(Luận văn) nghiên cứu nhân giống in vitro cây thổ nhân sâm (talinum crassifolium willd)

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC NGUYỄN THỊ TRANG lu an va n NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO p ie gh tn to CÂY THỔ NHÂN SÂM (Talinum crassifolium Willd) d oa nl w an lu ll u nf va LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC oi m z at nh z m co l gm @ n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN an Lu THÁI NGUYÊN - 2016 ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC NGUYỄN THỊ TRANG lu an n va NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO gh tn to CÂY THỔ NHÂN SÂM (Talinum crassifolium Willd) p ie Chuyên ngành: Công nghệ sinh học d oa nl w Mã số: 60.42.02.01 ll u nf va an lu LUẬN VĂN THẠC SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC oi m z at nh Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS NGUYỄN THỊ TÂM z m co l gm @ n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN an Lu THÁI NGUYÊN - 2016 ac th si i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi thực hiê ̣n dưới sự hướng dẫn của PGS.TS Nguyễn Thị Tâm Mọi trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Các số liệu, kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả luận văn lu an n va Nguyễn Thị Trang p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si ii LỜI CẢM ƠN Lời xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Thị Tâm, Khoa Sinh học, Trường Đại học Sư Phạm Thái Nguyên tận tình hướng dẫn, bảo giúp đỡ suốt thời gian thực hồn thành luận văn Tơi xin cảm ơn thầy cô giáo anh chi ̣ kỹ thuật viên phịng thí nghiệm Cơng nghệ tế bào thực vật, Khoa Sinh học trường đại học Sư Phạm Thái Nguyên tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình làm luận văn thạc sĩ lu Trong thời gian thực luận văn thạc sĩ phịng thí nghiệm Cơng an va nghệ sinh học, Viện Nghiên cứu Phát triển Lâm Nghiệp - Đại học Nông n Lâm Thái Nguyên, nhận sự giúp đỡ Ban lãnh đạo Viện, gh tn to kỹ thuật viên phịng thí nghiệm Cơng nghệ sinh học tận tình giúp đỡ p ie hướng dẫn tơi làm thí nghiệm luận văn thạc sĩ Tơi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Trường Đại học Khoa học - oa nl w Đại học Thái Nguyên, Ban chủ nhiệm khoa Khoa ho ̣c sự số ng thầ y cô d giáo, cán Khoa, đặc biệt sự quan tâm, giúp đỡ anh chị kỹ va an lu thuâ ̣t viên phịng thí nghiệm khoa Khoa ho ̣c sự sớ ng u nf Tơi xin cảm ơn gia đình bạn bè ln bên cạnh ủng hộ, khuyến ll khích, động viên tạo động lực để tơi hồn thành luận văn m oi Trong q trình làm luận văn khơng tránh khỏi sai sót, tơi z at nh mong nhận sự đóng góp q báu từ phía thầy bạn bè để tơi làm tốt z m co l gm @ Tác giả luận văn an Lu Nguyễn Thị Trang n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si iii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục từ chữ viết tắt v Danh mục bảng vi Danh mục hình vii MỞ ĐẦU lu an Đặt vấn đề n va Mục tiêu nghiên cứu tn to Nội dung nghiên cứu gh Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài p ie Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU w 1.1 Giới thiệu Thổ nhân sâm oa nl 1.1.1 Đặc điểm phân loại hình thái Thổ nhân sâm d 1.1.2 Đặc điểm phân bố Thổ nhân sâm lu an 1.1.3 Đặc điểm sinh thái, trồng trọt Thổ nhân sâm u nf va 1.1.4 Thành phần hóa học giá trị dược liệu Thổ nhân sâm ll 1.2 Khái quát nuôi cấy mô tế bào thực vật oi m 1.2.1 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật z at nh 1.2.2 Vai trị số chất kích thích sinh trưởng nuôi cấy mô tế bào thực vật 11 z 1.3 Các giai đoạn quy trình nhân giống vơ tính in vitro 15 @ l gm 1.3.1 Giai đoạn I - Cấy gây 15 1.3.2 Giai đoạn II - Nhân nhanh 15 m co 1.3.3 Giai đoạn III - Chuẩn bị đưa đất 16 an Lu 1.4 Một số thành tựu nhân giống dược liệu phương pháp ni http://www.lrc.tnu.edu.vn n Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN va cấy mô tế bào thực vật 16 ac th si iv lu an n va p ie gh tn to Chương VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 2.1 Vật liệu, hoá chất, thiết bị, địa điểm nghiên cứu 21 2.1.1 Vật liệu nghiên cứu 21 2.1.2 Hoá chất, thiết bị 21 2.1.3 Địa điểm thời gian nghiên cứu 21 2.2 Phương pháp nghiên cứu 21 2.2.1 Chuẩn bị môi trường nuôi cấy 21 2.2.2 Phương pháp nuôi cấy in vitro 22 2.2.3 Đưa môi trường tự nhiên 24 2.3 Điều kiện thí nghiệm 26 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 26 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 27 3.1 Kết nghiên cứu khử trùng hạt 27 3.1.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng 27 3.1.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời gian khử trùng dung dịch javel 60% đến hiệu khử trùng 28 3.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng số chất điều hòa sinh trưởng đến khả nhân nhanh sự sinh trưởng chồi Thổ nhân sâm ống nghiệm 31 3.2.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng BAP đến khả nhân chồi Thổ nhân sâm 31 3.2.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng BAP kết hợp kinetin đến khả nhân chồi Thổ nhân sâm 34 3.2.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng sự kết hợp BAP IBA tới khả nhân chồi Thổ nhân sâm 36 3.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ chồi Thổ nhân sâm 38 3.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng giá thể đến tỉ lệ sống, sinh trưởng phát triển in vitro vườn ươm 39 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 42 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si v PHỤ LỤC 47 DANH MỤC CÁC TỪ VÀ CHỮ VIẾT TẮT : Deoxyribonucleic acid BAP : - benzyl amino purine CT : Công thức CS : Cộng sự ĐC : Đối chứng IAA : - indol acetic acid IBA : - indol butyric acid Kinetin : - furfuryl- aminopurine MS : Murashighe Skoog, 1962 NAA : α - naphthalene acetic acid 2,4 - D : 2,4 - dichlorophenoxy acetic acid lu DNA an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si vi DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Kết khử trùng hạt Thổ nhân sâm HgCl2 0,1% 28 Bảng 3.2 Kết khử trùng hạt Thổ nhân sâm javen 60% 29 Bảng 3.3 Ảnh hưởng hàm lượng BAP đến khả nhân chồi Thổ nhân sâm 32 Bảng 3.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng BAP kết hợp kinetin đến khả nhân chồi Thổ nhân sâm 34 Bảng 3.5 Ảnh hưởng hàm lượng BAP kết hợp với IBA đến khả lu an nhân nhanh chồi Thổ nhân sâm 36 va n Bảng 3.6 Ảnh hưởng của IBA đến khả rễ chồi Thổ nhân sâm 38 tn to Bảng 3.7 Kết ảnh hưởng giá thể đến tỉ lệ sống, sinh trưởng p ie gh phát triển in vitro vườn ươm 40 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Cây Thổ nhân sâm ngồi tự nhiên Kết khử trùng hạt HgCl2 0,1% dung dịch javel 60% 30 Hình 3.1: Hình 3.2: Ảnh hưởng hàm lượng BAP đến khả nhân nhanh chồi Thổ nhân sâm 33 Hình 3.3: Ảnh hưởng hàm lượng BAP kết hợp kinetin đến khả nhân nhanh chồi Thổ nhân sâm 36 Hình 3.4: Ảnh hưởng hàm lượng BAP kết hợp với IBA đến khả lu an nhân chồi Thổ nhân sâm 37 va n Hình 3.5: Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ chồi Thổ nhân sâm 39 p ie gh tn to Cây trồng giá thể khác sau 30 ngày 41 Hình 3.6: d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Theo lịch sử y học cổ truyền Trung Quốc từ 3000 năm trước Cơng ngun, nhân sâm nói đến thần dược “Thần nông thảo” vua Thần Nông Sâm tên gọi khái quát số loại thân thảo mà củ rễ sử dụng làm thuốc từ lâu đời nhiều nước châu Á, thuộc nhiều chi họ khác chủ yếu loại thuộc chi Sâm [2] lu an Cây nhân sâm có tên khoa học Panax Gingseng C.A Mey Củ sâm va n có nhiều hình dạng, tư giống người, gọi nhân sâm gh tn to Nhân sâm thuộc họ Araliaceae loại dược phẩm quý có nhiều p ie nơi như: Nhật Bản, Trung Quốc, Hoa Kỳ đặc biệt Hàn Quốc Dân Hàn w Quốc coi nhân sâm tặng phẩm trời đất Đông y coi nhân sâm vị oa nl thuốc đứng đầu vị thuốc theo thứ tự: Sâm, Nhung, Quế, Phụ Có d nhiều loại sâm, để phân biệt thường người ta gọi thêm tên địa phương lu va an màu sắc vào tên gọi [2] u nf Ở Việt Nam có giống sâm như: Sâm Ngọc Linh, Sâm Bố Chính, ll Đảng Sâm, Tây Dương Sâm [2] oi m z at nh Thổ nhân sâm (Talinum crassifolium Willd) gọi Thổ cao ly sâm hay Đông dương sâm, sâm thảo, thuộc họ rau sam - Portulacaceae [2] z gm @ Thổ nhân sâm gồm nhiều thành phần hóa học khác nhau, có saponin tetracyclic nhóm Damavan gọi chung gingsenosid Ngồi ra, cịn có l m co saponin với aglicon acid oleanolic, vitamin B1, vitamin B2, an Lu phytosterol, tinh dầu, đường, tinh bột Thổ nhân sâm có tác dụng bổ dưỡng tồn thân, suy nhược thần kinh, thể hao tổn, tăng sức lực cho người già, n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 41 lu Đất thịt trung bình + trấu hun (2:1) Đất thịt trung bình + Cát (2:1) an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m Đất thịt trung bình z at nh z Hình 3.6 Cây trồng giá thể khác sau 30 ngày m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 42 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Kết luận Công thức khử trùng phù hợp hạt Thổ nhân sâm là: Trong cồn 70% phút rửa nước cất vơ trùng Sau khử trùng javen 60% 15 phút rửa lại nhiều lần nước cất vô trùng trước cấy lên mơi trường Mơi trường thích hợp cho sự nhân chồi sinh trưởng Thổ nhân sâm ống nghiệm là: MS + đường sucrose 30g/l + agar lu 6,0g/l + BAP 1,5mg/l + kinetin 0,5 mg/l an Mơi trường thích hợp cho sự tạo rễ chồi Thổ nhân sâm va n ống nghiệm là: MS + đường sucrose 30g/l + agar 6/l + IBA 1,5 mg/l to gh tn Giá thể thích hợp cho sau in vitro đất thịt trung bình + ie trấu hun (2:1) cho tỷ lệ sống đạt 87,52% p Đề nghị nl w - Tiếp tục nghiên cứu thêm ảnh hưởng số chất kích thích sinh d oa trưởng khác đến khả nhân nhanh chồi Thổ nhân sâm u nf va in vitro an lu - Nghiên cứu thêm giá thể thích hợp cho sự sinh trưởng phát triển - Ứng dụng mơi trường thích hợp vào nhân giống Thổ nhân sâm ll oi m kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật để nhân nhanh Thổ nhân sâm z at nh z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT Nguyễn Việt Cường, Hồ Thanh Tâm, Nguyễn Bá Nam, Hà Thị Mỹ Ngân, Lê Kim Cương, Nguyễn Phúc Huy, Dương Tấn Nhựt (2013), “Nghiên cứu ảnh hưởng số chất hữu bạc nitrat (AgNO 3) lên sự sinh trưởng phát triển sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha ET Grushv.) nuôi cấy in vitro”, Báo cáo khoa học - Hội nghị khoa học công nghệ sinh học toàn quốc, NXB Khoa học tự nhiên lu công nghệ, tr 727-731 an n va Nguyễn Thúy Dần (2007), Giáo trình dược liệu, NXB Hà Nội Trịnh Đình Đạt (2009), Cơng nghệ sinh học (cơng nghệ di truyền), tập 4, NXB giáo dục Nguyễn Thế Đặng, Đặng Văn Minh, Nguyễn Thế Hùng (2007), Giáo p ie gh tn to Nguyễn Hoàng Lộc (2007), Giáo trình nhập mơn cơng nghệ sinh học, nl w trình vật lý đất, NXB Nơng nghiệp Hà Nội d oa NXB Đại học Huế Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Y học Nguyễn Hoàng Nghĩa (1997), Bảo tồn nguồn gen trồng, NXB u nf va an lu Nông nghiệp Hà Nội ll Minh Phúc (2013), Thảo dược quý phương thuốc chủ trị, NXB Y học Vũ Thị Bạch Phượng, Quách Ngô Diễm Phương, Bùi văn Lệ (2013), oi m z at nh “Nghiên cứu ni cấy in vitro nguồn ngun liệu có hoạt tính oxi hóa z @ Thổ tam thất (Gynura pseudochina (L) DC)”, Báo cáo khoa học - m co nhiên công nghệ, tr.1006 - 1010 l gm Hội nghị khoa học cơng nghệ sinh học tồn quốc, NXB Khoa học tự 10 Hoàng Văn Sỹ (2010), Cẩm nang lý luận chẩn trị y học cổ truyền an Lu phương Đông, NXB Y học n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 44 11 Ngô Thanh Tài, Nguyễn Bá Nam, Hồ Thanh Tâm, Hà Thị Mỹ Ngân, Dương Tấn Nhựt (2013), “Nghiên cứu tác động ánh sáng đèn LED lên khả tăng sinh mô sẹo sự hình thành hồn chỉnh từ phơi vơ tính sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis Ha ET Grushv.)”, Báo cáo khoa học - Hội nghị khoa học công nghệ sinh học tồn quốc, NXB Khoa học tự nhiên cơng nghệ, tr 1038 - 1042 12 Trần Tế, Đoàn Nhân Ái, Trương Thị Bích Phượng (2008), “Nghiên cứu sản xuất hoa Đồng Tiền kỹ thuật nhân giống in vitro”, Tạp chí Cơng nghệ sinh học, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam, 6(4B), lu an tr.905 -913 n va 13 Nguyễn Đức Tồn (2002), Thuốc đơng y - cách sử dụng - chế biến - bảo tn to quản, NXB Y học, Hà Nội ie gh 14 Nguyễn Hải Tuất, Ngơ Kim Khơi (1996), Xử lí thống kê kết nghiên p cứu thực nghiệm nông lâm ngư nghiệp máy vi tính, NXB nl w Nông nghiệp, Hà Nội d oa 15 Nguyễn Thanh Tùng, Phạm Thi Diễm Thi, Trương Thị Bích Phượng (2010), lu “Nghiên cứu nhân giống in vitro Qua lâu (Trichosanthes kirilowii)”, Tạp va an chí cơng nghệ sinh học, (3B), Đại Học Huế, tr 1231 - 1239 ll oi m NXB Giáo dục u nf 16 Nguyễn Quang Thạch (2009), Cơ sở Công nghệ sinh học - Tập 3, z at nh 17 Nguyễn Thị Kim Thanh, Dương Huyền Trang (2008), “Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống vô tính Lơ hội phương pháp ni cấy in z vitro”, Tạp chí khoa học phát triển, NXB Nông nghiệp Hà Nội, 6(6), gm @ tr 514 - 521 NXB Nông nghiệp, Hà Nội m co l 18 Nguyễn Đức Thành (2000), Nuôi cấy mô tế bào thực vật ứng dụng, an Lu 19 Nguyễn Việt Thắng, Ngô Đức Thiện (2000), Kỹ thuật trồng khoai tây, http://www.lrc.tnu.edu.vn n Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN va NXB Nông nghiệp ac th si 45 20 Bùi Thị Tường Thu, Trần Văn Minh, Nguyễn Văn Uyển, “Vi nhân giống đu đủ”, Báo cáo khoa học 2002, NXB Khoa học Kỹ thuật 21 Lê Tiến Vinh, Ninh Thị Thảo, Lã Hoàng Anh, Nguyễn Thị Thủy, Nguyễn Thị Phương Thảo (2014), “Quy trình nhân giống in vitro Đan sâm (Salvia miltiorrhiza Bunge)”, Tạp chí khoa học phát triển 22 Đỗ Năng Vịnh, Lê Thị Thu Về (1999), “Nhân giống hoa Loa Kèn mới”, Báo cáo khoa học toàn quốc, NXB Khoa học Kỹ thuật, tr 889 - 895 23 Vũ Văn Vụ (1999), Sinh lý thực vật, NXB Giáo dục, Hà Nội TIẾNG ANH lu 24 Behera K K., Pani D and Shahoo S (2010), “Effect of plant growth an va regulator on in vitro multiplucation of turmeric (Curcumar longa n L.cv.Ranga)”, International Journal of Biological Technology, 1(1): 16 - 23 Binh, Nguyen Ba Nam, Le Nu Minh Thuy, Dang Thi Ngoc Ha, Hoang p ie gh tn to 25 Duong Tan Nhut, Nguyen Phuc Huy, Vu Quoc Luan, Nguyen Van Xuan Chien, Trinh Thi Huong, Hoang Van Cuong, Le Kim Cuong and nl w Vu Thi Hien (2011), “Shoot regeneration and micropropagation of d oa Panax vietnamensis Ha et Grushv from ex vitro leaf-derived callus”, an lu African Journal of Biotechnology, 10(84):19499 - 19504 va 26 Jala A and Patchpoonporn W (2012), “Effect of BA, NAA and 2,4-D International ll m makino)”, u nf on micropropagation of Jiaogulan (Gynostemma pentaphyllum Transaction Journal of Enginneering, oi Management, Applied Sciences & Technologies, 3(4): 363 - 370 z at nh 27 Nayak S., Parida R and Mohanty S (2011), “Evaluation of genetic z fidelity of in vitro propagated greater Galangal (Alpinia galanga L.) gm @ using DNA based markers”, International Journal of Plant, Animal l and Environmental Sciences, 1(3): 124 - 133 m co 28 Sen A., Goyal A.K., Ganguly K and Mishra T (2010), “In vitro multiplication of Curcuma Longa Linn.- an important medicinal n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN an Lu zingiber”, Journal of Plant Science, 4: 21 - 24 ac th si 46 29 Sharma G.J., Sinha S.K and Chirangini P (2005), “In vitro propagation and microrhizome induction in Kaempferia galanga Linn and Kaempferia rotunda Linn.”, Indian Journal of Biotechnology, 4: 404 - 408 30 Shahinozzaman M., Faruq M O., Azad M A K and Amin M N (2013), “Studies on in vitro propagation of an important medicinal plant - Curcuma zedoaria Roscoe using rhizome explants”, Persian Gulf Crop Protection Available online, 2( 4): 1- TRANG WEB 31 http://sotayyhoc.com/tin-tuc-y-hoc/cay-tho-cao-ly-sam.html lu an 32 https://vi.wikipedia.org/wiki/Cytokinin n va 33 https://vi.wikipedia.org/wiki/Auxin ly-sam.html p ie gh tn to 34 http://yduochoaviet.com/thuoc-bo-nguon-goc-thao-moc/891-cay-tho-cao- d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 47 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Thành phần môi trường MS (Murashige Skoog,1962) Thành phần khoáng đa lượng NH-4NO3 Nồng độ (mg/l) 1650 KNO3 1900 lu an n va 440 370 170 Nồng độ (mg/l) 23,3 8,6 6,2 0,83 0,25 0,025 0,025 p ie gh tn to CaCl2.2H2O MgSO4.7H2O KH2PO4 Thành phần khoáng vi lượng MnSO4.H2O ZnSO4.7H2O H3BO3 KI Na2MoO4.2H2O CuSO4.5H2O CoCl2.6H2O oa nl w 37,3 27,8 Nồng độ (mg/l) 0,1 0,5 0,5 2,0 d an lu Na2EDTA FeSO47H2O ll oi m z at nh Thiamin HCl Nicotinic Axit Pyridoxine HCl Glyxine u nf va Vitamin z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 48 Phụ lục 2: Kết xử lí số liệu Nghiên cứu ảnh hưởng HgCl2 0,1% đến khả khử trùng hạt Thổ nhân sâm Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT CT CT CT CT Count 5 5 lu ANOVA Source of Variation Sum 229,7 358,9 297,1 271,1 Average 45,94 71,78 59,42 54,22 Variance df MS F SS 29,508 8,722 15,362 16,852 an P-value F crit 4,48689E17 2,866081 n va Between Groups Within Groups 3784,8836 268,644853 20 14,0888 15421,31 24 tn to 15139,53 281,776 Total p ie gh Qua kết phân tích cho thấy F > F crit nên thời gian xử lý HgCl2 0,1% ảnh hưởng đến kết khử trùng hạt Thổ nhân sâm nl w Nghiên cứu ảnh hưởng javen 60% đến khả khử trùng hạt Thổ nhân sâm Count 5 5 ll u nf va an Sum 218,7 350,1 292,3 257,8 oi m Average Variance 0 43,74 29,778 70,02 1,357 58,46 15,678 51,56 20,043 z at nh SS df MS F z ANOVA Source of Variation lu SUMMARY Groups CT CT CT CT CT d oa Anova: Single Factor 14649,9016 24 268,9078 m co Total 3595,619 13,3712 l 20 gm 14382,4776 267,424 @ Between Groups Within Groups P-value F crit 4,44E17 2,866081 an Lu Qua kết phân tích cho thấy F > F crit nên thời gian xử lý javen 60% ảnh hưởng đến kết khử trùng hạt Thổ nhân sâm n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 49 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP đến khả nhân chồi sinh trưởng chồi Thổ nhân sâm 3.1 Phân tích tiêu số chồi/ mẫu Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT CT CT CT CT CT Count 5 5 5 lu an n va SS 4,239507 5,08164 Total 9,321147 Average Variance 1,46 0,433 1,822 0,15942 1,938 0,14152 2,6 0,25105 1,978 0,17492 1,51 0,1105 df MS 0,847901 24 0,211735 F 4,00454 P-value 0,008772196 F crit 2,6206541 29 ie gh tn to ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Sum 7,3 9,11 9,69 13 9,89 7,55 p Qua kết phân tích cho thấy F > F crit nên số chồi/mẫu khác sự khác w hàm lượng BAP khác d oa nl 3.2 Phân tích tiêu chiều cao chồi Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum CT 12,33 CT 11,05 CT 9,9 CT 9,3 CT 5 8,13 CT 7,45 ll u nf va an lu oi m z at nh Average Variance 2,466 0,08378 2,21 0,4905 1,98 0,002 1,86 0,043 1,626 0,10438 1,49 0,073 m co 29 l 6,47994667 MS F P-value F crit 0,658661 4,960671 0,002932 2,620654 24 0,132777 gm Total df @ SS 3,29330667 3,18664 z ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups an Lu Qua kết phân tích cho thấy F > F crit nên chiều cao chồi khác sự khác hàm lượng BAP khác n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 50 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP kết hợp với kinetin đến khả nhân chồi sinh trưởng chồi Thổ nhân sâm 4.1 Phân tích tiêu số chồi/ mẫu Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY Count lu an Sum Average Variance BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l 10,5 11,8 11,32 10,48 10,38 2,1 2,36 2,264 2,096 2,076 0,34 0,348 0,45548 0,41708 0,60788 Kinetin 0,0 mg/l Kinetin 0,25 mg/l Kinetin 0,50 mg/l Kinetin 1,0 mg/l Kinetin 1,5 mg/l 5 5 1,76 1,912 3,18 2,14 1,904 0,063 0,00652 0,022 0,098 0,40108 8,8 9,56 15,9 10,7 9,52 SS 0,3186 6,63 Error 2,0438 16 8,9924 24 gh tn to ie n va ANOVA Source of Variation Rows Columns df p MS F 0,07966 0,623599 1,6575 12,97595 4 P-value F crit 0,652364098 3,0069173 6,76053E-05 3,0069173 d oa Total nl w 0,12774 ll u nf va an lu Qua kết phân tích cho thấy: F rows (BAP) < F crit (BAP) nên hàm lượng BAP không ảnh hưởng tới số chồi/ mẫu F colum (kinetin) > F crit (kinetin) nên hàm lượng kinetin ảnh hưởng tới số chồi/ mẫu 4.2 Phân tích tiêu chiều cao chồi Anova: Two-Factor Without Replication Sum Average 10,1 2,02 10,5 2,1 10,3 2,06 9,8 1,96 10,9 2,18 oi Variance 0,062 0,05 0,35175 0,133 0,237 z at nh z 0,055 0,05 0,07 0,083 0,053 n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN 2,6 2,1 2,05 1,81 1,76 an Lu 13 10,5 10,25 9,05 8,8 m co Kinetin 0,0 mg/l Kinetin 0,25 mg/l Kinetin 0,50 mg/l Kinetin 1,0 mg/l Kinetin 1,5 mg/l l gm @ Count 5 5 m SUMMARY BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l ac th si 51 ANOVA Source of Variation Rows Columns Error SS 0,1376 2,2286 1,1064 Total 3,4726 df MS F 0,0344 0,49746927 0,55715 8,0571222 16 0,06915 P-value 0,737937735 0,000931169 F crit 3,00691728 3,00691728 24 Qua kết phân tích cho thấy: F rows (BAP) < F crit (BAP) nên hàm lượng BAP không ảnh hưởng tới chiều cao chồi F colum (kinetin) > F crit (kinetin) nên hàm lượng kinetin ảnh hưởng tới chiều cao chồi lu Nghiên cứu ảnh hưởng BAP kết hợp với IBA đến khả nhân chồi sinh trưởng chồi Thổ nhân sâm 5.1 Phân tích tiêu số chồi/ mẫu an n va Anova: Two-Factor Without Replication tn to p ie gh SUMMARY BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l Sum 7,4 6,92 8,1 6,75 7,6 Average 1,85 1,73 2,025 1,6875 1,9 Variance 0,836666667 0,0236 0,249166667 0,057291667 0,246666667 5 5 6,8 9,55 11,8 8,6 1,36 1,91 2,364 1,72 0,228 0,0155 0,18748 0,047 ll u nf va an lu IBA 0,0 mg/l IBA 0,5 mg/l IBA 1,0 mg/l IBA 1,5 mg/l d oa nl w Count 4 4 oi m z at nh ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit Rows 0,29308 0,07327 0,543129648 0,70737376 3,259166727 Columns 2,62134 0,873778333 6,477070001 0,0074447 3,490294821 Error 1,61884 12 0,134903333 z 19 m co l 4,53326 gm @ Total an Lu Qua kết phân tích cho thấy: F rows (BAP) < F crit (BAP) nên hàm lượng BAP không ảnh hưởng tới số chồi/ mẫu F colum (IBA) > F crit (IBA) nên hàm lượng IBA ảnh hưởng tới số chồi/ mẫu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 52 5.2 Phân tích tiêu chiều cao chồi Anova: Two-Factor Without Replication SUMMARY BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l BAP 1,5 mg/l Count Sum 8,1 8,02 9,15 9,5 7,7 lu IBA 0,0 mg/l IBA 0,5 mg/l IBA 1,0 mg/l IBA 1,5 mg/l an 5 5 Average 2,025 2,005 2,2875 2,375 1,925 Variance 0,0025 0,1601 0,577292 0,229167 0,009167 2,38 2,18 2,064 1,87 0,332 0,087 0,21248 0,0845 11,9 10,9 10,3 9,35 n va gh tn to ANOVA p ie Source of Variation Rows Columns Error df MS F 0,153295 0,817305 0,227978 1,215485 12 0,187562 3,54786 19 P-value 0,538273 0,346339 F crit 3,259167 3,490295 d Total oa nl w SS 0,61318 0,68394 2,25074 lu u nf va an Qua kết phân tích cho thấy: F rows (BAP) < F crit (BAP) nên hàm lượng BAP không ảnh hưởng tới chiều cao chồi F colum (IBA) < F crit (IBA) nên hàm lượng IBA không ảnh hưởng tới chiều cao chồi ll Nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến khả rễ chồi Thổ nhân sâm 6.1 Phân tích tiêu tỷ lệ chồi rễ Anova: Single Factor oi m z at nh SUMMARY Sum Average Variance @ Count z Groups 151,9 30,38 CT 300,3 60,06 CT 326,8 65,36 8,648 CT 400,8 80,16 3,228 CT 5 274,5 54,9 0,55 0,018 m co l n va http://www.lrc.tnu.edu.vn an Lu Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN 0,832 gm CT ac th si 53 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit 1,13EBetween Groups 6609,026 Within Groups Total 1652,257 53,104 20 6662,13 24 622,272 20 2,866081402 2,6552 Qua kết phân tích cho thấy F > F crit nên nồng độ IBA ảnh hưởng đến tỷ lệ chồi rễ lu 6.2 Phân tích tiêu số rễ trung bình an va n Anova: Single Factor tn to SUMMARY Count ie gh Groups Sum Average Variance 8,1 1,62 0,057 CT 11,7 2,34 0,263 14,6 2,92 0,012 20,1 4,02 0,047 13,53 2,706 0,04308 p CT u nf va an lu CT d oa nl CT w CT 15,42294 F P-value F crit 8,76E- 3,855736 45,67542 10 2,866081 20 0,084416 z 1,68832 MS z at nh Within Groups df oi Between Groups SS m Source of Variation ll ANOVA 17,11126 24 m co l gm @ Total Qua kết phân tích cho thấy F > F crit nên nồng độ IBA ảnh hưởng đến số rễ n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN an Lu trung bình chồi Thổ nhân sâm ac th si 54 6.3 Phân tích tiêu chiều dài rễ Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance CT 7,9 1,58 0,017 CT 9,3 1,86 0,01675 CT 10,38 2,076 0,09888 CT 12,8 2,56 0,023 CT 5 9,57 1,914 0,00048 df MS ANOVA Source of Variation SS lu an 2,6138 Within Groups 0,6244 20 Total 3,2382 24 P-value 0,6534 20,928832 F crit 6,4E-07 2,866081 0,0312 n va Between Groups F to dài rễ chồi Thổ nhân sâm ie gh tn Qua kết phân tích cho thấy F > F crit nên nồng độ IBA ảnh hưởng đến chiều p Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể đến tỉ lệ sống, sinh trưởng phát triển in vitro vườn ươm 7.1 Phân tích tiêu tỷ lệ sống nl w lu Count Sum 320,9 379,9 437,6 Average 64,18 75,98 87,52 ll u nf va an SUMMARY Groups CT CT CT d oa Anova: Single Factor Variance 4,577 1,502 13,992 oi m 1361,945333 80,284 12 Total 1442,229333 14 SS df z at nh ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups F Pvalue F crit 101,78456 3E-08 3,885293835 MS z m co l gm @ 680,9726667 6,690333333 an Lu Qua kết phân tích cho thấy F > F crit nên giá thể ảnh hưởng đến tỷ lệ sống Thổ nhân sâm n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si 55 7.2 Phân tích tiêu chiều cao Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum CT 63,8 CT 68,3 CT 70,6 lu an ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 4,79748 38,87968 Total 43,67716 Average 12,76 13,66 14,122 Variance 3,313 2,278 4,12892 df MS F P-value 2,39874 0,7403579 0,49752 12 3,23997333 F crit 3,885293835 14 n va p ie gh tn to Qua kết phân tích cho thấy F< F crit nên giá thể không ảnh hưởng đến chiều cao Thổ nhân sâm d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n http://www.lrc.tnu.edu.vn va Số hóa Trung tâm Học liệu – ĐHTN ac th si