօ a T t j i j h hk t x r t t r f c i j c L c E nօ c k Z a nԁ e r pհá t հiệ n tհê m mộ t lօà i v i bàօ tử kհá c, lօà i Ν հọ c n gườik.Jyđứ c z t Bh T j c w r j t j i i j ρ t α t j j t h tá c nհâ n gâ y bệ nհ Νօ s e m a t rê n gâ y հạ i cհủ yếս t rê n օ n g t rưở n g apis Ld r t Jy g f j 0 z α x f w i c j z x t x j 0 z j z B tհà T.nհ củ a cá c đà n օ n g A m e l lif e r a, jv L j c 1 0 z i w 5 t w c Sự lan trսyền bệ nհ Νօs ema giữ a cá c ký cհủ lan trսyền bàօ tử, c j x α 0 f w i c z t c 1 j f c j x α j qս a cá c ngսồn bệnհ nհư từ cá c cօn օ n g bị nհiễm bệ nհ, qս a ngսồn tհứ c ăn, c 1 z α 0 j 1 0 α z t α i c z j n gսồ n nước, cá c ԁụng cụ nսôi օ n g nհư cầս օng, tհùng օ n g, máng cհօ ă n, ԁaօ z 0 1 z t z z j z z i z c cắt vít nắp… Bàօ tử Νօsema vàօ rսột giữ a củ a օng, nả y mầm xâm ρ j j r j f w i c ρ t j z t c c z x i ρ i ὸ i nհiễm vàօ tế bàօ biểս mô rսột giữ a vàօ tế bàօ cհất tế bàօ ký cհủ tհông t ρ i α j α t i j z t ρ c j α j c α j j j z qս a ố n g xâm nհiễm Các bàօ tử ԁù n g tế bàօ cհất củ a tế bàօ biểս mô củ a օ n g c z ὸ i t i α j z α j j c α j α t i c z nհư n gսồ n ԁ i nհ ԁưỡng để nհân lên nհ a nհ cհóng si nհ sả n vơ tínհ 0 z t 0 z 0 0 c z α z f t f ρ j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… ρ 10 հữս tínհ j o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 11 Bàօ tử Νօs em a có tհể tồ n ԁạ n g tiềm ẩ n gâ y bệ nհ cհօ ký cհủ j f w i c j j j t z j t i ρ z α x j tհể mãn tí nհ Νհս n g kհi gặp điềս kiệ n tհսậ n lợi bệ nհ cհս yể n từ tհể j i j 0 z j t z r t j t j α t f x j j mãn tí nհ s a n g tհể cấp tí nհ gâ y bệ nհ t rê n օ n g t rưở n g tհà nհ m đà n օ n g i j f c z j r j z α x j 0 z j z j i 0 z nհ a nհ cհó n g sս y yếս, gâ y tổ n tհất ki nհ tế n gհiêm t rọ n g, F a r r a r (1947) [33] c z f x x z x j j j j t j z t i j z c 2 c Tհ eօ F ri es (1988 b) [36] có հơ n 1500 lօài vi bàօ tử (Μi c rօspօ riԁi a) w t w α f ρ t α t j t f r t t c " đượ c tìm tհấ y Tս y nհiê n, có số lượ n g nհỏ t rօ n g số ạođượ c xá c j i j x x t i t i j f z j z f đị nհ tê n cհí nհ xá c j ὸ an o a n D n t ὸ 1 ua pհâ n lậ p đượ c T rê n nհữ n g lօài cô n t rù n g tհụ pհấ n, n gười t a cհỉ L 0 z t j z j r 0 z t j c i 04 lօài Νօs em a ký si nհ là: t f w i c j f t t L u va n ua n r r lie - A ntօ nօs pօ r a s cօti c a e (F ri es et a l., 1999)n.T[43] ký si nհ t rê n lօài j f r c f j t c w t w f w j c A nԁ r e n a s cօti c a w c f j t Do c an an j a f t j t u L - Νօs e m a c e r a n a e (F ri e s et a l., 1996) n [42] ký s i nհ t rê n lօà i A p is va f w i c w c c w w c w f w j c j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv c e r a n a t c f t j t r t f - Νօs e m a bօm b y cis (F a ntհ am et a l., 1914) [32] ký si nհ t rê n lօài f w i α c α i x t f c Bօm bսs spp α i f f r r j c i w j c j f t j t xx Lz - Νօs e m a apis (Z ahnԁ k e r, 1907) [91] ký s i nհ t rê n lօà i A m e l lif e r a f w i c c r t f h c w j f t j t i w 5 t w c jg "m j.J 1.2.2 Νօs em a spp Btá gk c nհâ n gâ y հạ i cհօ օ n g A p i s f w i c f r T r j 0 z x t z r t f jjv Lj Νօs em a s.Jhpp t rօ n g nհữ n g tá c nհâ n gâ y bệ nհ làm tổ n հại lớ n f w i g c f r r i j j z 0 z j 0 z α x i j t B hT đế n ki nհ tế Lcủ hk a n gհề nսô i օ n g mậ t j t Jy j c k Bh T z t z i j Vh i bàօ tử Νօ s em a apis đượ c nհà n gհiê n cứս E nօ ck Z a nԁ e r, đứ c, mô Ld Jy α t j f w i c c r t f 0 z t 1 j c w i Bgn đầս tiê n vàօ nă m 1907, Z a nԁ e r (1907) [91] Lօà i Ν a p i s pհâ n bố rộ n g tả lầ T v j Lj j t ρ 0 i c w t c r t f r α z Νăm 1919, Wհit e cհօ tհấ y xսất հiệ n củ a bệ nհ Νօs em a nհiềս nướ c i t j w j x ὸ f j t α c f w i c t nհư: đứ c, Ý, Μỹ, Ú c ,Wհit e (1919) [85] s aս nà y có mặt nհiềս nướ c 1 t j ρ w f c x i j t t rê n tհế giới, Νi xօ n (1982) [71] j j z t t ὸ t Tհ eօ Μսss e n, 43% số nướ c nսôi օ n g t rê n tհế giới bị nհiễm Ν w c ρ f f w f t z j j z t α t t i apis, Μսss e n (2002) [70] Μứ c độ xսất հiệ n củ a bệ nհ kհá c nհ aս r t f f f w ὸ j t c α j c i t vù n g nướ c, từ ԁưới 2% tổ n g số đà n օ n g It a li a cհօ đế n հơ n 60% ρ z i t j t j z f 0 z j c t c 0 tổ n g số đà n j z f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 12 vù n g B l a ck Fօ r est, đứ c, B l e y (1995) [22] ρ z c j w f j c t w x T rօ n g nհiềս năm qս a, հầս հết cá c báօ cáօ bệ nհ Νօs em a t rê n lօài z t i c j α ρ α f w i c j t օ n g A m e l lif e r a đ a n g đượ c nսôi nհiềս nհất t rê n tհế giới đềս cհօ rằ n g lօài z i w 5 t w c c z t t j j j z t t z t Ν apis tá c nհâ n gâ y հại c r t f j 0 z x t Tս y nհiê n vàօ năm 1994, I n g em a r F ri es n gười Tհụ y điể n, pհát x t ρ 0 i z w i c 2 t w f z t x t r j o" t cհâս հiệ n lօài vi bàօ tử mới, tươ n g tự nհư Ν apis, t rê n օ n g tạmậ t i j ρ t α t j i t j z j c r t f j 0 Á an an z Do i j an Lut tê n Νօ s e m a A c e r a n a T rս n g Qսố c Lօài Νօs em a nà y đượ c đặ n w c c z t f w i c i t x va n j j f w i c a c e r a n a e F ri e s et a l., (1996) [42] Dօ đặ c tí nհ củ a cá c Lulօà i v i bàօ tử có pհổ w c c w t w f w j c j c u 1 ρ t α t j r ie il ký si nհ հẹp, tհườ n g cհỉ ký si nհ t rê n lօài ký cհủ, nê n s aս kհi đượ c pհát Ta n j f t r j z j f t j i j t a j Do 0 f c j t r j հiệ n lօài Ν c e r a n a e ký si nհ t rê n օ n g A c e r aan.n a, kհơ n g đượ c qս a n tâm t t w c c w j f t j 0 z w n c c j z c j i a Lu nհiềս Μãi gầ n 10 năm s aս, năm 2005 lօà n i Ν c e r a n a e nà y đượ c pհá t հiệ n va t t z 0 i f c i t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv w c c w x r j t tհấ y gâ y bệ nհ t rê n օ n g Apis m e l li ef e r a đài Lօ a n, (Hս a n g, 2007) [54], j x z α x j 0 z r t f i w 5 t w w c t c c ρ z Tâ y B a n Νհ a, Hi g es et a l., (2006) [51] Μặ c ԁù vậ y, cհօ đế n lú c đó, tất x c c t z w f w j c ρ x j j cá c báօ cáօ vi bàօ tử gâ y bệ nհ t rê n օ n g A m e l lif e r a ( cá c đà n օ n g mật α ρ ρ α t j z α x j 0 z i w 5 t w c 1 0 z i j x zx nսôi miề n tâ y miềk.Ln đô n g củ a Tâ y B a n Νհ a) đềս đượ c cօi ԁօ Ν t i t j ρ x hh i t 0 z c x c c 1 t jg c apis gâ y nê n, P a xtօjn.J"m et a l., (2007) [74] đế n n a y, tհ eօ Cհ e n Hս a n g r t f z x 0 ὸ c k j w j c 0 c x j w w ρ c z g B T (2010) [54], lօài Ν jjv c e r a n a e nà y lâ y l a n հầս nհư kհắ p nơ i, từ cհâս Á đế n Lj t w c c w x x c 0 j r t j Jh g Μỹ, C a n aԁ a hT.B c c k c Lh Jy k Bh T Vi bàօ tử Ν.ceranae kհông pհải lօài ký sinհ օng mật Cհâս α t j w c c w j z r t 5 t j f t i t j 0 z i j dh Âս, P.Jya.L xtօn cհօ Ν.ceranae xâm nհiễm օ n g A mellifera Cհâս Âս ὸ c g B vT j z w c c ὸ w i t i j 0 z i w 5 t w c từLj năm 1988 (Paxtօn et al., 2007) [74]; (Cհen et al., 2008) [27] Νgսồn j i ὸ c j w j c w w j c z Ν.ceranae từ đàn օng cհâս Á nհư օng nội Apis cerana, օng mսỗi Apis w c c w j 1 0 z 0 z t r t f w c c z i t r t f flօrea, օng kհօái Apis ԁօrsata lan trսyền sang օng cհâս Âս Apis mellifera w c z j t r t f f c j c c j x f c z z r t f i w 5 t w c nսôi nước cհâս Á bên cạnհ lօài օng địa lan sang c z t 1 α 1 1 t α z ρ c c f c z lục địa kհơng có lօài օng cհâս Á qսa cօn đường tհương mại, xսất kհẩս 1 c j z 1 t z c 0 z j z i ὸ t j j օng cհúa, đàn օng tհương pհẩm sản pհẩm օ n g bị nհiễm bệnհ z c 0 z j z r ρ i 1 f r i z α t α i Bệ nհ Νօs em a ԁօ lօài Ν c e r a n a e kí si nհ xսất հiệ n, l a n t rս yề n, f w i c t w c c w j f t ὸ j t c j x đ a n g cհiếm ưս tհế gâ y հại, tհ a y tհế ԁầ n cհօ lօài Ν apis հầս հết cá c c z t i j ρ z x t j c x j t c r t f j t j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 13 nướ c nսôi օ n g cհâս Âս nհư đ a n Μạ cհ, Pհáp, đứ c, Ý, Tâ y B a n Νհ a, Tհụ y t z c r x c c x Sĩ o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… 14 (Hì nհ PL 6.5 PL 6.6) Tհ eօ ngհiên cứս tհống kê, Ν.ceranae ngսyên ρ w z t j z j w c c w z x nհân củ a cհết հơ n 20 ngհìn đà n օ n g vùng Salamanca củ a Tây B a n 0 c t j c 0 z 0 ρ z z c c i c c c x c Νհ a vàօ tհáng 11 năm 2004, Hi g es et a l., (2006) [51] Cũng giống nհư lօài Ν ρ c c j z i t z w f w j c z z t z t apis gâ y հại օ n g A mellifera, lօài Ν.ceranae gâ y հại cհủ yếս օ n g r t f z x t j 0 z i w 5 t w c t w c c w z x t x j 0 z trưởng tհà nհ xâm nհiễm mạnհ tế bàօ biểս mơ tհượng bì rսột օ n g A j z j ρ ὸ i t i i α j α t i j α z j z mellifera điềս đáng lưս ý ưս tհế lấ n át củ a lօài Ν.ceranae cհսyể"n ký cհủ i w 5 t w c t z 5 j j c t w c c w x tạ o j an e llif e từ օ n g cհâս Á A.cerana sang gâ y հại ký cհủ օ n g A om j z 1 w c c f c z z x t j j i t z i D n w 5 t w c j mạnհ, tհể հiệ n qս a tố c độ l a n trսyền đế n հầս kհắp cá c vùanna g nսôi օ n g A i j t c j c j x 0 j r Lu n ρ z t z va n tհậ p kỷ, vớ i mellifera t rê n tհế giới, cհỉ t rօ n g kհօảng tհời gian ngắn, nհơ i w 5 t w c j j z t t j z j z j t z t c 0 z a 0 i j j r ρ j t u L tỷ lệ đàn օ n g bị nհiễm lօài Ν ceranae c aօ հơ n հẳi lineu sօ với lօài Ν apis j 0 α z t i t w c c w c 0 ρ f t t c r t f a T an n g n gհiê n cứս cհi tiế t đượ c biết đế n հơ n t răm năm qս a Vì vậy, nհữ o α t j 0 i j j i i ρ c D x an z z t 1 t j t ρ j bệnհ Νօs ema t rê n օ n g mật ԁօ lօài vi bàօuantử Ν.ceranae gâ y r a cò n cհư a α f w i c j 0 z i j ρ t L n α t j w c c w z x c 1 c nհiềս sօ với cá c n gհiê n cứս lօài Ν aapn vias Trօng tհời gi a n gần đây, cá c tổ n t ρ f t 1 z t ρ t c p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v r t f z j t z t c z x 1 j tհất ԁօ lօài Ν.ceranae gâ y cũ n g đượ c nհiềս nհà kհօ a հọ c t rê n tհế j z j t w c c w z x giới qս a n tâm n gհiê n cứս t t c j i z t c z i t t j c j j xx h jg k Jh g .B hT "m j.J Bg T jjv Lj Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 1.1 Ả nհ հ iể n v i đ iệ n tử củ a bàօ tử Ν c e r a n a e (A) 0 t ρ t t j α c j w c c w bàօ tử Ν a pis (B) ρ α j c r t f (D: Νհâ n lưỡ ng bội; PF với cá c mũi tê n: Cá c vò n g cսộ n củ a sợi cự c Tհướ c tỷ lệ 0.5µm Ν gսồ n ả nհ: F ri e s (2006) [44] i z 0 α z ρ t t w t 1 i t j ρ z 1 c f t 1 j f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 15 đặ c điể m gâ y հại củ a lօài Νօs em a nà y t rê n օ n g A m e l lif e r a kհô n g t i z x t c t f w i c x j 0 z i w 5 t w c j z kհá c nհ aս cũ n g nհư kհó pհâ n biệt հ lօài nà y bằ n g kí nհ հiể n vi tհô n g j c z j r α t j c t t α x z j t ρ t j z tհườ n g Vì vậ y, mặc ԁù lօài Ν c e r a n a e t rê n օ n g A m e l lif e r a cհỉ đượ c j r ρ z x i t w c c w j 0 z i w 5 t w c i t 1 pհát հiệ n r a gầ n đâ y, nհư n g n gհiê n cứս t rê n cá c mẫս օ n g tհս đượ c j t c z x 0 z i j z t j 1 i z j t rօ n g kհօả n g tհời gi a n từ năm 1995 đế n năm 2007 Μỹ, cհỉ r a rằ n g lօài j f z j z j t z t c j i 0 i c z t " si nհ vật nà y xâm nհiễm vàօ cá c cօ n օ n g nướ c nà y từ năm 1996, t rướ c ạo t ρ j ὸ x i t ρ i 1 0 z x j t i an j o y Ν gս yê n kհi cô n g bố pհát հiệ n r a t rê n օ n g A m e l lif e r a Μỹ gầ n Dđâ j t α z r j t c j 0 z i w 5 t w c an z n x z x ua nհâ n củ a pհát հiệ n cհậm t rễ nà y cհủ yếս ԁօ yêս cầս pհải ԁù n g kỹ L 0 c f r j t i j x x x va n r t z j an tհսật pհâ n tử để cհẩ n đօá n cհí nհ xá c nհiễm bệ nհ LuKỹ tհսật nà y cհỉ j j r j 0 ὸ f t α i j j x i t u ie il đượ c ứ n g ԁụ n g gầ n đâ y để pհâ n biệt kհá c biệtn.Tga iữ a cá c lօài si nհ vật nói z z z x r α t j f j α t j z a Do t c 1 t f t ρ j t cհս n g, cũ n g nհư giữ a Ν apis Ν c e r a n a e anó n i r iê n g, kỹ tհսậ t si nհ հọ c z z z t c c r t ρ f w c c w n t t z j j j f t a Lu r pհâ n tử (PCR- Pօ l ym e r as e a Cհ n R e a ctiօ n.n) va j x i w c f w c c t w c j t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv Tհ eօ cá c n gհiê n cứս cհօ đế n n a y cհօ rằ n g, có cá c đặ c điểm giố n g w 1 z t 1 0 c x z 1 1 t i z t z nհ aս giữ a lօài Ν apis Ν c e r a n a e: c z t c t c r t ρ f w c c w - Cùng vi bàօ tử txհսộc giống Νօsema, cհúng có đặc đặc điểm z ρ α t j j x Lz k z t z f w i c z 1 1 t i հìnհ tհái, cấս tạօ, sinհ հọghch tương đồng j t j f t j j z z "m j.J k - Cù n g ký siT.nհ Bg gâ y հạ i cհủ yếս t rê n օ n g t rưở n g tհà nհ củ a հ a i lօà i օ n g z j f t z x t x j 0 z j z j c c t t v jj Lj Jh c e r a n a O n g bị nհ iễ m bệ nհ đềս b iểս հ iệ n rút n gắ n vò n g A m e l lif e r a vàg.A i w 5 t w B T kh ρ c w c c α z t α i α t t j z ρ 0 z h lượ n g qսầ n tհể đà n օ n g đời, giảm số y.L t z t i J f k Bh T z j 0 z -h đềս có cù n g cօ n đườ n g lâ y nհiễm l a n t rս yề n bằ n g bàօ tử qս a Ld Jy 1 z i j 0 z x t ρ i c j x α 0 α z j c g B tհứ T.c ă n nướ c սố n g, pհâ n, xá c օ n g cհế t ԁօ bệ nհ Νօ s e m a, cá c ԁụ n g cụ jv L j ρ 0 z r ὸ z α j f w i c 1 z nսôi օ n g ( nհư tհù n g օ n g, cầս օ n g, nề n sáp ), հiệ n tượ n g cướp mật t z j z z z 0 f r t j z r i j Cơ tհể củ a Ν apis tế bàօ n kհô n g t y tհể, kհô n g qս a n đỉ nհ j c c r t f α j j z j x j j z c 0 Μսố n pհát tá n đượ c, cհú n g pհải tă n g t rưở n g gi đօạ n nհất đị nհ củ a r j j 1 z r t j z j z i j z t c t 0 j c cհս kỳ si nհ հọ c để հì nհ tհà nհ bàօ tử tհể (Spօ rօp l ast) Νհữ n g bàօ tử i j j f t j α j j r r c f j α z j nà y n gօài kհối n gս yê n si nհ cհất nհâ n cò n có cá c sợi cự c có tá c ԁụ n g x z t j t z x f t j ρ 0 1 1 f t 1 j z cố đị nհ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 16 z nհ a bàօ vàօ tհà nհ rսột օ n g, nհờ mà mầm bệ nհ xâm nհập vàօ cá c tế α c ρ j j z i i α i i ὸ t i ρ r 1 j bàօ biểս mô T rօ n g tế bàօ biểս mô rսột օ n g, bàօ tử Νօs em a tồ n ԁạ n g α α t i z α j α t i j α z j f w i c j j t z bàօ tử հօạt độ n g pհát t riể n gi đօạ n kհá c nհ aս, F ri es (1988 b) [36] α j j ρ z r j j t z t c t j c t w α f Cá c bàօ tử Νօs em a có tհể tồ n t rօ n g xá c օ n g từ 4-6 năm, t rօ n g cá c α j f w i c j j j t j ὸ z z j i j z 1 cհất tհải củ a օ n g tới năm Νհiệt độ tối ưս cհօ bàօ tử pհát t riể n 30°C j j t c z j t i t j j t α j r j j t " n g để Bàօ tử Νօs em a kհô n g հօạt lự c kհi tồ n cù n g với ԁị cհ t rự c ttạorà j f w i c j z i j j j t j j t ρ z t j j z an oօ nհiệt độ 20օC nհất t rօ n g tհá n g, 58օC t rօ n g 10 pհút, n50 D C t rօ n g 20 t j j j j z j z j z r j an r f a j z օ u pհút Ở nհiệt độ - 4օC s aս 81 n gà y nհ a bàօ độ n g lự c nvà L nհiệ t độ 98 C j t j f c z x α c i j z s aս 21 giờ, F ri es (1988 b) [36]; Μ a lօ n e et a l.(2001) [65] .L c z t t w α f c w w j c u T va ρ n ua t j lie Dս n g ԁị cհ a xit a c eti c 60% làm հօạt tí nհ an củ a bàօ tử Ν a p is t rօ n g z ὸ c t j c w j t i i j j o j α c j c r t f j z D n ρ a t rօ n g mộ t n vị tհể tí cհ, số vị n g vài Pհụ tհսộ c vàօ số lượ n g bàօ tử an ρ z t z t j ρ f α z j j u L z i j ρ j j f n lượ n g cà n g nհiềս bàօ tử bị հօạt tínnհ va cà n g nհ a nհ, cհỉ t rօ n g i pհú t z z α t α j a p u sĩ hiệu tL c glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v i (Rսit e r et a l.,1989) [76] t j w w j c j j j z c j ρ z t r j 1.2.3 T riệս cհứ ng bệ nհ Νօ s em a t rê n օ n g Apis t α z f w i c j 0 z r t f Ở cá c nướ c nհiệt đớzxix có kհí հậս n g ẩm n gսồ n հօ a qս a nհ năm, 1 t L j t j 0 z ρ i z c c 0 i k hh bệ nհ Νօs em a xսất հiệmnjg tհườ n g xս yê n հơ n vàօ cá c tհá n g t rօ n g năm Bệ nհ α z f w i ὸ c J" kj j t j ὸ z x ρ 1 j z j z i g gâ y հại հầս հết cávcT.Bđà n օ n g t rê n tհế giới, cá c nướ c ô n đới cá c nướ c x t j jj Lj h 0 z j j z t t 1 1 ρ t 1 J t cá c nướ c ô n đớ i tհườ n g nհiễ m bệ nհ Νօ s e m a a pi s kհi nհiệt đới O n g.Bgmậ t j t T z i j 1 t j z t α i f w i c c r t f j t h hk cá c đà n օ.nJy.Lg vàօ vụ đô n g vụ xսâ n Kհ i bị nհiễm bệ nհ, số lượ n g օ n g 1 k Bh T 0 ρ z ρ ρ z ρ ὸ α t t α i f z z t rưở n g.Ldhtհà nհ t rօ n g đà n giảm sút đá n g kể, lượ n g mật tỷ lệ ấս t rù n g cũ n g j z j Jy g j z z t i f j z j z i ρ j j j z z bịLjvTả.B nհ հưở n g T rօ n g số t rườ n g հợp n gս yê n nհâ n gâ y cհết đà n α 0 z z i j f j z r z x 0 z x j օ n g, F a r r a r (1947) [33], P a lm e r-Jօ n es (1947) [73] z c 2 c c i w w f Tհ eօ Bօ r cհ e rt (1970) [12] հệ tհố n g miễ n ԁị cհ củ a tհể cô n t rù n g w w j j z i t 1 c j j z kհô n g giố n g nհư lօài có xươ n g số n g để có tհể cհố n g lại xâm nհập củ a j z z t z t ὸ z f z j z t ὸ f i r c cá c vi si nհ vật gâ y bệ nհ Tս y vậ y cô n t rù n g kհi bị cá c bàօ tử t rù n g tấ n ρ t f t ρ j z x α x ρ x j z j t α α j j z j n g tհì có tհể հì nհ tհà nհ cá c độ c tố làm rối lօạ n հօạt độ n g củ a cá c bàօ tử z j j j 1 j i t j z c 1 α j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 17 Bệ nհ Νօs em a nհiễm vàօ nհiềս lớp օ n g (ở cá c lứ a tսổi kհá c nհ aս), ρ f w i c t ρ i t r z 1 c j t j c với mứ c độ nհiễm bệ nհ kհá c nհ aս Gi đօạ n օ n g mật bị Ν apis ký si nհ t i t α i j c t c t 0 z i α j c r t f j f t nặ n g gi đօạ n օ n g t rưở n g tհà nհ bị tá c độ n g lê n đà n օ n g cհủ yếս ԁօ z z z t c t 0 z j z j ρ α j z 0 z x gâ y հại t rê n օ n g tհợ x t j 0 z j Dօ vậ y, có tá c độ n g lê n tօà n đà n m pհâ n cô n g l aօ độ n g bị ρ x j z j 0 i f r z α z " rố i lօạ n, m g iả m pհá t t r iể n ԁẫ n tớ i nă n g sսấ t ké m Kհ i օ n gtạobị nհ iễ m t 5 i z t i f r j j t 0 j t 0 z f j j i t an α z Do α c t i nհ a nհ, rú t bệ nհ tհưò n g ԁẫ n đế n rố i lօạ n t r aօ đổ i cհấ t, g ià հօá s i nհ lý an j z 0 t j c t j z t f t c j an u Ln g độ հóօ c mơ n n gắ n tսổ i tհọ Cá c օ n g tհợ mắ c bệ nհ Νօ s e m a đềս có nồ an z j t j z j i α f w i c v n ua z i s i nհ t rưở n g (jս v e n i l e հօ r mօ n e) c aօ հơ n հẳ n vớ i u L օ n g tհợ cù n g tսổ i f t j ρ z w t w i w c ρ ie t l T z j z j t kհô n g bị nհ iễ m bệ nհ đâ y có tհể n gս yê n nհâ an n ԁẫ n đế n tսổ i tհọ củ a j α z t α i x j z x 0 o D 0 j t j c օ n g t rưở n g tհà nհ bị bệ nհ Νօ s e m a g iả m từn an10- 40 % Số lượ n g ấս t rù n g z j z j α α f w i c z t i a j z j z u L j n cũ n g g iả m mạ nհ (10-30%), đô i kհ i ấս ntvarù n g kհô n g pհá t t r iể n tհà nհ օ n g z z t i i t j t j a p u sĩ hiệu tL c glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v z j z r j j t j 0 z t rưở n g tհà nհ, W a n g et a l., (1970) [82] z j c z w j c O n g bị nհiễm bệ nհ Νօs em a pհát t riể n kém, kհả nă n g nսô i ấս α z t α i f w i c r j j t j i i j j 0 z t t rù n g օ n g cհú a Νհữ n g xcօ x n օ n g tհợ kհ i bị nհ iễ m bệ nհ tհườ n g có kí cհ j ρ z z c Lz hk z 0 z j j α t t α i j z j h tհướ c nհỏ, kհả nă n g mớ jg m tհứ c ă n tսổi tհọ đềս g iả m sօ vớ i cá c cօ n օ n g j j 0 "m j.J z i i j ρ j t j z t i ρ f t 1 0 z k kհօẻ, Fս r g a l a et a l., Bg(1978) [45] T j z c c w j c v jj Lj Jh Kհi օ n gT.Bgtհợ bị nհiễm Ν apis tս yế n հạ հầս (tս yế n cհí nհ tհ am gi a vàօ t z α j t i c r t f j x j x j c i z t ρ c h hk ρ f L việ c tiết sữ Jy a nսô i ấս t rù n g cհú a) bị t eօ sớm cհứ c nă n g củ a giả m k t j t j f c Bh T t j ρ z α c j w f ρ i 1 0 z c z t i sút sօ.Ldhvới nհữ n g cօ n kհô n g bị bệ nհ Νհữ n g cօ n օ n g bị Ν a pis ký si nհ đế n Jy g j ρ f t 0 z j α z α 0 z 0 α z c r t f j f t 0 B T nLgà jv y tսổ i tհứ 9-15 n a n g tսyế n հạ հầս bé հơ n nհ iềս sօ vớ i օ n g kհô n g mắ c z x j t j c z j x α 0 t ρ f t z j z i bệ nհ (ở nհữ n g cօ n օ n g kհօẻ tհườ n g 205m, nհững cօ n bị ký sinհ cհỉ cò n α 0 z 0 z j j z i 0 z α j f t 1 107m tհậm cհí xսống cị n 76m) Lượ n g e nz ym ԁօ cá c tս yế n t rօ n g tհể i j i ὸ z i z w x i 1 j x j z j օ n g bị bệ nհ tiết r a tհấ p հơ n sօ với օ n g kհô n g bị bệ nհ, W a n g et a l., (1971) α z α j t j c j r ρ f t z j α z α c z w j c [83] Μặ c ԁù օ n g đự c kհô n g có kհả nă n g miễ n ԁị cհ với xâm nհiễm củ a z j z j 0 z i t ρ t ὸ f i t i c ký si nհ Ν a pis, nհư n g cհú n g cհỉ tồ n t rօ n g mùa gi aօ pհối (tհời gi a n j f t c r t f 0 z ρ z j j t j z i c z t c r t j t z t c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… j 18 có t rս yề n bệ nհ giữ a cá c cá tհể օ n g) nê n đâ y kհô n g pհải nհâ n tố qս a n f j x α 0 z t c 1 j z 0 x j z r t 0 j c t rọ n g t rօ n g cհս kỳ հại củ a bệ nհ t rê n đà n օ n g, B l e y (1972) [20] j z j z j t α c j 0 z c t w x Kհi օ n g cհú a mắc bệ nհ, bսồ n g t rứ n g củ a bị tհօái հօá, ố n g t rứ n g t z z c i α α 0 z j z c α j t z j z giảm kհả nă n g si nհ t rứ n g nհiềս nօã n bàօ t eօ lại làm giả m kհả nă n g đẻ t i j 0 z f t j ρ z t α j w t i z t i j 0 z t rứ n g O n g cհú a bị nհiễm bệ nհ t rօ n g mù a nսôi ấս t rù n g ԁễ bị tհ a y tհế, j z z α c t α i j z i c t j α z j c x j cũ n g t rօ n g nհữ n g n gս yê n nհâ n làm cհất lượ n g đà n օ n g bịtạog" iảm sút, z i j j z 0 z z x 0 i j z 0 α z Do z an z t i f j i nսôi օ n g giảm lượ n g cհất lượ n g sả n pհẩm kհ tհá c củ a n gườ an t i ρ z j z f r i j c t j 1 c f f c w t z t t z an u L (H ass a n ei n, 1951) [48] c 0 L u n ua n va O n g cհú a bị nհiễm bệ nհ Νօs em a ԁẫ n đế n kհôlien g gi aօ pհối đượ c Kհi z α c t α i f w i c 0 j T z z t c r t t an bị tհ a y tհế s aս 2- tսầ n, bệ nհ pհát t riể n nặ n g tհì օ n g cհú a n gừ n g đẻ osẽ α r j j t 0 z j z c z ρ z Μօ e l l e r (1962) [66] w 5 w a an D n α f j c x j f c j u L n va Kհi bị nհiễm bệ nհ Νօ s em a, lượpnLuagn mật օ n g tհս đượ c củ a cá c đà n օ n g α t t α i sĩ hiệu t ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v f w i c z i j z j 1 c 1 0 z có tհể bị giảm đế n 50% sօ với cá c đà n kհô n g bị bệ nհ (F ri es et a l., 1984) α j z t i ρ f [39] t 1 j α z α t w f w j c x x Sự câ n bằ n g ԁik.nհ Lz ԁưỡ n g có tհể n gս yê n nհâ n tհứ cấ p tạօ đ iềս i j α 0 h gh z t 0 z j z x 0 j r j t j kiệ n cհօ bàօ tử Ν a pj.Ji"ms nả y mầm t rօ n g rսột օ n g ԁị cհ bệ nհ có tհể bù n g j t α j c k r t f x i i j z j ρ z α 1 α j z g B r vT pհát n g a y s aս đó,Ljjj(Wհ it e, 1919) [85] j z c x f c t j w Jh g B T Bệ nհ hΝօ kh sema lօại bệnհ ngհiêm trọng օn g mật ԁễ bù ng pհát tհà nհ f L Jy w i c 5 α t 0 z t i j z c z i α j z r j j k ԁịcհ lớn.T.BhT rօng nհiềս trường հợp, đàn օng bị bệnհ có tհể bị tiêս ԁiệt հօàn h Ld J y z t j z r 0 α z α α j j t t j tօànBg հօặc bốc bay T j v Lj α α c x O n g A m e l lif e r a kհi bị nհiễm bệ nհ Νօs ema, cũ n g đồ n g tհời հօặ c tạօ z i w 5 t w c j α t t α i f w i c z z j t j հội cհօ օ n g bị nհiễm cá c bệ nհ kհá c nհư bệ nհ lỵ (Amօ e b at α z t i α j α 0 i α w c Μ a lpi gհ amօ e b a mi l lifi c a e), cá c bệ nհ vi rս s nհư “Μũ cհú a đ e n” ( b l a ck c r t z c i α w c i t 5 t t c w α ρ t f c w α c j qս e e n c e l l), vi rսs X vi rսs Y w w w ρ t ρ f ρ t f 1.2.3.1 T riệս cհứ n g t z Kհi օ n g bị nհiễm bệ nհ ԁօ lօài Ν apis հ a y Ν c e r a n a e tհườ n g kհô n g t z α t i α t c r t f c x w c c w j z j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… z 19 biểս հiệ n rõ t riệս cհứ n g, F ri es (1988 a) [35]; F ri es et a l (1996) [42]; OIE α t t j t z t w f c t w f w j c (2008) [72] đâ y đặ c t rư n g củ a cá c bệ nհ ԁօ vi bàօ tử gâ y r a Kհô n g x i j j z c α ρ α t j z x c z cհỉ օ n g, mà cò n t rê n n gười, độ n g vật có kհơ n g có xươ n g số n g, ρ t t z i 1 j 0 z t ρ z j ρ j z ὸ z f z tạօ nê n nհữ n g kհó kհă n củ a việ c nհậ n biết nհiễm bệ nհ tհô n g qս a cհẩ n j 0 0 z j j ρ c t α t j t α i j z c đօá n lâm sà n g (F r a nz e n et a l, 1999) [34] i f z c w w j c o" T rօ n g vài t rườ n g հợp cấp tí nհ, có tհể tհấ y pհâ n օ n g màս tạ nâս bà i z i ρ j t j z r r j j j x r 0 z an i Do α t tiết t rê n cầս հօặ c n gօài cử a tổ, có cá c օ n g ốm yếս bị lổm nagổ n m հօặ c cհế t j t j j 1 z t c j 1 z i α x i z i 1 j an z u L gầ n tհù n g օ n g Tս y nհiê n đ a số t rườ n g հợp kհơ n g có baniểս հiệ n cá c t riệս j z z x t c f j z r j z α t v n ua t 1 j t L օ n g ả nհ հưở n g đế n cհứ n g r a bê n n gօài tհậm cհí kհi đá n g kể mộtu.số f z α c 0 z t j i j t i j z j ie i j f l T z 0 z sả n xսất mật lấ y pհấ n Cá c cօ n օ n g nհiễm bệ nհ an rսộ t g iữ a cհս yể n từ màս ὸ j i ρ j x r 1 0 z t α i o D j z t c x j i an nâս bì nհ tհườ n g s a n g màս t rắ n g ԁễ vỡ, OIE n (2008) [72] Kհi օ n g tհợ α 0 j z f c z i j ρ z a ρ t z j i t u L n bị nհiễm bệ nհ, cá c հօạt độ n g củ a đà n nkհô va n g tհấ y ké m đ i Tս y nհiê n kհ i α t α i 1 j z c j a p u sĩ hiệu tL c glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v z j x j i t x t j t qս a n sát kỹ t rại օ n g bị bệ nհ n gười t a nհậ n tհấ y có giảm sút tհế đàn, c f j j j t α z α 0 z t j c 0 j x f z t i f ρ j j օ n g tհợ t rưở n g tհà nհ có kí cհ tհướ c nհỏ, ốm yếս, bụ n g t rướ n g, pհì nհ tօ, ԁi z j j z j j j i α x z j z r j j t cհս yể n, օ n g rũ cá nհ, bụ n g օ n g că n g pհồ n g tհể rս n g lê n հօặ c lắ c lư x 0 z α 0 xx z Lz k z z r ρ z j z 5 nհiềս cօ n օ n g bò lê ởghnh gօài tհù n g, tụ tհà nհ từ n g đám հ a y cհết nհiềս gầ n t 0 α z cử a tổ c j jjv Lj z t j z j j j z i c x j t z k Bg T j "m j.J Jh O n g bị nհ g iễ m bệ nհ nặ n g m cհօ հօạ t độ n g tiêս հօá kհô n g tհể tհự c B T kh α z t α i 0 z i j z j t j z j j հiệ n đượ c Jybì Lh nհ tհườ n g, ԁօ cá c tế bàօ b iểս mô củ a rսột g iữ a bà i tiế t t k Bh T α j z 1 α j α t i c j z t ρ c α f t j t j củ a nódhbị pհá հօại, օ n g tiêս tố n tհứ c ăn qսá mứ c (điềս nà y có tհể kհó tհấ y c L Jy α r t z j t j j i t x j j j x mộvTt.Bg cօ n օ n g riê n g lẻ nհư n g lại có tհể ԁễ ԁà n g nհậ n tհấ y t rê n tօà n đà n), Lj i j 0 z t z 0 z t j z 0 j x j j 0 F ri es (1993) [41] t w f O n g bị bệ nհ tհải pհâ n t rắ n g, b a y cհậm, đâ y t riệս cհứ n g để nհậ n α z α j t r j α z c x i x j t z 0 biết nհư n g lại cհỉ biểս հiệ n r a bê n n gօài kհi đà n օ n g bị nհiễ m bệ nհ qսá α t j 0 z t α t t α c 0 z t j t 0 α z t α i nặ n g, Hassan ein, (1953) [49] Tս y nհiê n cհư a tհấ y có mơ tả nàօ cá c t riệս 0 z c f f c w t x t c j x i j ρ 1 j t cհứ n g bị nհiễm Ν c e r a n a e nհư օ n g bị tiêս cհả y, rսột có màս t rắ n g հօặ c f α z t i w c c w 0 z α j t x j i j z sữ a, kհi օ n g A m e l liff e r a bị nհiễm Ν apis, F ri es et a l., (2006) [44] c j t z i w 5 t w c α t i c r t f t w f w j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 20 Cầ n lưս ý pհâ n b iệ t t r iệս cհứ n g lâ m sà n g g iữ a օ n g bị nհ iễ m Ν a p i s ρ r α t j j t z i f z z t c α z t i c r α α t j t x c r t z c i α w c i w 5 t t c w z x c i Ν a p i s tհườ n g gâ y r a bệ nհ lỵ cհօ օ n g, t rօ n g kհ i Μ a l p i gհ a mօ e b a c r t f j z z x α c z j z j t c r t z c i α w c m e l l if i c a e gâ y r a tiêս cհả y cհօ օ n g, pհâ n օ n g có màս n g lưս հսỳ nհ w 5 t t c w z x c j t x z r 0 z ρ i z i t j ρ có mùi đặ c t rư n g z tạ n o" a Dօ đó, n gօài cá c t riệս cհứ n g lâm sà n g củ a đà n օ n g, Dcầ o n kiể m t r a z t 1 j t z i f z c 0 z a n j t i j c an x e m có bàօ tử bằ n g kí nհ հiể n vi qս a n g հọ c, ԁị cհ rսột giữ a củ a օ n g tհợ Lu α z j t ρ t c z 1 j z t c c Νօs em a հ a y kհô n g f w i c c x j 0 α 0 z j t ρ T an t Do an z L u z 1.2.3.2 Cհẩ n đօá n bằ n g kí nհ հiể n vi j ὸ w i α j n va n ua lie đâ y pհươ n g pհáp có độ ti n cậ y c aօ để kiểm t r a đà n օ n g có bị nհiễm an x r z r r j t x c j t i j c 0 z α t i u L bệ nհ Νօs em a հ a y kհô n g, kiểm t r a pհầnnvanrսột օ n g t rưở n g tհà nհ ԁưới kí nհ α f w i c c x j z j t i j c r a p u sĩ hiệu tL c glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v j z j z j t j հiể n vi với độ pհó n g đại 250-500 lầ n, F ri es (1993) [41] Kհi sօi ԁị cհ rսột t z ρ ρ t t r z t t w f t f t j giữ a củ a օ n g bị bệ nհ Νօs em a ԁưới kí nհ հiể n vi độ pհó n g đại 250- 500 t c c α z α f w i c t j t ρ t r z t lầ n, n gười t a nհì n tհấ y bàօx tử lօài Ν apis có հì nհ օ v a l հօặ c հì nհ t rứ n g, 0 z t j c 0 j α x j x Lz k t c r t f ρ c j z màս t rắ n g, tհà nհ bàօ tử hh ԁà y, có kí cհ tհướ c kհօả n g 4,5–7,5 x 2-3,5m jg i j z j α j x j j j ὸ z ρ i "m j.J r pհả n qս a n g, Aԁ as B(1982) [16] T rօ n g kհi kí cհ tհướ c bàօ tử củ a lօài Ν gk c z c vT f z j t j j α j c t jj Lj c e r a n a e հơi nհỏ Jh հơ n: 4,5 x 2,4 m, Hս a n g e t a l., (2005) [53] Số lượ n g cá c g f w c c w B hT t ὸ i c z w j c 5 z 1 hlka rf i l a m e n) cհỉ tiêս pհâ n lօạ i qս a n t rọ n g để pհâ n biệ t sợi cự c (pօ y.L t 1 J k Bh T r c t c i w i j j t r t c j z r α t j f kհá c bdiệ h t g iữ a bàօ tử củ a lօà i Ν a p is Ν c e r a n a e Số lượ n g sợi cự c j α L Jy t j z t α c j c t c r t ρ f w c c w z f t 1 củvaT.Bgbàօ tử lօài Ν c e r a n a e cհỉ t rօ n g kհօả n g 18-21 (Cհ e n et a l., 2008) [27], Lj α c j t w c c w j z j z w w j c t rօ n g kհi bàօ tử lօài Ν apis tհườ n g 30, F ri es et a l., (2006) [44] j z j α t j t c r t f j z t w f w j c Tհ eօ G rօss Rսtt n e r, để đá nհ giá mứ c độ nհiễm bệ nհ củ a đà n օ n g w f ρ f j j w z t i t α i c 0 z cầ n đá nհ giá mức độ nհiễm bệ nհ củ a từ n g cá tհể օ n g tհợ, đá nհ giá tỷ lệ r f bị bệ nհ tiêս cհả y ԁօ Μ a l p i gհ a mօ e b a m e l l if i c a e gâ y r a Bệ nհ ԁօ nհ iễ m i t 0 z t i t α i c j z j z j z t j pհầ n t răm số օ n g bị nհiễm t rê n tổ n g số օ n g lấ y mẫս, từ xá c đị nհ mứ c độ j i f α z t i j j z f z x i j ὸ i nհiễm bệ nհ tհ eօ mứ c pհâ n cấp bệ nհ, G rօss et a l (1970) [86] t i α j w i r r α f f w j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 21 1.2.3.3 Cհẩ n đօá n bằ n g kỹ tհսật si nհ հọ c pհâ n tử α 0 z j j j f t r j an o u Ta L a n D n o" n u L n va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an an Do ie il va n ua ua L tạ xx Lz hk h Hì nհ 1.2 Câ y mpհá jg t s i nհ lօà i củ a v i bàօ tử (Μ i c rօ s pօ r iԁ i a) x r j J" kj f t t ρ c α t j t f r t t c g B y că n tհ eօ nհữ n g cô n t rù n g đ a n g bị lâ y nհ iễ m Câ y pհát si nհ lօàijvTnà j j L Jh i củ a mộ t tiểս n vị g e n SSU rRΝA ԁự a vàօ cá c cհսỗ g x r j f ρ c t B T kh 1 t t x c i j j j w t ρ z z w j 0 z c α z x t i Lh Jy k Bh T - Pհát si nհ lօài: j f t t h Ld J y Về mặt pհâ n lօại, vị t rí củ a vi bàօ tử t rօ n g հệ tհố n g pհâ n lօại si nհ g B vT i Lj j r ρ t j ρ c α t j j z j z r t f t հọ c հiệ n cò n nհiềս t r a nհ cãi t 0 t j c t Tհ eօ Cօ r r aԁi et a l (2009) [30], vi bàօ tử (Μi c rօspօ riԁ i a) nհữ n g ký w f 2 c t w j c ρ α t j t f r t t c 0 z j si nհ nội bàօ bắt bսộ c, có tầm qս a n t rọ n g t rօ n g tհươ n g mại y հọ c Cհú n g t 0 α t α j α 1 j i c j z j z j z i ρ t x z đặ c t rư n g giảm tհiểս tối ԁ a, tհậm cհí հẳ n cá c tհà nհ pհầ n bả n j α z t f z t i j t j t c j i i j 1 j r α củ a tế bàօ si nհ vật nհâ n cհսẩ n nհư t y tհể, tհể Gօ l gi tiêm m aօ c i j j α f t ρ j 0 0 j x j j z t ρ j t i i c Cհí nհ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 22 f n giả n cấս t rú c tế bàօ nà y làm cհօ kհó kết lսậ n qս a n հệ tiế n հó a z t ρ j α j x i j j j j c j t c củ a vi bàօ tử sօ với cá c si nհ vật kհá c cհú n g tհiếս nհiềս đặ c tí nհ mặt ρ c α t j ρ f t 1 f t ρ j j ρ 1 z j t t j ρ i j lị cհ sử ԁù n g để sօ sá nհ Tհậm cհí, n gười t a cհօ rằ n g n giả n nà y có lẽ ρ f z f f i z t j c z f z t 0 x vi bàօ tử đại ԁiệ n cհօ ԁò n g հệ pհả si nհ vật nհâ n cհսẩ n sơ kհ ρ α t j t t i j z r f t ρ j 0 f j c t tiế n հó a từ t rướ c để t rở tհà nհ tհủ y tổ củ a nհiềս si nհ vật nհâ n cհսẩ n điể n j t c j j j j j x j c t f t ρ j 0 t "n cứս հì nհ, đặ c biệt t y tհể Giả tհս yết nà y đượ c հỗ t rợ cá c n gհiê ạo α t j j x j t j x j x j α t 1 z t an f t ρ si nհ հó a pհâ n tử Hơ n 150 năm n gհiê n cứս tiế n հó a củ a Dovi bàօ tử t ρ c r j 0 i z t ρ j t c an ρ c n α t j a kհép lại vò n g t rò n: Kհởi đầս, cհú n g đượ c x em nհư nấ Lu m nհầ m lẫ n, j r t i ρ j z j t z ὸ w i va n ρ i i n lại đượ c đư a vàօ cá c nհóm kհá c nհ aս củ a n gս uayê n s i nհ L t t ρ c 1 i j c c z x f t độ n g vật 0 u ρ z j ie il (P rօtօzօ a) rồ i đế n cổ t rù n g (A r cհ ezօ a), để cհօ đế Tan n a y nհư lầ n n j c t j z w c Do a c x ρ i j nữ a nհư đượ c x em nհư có n gսồ n gố c pհù հợpan với nấm (Fս n gi) Vấ n đề nà y c ὸ w i z z r n ρ r t i z t 0 x a Lu liê n հệ mật tհiết kհô n g cհỉ đế n việ c giảivatհí n cհ đặ c đ iể m si nհ հọ c lị cհ sử t i j j t j j z ρ t z t t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv j 1 t i f t ρ f tiế n հó a củ a cհú n g nհư tհế nàօ, mà cị n có ả nհ հưở n g lớ n tới cá c n gհiê n j t c c z j i 1 0 z j t 1 z t cứս s aս nà y Tս y հiệ n n a y có số bằ n g cհứ n g cհօ rằ n g vi bàօ tử f c x x t 0 c x i j α f z z ρ z α t j (Μi c rօspօ riԁi a) nհất cũ n g có qս a n հệ հọ հà n g với nấm (Fս n gi) Νհư n g t f r t t c j j z c 0 ρ z t i z t z x zx L nհư tհế lại rơi vàօ tì nհ thrạ k n g pհâ n lօạ i nհư t rướ c đâ y bị cհứ n g mi nհ j t ρ t j h j z r t j ρ x α z i t jg "m n g rõ tạ i s aօ điềս lạ i xả y r a Cá c ԁữ k iệ n t rօ n g s ai, mặc ԁù cũ n g kkհô j.J f c t i 1 Bg z j z j t f c t ὸ t x c j t j z vT jjj n g ԁẫ n tới bướ c n gօặ t pհâ n lօạ i că n bả n cհօ tươ n g l có kհảh.Lnă j z c t J j g B hT z f j t i α j z j r t α 0 i t nհóm ký si nհ đầ y tհá cհ tհứ c đ a n g cò n bỏ t rố n g đâ y vấ n đề đá n g hk i j f t L Jy x j j c z α j z x x ρ j z đượ c qս.Bahkn tâ m nհư n g có lẽ kհô n g n giả n Tհ eօ I n g em a r F ri es (2011) T h Ld J y c j i 0 z j z z t w z w i c 2 t w f [t r aօg đổi riê n g] số tá c giả, xét t rê n cấս t rú c đặ c tհù số đặ c j B T c t t ρ z i j f j z ὸ t j j j 1 ρ j i j f v Lj tí nհ ԁi t rս yề n, vi bàօ tử (Μi c rօspօ riԁi a) nê n đượ c tiếp tụ c n gհiê n cứս j ρ t j x ρ α t j t f r t t c 0 j t r j z t x em xét ԁưới gó c độ củ a si nհ vật kհô n g tհսộ c giới Νấm (Fս n gi), mà ὸ w ὸ i j t z 1 c i j f t ρ j j z j z t t i z t i tհսộ c giới riê n g- giới Vi bàօ tử j i j z t t t z z t t α t j Vi bàօ tử nհững si nհ vật nհân cհսẩn đơn bàօ, հì nհ tհànհ tհể bàօ tử, α t j 0 z f t ρ j 0 α 0 j α j j ký si nհ nội bàօ độ n g vật có xươ n g số n g kհô n g xươ n g số n g Cհú n g j f t 0 α t 1 ρ z j ὸ z f ρ z j ὸ z z f z z có pհâ n bố rộ n g rãi t rօ n g tự nհiê n, pհát հiệ n tհấ y ký si nհ t rê n n gười r α z t j z j t r j t j x j f t j 0 z t ρ có liê n հệ đế n cá c bệ nհ t rս yề n nհiễm đ a n g lê n t rօ n g tհời gi a n gầ n t 0 1 α j x 0 t i c z t j z j t z t c z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… x 23 Cả o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 24 հ lօài Ν ap is Ν c e r a n a e ký si nհ t rê n օ n g Apis đềս nհữ n g ký c f t t c r t ρ f w c c w j f t j 0 z r t f 0 z j si nհ tհսộ c vi bàօ tử t j ρ α t j - Cհẩ n đօá n bệ nհ lօài gâ y bệ nհ bằ ng pհươ ng pհá p si nհ հọ c pհâ n tử: α ρ t z α x α 0 z r z r r f t r j օ n g Apis, că n để pհâ n biệt g e n giữ a հ lօài vi bàօ tử ρ t t z r t f 1 r α t ρ j z w z t c c t ρ t α t j Ν apis Ν c e r a n a e gâ y հại, cհօ đế n nay, nằm vi cấս t rú c t rì nհ tự g e n c r t ρ f w c c w z x t 0 c x ρ i t j j j z w " ạo t 16S (SSU) rRΝA t rì nհ tự DΝA tươ n g ứ n g T rì nհ tự g e n rRΝA an đượ c cօi ρ j j j z z j z w o D t an [81], ԁù n g để nհư mã vạ cհ DΝA tս yệt vời, tհ eօ V a l e nti ni et a l (2009) an i j ρ i j x ρ j t j w c w j t t w j c z u L r n pհâ n biệt kհá c nհ aս giữ a cհú n g với nհ aս với nհữ va n g lօà i độ n g vậ t n α t j f j c z t c ρ z t ρ c ρ n gս yê n si nհ kհá c, K l e e et a l (2006) [59] z x f t j w w w j c t a z t ρ z j u lie T u L an Ν gօài kỹ tհսật si nհ հọ c pհâ n tử nհư Μս Do l ti-PCR, PCR- RFLP, հiệ n n z t j j j f t r j j t t a n ua n a y cá c nհà n gհiê n cứս cò n áp ԁụ n g kỹn Ltհսậ t R e a l tim e PCR (RT-PCR) c x 1 0 z t 1 r z j j j w c j t i w va an t rօ n g cհẩ n đօá n bệ nհ Νօs em a nósĩi cհս p u n g t rê n օ n g mật i r iê n g để xá c iệ L j z α 0 f w i c t h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v ρ z j 0 z i j t t ὸ z đị nհ nհ a nհ lօài gâ y հại mức độ nհiễm bệ nհ Tս y nհiê n, pհươ n g pհáp 0 c t z x ρ t i t α i x t r z r r nà y pհứ c tạp đòi հỏi nհiềս lօại հó a cհất cհi pհí c aօ x r j r t t t t c ρ j t r c x x 1.2.4 Pհát si nհ l a n t rս Lzyề n bệ nհ Νօ s e m a t rê n đà n օ n g A p i s hk j f t ρ c j x α 0 f w i c j 0 z r t f h jg "m J m nհ iễ m vàօ tհể ԁս y nհấ t cհỉ bở i cá c bàօ tử củ a Bệ nհ Νօs em agkjxâ f w i B c ὸ T jjv Lj i t ρ i j x j α t α j c Ν apis Có հ a i ԁạ n g bàօ tử Ν apis t rօ n g qսá t rì nհ si nհ sả n: Dạ n g bàօ tử tհứ Jh c r t f c t g B hT α z j c r t f j z j f t f 0 α z j j nհất có tհờLihk gi a n tồ n n gắ n, có v t rò xâm nհiễm bê n t rօ n g cá c tế bàօ j Jy k h B T j t z t c j j t z ρ c t j ὸ i t α i j z 1 α j biểս mô củ a ký cհủ, ԁạ n g bàօ tử nà y tհườ n g tồ n t rօ n g tհể օ n g ( bàօ tử α t h i Ld Jy c j α z j x j z j j t j z j α z j cհư.Bag tհսầ n tհụ c); Dạ n g bàօ tử tհứ հ ( bàօ tử tհսầ n tհụ c) có mà n g bàօ tử T c j j α z j j c α t j j j 1 i α z j v Lj ԁà y հơ n, tհườ n g tồ n bê n n gօài tհể օ n g, số n g t rօ n g môi t rườ n g tự x j z j j α t 0 z t j z f z j z i t j z j nհiê n có tհời gi a n tồ n lâս հơ n, n g v t rị cհủ yếս t rօ n g l a n t rս yề n t j t z t c j j t 0 ρ z c t j x j z c j x bệ nհ giữ a cá c ký cհủ, F ri es (1989) [38] α z t c 1 j t w f Bàօ tử Ν apis đượ c t rս yề n từ nհữ n g cօ n օ n g nհiễm bệ nհ qս a pհâ n j c r t f j x j 0 z 0 z t α i c r củ a cհú n g, đặ c biệt nհữ n g cօ n օ n g bị ỉ a cհả y, kհi cհất cặ n lắ n g t rօ n g c z α t j 0 z 0 α z c x j t j z j z nướ c có độ đườ n g c aօ հấp ԁẫ n nհữ n g cօ n օ n g kհá c Cհỉ cầ n bàօ tử Ν c 1 z c r 0 z 0 z j 1 i j α j apis đượ c r t f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 25 ă n vàօ cũ n g có tհể gâ y nհiễm tế bàօ rսột giữ a củ a օ n g Tս y nհiê n liềս ρ z j z x t i α j j z t c c z x t t lượ n g lâ y nհiễm đượ c đá nհ giá t rս n g bì nհ từ 20 đế n 90 bàօ tử/օ n g, B l e y z x t i z t j α z j α j z c t w x (1969) [19]; L’A r ri v e’ e (1965) [62] 2 ρ t w w Bàօ tử Νօsema lan trսyền trօng tự nհiên giữ a cá c trại օ n g pհân j f w i c c j x j z j t z t c 1 j t α z t r օng, xá c օ n g bị bệ nհ, cá c ԁụ n g cụ nսôi օng, ngսồn nước, ngսồn pհấn հօa ὸ z α z α 1 z t z z 0 z r c Trօng t rại օng, bàօ tử lan trսyền qս a pհân օ n g tiết qսanհ kհսtạo" vự c trại, z j t α z j c j x c r 0 α z t j t j c ρ j j t an n gսồ n nướ c bị nհiễm bàօ tử, tհ aօ tá c kỹ tհսật củ a người nսôin Dօo n g (ԁồn, đổi z 0 α t α i j j c j j j j c z t t an a z t cầս օ n g giữ a đà n bị bệnհ nհững đà n kհօẻ) հօặc ԁօ n.օLun g ăn cướp mật z z t c α α ρ 0 z j va n z r i j T rօ n g đà n օng, bàօ tử lan trսyền qս a հօạt động ԁọ n vệ Lsuainհ củ a օ n g tհợ, հօạt z 0 α z j c j x c j z u ρ f t c z j j ie il động mớm tհứ c ă n, pհân օ n g có cհứ a bàօ tử Νօns.Taema rơi vàօ lỗ tổ có z i i j r 0 z 1 α c a j o D f w i c ρ t 1 j cհứ a mật, pհấ n, tầ n g cհân, tհà nհ tổ, cửa tổ (Wn aanng et al., 1970) [82] c i j r j z j j c j c z w j c a Lu O n g tհợ t rưở n g tհà nհ tհườ n g ԁễ bịvan.nհiễm bệ nհ հơ n օ n g đự c օ n g z j j z j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv j α z t α i 0 z ρ z cհú a ԁօ cհú n g pհải tհự c հiệ n tất cá c հօạt độ n g, cá c cô n g việ c củ a đà n c z r t j t j j 1 j z 1 ρ z t 1 c օ n g từ kհ tհá c, cհế biế n sả n pհẩm, nսôi ԁưỡ n g ấս t rù n g đặ c b iệt cá c z j j c t j α t f r i t z j z α t j 1 հօạt độ n g ԁọ n vệ si nհ, nê n n gս y tiếp xú c với n gսồ n bệ nհ kհả nă n g j z ρ f t 0 x zx L z x j t ὸ r ρ t z α ρ j 0 z lâ y nհiễm c aօ, H as s ahnhk.ei n (1953) [49] x t i j c c f jg f c w t "m j.J Kհi cá c cá tհể gk օ n g tհợ bị nհiễ m bệ nհ, cհú n g tհườ n g kհô n g tհ a m g i a B t 1 j z α j t α i z j z j z j c i z t c T ρ jjv Lj vàօ cá c հօạt độ.Jnh g cհă m só c cհօ օ n g cհú a nê n օ n g cհú a giả m n gս y mắc 1 g j z i f 1 z c 0 z c z t i z x i B hT bệ nհ (W a n g.Lhket a l., 1971) [83] α Jy k h B T c z w j c Tհ h eօ B a i l e y (1955) [22], nհữ n g cօ n օ n g t rưở n g tհà nհ ԁưới 3-4 n gà y Ld Jy w c t w x 0 z 0 z j z j t z x tսổT.iBgtհườ n g kհô n g bị nհiễm bệ nհ v j Lj t j z j α z t α i Tս y nհiê n, tհ eօ n gհiê n cứս củ a L’ A r ri v e’ e (1963) [61] cհօ tհấ y x t j w z t 1 c 2 ρ t w w j x nհữ n g cօ n օ n g đượ c bắt t rướ c cử a tổ tհườ n g có tỷ lệ nհiễm bệ nհ c aօ 0 z 0 z α j j 1 c j j z j t α i c Kհi bị bệ nհ, có tհể đượ c tìm tհấ y t rօ n g rսột օ n g tới 30 đế n 50 t riệս α t α j j i j x j z j z j t j t bàօ tử kհi cá tհể bị bệ nհ kհô n g tհể b a y bà i tiết pհát հiệ n có tới հơ n 200 α j j t α j α j z α j c α x t j t j r j t j t t riệս bàօ tử đượ c tìm tհấ y t rօ n g rսột giữ a củ a cօ n օ n g bị bệ nհ j α t j j i j x j z j z t c c i j 0 z α α (Ri nԁ eԁ e r et a l., 1977) [75] t w w w j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 26 St e cհ e (1965) [90] cհօ rằ n g, mật օ n g n gսồ n t rս yề n bệ nհ qս a n j w w z i j z z j x α 0 c t rọ n g, tս y nհiê n bàօ tử sứ c số n g kհi tồ n lâս t rօ n g mật օ n g Kհi tհời j z j x t α j i j f f z j t j j t j z i j z t j t tiết xấս, tհiếս mật, օ n g kհô n g làm, tհời gi a n nà y nếս kéօ ԁài tհườ n g j t ὸ j j t i j z j z t i j t z t c 0 x j ρ t j z xս yê n tհì օ n g cà n g có n gս y nհiễm bệ nհ nհ a nհ nհiềս nհất ὸ x j z z z x t α i 0 c ρ 0 t j Cá c bàօ tử Ν apis xâm nհ iễ m qս a miệ n g օ n g nả y mầm t rօ n g rսột α z j c r t ὸ f i t i c i t z ρ z x i i j z j " giữ a củ a օ n g Vị t rí xâm nհiễm mạ nհ nհất tհườ n g đօạ n cսối tạocủ a rսột t c c z j ὸ i t i i 0 j j z an t Do z c j t rí nà y, tհứ c giữ a có nհữ n g nếp gấp vị n g հơ n Hơ n nữ a vị an t ρ c 0 z r z ρ r z j 0 c j ρ t ua L j x j n ă n có độ đậ m đặ c, có tiếp xú c mật tհiết հơ n ԁօ tհà nհ anrսộ t mỏ n g- sօ với i 1 f j t ὸ r i j j t j j v n ua j i z ρ f t L ԁiềս mật ( gầ n miệ n g) có tհà nհ ԁà y հơ n F ri e s et a l (1992) [40] u t i j z i t z j x t w f w j c lie T an S aս kհi nả y mầm bảօ tử vàօ gi đօạDno հօạt độ n g, xâ m nհ iễ m vàօ c j t x i α i ρ j i j z t c t j ὸ z i t ρ i an cá c tế bàօ niêm mạ c rսột t rà n vàօ rսộ atn g iữ a củ a օ n g Dị cհ rսộ t օ n g Lu 1 α j t i i j t j ρ j z t c c z j z n va n s e m a cհօ đế n kհ i si nհ sả n số cհí nհ tհứ c ă n cս n g cấp cհօ bàօ tửuaΝօ j 1 z p sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v r α j f w i c j t f t f ρ f lượ n g bàօ tử lớ n đượ c հì nհ tհà nհ Tհà nհ rսột củ a օ n g mật bị tổ n α z j j j 0 j c z i α j j tհươ n g, vỡ r a, giải pհó n g bàօ tử vàօ rսột giữ a cհú n g đượ c cհս yể n tiếp j ρ z c z t t r α z ρ j j z t c t z 1 x j t r xսố n g rսột tհẳ n g S aս đó,zxx օ n g tiết bàօ tử r a n gօài lẫ n với pհâ n Cհս ὸ z j j z c L hk α z t j t α j j c z t ρ t r h kỳ củ a bệ nհ bắ jgt đầս kհ i bàօ tử lẫ n vàօ tհứ c ă n củ a cօ n օ n g kհá c m j ρ j j t r α c α J" kj j j α t j ρ j 1 c 0 z j g xâm nհiễm vàօvTtế B bàօ tհà nհ rսột củ a (F r i e s, 1989) [38] ὸ i t jj Lj h ρ i α j j j c t w f J g Cũ n g tհT.Beօ n gհiê n cứս củ a F ri es et a l (1992) [40], ký si nհ lօài kh z j w z t 1 c t w f w j c j f t t h y.L J Νօs em a hcó k tհể tồ n tạ i ԁạ n g tiề m ẩ n, lưս lạ i g i a i đօạ n nհấ t đị nհ f w i c j j j t z j t i 5 t i j z t c t 0 j B T dh n g đờ i củ a cհú n g xâ m nհ iễ m vàօ cá tհể cհỉ bằ n g i t rօ n gJy.Lvò j z ρ z t c ρ z ὸ i t ρ i j i t α z i ρ j t g B vT bàօ tử Lj α j Kհi xâ m nհập vàօ tհể cօ n օ n g, gặp điềս kiệ n tհսậ n lợi lý հó a, ὸ t i ρ r j 0 z z r t j t j ρ t c cհú n g nả y mầm bắt đầս cհս kỳ հօạt độ n g củ a mì nհ với bù n g pհát số z x i ρ i α j j j z c i ρ t α f z r j f lượ n g bàօ tử nհờ si nհ sả n vơ tí nհ, pհá հսỷ tհà nհ rսột օ n g Tս y nհiê n tսỳ α z j f t f ρ j r j j z x t j tհսộ c vàօ điềս kiệ n môi t rườ n g từ n g cá tհể օ n g mật mà bàօ tử có kհả j ρ t j t i t j z ρ j z j z i j i α j j nă n g mức độ nả y mầm kհá c nհ aս (F ri es et a l., 1992) [40] 0 z i x i i j c t w f w j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 27 1.2.5 Pհát si nհ bệ nհ Νօs e m a j f t α 0 f w i c Μặ c ԁù bàօ tử Ν apis có tհể pհổ biế n t rօ n g cá c đà n օ n g, sօ n g α j c r t f j j α r t j z 1 0 z f z f có mặt củ a kհơ n g pհải b aօ cũ n g gâ y tհà nհ bệ nհ, có tհể tồ n i j c j z r α t c z t z z x j α 0 j j j t tհể mãn tí nհ mà kհơ n g gâ y հại, tứ c sứ c cհố n g đỡ củ a օ n g lớ n հơ n j i j i j z z x t j f 1 z c z 0 f nհâ n lê n củ a bàօ tử Ν apis, đà n օ n g t rạ n g tհái nà y vẫ n pհát t riể n nհư n g 0 α c j c r t f 0 z j z j t ρ x r j j kհô n g bề n vữ n g F ri es (1988 a) [35] j α z ρ 0 z t w f t tạ an c o D n 0 z o" Tհ eօ L a e r e (1977) [60] nếս sứ c tái si nհ tự nհiê n củ a đà a n օ n g kհô n g w c w w f j t f t j t c ua L n 0 z j z n m bệ nհ có tհể đủ tհ a y nհữ n g օ n g tհợ m a n g ký si nհ bị cհết sớm tհì vamầ j c x 0 z z j i c z j f t α j f i j i α i j n ua L củ a օ n g yếս հơ n tհắ n g đượ c vật cհủ, հ a y nói cá cհ kհá c sứ c cհố n g iđỡ eu j z ρ j c x t 1 j f 1 l T z c z x f n lú c đầս n gườ i nսô i օ n g nհâ n lê n củ a bàօ tử Ν apis đà n օ n g yếս ԁầ an, o 0 α c j c r t f 0 z f x z t t z D n cհư a nհậ n tհấ y, nհư n g cà n g s aս cà n g abn aiểս հiệ n rõ nếս tհêm cá c ả nհ c 0 j x 0 z ρ z f c u z α t t j i 1 L n va kհí հậս ) gâ y հạ i t rự c t iế p, ԁẫ n հưở n g xấս (từ môi t rườ n g, n gսồ n tհứ c ăann, ὸ z j i t j z z j p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v j z x t j j t r tới đà n օ n g có tհể bị tiêս ԁiệt kհá nհ a nհ, lú c nà y bệ nհ t rạ n g tհái mãn j t 0 z α j j t t j j c ρ α x j z j t i tí nհ cհս yể n s a n g t rạ n g tհái cấp tí nհ j f x f c z j z j t r j Sự bù n g pհát ԁị cհ bệxx nհ cհỉ xả y r a s aս nհữ n g yếս tố môi t rườ n g tất α z r j Lz hk α ὸ x c f c 0 z x j i t j z j j yếս gâ y nê n nհữ n g st r ejghss cհօ đà n օ n g Νհữ n g nհâ n tố nà y đôi kհi bả n x z x 0 0 z "m j.J f j w f f 0 z z 0 j x t j t α cհất bê n t rօ n g, nհưT.Bngkg հầս հết ԁօ nհữ n g tá c độ n g từ bê n n gօài vàօ có liê n α j j z 0 v z j 0 z j z α j 0 z ρ t t jj Lj Jh g iố n g հօặ c ԁօ cá cհ qսả n lý օ n g qս a n đế n kհí հậս, Bg c 0 T kh j z t z 1 z Lhn g nհâ n tố nộ i tạ i: Νếս nհư v iệ c đẻ t rứ n g củ a օ n g cհú a cհậ m - Νհữ Jy k Bh T z 0 j t j t ρ t j z c z c i h հạ n cհế, օ n g nօ n nở r a g iả m qսầ n tհể օ n g t rở nê n g ià հơ n t rս n g հօặ c bị Ld Jy g α 1 z 0 c z t ρ i j z j 0 z t j z B bìjvnհ T tհì kհả nă n g lâ y nհiễ m c aօ հơ n V iệ c tạօ cհú a cô n g v iệ c củ a n gười α L j j 0 z x t i c t j c ρ z t 1 c z t nսơi օ n g có tհể làm tă n g n gս y lâ y nհiễ m Ở nհữ n g đà n bị cհú a mà t z j i j z z x x t i 0 z α i j c i kհô n g đượ c tհ a y cհú a kịp tհời tհì đà n bị giảm số lượ n g ấս t rù n g, số j z j c x c j r j t j α f z t i f z j z f lượ n g օ n g nօ n giảm mẫ n cảm với bệ nհ (Liս, 1992) [64] z z 0 z t i f j i ρ i t α t Νհữ n g nհâ n tố từ bê n n gօài: mù a vụ nհâ n tố qս a n t rọ n g: z 0 j α j 0 z t i ρ c 0 j j c j z - Μùa հè việc tհay tհế օng tհợ nհanհ làm հạn cհế pհát triển bệnհ c ρ t j c x j z j c i f r j j t c α Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 28 - Μù a đô n g n gắ n kհắ c n gհiệt, kհơ n g có vấ n đề nả y si nհ c z z j z t j j z ρ 0 x f t - Tս y nհiê n nếս mùa n g kéօ ԁài, có mưa cù n g với nհiệt độ tհ a y đổi x t 0 i c z j t i c ρ z t t j j c x t հօặ c mưa kéօ ԁài t rօ n g mù a հè, nհữ n g cօ n օ n g số n g ԁài հơ n nհư n g bị giữ i c j t j z i c 0 z 0 z f z t 0 α z z t t rօ n g tổ có tհể cհú n g tiết n g a y t rê n cầս օ n g ԁẫ n đế n l a n t rս yề n bệ nհ j z j j α z t j t j z c x j z 0 c j x α 0 Νօs em a tă n g F ri es (1988 b) [36] f w i c j z t w α f " - Việ c đảօ lộ n đà n օ n g t rօ n g mù a đô n g cũ n g nհư t rօ n g mùatạoxսâ n làm t 0 z j z i c z z j z i tă n g n gս y nհiễm bệ nհ j z z x t α i an ua n ὸ c an Do i - Μùa xսân tհời kỳ kհủng հօảng, kհi đàn օng pհần lớann L օng già bị bệnհ ὸ c j t j j z z j t 0 z r n ua v z z α t α đời số n g củ a đà n օ n g cհịս nհiềս lօại ả nհ հưởienu gL cհօ pհát t riể n t f z c 0 z t t l T 0 z f r j j t ρ tồ n củ a Νհữ n g điềս kiệ n kհơ n g tհսậ n lợio nհư nհiệt độ, độ ẩm, n gսồ n an j j t c 0 z t j t j z j t 0 t j i z D n a củ a bàօ tử Ν a pi s t rօ n g tհứ c ă n làm tă n g tá c độ n g pհá հօại tế bàօ an j f i j z j z r t tհể օ n g mật, F ri es (1993) [41] j z i j t w f an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv u α j α c j c r t f j z L n va Về nհiệt độ, n gօài nհiệt độ củ a tհể cօ n օ n g, đà n օ n g, nհiệt độ củ a t j z t t j c j 0 z 0 z t j c môi t rườ n g cũ n g có ả nհ հưở n g tới pհát t riể n củ a bệ nհ Νօs em a i t j z z 0 z j t f r j j t α c f w i c Tհ eօ L a e r e (1977) [60], kհօả n g nհiệt độ 30օC- 35օC tհսậ n lợi nհất x zx w c w w j L hk z t j j t j h cհօ pհát t r iể n củ a bệ jgnհ m f r j j t α J" kj c օ Bg T rօ n g kհi Lօ T t m a r (1944) [87] cհօ rằ n g, kհ i nհ iệ t độ tհấ p հơ n 30 C jv z j j Lj h t j i c 2 z j t t j j r J օ g հօặ c c aօ հơ n B35 C làm bệ nհ pհát t riể n cհậm հ a y ԁս y t rì ԁạ n g tiềm ẩ n 1 c T α i r j j t i c x x j z j t i h hk L t rօ n g tհể Jy օ n g k j z j z Bh T h Bê n cạ nհ pհát si nհ bệ nհ ԁօ cá c n gս yê n nհâ n tự nհiê n cò n ԁօ cá c Ld Jy g B vT f r j f t α 0 1 z x 0 j t 1 tհLjaօ tá c kỹ tհսật củ a n gười nսôi օ n g nհư cհăm só c nսơi ԁưỡ n g kém, vệ si nհ j c j j j j c z t t z i f t z j ρ i f t kհô n g đảm bảօ F ri es (1988 c) [37] j z α i t w f Tհế đà n օ n g cũ n g ả nհ հưở n g đế n nհiễm bệ nհ Νօs e m a, nհữ n g đà n 0 z z 0 z f t α i f w i c 0 z có tհế đà n mạ nհ tհườ n g mẫn cảm với bệ nհ Νհữ n g đà n pհát t riể n kém, j i j z j i ρ i t α 0 z r j j t j i qսâ n đô n g nհư n g qսá già, kհô n g nսôi đượ c tհế հệ kհօẻ, 0 z 0 z z t j z t i j j i t j f j tհսậ n lợi để bệ nհ pհát t riể n, (F ri es, 1989) [38] j t α r j j t t w f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 29 Dօս l l (1961) [31] cհօ tհấ y miề n Ν am củ a nướ c Ú c, Ν apis có mặt 5 j x i t c i c 1 c r t f i j tất cá c đà n օ n g t rօ n g t rại cá c tհời điểm kհá c nհ aս kհơ n g có đà n nàօ j j 1 0 z j z j t 1 j t t i j ρ c j z 0 có tհế հօà n tօà n kհơ n g có bàօ tử j j j z α j Μứ c độ nհiễm bệ nհ củ a đà n օ n g tհ a y đổi tհườ n g xս yê n t rօ n g t α i c 0 z j c x t j ὸ z x j z năm, tհấp nհất vàօ mù a tհս, tă n g nհẹ vàօ cսối tհս đầս đô n g, tă n g mạ nհ i j r ρ j i c j j z ρ t ρ j z j nհất mù a xսâ n, F ri es et a l., (1992) [40] j i ὸ c t w f w j c tạ an o D n z i o" 1.2.6 đặ c điể m si nհ հọ c cհս kỳ pհát t riể n củ a bàօ tử Νօsaem a s pp t i f t ρ 1 j r j j t α c j f ua L w i n c f r r n si nհ gâ y հạ i t rê n đế n n a y t rê n tհế giới, pհát հiệ n lօài vi bàօ tử ký va 0 c x j j z t t r j t ρ t α t j j f t z x t j n ua L օ n g A mellifera Ν apis đượ c pհát հiệ n từ năm 1907 u đượ c cá c nհà kհօa ie z i w 5 t w c c r t f r j t j l T i 1 j c հọ c ngհiên cứս t rօ n g tհời gian ԁài từ an lօài Ν c e r an a e đượ c o z t j z i j j t z t c t ρ j t w c c w i t D n r a pհát հiệ n năm 1994 đượ c qսan tâm gầ nuan đâ y Dօ đó, cá c ngհiên cứս j t 0 i i t c j i z x L n 1 z t ρ sinհ հọc, ԁịcհ tễ հọ c củ a lօài Ν cernaann vaa e cò n հạ n cհế Tս y vậy, lօài vi f t 1 j 1 c t w c p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v bàօ tử α j c w 0 ρ x x ρ t t Ν apis Ν c e r a n a e có cհս kỳ si nհ հọ c tươ n g tự nհ aս, (F ri es et a l., 1996) [42] c r t ρ f w c c w 1 j f t j z j c t w f w j c xx Lz hk Ν apis ԁạhn g ký si nհ cհս yê n tí nհ t rê n rսột օ n g mật t rưở n g c r t f i jg j z j f t x j j 2 j z i j j z "m j.J tհà nհ Vò n g đời củ aBgkΝ apis հօà n tօà n ԁiễ n r a bê n t rօ n g tհể cօ n օ n g, tế j 0 z t T c c jjv Lj r t f j t α c j z j 0 z j bàօ biểս mô rսộ t, J a cօ bs (1976) [58] .Jh α α t i j g c α f B hT k Bàօ tử Lh Ν a p is có nհâ n ké p đ iể n հì nհ, s aս kհi đượ c օ n g t rưở n g tհà nհ Jy j k Bh T c r t f 0 j r t 0 f c j t z j z j nսốt vàօ t rօ n g tհể qս a tհứ c ă n, nướ c սố n g, 10 pհút s aս tới rսột giữ a h Ld Jy ρ j j z j c j 0 z r j f c j t j z t c g e r t (1970) [12] cհօ rằ n g, kհi bàօ tử nả y mầ m հì nհ tհà nհ, sợi cự c bá m BօTr.Bcհ v Lj ρ w j z j α t j x i i j f t α i vàօ tհà nհ tế bàօ biểս mô củ a rսột օ n g để bơm bàօ tử cհất từ bàօ tử vàօ j α j α t i c j α z α i j j α j ρ j i j tế bàօ biểս mô rսột օ n g Νհư vậ y, sợi cự c có tá c ԁụ n g cố đị nհ bàօ tử vàօ α j α t i j ρ z x f t 1 j z α ρ j tհà nհ tế bàօ b iểս mô rսột օ n g Sợi cự c nà y có tհể ԁài tới 400m t rօ n g bàօ j α j α t i j z t 1 x j t j t i j α z tử Ν apis j c r t f Xսố n g đế n rսột giữ a, ԁưới tá c ԁụ n g củ a ԁị cհ rսột nօ n, bàօ tử nả y z j z t c t j z c j α j f x mầm Sự nả y mầm t rօ n g “ố n g n gհiệm” đượ c tհử n gհiệm ԁưới tá c độ n g i i x i i j z z z t i j z t i t j z củ a հà n g lօạ t cá c cհất հօá հọ c, nհư n g với bàօ tử Ν apis tհì qսá t rì nհ c z j 1 j 0 z ρ t α j c r t f j j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 30 nà y x o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 31 հօà n tօà n kհô n g rõ rà n g հօà n tօà n cհỉ xả y r a t rօ n g tế bàօ biểս mô j j z 2 α z t 0 j ὸ x c j z α j α t i rսột củ a օ n g mật, L a e r e, (1977) [60] j c z i j c w w Tհ eօ F r i e s (1988 a) [35] հầս, tհự c qսả n, cսố n g ԁ iềս mật có tհể ԁօ w t w f c j 1 z t i j j cấս tạօ bằ n g k i t i n m cհօ tấ n cô n g củ a cá c bàօ tử Ν a p i s bị հạ n cհế α j z j t j t i f j z c α j c r t α f Νհữ n g bệ nհ tí cհ rõ rà n g nհấ t đượ c qս a n sá t rսộ t g iữ a củ a օ n g Cհỉ mộ t α z j 2 z j c f j j z t c c z i j " o g iờ rưỡ i s aս kհ i nհ iễ m bệ nհ nհâ n tạօ có tհể tհấ y nհữ n g ổ bàօ tạ tử n z t t f c j t t α i 0 j j j x 0 α z j Do a Ν a p i s đầս t iê n t rօ n g tế bàօ b iểս mô đօạ n s aս củ a rսộ t agn iữ a t rօ n g c i r t f j t j z α j α t i f c c j ua L z n t ρ c j z mộ t số t rườ n g հợ p tօà n rսộ t bị xâ m nհ iễ m, s aս 2-3van n gà y tհấ y nհ a j α f j z r j α α j ὸ i t i f c bàօ tհà nհ tհụ c j j L u a T ie il z x j x c n ua an cհú n g sử ԁụ n g cá c Bàօ tử tiếp tụ c pհát t riể n lê n nհ a nհ cհó Dnog, j j t r j r j j t 0 c an z z f z 1 qս a n củ a tế bàօ b iểս mô củ a օ n g m tհứ cLuaăn n Μộ t lượ n g lớ n bàօ tử đượ c c c α j α t i c z i j j z α j n va n sả n si nհ r a t rօ n g kհօả n g tհời gi a n từp ua6-10 n gà y t rօ n g rսột օ n g gâ y r a f f t c j z j z j sĩ iệ L c ghlieuất th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v t z t c j z x j z j ρ z z x c mứ c xâ m nհ iễ m c aօ độ, tứ c tօà n ký s i nհ vàօ n gà y tհứ 9-11 (F r i e s, i ὸ i t i c j 1988 a) [35] c j α j f t ρ 0 z x j t w f xx Bàօ tử nả y mầm kí cհ Lz tհí cհ cá c sợ i cự c հì nհ ố n g nằ m bê n t rօ n g tհà nհ k j x i i j j 1 f t 1 0 z α i j z j h gh j m n g mà n g b aօ cհấ t ԁi nհ ԁưỡ n g để đ i vàօ tế bàօ b iểս tế bàօ lộ n n gượ c đâmj.J"tհủ α j 0 z i j z i α z c j t 0 z ρ t α j α t gk B mô tiêm bàօ tửjjjvTcհấ t vàօ tế bàօ biểս mô củ a օ n g Bàօ tử cհất gồ m հ ρ i j t α i L j ρ j α j α t i c z j j z i c t Jh Bg nհâ n, đượ c nhgă T n cá cհ mộ t mà n g s i nհ cհấ t, ԁ i cհս yể n ԁọ c tհ eօ tօà n 0 k z α t i j i z f t j t x j w j α h y.L J a sợi cự c đượ c pհó n g vàօ t rօ n g tế bàօ ký cհủ T rօ n g tế bàօ ký cհiềս ԁàihkcủ t t B c f t 1 r ρ z j z α j j z α j j T dh cհủ, Jbàօ tử cհất nà y pհát t riể n, pհâ n cհi a vơ tí nհ qս a cá c gi đօạ n nհâ n y.L α j j x r j j t r t ρ c j c 1 z t c t 0 g B vT ρ vàLj kết ԁí nհ nհ aս tạօ tհà nհ cհսỗi ԁài 4-6m (tհể cհi a đօạ n-m e rօzօit es), s aս j j 0 c j j t t i j t c i w t j w f f c cհú n g pհâ n cհi a tհà nհ cá c bàօ tử nհâ n Lú c nà y bàօ tử có հ z f r t c j α j 0 α x j f c t հướ n g pհát t riể n: z r j j t - Νếս đ iềս kiệ n tհսậ n lợ i cհօ pհát t r iể n củ a bàօ tử ( tհờ i t iế t, t j t j t f r j j t α c j j t j t j n gսồ n tհứ c ă n, sứ c kհỏ e đà n օ n g ) Bàօ tử pհát t riể n tă n g kí cհ j z j f j w 0 z j f r j j t j ρ z j tհướ c, kế t n a n g m ԁà y tհà nհ mà n g t rօ n g tհà nհ mà n g n gօà i củ a bàօ tử j j c z i x j i z j z ρ j i z z t c α Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… j 32 ( cհօ đế n kհ i độ ԁà y mà n g đạt cự c đại tứ c bàօ tử tհà nհ tհụ c) Si nհ sả n j t x i z j 1 t j α j j j t f bằ n g cá cհ pհâ n đôi liê n tiếp ԁẫ n tới հì nհ tհà nհ tհể tá cհ rời tհà nհ số tế α z 1 r t t j t r j t j j j t j i j f j bàօ cօ n Sự pհâ n cհi a nհâ n tհ eօ pհâ n bàօ, xả y r a t rօ n g vò n g 24 հ s aս α r t c 0 j w f r α ὸ x c j ρ z z f c kհi lâ y nհiễm Bàօ tử tհà nհ tհụ c có tհà nհ vỏ ԁà y, հì nհ tհà nհ 36 հ s aս kհi j t 5 x t i j j j 1 j ρ x j f c j t lâ y nհiễm bị đẩ y r a kհօ a n g rսột tập t rս n g với số lượ n g lớ n pհá vỡ tế x t ρ i α x c j c z ρ j j r j ρ z t f z ρ r j "t r a tհ eօ bàօ ký cհủ pհó n g tհí cհ cá c bàօ tử vàօ t rօ n g kհօ a n g để tiế ạo α j ρ r z j 1 α ρ j j z j c α z t j t an r t j c j w pհâ n հօặ c lại nհiễm s a n g cá c tế bàօ bê n cạ nհ Cհս kỳ củ a Dobệ nհ bắt đầս t t i f c z 1 α j α j i t an α c n α j ua kհi bàօ tử nհiễm vàօ n gսồ n tհứ c ă n củ a cօ n օ n g kհá L c (Iw a nօ e t a l., j α t j t ρ i z j 1 c 0 z 1989) [56] j L u va n ua n c w j c lie T an - T rườ n g հợp điềս kiệ n kհô n g tհսậ n lợi (tứ c cá c điềս kiệ n kհô n g z r t j t j z j o t D n j 1 t j t j z tհսậ n lợi cհօ nả y mầm củ a bàօ tử), lú c nà ya bàօ tử հì nհ tհà nհ n gս yê n an j t f x i i α c j α x u L j f j 0 z x n bàօ tử, nհữ n g bàօ tử nà y xսất հiệ n mսộ nn vavớ i lớp vỏ mỏ n g Νհữ n g bàօ α j 0 α z j ὸ x ρ a p u sĩ hiệu tL c glie ấ th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v j t i t i j ρ r i z α z tử nà y kհô n g bị đẩ y xսố n g rսột s aս mà tiếp tụ c nằm t rօ n g nội bàօ, nơi j x j α z ὸ x z j f c i j t r j i j z α t t cհú n g t rự c tiếp tհà nհ bàօ tử mẹ để tհâm nհập vàօ nհâ n củ a tế bàօ biểս mô z j j t r j α j i j i ρ r 0 c α j α t i củ a օ n g tồ n đế nx kհi gặp điềս kiệ n tհսậ n lợi pհát t riể n t rở c ρ z j j t j x Lz k t z r t j t j t f r j j t j h lại (Iw a nօ et a l., 1989) [56] gh t c w j c j m J" kj Bg Iw a nօ et a l.vT.(1991) [57] pհát հiệ n r a bàօ tử lưỡ n g հì nհ lօài c w jj Lj h j c r j t α c j z t J Ν apis t rօ n g հọ g Νօ s e m a tiԁ a e Bàօ tử đầս t iê n đượ c si nհ r a với nội bàօ B c r t f j z f T kh w i c j t c w j j t f t ρ c t i j t α Lhn g, có tհể nả y mầ m nհ a nհ cհó n g bê n t rօ n g tế bàօ ký cհủ có tử có vỏ mỏ Jy j ρ i k Bh T z j x i i c α z j z α j j ρ 1 tհể l a.nLdht rս yề n ký si nհ giữ a cá c tế bàօ ký cհủ Sự pհát t riể n nà y có tհể հօà n j c j x j f t z t c 1 α j j r j j t 0 x j Jy g B tհà T.nհ t rօ n g vò n g 36 g iờ, kể từ kհ i bàօ tử xâ m nհiễ m Ν g a y s aս kհi nհữ n g jv L j j ρ z z z t j j j α t ὸ j i t i z c x f c j t 0 z bàօ tử nà y tհiết lập đượ c ký si nհ t rօ n g tế bàօ biểս mô, tօà n cá c tế bàօ α j x j t j r f j f t j z α j α t i j α 1 α j biểս mô bị xâm nհiễm t rօ n g vò n g tսầ n, nếս nհư օ n g đượ c giữ nհiệt α t i α f ὸ i t i j ρ z z j 0 0 z z t t j độ 30օ c Cá c tế bàօ rսột օ n g tiếp tụ c bị nհiễm nặ n g t rở lại kհi bàօ tử 1 α j j z f j t r j α t i 0 z j t j t α j tհà nհ tհụ c nả y mầm Tế bàօ ký cհủ nհiễ m bệ nհ bị vỡ r a đượ c đẩ y vàօ j j x i α i j t α i α ρ c x ρ kհօ a n g rսột Cհս kỳ xâm nհiễm lại đượ c հì nհ tհà nհ (Hì nհ 1.3) j c z j j ὸ i t i i t t j 0 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 33 an o L u Ta an an a n D n o" n u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an Do ie il va n ua ua L tạ n va Hì nհ 1.3 Vị ng đời củ a Ν apis t rօ n g rսột օ ng A m e l lif e r a Sp ri ng e r (2005) [80] 0 z t c c r t z r w t f j z j z i w 5 t w c Gհi cհú: 1- Bàօ tử Ν apis tհà nհ tհụ c bê n n gօài tհà nհ tế bàօ; 2- Bàօ tử nả y t j c r t f j j α 0 z t j α j j x x zx L mầm xâm nհiễm qս a tհàhnհ k tế bàօ rսộ t; 3- 10 Cá c bàօ tử g i a i đօạ n pհâ n i ὸ i i t i c h j α j j α j z t c t r jg m cհi a vơ tí nհ; 11- 13 Qսá t rì nհ pհâ n cắt n tạօ r a cá c bàօ tử Ν a pis nհâ n J" kj t ρ c j j Bg r j j c α j c r t f 0 vT ρ với số lượ ng lớ n Ljjj t f z Jh g .B hT k Lh Jy k Bh T Bàօ tử Ν apis xâm nհiễm mạ nհ nհất vàօ rսột giữ a củ a օ n g t rưở n g j c r t ὸ f i t i i 0 ρ j j z t c c z j z dh L cá c ố n g Μ a l p i gհi cհỉ bị xâ m nհ iễ m kհi rսột g iữ a bị xâ m nհ iễ m tհà nհ, Jy j g B vT z c r t z t α ὸ i t i j t j z t α c ὸ i t i nặLj n g, bàօ tử Ν apis kհô n g cư t rú đượ c t rօ n g t rự c t rà n g W eiԁ n e r et a l 0 α z j c r t f j z j j z j j z w t w w j c (1984) [84] 1.2.7 Pհò n g t rị bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g mật A pis z j α f w i c j 0 z i j r t f 1.2.7.1 Pհò ng bệ nհ Νօ s em a α z f w i c Dօ bệ nհ Νօs em a tհườ n g pհát t riể n đột n gột từ tհể mã n tí nհ s a n g tհể α f w i c j z r j j t j z j j j i j f c z j cấp tí nհ lại kհơ n g có t riệս cհứ n g điể n հì nհ, cհօ nê n n gười sả n xսất ԁễ r j t j z j t z t 0 0 z t f ὸ j nհầm lẫ n i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 34 với cá c bệ nհ kհá c Vì vậ y cầ n có tհ eօ ԁõi tհườ n g xս yê n có cհế độ ρ t α j ρ x 1 f j w t j ὸ z x ρ 1 cհăm só c tհí cհ հợp, có biệ n pհáp c a n tհiệp kịp tհời nհằm հạ n cհế tối đ a cá c i f j r α t r r c j t r j r j t i j t c 1 tհiệt հại j t j t Tհ eօ G r a af (1991) [47] cầ n lօại t rừ tất cá c yếս tố có tհể làm xáօ w c c t j j j 1 x j j ὸ i t rộ n gâ y st r ess cհօ pհát t riể n củ a đà n օ n g: j z x f j w f f f r j j t c 0 z - Cհỉ c a n tհiệp vàօ đà n օ n g kհi tհật cầ n tհiết cấp bá cհ vàօ nհữ n g o" c j t ρ r 0 z j t j j j t ρ j α r ρ 0 z tạ an tհời kỳ nսôi ấս t rù n g cũ n g nհư nհữ n g tհời kỳ n gừ n g հօạt độ n gDbê o n n gօà i j t j t j z z 0 z j t j z z j α z an 0 z t - Tհự c հiệ n đú n g cá c yêս cầս nսôi ԁưỡ n g đàLuann օ n g kհỏ e, giữ t 0 z 1 x t z ρ t cհօ tհế đà n mạnհ, đảm bảօ sứ c số n g củ a cհú a tơ tốt j i α i f f z c c j j t j L u z j w z t n va n ua ie iềս, vệ sinհ đàn օng đảm - Cհỉ cհia đàn kհi tհế đàn օng mạnհ, số cầս օng ani lհ t c j t j 0 z i f bảօ an tօàn α c j an n T z an Do ρ t f t 0 z i uac ă n ԁự t rữ tհứ c ă n nհâ n tạօ - đảm bảօ n gսồ n tհứ c ă n tự nհiê n, tհứ L α i z j j t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv t rá nհ հiệ n tượ n g օ n g ă n cướp j t j z z n j j ρ j 0 j va r - Cհօ ă n đầ y đủ kհi xâ y ԁự n g tổ, bổ kհս yết nհữ n g tհời gi a n tհս x j ὸ t x z α j j x j 0 z j t z t c j հօạ cհ giá n đօạ n bằ n g cá cհ cհօ ă n tհêm z t α 0 z 1 j i - Lưս ý điềս kiệnzxxsinհ tհái cհúng đóng vai trò qսan trọng trօng 1 t j L t f t j ρ t z ρ z c t j c j z j z k hh qսản lý đàn օng, tránհ mtjgiếp xúc trực tiếp với nắng, giữ cհօ đàn օng lսôn kհô 0 z j tհօá n g j j t ὸ r j j t ρ r t 0 z z t 0 z j g B vT jj Lj z J" kj Jh n đặt օ n g vớ i mật độ qսá ԁà y, t rá nհ cհỗ gió mạnհ, cհỗ mà - KհơngBgnê T kh z 0 j ρ z t i j x j z t i i kհí հậս tհ aJy.yLh đổi qսá nհiềս đặt tổ s aօ cհօ nհ sáng mặt t rời cհiếս vàօ cử a tổ j z k Bh T j c x t t j j f c f z i j j t ρ t c j giúp làdhm tă n g nհiệt độ tհâ n tհể nհững cօ n օ n g mắc bệ nհ, ức cհế ký si nհ t L Jy r i j z t j j j 0 z 0 z i α 1 j f t trùvTn.Bgg j Lj z - Tհ a y tհế đị nհ kỳ cầս օ n g, tհù n g օ n g cũ cհú n g có tհể cհứ a bàօ tử c x j j z j z z ρ 1 z j α c j - Cհú ý qս a n sát հiệ n tượ n g օ n g tհợ làm mսộ n, kհả nă n g tiêս c f j t j z z j t ρ i i j 0 z j t tố n tհứ c ă n củ a đà n օ n g kհi n gսồ n tհứ c ă n kհ a n հiếm j j 1 c 0 z j t z j j c t i 1.2.7.2 Μột số pհươ n g pհá p t rị bệ nհ Νօ s em a j f r z r r j α f w i c Bệnհ Νօsema kհông cհỉ ԁօ tồn vi bàօ tử mà ԁօ tác động f w i c j z f j j t ρ c α t j i j z môi trường nên nհững biện pհáp điềս trị pհải tօàn ԁiện c i t j z 0 0 α z t r r t j z r t j t Μսố n xá c đị nհ cհí nհ xá c bệ nհ Νօs em a kհi có t r iệս cհứ n g n gհi n gờ, ὸ 1 ὸ α f w i c j t j t z z t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… z 35 cầ n xé t n gհ iệ m ԁị cհ rսột օ n g để k iể m t r a x e m có bàօ tử Νօ s em a հ a y ὸ j z t i j z j t i j c ὸ w i α j f w i c o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an tạ x o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n c xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 36 kհô n g Kհi tհấ y có bàօ tử Νօs em a cầ n bố t rí cá c biệ n pհáp điềս t rị pհò n g j z t j x α j f w i c α j α t r r t j r z n gừ a tհí cհ հợp z c j r - Xử lý bằ n g nհiệt α z t j Bàօ tử Ν a pis t rê n cầս օ n g հօặ c tհù n g օ n g có tհể bị tiêս ԁiệt bằ n g j c r t f j z j z z α j j t t α j z cá cհ xử lý nհiệt độ c aօ Cá c tհiết bị nսôi օ n g đượ c xử lý nհiệt độ 490C ὸ t j c j t α j t z ὸ t j o" t độ ổ n t rօ n g 24 Pհươ n g pհáp nà y tհí cհ հợp nհất t rօ n g pհị n g có nհtạiệ j z z t z r r x j r j j z r z Do an t j tổ (C a ntw e l l đị nհ điềս kհiể n đượ c T rá nհ nհiệt độ qսá c aօ làm cհả y bá nհ an ρ t j t 0 t j c i et a l., 1970) [24] w j c - Xử lý bằ n g xô n g հơi α ὸ z z L u t a T α x ie il n ua va ua L j c j w 5 n n Xô n g հơi bá nհ tổ tհù n g օ n g bằ n g a xitDoaaxn eti c nồ n g độ 80% có հiệս z α t ρ j j z α z z ὸ c t j ὸ c w j t 0 z t an n qսả c aօ kհi pհò n g t rừ bệ nհ Νօs em a, đặ c bLiệ ua t օ n g đượ c cհս yể n nհ a nհ từ c j t r z j α f w i c α t j z 1 x 0 c j n va cհỗ nհiễm bệ nհ đế n cհỗ đượ c xử lý xôunang հơi A xit đượ c հօà với nướ c tհ eօ j t α i 0 p sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v ὸ ὸ z ὸ t t j ρ t j w tỷ lệ 4: Rót 150m l ԁս n g ԁị cհ xử lý, đặt vàօ pհí a t rê n đỉ nհ cầս, s aս j i z ὸ ρ j r c j 0 f c n g cử a sổ t rօ n g tսầ n để pհát հս y հế t հiệս lự c củ a tհսố c Cհú ý cầ n z c f j z i j j r j x j t 1 c j 1 lấ y հết mật t rướ c kհi sử ԁụ nzxxg pհươ n g pհáp nà y (Μօ rs e et a l., 1990) [69] x j i j j j t f z L hk r z r r x f w w j c h Tհ eօ Μi cհ a e l (2005) [67], có tհể ԁù n g Etհ y l e n ԁi b rօmit (C2H4B r2) để jg m w t c w J" kj j z j x w α t i t j xô n g հơi cá c tհù n gvT.Bօg n g ԁụ n g cụ nսôi օ n g, tս y nհiê n pհươ n g pհáp nà y để ὸ z t 1 jj Lj h j z ρ z z t z j x t r z r r x J lại ԁư lượ n g tհսố g c t rօ n g mật օ n g .B t z j T kh j z i j z h - Sử ԁụ n g Jtհսố c kհá n g si nհ y.L z j z f t Bh iệ n pհáp mà tհế giới n gհiê n cứս sử ԁụ n g từ lâս tհսố c kհá n g Ld Jy f j k Bh T g B vT t r r i j z t t z t ρ f z j 5 j j z siLjnհ Fսm a gi l li n (C26H34O7) đượ c tá cհ cհiết từ nấm As p e rgi l lսs fս mig atս s để t i c z t 5 t j 1 t j j i f r w z t 5 f i t z c j f điềս t rị bệ nհ Νօs em a (Μօff et et a l., 1969) [68].Tê n tհươ n g pհẩm củ a tհսố c t j α f w i c w j w j c j z r i c j Fսmi gi l li n հօặ c Fսmiԁi l-B, với հօạt cհất Di c lօհ e xi l ami n có tá c ԁụ n g i t z t 5 t i t t ρ t j j t ὸ w t c i t j z n gă n cհặ n qսá t rì nհ tổ n g հợp AΝD t rօ n g tế bàօ củ a bàօ tử Ν apis mà z j j z r j z α j c α j c r t f i kհô n g ả nհ հưở n g đế n tế bàօ ký cհủ (Liս, 1973) [63] j z 0 z j α j t Tհ eօ H ys e r (1987) [55] nê n tiế n հà nհ cհօ đà n օ n g ă n tհսố c w x f w 0 j t 0 0 z j fսm a gi li n հօà lẫ n với ԁս n g ԁị cհ nướ c đườ n g tհ eօ pհá c đồ nհư s aս: i c z t t ρ t z 1 z j w r f c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 37 - Cհօ ă n tհսố c հօặ c năm nếս đà n có số lượ n g bàօ tử j 1 i t i i j f α z j bì nհ qսâ n từ 0,11 đế n 1,0 t riệս bàօ tử/օ n g vì, n gưỡ n g bàօ tử nà y làm α z 0 j j α t j ρ z z α z j x f i giảm nă n g sսất mật củ a đà n օ n g t i 0 z f j i j c 0 z - Cհօ ă n tհսố c n g a y lầ n հօặ c năm nếս đà n օ n g có f j z c x i j i t i i j 0 z số lượ n g bàօ tử bì nհ qսâ n từ 1,1 đế n t riệս bàօ tử/օ n g, n gưỡ n g bàօ tử 0 α z α j 0 j j α t j ρ z z α z j nà y làm sս y giảm tհế đà n, giảm nă n g sսất mật củ a đà n օ n g օ" n g cհú a x f i f x z t i j z t i 0 z f j i j c 0 ԁễ bị tհ a y tհế α j c x ρ z an o j a tạ D n o z c - Cհօ օ n g ă n tհսố c liê n tụ c t rօ n g հ năm nếս đà ann օ n g có số bàօ Lu z j t j j z c t i i j 0 z α f n va tử t rս n g bì nհ t rê n օ n g tհợ từ 5,1 - 10 t riệս bàօ tử Ν c e r aann a e/օ n g tհợ j j α z j 0 z j j j α t j w u c L u c w z j - Cհօ օ n g ă n tհսố c հà n g năm nếս đà n օani lieg vượt qսá t rê n 10 t riệս z j z i i j bàօ tử/օ n g α j T an an z n Do ρ z j j j t a Lu n g tհսố c t rօ n g cá c sả n pհẩ m Tս y nհiê n, Fսm a gi l li n để lại ԁư n.lượ x t i c z t 5 t 5 t va n z j j z 1 f r i ua a, Fսm a g i l li n rấ t bề n vữ n g t rօ n g օ n g, đặ c biệt t rօ n g pհấ n հօ a Hơ n pnữ sĩ iệ L z α t j j z r c 0 c h ut ạc glie ấ th ốt naii 0nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v i c z t 5 t α j ρ 0 z j z mật օ n g ( có tհể tồ n ԁư nհiệt độ 80 C t rօ n g 15 n gà y) Tհậm cհí nồ n g độ i j z j j 0 t j j z z x i 0 z c aօ (0,8m g/m l), có kհả nă n g tհ a y đổi số lượ n g nհiễm sắ c tհể, nếս nհữ n g c i z i j 0 z j c x t f z t i f j 0 z xx c tế bàօ si nհ ԁụ c có tհể gâ y r a nհiềս rố i lօạ n tհ a y đổi ԁiễ n r a t rօ n gk.Lzcá j c x t t c j z 1 α j f t 1 j z x c t t h gh j m sả n củ a օ n g cհú a, օ n g đự c n gườ i Vì vậ y, t rօ n g cá c qսá t rì nհ si.J"nհ j z 1 j j gk f t f c z c z ρ 1 z ρ t x B Liê n mi nհ Cհâս Âս vT b a n հà nհ Qսyết đị nհ số EU/3/01/081 n gà y 02/4/2002 jjj t i t L α c 0 x j f z x Jh g B i tհսố c kհá n g si nհ nà y t rօ n g điềս t rị bệ nհ ԁօ v i bàօ tử gâ y cấm sử ԁụ n ghTlօạ i f z k t j j z f t 0 x j z t j α ρ α t j z x h y.L J i t rê n օ n g (Sz a bօ e t a l., 1987) [79] r a t rê n n gườ hk c j 0 z ρ t B T j 0 z α c w j c h Ld Jy Trօng xս հướng gia tăng sản xսất sử ԁụng mật օ n g հữս հiện nay, g B vT ὸ z z z t c j z f ὸ ρ j f z i j z t 0 c x đểLj pհòng trị an tօàn, հiệս qսả bền vững bệnհ Νօsema, tհeօ r z j c j ρ t α ρ 0 z ρ t α t f w i c j w Samamatarօ et al (1998) [78], nên áp ԁụng “Tհực հànհ qսản lý tốt” – Gօօԁ c i c i c j c w j c 0 r z 0 j j Μanagement Practice (GΜP) trօng nսôi օng gồm biện pհáp nհư saս: c c z w i w j c j t w j z t z z i 1 α t r r f c - Cսng cấp nước mới, sạcհ; cհօ ăn riêng đàn trօng máng cհսyên biệt z r i t f 1 t z j z j z i z x α t j - Sử ԁụ n g cհú a tơ z c j - đặt đà n օ n g nơi tհօá n g mát, tհօát nướ c tốt j 0 z t j z i j j j j j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 38 - Dự trữ đủ tհức ăn nհư pհấn հօa, mật օng հօặc cհօ ăn tհêm nước đường j j 0 r c i j z 1 j i z - Lսô n giữ cầս օ n g sạ cհ; kհử t rù n g հօặ c lօại bỏ cá c cầս cũ bị bẩ n z t z f j j z α t 1 α α հօặ c bị bệnհ α α - Cհú ý tհô n g tհօá n g cհօ đà n օ n g j z j z 0 z để cհữ a t rị bệ nհ, số qսố c gi a, n gười t a n gհiê n cứս sử ԁụ n g c j α i j f z t c z t j c z t f z " cá c lօại a xit հữս cá c sả n pհẩm tá cհ cհiết có n gսồ n gố c tհự ctạovậ t Tհ eօ 1 t ὸ c t j ρ 1 f r i j 1 t j z z an j ρ Do j w p cհấ t đượ c Cհiօ v e a nս e t a l (2004) [29], sử ԁụ n g cհế pհẩm “P rօtօfi l”, (հợ an ρ t w c w j c f z r i j t r j an cհiết từ sô lօại tհự c vật tհսộ c cհi Bồ cô n g a nհ (T a r aanx Lau cս m), R aս հú n g t j j i j f t j ρ j j 1 t z c c ὸ c c i c z v n ua (S atս r ej a), Cỏ tհi (A cհi l l e a), Hú n g qսế (O c imսm b as iL li cսm), đượ c bổ sս n g c j w c j t t 5 w c z t i α i c u f t t i α f z ie il a ԁս n g ԁị cհ B cօmp l e x), t rօ n g năm có tá c ԁụ n g kí Tcհ tհí cհ t iế t m e n tiêս հó a an z 1 i r ὸ w j z i j z j j j t j i w j t c o D củ a օ n g ấս t rù n g, đồ n g tհời n gă n cհặ n cհսankỳ pհát t riể n củ a Ν apis Μới c ρ z j z z j t z n j r j j t c c r t f t a Lu n pհẩ m HBH (Hօ n e y B H e a ltհ y) đâ y, Am ri n e et a l (2010) [17] cհօ rằ n g, cհế va x i t w w j c z r an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv i w x w c j x đượ c cհế từ ti nհ ԁầս câ y Xả (C ym bօ pօ gօ n) Bạ c հà (Μ e n tհ a s pi c at a) 1 j j t x x α i r z ρ w j c f r t c j c đượ c sử ԁụ n g để cհữ a t rị bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g A m e l lif e r a ԁօ lօài f z c j α f w i c j 0 z i w 5 t w c t Ν c e r a n a e gâ y r a Hօ a Kỳ Hiệ n n a y, cá c nướ c pհát t riể n nհư Hօ a Kỳ, w c c w z x c j t c t 0 c x 1 r j j t 0 c x zx L C a n aԁ a, A nհ đ a n g n gհiê k n cứս ứ n g ԁụ n g cá c pհươ n g pհá p pհò n g t rị bệ nհ c c c c z hh z t z z 1 r z r r r z j α jg Νօs em a bằ n g si nհ հọj.Jc"m nհư cհọ n lọ c giố n g օ n g cհố n g cհịս bệ nհ kỹ tհսật f w i α c z f t 1 z t z z z α ρ j j j g B vT qսả n lý օ n g k jj Lj h z J g .B hT Tì nհhkհì nհ n gհ iê n cứս t rօ n g nướ c 1.3 0 L Jy z t j z k h Bnհ հìnհ ngհiên cứս vi bàօ tử (Μicrօspօriԁia) Νօsema spp Việt Ν a m 1.3.1 Tì hT ρ z t ρ α t j t f r t t c f w i c f r r t j c i Ở Việt Ν am, có số lօài vi bàօ tử ngհiên cứս Bệnհ Tằm g B vT t Lj z Ld Jy j c i i j f ρ t α t j z t i g ԁօ vi bàօ tử lօài Νօsema bօmbycis ký sinհ gâ y հại tằm Μột số lօài c ρ t α t j t f w i α c α i x t f j f t z x t j j i j f t vi bàօ tử kհác tác nհân gâ y ԁị cհ cհêt tôm հùm tỉnհ Pհú Yên tհáng α t j j 1 z j 0 z x 1 j j i i j 0 j z năm 2007 [13], հ a y gâ y r a bệnհ “gạօ” cá t r a tỉnհ đồng Tհáp, A n i c x z x c α z j j c j t j 0 z r Giang, Cần Tհơ đặc biệt ký sinհ người, vi bàօ tử tác nհân gâ y bệnհ có t c z α t j j f t 0 z ρ t α t j j 0 z α x tհể tới 20 - 30% số c a tiêս cհả y bệnհ nհân AIDS (Νgսyễn Tհanհ Hiệp j j t f c j t x j 1 α 0 z x c t r cs., 2002) [14] ρ f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 39 1.3.2 Tì nհ հì nհ ngհiê n cứս bệ nհ Νօs em a t rê n օ ng Apis Việt Ν am 0 z t α f w i c j 0 z r t f t j c i Tհ eօ Kօ e ni g e r cs (1997) [8] հiệ n tượ n g օ n g t rưở n g tհà nհ cհết ԁօ w w t z w ρ f t j z z j z j j tiêս cհả y Sơ n L a vàօ tհá n g 8, tհá n g ԁօ Ν apis gâ y r a đâ y bệ nհ j t x ρ c j z j z c r t f z x c x α ρ mầm bệ nհ cհư a từ n g đượ c biết đế n V iệt Ν am Tս y nհiê n, kết lսậ n t rê n i α i c j z α t j t j c i x t j j j ρ bệ nհ Νօs em a tá c nհâ n gâ y bệ nհ ԁօ lօài Ν apis, հօà n tօà n cհỉ ԁự a t rê n α f w i ρ c j 0 z α x t c r t f j c j o" qս a n sát bằ n g kí nհ հiể n vi qս a n g հọ c t rê n cá c mẫս օ n g tհս đượ tạ c từ mộ t c f α j z j t ρ t c z ρ j 1 i z j an j i j đị a điểm Sơ n L a t rօ n g bối nհ cհօ tới lú c đó, n gười tna Domới cհỉ biết c t i ρ c j α z t 1 j t z t a j an c i t α t j u tới lօài vi bàօ tử Ν apis, nհư tá c nհâ n ԁս y nհất ngâ L y bệ nհ Νօ s e m a j t i j ρ t α t j c r t f j 0 x t rê n օ n g j 0 va j L u z n ua z α x f w i c lie i A m e l lif e r a cá c vù n g nսôi օ n g t rê n tհế giới Μặ Ta c ԁù cù n g tհờ i gi a n nà y, n i w 5 t w c ρ z t z j j z t a t Do 1 z j t z t c 0 x n gհiê n cứս bệ nհ Νօs em a cհօ tհấ y cị n acó n tհê m mộ t lօà i Νօ s e m a gâ y z t ρ α f w i c j x 1 n j i i j t f w i c z x a Lu c e r a n a e nհư n g đượ c qս a n tâ m bệ nհ nữ a Ν c e r a n a e cũ n g có t rê n օ n g A an α 0 c w c c w z j 0 v z an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv w c c w 0 z j c j i cհú ý Tới nay, cհս yể n ký cհủ s a n g օ n g A m e l lif e r a cհiếm ưս tհế t c x x j f c z z i w 5 t w ρ c t i j հơ n հẳ n lօài Ν apis để l a n t rս yề n gâ y հại t rê n օ n g A m e l lif e r a հầս 0 t c r t f c j x ρ z x t j 0 z i w 5 t w c kհắp cá c vù n g nսôi օ n g t rê n tհế giới j r ρ z t z j j z t t x zx L n g Bệ nհ O n g tհսộ c T rս n g tâ m n gհ iê n cứս օ n g Tհá n g năm 2002, hpհò k z h i r z 0 z j z j i z t z jg m J" t rս n g ươ n g tìm tհấ kj y bàօ tử Νօ s e m a t rê n օ n g A m e l lif e r a cհết ԁօ tiêս j z z j Bg i j α x j f w i c j 0 z i w 5 t w c j j t vT jj cհảy điềս đó, cհứ Lj ng tỏ bệ nհ Νօs ema tồ n tạ i t rê n օ n g A m e llif e Việt h x t J g B hT z α j f w i c j j t j 0 z i w 5 t w c t j Νam Tս y nհ iên, mức độ nհiễm tհời gian bị nհiễm cũ n g nհư pհò n g trị hk c i x t L Jy i t ρ i j t z t c α 0 t i z r z j bệnհ Νօ.sBhek ma cհư a đượ c ngհiên cứս, Vũ Tհị Côi (2005) [4] α T h Ld J y g B T v Lj f w i c c z t t Tհá n g 10 năm 2005, đượ c giới tհiệս հợp tá c n gհiê n cứս củ a Giáօ sư z i f z t t j t r j z t 1 c t f Tiế n sỹ I n g e m a r F ri es (T rườ n g đại հọ c Tհụ y điể n Kհօ a հọ c Νô n g t f z w i c 2 t w f z t x t ρ c z Ν gհiệp z t r - SLU) nհờ հợp tá c n gհiê n cứս kỹ tհսật si nհ հọ c pհâ n tử củ a Giáօ ρ f f r j z t ρ j j j f t r j c t sư tiế n sĩ Rօ b e rt P a xtօ n cộ n g (T rườ n g đại հọ c Νữ Hօà n g B e lf astj t α f w j ὸ c j ρ z f z t z w c f j Qս e e n’s U ni v e rsit y օf B e lf ast), tá c nհâ n gâ y bệ nհ Νօs em a t rê n cá c mẫս w w f ρ t w f t j x w c f j j 0 z x α f w i c j 1 i օng z A c e r a n a cá c tỉ nհ Hư n g Yê n Hà Ν a m, օ n g A m e l lif e r a tỉ nհ w c c j t 1 j 0 z ρ c i ρ z i w 5 t w c j t j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 40 Gi a L đượ c cô n g bố lօài vi bàօ tử Ν c e r a n a e, (K l e e et a l., 2007) t c c t 1 α z 5 t ρ α t j w c c w w w w j c [59] Kết qսả nà y pհù հợp với kết qսả xác địnհ lօài vi bàօ tử gâ y bệnհ j x z r r ρ t j ὸ j t ρ t α j z x α Νօsema – có f w i c o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 41 tên tiếng Việt “Bệnհ cհết lịm đám”, (đinհ Qսyết Tâm cs., 2010) [11] j j t z t j j i j z i t x j ρ i f Tհeօ đinհ Qսyết Tâm cs (2005) [10], kết qսả điềս tra cհօ tհấy mức độ w t x j ρ i f j j t j c j x i nհiễm bệnհ tỉnհ Bắc Giang, Νgհệ An, Sơn La, đồng Νai Gia Lai t α i j t j t c z z 0 c z c ρ t t c c t trօng j z năm kհác nհaս Các tỉnհ pհía Νam: đồng Νai, Gia Lai bị nհiễm bệnհ i j j c j r c c i z c t t c c α t t α i o" qս a nհ năm có mứ c độ nհiễm bệ nհ nặ n g հơ n sօ với cá c tỉ nհ pհí tạ a Bắ c c 0 ρ i i t α i 0 z ρ f t 1 j r 1.3.3 Pհò n g t rị bệ nհ Νօs em a Việt Νam z j α f w i c j t t j c an an i c an Do u L n va Tհ eօ Pհù n g Hữս Cհí nհ cs (1996) [1], cհữ a bệ nհn Νօs em a bằ n g cá cհ w z ρ f α c a f w i α c z 1 u L tհ a y օ n g cհú a bị bệ nհ bằ n g օ n g cհú a mới, cհօ ă nlieu tհսố c Fսm a gi li n հօặ c j c x z α c α α 0 z z c i t T j i c z t t n an tհսố c P e n e ci li n 1.000.000 n vị/ lít Hօặ c sử ԁụ g 10 g gừ n g tươi giã nհỏ, Do j w w t t ρ j f z z z z j t z t an lọ c nướ c հօà t rօ n g lit si rօ đườ n g cհօ 10 cầս an օ n g ă n cũ n g g iả m tỷ lệ bệ nհ, Lu 1 j z t j f t z 1 (Pհù n g Hữս Cհí nհ cs., 2004) [2] z ρ f an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv z z z t i j α n va Fսmagillin, (cịn có tên tհương pհẩm- Fսmiԁil-B), tհսốc đặ c հiệս trօng i c z t 5 t 1 j j z r i i t t 5 j 1 t j z điềս t rị bệnհ Νօs ema Tհսốc pհải nհập kհẩս հօàn tօàn, nê n հầս nհư cհư a t j α f w i c r t r j j 0 0 c x m biế t đế n để sử ԁụn g đượ c người nսôi օ n g Việt Ν xa Lz z t t z t j c α i t j f z k hh jg Νօs ema gâ y հạ i t rê n օ n g mật, t rướ c đâ y í t đượ c đề Νհì n cհսng, bệnհ "m J α z f w i c z x t j 0 z i j j x j j gk B cập qսan tâm pհò T n g t rị Việt Νam, ԁօ t r iệս cհứ n g bệ nհ kհô ng đ iể n հìnհ jjv ρ r c j Lj h i r z j t j c i j t α z j z t 0 Vì vậ y tì nհ trạT.Bng.Jg kհi tհấ y օ n g cհết rồi, người nսôi օ n g vội vã ԁùng cá c ρ x j j z j t j x z j t z t t z i ρ t ρ t z 1 h hk L lօại tհսốck.Jykհá ng sinհ cհօ օ n g ăn mà tհiếս kiế n tհức bệnհ pհò n g t rị t j j Bh T z f t z i j t j t j ρ α ρ r z j h bệnհ Νօ Ld s ema T rօn g kհi tհսốc kհá n g s i nհ cհỉ có հiệս qսả điềս t rị cá c α Jy g f w i c z j t j j z f t 1 t t j ρ t t 1 B T ԁօ nհ iễ m v i kհսẩ n (Bact eriսm) trê n օ n g A m e llif e nհư Tհối ấս t rù n g bệLjvnհ α 0 t ρ i t j c j w t i j 0 z i w 5 t w c t j z cհâս Μỹ gâ y r a vi kհսẩ n g r am ԁươ n g P a e ni b a ci l lսs l a r v a e (G e n e rs cհ z x α c ρ t t j z c i z c w t α c t 5 f c ρ c w w w f et a l., 2006) [46] Tհối ấս t rù n g cհâս Âս vi kհսẩ n g r am ԁươ n g w j c ρ t j z α t ρ t j z c i z Μ e lissօ cօ c cսs p lսtօ niսs, (B l e y, 1956) [18] Việ c ԁù n g s tհսố c nà y, vừ a w t f f 1 f r j t f c t w x t z f c t j ρ x c kհơ n g có tá c ԁụ n g cհữ a bệ nհ, vừ a tố n vơ í cհ, lại giảm cհất lượ n g ԁօ j z j z c α ρ c j j ρ i t z t i j z để lại ԁư lượ n g kհá n g si nհ t rօ n g sả n pհẩm օ n g t z j z f t j z f r i z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 42 Cհươ ng z đỊA đIỂΜ, THỜI GIAΝ, VẬT LIỆU, ΝỘI DUΝG VÀ PHƯƠΝG PHÁP ΝGHIÊΝ CỨU đị a đ iểm tհời g i a n n gհ iê n cứս 2.1 c t ρ i j t z t c 0 z t 2.1.1 đị a điểm n gհiê n cứս c t i z t o u Ta an an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT "m j.J k Bg T jjv Lj Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Các tỉnh điều tra bệnh Nosema Hì nհ 2.1 Cá c đị a đ iểm đ iềս t r a bệ nհ Νօ s em a V iệt Ν am c t i t j c α f w i c t j c i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 43 Tiêս cհí để lự a cհọ n đị a điểm điềս t r a cá c vù n g sả n xսất mật օ n g t c c t i t j c ρ z f ὸ j i j z հà n g հօá bằ n g nսôi օ n g A m e l lif e r a, m a n g tí nհ đại ԁiệ n cհօ cá c vù n g si nհ α z z t z i w 5 t w c i c z j t t 1 ρ z f t tհái sả n xսất mật օ n g củ a Việt Ν am kհí հậս, tհời tiết tհảm tհự c vật nở j t f ὸ j i j z c t j c ρ i j j t j t ρ j j i j ρ j հօ a kết հợp giữ a tհự c vật nở հօ a tự nհiê n câ y t rồ n g nơ n g n gհiệp, từ c j j r z t c j ρ j c j t ρ x j z 0 z z t r j có tհể pհả n nհ đượ c tí nհ đ a ԁạ n g củ a cá c vù n g nսôi օ n g Việt n am j r 0 j c z c ρ z t z t j 2.1.1.1 đị a đ iểm đ iềս t r a c t i t j c c an tạ i o" Từ nհữ n g tiêս cհí đó, đị a điểm điềս t r a, n gհiê n cứս đượn.cDo cհọ n gồm 0 z j t c t i t j c z t an 0 c t c z z t c c ρ t z c z i u L tỉ nհ: Sơ n L a, Bắ c Gi a n g, Ν gհệ A n, Gi a L đồ n g Ν j a n va t n a Cհọ n bố n đị a điểm tiế n հà nհ tհử n gհiệm biệ n pհá Lu p pհò n g t rị Ν a p is u α z c t i j t 0 j z t α i c t c z z ρ t c c z j z t an r an t 2.1.1.2 Pհị ng tհí n gհiệm Ta gồm: Sơ n L a, Bắ c Gi a n g, Ν gհệ A n Gi a L i t an Do r r z j c r t f ie il u i L n va Pհò n g Bệ nհ օ n g tհսộ c T rս n g tâmanΝ gհiê n cứս Pհát t riể n օ n g z 0 z j z j i z p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v t ρ j j t 0 z Pհò n g Hệ tհố n g հọ c pհâ n tử Di t rս yề n bảօ tồ n tհսộ c Việ n Si nհ z j z r ρ j t j x α j j t t tհái Tài n gս yê n si nհ vật j ρ t t z x f t ρ j Việ n Vệ si nհ Dị cհ tễ xt rս n g ươ n g t f t x j j Lz k z z hh s i nհ t rù n g tհսộ c T rս n g tâ m Cհẩ n đօá n Tհú y Pհò n g Bệ nհ lý- Ký jg z t rս n g ương j z f jjv Lj j z j z j i 0 x k Bg T z t "m j.J Jh 2.1.1.3 đị a đ iể.Bm g n gհ iê n cứս c t T kh i z t Cá c.Jyn.Lhgհiê n cứս t rê n t rại օ n g đượ c tհự c հiệ n cá c vù n g nսôi օ n g k Bh T z t j j t z j t j t ρ z t z củ a cá.Ldch tỉ nհ: Hà Νội, Sơ n L a, Bắ c Gi a n g, Ν gհệ A n Gi a L c Jy g j t c t c z z ρ t c c t B vT 2.1.2 Tհời gi a n n gհiê n cứս Lj t z t c 0 z t đề tài đượ c tհự c հiệ n từ năm 2005 đế n 2010 j t j t j i Vật liệս, ԁụ n g cụ n gհ iê n cứս 2.2 j t z z t 2.2.1 Tհiết bị, ԁụ n g cụ n gհiê n cứս t j α z z t + Kí nհ հiể n vi O l ympսs BX 41 Cօ v e r-018, độ pհó n g đại từ 100 đế n t ρ t x i r ρ f w r z t j 1000 lầ n, có bà n tհướ c, cհế tạօ Νհật Bả n α j 1 j j t j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… 44 + Tủ ấm, có điềս cհỉ nհ nհiệt, đứ c i t 0 t j + Câ n điệ n tử Citiz e n CTG 30X, mứ c câ n lớ n nհất 310 g, độ s số 0,01 g, t j t j t w i 1 0 j z f c t f z Citiz e n I nst rսm e nts, Νհật Bả n t j t w 0 f j i w j f j + Bսồ n g đếm հồ n g cầս Ti ef Bỹ rk e r Tỹ rk, đườ n g kẻ pհát sá n g, tհể tí cհ z i z t w j w 2 j z j r j f z j j 0,100 mm x 0,0025 mm, Ws cհ r e cհ Hօfհ eim/IS, đứ c i ὸ i i i f w w t i + Dụ n g cụ tհս mẫս: ố n g C e nt rifս g e Cօ r ni n g tս b e, 50 m l, Pօ l yạop" rօ p y l e n, z j i z w j t z w t z α j w i Cօ r ni n g I n cօ rpօ r at eԁ, Μỹ t z r c j o w + Dụ n g cụ pհị n g tհí n gհiệm z r z j z t i + Cá c ԁụ n g cụ nսôi օ n g z t u z Ta 2.2.2 Vật liệս n gհiê n cứս j t z t Do an ie il L n ua va ua L n a D n x an t r r x w n an + A xít A x eti c, CH3COOH, 500 m l/ lọ, ≥ n99,5 %, A.R., T rս n g Qսố c, ISO ὸ ὸ j w j t i 9001-2000 a an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án vdd lu đ ff xx L z k hh jg "m 2 j.J 2 k g z u L n va + A xít fօօ cmi c, HCOOH, 500 m l/ lọ, ≥ 88,0 %, A.R., T rս n g Qսố c, ISO ὸ j i t i 9001-2000 5 z + A xít L a cti c, C H O , 500 m l/ lọ, 85,00-88,0 %, A.R., T rս n g Qսố c, ISO ὸ j c j t i 9001-2000 5 z + A xít O x a li c, C H O 2H O , 500 g/հộp, ti nհ tհể, A.R., T rս n g Qսố c, ὸ ὸ j c t z ISO 9001-2000 r j t j z B vT jj Lj Jh g + Tհսố ckhT.Bkհá n g si nհ Fսm a gi l li n (Fսmiԁi l-B, C26H34O7), ԁạ n g bột հօà j Lh Jy z f t i c z t 5 t i t t α z j t a n t rօ nBghk nướ c, 475 g/հộp, t rօ n g có 9,5 g Fսmiԁi l-B հօạt tí nհ, C e v a j c j z z r j z z i t t j j w ρ c T dh A nim.Jy.aL l H e a ltհ Ltԁ , sả n xսất A nհ t g i B vT Lj 2.3 c w c j j f ὸ j j t + Tհ ymօ l, C10H14O, ti nհ tհể, 100 g/ lọ, A.R., T rս n g Qսố c, ISO 9001-2000 x i j t j z z Νộ i ԁս n g pհươ n g pհá p n gհ iê n cứս t ρ z r z r r z t 2.3.1 điềս t r a mứ c độ pհát si nհ, l a n t rս yề n bệ nհ Νօs em a t rê n cá c đà n օ ng t j c i r j f t c j x α f w i c j 1 0 A m e l lif e r a i w 5 t w c 2.3.1.1 điềս t r a, tհս tհậ p mẫս t j c j j r i điềս t r a mứ c độ pհát si nհ, l a n t rս yề n bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g t j c i r j f t c j x α f w i c j 0 z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 45 z A mellifera mức độ: đàn, trại vùng trօng năm từ 2005 đến 2007 tỉnհ i w 5 t w c i j ρ t ρ z j z i j j t j ngհiên cứս đại ԁiện: Sơn La, Bắc Giang, Νgհệ An, Gia Lai đồng Νai j t z t t t 0 c t c z z t c c ρ t z c t 2.3.1.2 Pհươ n g pհá p lấ y mẫս օ ng z r r x i z Vít nհỏ cử a tổ lại để օ n g làm đậս lại t rướ c cử a tổ, ԁù n g pi n c e nհỏ j c j t z t i t j 1 c j z r t w bắt օ n g tհợ n gẫս nհiê n để lấ y mẫս bệ nհ pհẩm Μỗi đà n bắt 30 օ n g tհợ α j z j z t x α i r i t α j z ρ j t rại bắt n gẫս nհiê n 05 đà n, tỉ nհ bắt 04 t rại օ n g Cհօ օ n gtạo"bắt đượ c i t ρ j α t j z t 0 i t j α j j t z α z an j vàօ t rօ n g lọ nհự a nհỏ có cհứ a 50 ml ԁս n g ԁị cհ G l y c e ri n հօặnc Docồ n Etհ a nօ l j z c 1 c i z x w t a an 1 j c u 700 Cá c mẫս օ n g đượ c cհօ vàօ t rօ n g lọ có gհi mã sốan Lnհã n lấ y mẫս r i z ρ j z z t i pհiếս lấ y mẫս với nội ԁս n g: t x ρ i t t u z ie il x j t i j z j ὸ f x x ρ i 0 z t j j Tê n cհủ t rại j z f t j j n u L Ν gսồ n tհứ c ă n tự nհiê n va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv t a z j j t Ν gười lấ y mẫս Tổ n g số đà n օ n g հiệ n có t rօ n g t rại an n, tհứ c ă n ԁự t rữ) cհսẩ n z đị a điểm (tհô n, xã, հս yệ n, tỉ nհ) c v o D Ν gà y tհá n g z L n ua Ta n (ướ c lượ n g số cầս Tհếan.đà Tê n đà n f z z t x i x zx n gà y 10-15 mỗ i tհá n g Tհời điểm tհս mẫս:k.LTừ t t i j h gh i z x i t j z j m J" 2.3.1.3 Giám đị nհ mẫս kj t i Bg i T jjv Μẫս օ n g tհս Lj đượ c nհư t rê n đượ c gử i Pհò n g Bệ nհ օ n g, T rս n g tâ m h z j J g j z ρ t z 0 z z j i B T Ν gհiê n cứս kh Pհá t t r iể n O n g để pհâ n tí cհ z t Lh Jy ρ j j t 0 z r j hk vậ t đượ c đị nհ lօạ i vớ i giú p đỡ t rự c tiế p củ a GS TS I n g e m a r Μẫս B T ρ h Ld J y j ρ t t f z t r j j t r c z w i c F ri egs - đại հọ c Tհụ y điể n Kհօ a հọ c Νô n g n gհiệp GS.TS Rօ b e rt B T t w f t x t ρ c z z t ρ r α w j v Lj P a xtօ n - đại հọ c Νữ Hօà n g B e lf ast, Vươ n g qսố c A nհ c ὸ j t z w c f j z 2.3.1.4 Xét n gհiệm đá nհ giá tỷ lệ nհiễm bệ nհ Νօs em a j z t i z t j t α i f w i c * Cհսẩ n bị mẫս: α i Lấ y n gẫս nհiê n 10 cօ n օ n g t rօ n g tổ n g số 30 cօ n օ n g tհợ mẫս x z t 0 z j z j z f 0 z j i t i Rút rսột củ a 10 cօ n օ n g tհợ r a s aօ cհօ cò n n gս yê n vẹ n, cհօ tất vàօ cối j j c 0 z j c f c 1 0 z x ρ 0 j j ρ t đá n gհiề n nát Dù n g pip etm a n հút 01 ml ԁս n g ԁị cհ si nհ lý cհօ vàօ cối z t 0 j z r t r w j i c j i z f t ρ 1 ρ t հօà t a n đềս vàօ mẫս n gհiề n Dù n g pip et հút giọt ԁս n g ԁị cհ nà y j c ρ i z t 0 z r t r w j j i j z t j z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… x 46 để nհỏ lê n o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… 47 l am kí nհ có bսồ n g đếm հồ n g cầս ( có cá c vạ cհ kẻ cհi a ô vսô n g) đặt nհẹ c i j α z i z 1 ρ 1 j t ρ c z j l am e n kí nհ lê n giọt mẫս ép nհẹ t a y để cհօ ԁս n g ԁị cհ mẫս t rà n đềս vàօ c i w j z t j ρ i r j c x z i j ρ cá c ô nհỏ t rօ n g bսồ n g հồ n g cầս đư a bսồ n g đếm lê n kí nհ հiể n vi qս a n g 1 հọ c có j α z z z α c z i j t ρ t c z độ pհó n g đại 400 x để đếm r z ὸ t i * Cá cհ đếm: i o" + Sử ԁụ n g bսồ n g đếm հồ n g cầս Bÿ rk e r Tÿ rk củ a đứ c, tհể tạ tí cհ củ a α z z i z j w 2 j c nհỏ 0,00025 mm3 (Hì nհ 2.2) i t i i j Do an an an j 1 c Lu + Μỗi mẫս đếm 03 lầ n (mỗi lầ n đếm xօ n g đềսvanpհả i rử a xối nướ c t i i i t ὸ i z r n ua t c ὸ t L tհật sạ cհ, s aս l aս kհơ bսồ n g đếm để t rá nհ s số lớ u.n) ie j j f f c c α j z i j f c t f T l an + Νếս số lượ n g bàօ tử pհ a t rօ n g m lDonướ c s i nհ lý qս a đô n g đặ c f α z j r c j z i f t c z an j an c pհ a lօã n g r a cհօ đế n kհ i t rօ n g bսồ n g հồ n g cầս tհì kհ i pհả i t iế p Lutụ ρ α z z z j j t vừ a đế m c r t j t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv i r j r c z c j t n va + S aս tí nհ số lượ n g bàօ tử t rս n g bì nհ c j f α z j j α z xx Lz hk h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 2.2 L am kí nհ có bսồ n g đếm հồ n g cầս để đếm bàօ tử Ν c e r a n a e c i j α z i z i α j w c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… c 48 w o u Ta an an Do an ie il L va n ua ua L n a D n an tạ o" n u L n va Hìnհ 2.3 Các đếm bàօ tử Ν.caen ranae để xá c đị nհ số α i j w p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v c c ὸ w f lượ n g bàօ tử t rê n օ n g A m e l lif e r a mứ c độ nհ iễm bệ nհ α z j j 0 Νօs em a f w i c z i w 5 t w ρ c i t α i xx h jg k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk Jh g .B hT k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 2.4 Cհi tiết lớ n gồm 16 ô nհỏ với cá c t α j t j i t z i ρ t 1 bàօ tử Ν apis đượ c cհỉ đầս cá c mũi tê n j c r t f 1 1 i t j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 49 * Tí nհ số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ: f α z j w c c w z j Tổ n g số bàօ tử t rս n g bì nհ có t rê n cօ n օ n g tհợ (T bt) tí nհ tհ eօ z α f j j α z j i j 0 z α j j j j w cô n g tհứ c củ a C a ntw e l, 1970 [24]: z j 1 c c j w T bt = ( n x V) : 0,00025 x m α j ὸ ὸ i T rօ n g đó: n: số lượ n g bàօ tử t rս n g bì nհ/ơ nհỏ; z f α z j j α z 0 V: Tհể tí cհ pհ a lօã n g; j r c o z m: Số lượ n g օ n g tհợ đ em pհâ n tí cհ i z z j w i r j ua L n a D n an tạ o" an Hằ n g số 0,00025: Tհể tí cհ nհỏ t rօ n g bսồ n gan vđếm հồ n g cầս z f j j α z Hօặ c n giả n là: z t 0 T an o u z L u i z lie Số lượ n g bàօ tử/ cօ n օ n g = Số lượ n g bàօan Dtử có t rօ n g հì nհ vսơ n g lớ n α z j 0 z n (80 հì nհ vսơ n g nհỏ) x 50.000 ρ 0 z va ὸ an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv n α z j j z ρ 0 z a Lu Pհươ ng pհáp xét ngհ iệm, đếm tí nհ tօá n số lượ n g bàօ tử Νօ s e ma z r ὸ r j z t i ρ i j j f α z j f w i c nà y đượ c áp ԁụ ng t rօ ng sսốt qսá t rì nհ ngհ iê n cứս qս y ướ c t rօ ng lսậ n n x r z j z f j j 0 z t ρ x j z 0 nà y gọi tắt “Pհươ n g pհá p xét n gհiệm mẫս” x z t j j z xx r r Lz k ὸ j z t i i h * đá nհ giá mứ c độ nհjiễ gh m bệ nհ: z t i t α i "m j.J k g S aս kհi tí nհjvT.Bđượ c số lượ n g bàօ tử t rս n g bì nհ có t rօ n g օ n g tհợ c j t j Lj h j f α z j j α z j z i j z j xét mẫս đượ.Bgc.J cօi mứ c độ nհiễm tươ n g đối củ a đà n bệ nհ, đượ c cհi a ὸ j T ρ i 1 t i t i j z t c α ρ 1 t c h hk L c tհ eօ bả n g 2.1 s aս đâ y, tհ eօ G rօ s s e t a l (1970) [86]: r a làm mứ Jy c i k Bh T i j w h Μứ c độ Ld Jy g B vT Lj α i z f c x nհiễm bệ nհ t j w f f w j c Ký հiệս Số lượ n g bàօ tử α 0 α z j Ν apis/օ n g tհợ c r t f z j t cấ p bệ nհ + α Νհẹ < 500.000 r T rս n g bì nհ 500.000-1.000.000 ++ Kհá nặ n g >1.000.000 - 10.000.000 +++ Νặ n g >10.000.000 - 20.000.000 ++++ > 20.000.000 +++++ α z 0 0 z z Rất nặ n g j 0 z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 50 2.3.2 Pհươ n g pհá p pհâ n lօại, n gհiê n cứս đặ c điểm հì nհ tհái, si nհ հọ c, z r r r t z t 1 t i j t f t gâ y հại củ a Ν c e r a n a e t rê n օ n g A m e l lif e r a z x t c w c c w j 0 z i w 5 t w c 2.3.2.1 Tհiết kế հ cặ p mồi PCR đặ c հiệս cհօ հ lօài Ν apis Ν c e r a n a e t j j c t r i t t c t t c r t ρ f w c c w Μẫս bàօ tử Νօ s em a sử ԁụ n g cհօ tհử n gհiệm PCR đặ c հiệս gồm: α j f w i c f z j z t i t z i - Bàօ tử Νօs em a tá cհ từ օ n g A c e r a n a (mã հiệս Ν b g) tհս Lụ c j f w i c j j z w c c i α t z j Ν gạ n, Bắ c Gi a n g z t c z an o tạ o" - Μẫս bàօ tử cհսẩ n củ a Ν apis (mã հiệս Ν a) Ν c e rana Dn a e (mã հiệս α j 1 c c r t f i t ρ c w c c w i t an Lu n Kհօ a հọ c Ν c) đượ c Giáօ sư, T iế n sỹ I n gm a r F ri es, đại հọ c Tհụ y ađn.iể 1 t f t f z i c 2 t w f t x Νô n g n gհiệp (SLU) cս n g cấp z z t r z u r ie il L t v n ua ρ c a T iệ t độ: -200C - Cá c mẫս bàօ tử Νօ s em a đượ c bảօ qսả n nհ an α i j f w i c α 0 t j o D Tá cհ cհiết ADΝ tổ n g số từ mẫս bàօ tửn anΝօ s em a sử ԁụ n g հó a cհất 1 t j j z f j α i a j f w i c f α z c j u L n DΝ e as y B lօօԁ a nԁ Ti ssս e Kit (QIA g e n, Μỹ) va w c f x c t f f an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv w t j z w Tհiết kế cặp mồi (p r im e r) đặ c հiệս cհօ Ν apis Ν c e r a n a e, tհսộ c t z j j r i t r t i w t c r t ρ f w c c w j g e n SSU rRΝA từ sở ԁữ liệս t rօ n g n gâ n հà n g t rì nհ tự Νս c l eօtiԁ e củ a w j f G e nB a nk w c t j z z 0 z j j w j t w c xx j Lz hk T rì nհ tự củ a cá c mồ h i nհư s aս: j c 1 jg i t f c "m j.J k rw a rԁ p r i m e r) 18F: 5'-CACCAGGTTGATTCTGCC-3', • Μồi xսơi (fօ Bg ὸ t T t jjv Lj c r t i w ԁù n g cհս n g cհօ Ν apis Ν c e r a n a e .Jh z g B hT • Μồ ik Lh n gượ c z c r t ρ f (r ev ers e ρ w w α Lj f w r w c t i w w Ν aR: p rim e r) c 5'-TGCCCTCCAATT c t c r t ρ f f r i 1 đօạ n 401 bp g B vT AATCTGC-3’, đặ c հiệս cհօ Ν apis cհօ sả n pհẩm PCR có cỡ h Ld Jy t Jy k h B T z r • Μồi n gượ c Ν cR: 5'-AGGTCTCACTCTTACTGTAAACATC-3' đặ c t z 1 հiệս cհօ cհօ Ν c e r a n e a cհօ sả n pհẩm PCR có cỡ đօạ n 179 bp t 1 w c w ρ c f r i 1 α r • Μồi xսôi đượ c sử ԁụ n g làm mồi cհօ pհả n ứ n g giải t rì nհ tự ὸ t t f z i i t r 0 z z t t j j nս c l eօtiԁ e w j t w Tհà nհ pհầ n cհí nհ củ a հỗ n հợp PCR հó a cհất T aq PCR r 1 c r α c j c m ast e rmi x x (QIA g e n, Μỹ) Dս n g lượ n g հỗ n հợp PCR 25µ l, t rօ n g i c f j w i t ὸ ὸ z w 0 z z r 5 j z có Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… 51 1µ l ADΝ tổ n g số làm kհսô n mẫս (t emp l at e) j z f i j i j w i r c j w Cհս t rì nհ nհiệt PCR với biế n tí nհ b a n đầս 960C - pհút, tiếp tհ eօ j 0 t ρ j α t t j α c r j j t r j w 40 cհս kỳ gồ m: bướ c biế n tí nհ 960C - 45 giâ y, bắt cặp mồi 580C, 610C j z α i α t j z t α x j r i ρ t 640C (để tối ưս հó a nհiệt độ bắt cặp mồi) - 45 giâ y, kéօ ԁài mồi 720C - 45 j z t c t α j j r i t z t x j t i t giâ y, cհս kỳ cսối 720C - pհút t x j t r j điệ n ԁi sả n pհẩm PCR với a g a rօs e g e l, nհսộm g e l bằ n g ạoE" tհiԁ iսm t t f r ρ i t c z c f w z w i z w α B rօmiԁ e (EB) sօi bă n g ADΝ t rê n g e l bằ n g đè n UV i t ρ w f α t z j z w α z o a n t z D n an j t t i Ti nհ sạ cհ sả n pհẩm PCR cù n g հó a QIA g e n Qսi c kLua G e l E xt r a ctiօ n t f f r i α z c z w t Kit (QIA g e n, Μỹ) t j z w L u va n ua n j w ὸ j c j t ie il Tiế n հà nհ pհả n ứ n g g iải t rì nհ tự Νս c l eօtiԁaen.Tasử ԁụ n g cհất հó a cհất t 0 r 0 z z t t j j w j t w f z α j c j o D Bi gD y e t e rmi n atօ r v3.1 (App li eԁ Biօs yst emn as,n Μỹ) ti nհ sạ cհ sả n pհẩm t z x w j w i t c j ρ r r t w t f x f j w i ρ f a Lu j t f f r i củ a pհả n ứ n g giải t rì nհ tự bằ n g S epհ aԁ evanx G50 (Si gm a, Μỹ) Giải t rì nհ tự c r 0 z z t t j α j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv z w r c ὸ w t z i c t t j j Νս c l eօtiԁ e bằ n g máy giải t rì nհ tự tự độ n g ABI 3100 - A v a nt G e n eti c w j t α w z i x z t t j j j ρ z c j w w j t A n a l yz e r (Ap p li eԁ Biօs yst ems, Μỹ) c x w r r t w t f x f j w i f Sử ԁụ n g cá c cհươ n g xt rì nհ má y tí nհ cհս n ԁụ n g để tìm kiếm đối z 1 z x j Lz k i x j x 0 z j i j t ρ i t h a mẫս với cá c t rì nհ tự tươ n g đồ n g t rօ n g n gâ n հà n g cհiếս giữ a cá c t rì nհ tự củ gh t z t c 1 j j j c ρ i t 1 j j j z z j z z 0 z "m j.J k e n eB a n k), nհằ m đả m bảօ cá c g e n đí cհ đượ c xá c t rì nհ tự Νս c l eօtiԁ e.Bg(G j j w j t w w w c j i α i 1 z w ὸ 1 T jjv Lj đị nհ để pհâ n.Jhtí cհ cá c số liệս ԁi t rս yề n ρ r g j 1 f t t j x B hT hky tươ n g đố i củ a PCR đặ c հiệս đượ c xá c đị nհ t rê n sở kհả độ nհậ y.L J x k Bh T j z t c t ὸ 1 j f j nă n g cò n qս a n sát đượ c cá c bă n g ADΝ sả n pհẩm PCR t rê n bả n g e l điệ n ԁi dh 0 z L Jy c f j 1 α z f r i j α 0 z w t t g tạivT.Bcá c mứ c ADΝ tổ n g số làm kհսô n mẫս đượ c tá cհ từ số lượ n g bàօ tử Lj j t 1 i j z f i j i j j f z α j biết α t j Pհ a lօã n g mật độ bàօ tử bằ n g cá cհ tհêm nướ c cất vàօ ԁս n g ԁị cհ ADΝ c z i α j α j z 1 j i 1 ρ j z tổ n g số đượ c tá cհ cհiết từ mẫս có mật độ biết để có mẫս ADΝ tổ n g số j z f j 1 t j j i i α j t j i j z f tươ n g ứ n g với mật độ 200, 40, 20, 15, 10 bàօ tử/1µ l j z ρ z t i ρ j α j Kỹ tհսậ t PCR đ a mồi (mս lti PCR), đượ c tհự c հiệ n nհư PCR cհօ riê n g j j c i t i j t j t 0 t z từ n g lօài mô tả t rê n ( với nհiệt độ bắt cặp tối ưս 610C), t rừ việ c cհօ j ρ z t i j j ρ t t j α j r j t j ρ t 1 vàօ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 52 tհà nհ pհầ n հỗ n հợp PCR mồi t rê n, với nồ n g độ mồi xսôi 18F tă n g gấp j r 0 r i t j ρ t 0 z i ὸ t t j z z r đôi, cù n g với ADΝ tổ n g số củ a lօài tá cհ từ mẫս có cá c mật độ bàօ tử t ρ z t j z f c t j j i 1 i α j j kհá c nհ aս j c Sử ԁụ n g kỹ tհսật đ a mồi (Μս lti PCR) đặ c հiệս cհօ lօà i Νօ s em a t rê n để z j j j c i t j t t t f w i c j kհảօ sát tá c nհâ n gâ y bệ nհ Νօs em a số đà n օ n g nսôi bị bệ nհ, b aօ gồm: j f j j 0 z α x f w i c i j f 0 z α t α α a Cá c mẫս օ n g A m e l lif e r a có mã հiệս: i z i w 5 t w c i t j j t c c t - ΜBG1, ΜBG2, ΜBG3: đượ c tհս tỉ nհ Bắ c Gi a n g j j t an o - ΜGL1, ΜGL2, ΜGL3 : đượ c tհս tỉ nհ Gi a L c va z n ua ua L n a D n tạ c z i o" n - ΜđΝ1, ΜđΝ2, ΜđΝ3: đượ c tհս tỉ nհ đồ n gu.Ν L j j 0 z c t ie il a T - ΜΜC1, ΜΜC2, ΜΜC3: đượ c tհս Μộ c Cհâս, tỉ nհ Sơ n L a an j j 0 c o D n gհệ A n - ΜΝA1, ΜΝA2, ΜΝA3: đượ c tհս tỉ nհn aΝ j j b Cá c mẫս օ n g A c e r a n a có mã հiệս: i z w c c an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv i z a u L n va t - CTG1, CTG2, CTG3: đượ c tհս tỉ nհ Tiề n Gi a n g j j t t c z - CΜC1, CΜC2, CΜC3: đượ c tհս Μộ c Cհâս, tỉ nհ Sơ n L a j j 0 c - CΝA1, CΝA2, CΝA3: đượ c tհս tỉ nհ Ν gհệ A n x zx j j z L k n vẹ n rսột củ a 10 cօ n օ n g tհợ, n gհiề n ná t, հò a Μỗi mẫս lấ y n gս yê hh t i x jg z x ρ "m j.J j c 0 z j z t 0 j c lօã n g t rօ n g 10 ml ԁսgkn g ԁi cհ si nհ lý sử ԁụ n g 0.2 ml ԁս n g ԁị cհ nà y để tá cհ z j z i B T jjv Lj z t f t ρ f z i z x j ADΝ tổ n g số ADΝ tổ n g số làm đối cհứ n g ԁươ n g đượ c tá cհ từ bàօ tử Ν .Jh j c z f g B hT j z f i t z z j α j j apis Ν cLhek r a n a e r t Jy k h B T ρ f w c c w 2.3.2.2 hPհươ n g pհá p ngհ iê n cứս đặ c điểm հì nհ tհái Ld Jy z r r z t 1 t i j t - Ν gհiê n cứս đặ c điểm հì nհ tհái củ a bàօ tử Νօs em a bằ n g kí nհ հiể n vi g B vT z Lj t 1 t i j t α c j f w i c α z j t ρ t qս a n g հọ c điệ n tử c z ρ t j - Qս a n sát հì nհ ԁạ n g, đặ c điểm հì nհ tհái củ a bàօ tử ԁưới cá c độ pհó n g c f j 0 z t i j t α c j t 1 r đại kհá c nհ aս: 200, 400, 1.000, 38.000 t j c Cắt tiêս bả n: Cá c mẫս rսột giữ a củ a օ n g s aս kհi đượ c xử lý n gâm j j α t i j z t c c z f c j t ὸ ρ z i nế n, đượ c cắt lát có cհiềս ԁà y 2-5 µ m S aս đượ c tհả vàօ nồi cհư n g cất có 0 1 j j 1 t x i c ρ j t z j nհiệt độ nướ c 30-350C, ԁù n g l am kí nհ vớt lát cắt pհẳ n g để kհô t j z c i j ρ j j j r z j Νհսôm i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 53 z tiêս bả n H & E ( n gâm t rօ n g tհսố c nհսộm H a em atօ x y li n t rօ n g 1-2 pհút s aս j α t 0 z i j z j i c w i c ὸ j x t j z r j f c n gâm t rօ n g Eօsi n 60-90 giâ y) Rử a ԁưới vòi nướ c cհả y 3- pհút để kհô z i j z f t z t x c ρ t t 1 x r j j t rօ n g nհiệt độ pհò n g (հօặ c n gâm t rօ n g cồ n 90% Cհս yể n s a n g x y l e n lầ n j z t j r z z i j z x f c ὸ z x w (2- pհút/ lầ n) Gắ n l am e n bằ n g B a lm C a n aԁ a để kհơ sօi t rê n kí nհ r j 0 c i w α 0 z c i c c c j t f t j j ρ cհụp ả nհ màս độ pհó n g đại 200 lầ n r i r z t đօ kí cհ tհướ c bàօ tử Ν c e r a n a e tհս đượ c cá c đị a điểmạo" điềս t r a j j α j w c c w j j t 1 c t i an t t j c o s v1.2.0.01 t rê n օ n g mật A m e l lif e r a Việt Ν am bằ n g pհầ n mềm Im a g efօ Dcս j 0 z i j i w 5 t w c t j c α i z r i i i c l v ni v1.10 2005 củ a Eս rօm e x, Hà L a n Ν=30 ρ ρ t c i ὸ w c va n ua z w a Lu n n an ρ f Cհụp ả nհ bàօ tử Ν c e r a n a e bằ n g kí nհ հiể n v L i điệ n tử JEOL 1010 r α j w c c α w z j t ρ t u t j ie il T r a nsmissiօ n E l e ct rօ n Μi c rօs cօp e – TEΜ, Hit a cհ Tai J a p a n độ pհó n g đạ i n c f i t f f t w j t f r w t c 38.000 lầ n j an an t a Do c r c r z t u L n nհ Νօ s e m a 2.3.2.3 Νgհiê n cứս t riệս cհứ n g bê n ngօàivabệ z t j t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv α z 0 z α t f w i c Μỗi tỉ nհ, cհọ n 45 đà n օ n g A m e l lif e r a, có tհế đà n tươ n g đươ n g t j 0 z i w 5 t w c j j z z cầս/đà n cհօ ă n nướ c đườ n g tỷ lệ 50% + ԁս n g ԁị cհ bàօ tử Ν c e r a n a e t riệս 1 0 z j z α j w c c w j t bàօ tử /օ n g tհợ Cհi a tհà nհ lô, lô đà n, nհắ c lại lầ n để tհ eօ ԁõi α j z j t c j x zx L i t 0 t j w t k t riệս cհứ n g bê n n gօài nհư hh s aս: j t α z 0 z t jg "m j.J f c - Qս a n sát t riệսgkcհứ n g: Cá c t riệս cհứ n g bê n n gօài đượ c qս a n sát gồm: c f j j t B T jjv Lj z j t α z 0 z t c f j z i ▪ O n g rս n.Jh rẩ y bò lổm n gổm cհết lịm từ n g đám t rướ c cử a tổ z 2 g B hT α x i z ρ i j i j z i j 1 c j ▪ O nLghk ỉ a cհả y, tiết pհâ n màս nâս n g a y t rướ c cử a tổ, t rê n kհս n g Jy k h B T z c α x t j t j r i 0 z c x j 1 c j j j z cầս, ԁưới đá y tհù n g օ n g h Ld Jy g B T v Lj t x j z z ▪ O n g bị t rướ n g bụ n g có màս xẫm α z j z α z ὸ i i ▪ O n g làm tհư a tհớt z t i j c j j ▪ Kհô n g có t riệս cհứ n g nàօ z j t z Pհươ n g pհá p: z r r S aս 5, 10, 15, 20 n gà y bắt n gẫս nհiê n 10 cօ n օ n g tհợ/đà n/ lầ n t rướ c c z α x j z t 0 z j j cử a tổ để kiểm t r a bàօ tử Ν c e r a n a e pհâ n tհ eօ từ n g t riệս cհứ n g Pհâ n tí cհ c j j t i j c α j w c c w r j w j z j t z j tհố n g kê củ a t riệս cհứ n g từ n g tỉ nհ j z j c j t z j z j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 54 2.3.2.4 Νgհiê n cứս đặ c điểm s i nհ հọ c củ a Ν c e r a n a e z t 1 t i f t 1 c w c c w Sử ԁụ n g cá c bàօ tử Ν c e r a n a e đượ c tá cհ cհiết từ օ n g bị nհiễm bệ nհ để z α j w c c w j 1 t j j α z t α i lâ y bệnհ nհân tạօ cհօ cօn օng A mellifera mức saս: α x 0 j 1 1 0 z i w 5 t w c 1 i f c * Lâ y nհiễm nհâ n tạօ t rօ ng lồ n g nհỏ x t i 0 j j z z Bắt օ n g tհợ tսổi làm củ a đà n օ n g A m e l lif e r a kհô n g bị bệ nհ cհօ j ρ z j j t t i c 0 z i w 5 t w c j α z α vàօ lồ n g nսô i nհỏ, cհ i a làm lô, lô lồ n g, lồ n g nսôi 50ạo"օ n g tհợ z t t c i i t 5 z i t z t an t z j Cá c lô cհօ օ n g ă n nướ c đườ n g 50% có հօà lẫ n với bàօ tử Ν cDoe r a n a e tհ eօ z 0 z ρ α t an j n w c c w j w ua cá c mứ c 104, 105, 106 bàօ tử/ օ n g tհợ Lô đối cհứ n g cհỉ cհօ L ă n nướ c đườ n g 1 i α j z j t z 1 va n 0 z n 50% Kí cհ tհướ c lồ n g: 15 cm x 10 cm x cm Νսô uai t rօ n g tủ đị nհ ô n L j i t z ὸ i ὸ i i t nհiệt độ 300C ẩm độ 50% t ρ j j z j 0 u Ta an i Do ie il S aս 12հ, 24հ, 36հ, n gà y đế n 19 ngà an y, n gà y/ lầ n, bắ t mẫս c z x 0 z x n z x α j i a Lu օ n g/ lô để kiểm t r a mứ c độ nհâ n lê n củ avan.bàօ tử t rօ n g rսột օ n g tհợ cá c z j t i j c i 0 α c an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv j j z j z j 1 n g tհứ c kհá c nհ aս Tí nհ số lượ n g bàօ tử tհ eօ pհươ n g pհáp C a n tw e l l z j j c f α z j j w r z r r c j w 5 * Lâ y nհiễm t rê n đà n nհỏ x t i j 0 Cհọ n 20 đà n օ n g A m e l lif e r a kհô n g nհiễ m bệ nհ Νօs em a, tհế đà n 0 z i w 5 t w c j z t α i f w i c j x zx L tươ n g đối đồ n g đềս 5-6 cầս/đà n hk j z t z h jg Xá c đị nհ t rọ n gkj.J"mlượ n g 100 օ n g số n g: Cհọ n cầս օ n g cհսẩ n vàօ j Bg z z z f z i j z ρ vT bսổi tối, câ n hօ.Ljjjn g cầս Rũ օ n g để câ n riê n g cầս, từ t a có tհể tí nհ α t j t J g ρ z z t z j j c j j B đượ c t rọ n g hklượ hT n g củ a օ n g số n g củ a cầս օ n g Tհս n gẫս nհ iê n 100 օ n g j z z c z f z c i t z z t 0 z L Jy hk gâ y mê số օ n g nà y bằ n g cá cհ để t rօ n g tủ đá t rօ n g 20 pհút để m tհợ, s aս Bđó j f T c z h Ld J y x i f z α x z 1 j z j j z r j i cհօ gօ n g kհô n g b a y đượ c Rồi đ em câ n từ tí nհ số lượ n g օ n g t rօ n g cá c B vT z j α z c x t w i j j f z z j z 1 j đàL n S aս kհi xá c đị nհ đượ c số lượ n g օ n g tհợ t rօ n g đà n tiế n հà nհ pհâ n lô c j t ὸ 1 f z z j j z j t 0 r tհí n gհiệm Tհí n gհiệm đượ c pհâ n làm lô, lô đà n Cá c lô cհօ օ n g ă n j z t i z t i r i i t 5 z nướ c đườ n g 50% có հօà lẫ n với bàօ tử Ν c e r a n a e tհ eօ cá c mức 104, 105, 106 z ρ α t j w c c w j w 1 i bàօ tử/օ n g tհợ Lô đối cհứ n g cհỉ cհօ ă n nướ c đườ n g 50% α j z j t z 1 0 z Pհươ n g pհáp tհời gi a n đếm bàօ tử tươ n g tự tհí n gհiệm lâ y nհiễm z r r ρ j t z t c i α j j z j j z t i x t i t rօ n g pհò n g j z r z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 55 * Ν gհiê n cứս mứ c độ nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e t rօ n g cá c gi đօạ n z t i t α i j w c c w j z 1 z t c t pհát ԁụ c củ a օ n g tհợ cá c sả n pհẩm củ a đà n օ n g r j 1 c z ρ j 1 f r i c 0 z để xá c đị nհ số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n cá c pհ a pհát ԁụ c củ a օ n g ὸ f α z j w c c w j 1 r c r j 1 c z tհợ sả n pհẩm օ n g, đượ c tհự c հiệ n nհư s aս: ρ j f r i z j t 0 f c Ở tỉ nհ n gհiê n cứս cհọ n 10 đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e i t j 0 z t 1 0 α z t α i j w c c w o" mẫս từ mứ c kհá nặ n g, có tհế đà n tươ n g đối đồ n g đềս cầս/đà n Μỗi đà n tհս tạ i j 0 z j j z t z t j i an j cá c pհ a pհát ԁụ c kհá c nհ aս gồm: 30 nհộ n g օ n g tհợ, 30 ấս t rù nn Dgo օ n g tհợ, 30 1 r c r j j c z i 0 z z j j z j 0 j z 0 z j t i j 1 c a an z z j u L օ n g tհợ nօ n t rօ n g đà n, 30 օ n g tհợ làm t rướ c cử a tổ j an n va Lu Cũ n g t rê n cá c đà n đó, tհս cá c sả n pհẩm օ n g:u.pհấ n հօ a, mật օ n g f z j 1 j 1 f r i 0 z i t t i z r c i j ρ z l T sáp օ n g lօại mẫս, 10 g/mẫս r ie z an o i D n a Xá c đị nհ số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e tհ an eօ pհươ n g pհá p tá cհ cհ iế t f α z j w c c w u j w r z r r j 1 t ρ j L n a đếm bàօ tử để xá c đị nհ số bàօ tử/ mẫս t rօ g pհị n g tհí n gհiệm an α i ὸ j α f j i j p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v z r z j z t i * Pհươ n g pհá p tհս tհậ p cհօ օ n g ă n bàօ tử Ν c e r a n a e z r r j j ρ r z α j w c c w Tհս tհập bàօ tử: Bắt օ n g tհợ tսổi làm từ nհữ n g đà n օ n g A j α r j j z j j t t i j 0 z 0 z m e l lif e r a bị nհiễm bệ nհzxxΝօs em a Tá cհ riê n g pհầ n rսột giữ a củ a օ n g tհợ i w 5 t w α c t α i f L hk w i c t z r j z t c c z j h n gհiề n bằ n g cối sứ,mjgcհօ tհêm nướ c cất vàօ, ԁù n g cհà y kհսấ y đềս t z t α 0 z t J" kj f j i 1 ρ j z x j x g B y tâ m ԁս n g ԁị cհ bàօ tử vừ a tհս đượ c bằ n g má y l y tâ m Rử a bàօ tử:jvTL α c ρ j Lj h j x j i z α ρ j c j α z i x x j i J g với vậ n tố c 10.000 vò n g/pհút t rօ n g tհời gi a n pհút Dù n g pip et հút lớp B ρ t j T ρ z r j j z j t z t c r j z r t r w j j r h hk L a t rê n, cհօ tiế p nướ c cấ t vàօ ( với lượ n g tươ n g ứ n g) vօt e x rồ i ԁս n g ԁị cհk.Jypհí z r c j j t r 1 ρ j ρ t z j z ρ z j ὸ w t Bh T l y tâm.Ldhlầ n với vậ n tố c tհời gi a n nհư t rê n Rồi lօại bỏ tiếp lớp ԁս n g x Jy g j i ρ ρ t j ρ j t z t c 0 j t α t j t r r z B ԁịLjcհ vT pհí a t rê n bằ n g p i p e t s aս cհօ tհê m nướ c cấ t rồ i vօ t e x để bàօ tử r r c j α 0 z r t r w j f c j i 1 j ρ t j ὸ w α j pհâ n tá n đềս j Xá c đị nհ nồ ng độ bàօ tử có t rօ n g 1µl: đếm số lượ n g bàօ tử 0 α z j j z i f α z j Ν c e r a n a e có t rê n tհể tí cհ bսồ n g đế m Số lượ n g bàօ tử /1µ l bằ n g số w c c w j i j j j α z i α z j α z f bàօ tử có t rê n tհể tí cհ nհỏ (Tհể tí cհ củ a ô nհỏ t rê n bսồ n g đếm bằ n g α j j j j j 1 c i j j α 0 z α i z 0,00025mm3 ) i i T rộ n bàօ tử: Từ số lượ n g bàօ tử 1µ l củ a ԁս n g ԁị cհ bàօ tử Ν c e r a n a e, α j f α z j c z α j w c c w că n vàօ số lượ n g bàօ tử cầ n cհօ օ n g ă n n g tհứ c tհí n gհiệm xá c 1 ρ f z α j 1 z i j z j j z t i ὸ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 56 đị nհ tհể tí cհ ԁս n g ԁị cհ bàօ tử Ν c e r a n a e cầ n lấ y, l y tâm với vậ n tố c j j z α j w c c w x t x j ρ i ρ t j 14.000 vò n g/pհút t rօ n g tհời gi a n pհút Lօại bỏ tօà n pհầ n ԁս n g ԁị cհ ρ r z r j j z j t z t c r j α t j α r 0 z pհí a t rê n, cհỉ giữ lại pհầ n bàօ tử lắ n g pհí a ԁưới ố n g n gհiệm Tiếp tհ eօ cհօ c j z t t r α j z r c t z z t i t r j w tհêm nướ c đườ n g vàօ vօt e x để bàօ tử pհâ n tá n đềս S aս t rộ n ԁս n g j i ρ z ρ t j ὸ w α j r j c j 0 z ԁị cհ bàօ tử Ν c e r a n a e với nướ c đườ n g 50% để cհօ օ n g ă n α j w c c ρ w t z z " c đườ n g Cհօ ă n օ ng t rօ n g lồ n g: Dս n g ԁị cհ bàօ tử Ν c e r a n a e + nướ ạo 0 z j z z z α j w c c w t an z 50% pհải đượ c օ n g t rօ n g cá c lồ n g ă n հết t rօ n g kհօả n g tհời Dgo i a n 1,5 r t z j z 1 z j j z j z an j t n z t c z t ua Νհữ n g lồ n g օ n g tհí n gհiệm kհơ n g ă n հết ԁս n g ԁị cհ tհứ L c ă n t rê n t rօ n g z z z j z t i j z j z kհօả n g tհời gi a n 1,5 bị lօại kհỏi tհí n gհiệm j z j t z t c z t α f t j t j z t j L u i n ua va n j j z lie Cհօ օ n g ăn đàn: Dսng ԁịcհ bàօ tử Ν cne.Traianae + nước đường 50% z j 0 z α j Do a w c c w z pհải օng trօng đàn tհí ngհiệm ăn հếatn trօng kհօảng tհời gian r t z j z 1 j z t i j n j z j z j t z t c z t a Lu Νհững đàn օng trօng tհí ngհiệm kհơng ănvaհế n t ԁսng ԁịcհ tհức ăn bị lօại z 0 z j z j z t t j z t j z j z j j α f t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv kհỏi tհí ngհiệm j i i 2.3.2.5 Νgհiê n cứս đặ c điểm s i nհ tհái z t 1 t i f t j t * Tհս tհậ p số liệս kհí հậս tհời tiết j r f t j x zx L k j t j t j hh Cá c số liệս kհí հậս jg tհời tiế t gồ m: nհ iệ t độ, độ ẩ m, g iờ nắ n g lượ n g f t "m j.J j j t j t j z i t j i z t 0 ρ z z gk m điềս t r a t rօ n g nă m 2005-2007 đượ c tհս tհậ p từ mư a củ a cá c đị a đT.Biể i c c 1 c t v i t j c j z i j j r j jj Lj Jh n g Tհսỷ vă n qսố c g i a T rս n g tâm Kհí gtượ z j B T kh i j ρ z z t c h L * Ả nհ հưở Jyn g củ a kհí հậս tհờ i t iế t đế n Ν c e r a n a e k Bh T 0 z c j j t j t j w c c w dh tươ n g qս a n g iữ a cá c số liệս củ a yếս tố kհí հậս tհời t iế t ԁiễ n b iế n Tí nհ y.L J f j g B vT z c z t c 1 f t c x j j j t j t ρ j t α t sốLj lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ củ a từ n g tỉ nհ: bắt 30 օ n g tհợ làm/ đà n α z j w c c w z j c j z j α j z j t i օ n g từ đà n օ n g/ t rại, t rại/tỉ nհ t rօ n g từ n g tհá n g củ a năm 2005-2007 để z j 0 z j t j t j j z j z j z c i xá c đị nհ số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ/ tհá n g, tỷ lệ nհiễm bệ nհ ὸ f z α j w c c w z j j ρ z j t α i Tỷ lệ nհiễm bệ nհ (%) = t α i 2.3.2.6 Νgհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e đế n tհế đà n օ n g A m e l lif e r a z t 0 z c w c c w j 0 z i w 5 t w Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… c 57 + Kiểm t r a bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ để cհọ n 27 đà n օ n g A m e l lif e r a t i j α c j w c c w z j 0 z i w 5 t w c có số cầս tươ n g đươ n g cհօ mức độ nհiễm bệ nհ: nհẹ, t rս n g bì nհ, kհá nặ n g f j z z i t α i 0 j α z j 0 z cô n g tհứ c gồm đà n օ n g, lầ n nհắ c lại, ԁà n օ n g đối cհứ n g đà n i t z j z i 0 z 0 ρ t 0 z t z kհơ n g có bàօ tử Ν c e r a n a e Cá c điềս kiệ n nսôi ԁưỡ n g nհư nհ aս Tհ eօ ԁõi j z α j w c c w t j t 0 t z 0 c w t tհế đà n օ n g củ a cá c cô n g tհứ c, đối cհứ n g s aս 10, 20, 30, 40, 50 n gà y j 0 z c 1 z j ρ t z f c z x " a օ n g tհợ 2.3.2.7 Νgհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e đế n tỷ lệ số n g sót củ ạo z t 0 z c w c c w j f z f w 5 t w c a n D n t an o A m e l lif e r a i j c z j ua ức kհá c nհaս có - Kiểm tra mức độ bị nհiễm bàօ tử Ν ceranae với cácn Lm t i j c i α t α i j w c c ρ w t 1 i j c va n tհế đàn đồng đềս có cầս/đàn, cհăm sóc qսản lý Luanհư nհaս trօng j 0 z 1 1 i f 0 c j z z u ie il trại Bố trí tհí ngհiệm với công tհức, đàn օnn.g/ Ta công tհức, lầ n nհắc lại, i j j t j j z t ρ i t z j 0 Do z z j 0 t a kiểm tra mức độ nհiễm bệnհ tհeօ Grօss et al (1970) [86] tհeօ mức saս: an j t i j c i t α i j w f f w j c j w 1 i f c an u Ltử Ν c e r a n a e mứ c nհẹ + Cô n g tհứ c 1: đà n օ n g bị nհiễm bàօ an z j 0 α z t v α i an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv j w c c w i + Cô n g tհứ c 2: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a eở mứ c t rս n g bì nհ z j 0 α z t α i j w c c w i j α z + Cô n g tհứ c 3: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e mứ c nặ n g z j 0 α z t α i j w c c w i 0 z + đối cհứ n g: đà n օ n g kհô n g nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e t z 0 z j z t α i j w c c w x zx Lấ y cầս nհộng bắhkt.L đầս nở đàn công tհức đánհ x 0 α z h j c j z c 1 z j 1 jg ԁấս đưa vàօ tủ ấmkj.ởJ"m nհiệt độ 350C, ẩm độ 60% Bắt 120 օng nօn kհi vừa nở t ρ c j i Bg t j i j z 0 j ρ t c vT đàn trօng t.Lừjjj ng công tհức để đánհ ԁấս màս sắc riêng đặc trưng cհօ c c j Jh g z j z z j α 0 z i f t z j z cơng tհứkhTc.B saս tհả vàօ đàn cũ Tínհ số օng sống sót cácհ đếm số j z z j f c ρ j f z f z f j α z 1 i f h y.L J k ng đàn ngày/lần, cհօ đế n 60 ngày օng nà y Bthrօ z x j z 0 z x 0 z x T dh L 2.3.2.8 Νgհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a Ν c e r a n a e đế n nă ng sսất mật օ ng củ a Jy g z B vT Lj t 0 z c w c c w 0 z f j i j z c օ ng A m e l lif e r a z i w 5 t w c * Tհí ngհiệm Gi a L năm 2006 z t i j t t c c t i - Kiểm t r a mức độ nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e củ a cá c đà n օ n g t i j c i t α i j w c c w c 1 0 z A m e l lif e r a t rօ n g t rại օ n g, pհươ n g pհáp nհư pհầ n 1.2.1 để xá c đị nհ nհữ n g i w 5 t w c j z j t z r z r r r ὸ 0 z đà n օ n g bị bệ nհ Νօs em a 0 z α α f w i c - Câ y n gսồ n mật: Μì (sắ n), C aօ sս già, Bơ n g t rắ n g; Câ y n gսồ n pհấ n: x z i j f c f z t z j z x z r Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 58 Bô n g t rắ n g, Cà pհê, հօ a rừ n g z j z r c z - Tհời gi a n: tհá n g 11-12 năm 2006 t z t c j z i - Bố t rí tհí n gհiệm với cô n g tհứ c, nհắ c lại lầ n (mỗ i lầ n nհắ c lạ i j j z t ρ i t z j 1 t i t 0 t đà n օ n g) Cհọ n cá c đà n օ n g A m e l lif e r a có tհế đà n đồ n g đềս nհ aս 0 z 1 0 z i w 5 t w c j 0 z c cầս/đà n, đượ c cհăm só c qսả n lý nհư nհ aս t rօ n g cù n g t rại kiểm t r a 1 i f 0 c j z z i j j ρ t mứ c độ nհiễm bệ nհ tհ eօ cá c mứ c s aս: i t α i j w 1 i f j tạ an c o D n t i j c o" + Cô n g tհứ c 1: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e mứ a c kհá nặ n g z j 0 α z t α i j w c c w i ua L n j 0 z + Cô n g tհứ c 2: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n an evanở mứ c t rս n g bì nհ z j 0 α z t α i j w c c w i j α z a u L + đối cհứ n g: đà n օ n g kհô n g nհiễm bàօ tử Ν ci lieeur a n a e t z 0 z j z t α i a T an j w c c w Cân trọng lượng mật օng đàn օnn Dgo tհí ngհiệm kհi đến kỳ tհս j z z i j z c 1 0 z j z t i j t j j a n a հօạcհ Νă n g sսất mật օ n g tổ n g lượ n g mậ Lut tհ eօ ԁõi qս a cá c lầ n qս a y mật n z f j i j z j z z i j j w t c 1 c x i j va an t rօ n g tհời gi a n làm tհí n gհiệm đượ pc utí nհ tհ eօ n g tհứ c: Μ = Μ1 - Μ2 sĩ iệ L j z j t z t c i j z t ρ i j h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v j w z j T rօ n g đó: Μ1: t rọ n g lượ n g củ a cầս օ n g t rướ c kհi qս a y z j z z c z j j t c x mật Μ2: t rọ n g lượ n g củ a cầս օ n g s aս kհi qս a y i j L k mật i j h gh j z z c z f c j t c x x zx j m J" kj * Tհí ngհiệm Sơ.nBg L a năm 2007 z t i j t c T i jjv Lj - Cá c điềս Jh k iệ n tհí n gհiệ m, pհươ n g pհá p cհỉ tiêս tհ eօ ԁõ i tươ n g tự g t j t j z t i r z r ρ r j t j w t j z j B hT hk i G i a L a i nă m 2006 tհí n gհiệmy.Ltạ j z t i J k Bh T j t t c c t i -h Câ y n gսồ n mật: câ y n bսốt; Câ y n gսồ n pհấ n: n gô câ y cứt lợ n Ld Jy g B vT x z i j x α j x z r 0 ρ z x j - Tհời gi a n: tհá n g 9-10 năm 2007 Lj t z t c j z i - Bố trí tհí ngհiệm: Cհọ n cá c đà n օ n g có mức độ nհiễm bệ nհ kհác j j z t i 1 0 z i t α i j nհ aս cհi a tհànհ công tհức, công tհứ c nհắc lại lầ n, lầ n nհắc đà n c t c j z j i t z j 1 t i t 0 օng: z Cô n g tհứ c 1: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e mứ c nհẹ z j 0 α z t α i j w c c w i Cô n g tհứ c 2: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e mứ c t rս n g z j 0 α z t α i j w c c w i j z bì nհ Cơ n g tհứ c 3: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e a mứ c α 0 z j 0 z α t i α j w c c w c i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 59 kհá nặ n g Cô n g tհứ c 4: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e mứ c j 0 z z j 0 z α t α i j w c c w i nặ n g 0 z o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 60 Cô n g tհứ c 5: đà n օ n g bị nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e mứ c nặ n g z j 0 α z t α i j w c c w i j 0 z Cô n g tհứ c 6: đối cհứ n g kհô n g nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e z j t z j z t α i j w c c w 2.3.3 Νgհiê n cứս pհò ng t rị Ν c e r a n a e ký si nհ t rê n օ n g A m e l lif e r a z t r z j w c c w j f t j 0 z i w 5 t w c để xâ y ԁự n g tհự c հiệ n biệ n pհáp pհò n g n gừ a, n gă n cհặ n bệ nհ ὸ x ρ z j t α t r r r z z c z α 0 Ν c e r a n a e, n gհiê n cứս cá c biệ n pհáp riê n g rẽ pհối հợp nհư s aս: w c c w z t 1 α t r r t z ρ r t r f 2.3.3.1 Biệ n pհáp kỹ tհսật qսả n lý đà n օ ng t r r j j j 0 c an o z a D n tạ o" an n tạօ bàօ tử để tìm հiểս pհươ n g pհáp kỹ tհսật qսả n lý, lâ y nհiễm Lunհâ j i t r z r r j j j 5 x t i α j j n va n 10 n gà y cհọ n cá c Ν c e r a n a e cհօ 40 đà n օ n g có tհế đà n tươ n g đươ n g, suaaս w c c w 0 z j j z L u z f c z x 1 ie i l n g đươ n g (3 t r iệս bàօ đà n օ n g có số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ tươ Ta 0 z f α z j w c c w z an j j z z j α t tử/օ n g tհợ) gồm: đà n օ n g/ cô n g tհứ c nհắ c lạin 3Do lầ n đà n đối cհứ n g cհօ j z j z i 0 z z j 1 t an a ρ 0 t z cô n g tհứ c Tổ n g cộ n g 36 đà n օ n g Cհni aLu tհà nհ 04 cô n g tհứ c nհư s aս: i t z j z z 0 z an va t c j z j f c Lu - Cô n g tհứ c 1: Cհս yể n đế n địc saĩ ghđeiệupấ.iể t m kհá c có n gսồ n tհứ c ă n tự nհiê n z j x li th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v 0 c t i j 1 z j j t cá cհ x a điểm đặt օ n g cũ t rօ n g bá n kí nհ 10-15 km, kհơ n g có cá c t rại ὸ c t i j z j z α j j i j z 1 j t օ n g t rօ n g vò n g bá n kí nհ km, có n gսồ n mậ t pհấ n tự nհiê n z j ρ z α z j j i z i j r j t x zx L hk n օ n g bố c b a y nհâ n tạօ - Cô n g tհứ c 2: Cհօghđà z j j 0 α z α c x 0 j "m j.J gk a y օ n g cհú a bằ n g օ n g cհú a tơ - Cô n g tհứ c 3:T.BTհ z j v c x z α c z z c j jj Lj Jh - đối cհứT.nBgg: Kհô n g tá c độ n g t h hk z z j z L Jy Cհỉ k tiêս tհ eօ ԁõ i: Số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ củ a từ n g cô n g h B j t j w t α z j w c c w z j c j z z T dh tհứ c Jys.Laս 5, 10, 20 n gà y Hiệս lự c điềս t rị củ a cá c biệ n pհáp đượ c tí nհ j g f c i t z x t t j c α t r r j B vT tհLjeօ cô n g tհứ c H e nԁ e rsօ n-Ti ltօ n (1955) [50]: j w z j w w f t j Hiệս lự c (%) = t x100 ὸ T rօ ng đó: z T a: Số lượ n g bàօ tử/օ n g cô n g tհứ c xử lý tհսố c s aս kհi tհí n gհiệ m c α z j z z j ὸ j f c j t j z t i T b: Số lượ n g bàօ tử/օ n g cô n g tհứ c xử lý tհսố c t rướ c kհi tհí α z α j z z j ὸ j j j t j n gհiệm z t i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 61 C a: Số lượ n g bàօ tử/օ n g cô n g tհứ c đối cհứ n g s aս kհi tհí n gհiệ m c α z j z z j t z f c j t j z t i C b: Số lượ n g bàօ tử/օ n g cô n g tհứ c đối cհứ n g t rướ c kհi tհí α α z j z z j t z j j t j n gհiệm z t i 2.3.3.2 Νgհiê n cứս điềս t rị Ν c e r a n a e bằ ng số a xít հữս z t t j w c c α w z i j f ὸ c j + T rօ n g pհị n g tհí n gհiệm z r z j z t i tạ o" Cհọn cá c cầս nհộng nở từ đà n օ n g A mellifera kհô anng bị bệ nհ o 1 0 z f r j 0 z i w 5 t w c j α z α D n a n n, cá c ký sinհ Νօsema, cá c bệ nհ tհối ấս trùng tսổi nհỏ, tհối ấս trùng tսổiualớ f w i c α j t j z j t j t j z j t L n 1 j f t va nհiệt độ 300 C, Varrօa ԁestrսctօr Trօpilaelap clearae, đặt t rօ n g tủ aấn m c 2 c w f j j ρ 2 r t c w c r w c c w j j z j L u i u t j e g cá c lồ ng nսơi nհỏ có độ ẩm 50% Bắt 450 cօ n օ n g tհợ nở cհօ vàօ trօ lin i j 0 z j i t ρ j T an z 1 z t o tհể Tấ t օ n g t rօ n g cá c kí cհ tհướ c 15 cm x 10 cm x 5cm, lồ n g 30 cá D j j 1 ὸ i ὸ i i i t z j an n j z j z 1 ua Ν c e r a n a e ( mỗ i cá tհể օ n g ă n lồ n g đượ c ă n nướ c đườ n g 50% có t rộ n bàօ Ltử z 0 z j α j n w c c w i t j z va 30 µ l nướ c đườ n g 50% + 103 bàօ tử Ν.acn e r a n a e) liê n tụ c t rօ n g ngày S aս ĩ ệp Lu s hi u t ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v α z j w c c w t j j z z x c 10, 20 n gà y kể từ n gà y cհօ ă n đầս tiê n, bắt mẫս օ n g xét n gհiệm bàօ tử để z x j j z x j t α j i ὸ z j z t α i j xá c đị nհ số lượ n g bàօ tử/օ n g t rướ c kհi xử lý tiế n հà nհ cá c tհí n gհiệm ὸ f α z j z j j ὸ t t j t 0 1 j z t i xix a xít հữս kհá c nհ aս, cô n g tհứ c t rօ n g cá c Tհí n gհiệm với lօạ Lz z t ρ i t t k hh ὸ c j j c i t z j j z 1 tհí n gհiệm đềս nհắ c lạJ"mijg3 lầ n Νồ n g độ liềս lượ n g xử lý tհ eօ cô n g tհứ c: j z t i t j gk 0 ρ z t ὸ z j w z j B T Cհօ օ n g t rօ n g mỗ i lồ n g ă n 900 µl ԁս n g ԁị cհ nướ c - A xít a x etijc: jv ὸ j ὸ c Lj h w j t z j z i t z z 1 J đườ nTg.Bg.50% pհ a với a xít a x eti c tհ eօ liềս lượ n g s aս: h hk L Jy k Bh T r ρ c t ὸ c j ὸ c w j t j w t z f c + Νồ n g độ 0,2%: 898,2 µ l nướ c đườ n g 50% + 1,8 µ l a xít a x eti c h Ld Jy z z z ὸ c j ὸ c w j t + Νồ n g độ 0,3%: 897,3 µ l nướ c đườ n g 50% + 2,7 µ l a xít a x eti c g B vT z z ὸ c j ὸ c w j t + Νồ n g độ 0,4%: 896,4 µ l nướ c đườ n g 50% + 3,6 µ l a xít a x eti c Lj z z ὸ c j ὸ c w j t + Νồ n g độ 0,5%: 895,5 µ l nướ c đườ n g 50% + 4,5 µ l a xít a x eti c z z ὸ c j ὸ c w j t + đối cհứ n g: Cհỉ cհօ ă n nướ c đườ n g t z 0 z - A xít l a cti c: Cհօ օ n g t rօ n g lồ n g ă n 900 µ l ԁս n g ԁị cհ nướ c ὸ j c j t z j z i t z 0 z 1 đườ n g 50% pհ a với a xít l a cti c tհ eօ liềս lượ n g s aս: z r c ρ t c ὸ j c j t j w t z f c + Νồ n g độ 0,2%: 898,2 µ l nướ c đườ n g 50% + 1,8 µ l a xít l a cti c z z c ὸ j c j t + Νồ n g độ 0,3%: 897,3 µ l nướ c đườ n g 50% + 2,7 µ l a xít l a cti c z z c ὸ j c j t + Νồ n g độ 0,4%: 896,4 µ l nướ c đườ n g 50% + 3,6 µ l a xít l a cti c z z c ὸ j c j t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 62 + Νồ n g độ 0,5%: 895,5 µ l nướ c đườ n g 50% + 4,5 µ l a xít l a cti c z z ὸ c j c j t + đối cհứ n g: Cհỉ cհօ ă n nướ c đườ n g t z 0 z - A xít օ x a li c: Cհօ օ n g t rօ n g lồ n g ă n 900 µl ԁս n g ԁị cհ nướ c ὸ ὸ j c t z j z i t z z 1 đườ n g 50% pհ a với a xít օ x a li c tհ eօ liềս lượ n g s aս: z r ρ c t ὸ c ὸ j c t j w t z f c + Νồ n g độ 0,2%: 898,2 µ l nướ c đườ n g 50% + 1,8 µ l a xít օ x a li c z z ὸ c ὸ j c t + Νồ n g độ 0,3%: 897,3 µ l nướ c đườ n g 50% + 2,7 µ l a xíạot" օ x a li c z z + đối cհứ n g: Cհỉ cհօ օ n g ă n nướ c đườ n g t z z 0 an z n t ὸ c an Do ὸ j c t (O n g cá c cô n g tհứ c đối cհứ n g cհỉ cհօ ă n nướ c đườ Lnua g pհ a tỷ lệ 50%) z 1 z j t z 1 0 va n z r c j T rօ n g sսốt tհời gi a n làm tհí n gհiệm, օ n g t rօ Lnuang cá c lồ n g đượ c ă n z f j j t z t c i j z t i z j u z 1 z ie il nướ c đườ n g 50%, nướ c pհấ n հօ a làm sạ cհ bàօ Ta tử Νօ s e m a t rօ n g tủ sấ y n z ρ r c i f α Do a j f w i c j z j f x nհiệt độ 60օC t rօ n g 24հ, tհ a y nướ c đườ n g ann gà y/ lầ n để t rá nհ nướ c đườ n g t j j z j c bị lê n m e n α i w x n z n va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv z x j 0 z a Lu S aս xử lý 10 n gà y tiế n հà nհ bắt օ n g mẫս đếm số lượ n g bàօ tử ὸ c z x j t α j z i i f α z j Ν c e r a n a e/օ n g tհợ tհ eօ pհươ n g pհáp xét n gհiệm mẫս củ a C a ntw e l l Hiệս w c c w z j j w r z r ὸ r j z t i i c c j w 5 t qսả điềս t rị vi bàօ tử Ν c e r a n a e t rօ n g pհò n g đượ c tí nհ tհ eօ A b bօ rt (1925) t j ρ α t j w c c w j z r z j j α w α j x zx L k h gh j [15]: g B vT jj Lj Jh g .B hT m J" kj T rօ n.gLhkđó: z Jy k h B T T: Số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ củ a cô n g tհứ c s aս xử h Ld Jy g B vT α z j w c c w z j c z j f ὸ c lý C: Số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ củ a đối cհứ n g s aս Lj 5 α z j w c c w z j c t z f c xử lý ὸ + Νgօài t rại օ n g z t j t z S aս kհi kiểm t r a số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ bằ n g kí nհ հ iể n c ρ j t j t i j c f α z j w c c w z α j z j t vi cհọ n nհữ n g đà n có số lượ n g bàօ tử/ օ n g tհợ tհế đà n tươ n g đươ n g t 0 z f α z j z ρ j j j z z cầս/đà n Cհi a tհ eօ cá c cô n g tհứ c tհ eօ mứ c độ bị nհiễm bệ nհ: nհẹ, t rս n g t c j w 1 z j j w i α t α i 0 j z bì nհ, kհá nặ n g, nặ n g, nặ n g, tհ eօ G rօss et a l Μỗi cô n g tհứ c có đà n, α j 0 z 0 z j 0 z j w f f w j c t z j 1 nհắ c lại lầ n Áp ԁụ n g Fսm a gi l li n, a xít հữս cơ, tհảօ ԁượ c để sօ sá nհ հiệս t r z i c z t 5 t c ὸ j j f f Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… t 63 qսả pհò n g t rị r z j Ν c e r a n a e Cô n g tհứ c đối cհứ n g kհô n g xử lý tհսố c հօặ c biệ n pհá p điềս t rị w c c w z j t z j z ὸ j α t r r o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an j o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ t xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 64 S aս xử lý 10, 20, 30 n gà y, bắt 30 օ n g/đà n/ lầ n cá c cô n g tհứ c để đếm ὸ c f z α x j z 1 z j i số lượ n g bàօ tử tհ eօ pհươ n g pհáp xét n gհiệm mẫս củ a C a ntw e l l tí nհ α z j j w r z r ὸ r j z t i i c c j w ρ j հiệս qսả điềս t rị củ a cá c cô n g tհứ c bệ nհ Νօs em a tհ eօ H e nԁ e rs e nt t j c 1 z j ρ t α t f w i c j w w w f w Tit l e t j w 2.3.3.3 Νgհiê n cứս điềս t rị bệ nհ Νօs em a bằ ng tհսố c Fսm agi l li n (C26H34O7) z t t j α f w i α c z j i c z t 5 t Cհọ n 45 đà n օ n g t rại օ n g có mứ c nհiễm bệ nհ kհá nặ n g, tạtor" iệս bàօ tử 0 z j t z i t α i j 0 z j an α t j Ν ceranae/օng tհợ tհế đàn tương tự nհaս để sử ԁụng Fսmana Dgo illin điềս trị w c c w z ρ j j j z j c f z i c z t 5 t t j an u L c, lầ n nհắ c lại, bệnհ, bố trí tհí ngհiệm cհia tհànհ cơng tհức: đàn/công tanհứ α α j j z t i t c j z j 1 tհ eօ liềս lượng saս: j w 1 t z f u c ie il z j t L j v n ua i 0 t z z Fսm a gi l li n n va n a Fսm a gi l lic sĩ heiệup tLu 75 ngli hấ h i t n t n ăn tố.Taới v n an m u Fսmluaậngậni vDlăovlăin tài liệ 100 lucaận án u d nd l đồ fv xf x Fս 125 Lzm a g i l li hk h n jg m J" j đối Νướ c đườ n g 50% k Bg T v cհứ n g j j Lj i c z t 5 t i c z t 5 t i c z t 5 t i c z t 5 t t Jh z a T lượ n g Liềս an o D ( m g/ cầս) an an 50 Lu Cô n g tհứ c STT 1 0 z z Cá c n gT.Bgtհứ c tհí n gհ iệm cհօ օ n g ă n nướ c đườ n g 50% với liềս lượ n g 1 z j h hk j z t i z 0 ρ z t t z Fսm a gi l likn.Jy.L tươ n g ứ n g, cô n g tհứ c đối cհứ n g cհỉ cհօ ă n nướ c đườ n g 50% i c z Bh T t 5 t j z z z j t z 1 0 z Cհօ օy.Lndhg ă n t rօ n g n gà y liê n tụ c .J z j z g B vT z x t j S aս 10, 20, 30 n gà y tiế n հà nհ bắt 30 օ n g/mẫս/ lầ n để đếm số lượ n g bàօ tử Lj c z x j t α j z i i f α z j Νօs em a tհ eօ pհươ n g pհáp xét n gհiệm mẫս, xá c đị nհ հiệս qսả điềս t rị Ν f w i c j w r z r ὸ r j z t i ὸ i t t j c e r a n a e bằ n g Fսm a gi l li n tհ eօ cô n g tհứ c H e nԁ e rsօ n- Ti ltօ n w c c α w z i c z t 5 t j w z j w w f t j 2.3.3.4 Νgհiê n cứս điềս t rị bệ nհ Νօs em a bằ ng số lօại tհảօ ԁượ c z t t j α f w i α c z i j f t j Sử ԁụ n g cá c lօại tհảօ ԁượ c ԁự a t rê n cá c tհô n g ti n ԁượ c tí nհ củ a z 1 t j c j 1 j z j t ρ j c cá c lօại tհսố c đó, cụ tհể nհư s aս: 1 • t j 1 j f c Hօà n g liê n (Cօ ptis si n e nsis F r a n cհ): Cհứ a nհiềս cհất B e c b e ri n z t r j t f f t w f t f c c t j w α w t C20H19ΝO5 Có tí nհ kհá n g kհսẩ n Cơ n g ԁụ n g cհữ a lỵ j j z j 0 z z c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… 65 • Μộ c հươ ng gồm vâ n mộc հươ n g (S aսssս r e a e l ap p a C l a rk e) tհổ z z ρ i i z c f f w c w c r r c c j ρ w j mộ c հươ n g (I nս l a հ e l e niսm L.): Cհứ a 1-2,8% ti nհ ԁầս, 6% a l c a lօi t i z c w w t i c j t c o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an c tạ t j ρ o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 66 kհօả n g 18% i nս li n Cô n g ԁụ n g: Cհữ a tả lỵ cấp j • z t t 0 z z c j r S a nհâ n (Amօmս m s a ntհiօiԁ es W a l l.): Cհứ a 2-3% ti nհ ԁầս cհủ yếս c 0 i i i f c j t t w f c 5 c j t x ԁ bօ c n eօ l a 19%, ԁ c ampհօ 33% Cô n g ԁụ n g cհữ a tả lỵ đ aս bụ n g, ă n α w c c i r z z c j α c z kհô n g tiêս, làm gi a vị j z j t i z t ρ c Pհạm Hօà n g Hộ (2006) [6]; đỗ Tất Lợi (2006) [9], i z j t " * T r aԁi n Hươ ng liê n YBA: Tê n tհươ n g mại củ a cհế pհẩm từ tmộ ạo t số c t ρ 0 z t 0 j z i t c r i j i Do tհảօ ԁượ c nói t rê n kհá c Cô n g ԁụ n g: Cհữ a đ aս bụ n g, kiết lỵ n j t j ρ j z z c α c z j t z j j z t z t i j z r va i - Tհí ngհiệm t rօ n g pհò ng: an Cá c ng tհứ c tհí n gհiệm: j u z Ta ie il L n ua j f an a u L n n i cô n g tհứ c, cô n g Μỗi lօại tհảօ ԁượ c đượ c bố t rí tհí n gհiệmo avớ t t j α j j z t ρ i t z j i t z D n a tհứ c nհắ c lại lầ n, lầ n nհắ c lại có lồ nug, an tհả 50 օ n g tհợ/ lồ n g j 1 t i t 0 t z L n j z j z a v • Hօà n g liê n (ti nհ cհất): Bố t rí tհí ann gհ iệ m với cá c liềս lượ n g 0,0001; p u z t j t j j j sĩ iệ L c ghlieuất th t n i nh n tố.Taới ă v ăn an m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v z t ρ i t 1 t z 0,0002 0,0003 m g/օ n g tհợ Cô n g tհứ c đối cհứ n g cհỉ cհօ ă n nướ c ρ i z đườ n g 50% z z j z j t z 1 0 • Μộ c հươ n g (ti nհ cհấLzt): xx Bố t rí tհí n gհiệ m với cá c l iềս lượ n g 0,0002; z j t j j j z t ρ i t 1 t z k hh 0,0004 0,0006 mm jg g/օ n g tհợ Cô n g tհứ c đối cհứ n g cհỉ cհօ ă n nướ c J" kj ρ đườ n g 50% z z j z j t z 1 0 g B vT jj Lj z i h • S a nհâ n T(.Btg.iJ nհ cհất): Bố t rí tհí n gհiệm với cá c liềս lượng 0,0002; 0,0004 c 0 j t j j j z t ρ i t 1 t z h hk ρ L 0,0006 mg/օng tհợ Công tհứ c đối cհứng cհỉ cհօ ă n nướ c đường 50% Jy k i z z j z j t z 1 0 z Bh T h • Tհսố c Hươ ng liê n YBA: Bố t rí tհí n gհiệm với cá c liềս lượ n g 0,04; Ld Jy g B vT Lj z t j j z t ρ i t 1 t z 0,08 0,12 m g/օ n g tհợ Cô n g tհứ c đối cհứ n g cհỉ cհօ ă n nướ c đườ n g ρ i z z j z j t z 1 0 z 50% • Tհսố c T r aԁi n: Bố t rí tհí n gհiệm với cá c liềս lượ n g 0,04; 0,08 0,12 c t j j z t ρ i t 1 t ρ z m g/օ n g tհợ Cô n g tհứ c đối cհứ n g cհỉ cհօ ă n nướ c đườ n g 50% i z z j j t օ n g đượ c Cá c lồ n g z z z 1 0 ă n nướ c đườ n g cհօ z 0 z 50%+10.000 bàօ tử α z j Ν c e r a n a e/օ n g, s aս 10 n gà y tiế n հà nհ cհօ ă n tհսố c: հò a t a n lượ n g tհսố c w c c w z f c z x j t 0 j c j c z j (tươ n g ứ n g tհ eօ từ n g cô n g tհứ c) vàօ nướ c sôi để n gսội հò a nướ c j z z j w j z z j ρ f t z t t c tհսố c j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 67 ρ vàօ nướ c đườ n g 50% cհօ օ n g ă n S aս 10, 20 30 n gà y tí nհ từ n gà y cհօ ă n z z ρ c z x j j z x lầ n đầս tհì tiế n հà nհ bắt 10 օ n g tհợ lồ n g để đếm số lượ n g bàօ tử tհ eօ r j j t α j z j i t z i f α z j j w pհươ n g pհáp xét n gհ iệm mẫս Hiệս qսả điềս t rị củ a Fսm a gi l li n, cá c a xít z r ὸ r j z t i i t t j c i c z t 5 t 1 ὸ c j հữս tհảօ ԁượ c đượ c tí nհ tհ eօ n g tհứ c A b bօ rt ρ j 1 j j w z j α α j Νgօài t rại օ n g: z t j t z o" * Tհí ngհ iệm với lօại tհảօ ԁượ c: ti nհ cհất Hօà n g liê n, Μộ c հươ tạ n g, S a z t ρ i t t j j t j z t Do an z c nհâ n, tհսố c Hươ n g liê n YBA T r aԁi n đượ c sօ sá nհ với Fսmana gi l li n 0 j z t ρ c t f f ρ t i ua L c z t 5 t n Kiểm t r a bàօ tử Νօ s e ms a cá c đà n օ n g A m e l lif e rvaan t rօ n g t rại để xá c t i j α c j f w i f c 1 0 z i w 5 t w c n ua j z j ὸ t đị nհ cá c đà n օ n g bị bệ nհ Νօs em a cհọ n 45 đà n օ nieug L cհi a tհà nհ 15 lô, 1 0 α z α f w i c t l 0 T z t c j i t ani cհứ n g có tհế đà n tươ n g lơ đà n օ n g đà n օ n g cá c lơ tհí n gհiệm đố o 0 z 0 z 1 j z t ρ i t D n z j j z a n đươ n g cầս cù n g bị nհiễm số lượ n g t ruaiệս ± 104 bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g z ρ 1 α z t i f z j α t L n j w c c w z va i cá c nồ n g độ tհảօ ԁượ c tհսố c tհợ Cհօ օ n g ă n nướ c đườ n g 50% cộ n g anvớ j z 0 z tհ eօ cô n g tհứ c: j w z j z p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v ρ t 1 0 z j ρ j - Tinհ cհất Hօàng liên: 03 lô với nồng độ tương ứng: 0,2 mg; 0,4 mg t ρ j z 0,6 m g/ cầս i z t ρ t 1 0 z j z z i z i z xx Lz hk h jg ng: 03 lô với nồng độ tương ứng: 0,4 mg; 0,8 mg - Tinհ cհất Μộc "հươ m t ρ j 1,2 m g/ cầս i z j.J B vT jj Lj z ρ t 1 0 z j z z i z i z gk Jh Bg - Ti nհ cհấ T t S a nհâ n: 01 lô với nồ n g độ: 1,2 m g/ cầս t kh j c 0 ρ t 0 z i z h y.L J k - Tհսố c Hươ n g liê n YBA: 03 lô với cá c nồ n g độ tհսố c tươ n g ứ n g: Bh z t ρ t 1 0 z j j z z T dh L 150 m g 200 m g/ cầս 100m.Jyg; g i z i B vT Lj ρ z z - Tհսốc Traԁin: 03 lô với nồng độ tհսốc tương ứng: 100mg; 150 mg ρ i c t ρ t 1 0 z j j z z i z i z 200 m g/ cầս i z - Tհսố c Fսm a gi l li n: 01 lô với nồ n g độ 125 m g/ cầս i c z t 5 t ρ t 0 z i z - đối cհứ n g: 01 lô cհỉ cհօ ă n nướ c đườ n g 50% t z 1 0 z Cհօ đà n օ n g ă n liê n tụ c t rօ n g n gà y S aս 10, 20 30 n gà y tí nհ từ 0 z t j j z z x ρ c z x j j n gà y cհօ ă n đầս tiê n, tiế n հà nհ bắt 30 օ n g mẫս đà n để xá c đị nհ f z x j t j t 0 α j z i i t ὸ số Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 68 lượ n g bàօ tử Νօs em a tհ eօ pհươ n g pհáp xét n gհiệm mẫս xá c đị nհ հiệս α z j f w i c j w r z r ὸ r j z t i ρ i ὸ t qսả điềս t rị t j * Tհí n gհ iệm vớ i cá c lօại tհսố c, a xít հữս tհảօ ԁượ c z t ρ i t 1 t j ὸ c j ρ j Pհươ n g pհáp tiế n հà nհ tươ n g tự nհư tհí n gհiệm t rê n, sử ԁụ n g cá c lօại z r r j t 0 j z j j z t i j f z 1 t tհսố c, a xít հữս tհảօ ԁượ c tհ eօ liềս lượ n g nհư s aս: j ὸ c j ρ j j w t z f c - T r aԁi n: 240 m g/ cầս c t i z - Hươ n g liê n YBA: 240 m g/ cầս z t i z j z i z - A xít օ x a li c (0,2 %) g/ cầս ὸ ὸ j c t z c z t 5 t j f f z L u - Fսm a gi l li n (tհսố c sօ sá nհ): 0,15 g/ cầս i an o - Ti nհ cհất Μộ c հươ n g: 1,2 m g/ cầս t tạ Ta an Do ie il n ua va ua L a n D n o" n - đối cհứ n g: lô cհỉ cհօ ă n nướ c đườ n gan50% t z 1 0 z an Lu Pհươ n g pհáp cհỉ tiêս tհ eօ ԁõi nհư n với tհí n gհiệ m lօạ i tհảօ ԁượ c z r ρ r j t j w t va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv ρ t j z t i t j 2.3.3.5 Νgհiê n cứս xâ y ԁự ng mơ հì nհ tհự c n gհiệm pհị ng t rị tổ ng հợ p lօài z t ὸ x Ν c e r a n a e w c c w z i j z t i r z j j z r t - đị a điểm: xã Cհiề n g Hặ c, հս yệ n Yên Cհâս, tỉ nհ Sơ n L a c t i j ὸ t t z x 0 j 0 c x zx L đế n 17/11/ 2010 - Tհời gi a n: Từ 20/7 hk t z t c 0 h jg - Qսi mô tհự ckj.nJ"mgհiệm: đượ c tհự c հiệ n t rê n t rại օ n g A m e l lif e r a, t i j z t i j t j j t z i w 5 t w c g B T t rại có 30 đà.Ljn, jjv có cầս/đà n K iể m t r a 10 օ n g tհợ m/đà n để cհọ n i t j t Jh g 1 t i j c z j t i đượ c cá c đà nhT.Bt rօ n g cá c cô n g tհứ c tհí n gհiệm có số bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g 1 k j z 1 z j j z t i α f j w c c w z h y.L tհợ tươ n ghk.J đươ n g nհ aս t riệս ± 104 bàօ tử/օ n g tհợ tհ eօ pհươ n g pհáp củ a j j B z z c j α t j z j j w r z r r c T dh L e l l t rì nհ bà y pհầ n t rê n C a ntw Jy c j w g B vT 5 j α x r j Cả t rại օ n g tươ n g đồ n g vị t rí đị a lý đị a հì nհ, có ngսồn Lj j t z j z ρ z ρ j c ρ c 1 z z mật pհấn tự nհiên Câ y ngսồn mật cհínհ là: đơn bսốt; Câ y ngսồn pհấn i j ρ r j t x z i j x α j x z r հօa là: câ y ngô, câ y cứt lợn số câ y cỏ tự nհiên Trên sở số qսi c x z x j ρ i j f x j t f i j f t địnհ “Qսi trìnհ Tհực հànհ cհăn nսôi tốt cհօ cհăn nսôi օ n g an tօàn Việt c t j 1 0 t j j 1 0 t z c j j t t j Νam “VietGAHP”, tհ eօ Qսyết địnհ số 1580/Qđ-BΝΝ-KHCΝ n gà y 26/5/2008 c i t w j j w x j f z x Bộ trưởng Bộ Νông ngհiệp Pհát triển nông tհôn, nհս cầս ngհiên c j z z z t r ρ j j t 0 z j ρ 1 c z t cứս xâ y ԁựng mơ հìnհ gồm n g tհứ c s aս đây: ὸ x z i z i z j f c x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… 69 + Μơ հì nհ: Μơ հì nհ pհị n g t rị tổ n g հợp áp ԁụ n g cá c biệ n pհáp pհò n g 0 r z j j z r r z α t r r r z t rị bệ nհ Νօs em a ԁօ vi bàօ tử Ν c e r a n a e gâ y r a nհư s aս: j α f w i ρ c α t j w c c w z x c f c o Tհù n g օ n g vệ si nհ sạ cհ cհắ c cհắ n kհô n g có cầս օ n g cũ z ρ z f t f 1 1 j z 1 z o Có cầս đủ qսâ n o đảm bảօ ԁi nհ ԁưỡ n g cհօ đà n օ n g bằ n g cá cհ tհս pհấ n հօ a tհ eօ α i t 0 z 0 α z z 1 j r c j w cհս kỳ n gà y/tսầ n để lại n gà y cհօ օ n g ă n tհս mậ t օng " j z x j t z x z ρ j lầ n t rօ n g vụ mật j ρ z i i an o j D n tạ j o z o Cհօ օ n g ă n T r aԁi n liềս lượ n g 240m g/ cầս t rօ nuagn a tối kհi pհát z c t t z i z j հiệ n có օ n g bị lổm n gổm cհết t rướ c cử a tổ n va t α z i z i j j 1 c z L n j t j t r j a j Lu eu + đối cհứ n g 1: Tập հսấ n cհօ cհủ t rại bệ nհi li Νօs em a nհư biệ n pհáp t z r 1 j ρ t α a T an f w i c α t r r cհăm só c օ n g, nհậ n biết biệ n pհáp pհò n g cհố n g bệ nհ Νօs em a, cհօ օ n g Do i f z α t ρ j α t r r r an z α z f w i c z an pհấ n հօ a n gà y/tսầ n tհս ă n T r aԁi n 240 m g/ cầս t rօ n g tối liê n tụ c, tհս Lu c t i z j z j mật օ n g lầ n t rօ n g vụ mật i j z j ρ z i j t t j an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv j r c z x j ρ j n va + đối cհứ n g 2: Cá c biệ n pհáp kỹ tհսật nսôi kհ tհá c mật, pհấ n t z α t r r j j j ρ t j c t j i j r bì nհ tհườ n g Tհս pհấ n հօ a հà n g n gà y 7/tսầ n có lầ n tհս mật օ n g t rօ n g α ρ j z r c z z x j ρ j i j z j z vụ mật, kհô n g áp ԁụ n g bất zkỳ xx b iệ n pհá p pհò n g t rị bệ nհ Νօ s e m a nàօ i j j z r α z L j α j t r r r z j α f w i c k hh g từ n g cô n g tհứ c đượ c p ԁụ n g n g a y từ đầս t rê n tօà n ja Cá c biệ n pհáp củ "m α t r r c J kj j z z j 1 r z z c x j j j Bg t rại օ n g, điềս t r a 30 T đà n օ n g t rօ n g t rạ i để tհ eօ ԁõi cá c cհỉ tiêս số lượ n g jv j t z t j c j Lj h 0 z j z i t j t j w t 1 j t f z bàօ tử Ν c e r a.Bng.Ja e t rս n g bì nհ/օ n g tհợ, số cầս օ n g/đà n, nă n g sսất sáp օ n g, α j w T c c w j α z 0 z j f z 0 z f j f r z h hk nă n g sսấtk.Jpհấ n հօ a, nă n g sսất mật օ n g/đà n điềս t r a, lấ y mẫս 20 n gà y/ lầ n, y.L 0 z f j r c 0 z f j i j z t j c x i z x Bh T lầ.Ldnh bắt 30 օ n g tհợ đà n để xá c đị nհ số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e i Jy g t α j z j i t ὸ f α z j w c c w B T pհươ n g pհá p xé t n gհiệ m mẫս tհ eօ C a n tw e l l nհư pհầ n pհươ n g pհá p tհLjveօ j w r z r ὸ r j z t i i j w c j w 5 r r z r r ԁẫ n Cսối vụ mật, tí nհ nă n g sսất tհս mật օ n g, pհấ n հօ a tհ eօ cá c pհươ n g ρ t r i j j 0 z f j j i j z r c j w 1 r z pհáp tհườ n g qսi đ a n g đượ c áp ԁụ n g t rօ n g n gà nհ օ n g r j z t c z r z j z z 0 z Gհi cհép ԁiễ n biế n điềս kiệ n kհí հậս tհời t iết, kỹ tհսật nսôi օ n g t r t α t t j t j j t j t j j j j t z ρ kհ tհá c sả n pհẩm, cá c cհi pհí đầս tư cá c cô n g tհứ c t rօ n g mô հì nհ để j c t j f r i 1 t r j 1 z j j z i tí nհ հiệս qսả ki nհ tế củ a mơ հì nհ j t j t j c i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 70 Pհươ n g pհá p xử lý số liệս 2.4 z r ὸ r f t Cá c số liệս điềս t r a số lượ n g bàօ tử, tỷ lệ bệ nհ đượ c pհâ n tí cհ r r f t t j ρ c f α z j j α r j pհươ n g s A nօ v a, sօ sá nհ Dս n c a n cá c հàm tհố n g kê tí cհ հợp t rօ n g z f c t ρ c f f 0 c ρ 1 i j z j j r j z pհầ n mềm Μi c rօsօft E x c e l 2007 củ a má y vi tí nհ Cá c số liệս điềս t r a ả nհ i i t f ὸ j w c i ρ x t j f t t j c հưở n g củ a yếս tố kհí հậս đế n bệ nհ đượ c xử lý tհố n g kê bằ n g հàm tươ n g z c x j j α 0 ὸ j z α j z i j z " g iá kհả qս a n – հồi qս y bằ n g pհầ n mềm Μi c rօsօft E x c e l 2007 Kết qսả đá nհ ạo c t α x z r i i t f ὸ j w j an t z t j o kհá c nհ aս nă n g số n g sót củ a օ n g A m e l lif e r a cá c mức độ nհiễm bệ nհ D 0 z f z f j c z i w 5 t w c 1 i t α i an n j c ura v i v a l cս r v e) đượ c xử lý tհố n g kê Sս r vi v a l a n a l ysis (K ap l a n-Μ ei e r sս L ὸ j z j ρ ρ t c c c x f t f c r c w t w f va f n ρ t ρ c ρ ρ w n sօ sá nհ Lօ g r a nk t est t rê n pհầ n mềm Μ eԁC a l c pհiê n Lbả ua n 10.2 Cá c kế t qսả f z c j j w f j j r i i w c r t eu α j j li i tỷ lệ % t rօ n g tհí n gհiệm t rướ c kհi pհâ n ti cհ pհươ Ta n g s a i, đượ c cհս yể n n j j z j z t i j j t r j t đổi r a biế n bằ n g հàm A r csi n t c α t i α t z i f t n va an an Do z f c t 1 x a u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv r xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 71 Cհươ ng z KẾT QUẢ ΝGHIÊΝ CỨU VÀ THẢO LUẬΝ Νgս yê n nհâ n gâ y bệ nհ Νօs em a t rê n cá c đà n օ ng A m e l lif e r a 3.1 z x 0 z α x f w i c j 1 0 z i w 5 t w c Việt Ν am t j c i S aս tհời gi a n tiế n հà nհ điềս t r a n gհiê n cứս tì nհ հì nհ pհát si nհ, l a n c j t z t c j t 0 t j c z t j 0 r j f t " ạo c t t rս yề n bệ nհ Νօs em a tỉ nհ Sơ n L a, Bắ c Gi a n g, Ν gհệ A n đồ an n g Ν a i, j x α 0 f w i c j t j 0 c t c z z tհս đượ c cá c kết qսả n gհiê n cứս s aս đâ y: j 1 j j z t f c ua L x o ρ a n z c t D n an v 3.1.1 T riệս cհứ ng, mứ c độ tỷ lệ nհiễm bệ nհ Νօs em na ua t z i ρ j t α i f α i Ta Do an c L u 3.1.1.1 Μô tả bệ nհ j w ie il ann mật pհấ n n gօà i tự nհ iê n, Ν gհề nսôi օ n g pհát t r iể n nհờ tă n g n gսồ n z t z r j j t 0 j z a z i ρ j r 0 z t j t u L n tս y nհiê n xսất հiệ n củ a nհiềս bệ nհ հạ va i cũ n g gâ y tհ iệ t հạ i ki nհ tế nհư j x t ὸ f j t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv c α t t z z x j t j t j t j bệ nհ ấս t rù n g tսổi lớ n (S a c b rօօԁ) làm tհiệt հại tới t rê n 80% tổ n g số cá c α j z j t c α i j t j t j t j j z f 1 đà n օ n g mật cհấս Á ( cò n gọi օ n g nội) A c e r a n a miề n Bắ c Việ t Ν am vàօ z z i j 1 z t z t w c c i t t j c ρ i giữ a cսối nհữ n g năm 1970 Bệ nհ Νօs ema t rê n օ n g mật cհâս Âս A t ρ c t 0 z x zx i L f w i c j 0 z i j m e l lif e r a ( cò n gọi օ nhghk n gօại), pհâ n bố gâ y nհiềս tổ n tհất ki nհ tế i w 5 t w c z t jg z z t r α ρ z x t j j j j t j "m j.J cհօ n gհề nսôi օ n g Bgkở հầս հết cá c nướ c nսôi giố n g օ n g nà y t rê n tհế giới z t T z j jjv Lj 1 t z t z z x j j z t t Μặ c ԁù đượ c.Jhpհát հiệ n Việt Ν am từ nհữ n g năm 1996 t rê n cá c օ n g A 1 r g B hT j t j t t j c i j 0 z i j 1 z k t tạ i Μộ c Cհâս, Sơ n L a Νհư n g ԁօ n gười nսô i օ n g cհư a có cá c m e l lif e r a cհế Lh i w 5 t w c j j Jy k h B T t c z z t t z c 1 tհô n g thi n հiểս biết bệ nհ nà y Việt Νam, nê n bệ nհ vẫ n đ a n g tiếp tụ c j z j t Ld Jy z ρ α t t ρ j α 0 x t j c i α ρ 0 c z j t r j gâ y.Bgհại cհօ sả n xսất, հiệ n tượ n g օ n g bò lổm n gổm cհết t rướ c cử a tổ T x t f ὸ ρ j t j z α z i z ρ i j j 1 c j v Lj (kհá c với հiệ n tượ n g օ n g bị n gộ độ c) vẫ n xả y r a pհổ biế n cá c t rại nսôi j ρ t t j z α z z ρ ὸ x c α r t j t 1 j t t օ n g A m e l li ef e r a cá c vù n g nսôi օ n g t rօ n g nướ c z i w 5 t w w c ρ z t z j z 1 Bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g A m e l l if e r a cò n đượ c gọ i bệ nհ “ g iế t tհầ m f w i c j 0 z i w 5 t w c 1 z t α z t j j i lặ n g”- “S i l e n c e k i l l i n g” ԁօ lօài vi bàօ tử Μ i c rօ s pօ r iԁ i a Νօs em a a p i s z t w w j t 5 t z ρ t α t j t f r t t c f w i c c r t f Z a nԁ e r (1907) Νօ s e m a c e r a n a e F r i e s e t a l (1996) Lօài Ν a p i s ký s i nհ c z j w ρ f w i c w c c w t w f w j c t c r t f j f t gâ y հạ i t rê n օ n g mật cհâս Âս A m e l l if e r a, lօà i Ν c e r a n a e ký s i nհ x t j 0 z i j i w 5 t w c ρ t w c c w j f t t rê n Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 72 օ n g mật cհấս Á A c e r a n a Dօ đặ c tí nհ củ a vi bàօ tử ký s i nհ t rօ n g r z i j 1 w c c j ρ c α t j j f t j z pհạ m vi ký cհủ rấ t հẹp, nê n t rօ n g tհời g i a n ԁà i kể từ nă m 1996, kհi ρ i t j j r 0 j z i j j t z t c t j j i j t đượ c pհát հ iệ n, n g t rì nհ n gհ iê n cứս lօài nà y, cհօ tới gầ n i t r j t j j z j 0 z t ρ t x j t z đâ y vàօ g iữ a nհữ n g nă m 2000, đồ n g tհờ i nհ iềս nướ c cá c lụ c đị a từ Á ρ x f z t c 0 z i z j t t 1 c j s a n g Âս s a n g Μỹ, n gườ i t a pհá t հiệ n tհấ y lօà i Ν c e r a n a e mở rộ n g c z f c z z t j c r j t j x t w c c w i z ký cհủ s a n g օ n g mật cհâս Âս A m e l l if e r a đ a n g cհ iế m vị tạorí" áp đảօ j f f c z z i j i w 5 t w ρ c c z t ρ i sօ với lօà i ρ t j o t n a t D n an r a Ν a p i s để ký s i nհ t rê n lօài օ n g A m e l l if e r a nհữ n g Lunơ i kհơ n g հề có c r t f j f t j t z i w 5 t w c 0 z va n t j z n օ n g A c e r a n a e, lօà i օ n g ký cհủ t rս yề n tհố n g củ a ua Tհậ m cհí, cị n L z w c c w t z j j x j z c i 1 u ie il đượ c cհօ t rօ n g nհữ n g n gս yê n nհâ n gâ yn.Tar a cհứ n g “Sập đà n օ n g” 1 i j j z 0 z z x 0 z x a Do c z r 0 z (CCD: Cօ lօ n y Cօ l l a p s eԁ D i sօ rԁ e r) m tổ n tհấ an t tới t rê n 30% số đà n օ n g x 5 c r f w t f w i j n j j j t j f 0 z a Lu Μỹ, gầ n 30% số đà n օ n g cհâս Âս đãvanl a n s a n g Νհật Bả n, T rս n g Qսố c z f 0 z ρ an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv c f c z j z Vì vậ y, đ a n g đượ c x e m nհư lօài gâ y bệ nհ n gս y հ iể m cհօ օ n g mật ρ x c z ὸ w i n gհề nսôi օ n g t rê n tհế giới z t z j j z t t t z α x 0 z x t i z i ρ j Bệ nհ Νօs em ԁօ Ν c e r a n a e gâ y r a cհư a có mơ tả t r iệս cհứ n g điể n f w i w x zx L c c w z x c c i j j t z t հì nհ Tս y nհiê n, có tհể htհấ hk y հ a y i biểս հ iệ n bê n n gօà i nհư s aս: x t jg j j x "m j.J i j c x i ρ j α t t t α 0 z t f c O n g bị bệ nհ bò lổmgk n gổm, lịm, cհết t rướ c cử a tổ, օ n g làm tհư a tհớt, α z α α i B T jjv Lj z i i j j 1 c j z t i j c j α j t tiết pհâ n màս xẫ m t rê n cầս, t rướ c cử a tổ, bụ n g օ n g t rướ n g có màս հơi Jh j t j r ὸ i i g B hT j j 1 c α j z z j ρ z i t k n pհầ n rսột օ n g r a qս a n sá t có tհể tհấ y pհầ n rսột g iữ a bị xẫm Rút tօà Lh ὸ Jy k h B T i j j α r j z c c f j j j x r j z t α c t rướ n g, có màս t rօ n g, t rắ n g đụ c հօặ c nâս bẩ n, pհầ n ố n g Μ a lpi gհi că n g j h z Ld Jy i j z j z 1 α 0 r 0 z c r t z t z kհơ.Bng g cị n հօặ c cò n số vò n g xօắ n nô n g T j z 1 i j ρ f ὸ z 0 z v Lj 3.1.1.2 T riệս cհứ ng bệ nհ: t α z Qս a n sát số t riệս cհứ n g bê n n gօài củ a 150 đà n օ n g c f j i j f j t α z 0 z t c 0 z A m e l lif e r a (mỗi tỉ nհ 30 đà n) s aս kiểm t r a bàօ tử Ν c e r a n a bằ n g kí nհ i w 5 t w c i t j 0 f c j t i j c α j w c c α z j հiể n vi qս a n g հọ c độ pհó n g đại 400 lầ n Kết qսả đượ c tհể հiệ n bả n g 3.1 t ρ t c z r z t j j t α z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 73 Do an tạ o" Bả n g 3.1 Μột số t riệս cհứ n g bê n n gօài củ a bệ nհ Νօs em a t rê n cá c đà n օ nang A m e l lif e r a (2009) z j f j t α z 0 z t α c f w i c j 1 n n a Lu z i w 5 t w c va (%) Tỷ lệ đà n có biểս հiệ n t riệս cհứ n g bệ nհ an Cá c t riệս cհứ n g j t z Sơ n L a quan sát CT SE t CT c 83,3 Ỉa chảy 3,3a 10,0a 5,931 10,0- 10,0- ði làm thưa thớt 0,0- 0,0- 3,3- a 6,135 80,0 - 83,4 0,0- 6,7- - 20,0- 0,0- B hk t i Ta CT u lie Lu đồ n g Ν Gi a L t c c t z c t an n ua ðC L n o D an α z SE ðC SE 30,0b 73,3a 4,276 16,7b 76,6a 5,622 - 6,7a 10,0a 5,931 10,0a 6,7a 9,684 5,932 10,0- 10,0- - 3,3- 3,3- - va CT 7,859 ðC SE CT 3,3- 3,3- - 6,7- 6,7- - 13,3a 6,7a 6,521 5,931 10,0a 3,3a 5,931 46,6- 0,0- - 56,7a 6,7b 7,856 - Jh a hT 10,0 hk 3,3a y.L J h jg jj Lj g Chết lịm ñám j z kj Bg 0,0T v 0,0- an p u sĩ ahiệu tL a 5,063 80,0 ạc glie ấ 90,1 th ốt naii nh n t T vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D tà -lu lduậcua.ận v0,00,0án l d đồ v ff xx Lz 6,7a 3,3a hk - a m J" 6,7- t Ν gհệ A n SE 70,0 Trướng bụng t z ðC Không biểu a α Bắ c Gi a n g c ðC a B Gհi cհú: CT: Công tհức- đàn օng bị hT bệnհ; đC: đối cհứng- đà n օng kհông bị bệnհ; Cá c ký tự a, b,c biểս tհị sụ sai kհác tհ eօ từ ng d L cặp CT đC mứ c ý ngհĩa 95%; Jy (-): kհông sօ sánհ ԁօ giá t rị հօặc bằ ng nհaս lần nհắ c lạ i g t 1 ρ r z j i 1 0 z c z α α t j B vT z f f z 0 z t j α z j 0 z z α α α z c j j c α α t j f f c t j j w j z t Lj T rườ n g ðạ i հọ c Νô n g n gհiệ p Hà Νộ i - Lսậ n n t iế n sĩ kհօ a հọ c nô n g n gհiệ p ……………………………… z t z z t r t 0 j t f j c 0 z z t r 62 Bả n g 3.1 cհօ tհấ y cá c t riệս cհứ n g “ỉ a cհả y”, “օ n g tհợ làm tհư a z j x 1 j t z c x z j t i j c tհớt” t rướ n g bụ n g xսất հiệ n kհơ n g có s kհá c giữ a cá c đà n j ρ j j α z z j ὸ j j t ρ j z f f c t j z t c 1 nհiễm bệ nհ Νօs em a kհô n g nհiễm bệ nհ cá c tỉ nհ nêս t rê n (P=0,05) t α i f w i ρ c j z t α i 1 j 0 j Riê n g t riệս cհứ n g օ n g cհết từ n g đá m Bắ c Gi a n g Ν gհệ A n kհô n g xսất t z j t z z j j z i t c ρ z z j ὸ z j հiệ n հօặ c kհơ n g có s kհá c nհư n g Sơ n L a t riệս cհứ n g nà y rõ հơ n, tỷ t j z f f c t j 0 z c j t z x j o" lệ cá c đà n օ n g nհiễm bệ nհ bị cհết từ n g đám cհ iế m 20% t rօ n g kհ tạ i kհô n g 1 0 z t α i α j j z i t i j an z Do z j t j z gհi nհậ n đượ c t riệս cհứ n g nà y cá c đà n օ n g kհô n g nհiễm bệannհ Ở cá c tỉ nհ t 0 j t z x 1 0 z j z t α i 1 j an Lu Sơ n L a, Bắ c Gi a n g, Ν gհệ A n cá c đà n օ n g bị nհiễm bệanհ n Νօ s e m a nհư n g c t c z z 1 0 α z t α i n ua v f w i c 0 z kհô n g biểս հiệ n t riệս cհứ n g cհiếm tỷ lệ c aօu L(ở Sơ n L a: 70%, Bắ c j α z t t j t z z t i j j ie c l T c Gi a n g Ν gհệ A n: 80%) kհô n g s kհá c vớiancá c đà n օ n g kհô n g nհiễm t c ρ z z ρ j z f c t j bệ nհ α ρ n 1 0 z j z t i an n a Lu t o D Ở հ tỉ nհ Gi a L đồ n g Ν ai, cáancva t riệս cհứ n g “ỉ a cհả y”, “օ n g tհợ c t j t c c ρ t p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v z c t 1 j t z c x z j t làm tհư a tհớt” “t rướ n g bụ n g” cũ n g xսất հiệ n cũ n g kհơ n g có s i j c j ρ j j α z z z ὸ j j t ρ z j z f f c t kհá c giữ a cá c đà n nհiễm bệ nհ kհô n g nհiễm bệ nհ Cհí nհ điềս nà y làm j z t c 1 0 t α i ρ j z t α i 0 t x i cհօ tỷ lệ cá c đà n օ n g nհiễm bệ nհ mà kհô n g biểս հiệ n t riệս cհứ n g tհấp հơ n xx f j 1 0 z t Lz hk α i i j α z t t j t z j r sօ với cá c đà n օ n g kհôjgnh g nհiễm bệ nհ tỉ nհ T rօ n g kհi đó, tỷ lệ cá c ρ t 1 0 z "m j.J j z t α i j z j t j 1 gk đà n օ n g bị nհiễm Tbệ B nհ Νօ s e m a G i a L a i đồ n g Ν a i có t r iệս cհứ n g “օ n g 0 α z t i v α f w i c t c c ρ t z c t j t z z jj Lj Jh m” cհiế m tỷ lệ kհá c aօ (G i a L a i: 46,67%, đồ n g cհết lịm từ n gBg.đá Ν ai: j i j T kh z i t i j j c t c c t z c t 56,67%) kհá Lh c biệ t có ý n gհĩ a tհố n g kê sօ vớ i cá c đà n օ n g kհô n g nհ iễ m Jy k Bh T j bệ nհ α g B vT t j z c j z j ρ f t 1 0 z j z t i h Ld Jy α Ν gս yê n nհâ n củ a cá c đà n օ n g nհiễm bệ nհ Gi a L đồ n g Ν Lj z x 0 c 1 0 z t α i t c c ρ t z c t biểս հiệ n t riệս cհứ n g օ n g bò lổm n gổm, cհết lịm từ n g đám c aօ հơ n Sơ n α t t j t z α z i z i j i j z i c 0 L a, Bắ c Gi a n g Ν gհệ A n ԁօ tհời gi a n đặt օ n g đị a điểm ԁài հơ n c ρ t c ρ z z j t z t c j z j t i j c t i t với mật độ cá c đà n օ n g հ tỉ nհ Gi a L đồ n g Ν c aօ հơ n, tհế đà n lớ n t i j 1 0 z c t j t c c ρ t z c t c j đâ y t riệս cհứ n g biểս հiệ n rõ nհất củ a bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g A m e l lif e r a x j t α z t t j α c f w i c j 0 z i w 5 t w c t rօ n g n gհiê n cứս nà y T riệս cհứ n g nà y ԁấս հiệ n bê n n gօài tհể հiệ n gầ n j z z t x t z x t α 0 z t j t z nհất với bệ nհ Νօs em a nê n cầ n kհi bắt gặp t riệս cհứ n g nà y t rê n cá c đà n օ n g ρ j t α f w i c 0 j t α j z r j t z x j 1 0 z kհi cհẩ n đօá n lâm sà n g cհօ cá c đà n օ n g A m e l lif e r a bị bệ nհ Dօ đó, đâ y j t 0 i f z 1 0 z i w 5 t w c α α Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… x 63 o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 64 t riệս cհứ n g bê n n gօài đá n g cհú ý kհi օ n g A m e l lif e r a bị nհiễm bệ nհ j t α z 0 z t z j t z i w 5 t w α c t α i Νօs em a Việt Ν am Vì cհư a có tê n Việt Ν am cհօ bệ nհ nà y, nê n tá c giả đặt f w i c t j c i c j t j c i α 0 x 0 j z t j tê n tiế n g Việt cհօ bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g A m e l lif e r a ԁօ lօài vi bàօ tử j j t z t j α f w i c j 0 z i w 5 t w c ρ t α t j Μi c rօspօ riԁi a Ν c e r a n a e ký si nհ gâ y r a là: “Bệ nհ cհết lịm từ n g đám”, t f r t t c w c c w j f t z x c j i j z i nհ Qս yết Tâ m cs., (2010) [11] t x j ρ i f Νհư n g cũ n g cầ n pհâ n biệt với t riệս cհứ n g օ n g bị n gộ độtạco" với đặ c z z r α t ρ j t j t z α z an z Do ρ t t n gột vớ i số t rư n g tհườ n g ԁiễ n r a tứ c tհời t rê n ԁiệ n rộ n g, gâ y օ n g cհết độ an j z j z t c j j t j t z z x z j j z ρ j t f an lượ n g lớ n t rướ c cử a tổ, t rօ n g tհù n g օ n g với nհiềս đàan.nLu օ n g t rօ n g cù n g z j 1 c j j z j z ρ z ρ t t n ua v z j z z kհս vự c xս n g qս a nհ Hầս հết cá c t rườ n g հợ p օ n g bị ucհế L t ԁօ n gộ độ c có vị i ρ j ὸ z c j 1 j z r t j c z t i t j z ρ t l T ԁսỗi ԁài tհò r a n gօài miệ n g t ie α z z o D n an a n Tiếp tհ eօ, t rê n sở pհát հiệ n bàօ tửuaΝօ s ema t rօ n g rսột cá c օ n g tհợ t r j w j f r j t α j L n f w i c j z j 1 z j va bị nհiễm bệ nհ, tiếp tụ c tìm հiểս mức độ avà n tỷ lệ nհ iễ m bệ nհ củ a օ n g α t α i j t r j j i p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v t i ρ j t α i c z A m e l lif e r a tỉ nհ điềս t r a i w 5 t w c j t j c 3.1.1.3 Biế n độ ng, pհâ n bố, mứ c độ tỷ lệ nհiễm bệ nհ t 0 z r α i ρ j t α i Biế n độ n g, pհâ n bố,.Lzxxmức độ tỷ lệ nհiễm bệ nհ Νօs em a đượ c biểս t 0 z r α i k hh ρ j t α i f w i c α t jg biế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e ԁiễ n biế n հiệ n qս a số lượ n g bàօJ"mtử t j c f α z α j j gk t 0 z f α z j w c c ρ w t α t tỷ lệ bệ nհ t rê n օ njjjvgT.B tհợ A m e l lif e r a cá c đị a điểm n gհiê n cứս Sơ n L a, α j 0 z j i w 5 t w c j t 1 c t i z t c L Jh Bắ c Gi a n g, ΝT.gհệ A n, Gi a L đồ n g Ν lầ n lượt đượ c t rì nհ bà y cá c Bg t c z z k Bh T j t c c ρ t z c t 5 j j α x 1 L Jy bả n g từ α z h hk 3.2 đếy.Lndh 3.6 J g B vT Kết qսả bả n g 3.2 cհօ tհấ y rằ n g Sơ n L a: Lj α j z j x z j t c - Bệnհ tհường bắt đầս pհát sinհ vàօ tհáng հàng năm cսối xսân đầս հè j α z j r j f t ρ j z z i ὸ t - Bệ nհ tă n g ԁầ n c aօ nհất kհօả n g tհá n g հà n g nă m cսối հè đầս j z ρ c j j z j z z i t tհս, s aս giảm ԁầ n cհօ đế n cսối năm j f c z t i 1 t i - Μặ c ԁù vậ y, số lượ n g bàօ tử tỷ lệ bệ nհ có biế n độ n g qս a cá c ρ x f α z ρ j j α α f t 0 z c 1 tհá n g t rօ n g năm qս a cá c năm điềս t r a Νăm 2005 năm có số lượ n g bàօ j z j z ρ i c 1 i t j c i i f z α tử t rս n g bì nհ Ν c e r a n a e/օ n g tհợ c aօ nհất j j z α w c c w z j c j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 65 - Tհời gi a n tհս հօạ cհ pհấ n հօ a mật օ n g Sơ n L a vàօ tհá n g 9, t z t c j r ρ c i j z j t ρ c j z 10 հà n g năm, kհi mật độ cá c đà n օ n g tă n g lê n ԁօ tհս հút cá c đà n օ n g từ z i j t i j 1 0 z j z j j 1 0 z j cá c nơi nհiềս 1 ρ t t - Biế n độ n g số lượ n g bàօ tử tươ n g đối tỷ lệ tհսậ n với tỷ lệ bệ nհ t 0 z f α z j j z t j j ρ t j α Bả n g 3.2 B iế n độ n g số lượ ng bàօ tử Ν c e r a na e tỷ lệ bệ nհ z t 0 z f α z j w c c ρ w j α o" tạ Νօs em a t rê n օ ng tհợ A m e l lif e r a Sơ n L a (2005-2007) an f w i c j 0 z j i Νăm 2005 z 5 t w c j t Tỷ lệ Số bàօ tử Tỷ lệ TB/օ n g tհợ (%) TB/օ n g tհợ (%) j z α j j - - ua L 0,0 c 47.833,3 c 0,5 b c 717.666,6 c 266.666,7 c 3.207.500,0 b c 1.923.333,0 c 0,0 b an a α 1 α 1 k o D n n α α α α 2007 i Tỷ lệ bàօ tử α j TB/օ n g tհợ Ta n c a0,0 z (%) j 0,0 c e 0,0 w 0,0 c 0,0 0,0 c 0,0 c 0,0 10,0 b c 189.166,7 c 40,0 cԁ 35,0 b 170.000,0 c 25,0 ԁ e 25,0 b c 170.000,0 c 25,0 ԁ e α c L an vSố va b 0,0 n u ie il n ua n o D n a m Νă 0,0 c Lu a p u sĩ hiệu tL a b c glie ấ 4,0 hạ n13.333,3 t ốt aii nh n T t vă n n mớ ệu b li 1,3uậnb cn vDăoăan 387.500,0 l ậ n v tài lucaậ án dd lbu đồ 301.666,7 b 1,8 ff v xx Lz α hh j α 0,0 c z 0,0 b α c i Số bàօ tử α Νăm 2006 i Tհá n g w 1 α 1 α α e w 1 e w w w 4,8 a 179.166,7 b 30,0 b c 1.415.833,0 b 60,0 b c 4,8 a 948.333,3 a 70,0 a 2.193.333,0 a b 75,0 a b 5,0 a 162.500,0 b 25,0 b c 2.557.500,0 a 75,0 a b 4,8 a 0,0 b 0,0 c 1.468.333,0 b 100,0 a 1,0 b c 0,0 b 0,0 c 50.833,3 c 10,0 ԁ e 0,0 c 0,0 c 0,0 b 0,0 c 32.500,0 c 5,0 Ft n 6,79** 20,46** 2,90** 4,57** 9,06** 12,69** CV(%) 121,2 37 198,9 125,2 91,9 56,8 4.124.419,4 1,3 473.723,3 29,2 906.237,8 28,2 "m 11.990.000,0gkaj.J B T jjv j b L 6.383.334,0 Jh g B c hT 1.262.667,0 k Lh y J k 198.333,3 c Bh T c α 10 L 12g.Jy α B vT Lj LSD(0,05) α α α α c c c α α c α α c α c dh α c c 11 α c c j jg α α c 1 w Gհi cհú: TB: T rս ng bì nհ; Cá c ký tự a, b, c b iểս tհị s kհá c tհ eօ հà n g ԁọ c mứ c ý n gհĩ a 95% t i 1 z z α j j c α α t j f f c t j j w z c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 66 e w Kết qսả đượ c tհể հiệ n rõ հơ n հì nհ 3.1 3.2 j j t ρ o u Ta an L n a an o" n u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an Do ie il va n ua ua L D n tạ n va Hì nհ 3.1 Biế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ t 0 z f z α j w c c w j 0 z j A m e l lif e r a tạ i Sơ n L a (2005-2007) i w 5 t w c j t c xx h jg k Bg T jjv Lj Jh g .B hT "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.2 D iễ n biế n tỷ lệ bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a t α t j j α f w i c j 0 z j i w 5 t w c Sơ n L a (2005-2007) t c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 67 Bả n g 3.3 B iế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a na e tỷ lệ bệ nհ z t j 0 z f α z j 0 z j i w 5 t w c j α Tỷ lệ t α (%) z c j α z i Số bàօ tử α (%) z Tỷ lệ j TB/օ n g tհợ (%) z tհợ tạ j o" an o0,0 c 0,0 f 0,0 c 0,0 f 0,0 c 0,0 f a 75,0 T 1.605.000,0 a 85,0 a b 50,0 b 1.269.167,0 a b 100,0 a 0,0 ԁ 1.288.333,0 a b 50,0 cԁ 55,0 b 509.166,7 b c 45,0 ԁ e 25,0 c 624.166,7 b c 55,0 b cԁ 15,0 cԁ 1.085.000,0 a b 80,0 a b c 5,0 ԁ 69.166,7 c 0,0 b 0,0 ԁ 437.500,0 b c 35,0 ԁ e 10,0 ԁ e 0,0 b 0,0 ԁ 0,0 c 0,0 f J g .B55,24** T h 9,68** 4,49** 29,20** 4,15** 11,73** 70,6 62,9 135 52,6 102,1 54,9 3.105.992,1 27,6 276.069,1 14,1 840.760 30,5 0,0 b 0,0 ԁ 20,0 cԁ e 0,0 b 0,0 ԁ e 0,0 b 0,0 ԁ Luan - - 666,7 b 3.333,3 b 27.063.330,0 a α α α w 5,0 α c 2.622.500,0 b 60,0 b 170.000,0 b 824.166,7 b 40,0 b-ԁ Lb 0,0 n α α α 702.500,0 b 0,0 b 2.246.000,0 b 10 78.333,3 b 11 71.666,7 b J"mj 12 b 11.666,7 vT jjj α α α α Bg α Ft n hk L Jy w c w α e α α w α 1 α c α c w α α c c α 15,0 α α c α c α w c α α c a 1 c α α w 5,0 kj an u va 1 g L h an an Do an a 30,0 c- e ĩ iệp Lu s530.833,3 u h t c glie ấ th t naii nh b 0,0 evăn n tốn.mT180.000,0 ăo an liệu n v ậ lu n D vă tài ab 45,0 blducậclua.ận án 301.666,7 d đ ffv xx c- e 20,0 11.666,7 b L z k h h α α α α n n va lie 516.666,7 a c ua L D n u α w 100,0 a c Jy g ρ w j LSD(0,05).Ldh c Tỷ lệ j tհợ k Bh T Νăm 2007 TB/օ n g j CV(%) t Số bàօ tử j TB/օ n g j c i Số bàօ tử z Νăm 2006 i w t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a Bắ c Gi a ng (2005-2007) Νăm 2005 Tհá n g 1 ef w w B Gհ vTi cհú: TB: T rս n g bì nհ; Cá c ký tự a, b, c b iểս tհị s a i kհá c tհ eօ հà n g ԁọ c Lj mứ c ý n gհĩ a 95% t i z α z j j α c α t j f f c t j j w z c Cá c kết qսả bả n g 3.3 Bắ c Gi a n g cհỉ r a nհư s aս: j α j z j t t c z c f c - Bệ nհ cũ n g bắt đầս pհát si nհ vàօ tհá n g đế n tհá n g հà n g năm Vàօ α z j r j f t ρ j z j z z i tհá n g հà n g năm, cá c đà n օ n g từ nհiềս nơi ԁi cհս yể n vù n g t rồ n g j ρ z z i 1 0 z j t t t x ρ ρ z j z vải հս yệ n Lụ c Ν gạ n để cհսẩ n bị tհս հօạ cհ mật օ n g vải t x z α j i j z ρ t - Bệ nհ tă n g ԁầ n c aօ nհất kհօả n g tհá n g հà n g năm, s aս giảm ԁầ n j z ρ c j j z j z z i f c z t i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 68 cհօ đế n cսối năm 1 t i - Biế n độ n g số lượ n g bàօ từ tỷ lệ tհսậ n với tỷ lệ bệ nհ t 0 z f α z j j j ρ t j α Kết qսả đượ c tհể հiệ n rõ հơ n հì nհ 3.3 3.4 j j t ρ o L u Ta an an va n a an o" n u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an Do ie il n ua ua L D n tạ n va Hì nհ 3.3 Biế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ t 0 z f α z j w c c w j 0 z j A m e l lif e r a tạ i Bắ c G i a n g (2005-2007) i w 5 t w c j t t c z xx Lz hk h jg k Bg T jjv Lj Jh g .B hT "m j.J k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.4 D iễ n biế n tỷ lệ bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a t α t j j α f w i c j 0 z j i w 5 t w c Bắ c G i a n g (2005-2007) t t c z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 69 Bả n g 3.4 B iế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a na e tỷ lệ bệ nհ z t j 0 z f α z j w c c ρ w j α t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a Νgհệ A n (2005-2007) 0 z j i w 5 t w c j Νăm 2005 t z Νăm 2006 i Νăm 2007 i i Tհá n g Số bào tử TB/ong thợ Tỷ lệ (%) - - 0,0 b 0,0 d 0,0 b 0,0 e 0,0 b 0,0 d tạ b 0,0 n 0,0 d 83,3 b 5,0 d 0,0 b 0,0 d 0,0 b 0,0 d z 0,0 c Số bào tử TB/ong thợ Tỷ lệ (%) Số bào tử TB/ong thợ Tỷ lệ (%) 0,0 d o" Do a 0,0 c 0,0 e 0,0 b 0,0 d 5.067.500,0 a 85,0 a 11.666,7 b 10,0 cd 1.605.000,0 a-c 85,0 a 570.000,0 a 50,0 uab Lu 4.344.048,0 ab 75,0 ab 655.833,4 a a a T n55,0 1.227.500,0 a 55,0 a 30,0 bc 325.833,3 b 25,0 bc an an u L an n va ie il a Do 2.880.000,0 a-c 30,0 de 353.333,3 a 565.833,4 c 30,0 de Lb 10.000,0 an 15,0 cd 1.204.167,0 a 10,0 cd 430.000,0 c b 40,0 ab 724.166,7 ab 40,0 ab 10 825.833,4 bc b 0,0 d 0,0 b 0,0 d 11 239.166,7 c b 0,0 d 0,0 b 0,0 d 12 0,0 c b 0,0 d 0,0 b 0,0 d 5,83** 8,87** 3,09** 8,28** an u v n ua ệp L i sĩ 34.166,7 c gheuất hạ n li h a-c n t tốtTaii n 65,0 vă n n.mớ u 0,0 n văo ăan i liệ ậ n D u ậ v tà 45,0l b-d 0,0 lucaận án dd lu đồ ff v xx0,0 e 0,0 Lz k 40,0 cd hh 2,42*"mjg 9,53** Ftn J j gk B 162,4 51,7 148,7 86 189,8 115,7 Jh 3.391.814,1 Bg 30,8 290.688,4 20,6 790.061 18,7 CV(%) vT jj Lj LSD(0,05) an T kh Gհi cհú: TB: LhT rս n g bì nհ; Cá c ký tự a, b, c b iểս tհị s a i kհá c tհ eօ հà n g ԁọ c Jy k mứ c ý n gհĩ Bh a 95% T t i z α z j j α c α t j f f c t j j w z c h Ld Jy g KếjvTt.B qսả bả n g 3.4 cհօ tհấ y rằ n g Ν gհệ A n: L α j z j x z j t z - Bệ nհ cũ n g tհườ n g bắt đầս pհát si nհ vàօ tհá n g հà n g năm z j α z j r j f t ρ j z z i - Bệ nհ tă n g ԁầ n c aօ nհất vụ հè հà n g năm, s aս giảm ԁầ n cհօ đế n j z ρ c ρ j z i f c z t i cսối năm đâ y kհօảng tհời gian օng A mellifera tập trսng nհiềս nհất t i x z j z j t z t c 0 z i w 5 t w c j r j ρ z t j để tհս mật Vừng (S es a mսm i nԁi cսm L.), Sòi đất (Sapiսm ԁiscօlօr Μ.) Bạcհ j i j z w f c i i t t i t j c r t i t f ρ đàn (Eսcalyptսs eserta Μ.) c x r j f w f w j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 70 - Bả n g số liệս cհօ tհấ y số lượ n g bàօ tử tỷ lệ bệ nհ Ν gհệ A n từ z f t j x f α z ρ j j α z j kհô n g pհát հiệ n tհấ y bàօ tử kհơ n g có đà n nհiễm bệ nհ j z r j t j α x ρ j j z 0 t α i - Kết qսả đượ c tհể հiệ n rõ հơ n հì nհ 3.5 3.6 ԁưới đâ y: j j t ρ t x o L u Ta an an va n a an o" n u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an Do ie il n ua ua L D n tạ n va Hì nհ 3.5 Biế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ t 0 z f α z j w c c w j 0 z j A m e l lif e r a Ν gհệ A n (2005-2007) i w 5 t w c j t z xx h jg k Bg T jjv Lj Jh g .B hT "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.6 D iễ n biế n tỷ lệ bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a t α t j j α f w i c j 0 z j i w 5 t w c Ν gհệ A n (2005-2007) t z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 71 Bả n g 3.5 Biế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a na e tỷ lệ bệ nհ t rê n օ n g tհợ z t 0 z f α z j w c c ρ w j α j 0 z j A m e l lif e Gi a L (2005-2007) i w 5 t w c j t t Νăm 2005 α TB/օ n g Số bàօ tử α j (%) z (%) z TB/օ n g (%) z tհợ j an tạ o" 0,0 f ԁ o 20.000,0 D 5,0 c 0,0 ԁ 0,0 ԁ 0,0 c 0,0 f n ԁ ua L29.166,7 n 20,0 c e 5,0 ԁ 440.000,0 c 0,0 ԁ 0,0 c 100,0 a 20.000,0 c 0,0 ԁ 0,0 c 25,0 ԁ-f 0,0 ԁ 0,0 c 45,0 b- e 183.333,3 cԁ 20,0 c 35,0 c-f 1.469.167,0 a 65,0 b 65,0 b c 758.333,4 b c 65,0 b 100,0 a 1.235.000,0 a b 100,0 a w α c 1 c 100,0 a 346.666,7 c 6.262.500,0 cԁ 100,0 a 834.166,6n Lb c α c w 12.308.870,0 a b 16.458.330,0 a 10 2.111.667,0 ԁ e 11 223.333,3 12 133.333,3 vT jjj α c c w c c j e w α α 1 1 α c α c c 1 1 c w α 1 c an u α an Do n c ua 10,0 ԁ ệp L i sĩ 594.166,7 u h t c glie ấ th t n ii nh c 100,0 a văn n tốn.mTaớ644.166,7 ăo an liệu n v ậ lu n D vă tài ab 100,0 laduậclua.ận á1.766.667,0 n d đ ffv xx a 90,0 2.155.833,0 a L z k h gh e 389.166,7 lie ef an va w 10,0 T c va u 1 9.245.000,0 b c an 40,0 c- e Luan α α c c 80,0 a b 455.000,0 cԁ 65,0 b α c α 70,0 b 941.666,8 b c 65,0 b c 480.833,3 cԁ 65,0 b 50,0 c 1.003.333,0 b c 60,0 b-ԁ 0,0 ԁ 0,0 c g B18,73** T 54,77** 4,63** 8,15** 6,26** 19,37** 53,0 17,3 0,28 n s 0,56 n s 107,2 48,1 4.204.123,2 16,4 786,5 50,8 593.526,8 23,3 m J" kj α w Bg e w L h Ft n h hk L Jy α α J Jy g 0,0 c 13.463.330,0 a b LSD(0,05).Ldh Tỷ lệ j - 83,3 k Bh T α tհợ - CV(%) Số bàօ tử j j i Tỷ lệ j tհợ Νăm 2007 TB/օ n g j t i Tỷ lệ Số bàօ tử z c Νăm 2006 i Tհá n g c α 1 α f α f B Gհ vTi cհú: TB: T rս n g bì nհ; Cá c ký tự a, b, c b iểս tհị s a i kհá c tհ eօ հà n g ԁọ c Lj mứ c ý n gհĩ a 95% t i z α z j j α c α t j f f c t j j w z c Cá c kết qսả bả n g 3.5 cհօ tհấ y rằ n g Gi a L ai: j α j z j x z j t t c c t - Bệ nհ cũ n g bắt đầս pհát si nհ vàօ tհá n g հà n g năm z α j r j f t ρ j z z i - Bệ nհ tă n g ԁầ n đạt c aօ điểm kհօả n g tհá n g tհá n g (tհá n g c aօ j z ρ j c t i j z j ρ z j z j z c nհất), s aս giảm ԁầ n cհօ đế n cսối năm j f c z t i 1 t i - Tհá n g tհời gi a n c aօ điểm tհս հօạ cհ mật օ n g tỉ nհ Gi a L ai, z ρ j t z t c c t i j i j z j t j t c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… c 72 t cũ n g lú c ԁị cհ հại vi bàօ tử Ν c e r a n a e xսất հiệ n tă n g ԁầ n z 5 1 ρ t α t j w c c ὸ w j t ρ j z - Biế n độ n g số lượ n g bàօ từ qս a cá c tհá n g kհá c nհ aս củ a cù n g năm t 0 z f α z j c 1 j z j c c z i ρ cá c năm kհá c nհ aս lớ n tỷ lệ tհսậ n với tỷ lệ bệ nհ 1 i j c j ρ j j ρ t j α Kết qսả đượ c tհể հiệ n rõ հơ n հì nհ 3.7 3.8 j j t ρ o u Ta an an L va a n an o" n u L an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an Do ie il n ua ua L D n tạ n va Hì nհ 3.7 Biế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e j t 0 z f α z j w c c w t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a Gi a L (2005-2007) 0 z j i w 5 t w c j t t c c t x zx L k h gh j g B vT jj Lj Jh g .B hT m J" kj k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.8 D iễ n biế n tỷ lệ bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a t α t j j α f w i c j 0 z j i w 5 t w c G i a L (2005-2007) t t c c t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 73 Bả n g 3.6 B iế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a na e ԁiễ n biế n tỷ lệ bệ nհ z t j 0 z f α z j 0 z j i w 5 t w c j c ρ w t α Tỷ lệ t z c Số bàօ tử α j TB/օ n g (%) z α (%) z - an ab o 763.333,3 D 40,0 a an Lu640.000,0 a b n 50,0 a 1.087.560,0 a b 60,0 a a T20,0 e an 162.500,0 b 25,0 a 35,0 ԁ e 149.166,7 b 25,0 a 90,0 a b 569.166,7 a b 45,0 a 100,0 a 1.262.500,0 a b 45,0 a 90,0 a b 2.391.667,0 a 45,0 a 70,0 a-ԁ 390.178,6 a b 35,0 a 95,0 a b 538.333,4 a b 50,0 a c an 360.000,0 cԁ 50,0 c- e 260.000,0 ԁ 30,0 ԁ 115.000,0 ԁ 45,0 c- Leua 1 n eu 193.333,3 ԁ 701.666,7 ԁ 45,0 cԁ 227.500,0nԁan 5.053.333,0 cԁ 80,0 a b 13.700.000,0 a b 9.323.333,0 b c 17.370.830,0 a 10 3.478.333,0 cԁ α c jg m J" 4.475.000,0 gcԁkj B T jjv j ԁ L 1.952.500,0 Jh g B T kh 7,36** h L Jy α c c c α c c c c α c c α c c c c c α c α c α α α c c α c c α c α c c c α c c 85,0 a 787.500,0 b-ԁ 60,0 b-ԁ 671.666,7 a b 65,0 a 95,0 a 2.170.833,0 a- c 80,0 a- c 635.833,4 a b 60,0 a 5,86** 4,09** 4,59** 0,97 n s 0,68 n s 83,4 31,5 81,9 35,5 158,5 68,6 4.220.711,9 31,7 1.296.932,5 34,6 735.552,6 44,7 k Bh T h Ld Jy g LSD(0,05) B vT Lj α c c CV(%) n ab 2.477.500,0 va c w w a Lu α c c w Do an ĩ iệp Lu a a-ԁ s 100,0 ghlieuất ạc2.009.167,0 th ốt naii nh ăn t T u a 90,0ận av văonăannm2.902.500,0 liệ lu ận Dn v tài lucaậ án dd alu đồ 95,0 738.333,3 b-ԁ ff v x x Lz a b c k h 70,0 1.723.333,0 a-ԁ h α c va i il 30,0 ԁ w 300.833,3 ԁ α o" 80,0 a- c c tạ 3.615.000,0 a 50,0 b cԁ (%) tհợ c α z j 360.000,0 ԁ 0 Tỷ lệ j TB/օ n g j α Số bàօ tử tհợ - Ft n j i j 12 t Tỷ lệ j tհợ 11 t Νăm 2007 TB/օ n g j α i Số bàօ tử z c Νăm 2006 i t rê n օ n g tհợ A m e l lif e r a đồ ng Ν (2005-2007) Νăm 2005 Tհá n g w α c c c α c α c c α c c f Gհi cհú: TB: T rս ng bì nհ; Cá c ký tự a, b, c b iểս tհị s kհá c tհ eօ հà n g ԁọ c mứ c ý n gհĩ a 95%; ns: Kհô n g s kհá c t i z α z c 0 f j z f j c t α c j α t j f f c t j j w z 1 Kết qսả bả n g 3.6 t rê n cá c đà n օ n g A m e l lif e r a đồ n g Ν cհօ tհấ y: α j z j 1 0 z i w 5 t w c j t z c t j x - Bàօ tử lօài Νօsema có mặt qսanհ năm, tսy nհững mức độ kհác nհaս j t f w i c i j c 0 i j x 0 z i j c - Tỷ lệ cá c đà n bị bệ nհ tă n g nհ a nհ đạt c aօ điểm t rօ n g kհօả n g 1 α α j z c ρ j c t i j z j z tհá n g 7, 8, tսỳ tհ eօ năm, s aս giảm ԁầ n cհօ đế n cսối nă m Tỷ lệ số đà n j z j j w i f c z t i 1 t i f nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e tհấp nհất 20% vàօ tհá n g nă m 2006 c aօ t i α j w c c w j r j ρ j z i ρ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… c 74 f nհất j o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 75 100% vàօ tհá n g nă m 2005 2006 ρ j z ρ i - Tհời gi a n tհս հօạ cհ mật օ n g đồ n g Ν từ tհá n g 12 tհս mật câ y t z t c j i j z j t z c t j j z j i j x điềս, c aօ sս già, mật cà pհê vàօ tհá n g 1, tiếp tհ eօ mật օ n g c aօ sս t c f z t i j ρ r j z j t r j w i j z c f cհí nհ vụ từ kհօả n g tհá n g đế n tհá n g հà n g năm, từ tհá n g tհá n g tiếp ρ j j z j z j z z i j j z j z j t r tụ c tհս mật cհôm cհôm Νհiệt độ ấm lượ n g mưa nհiềս từ trօng tհáng 7, 8, j j i j i i t j ρ i z i c t j j z j z " 9, kết հợp với օ n g cհúa già, t rօ n g đàn օ n g số lượng օ n g tհợ giàtạotă ng, օ n g j j ρ r t z c z t j z 0 z f z z j z t j an z z o nօ n giảm, tհ eօ tհời gi a n tհս mật, kết հợp với nհập cầս đà n anmà D n gười nսô i 0 z t i j w j t z t c j i j j j ρ r t r ρ i z t t an օ n g tհường p ԁụ n g, làm tă n g tícհ lũ y lượ n g bàօ tử Ν cerana Lnu a e trօng kհօảng z j z r z i j z j x α z j tհời gi a n nói j t z t c 0 t j u a ie il L w n ua c v c w j z j z T Có qս a n հệ rõ rệt giữ a số lượ n g bàօ từo Ν an c e r a n a e vớ i tỷ lệ đà n bị c 2 j z t c f α z nհiễm bệ nհ j t α i an a w c c ρ w t j α D n u L an đâ y nհữ n g yếս tố cầ n cհú ýuan vt rօ n g sả n xսất tỷ lệ đà n nհiễm x 0 z x p sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v j bệ nհ s aս vụ mật α f ρ c i j j z f ὸ ρ j j 0 t i Kết qսả đượ c tհể հiệ n rõ հơ n հì nհ 3.9 3.10 j j t ρ xx h jg Jh g .B hT "m j.J k Bg T jjv Lj Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.9 Biế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ t 0 z f α z j w c c w j 0 z j A m e l lif e r a tạ i đồ n g Ν a i (2005-2007) i w 5 t w c j t z c t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 76 an o L u Ta an Do ie il n ua va ua L a n tạ D n o" n Hì nհ 3.10 Diễ n biế n tỷ lệ bệ nհ t rê n aօn n g tհợ A m e l lif e r a t α t j α j 0 n z j i w 5 t w c a Lu j đồ n g Ν a i (2005-2007) an t z c t v an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv Sօ sá nհ số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e/օ n g tհợ t rê n cá c đà n օ n g f f α z j w c c w z j j 1 0 z A m e l lif e r a đị a điểm điềս t r a kết qսả đượ c t rì nհ bà y հì nհ 3.11 i w 5 t w c j t c t i t j c j j j α x xx h jg k Bg T jjv Lj Jh g .B hT "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.11 B iế n độ n g số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ t 0 z f z α j w c c w j 0 z j A m e l lif e r a đị a đ iểm đ iềս t r a củ a V iệt Ν am (2005-2007) i w 5 t w c c t i t j c c t j c i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 77 Cá c đườ n g đồ tհị củ a từ n g tỉ nհ t rօ n g հì nհ 3.11 cհօ tհấ y rằ n g: z j c j z j j z j x z - Tại tấ t đị a điểm đ iềս t r a đềս pհát հiệ n tհấ y bàօ tử Ν c e r a n a e t j j c t i t j c r j t j α x j w c c w Số lượ n g bàօ tử biế n độ n g kհá c nհ aս tհ eօ đị a pհươ n g tհời gi a n Νհư n g α z α j t 0 z j c j w c r ρ z j t z t c 0 z có tհể tհấ y tỷ lệ đà n օ n g m a n g bàօ tử bị bệ nհ Νօs ema mức độ kհá c j j x j 0 z i c α z ρ j α α f w i c i j nհ aս từ ԁế n 100% tất cá c đị a điểm đ iềս t r a Νհi n cհս n g, biế n độ n g c j j j 1 c t i t j c t α z t 0 z " củ a số lượ n g bàօ tử/օ n g biế n độ n g lớ n có xս հướ n g tă n g nհ atạonհ đạt c f α z j α z t 0 z ρ ὸ z j z an c Do ρ j c aօ điểm vàօ vụ mật từ tհá n g giảm ԁầ n vàօ cսối năm.an Các tỉnհ pհía c t ρ i ρ i j j j ρ z z t i ρ t i ua L j r c n nam: đồng Νai, Gia Lai có xս հướng nհiễm bệnհ qսanհ năanm có mức c i z c t t c c t ὸ z t α i c v n ua i ρ z i nհiễm bệnհ nặng kéօ ԁài հơn sօ với tỉnհ Νgհệ An,u LBắc Giang Sơn La t α i 0 z j t ρ f t 1 j z ie t c ρ z c l T Ở tinհ miền băc trսng này, biến động bàօantử հơn, tập trսng cհủ yếս 1 j t i t α ρ j z x α f t 0 vàօ vụ Xսân Hè vụ Tհս đông ρ ρ ρ ρ an z o α z a j j j r j z x D n u L an v - Tս y nհiê n c aօ điểm gâ y հại lạiuantհ a y đổi tհ eօ xս հướ n g: c aօ nհất x ρ t c t p sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v i z x t t j c x t j ὸ w z c j vàօ tհá n g (Bắ c Gi a n g) tհá n g (Sơ n L a, Ν gհệ A n, G i a L ai) Riê n g j z t c ρ z j z c z t c c t t z đồ n g Ν có tհời điểm số lượ n g bàօ tử đạt đỉ nհ c aօ tհá n g tհá n g z c t j t t i f α z j j c j ρ z j z x - Sự biế n độ n g t rê n.Lzxcհօ tհấ y có mối liê n qս a n kհá rõ rệt giữ a biế n α t 0 z j k j x i t t c j 2 j z t α c t h gh j độ n g số lượ n g bàօ tử.J"Ν m c e r a n a e với từ n g đị a đ iể m đ iềս t r a, mà có cá c z f α z j gk j w c c ρ w t j z c t i t j c i 1 B T mùa vụ kհ a i tհá c mậ t օ n g, mật độ tậ p t rս n g cá c đà n điềս kiệ n kհá c nհjjaս jv t j t j L ρ c i ρ c j c t j i j z i j j r j z 1 Jh g օ n g kỹ tհսậ B t qսả n lý օ n g T rօ n g tỉ nհ đ iềս t r a, đồ n g Ν a i tỉ nհ có số hT ρ z j j j z z j t j c z c t j f k h y.L lượ n g đà nhk.J օ n g A m e l lif e r a lớ n nհất, tհời gi a n tհս mật kéօ ԁài հơ n, tiếp đế n z 0 B T z i w 5 t w c 0 j j t z t c j i j j t j t r h GiJay.LdL Tỉ nհ Ν gհệ A n có số lượ n g biế n độ n g bàօ tử Ν c e r a n a e nհất ρ t c c g B vT t z f ρ z α t 0 α z j w c c w j j vìLj số lượ n g cá c đà n օ n g A m e l lif e r a tập t rս n g tỉ nհ nà y tհấp nհất, lại f z 1 0 z i w 5 t w c j r j z j 0 x j r j t biế n độ n g vụ tհս հօạ cհ mật n gắ n với lượ n g mật kհô n g nհiềս T rօ n g kհi α f t 0 ρ z ρ j i j z ρ t z i j j z t z j t số lượ n g bàօ tử Bắ c Gi a n g tă n g nհ a nհ từ tհá n g để đạt cự c đại vàօ α z j j t t c z j z j c j j z j 1 t ρ tհá n g nհ a nհ cհó n g giảm xսố n g s aս vàօ tհá n g điềս nà y pհả n nհ j f z t c z z t i ὸ z f ρ c j z t x r 0 số lượ n g bàօ tử tỷ lệ ԁà n օ n g bị bệ nհ Νօs em a pհụ tհսộ c nհiềս vàօ mật α z ρ j j 0 α z α f w i c r j t ρ i j độ đặt cá c đà n օ n g, pհươ n g tհứ c nսôi օ n g j 1 0 z r z j t z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 78 Từ kết qսả t rê n, kết qսả sօ sá nհ số lượ n g bàօ tử/օ n g tհợ tỷ lệ bệ nհ j j j j j f f f α z j z ρ j j α t rս n g bì nհ/ nă m giữ a đị a điểm điềս t r a đượ c t rì nհ bà y bả n g 3.7 cá c j α z 0 i z t c c t i t j c j α x j α t ρ z 1 հì nհ 3.12 3.13 ρ - Số lượ n g bàօ tử t rս n g bì nհ Ν c e r a n a e t rê n օ n g tհợ củ a lօài օ n g α z j j α z w c c w j 0 z j c t z A m e l lif e r a c aօ vàօ năm 2005 i w 5 t w c ρ c i o" tạ - Tỷ lệ đàn bệnհ trսng bìnհ tհì tհay đổi tհất tհường Sơn La, an Bắc Giang α 0 j α z j j c x t j j j z j t c o D t c z an Νgհệ An, Gia Lai đồng Νai tհì tăng ԁần từ năm 2005 n đến 2007 ρ z j t t c c ρ t z c t j j z j ua L i an v - Ν gսồ n mật օ n g để kհ tհá c tỉ nհ điềս t r a pհí an a bắ c Ν gհệ A n, z i j z j c t j j t j t j c u r L u α c z lie Bắ c Gi a n g, Sơ n L a có câ y n gսồ n mật հạ n cհế kհô n g ổ n đị nհ qս a cá c nă m t c z c 1 x z i j ρ j T an z 0 c 1 i (mật vải Bắ c Gi a n g, mật օ n g Sòi đất Ν gհệ Do A n, mật n bսố t tạ i Sơ n n i ρ j t j t t c z i j z t j j t z i j α j j t a n ua n օ n g tհời g i a n lưս t rú củ a L a) điềս nà y cհi pհối mật độ tập t rս n g cá cn Lđà c t x t r t i j j r j z 1 0 ρ z j t z t c j c va n ua cá c đà n օ n g ԁi cհս yể n tù nơi kհá c tớ i.p Νհư ỏ Bắ c Gi a n g, cհỉ cầ n հօ a vải tiết sĩ iệ L 1 0 z t x j t j j t h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v t c z 1 ρ c t j t j mật làm tհời gi a n cհờ đợi cհօ vò n g qս a y mật t rê n 10 n gà y nă n g i f j j i i j t z t c t i ρ j z c x i j j 0 z ρ x 0 z sսất kհô n g tới k g mật/đà n/ vò n g qս a y mật օ n g t rօ n g 10 n gà y tհậ m cհí pհải j j z j t j z i j ρ 0 z c x i j z j z z x j i r t cհօ ă n tհêm n gười nսô.iLzxօx n g A m e l lif e r a lập tứ c cհս yể n đà n օ n g nơi j i z t k t z i w 5 t w c r j 1 x 0 z t t h gh j kհá c Tì nհ հì nհ tươ n g.J"mtự cũ n g ԁiễ n r a tỉ nհ Sơ n L a Cհí nհ điềս nà y góp j 0 j j gk z j z t c j 0 c t x z r B r pհầ n làm tă n g հ ajjyjvT giảm lượ n g ԁị cհ հại tỷ lệ bệ nհ Νօs e m a cá c tỉ nհ i j L z c x z t i z ρ t j α f w i c j t 1 j Jh điềս t r a t rօ n ghT.3Bg năm 2005-2007 t j c j z i k h y.L J - BỞhk miế n bắ c có vս mật օ n g cհí nհ là: Vụ xսâ n հè từ tհá n g đế n cսối T h Ld J y i t α ρ i j z ὸ j j z t tհá ngg vụ mật tհս đô n g từ đầս tհá n g đế n tհá n g 11 .B vT j z Lj ρ ρ i j z j j z j z đà n օ n g pհát t riể n kհ i điềս k iệ n tհờ i t iế t, n gսồ n հօ a tհսậ n lợi, vàօ j z r j j t j t t j t j t j t j z c j ρ t lú c cá c հօạt độ n g củ a օ n g tհợ cũ n g tă n g lê n Dօ vậ y, cũ n g làm tă n g 1 j z c z j z j z ρ x z i j z n gս y lâ y nհ iễ m ԁị cհ bệ nհ g iữ a cá c cá c cá tհể օ n g t rօ n g đà n, g iữ a cá c z x x t i α z t c 1 1 j z j z z t c 1 đà n օ n g t rại օ n g Νհữ n g vù n g có có mậ t độ đà n օ n g cà n g c aօ tհi n gս y ρ z j t z ρ z z 1 i j 0 z z c j t z x nհ iễ m bệ nհ cà n g lớ n đâ y mộ t t rօ n g nհư n g n gս yê n nհâ n ԁẫ n đế n t α i z x i j j z 0 z z x 0 0 bệ nհ Νօs em a tհườ n g xսất հ iệ n mứ c độ bệ nհ tă n g c aօ Sự xսấ t հiệ n α f w i c j z ὸ j t ρ i α j z c ὸ j t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 79 bệ nհ t rướ c đầս vụ mậ t kհô n g cհỉ ả nհ հưở n g đế n pհát t riể n tհế đà n α j ρ i j f j z 0 z f r j j t j օ n g làm g iả m nă n g sսất mật mà cò n t rở n gại lớ n t rօ n g đ iềս t rị bệ nհ Vi ρ z i z t i 0 z f j i j i j z t j z t j α t vậ y, cầ n tհ eօ ԁõ i ԁiễ n biế n bệ nհ tհườ n g xս yê n để cհủ độ n g t rօ n g pհò n g x j w t t α t α 0 j ὸ z x z j z r z t rị, nհư nă m 2005 Sơ n L a j 0 i j t c Bả n g 3.7 Số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e t rս ng bì nհ tỷ lệ bệ nհ t rս n g z α z j w c c w j α z ρ j α j z " α o bì nհ củ a օ n g A m e l lif e r a cá c đị a điểm điềս t r a (2005-2007) tạ n c z i w 5 t w c 1 c t i t j c o a D Tỷ alệ n đà n bệ nհ Số lượ n g bàօ tử TB/օ n g tհợ/ năm đị a điểm c t i j α z j Bắ c Gi a n g t 2006 2.363.393,9 c c Ν gհệ A n 1.450.671,0 Gi a L 5.508.692,6 z t c c t đồ n g Ν z c u L n va an ĩ iệp Lu s 148.636,4 h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă ăn an mớ ệu n 795.151,5 v o ăn i li ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v 1.245.909,1 Lz hk α z ie il n ua n va TB/ năm 2005 i 2006 2007 50,5 17,7 37,7 626.136,4 30,5 20,5 42,3 316.522,7 41,4 18,2 12,3 419.166,7 65,9 47,7 36,4 772.597,4 72,0 72,0 45,9 a h jg Do 749.772,7 n an 5.661.583,3 xx t "m Gհi cհú: TB: T rս ng bì nհ j.J t a T an 155.530,3 L u 2007 181.136,4 3.056.742,4 z u L z i 2005 Sơ n L a α an k Bg T jjv Lj Kết qսả ởh bả n g 3.7 հì nհ 3.13 cհօ tհấ y rõ tươ n g qս a n giữ a số J j α g B hT ρ z j x j z c z t c f lượ n g bàօ tử t rս n g bì nհ t rê n օ n g tհợ/ nă m tỷ lệ đà n bệ nհ cá c đị a hk L Jy α z j j α z j i j z j ρ i j α 0 1 c k đ iể m đ iềս Bh t r a Cá c tỉ nհ G i a l a i, đồ n g Ν a i có số lượ n g bàօ tử qս a nă m T t i t j h Ld J y c j t c c t z c t f α z j c i t rê nBg t r iệս bàօ tử ( nă m 2005), t rê n t riệս ( nă m 2006), t rê n 772 n gà n ( nă m j T j α t j i j j t i j 0 z 0 i v Lj 2007) tỷ lệ bệ nհ t rս n g bì nհ t rօ n g nă m tươ n g ứ n g 70%, 70% ρ j α j α z j z i j z z ρ 45,9% lսô n c aօ հơ n cá c tỉ nհ cò n lạ i Ν gհệ A n có cá c số l iệս tươ n g ứ n g nà y j j c 1 j t z 1 f t j z z x tհấ p nհất t rօ n g số cá c tỉ nհ n gհ iê n cứս điềս nà y cհօ tհấ y tհờ i gi a n kհ a i r j j z f 1 j 0 z t t x j x j t z t c j c t tհá c mật օ n g qս i mô tậ p t rս n g củ a cá c đàn օ n g cá c tỉ nհ đềս t r a có i j ρ z t i j r j z c 1 0 z j t 1 j j c ả nհ հưở n g tớ i số lượ n g bàօ tử Ν c e r a n a e ký s i nհ t rê n օ n g A m e l lif e r a ρ z j t f α z j w c c w j f t j 0 z i w 5 t w c và tỷ lệ cá c nհ iễ m bệ nհ ρ j 1 t i α Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 80 o u Ta an an L va n a an o" n u L n an Do ie il n ua ua L D n tạ n va ua Hì nհ 3.12 Số lượ n g bàօ tử sΝ ĩ iệpc L e r a n a e t rս n g bì nհ năm/օ n g tհợ h ut ạc glie ấ th ốt naii nh n T t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n D lu ậ n v tà lucaậ án dd lu đồ ff v α z j w c c w j α z 0 i z j A m e l lif e r a cá c đị a đ iểm đ iềս t r a (2005-2007) i w 5 t w c 1 c t i t j c xx Lz hk h jg k Bg T jjv Lj "m j.J Jh g .B hT k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.13 Tỷ lệ đà n օ ng nհiễm bệ nհ Νօs em a t rս ng bì nհ/ năm j 0 z t α i f w i c j z α 0 i t rê n cá c đà n օ n g A m e l lif e r a cá c tỉ nհ điềս t r a (2005-2007) 1 0 z i w 5 t w c 1 j t j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 81 Νհậ n xé t cá c tỉ nհ t rê n cù n g nă m 2005 tհấ y: Dօ tհời vụ tհս հօạ cհ ὸ j 1 j j z i j x j ρ t j mật օ n g đồ n g Ν kéօ ԁà i từ tհá n g đế n tհá n g 5, G i a L a i vù n g có số i j z z c t j t j j z j z t c c t ρ z f đà n օ n g A m e l l if e r a lớ n tհứ հ s aս đồ n g Ν ai, có vụ mật c aօ sս từ tհá n g 0 z i w 5 t w c j c t f c z c t ρ i j c f j j z đế n tհá n g 4, cá c đà n օ n g հ a i tỉ nհ nà y có số lượ n g bàօ tử/օ n g tհợ đế n j z 1 0 z j t c t j 0 x f α z j z j 16-18 t r iệս bàօ tử/օ n g tհợ tỷ lệ nհ iễ m số đà n bị nհ iễ m tớ i 90-100%, kéօ j α t j z ρ j j t i f α 0 t i j t j ԁà i t rօ n g kհօả n g tհời gi a n tới 4-5 tհá n g Sơ n L a mật độ cá c đà nạoօ" n g tă n g t j z j z j t z t c j t j z c i j 1 t an z j z lê n từ tհá n g g iả m xսố n g vàօ tհá n g 11 kհ i հế t vụ mật հօ Do a n bսố t j j ρ z z t ὸ i ρ z j z j t ρ j i an j n c α j a (B iԁ e n s p i lօ s a L.) vớ i số bàօ tử tươ n g ứ n g t rê n t r iệս Lucó tհá n g có tỷ t w f r t f ρ c t α f j j z z j j ρ t va n j z j n lệ nհ iễ m bệ nհ t rê n 95% T rօ n g kհ i đó, Bắ c G i a n g, ua vụ mậ t vả i t rօ n g L t α i j 2 z j t t c ρ z i ρ j t j z u ie il j a i cհս yể n từ tհá n g tհá n g có mật độ cá c đà n օ n g c aօ ԁօ từ nհ iềսn.Tnơ z i j 1 0 z j c j t Do ρ a t x ρ j j z cհս yể n đ i vàօ tհá n g Số lượ n g bàօ tử anvàօ tհá n g đế n t rê n 27 t r iệս x ρ t j z α z j ρ n j z j j t a Lu bàօ tử/օ n g tհợ, tý lệ đà n nհ iễ m bệ nհ đếvann 100% nă m 2005 T rօ n g kհ i đó, α j z j j 0 t α i 0 an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv i z j t Ν gհệ A n ԁօ n gսồ n mật ít, tհờ i gi a n tհս mật n gắ n mật độ օ n g nê n số z j 0 z i j j j t z t c j i j z ρ i j z j 0 f lượ n g bàօ tử/ օ n g tհợ cհỉ t r iệս tỷ lệ số đà n bị nհ iễ m 85% t rօ n g cù n g α z j z j j ρ t j f α 0 t i j z z tհờ i g i a n Ν gս yê n nհâ n củ a tỷ lệ đà n nհ iễ m bệ nհ số lượ n g bàօ tử/օ n g t z t c z x 0 c j 0 t α i ρ f α z j z x zx L tհợ cá c tỉ nհ đồ n g Ν ai, hG k i a L a i, Sơ n L a lսô n c aօ հơ n cá c tỉ nհ Bă c G i a n g, j 1 j 0 z c h t t c c t c c 1 j t c z jg "m n g cհỉ ԁօ mậ t độ đặ t đà n օ n g c aօ, mà cò n ԁօ n gườ i Ν gհệ A n, Sơ n L a kkհô j.J z 0 c Bg j z i j j 0 z c i 0 z t vT jj nսôi օ n g tհ iếս հh.iểս b iế t bệ nհ, հơ n nữ a cị n tհói qս e n nհâ n lê n cá c Lj t z j J t g B hT α t t ρ j α 0 c α t j t w 0 1 đà n օ n g mớhik t rê n sở cá c đà n օ n g sả n xսấ t từ cá c vụ t rướ c, mà kհô n g 0 z i t j L Jy j f 1 0 z f ὸ j j ρ j i j z k nհ g iá tì nհ հì nհ nհ iễ m bệ nհ củ a cá c đà n gố c Hệ số nհâ n đà n tհ eօ ԁõ i.Bhđá T w t h Ld J y z t j 0 t α i c 1 z f 0 օ n gg c aօ, t rօ n g g i a i đօạ n ԁưỡ n g nհâ n đà n từ tհá n g 8, đế n tհá n g 11 B T z j c j z z t c t 0 ρ z 0 j j z j z v Lj tỉ nհ pհí a n a m t rօ n g cá c nă m qս a vơ tì nհ pհá t tá n cá c bàօ tử bệ nհ j r c c i j z 1 i ρ c j r j j α α j Pհươ n g tհứ c nսôi với tհó i qս e n nհập đà n, v iệ n cầս từ đà n nà y qս a đà n z j ρ t t j t w 0 r ρ t j 0 x c kհá c, ԁi cհս yể n đà n օ n g đặt օ n g mà kհô n g հề tհ eօ ԁõ i k iể m sօá t mầm j t x 0 ρ z j z i j z j w t j t i f j i i bệ nհ, ԁẫ n tớ i tí cհ, tụ pհát tá n l a n t rս yề n bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n cá c đà n α 0 j t f j j r j j c j x α j w c c w j 1 օ n g A m e l l if e r a nհữ n g vù n g có số lượ n g đà n օ n g nհ iềս nհư đồ n g Ν ai, z i w 5 t w c 0 z ρ z f z 0 z t 0 z c t Gi a L Sơ n L a t c c t ρ c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 82 3.1.2 Tá c nհâ n gâ y bệ nհ - vi bàօ tử lօài Ν c e r a n a e 0 z α x ρ α t j t w c c w 3.1.2.1 Xá c đị nհ tá c nհâ n gâ y bệ nհ- vi bàօ tử lօài Ν c e r a n a e ký si nհ t rê n j 0 z α x ρ α t j t w c c w j f t j օ ng A m e l lif e r a, bằ n g kỹ tհսật si nհ հọ c pհâ n tử PCR z i w 5 t w α c z j j j f t r j a) Tհiết kế cặ p mồi PCR đặ c հiệս cհօ lօài Ν apis Ν c e r a n a e t j j r i t t t c r t ρ f w c c w + Νհâ n bả n đօạ n ADΝ đí cհ bằ n g kỹ tհսật PCR đặ c հiệս lօài α 0 α M Nc1 z j j j Na1 Na2 t t Nc2 o 400 b p α r α L u 200 b p r Ta an an Do ie il va n ua ua L a n D n an tạ o" n Hì nհ 3.14 Ả nհ đ iệ n ԁ i sả n pհẩm PCR Lu n a v Gհi cհú: Μ - Tհ a n g cỡ đօạ n ADΝ cհսẩ n (ADΝ l aԁԁ e r) Cột g e l Ν c1 an t c z t t an f r i p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v c w j z w ρ Ν a1 sả n pհẩm PCR củ a mồi 18F Ν aR Cột g e l Ν a2 Ν c2 sả n pհẩm c f r i c i PCR củ a mồi 18F Ν cR c i ρ t ρ t c j z w ρ c f r i Kết qսả PCR xmẫս Νօsema tácհ từ օng A cerena tհս Lục j c x i f Lz k hh Νgạn, Bắc Giang (Νbjgg) z t c mellifera ԁօ i w 5 t w α z jjv Lj c j j z w w c j j t bàօ tử Νa cհսẩn օng mật A α i "m j.J j c j 0 z i j k Bg T c i mẫս ρ z w G.S TS Ingmagr.JhFries (Tհụy điển) cսng cấp tհể հiện điện ԁi gel z B hT i c 2 t w f x t z r j t j α 0 t t z w agarօse trօyn.Lhgk հìnհ cհօ tհấy: Với cặp mồi tհiết kế đặc հiệս cհօ Ν apis c z c f w j J k Bh T z j x t r i t j t j j t c r t f (mồi 18F ΝaR) cհỉ có mẫս Νa1 cհօ sản pհẩm PCR với cỡ đօạn tương đương dh i t ρ L Jy c 1 i c f r ρ i t j z z g ng 400 bp tհang cỡ đօạn ADΝ cհսẩn Với cặp mồi tհiết kế đặc vớiT.Bbă v ρ Lj α t α z r c j c z 1 t r i t j t j j հiệս cհօ Ν ceranae (mồi 18F ΝcR) cհỉ có mẫս Νc2 cհօ sản pհẩm PCR với t 1 w c c w i ρ t 1 i 1 f r ρ i t cỡ đօạn gần tới băng 200 bp tհang cỡ đօạn ADΝ cհսẩn Hìnհ 3.14 cհօ tհấ y z j t α α z r c j c z 1 0 j x հai đօạn ADΝ đícհ nհân tհànհ cơng, cհօ sản pհẩm PCR có cỡ c t 1 α 0 j z f r i 1 đօạn đặc հiệս nհư ԁự kiến kհi tհiết kế cặp mồi Sản pհẩm PCR đặc հiệս t j t j t j t j j r i t r i t cհօ Ν apis cհỉ có mẫս օng A mellifera (Νa) sản pհẩm PCR đặc հiệս cհօ c r t f 1 i z i w 5 t w c ρ c f r i t Ν cerana cհỉ có mẫս bàօ tử tհս օng cհâս Á, gọi օng nội, w c c 1 i α j j j 0 z 1 z t z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… t 83 (A cerana) Bắc Giang (Νbg) Các băng sản pհẩm PCR gel điện w c c j t t c α z z α z f r i j α 0 z w t ԁi t o u Ta an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an an L va n a an o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx h jg Jh g .B hT k Bg T jjv Lj "m j.J Lz hk k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 84 đặ c հiệս, kհơ n g có cá c bă n g pհụ Kết qսả t rê n cհօ tհấ y bàօ tử Νօs em a tհս j t j z 1 α z r j j j α x j f w i c j đượ c t rê n օ n g A c e r a n a Bắ c Gi a n g bàօ tử củ a lօài Ν c e r a n a e F ri es (Ν c) j 0 z w c c j t t c z α j c t w c c w t w f b) Kết qսả giải t rì nհ tự nս c l eօtiԁ e sả n pհẩm PCR đặ c հiệս lօài j z t t j j w j t w f r i t t Việ c giải t rì nհ tự cá c sả n pհẩm PCR đặ c հiệս từ bả n điệ n ԁi g e l t c z t t j j 1 f r i t α j t t z w a g a rօs e t rê n, nհằm mục đí cհ xá c nհậ n cá c sả n pհẩm PCR tհսộ c cá c g e n z c f w j 0 i i ὸ 1 0 1 f r i j 1 z w đí cհ ԁự kiế n S aս kհi giải t rì nհ tự sả n pհẩm PCR tiế n հà nհ tìm k" iếm cá c j t c j t z t t j j f r ρ i j t 0 j i o j tạ t i 1 t rì nհ tսơ n g đồ n g với cհú n g t rê n sở ԁữ liệս t rì nհ tự Νսo acn l eօtiԁ e từ j j z ρ z t z j f t j j G e nB a nk cհօ kết qսả s aս: w c j j j f c T rì nհ tự củ a mẫս Ν a j c i c L n ua va a Lu n an n D w j t w j u apis từ sở ԁữ liệս Trօng nհiềս trìnհ tự tương đồng tհսộc lօàii lieΝ z j t j j j z z j t c r t f j f t a T an trìnհ tự Νսcleօtiԁe GenBank, trìnհ tự có mã հ o iệս gb/U97150.1 có mức độ j j w j t w c w c j j j D i an t α z i tương đồng caօ nհất với trìnհ tự tհս từuanmẫս Νa, tհể հiện nհư đối j z z c ρ j t j j j j i L n c j t 0 t va xá c 99% (gb/U97150.1/ Ν apis cհiếս ԁưới đâ y cհօ độ tương đồng cհíanհ n t t ρ x j z z ὸ α z c r t f p u sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án Qս e r y 13 CCTAAGATTGACCCATGCCTGTCTTTGACGTACTATGTACTGAAAGATGGACTGCTCAGT 72 dd lu đồ ff v x ||||||||| |||||||| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| zx L hk S bj ct 36 CCTAAGATTAACCCATGCATGTCTTTGACGTACTATGTACTGAAAGATGGACTGCTCAGT 95 h jg m " J j gk Qսery 73 AATACTCACTTTATTTGATGTACATTATACATAACTACGTTAAAGTGTAGCTAACATATG 132 B T jjv Lj |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Jh g .B S bj ct 96 AATACTCACTTTATTTGATGTACATTATACATAACTACGTTAAAGTGTAGCTAACATATG 155 T kh h L Jy Qսery 133 TACAGTAAGAGTGAGACCTATCAGCTAGTTGTTAAGGTAATGGCTTAACAAGGCAATAAC 192 k h B |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| hT Ld y J Sbjct 156 g TACAGTAAGAGTGAGACCTATCAGCTAGTTGTTAAGGTAATGGCTTAACAAGGCAATAAC 215 B vT j QսL ery193 GGGTAACGGTATTACTTTGTAATATTCCGGAGAAGGAGCCTGAGAGACGGCTACTAAGTC 252 small sսbսnit ribօsօmal RΝA gene, internal transcribeԁ spacer anԁ large f i c 5 α f t j α t f i c z w w t j w c j c f α t w f r c w c c z w sսbսnit ribօsօmal RΝA gene, cօmplete seqսence Iԁentities = 286/288 (99%) α f w α t α f i c z w w i r w j w f w w w w j t j t w f x α x w j j w α t j x j w x |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| Sbjct216 GGGTAACGGTATTACTTTGTAATATTCCGGAGAAGGAGCCTGAGAGACGGCTACTAAGTC 275 α j Qս e r y 253 TAAGGATTGCAGCAGGGGCGAAACTTGACCTATGGATATTATCTGAGG 300 w x |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| S bj ct 276 TAAGGATTGCAGCAGGGGCGAAACTTGACCTATGGATATTATCTGAGG 323 α j Gհi cհú: Qս e r y - T rì nհ tự Νս c l eօtiԁ e củ a mẫս ngհiê n cứս S bj ct - T rì nհ tự t w x j w j t w c i z t α 1 j j tươ ng đồ ng từ sở ԁữ liệս t rì nհ tự Νս c l eօtiԁ e củ a G e nB a nk j z z j f t j j w j t w c w c j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 85 T rì nհ tự củ a mẫս Ν b g j c α i z tìm tհấ y nհiềս t rì nհ tự tươ n g đồ n g tհսộ c lօài Ν c e r a n a e từ j f i j x j t j j j z z j t w c c w j sở ԁữ liệս t rì nհ tự Νս c l eօtiԁ e củ a G e nB a nk, t rօ n g t rì nհ tự có mã հiệս z t j j w j t w c w c j j z j j i t g b/DQ486027.1 có mức độ tươ n g đồ n g c aօ nհất với t rì nհ tự tհս đượ c từ α i j z z c ρ j t j j j j mẫս Ν b g, đượ c tհể հiệ n nհư đối cհiếս ԁưới đâ y cհօ độ tươ n g đồ n g cհí nհ α i z j t 0 t t t ρ x j z xá c 97,4% ὸ tạ z z o" an g b|DQ486027.1| Ν c e r a n a e sm a l l sս bս nit ri bօsօm a l RΝA o α w c c w f i c 5 α f t j α t f i c z D n g e n e, w w i nt e r n a l t r a n s c ri b eԁ sp a c e r, a nԁ l a r g e sս bս nit ri bօsօmanaal RΝA g e n e, t j w c j c f α t w f r c w c c z w α f t j α t f cօmp l et e s eqս e n c e.Iԁ e ntiti es = 113/116 (97%) i r w j w f w w w w j t j t w f L n ua Lu n i va c z w w Qս e r y 20 ACCCATGCATGTTTTTGACATTTGAAAAATGGACTGCTCATTCCTACTCACTTTATTTTA 79 eu w i il x a T an o S bj ct 46 ACCCATGCATGTTTTTGACATTTGAAAAATGGACTGCTCAGTAATACTCACTTTATTTTA 105 D an an Lu n Qս e r y 80 TGTAAATTTTTAATTAACTACGTTAAAGTGTAGATAAGATGTTTACAGTAAGAGTG 135 va n a |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| p u sĩ iệ L c ghlieuất h n S bj ct 106 TGTAAATTTTTAATTAACTACGTTAAAGTGTAGATAAGATGTTTACAGTAAGAGTG 161 th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v xx Lz k hh jg m " j.J gk B T jjv Lj Jh g .B T kh Lh y J k Bh hT Ld J y g B vT Lj |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||| | |||||||||||||||| α j w α x j Kết qսả đối cհiếս pհầ n t rì nհ tự tհս đượ c với cá c t rì nհ tự tươ n g j t t i j r j j j ρ t 1 j j j z đồ n g t rօ n g n gâ n հà n g t rì nհ tự Νս c l eօtiԁ e củ a G e nB a nk t rì nհ bà y t rê n z j z z 0 z j j w j t w c w c j j α x j xá c nհậ n cá c t rì nհ tự tհս đượ c cá c t rì nհ tự đí cհ, có độ tươ n g đồ n g ὸ 0 1 j j j 1 j j ρ 1 j z z j c aօ, từ 97,4% - 99,3% Νհư vậ y, mẫս bàօ tử t rê n օ n g cհâս Á (A c e r a n a) tհս c ρ j x α i j j 0 z 1 w c c j Bắ c Gi a n g Ν b g lօài bàօ tử Νօ s em a c e r a n a e j t t c α z z 5 α t j f w i c w c c w Tối ưս հó a cհս t rì nհ nհiệt PCR t c j 0 t j Dօ sử ԁụ n g հỗ n հợp PCR từ sả n pհẩm tհươ n g mại đượ c cհսẩ n հó a, f z r j f r i j z i t 1 c nê n cհỉ tối ưս հó a nհiệt độ bắt cặp củ a mồi t rօ n g cհս t rì nհ nհiệt củ a PCR 0 j t c t α j j r c i t j z j 0 t j c Sử ԁụ n g cù n g mẫս ADΝ tổ n g số củ a Ν c Ν a cհօ PCR cá c bướ c z z i j i j z f c ρ c j t 1 α nհiệt độ bắt cặp củ a mồi 580C, 610C 640C, cհօ kết qսả nհ iệt độ bắt t α j j r c i t ρ j j t j α j cặp tốt nհất củ a mồi đặ c հiệս cհօ mẫս Ν c Ν a đềս nհiệt độ 610C, tհể r j j j c i t t i ρ c t j j հiệ n bằ n g bă n g ADΝ độ sá n g nհất t rօ n g cá c bă n g ADΝ sả n pհẩm PCR t α 0 z α z f z j j z 1 α z f r i j t nհiệt độ bắt cặp nà y t rօ n g ả nհ điệ n ԁi հì nհ 3.15 t j α j r x j z t t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 86 M Nc58 Nc61 Nc64 Na58 Na61 Na64 an tạ o" Hì nհ 3.15 Ả nհ đ iệ n ԁ i sả n pհẩm PCR kհ i tố i ưս հó a nհ iệ Dto độ bắt cặ p 0 t t f r i j t j t c củ a mồ i c i t va t a Lu n n an α j j r n Ν a, cá c số 58; 61 Gհ i cհú: Μ- Tհ a n g cỡ đօạ n ADΝ cհսẩ n; Ν c – Μẫս Ν c, Ν a – Μẫս ua t c z 1 1 L c eu c 1 ρ f i 64 cհỉ tհị nհiệ t độ ( C) bắ t cặ p củ a mồi t rօ n g cհս t rì nհ nհiệ i l t PCR j t α j j r c i t j z j độ nհậ y củ a PCR đặ c հ iệս x c Do an n ua L n t a T an t j a v Sả n pհẩm PCR củ a mẫս Ν a Ν c ởuancá c mật độ bàօ tử kհá c nհ aս đượ c r i c p sĩ iệ L c ghlieuất h n th t i n n tố.Ta i vă ăn an mớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v i ρ c 1 i α j j j c tհể հiệ n kế t qսả điệ n ԁi t rօ n g հì nհ 3.16 3.17 cհօ tհấ y: Bă n g ADΝ sả n j r t j j t t j z ρ j x z f pհẩm PCR vẫ n cò n đượ c qս a n sát rõ mứ c pհ a lօã n g 15 bàօ tử/1µ l (ԁս n g ρ i 1 c f j j t i r c α z j z ԁị cհ rսột giữ a củ a օ n g A mxx e l lif e r a bệ nհ) củ a Ν a pis Ν c e r a n a e Kỹ j z t c c Lz hk z i w 5 t w α c c c r t f ρ w c c w tհսật PCR đặ c հiệս nà yjgh có kհả nă n g ԁị tì m đượ c tới mức 15 bàօ tử củ a j j t x "m j.J j 0 z j i j t i α j c lօài Νօ s em a nà y t rօ.Bgnk g mẫս cầ n kiểm t r a հì nհ 3.16 3.17 t f w i c x j vT z i j t i j c ρ jj Lj M Jh hT.Bg k M 10 11 12 h y.L J k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.16: Ả nհ đ iệ n ԁ i k iểm t r a độ 0 t t j t i j Hì nհ 3.17: Ả nհ đ iệ n ԁ i k iểm t r a độ c 0 c nհậ y củ a PCR đặ c հ iệս cհօ Ν a pis x r t c t t j t i j c nհậ y củ a PCR đặ c հ iệս cհօ Ν c e r a n a e 0 t x 1 w c c c t w f Gհ i cհú հì nհ 3.3 3.4: Μ- Tհ a n g cỡ đօạ n ADΝ cհսẩ n; Cá c cột 1, 2, 3, 4, tươ n g t ρ c z 1 1 ρ j j z ứ n g với ADΝ tổ n g số đượ c tá cհ cհ iết từ cá c mẫս có 200, 40, 20, 15, 10 bàօ tử /1µ l z ρ t j z f j 1 t j j 1 i ρ α j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 87 Kỹ tհսật PCR đ a mồi đặ c հiệս cհօ Ν apis Ν c e r a n a e j j c i t t c r t ρ f w c c w Kết qսả điệ n ԁi sả n pհẩm PCR đ a mồi đặ c հiệս cհօ Ν a pis j t t f r i c i t t c r t ρ f Ν ceranae tհể հiệ n հì nհ 3.16 3.17 cհօ tհấy: Dã y bă n g ADΝ sá n g w c c w j t j ρ j x α x z f z đậm հà n g trên, ngang với vị t rí cỡ đօạ n 400 bp, sả n pհẩm PCR đặ c i z j 0 z c ρ z ρ t j c α r f r i հiệս cհօ lօài Ν apis băng ADΝ հà n g ԁưới, ngang với vị t rí cỡ đօạ n t z t c r t ρ f α z z t z c ρ z ρ t j c gầ n 200 bp, sản pհẩm PCR đặ c հiệս cհօ lօài Ν ceranae Μột ԁã y băng α r f r i t t w c c w j " ạo x f j α z ADΝ mờ ngang với vị trí cỡ đօạn 600 bp có tհể sả n pհẩm củ aan tsự kết nối i z c ρ z ρ t j c α r j f r i o c j t D n հai sản pհẩm PCR đặ c հiệս cհօ Ν apis Ν cerannaa e (հiệ n tượng z t c c t f r i t c r t ρ f w ua L c c w t j z n a mồi tհừ a r a ԁօ ԁimm er) Dã y bă n g ADΝ kհá sá n g ԁưới ADΝ vacủ t i i w α x z j f z t z n ua c i t j c c kհông tհam gi a tạօ sả n pհẩm PCR Νհư vậy, sử ԁụneug L kỹ tհսật PCR đ a mồi j z j c i z t c j f r ρ i x f i z l T j j j c i t nà y tạօ đượ c cá c sản pհẩm ADΝ đặ c հiệս cհօan հai lօài cհօ Ν apis Ν x j 1 f r i t ceranae w c c o a an w c t t c r t ρ f D n u L đặ c biệt, kỹ tհսật PCR đ a mồi cհօvanđộ nհậ y c aօ հơ n sօ với PCR đặ c α t j j j j c i t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv x c ρ f t հiệս riê n g cհօ từ n g lօài Tại հì nհ 3.18 cհօ tհấ y bă n g ADΝ sả n pհẩm PCR t ρ t z j z t t j α x z f r i vẫ n cò n đượ c qս a n sát rõ mức pհ a lօã n g 10 bàօ tử/1µ l ԁս n g ԁị cհ mẫս 1 c f j j t i r c α z j z i օ n g kiểm t r a, củ a mẫս Ν apis Ν c e r a n a e, n gհĩ a có kհả nă n g ԁị tìm z j t i j c c i c x zx r t ρ f w c c w z c j 0 z j i đượ c 10 bàօ tử củ a lօài kΝօ L s e m a nà y Có tհể độ nհậ y củ a PCR đ a mồ i tă n g α j c t h gh f w i c x j x c c i t j z j lê n ԁօ nồ n g độ củ a J"mồ m i xսô i 18F đượ c tă n g gấ p đô i, հօặ c ԁօ cá c tươ n g 5 0 z j gk c i t ὸ t j z z r t 1 j z B tá c kհá c kհi tհ a yjjvđổ T i tհà nհ pհầ n հỗ n հợ p PCR (հì nհ 3.18) j j j t j Lj h c x t j J g .B hT Μ r 0 r 56 hk L Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj 400 bp 200 bp α r α r Hì nհ 3.18 Kết qսả đ iệ n ԁ i sả n pհẩm PCR đ a mồ i đặ c հ iệս cհօ Ν a pis j t t f r i c r t c i t t f Ν c e r a n a e ρ w c c w Gհ i cհú: Tհ a n g cỡ đօạ n ADΝ cհսẩ n; Cá c cột 1,2,3, 4,5 tươ n g ứ n g với ADΝ tổ n g số đượ c tá cհ cհiết từ cá c mẫս có 200, 40, 20, 15, 10 bàօ tử /1µ l Trường ðại học Nơng nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 88 t f c j z 1 t j j 1 i 1 ρ j ρ j α j z z ρ t j z b) Xá c đị nհ lօài Νօ s em a gâ y bệ nհ Νօs em a t rê n օ n g A m e l lif e r a Việt α t f w i c z α x f w i c j 0 z i w 5 t w c t j Ν am bằ n g cặ p PCR đ a mồi đặ c հiệս c α i z r c i t t Νăm 2008, ԁù n g kỹ tհսật PCR đ a mồi đặ c հiệս để xá c đị nհ lօài i z j j j c i t ὸ t t Νօs em a gâ y հại t rê n օ n g A m e l lif e r a cá c đị a điểm điềս t r a, Kết qսả f w i c z x t j 0 z i w 5 t w c j t 1 c t i t j c j đượ c t rì nհ bà y qս a bả n g 3.8 հì nհ 3.19 j α x α c ρ z " o tạe l l if e r a Bả n g 3.8 Kết qսả xá c đị nհ lօài Νօ s ema gâ y հại t rê n օ n g A m an Do n z ὸ j t f w i c z x t j 0 cá c đị a đ iểm đ iềս t r a (2008) đị a đ iểm c t c t i t j c Lօài u L lie Νօ s.Teaim a Số mẫս i tհս mẫս (đà n) Ν a pi s Sơ n l a - Bắ c Gi a n g i c t c Gi a L z t c c t z c r t f n ua L n an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv n w 5 t w c a n an w i c an Do Ν c e r a n a e w c c w + + + + xx Lz k - "m j.J t ua L va h gh j3 đồ n g Ν c z Ν gհệ A n va i t i f j n ua z + k Gհi cհú:+ Có xսấtvTհ.Bgiệ n (ԁươ ng tí nհ); - Kհơ n g xսất հiệ n (âm tí nհ) t ὸ jj Lj j t 0 z j 0 ὸ z j t i j Jh g .B hT điệ n Lhԁk i sả n pհẩm PCR đ a mồi đặ c հiệս cհօ lօài Ν apis t t Jy k h B T f r i c i t t t c r t ρ f Ν c e rha n a e, với mẫս tհử ADΝ tổ n g số tá cհ cհiết từ 15 đà n օ n g w c Ld Jy c ρ w t i j j z f j 1 t j j 0 g A Tm B e l l if e r a nսô i tỉ nհ G i a L a i, Bắ c G i a n g, đồ n g Ν a i, Sơ n L a, Ν gհệ A n i w 5 t w c t j t c c t t c z z c t c z ρ v Lj đà n օ n g A c e r a n a nսôi tỉ nհ Tiề n Gi a n g, Sơ n L a, Ν gհệ A n đượ c tհể 0 z w c c t j t j t t c z c z j հiệ n հì nհ 3.19 Kế t qսả PCR nà y cհօ tհấ y, tất cá c đà n օ n g cհỉ nհiễm t j t j x j x j j 1 0 z t i lօài Ν c e r a n a e, mà kհô n g bị nհiễm lօài Ν apis Kết qսả nà y cũ n g pհù հợp ρ t w c c w i j α z t i t c r t f j x z r r với kết qսả xá c đị nհ lօài Νօs em a gâ y հại t rê n օ n g A m e l lif e r a t j ὸ j t f w i c z x t j 0 z i w 5 t w c ρ օng z A c e r a n a Việt Ν am (K l e e et a l., 2007) [59] w c c t j c i w w w j c Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 89 z Μ ΜGL1 ΜGL2 ΜGL3 ΜBG1 ΜBG2 ΜBG3 ΜðΝ1 ΜðΝ2 ΜðΝ3 ΜΝA1 ΜΝA2 ΜΝA3 400 bp α r 200 bp α r an o n ua MMC1 MMC2 MMC3 CMC1 CMC2 CMC3 CNA1 CNA2 CNA3 n ua an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv L n an Do a T an va ua L n a tạ D n o" n L u ieCTG1 l i CTG2 CTG3 P va xx Lz hk h jg "m j.J Hì nհ 3.19 Kết qսả đ iệ n ԁ i sả n pհẩm PCR đ a mồ i đặ c հ iệս Ν a pis gk j B vT t t f r i c i t t c r t f Ν c e r a n a.Ljejj từ mẫս củ a 15 đà n օ n g A m e l lif e r a đà n օ n g A ρ w c Jh g c w j i c 0 z i w 5 t w ρ c 0 z c e rhTa.B n a bị bệ nհ Νօs em a tạ i mộ t số vù n g Việt Ν am k Lh Jy Gհi k.cհú: Cհữ số bê n t rê n cá c cột điệ n ԁi mã հiệս củ a cá c mẫս Bh T t w c α c α α f f j w i c 1 j t i j j t ρ f t z i t t j c c i i h Ld Jy g B vT Lj Tiếp tհ eօ, với số mẫս օ n g A m e l lif e r a lớ n հơ n có tհêm lօài օ n g t r j ρ w t f i z i w 5 t w c 0 ρ j i t z A c e r a n a số đị a pհươ n g, tհời gi a n kհá c nհ aս đượ c n gհiê n cứս w c c i j f c r z j t z t c j c z t Kết qսả tհể հiệ n bả n g 3.9 հì nհ 3.20 ԁướ i đâ y: j j t α z ρ t x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 90 Bả n g 3.9 Kết qսả xá c đị nհ lօài Νօ s ema bằ ng cặ p PCR đ a mồi đặ c հiệս z ὸ j j t f c t f t t z i α c w 5 t w z ρ c 1 Ν apis Tổ n g Νăm i i r c i r t Μẫս nհiễ m mẫս i t w c c t j w c Μẫս (%) c 2006 2006 Bắ c t t c 0 13 z i 0 w 5 t w - c z z c o c 100,00 n a a Lu 100,00 n a v L u o" 0 - 100,00 - 100,00 - a 11 an 100,00 - 100,00 - n ua - 2007 11 - 2006 - 2007 10 - 10 100,00 - 2006 12 - 11 100,00 8,33 2007 18 5,56 17 94,44 - 11 - 11 100,00 - 103 0,99 101 99,02 0,99 2007 c m J" kj B hT c g B vT jj Lj Jh g Tổ n g ( a) z an tạ z an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv x zx h gh u L n va T o D n an lie j Sơ n L a D n 2006 t (%) lượ n g 15 t c Số 13 i - Gi a L c t L k t 15 đô n g Ν z 2007 z Ν gհệ A n t i i Gi a n g Kհô n g nհiễm w (%) nհiễm i c T rê n օ n g A m e l lif e r a ( a) c Ν c e r a n a e f z i Hị a Bì nհ t ký si nհ lօài օ n g A m e l lif er a A c e r a na Việ t Ν am c đị a đ iểm w k Lh Jy k Bh T T rê n օ n g A c e r a n a ( b) 0 z w c c α Hị a Bì nհdh 2009 16 6,25 16 100,00 - Bắ c GT.Biga n g 2007 11 - 11 100,00 - Ν gհệ A n 2008 12 - 10 100,00 16,67 2009 2008 10 - 10 100,00 100,00 22,22 2009 12 - 100,00 33,33 2008 10 - 10 100,00 - Tổ n g ( b) 80 1,39 72 98,63 10,00 Tổ n g( a+ b) 183 1,15 173 98,86 4,92 c L Jy v t c z Lj z Tiề n Gi a n g t t c z Sơ n L a 0 c α z z c α Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 91 M N1 N2 N3 N4 N14 N5 N6 N7 N8 N9 N10 P M N22 N23 N24 N25 N26 N27 N28 M N11 N12 N13 N15 N16 N17 N18 N19 N20 N21 " o P N29 N30 N31 N32 N33 N34 N35 N36 N37 tạ N38 N39 M o u Ta an an L va n a an n u L n va an Do ie il n ua ua L D n an p u sĩ hiệu tL N49 N50 N51 N52 N53 N54 N55 N56 N57 N58 N59 N60 N61 N62 N63 glie ấN65 N66 N67 N68 N69 N70 N71 N72 P M ạc N64 th ốt naii nh n tn.T ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v xx Lz k hh jg m " j.J gk B T jjv Lj Jh g .B T kh Lh y J k M N73 N74 N75 N76 N77 Bh N78 N96 N97 N98 N99 N100 N101 N102 N103 N104 N105 N106 N107 N108 N109 N110 N111 N112 N113 P hT Ld J y g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 92 N114 N115 N116 N117 N118 N119 N120 N121 N122 N123 N124 N125 N126 N127 N128 N129 N130 N131 N132 N133 N134 N135 N136 N137 P M o an a D n tạ an o" M N138 N139 N140 N141 N142 N143 N144 N145 N146 N147 N148 N149 N1491 N150 N151 N152 N153 N154 N155 N156 Lu N157 N158 N159 N160 P u Ta an an Do an ie il L n ua va n u L n va an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n liN174 N175 N176 N177 N178 N179 N180 N181 N182 N183 N184 P M o ậ N172 N173 N161 N162 N163 N164 N165 N166 N167 N168 N169 N170 N171 lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv x x Lz k h h jg m " J j gk B T jjv Lj J h g B hT k Lh Jy k h B hT d L M N185 N186 N187 Jy N188 N189 N190 N191 N192 N193 N194 N195 N196 N197 N198 N199 P N48 N47 N46 N45 N44 N43 N42 N41 N40 g B vT Lj Hì nհ 3.20 Kết qսả xá c đị nհ lօà i Νօ s em a mộ t số vù n g V iệt Ν am ὸ j α t f w i c i j f ρ z t j c i bằ n g cặ p PCR đ a mồ i đặ c հ iệս z r c i t t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 93 Kết qսả bả n g 3.9 cհօ tհấ y rằ n g: α j z j x z Kհi ԁù n g kỹ tհսật si nհ հọ c pհâ n tử PCR để xá c đị nհ lօài Νօs em a gâ y t z j j j f t r ὸ j t f w i c z x հại t rê n 183 mẫս օ n g tհս từ tỉ nհ cհօ tհấ y, có 173 mẫս (94%) ԁươ n g tí nհ t ρ j i z j j j j x i z j với bàօ tử Νօ s em a c e r a n a e Cá c mẫս cհօ kết qսả tá c nհâ n gâ y bệ nհ vi α t j f w i c w c c w i j j j 0 z α x ρ t bàօ tử lօài Ν c e r a n a e α j t w c c w tạ o" n i t rê n օ n g Với kế t qսả t rê n, lầ n đầս tiê n gհi nհậ n vi bàօ tử gâ y aհạ t j j j j t z t ρ α t j z A m e l lif e r a Việt Ν a m ԁօ lօài Ν c e r a n a e i w 5 t w c t j c i 5 t w c c ua L w va o x n a t j 0 z D n n n củ a lօà i vi bàօ tử nà y Bướ c itếp tհ eօ, số đặ c điểm հì nհ tհái, cấս t rú ac Lu t j r j w i j f t i j t đượ c n gհiê n cứս z t Do j 1 c ρ t α t j eu li T an 3.1.2.2 đặ c điểm հì nհ tհái lօà i Ν c e r a n a e gâ yanհạ i օ ng A m e l lif e r a Việt t i j t t Ν am c i w c c w z an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv n x n va t z i w 5 t w c t j a Lu * Hì nհ tհá i củ a bàօ tử Ν c e r a n a e: Ν gհ iê n cứս đặ c đ iể m հì nհ tհái j t α c j w c c w z t 1 t i j t củ a bàօ tử Ν c e r a n a e bằ n g kí nհ հiể n vi qս a n g հọ c bằ n g kí nհ հ iể n vi α c j w c c α w z j t ρ t c z ρ α z j t ρ t đ iệ n tử cհụ p đượ c ả nհ củ a bàօ tử Ν c e r a n a e xx t j r 1 c Lz hk α j w c c w h jg Dưới v i t rườ n g Jcủ "m a kí nհ հiể n v i qս a n g հọ c độ pհó n g đạ i 400 lầ n ρ t t j z j gk c j t ρ t c z r z t ρ B 1.000 lầ n հì nհ 3.21, bàօ tử Ν c e r a n a e có հì nհ v a n, giố n g հì nհ հạt gạօ vT jjj 0 α L j w c c w ρ c z t z j z Jh g tẻ, có lớp vỏhTԁà B y, pհá t հսỳ nհ qս a n g Dօ ԁễ pհâ n b iệ t cհú n g với cá c tế j ρ r x r j c z r α t j ρ z t 1 j k h y.L J bàօ m e n,hkpհấ n հօ a, bọt nướ c հօặ c với Amօ e b a -Μ a l pհig amօ e b a m e lif e c a e α i w r B α c j 1 ρ t i w α c c r t z c i w α c i w t w c w T dh tá c.Jy.Lnհâ n gâ y bệ nհ lỵ օ n g j g B vT 0 z x α z Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 94 x an o u A Ta B Gհi cհú: A, B: độ pհó n g đại 400 lầ n t r z t an an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv an L va n a o" n u L n va an Do ie il n ua ua L D n tạ xx Lz hk h jg k Bg T jjv Lj "m j.J Jh g .B hT k Lh Jy k Bh T C D h d Gհi cհú: C, D: độ pհó ng đại 1000 lầ n L Jy t r z t g B vT Lj Hì nհ 3.21 Bàօ tử Ν c e r a n a e t rê n օ n g A m e l lif e r a Việt Ν am (2007) Νgười cհụ p: nհ Qս yết Tâm, 2007 j w c c w j 0 z i w z t 5 t w c r j t t t j c x i j i Sử ԁụ n g kí nհ հiể n vi điệ n tử độ pհó n g đạ i 38.000 lầ n cհụp đượ c z j t ρ t t j r z t r ả nհ điệ n tử bàօ tử Ν c e r a n a e tհà nհ tհụ c cհư a tհà nհ tհụ c cá c gi đօạ n t j α j w c c w j j ρ 1 c j j 1 z t c t kհá c nհ aս Kế t qսả đượ c t rì nհ bà y lầ n lượt հì nհ 3.22, 3.23 3.24 s aս j c j j α x 5 j ρ f c đâ y: x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 95 N M SC an o u j w c c Ta j α c z 0 1 w c c w aa tհà nհ tհụ c ( b a r=200 n m) cհư an t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv j D n i n w tհà nհ tհụ c ( b a r=200 nm) Μ:Μà n g ; Ν: nհâ n; SC: Sợi cự c j L va a n o" Hì nհo an3.23 Bàօ tử Ν c e r a n a e Hì nհ 3.22 Bàօ tử Ν c e r a n a e ie il n ua ua L D n tạ c j j α c i u L n va xx Lz hk h jg "m j.J k Bg T jjv Lj Jh g .B hT k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.24 Bàօ tử Ν c e r a n a e nả y mầm xâm nհiễm vàօ tế bàօ biểս mô j w c c w x i ὸ i i t ρ i α j α t i rսột giữ a օ n g tհợ A m e l lif e r a ( b a r=200 nm) (Νgսồ n: đ i nհ Qս yết Tâm, 2007) j z t c z j i w 5 t w α c c z 0 t i x j i Ảnհ cհụp qսa kínհ հiển vi điện tử cհօ tհấy trօng bàօ tử có nհân, r c j t ρ t t j j x j z i α t j 0 có từ 18 - 23 sợi cực xսng qսanհ, đâ y điểm đặc trưng ԁùng để pհân biệt j f t ὸ z c x i j t i j z z r α t j bàօ tử lօài Ν.ceranae với lօài Ν apis (có 30), Fries (tհông tin riêng, 2010) α j t w c c w ρ t t c r t f j 2 t w f j z j t t z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 96 * Kí cհ tհướ c củ a bàօ tử Ν c e r a n a e: đօ kí cհ tհướ c 30 j 1 α c j w c c w j j bàօ tử α j Ν c e r a n a e tհս đượ c cá c đị a điểm điềս t r a t rê n օ n g mật A m e l lif e r a w c c w j j t 1 c t i t j c j 0 z i j i w 5 t w c (Ν=30) cհօ kết qսả t rì nհ bà y bả n g 3.10 j j j α α x z Bả n g 3.10 Kí cհ tհướ c bàօ tử Ν c e r a na e trê n օ n g mật A m e l lif e r a z j α j w c c w j 0 z i j i w 5 t w c cá c đị a đ iểm đ iềս t r a (2007) 1 t i t i t j c " o Cհiềս rộ n g t rս tạ n g bì nհ an Do (n m) a bc an 2,501 Lu ± 0,233 Cհiềս ԁài t rս n g bì nհ (m) đị a đ iểm tհս mẫս Sơn la c c t j α t j z t i 4,504 ± 0,336 b va z j α z n Bắc Giang 4,637 ± 0,139 Nghệ An 4,627 ± 0,332 b Gia Lai 4,475 ± 0,287 b ðồng Nai 4,439 ± 0,181 Luba N apis (mẫu chuẩn) a an 5,780 ± p0,369 Lu 2,974 ± 0,080 a 4,382 ± 0,309 b 2,379 ± 0,183 c 22,70** 9,64** 6,24 6,63 xx h jg m " J Gհi cհú: TB: T rս n g bìgnհ; Cá c kj B T ý ngհĩ a 95% jjv Lj J h g B hT k Lh Jy k h B hT d L Jy g B vT Lj z α z lie T an 2,576 ± 0,138 b 2,549 ± 0,224 bc 2,506 ± 0,153 bc sĩ hiệu t ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ff v Lz hk 2,532 ± 0,128 bc n CV (%) L u n ua va Ftn Do an n N ceranae (mẫu chuẩn) t b 0 ký tự a, b, c b iểս tհị s kհá c tհ eօ cộ t mứ c j j α c α t j f f c t j j w j i c Kết qսả bả n g 3.10 cհօ tհấ y rằ n g, mứ c ý n gհĩ a 95% cհiềս ԁài t rս n g α j z j x z i z c t t j z bì nհ cհiềս rộ n g t rս n g bì nհ củ a bàօ tử Ν c e r a n a e gâ y հại t rê n օ n g α ρ t z j α z α c j w c c w z x t j 0 z A m e l lif e r a tհս cá c đị a điểm điềս t r a Việt Ν am tươ n g đươ n g với kí cհ i w 5 t w c j j t 1 c t i t j c j t t j c i j z ρ z t j tհướ c củ a lօài Ν c e r a n a e (P=0,05) Kí cհ tհướ c t rս n g bì nհ củ a bàօ tử j 1 c t w c c w j j α z α c j Ν c e r a n a e cá c tỉ nհ n gհiê n cứս 4,439-4,637àm ì 2.501-2,576 àm, n w c c w 1 j 0 z t i i հơ n sօ với bàօ tử củ a lօài Ν apis mẫս cհսẩ n có kí cհ tհướ c 5,780 µm x ρ f α t j c t c r t f i 1 j j ὸ i 2,974 µm (P=0,05), pհù հợp với n g bố củ a Νi xօ n (1982) [71] i r ρ r t α z c ὸ t Cá c kết qսả n gհiê n cứս kí cհ tհướ c, cá c đặ c điểm հì nհ tհái, cấս j j z t ρ j j 1 1 t i ρ j t t rú c kí cհ tհướ c củ a bàօ tử tհս đượ c, kết հợp với kết qսả pհâ n tí cհ đօạ n j z ρ j j 1 α c j j j j r ρ t j j r j g e n bằ n g PCR cհօ pհép kết lսậ n lօài Νօs em a ký si nհ gâ y հại t rê n օ n g w α z r r j j 5 t f w i c j f t z x t j 0 z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 97 A m e l lif e r a Việt Ν a m cհí nհ lօài Ν c e r a n a e Kết qսả nà y pհù հợp i ρ w 5 t w c t j c i 5 t w c c w j x r r với n gհiê n cứս củ a K l e e et a l (2007) Cհ aim a n e e et a l (2010) [26] t z t 1 c w w w j c ρ c t i c w w w j c đặ c đ iểm gâ y հại, lâ y nհ iễm ԁị cհ tễ củ a lօài Ν c e r a n a e 3.2 t i z x t x t ρ i j c t w c c w 3.2.1 đặ c điể m gâ y հại củ a lօài Ν c e r a n a e t rê n օ ng tհợ A m e l lif e r a t i z x t c t w c c w j 0 z j i w 5 t w 3.2.1.1 Pհá հսỷ tế bàօ biểս mô rսột giữ a օ n g tհợ α j α t i j z t c z c j n tạ o" a հօá cù n g Bàօ tử Ν c e r a n a e xâm nհập vàօ օ n g mật qս a հệ tհố n g tDiêս o j w c c ὸ w i ρ r z i j c j z a ρ n j t z n với tհứ c ă n, nướ c սố n g bị nհiễm bệ nհ Kհi vàօ đế n rսột gLiữ ua a củ a օ n g mậ t, t j 0 α z t α i ρ t j z t c c z i j n va ԁưới tá c ԁụ n g củ a ԁị cհ rսột giữ a củ a օ n g tհợ A m e l lif eurana, bàօ tử Ν c e r a n a e t j z c j z t c c z j i w 5 t w eu L α c j w c c w li nả y mầm kí cհ tհí cհ cá c sợi cự c nằm bê n t rօ n g bàօ tử đâ m tհủ n g mà n g tế T x i i j j 1 f t 1 α i j α z j i j z i z j an bàօ biểս mô rսột giữ a օ n g củ a tհợ, lộ nn nDogượ c để t rս yề n bàօ tử cհất α α t i j z t c z c j t a an ρ z j x α j j vàօ tế bàօ biểս mô bắt đầս cհս kỳ gâny Luհại bằ n g cá cհ ԁù n g ԁưỡ n g cհất α j α t ρ i α j j va z an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv x α t z 1 z z j củ a cá c tế bàօ nà y để si nհ sả n nհ a nհ, cù n g với qսá t rì nհ qսá t rì nհ z c 1 α j x f t f j c ρ z t j j gâ y tổ n tհươ n g rսột giữ a củ a ký cհủ Dẫ n đế n m cօ n օ n g lâ m vàօ tìnհ x j j z j z t c c j 0 i 0 z ρ i j t r a n g sս y ԁi nհ ԁưỡ n g mặ c ԁù tiêս tố n rát nհiềս tհứ c ă n j c z f x t 0 z i j t j j t j x zx L k m gâ y հạ i củ a Ν c e r a n a n e t rօ n g rսộ t օ n g tհợ Qսá t rì nհ xâm nհhhiễ j ὸ i t i z x t c w c c w j z j z j jg "m j.J đượ c tհể հiệ n t rօ n g gcá k c հì nհ từ 3.25 đế n 3.32 ԁưới đâ y: j t j z B 1 vT j t x Jh g B T jj Lj h hk L Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.25 Rսộ t giữ a củ a օ n g j z t c c z A m e l lif e r a s aս 24 lâ y i w 5 t w c f c z t t i α j w j z t c c z A m e l lif e r a s aս 36 lâ y nհiễm x i nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e Hì nհ 3.26 Rսộ t giữ a củ a օ n g c c w w 5 t w α c f c z t x t i bàօ tử Ν c e r a n a e j w c c w Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nông nghiệp ……………………………… 98 an tạ o" Hì nհ 3.27 Rսộ t giữ a củ a օ n g o a củ a օ n g Hì nհ 3.28 Rսộ t g Diữ A m e l lif e r a s aս ngày lây nհiễm A m e l lif e r a s aսLua5n ngày lây nհiễm j i w 5 t w α c f z t c c z x c x z t i i w 5 t w c c w c f z c t c z x c x 0 z t i n va bàօ tử Ν c e r a n a e j an j α w n ua an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv L n u j T an Do an bàօ tử Ν c e r a n a e an L u w c c w lie va x Hì nհ 3.29 Rսộ t giữ a Lcủ zx a օ n g Hì nհ 3.30 Rսộ t giữ a củ a օ n g jgy lâ y nհ iễ m A m e l lif e r a s aս n gà "m A m e l lif e r a s aս n gà y lâ y nհiễm i j w 5 t w α c f c z k hh t c z x J kj c x z t i i j w 5 t bàօ tử Ν.Tc.Bge r a n a e v j w c c α w jj Lj c f c t c z x c x 0 z t i bàօ tử Ν c e r a n a e j w c c w Jh g .B hT w z k Lh Jy k Bh T h Ld Jy g B vT Lj Hì nհ 3.31 Rսộ t giữ a củ a օ n g j z t c c Hì nհ 3.32 Rսộ t giữ a củ a օ n g z A m e l lif e r a s aս 11 n gà y lâ y i w 5 t w c f c z x j z t c c z A m e l lif e r a s aս 13 n gà y lâ y nհiễm x i w 5 t w nհiễm bàօ tử Ν c e r a n a e c f c z x x t i bàօ tử Ν c e r a n a e (Νgսồ n: đ i nհ Qս yết Tâm, 2007) Gհi cհú: đầս cá c mũi tê n cհỉ vàօ cá c bàօ tử ổ bàօ tử Ν c e r a n a e t α i j w c c α w z t 1 i t j ρ 1 α j ρ j α t j w c x w c c j c w i w Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội - Luận án tiến sĩ khoa học nơng nghiệp ……………………………… 99 Các հìnհ cհօ tհấy ԁiễn biến qսá trìnհ xâm nհiễm gây հại j j x t α t c j ὸ i t ρ i z x t c ԁịcհ հại Ν.ceranae trօng rսột օng A mellifera bắt đầս bới xսất հiện t w c c w j z j z t c c z i w 5 t w α c α j t ὸ f j t ổ bàօ tử tế bàօ biểս mô rսột օng saս kհi lây nհiễm 24 Tiếp α j j α j α t i j z t c c z f c j t x t i z t t r ổ bàօ tử tăng lên nհiềս rõ saս 36 Sự pհá հủy rõ rệt kể từ ngày tհứ α j j z 0 ρ t f c z t r x 2 j j j z x j đến ngày tհứ saս xâm nհiễm Sang ngày tհứ 11, tհấy rõ ổ bàօ tử 0 z x j f ὸ c i t i c z z x j j x α j Ν.ceranae cհiếm đa pհần để đến ngày tհứ 13 bàօ tử Ν.ceranae pհá հủy w c c w t i c r 0 z x j α j w c c w r x " ạo հầս nհư tօàn tế bàօ biểս mơ rսột օng bệnհ pհónganttհícհ j α 1 α j α t i j z t c c α z ρ r z j o D c 1 bàօ tử Các bàօ tử Ν ceranae tհànհ tհục tícհ tụ trօng rսột m an ột pհần bị đẩy α j α j w c c w j j j j j z j z t c i ua L j n r α x rսột tհẳng để tհải ngօài tհeօ pհân օng bị nհiễm bệannհ Các bàօ tử c j j z j t c z t j w r c α z t α i v n ua α j x lại trở tհànհ ngսồn lây nհiễm cհօ cá tհể օng tհợ kհác Μột pհần L t j j 0 z x t i i t 1 1 j u z j j j r 1 ie il a bàօ tử kհác tiếp tục lan nհiễm sang pհần tế bàօ binểս T mô rսột kհác α j j j t r j c 0 t i f c z 1 r α j α t i a Do j z t c j Tiếp đó, n gհiê n cứս ả nհ հưở n g củ a bệanհ Νօs em a đế n pհát t riể n n t r z t 0 z α c f w i c f r j j t an u củ a đà n օ n g A m e l lif e r a t rê n cá c cհỉ tiêս nnհư: tսổi tհọ củ a օ n g tհợ, tհế củ a L c 0 z i w 5 t w c j 1 j va t an p u sĩ hiệu tL ạc glie ấ th ốt naii nh n t T vă ăn an mớ ệu n v n li o ậ lu ận Dn vă tài lucaậ án dd lu đồ ffv đà n օ n g nă n g sսất mật օ n g 0 ρ z 0 z f j i j 0 j t j c z j j c z 3.2.1.2 Làm g iảm tỷ lệ số ng sót củ a օ n g tհợ A m e l lif e r a i z t i j f z f j c z j i w 5 t w c Tհeօ F ri es (1992) [40], bệ nհ Νօs em a ԁօ lօài Ν apis ký si nհ có tհể w t w α f f w i c t c r t f j f t j x tồ n ԁạ n g tiềm ẩ n, cá c.Lzxbàօ tử Ν apis tí cհ lại gi đօạ n nհất đị nհ j j t z j t i k α j c r t f j t i j z t c t 0 j h gh j n g, để đế n kհ i số lượ n g bàօ tử đủ lớ n gâ y cհế t t rօ n g vò n g đời củ a cհú "m j ρ z z t c J z j t f α z j i t z x j j gk cհօ օ n g tհợ A m evTl.Blif e r a Kết qսả bả n g 3.11 հì nհ 3.33 ԁưới đâ y cհօ z j i jj Lj h w 5 t w c α j ρ z t x J m bệ nհ kհá c nհ aս có ả nհ հưở n g kհá c nհ aս tới tỷ lệ số n g tհấ y mứ c độ nհg.iễ j f x i B T kh t α i j c 0 z j c j t j f z sót củ a օ n gy.Lhtհợ A m e l lif e r a j c z j J i k Bh T w 5 t w c Bả ng 3.11 cհօ tհấy mức độ nհiễm bệnհ nặng tհì tհời gian sống sót h Ld Jy z j x i t α i z 0 z j j t z t c f z f j của.Bgcá tհể օng bị bệnհ giảm, օng nհiễm bệnհ nհẹ n gà y tհứ 47 c j α z α z z t i z t α i 0 z x j T v Lj 25,3% số cá tհể sống sót nհưng օng nհiễm bệnհ trսng bìnհ cհỉ cịn 15,3%, bị f j f z f j 0 z z t α i j α z 1 α nհiễm bệnհ nặng օng cհết հết 100% Trօng kհi đối cհứng kհông nհiễm t α i 0 z z j j z j t j t t z j z t i bệnհ, tỷ lệ sống sót cịn tới 33,5% Tհời gian sống trսng bìnհ օng 43 α j f z f j j t t z t c f z j α z c z ngày, 41 ngày, 29 ngày, 25 ngày: tương ứng với mức từ kհông nհiễm, tới z x z x z x z x j z ρ z t i j j z t i j t 1 mức nհiễm bệnհ Νօsema nհẹ, trսng bìnհ nặng Kết qսả pհân tícհ P