(Luận văn) nghiên cứu sử dụng vi sinh vật nội sinh để sản xuất chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức năng từ phế thải chăn nuôi dạng lỏng

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ MỸ DUYÊN lu an va NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG VI SINH VẬT NỘI SINH ĐỂ n SẢN XUẤT CHẾ PHẨM DINH DƯỠNG VI SINH ĐA tn to p ie gh CHỨC NĂNG TỪ PHẾ THẢI CHĂN NUÔI DẠNG LỎNG d oa nl w an lu Khoa học Môi trường Mã số: u nf va Chuyên ngành: 60 44 03 01 ll m oi Người hướng dẫn khoa học: TS Nguyễn Thị Minh z at nh z m co l gm @ an Lu NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2018 n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn, thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn lu an va n Nguyễn Thị Mỹ Duyên p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th i si LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn, tơi nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới TS Nguyễn Thị Minh tận tình hướng dẫn giúp đỡ tơi suốt q trình học tập nghiên cứu Tơi xin gửi lời cảm ơn tới thầy - cô giáo khoa Môi trường, trường Học viện Nông nghiệp Việt Nam truyền đạt cho nhiều kiến thức quý báu lu Tôi xin gửi lời cảm ơn tới phịng thí nghiệm Jica, khoa Quản lý đất đai, Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ tơi q trình làm luận văn an n va Cuối xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè người bên cạnh ủng hộ tơi suốt q trình học tập tn to Hà Nội, ngày tháng năm 2017 p ie gh Tác giả luận văn oa nl w d Nguyễn Thị Mỹ Duyên ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th ii si MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng vi Danh mục hình vii Danh mục chữ viết tắt viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract xi lu n va Tính cấp thiết đề tài 1.2 Giả thuyết khoa học 1.3 Mục tiêu nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu 1.5 Những đóng góp mới, ý nghĩa khoa học thực tiễn tn to 1.1 gh an Phần Mở đầu 1.4 p ie Tình hình phát triển chăn ni, trạng phế thải chăn nuôi giới oa nl 2.1 w Phần Tổng quan tài liệu d Việt Nam lu Tình hình phát triển chăn ni Thế Giới Việt Nam 2.1.2 Hiện trạng chất thải chăn nuôi tác động chúng đến môi trường 2.1.3 Các biện pháp xử lý phế thải chăn nuôi 10 2.2 Cơ sở khoa học việc sử dụng vi sinh vật nội sinh để sản xuất chế ll u nf va an 2.1.1 oi m phẩm sinh học 15 z at nh Khả phân giải hợp chất hữu vi sinh vật 15 2.2.2 Khả phân giải chuyển hóa lân vi sinh vật 16 2.2.3 Khả cố định Nitơ vi sinh vật 18 2.2.4 Khả tổng hợp IAA vi sinh vật 18 2.2.5 Khả kháng bệnh hại trồng 19 2.3 Tổng quan vi sinh vật nội sinh chế phẩm sinh học 20 2.3.1 Tổng quan vi sinh vật nội sinh 20 2.3.2 Tổng quan chế phẩm sinh học 24 z 2.2.1 m co l gm @ an Lu n va ac th iii si 2.4 Tình hình nghiên cứu sử dụng vi sinh vật nội sinh chế phẩm sinh học giới Việt Nam 26 2.4.1 Tình hình nghiên cứu sử dụng VSV nội sinh chế phẩm sinh học Thế giới 26 2.4.2 Tình hình nghiên cứu sử dụng VSV nội sinh chế phẩm sinh học Việt Nam 27 Phần Nội dung phương pháp nghiên cứu 31 lu an Địa điểm nghiên cứu 31 3.2 Thời gian nghiên cứu 31 3.3 Đối tượng/vật liệu nghiên cứu 31 3.4 Nội dung nghiên cứu 31 3.5 Phương pháp nghiên cứu 31 3.5.1 Tuyển chọn giống vi sinh vật theo phương pháp đánh giá trực tiếp đặc n va 3.1 tn to tính sinh học chủng vi sinh vật mơi trường chun tính gh điều kiện khác 31 Xác định điều kiện nhân giống thích hợp cho chủng VSV nội sinh p ie 3.5.2 Xác định chất lượng chế phẩm dinh dưỡng vi sinh từ phế thải chăn nl w 3.5.3 tuyển chọn 34 Giống vi sinh vật dịch dinh dưỡng sau xử lý phế thải chăn ni d lu 3.5.4 oa ni, tính chất đất thí nghiệm 35 va an phối trộn theo phương pháp phối trộn chất mang không trùng 35 Thí nghiệm chậu vại 35 3.5.6 Phương pháp xử lý số liệu 36 ll u nf 3.5.5 oi m Phần Kết thảo luận 37 Tuyển chọn giống vi sinh vật nội sinh có hoạt tính sinh học cao 37 4.1.1 Đánh giá khả tổng hợp IAA, phân giải lân, phân giải xenlulo, phân z at nh 4.1 z giải tinh bột chủng vi sinh vật nội sinh 37 @ Đánh giá khả chịu nhiệt thích ứng pH chủng vi sinh vật 43 4.1.3 Đánh giá tính đối kháng chủng vi sinh vật 48 4.1.4 Đánh giá khả kháng bệnh chủng vi sinh vật tuyển chọn 49 4.2 Xác định điều kiện nhân sinh khối tối ưu cho giống vsv tuyển chọn 51 4.2.1 Ảnh hưởng pH môi trường 51 m co l gm 4.1.2 an Lu n va ac th iv si 4.2.2 Ảnh hưởng nhiệt độ 52 4.2.3 Ảnh hưởng tốc độ lắc 54 4.2.4 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy 55 4.2.5 Ảnh hưởng nồng độ muối 57 4.3 Chất lượng chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức từ vsv nội sinh đa chức phế thải chăn nuôi dạng lỏng 58 4.4 Đánh giá hiệu chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức 59 4.4.1 Hiệu chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức tới sinh trưởng phát triển trồng 59 4.4.2 Hiệu chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức tới việc cải lu tạo đất 60 an Phần Kết luận kiến nghị 62 n va Kết luận 62 5.2 Kiến nghị 63 tn to 5.1 p ie gh Tài liệu tham khảo 64 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th v si DANH MỤC BẢNG lu an n va Bảng 2.1 Số lượng gia súc gia cầm năm 2013-2016 Bảng 2.2 Định hướng phát triển đàn gia súc, gia cầm đến năm 2020 Bảng 2.3 Ước tính lượng chất thải rắn chăn nuôi phát sinh từ năm 2015-2016 Bảng 4.2 Kết khả phân giải lân VSV nội sinh 40 Bảng 4.3 Kết khả phân giải xenlulozơ VSV nội sinh 41 Bảng 4.4 Kết phân giải vòng tinh bột VSV nội sinh 42 Bảng 4.5 Khả chịu nhiệt chủng vi sinh vật 45 Bảng 4.6 Khả thích ứng pH chủng vi sinh vật 47 Bảng 4.7 Khả kháng bệnh chủng vi sinh vật tuyển chọn 49 Bảng 4.8 Đặc tính sinh học chủng vi sinh vật nội sinh tuyển chọn 50 Bảng 4.9 Ảnh hưởng pH đến số lượng vi khuẩn 51 Bảng 4.11 Ảnh hưởng tốc độ lắc đến số lượng vi khuẩn 54 gh tn to Bảng 4.10 Ảnh hưởng nhiệt độ đến số lượng vi khuẩn 52 ie Bảng 4.12 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến số lượng vi khuẩn 56 p Bảng 4.13 Ảnh hưởng nồng độ muối đến số lượng vi khuẩn 57 nl w Bảng 4.14 Chất lượng chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức 59 oa Bảng 4.15 Một số tiêu sinh trưởng trồng sau thí nghiệm 60 d Bảng 4.16 Tính chất đất trước sau thí nghiệm 60 ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th vi si DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Sơ đồ chuyển hoá hợp chất lân hữu thành muối H3PO4 16 Hình 4.1 Khả thích ứng với nhiệt độ số chủng VSV 44 Hình 4.2 Khả thích ứng pH chủng 6RN2 (pH=5) chủng 6RN1(pH=6) 46 Hình 4.3 Chủng vi sinh vật nội sinh tuyển chọn 48 Hình 4.4 Tính đối kháng của chủng vi sinh vật tuyển chọn 48 Hình 4.5 Vịng kháng bệnh nấm chủng 6TCCH1 Ecoli chủng 3RMT 49 Hình 4.6 Ảnh hưởng pH môi trường đến hàm lượng IAA 52 Hình 4.7 Ảnh hưởng pH môi trường đến hàm lượng IAA 53 lu an Hình 4.8 Ảnh hưởng tốc độ lắc đến hàm lượng IAA 55 n va Hình 4.9 Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy đến hàm lượng IAA 56 p ie gh tn to Hình 4.10 Ảnh hưởng nồng độ muối đến hàm lượng IAA 58 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th vii si DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT lu an Nghĩa tiếng việt BTNMT Bộ Tài nguyên Môi trường BNNPTNT Bộ Nông nghiệp Phát triển nông thôn BVTV Bảo vệ thực vật CTR Chất thải rắn CT Cơng thức IAA Kích thích tố Auxin QCVN Quy chuẩn Việt Nam n va Tên viết tắt gh tn to Tiêu chuẩn Việt Nam p ie TCVN Vi sinh đa chức Vi sinh vật d oa VSV nl w VSDCN ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th viii si TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Thị Mỹ Duyên Tên luận văn: Nghiên cứu sử dụng vi sinh vật nội sinh để sản xuất chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức từ phế thải chăn nuôi dạng lỏng Ngành: Khoa học Môi trường Mã số: 60 44 03 01 Tên sở đào tạo: Học Viện Nơng Nghiệp Việt Nam lu Mục đích nghiên cứu: Tuyển chọn giống vi sinh vật nội sinh có hoạt tính sinh học cao (có khả kích thích sinh trưởng phát triển trồng, phân giải chuyển hóa lân chất hữu cơ, kháng bệnh hại, ) từ vùng sinh thái trồng khác Xác định điều kiện nhân sinh khối tối ưu cho giống VSV tuyển chọn Sản xuất chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức từ VSV nội sinh phế thải chăn nuôi dạng lỏng an va n Phương pháp nghiên cứu: p ie gh tn to Nghiên cứu thực tuyển chọn giống vi sinh vật nội sinh có hoạt tính sinh học cao (khả sinh IAA, chuyển hóa lân, ) từ vi sinh vật nội sinh phân lập từ vùng có điều kiện sinh thái khác Sau tuyển chọn vi sinh vật có hoạt tính sinh học cao, tiến hành xác định điều kiện nhân sinh khối tối ưu cho giống VSV tuyển chọn Việc đánh giá chất lượng chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức từ VSV nội sinh phế thải chăn nuôi dạng lỏng thực đối tượng mồng tơi d oa nl w lu ll u nf va an Nghiên cứu sử dụng phương pháp: Tuyển chọn giống vi sinh vật theo phương pháp đánh giá trực tiếp đặc tính sinh học chủng vi sinh vật mơi trường chun tính điều kiện khác nhau; Xác định chất lượng chế phẩm dinh dưỡng vi sinh từ phế thải chăn ni, tính chất đất thí nghiệm theo TCVN hàm lượng chất hữu cơ, hàm lượng chất dinh dưỡng chính, độ ẩm, pH ; Giống vi sinh vật dịch dinh dưỡng sau xử lý phế thải chăn nuôi phối trộn theo phương pháp phối trộn chất mang khơng trùng; Thí nghiệm chậu vại theo phương pháp Vicent (1976) gồm công thức với lần nhắc lại: Công thức 0: Đối chứng (bón theo thâm canh địa phương), Cơng thức 1: Bón dịch dinh dưỡng từ phế thải chăn ni, Cơng thức 2: Bón chế phẩm dinh dưỡng VSDCN Theo dõi tiêu: Số lá, Chiều cao cây, Diện tích lá, Năng suất Các số liệu thu thập xử lý phần mềm IRRISTAT oi m z at nh z m co l gm @ Kết nghiên cứu kết luận: an Lu Nghiên cứu tìm 08 chủng vi sinh vật nội sinh có hoạt tính sinh học cao: 3RMT, 3TMT2, 6TCCH1, 6TCCH2, 6RCC2, 7TCCH, 8TCCH 8RCCH2 Các n va ac th ix si PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Từ 40 chủng vi sinh vật nội sinh phân lập, tuyển chọn từ vùng sinh thái khác Nghiên cứu tiến hành đánh giá khả tổng hợp IAA, phân giải lân, tinh bột, xenlullo chọn 08 chủng VSV nội sinh có hoạt tính tốt gồm: 3RMT, 3TMT2, 6TCCH1, 6TCCH2, 6RCC2, 7TCCH, 8TCCH 8RCCH2 Các chủng VSV nội sinh khơng đối kháng có khả kháng loại bệnh ( Nấm Fusarium, Salmonella, E.coli) lu an n va p ie gh tn to Thí nghiệm xác định điều kiện nhân sinh khối VSV: pH, nhiệt độ, tốc độ lắc, thời gian nuôi cấy, nồng độ muối Kết cho thấy hầu hết VSV nội sinh sinh trưởng, phát triển tốt khả sinh tổng hợp IAA mơi trường pH trung tính kiềm nhẹ; Các VSV nội sinh có ngưỡng phát triển rộng nhiệt độ từ 20-40oC, đặc biệt chúng hoạt động tốt khoảng nhiệt từ 25 - 30oC; Số lượng tế bào, sinh tổng hợp IAA tăng theo tốc độ lắc, đạt cao 200 vịng/phút; Thời gian ni cấy: phần lớn VSV đạt số lượng tế bào lớn sau 48 nuôi cấy đồng thời khoảng thời gian lượng IAA tổng hợp đạt giá trị lớn Đối với yếu tố nồng độ muối chủng VSV có khả chịu mặn tương đối tốt với nồng đô 4-5%, Tuy nhiên, nồng độ muối oa nl w d thấp khả tổng hợp IAA cao lu oi m quản lý phân bón ll u nf va an Chế phẩm tạo thành cách phối trộn VSV với dịch dinh dưỡng từ phế thải chăn nuôi xử lý với tỉ lệ 1/3 Qua phân tích hàm lượng chất dinh dưỡng, tỉ lệ vi sinh vật chế phẩm đạt theo nghị định 108/2017/NĐ – CP z at nh Qua thí nghiệm đánh giá hiệu chế phẩm mồng tơi, kết cho thấy chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức có tác dụng thúc đẩy sinh trưởng phát triển trồng Các tiêu theo dõi: chiều cao cây, số lá, diện tích lá, suất trồng bón chế phẩm cao nhiều so với trồng không sử dụng chế phẩm mức sai số có ý nghĩa LSD5% Ngồi ra, chế phẩm cịn có tác dụng tích cực đất trồng, cung cấp hàm lượng lớn vi sinh vật hữu ích cho đất, vi sinh vật có khả chuyển hóa lân khó tiêu, chất hữu tạo thành chất dinh dưỡng dễ tiêu giúp z m co l gm @ an Lu trồng hấp thụ n va ac th 62 si 5.2 KIẾN NGHỊ Do thời gian thực đề tài có hạn nên chưa thể sâu nghiên cứu kỹ chế phẩm dinh dưỡng vi sinh đa chức năng, kiến nghị: - Cần mở rộng thử nghiệm quy mơ lớn ngồi đồng ruộng, loại trồng khác thời vụ vùng sinh thái khác để có đánh giá tổng thể hiệu chế phẩm - Đánh giá sâu hiệu vi sinh vật nội sinh, khả xâm nhập chúng vào trồng lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 63 si TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu Tiếng Việt: Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn (2015) Đẩy nhanh tái cấu phát triển ngành chăn nuôi Bùi Thị Hiền, Phân hữu sản xuất nông nghiệp bền vững Việt Nam.http://iasvn.org/upload/files/ZS0UBQV8ZNBH%20HienPhan%20huu%20 co.pdf Thứ 2, 16/01/2017 Cao Ngọc Điệp Nguyễn Ái Chi (2009) Phân lập đặc tính vi khuẩn nội sinh Khóm trồng đất phèn huyện Bến Lức, tỉnh Long An, Việt lu an Nam Tuyển tập cơng trình nghiên cứu hội nghị Công nghệ sinh học năm Vinh Cao Ngọc Điệp (2008) Phân lập vi khuẩn phân giải cellulose, tinh bột to gh Hà Thanh Toàn, Mai Thu Thảo, Nguyễn Thu Phướng, TRần Lê Kim Ngân, Bùi Thế n tn va 2009 tổ chức thành phố Hồ Chí Minh, 23-24, tháng 10 năm 2009 Minh Long, STINFO Số 11 (2012), Nông nghiệp bền vững với chế phẩm sinh p ie protein nước rỉ rác thành phố Cần Thơ Tạp chí Khoa học 2008:10 195-202 w học http://www.cesti.gov.vn/khong-gian-cong-nghe/nong-nghiep-ben-vung-voiNguyễn Thi Thu Hà, Hà Thanh Toàn Cao Ngoc Điệp (2009) Phân lập đặc d oa nl che-pham-sinh-hoc.html Thứ 2, 16/1/2017 lu an tính dịng vi khuẩn nội sinh số cỏ chăn ni Tạp chí Cơng u nf va nghệ sinh học 7(2), 241-250 Nguyễn Hữu Hiệp Nguyễn Thị Hải Lý (2012) Phân lập dịng vi khuẩn có ll Nguyễn Thị Minh (2005) Phân lập tuyển chọn nấm rễ Arbuscular Mycorrhizae z at nh oi m khả phân hủy tinh bột Tạp chí Khoa học 2012:21a 37-44 để xử lý cho trồng Tạp chí Khoa học đất Việt Nam, (23) tr 46-51 Nguyễn Lân Dũng, Bùi Thị Việt Hà (2009) Sinh trưởng phát triển Vi z gm @ sinh vật http://vietsciences.free.fr/khaocuu/nguyenlandung/vsv14.htm Thứ 4, ngày 21/2/2017 l Trần Minh Hiền, Trần Thị Kim Cúc, Mai Thanh Trúc, Ngơ Thị Bích Ngọc, Đỗ m co 10 Trung Bình (2013) Ứng dụng công nghệ vi sinh sản xuât chế phẩm vi sinh an Lu phân hữu vi sinh n va ac th 64 si 11 Phạm Văn Toản Phạm Bích Hiên (2014), Nghiên cứu sử dụng vi sinh vật phân giải lân Việt Nam http://iasvn.org/upload/files/S63W5SP9H4su%20dung%20vi%20sinh%20vat%2 0phan%20giai.pdf Thứ 3, 17/01/2017 12 Dairy Việt Nam (2010) Tình hình chăn ni giới khu vực Http://www.dairyvietnam.com/vn/Sua-The-gioi/Tinh-hinh-chan-nuoi-the-gioiva-khu-vuc.html Thứ 7, ngày 18/2/2017 13 Lưu Nguyễn Thành Công (2014) Thực trạng sử dụng hóa chất bảo vệ thực vật vấn đề nhiễm chế phẩm hóa học sử dụng Nông nghiệp Việt Nam 1-2 14 Lương Thị Hồng Hiệp, Cao Ngọc Điệp (2011) Phân lập nhận diện vi khuẩn lu nội sinh cúc xuyến chi an 15 Lương Đức Phẩm (2011) Giáo trình Sản xuất sử dụng chế phẩm sinh học va n nông nghiệp NXB Giáo dục Việt Nam Mai Thế Hào (2016) Chất thải chăn nuôi số biện pháp xử lý tn to 16 phap-xu-ly Thứ 6, ngày 17/2/2017 p ie gh Http://safa.com.vn/vi/view-1098-chat-thai-trong-chan-nuoi-va-mot-so-bienNguyễn Thị Huỳnh Như, Nguyễn Hữu Hiệp, Nguyễn Minh Đời, Trần Nguyễn w 17 oa nl Nhật Khoa, Thái Trần Phương Minh (2013) Phân lập dịng vi khuẩn nội sinh có khả tổng hợp IAA cố định đạm chuối d Nguyễn Văn Minh, Mai Hữu Phúc, Võ Ngọc Yến Nhi, Dương Nhật Linh, an lu 18 va Nguyễn Anh Nghĩa (2014) Sàng lọc vi sinh vật nội sinh cao su có khả Phúc Văn (2013) Chất thải chăn nuôi gây sức ép đến môi trường ll m 19 u nf kiểm soát sinh học vi nấm Corynespora cassiicola oi http://www.donre.hochiminhcity.gov.vn/tintuc/Lists/Posts/Post.aspx?List=f73ce z at nh bc3-9669-400e-b5fd-9e63a89949f0&ID=3511 Thứ 7, ngày 04/2/2017 20 Tổng cục thống kê (2017) Tổng đàn gia súc gia cầm tính đến 01/10/2016 z Trần Thị Xuân Phương (2016) Nghiên cứu sử dụng số chế phẩm sinh học gm 21 @ https://www.gso.gov.vn/default.aspx?tabid=71 Thứ 5, ngày 26/1/2017 m co l sản xuất lúa an toàn theo tiêu chuẩn VietGap tỉnh Thừa Thiên Huế an Lu n va ac th 65 si Tài liệu tiếng Anh: 22 Bergey (2009) Bergay manual’s of systermatic Bacteriology Second edition William B Whitman Springer, USA, pp 19-21 23 Barbieri, P., T Zanelli, E Galli and G Zanetti, (1986) Wheat inoculation with Azospirillum brazilance Sp6 and some mutants altered in nitrogen fixation and indole-3-acetic acid production FEMS Microbiology Letters 36,87-90 24 Benhamou, N., Kloepper, JW., Quadt-Hallman, A., Tuzon, S., (1996) Induction of defense-related ultrastructural modification in pea root tissues inoculated with endophytic bacteria Plant Physiol 112, 919-929 25 Boddey, R M , O C De Oliveira, S Urquiaga, V M Reis, F L Olivares, V lu L D Baldani and J Döbereiner (1995) Biological nitrogen fixation associated an with sugar cane and rice: contributions and prospects for improvement Plant va n Soil 174: 195 – 209 gh tn to 26 Campbell I (1971) Comparison of Serological and Physiological Classification of the Genus Saccharomyces Journal of General Microbiology 3, p 189-198 p ie 27 Costacurta, A., V Keijers and J Vanderleyden, (1994) Molecular cloning and w sequence analysis of an Azospirillum brasilense indole-3-pyruvate decarboxylase oa nl gene Mol Gen Genet, 243: 463-472 28 Döbereiner, J., (1974) Nitrogen-fixing bacteria in the rhizosphere In The biology d an lu of nitrogen fixation, ed A Quispel, Amsterdam, The netherlands: North Holland va Publishing Company: 86-120 u nf 29 Harari, A., J Kigel and Y Okon, (1988) Involvement of IAA in the interaction ll between Azospirillum brasilense and Panicum miliaceum roots Plant and Soil oi m 110, 275–282 z at nh 30 Glickmann, E., L Gardan, S Jacquet and Y Desseaux, (1998) Auxin Production is a common feature of most pathovars of Pseudomonas syringae Molecular z @ Plant-of mineral phosphates: historical perspective and future prospects Microbe gm Interaction, 11: 156-162 m co l 31 Hallmann, J (2001) Plant Interactions with Endophytic Bacteria In: Jeger, M.J and N.J Spence (Eds.) Biotic Interactions in Plant-Pathogen Associations CAB an Lu International, USA., pp: 87 - 119 n va ac th 66 si 32 Hwangbo, H., D.R Park, W.Y Kim, S.Y Rim, H.K Park, H.T Kim, S.J Suh and Y K Kim, (2003) 2-ketogluconic acid production and phosphate solubilization by Enterobacter intermedium, Cur Microbiol, 47: 87-92 33 Khan, Z and L.S Doty, (2009) Characterization of bacterial endophytes of sweet potato plants Plant Soil DOI 10.1007 34 Kloepper, J.W., R Lifshitz and M.R Zablotowicz, (1989) Free-living bacterial inocula for enhancing crop productivity Trends Biotechnology, 7: 39-43 35 Madhaiyan, M., S.V Saravannan, S.D Jovi, H Lee, R Thenmozhi, K Hair and T Sa, (2004) Occurrence of Gluconacetobacter diazotrophicus in tropical and subtropical plants of Western Ghats, India, Microbiological research, 159: 233-243 lu 36 Pillay, V.K and J Norwak, (1997) Inoculum density, temperature, and genotype an effects on in vitro growth promotion and epiphytic and endophytic colonization of va n tomato (Lycospersicon esculentum L.) seedlings inoculated with a Pseudomonas tn to bacterium Can J Microbiol, 43: 354-361 Sergeeva, E., A Liaimer and B Bergman, (2002) Evidence for production of the phytohormone indole-3-acetic acid by cyanobacteria Planta, 215: 229-238 p ie gh 37 w 38 Seshadri, S., R Muthurumarasimha, C Laksminarasimha and S Ignacirunthu, oa nl (2000) Solubilization of inorganic by Azospirillum halopraeferans, Current science, 79: 565-567 d an lu 39 Koga, J., T Adachi, H Hidaka (1991) Molecular cloning of the gene for u nf 226(1-2): 10 - va indolepyruvate decarboxylase from Enterobacter cloacae Mol Gen Genet, ll 40 Rosenblueth M and E Martínez-Romero, (2006) Bacterial endophytes and their m oi interactions with hosts Am Phytopathol Soc 19, 827-837 z at nh 41 Van, T.V., P Mavingui, O Berge and T Heulin, (1994) Promotion de croissance du riz incocule par une bacteria fixatrice dazote, Burkhoderia vietnamensis, z @ isolated in soil acid Viet Nam, Agronomie, 14: 697-707 gm 42 Zinniel, D K., P Lambrecht, N B Harris, Z Feng, D Kuezmarski, P Highley, m co l C Ishimaru, A Arunakumari, G R Barletta and A K Vidaver, (2002) Isolation and characterization of endophytic colonizing bacteria from agronomic crops and an Lu prairie plants Appl Environ Microbiol 59, 2198-2208 n va ac th 67 si PHỤ LỤC Phụ lục Xử lý số liệu phần mềm IRRISTAT tiêu Chiều cao BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE CCC 13/ 9/17 22:50 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI CHIEU CAO CAY VARIATE V003 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF lu SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 184.465 92.2327 124.51 0.000 NL 2.44580 611449 0.83 0.546 * RESIDUAL 5.92618 740773 * TOTAL (CORRECTED) 14 192.837 13.7741 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CCC 13/ 9/17 22:50 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI CHIEU CAO CAY an n va tn to MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 5 p ie gh CCC 16.4200 20.0800 24.9800 oa nl w SE(N= 5) 0.384908 5%LSD 8DF 1.25515 - d MEANS FOR EFFECT NL NOS 3 3 CCC 20.6733 19.7133 20.5100 20.8300 20.7400 ll u nf va an lu NL oi m SE(N= 3) 0.496915 5%LSD 8DF 1.62039 - z at nh ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CCC 13/ 9/17 22:50 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI CHIEU CAO CAY z 15 20.493 3.7113 0.86068 |NL | | | | | | | 4.2 0.0000 m co CCC STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | l GRAND MEAN (N= 15) NO OBS gm VARIATE @ F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - 0.5457 an Lu n va ac th 68 si Phụ lục Xử lý số liệu phần mềm IRRISTAT tiêu Số BALANCED ANOVA FOR VARIATE SLA FILE SLA 13/ 9/17 22:59 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI SO LA VARIATE V003 SLA LN SOURCE OF VARIATION DF lu SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 14.0440 7.02200 95.62 0.000 NL 390733 976832E-01 1.33 0.338 * RESIDUAL 587467 734333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 15.0222 1.07301 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SLA 13/ 9/17 22:59 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI SO LA an n va MEANS FOR EFFECT CT CT SLA 7.18000 7.92000 9.50000 gh tn to NOS 5 p ie SE(N= 5) 0.121189 5%LSD 8DF 0.395184 - NL NOS 3 3 d oa SLA 8.05333 8.00000 8.42333 8.33667 8.18667 va an lu nl w MEANS FOR EFFECT NL - ll u nf SE(N= 3) 0.156454 5%LSD 8DF 0.510180 - m ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SLA 13/ 9/17 22:59 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI SO LA oi z at nh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0359 0.27099 3.3 0.0000 z |NL | | | 0.3380 | | | | m co l gm @ SLA GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 8.2000 an Lu n va ac th 69 si Phụ lục Xử lý số liệu phần mềm IRRISTAT tiêu Diện tích BALANCED ANOVA FOR VARIATE DTLA FILE DTLA 13/ 9/17 23:54 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI DIEN TICH LA VARIATE V003 DTLA LN SOURCE OF VARIATION DF lu SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 803.562 401.781 484.01 0.000 NL 2.72850 682125 0.82 0.548 * RESIDUAL 6.64080 830100 * TOTAL (CORRECTED) 14 812.931 58.0665 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DTLA 13/ 9/17 23:54 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI DIEN TICH LA an n va MEANS FOR EFFECT CT CT DTLA 22.1700 30.2800 40.0720 gh tn to NOS 5 p ie SE(N= 5) 0.407456 5%LSD 8DF 1.32867 - NL NOS 3 3 d oa DTLA 30.1433 31.1233 30.6600 31.3967 30.8800 va an lu nl w MEANS FOR EFFECT NL - ll u nf SE(N= 3) 0.526023 5%LSD 8DF 1.71531 - m ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DTLA 13/ 9/17 23:54 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI DIEN TICH LA oi z at nh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 7.6201 0.91110 3.0 0.0000 z |NL | | | 0.5476 | | | | m co l gm @ DTLA GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 30.841 an Lu n va ac th 70 si Phụ lục Xử lý số liệu phần mềm IRRISTAT tiêu Năng suất BALANCED ANOVA FOR VARIATE NS FILE NSUAT 13/ 9/17 23:30 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI NANG SUAT VARIATE V003 NS LN SOURCE OF VARIATION DF lu SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3430.43 1715.22 952.76 0.000 NL 41.6719 10.4180 5.79 0.018 * RESIDUAL 14.4020 1.80025 * TOTAL (CORRECTED) 14 3486.51 249.036 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NSUAT 13/ 9/17 23:30 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI NANG SUAT an n va MEANS FOR EFFECT CT CT NS 39.7400 55.8700 76.6840 gh tn to NOS 5 p ie SE(N= 5) 0.600042 5%LSD 8DF 1.95668 - NL NOS 3 3 d oa NS 57.6833 55.4433 57.2367 56.4000 60.3933 va an lu nl w MEANS FOR EFFECT NL - ll u nf SE(N= 3) 0.774651 5%LSD 8DF 2.52606 - m ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NSUAT 13/ 9/17 23:30 :PAGE PHAN TICH PHUONG SAI NANG SUAT oi z at nh F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 15.781 1.3417 2.3 0.0000 z |NL | | | 0.0177 | | | | m co l gm @ NS GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 57.431 an Lu n va ac th 71 si Phụ lục Chất lượng phế thải chăn nuôi dạng lỏng sau xử lý STT Chỉ tiêu pH Kết TCVN 6168:2002 lu 7,6 6-8 OM% 9,41 - N% 1,76 - P2O5% 0,04 - K2O% 4,14 - Salmonella (CFU/ml) - an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 72 si Phụ lục Nguồn gốc 40 chủng VSV nội sinh phân lập tuyển chọn sơ từ vùng sinh thái khác Môi STT Ký hiệu Thời trường phân gian Nguồn gốc Đặc điểm khuẩn lạc mọc lập (h) lu an n va 1TX TSA Thân Cỏ Hôi 24 Trắng đục, viền trơn, không nhầy, lồi 3LDC LB Lá Diếp Cá 48 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi, tròn 3LMT2 LB Lá Mồng Tơi 48 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi, tròn 3RDC2 LB Rễ Diếp Cá 24 Vàng đục, viền trơn, nhầy, lồi, trịn 3RMT LB Rễ Ngơ 24 Vàng, viền trơn, nhầy, lồi, trịn 3RN2 LB Rễ Ngơ 24 Trắng đục, viền trơn, khơ, trịn 3TCC LB Thân Cải Cúc 24 3TCCH1 LB gh tn to Thân Cải Chíp p ie 3TCCH2 Thân Cải LB Chíp nl w Thân Mồng oa 3TMT2 LB 11 3TN1 LB 12 6LDC2 13 d 10 lồi, tròn 24 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi 24 Vàng cam, viền trơn, nhầy, tròn 24 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi, trịn Trắng đục, viền trơn, khơng nhầy, 24 NA 24 6LDC3 NA Lá Diếp Cá 14 6LMT NA Lá Mồng Tơi 24 Hồng nhạt, viền trơn, nhầy, lồi, tròn 15 6LN2 NA Lá Ngô 24 Cam nhạt, viền trơn, nhầy, lồi, tròn 16 6RCC2 NA Rễ Cải Cúc 24 17 6RCCH NA Rễ Cải Chíp 24 18 6RN1 NA Rễ Ngô 24 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi 19 6RN2 NA Rễ Ngô 24 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi, trịn 20 6RN3 NA Rễ Ngơ 24 Trắng đục, viền trơn, không nhầy, lồi va Thân Ngô u nf an lu Tơi Trắng đục, viền trơn, nhầy, không Lá Diếp Cá lồi, tròn Trắng, viền trơn, nhầy, lồi, tròn ll oi m Da cam, viền trơn, không nhầy, lồi, 24 z at nh tròn z @ Vàng cam, viền trơn, nhầy, lồi gm Trắng đục, viền trơn, không nhầy, m co l không lồi an Lu n va ac th 73 si 6RN4 NA 22 6TCCH1 NA 23 6TCCH2 NA 24 6TDC1 NA 25 6TDC2 NA 26 6TDC3 NA 27 6TN1 NA Thân Ngô 24 Trắng, viền trơn, nhầy, khơng lồi 7LCCH2 Hansen Lá Cải chíp 24 Vàng, viền trơn, nhầy, lồi 29 7LDC3 Hansen Lá Diếp Cá 24 30 7RCC3 Hansen Rễ Cải Cúc 24 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi 31 gh 7RCCH Hansen Rễ Cải chíp 24 Trắng đục, viền trơn, không nhầy, lồi 32 7RN1 Hansen Rễ Ngô 24 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi 7RX Hansen Rễ Cỏ Hôi 24 Trắng, viền trơn, nhầy, lồi Hansen Thân Cải Cúc 24 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi 24 Trắng, viền trơn, nhầy, không lồi 24 Vàng nhạt, viền trơn, nhầy, lồi Rễ Cải chíp 24 Vàng nhạt, viền trơn, nhầy, lồi Rễ Cải chíp 24 vàng, viền trơn, nhầy, lồi 24 Vàng nhạt, viền trơn, nhầy, lồi 36 Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi lu 21 an 28 Rễ Ngô 24 Thân Cải Trắng đục, viền trơn, nhầy, lồi Vàng, viền trơn, không nhầy, không 24 chíp Thân Cải lồi Vàng cam, viền trơn, khơng nhầy, 24 chíp Thân Diếp Cá Thân Diếp Cá Thân Diếp không lồi 24 Trắng đục, viền trơn, nhầy, không lồi 24 Vàng, viền trơn, nhầy, không lồi Trắng đục, viền trơn, không nhầy, 24 Cá không lồi n va Vàng nhạt, viền trơn, nhầy, không tn to lồi p ie nl 7TCC1 Hansen Thân Cải chíp 36 8LCCH LGI Lá Cải chíp 37 8RCCH1 LGI 38 8RCCH2 LGI 39 8TCCH LGI 40 10NS8 YMA ll u nf va an lu 7TCCH d oa 35 w 34 33 oi m Thân Cải Nốt sần Lạc z at nh chíp z m co l gm @ an Lu n va ac th 74 si Phụ lục 7: Hình ảnh Hình 4.1: Các chủng vi sinh vật có khả sinh IAA làm đổi màu thuốc thử lu an n va tn to p ie gh Hình 4.2 Khả phân giải lân chủng 6TCCH1 2TDC1 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu Hình 4.3 Vịng phân giải xenlulo chủng 3TCCH 6TDC2 n va ac th 75 si lu an va n Hình 4.4: Khả phân giải tinh bột chủng 6LN2 3LDC p ie gh tn to Hình 4.5: Hình ảnh bố trí thí nghiệm trồng rau mồng tơi d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 76 si