Báo cáo an toàn thực phẩm Nội dung BÀI 1 XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG NITRAT (NO3 ) TRÊN RAU HOA QUẢ BÀI 2 XÁC ĐỊNH SỰ CÓ MẶT CỦA MỘT SỐ HÓA CHẤT TRÊN NÔNG SẢN THỰC PHẨM BÀI 3 XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU VI SINH VẬ[.]
Báo cáo an toàn thực phẩm Nội dung BÀI 1: XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG NITRAT (NO3-) TRÊN RAU HOA QUẢ BÀI 2: XÁC ĐỊNH SỰ CÓ MẶT CỦA MỘT SỐ HĨA CHẤT TRÊN NƠNG SẢN THỰC PHẨM BÀI 3: XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU VI SINH VẬT TRÊN NÔNG SẢN THỰC PHẨM BÀI 1: XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG NITRAT (NO3-) TRÊN RAU HOA QUẢ I.Khái quát chung - Nguyên nhân: + Lạm dụng phân bón hóa học + Sử dụng nguồn nước tưới hợp chất giàu nitơ + Một số hợp chất chứa nitrat - Tác động: + Ngộ độc cấp tính 1-3mg + Ngộ độc mãn tính II.Định lượng nitrat phương pháp so màu với axit disunfophenic 1.Nguyên tắc pH 7.5 – NO3- + disunfophenic trinitrophenol (màu vàng) Xác định cường độ màu quang phổ kế bước song 420 – 460nm 2.Cách tiến hành a Xác định phương trình đường chuẩn dung dịch KNO3 0.01mg/ml -Mẫu chọn phân tích:rau cải OD VKNO3(ml) VH2O(ml) 25 VDD (ml) 25 [N03-] (mg/ml) OD O D1 10 15 20 25 20 15 10 25 25 25 25 25 0.00 0.00 0.00 0.00 0.0 OD2 OD3 OD4 OD5 O D6 Cô cạn dung dịch bếp điện đến giọt,để nguội Sau thêm 1ml axit disunfophenic láng bề mặt cặn thêm 20ml nước cất từ từ nhỏ NAOH 10% đến dung dịch có màu vàng khơng đổi.Lên thể tích dung dịch 50ml bình định mức => Xác định cường độ màu quang phổ kế b.Tiến hành phân tích mẫu -Mẫu rửa ,vẩy nước,thái nhỏ,trộn -Cân 6.12g mẫu đưa vào bình tam giác 250ml , thêm 75ml nước cất -Đun sôi phút bếp điện,để nguội lọc lấy tồn dịch - Lên thể tích 100ml bình định mức Hút 10ml dịch vào cốc thủy tinh sau cạn dung dịch,để nguội -Thêm 1ml axit disunfophenic thêm 20ml nước cất tứ từ nhỏ NaOH 10% đến dung dịch có màu vàng khơng đổi,lên thể tích 50ml sau xác định cường độ quang 3.Tính kết a.Kết [NO3-](mg/ml) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,01 Ta có: OD 0,3774 0,6950 1,4406 1,8181 2,2823 ODmẫu = 1.029 Từ phương trình y =235.42x – 0.0749 Thay y= 1.029 vào ta x = 4.7 x 10-3 Áp dụng công thức : A (mg/kg) = x V 1000 V 1.P Trong đó: A dư lượng NO3- có rau (mg/kg) x nồng độ NO3- tính từ phương trình đường chuẩn (mg/ml) V tổng thể tích chiết từ mẫu (100ml) V1 thể tích mẫu đem phân tích (10ml) P khối lượng mẫu đem phân tích (g) Với P = 6.12g Vậy lượng NO3- mẫu rau muống là: A= 4.7 X 10−3 X 100 X 1000 10 X 6.12 = 7.68mg/kg Nhận xét: Hàm lượng NO3- cho phép 500mg/kg nên lượng NO3- mẫu rau đem phân tích chấp nhận sử dụng Tuy nhiên không nên ăn hàng ngày với số lượng lớn dẫn đến tích tụ NO3- dẫn đến ngộ độc nitrat BÀI 2: XÁC ĐỊNH SỰ CĨ MẶT CỦA MỘT SỐ HĨA CHẤT TRÊN NƠNG SẢN THỰC PHẨM I.Xác định có mặt Wofatox (parathion Metyl) 1.Nguyên tắc: Hợp chất parathion Metyl không bền môi trường kiềm phản ứng với NaOH tạo chất natri paranitrophenolat chất có màu vàng rơm Cách tiến hành Mẫu nghiên cứu: Dưa chuột đỗ - Chiết thuốc bảo vệ thực vật khỏi sản phẩm bông, cồn - Đun nhẹ để cồn bay làm tăng nồng độ thuốc - Lấy 3ml dịch chiết cho vào ống nghiệm, sau cho thêm 3ml NaOH 1N lắc quan sát Đánh giá kết Cả dưa chuột đỗ: dung dịch ống nghiệm không màu ( hay khơng có màu vàng ) Kết luận: dưa chuột đỗ khơng có dư lượng wofatox thuốc bảo vệ thực vật lân hữu \ BÀI 3: XÁC ĐỊNH MỘT SỐ CHỈ TIÊU VI SINH VẬT TRÊN NÔNG SẢN THỰC PHẨM II Định lượng số tiêu vi sinh vật 1.Khái quát chung vấn đề cần tìm hiểu * Tổng số vi khuẩn hiếu khí * Tổng số nấm men, nấm mốc * Tổng số coliform - Colifrom nhóm vi khuẩn gram (-), khơng sinh bào tử, hơ hấp hiếu khí kị khí tùy tiện Trong mơi trường có đường lactozo vi khuẩn colofrom có khả lên men sinh axit sinh khí Khi ni cấy 37°C mơi trường VRBL khuẩn lạc coliform có màu đỏ đến đỏ đậm,đường kính > 0,5 mm Xung quanh khuẩn lạc có vùng đổi màu mơi trường từ đỏ tím đến vàng nhạt - Nhóm vi khuẩn colifrom bao gồm giống: + Enterobacter: salmonella, shigella vibriora + Escherichia: E.coli + Klebsiella + Citrobacter II Nguyên tắc phương pháp phân tích vi sinh vật cách đếm khuẩn lạc môi trường thạch chọn lọc - Mẫu đồng pha lỗng đến nồng độ thích hợp cấy môi trường thạch chọn lọc VRBL Xác định số lượng khuẩn lạc sau 48h -Với vi khuẩn hiếu khí dùng mơi trường PCA -Nấm men, nấm mốc dùng môi trường YGC -Coliform dùng môi trường VRBL III Cách tiến hành Mẫu nghiên cứu: cà phê -Pha loãng mẫu Mục đích: giảm nồng độ dung dịch xuống 10 lần sau lần pha lỗng Từ mật độ khuẩn lạc giảm giúp ta dễ đếm Trước hết cho 1g cà phê vào ống nghiệm sau thêm 9ml nước cất, lắc ta dung dịch có nồng độ 10-1 lắc cho cà phê tan vào nước cất Tiếp theo ta hút 1ml dung dich cho vào ống nghiệm 2, thêm vào 9ml nước cất, lắc ta dung dịch có nồng độ 10-2 Tiếp tục hút 1ml dung dịch thu cho vào ống nghiệm 3,thêm vào 9ml nước cất,lắc ta dung dịch có nồng độ 10-2 -Cấy mẫu vào đĩa petri Ở ống nghiệm 2,3 ta hút dung dịch vào ba đĩa petri, đĩa 1ml, ta có đĩa -Chuẩn bị mơi trường rót mơi trường vào đĩa petri Khi làm môi trường đợi nguội đến 500C ta rót vào đĩa petri cấy mẫu, chiều dày lớp môi trường mm Xoay đĩa bốn vòng theo chiều kim đồng hồ bốn vòng ngược chiều kim đồng hồ mẫu mơi trường hịa Đợi cho môi trường đông hẳn đặt nuôi tủ ấm có điều kiện thích hợp IV Tính tốn kết -Kết thu Nồng độ Môi trường PCA Môi trường YGC Mơi trường VRBL -Tính tốn A (CFU/g) = 10 -2 110 10-3 97 58 37 N R n vf 1+ n2 vf Trong đó: N tổng số khuẩn lạc đếm n số đĩa nồng độ pha loãng v thể tích mẫu đem cấy f độ pha loãng R hệ số khẳng định với coliform R= 0,9 ; vi khuẩn hiếu khí nấm men,nấm mốc R=1 + Mật độ vi khuẩn hiếu khí A= 207 −3 1.1 ( 10 ) +1.1( 10 ) −2 x 1= 18818 (CFU/g) + Mật độ nấm men,nấm mốc A= 14 −3 1.1 ( 10 ) +1.1( 10 ) −2 x 1= 1273 (CFU/g) + Mật độ colifrom A = 95 1.1 ( 10 ) +1.1( 10−3 ) −2 x 0,9 = 7773 (CFU/g)