(Luận văn) nghiên cứu thành phần bệnh nấm hại trên cây gừng và nghệ tại hà nội và phụ cận

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM LÊ THỊ THỦY lu an n va NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN BỆNH NẤM HẠI p ie gh tn to TRÊN CÂY GỪNG VÀ NGHỆ TẠI HÀ NỘI VÀ PHỤ CẬN oa nl w Bảo vệ thực vật d Ngành: an lu 60 62 01 10 Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Hà Viết Cường ll u nf va Mã ngành: oi m z at nh z m co l gm @ an Lu NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2018 n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn, thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày… tháng… năm 2017 Tác giả luận văn lu an va n Lê Thị Thủy p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th i si LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn, nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận văn, cho phép tơi bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Hà Viết Cường tận tình hướng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập thực đề tài Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Bệnh cây, Khoa Nông học - Học viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, thực đề tài hồn thành luận văn lu an Tơi xin chân thành cảm ơn cán Trung tâm Bệnh nhiệt đới – Học viện Nông nghiệp Việt Nam, cán Trung tâm thuốc Hà Nội giúp đỡ tạo điều kiện cho suốt trình thực đề tài n va ie gh tn to Xin chân thành cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ mặt, động viên khuyến khích tơi hồn thành luận văn./ p Hà Nội, ngày… tháng… năm 2017 d oa nl w Tác giả luận văn an lu ll u nf va Lê Thị Thủy oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th ii si MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract x lu Phần Mở đầu an n va Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu đề tài ie gh tn to 1.1 p Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Tiềm thuốc Việt Nam vấn đề bệnh hại w Đặc điểm phân loại, nông học, ứng dụng số bệnh hại gừng nghệ 2.2.1 Cây Nghệ (Curcuma longa) 2.2.2 Cây gừng (Zingiber officinale) 2.3 Một số nguyên nhân gây hại dược liệu 2.3.1 Lớp nấm trứng OOmycetes 2.3.2 Pythium sp 10 2.3.3 Phytopythium sp 13 2.3.4 Nấm Fusarium oxysporum gây bệnh héo vàng 14 2.4 Xác định danh tính nấm giải trình tự vùng ITS 16 d oa nl 2.2 ll u nf va an lu oi m z at nh z @ Phần Vật liệu phương pháp nghiên cứu 17 Địa điểm thời gian 17 3.2 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 17 3.2.1 Đối tượng nghiên cứu 17 3.2.2 Vật liệu nghiên cứu: 17 3.3 Nội dung nghiên cứu 20 m co l gm 3.1 an Lu n va ac th iii si 3.4 Phương pháp nghiên cứu 20 3.4.1 Phương pháp điều tra thành phần bệnh hại 20 3.4.2 Phương pháp điều tra mức độ gây hại, quy luật phát sinh phát triển bệnh 26 3.4.3 Phương pháp đánh giá khả đối kháng vi khuẩn đối kháng với nấm gây bệnh 27 3.4.4 Đánh giá hiệu lực số loại thuốc hóa học mơi trường nhân tạo 27 3.4.5 Đánh giá hiệu lực số loại thuốc trừ nấm bệnh thối gốc rễ nghệ đồng ruộng 28 Phần Kết thảo luận 29 lu an n va Thành phần bệnh hại nghệ gừng Hà Nội phụ cận năm 2016 29 4.1.1 Thành phần bệnh hại nghệ Quảng Ninh, Hưng Yên Hà Nội 29 4.1.2 Đặc điểm triệu chứng tác nhân gây bệnh nghệ 30 4.1.2 Thành phần bệnh hại gừng Hà Nội Lạng Sơn 32 tn to 4.1 Nghiên cứu bệnh thối gốc rễ nghệ Hưng Yên 32 4.2.1 Phân lập mẫu nghệ bị bệnh thối gốc rễ mẫu đất trồng nghệ p ie gh 4.2 Đặc điểm hình thái nấm phân lập nghệ bệnh Khoái nl w 4.2.2 Hưng Yên 33 oa Châu – Hưng Yên năm 2017 36 Lây nhiễm Fusarium Pythium phân lập nghệ 43 4.2.4 Xác định lồi Pythium Py1 Py2 giải trình tự vùng ITS 46 4.2.5 Sự phát sinh phát triển bệnh thối gốc rễ nghệ Hưng Yên năm d 4.2.3 u nf va an lu ll 2017 49 Ảnh hưởng mật độ trồng đến bệnh thối gốc rễ nghệ Hưng oi m 4.2.6 4.2.7 z at nh Yên năm 2017 50 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến bệnh thối gốc rễ nghệ Hưng z Yên năm 2017 51 @ Thử nghiệm khả ức chế sinh trưởng loài Pythium gm 4.2.8 l aphanidermatum Phytopythium helicoides thuốc hóa học vi 4.2.9 m co khuẩn đối kháng điều kiện invitro 52 Khả ức chế sinh trưởng số loại thuốc hóa học nấm an Lu Pythium spp đồng ruộng 55 n va ac th iv si Phần Kết luận đề nghị 57 5.1 Kết luận 57 5.2 Đề nghị 57 Tài liệu tham khảo 59 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th v si DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Nghĩa tiếng việt CTAB Cetyl trimethylammonium bromide F oxysporum Fusarium oxysporum PCR Polymerase Chain Reaction P helicoides Pythium helicoides P aphanidermatum Pythium aphanidermatum P myriotylum Pythium myriotylum lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th vi si DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Thành phần bệnh hại nghệ Quảng Ninh, Hưng Yên Hà Nội năm 2016 29 Bảng 4.2 Kết phân lập nấm từ mẫu Nghệ bị bệnh thối gốc rễ Chí Tân – Khối Châu – Hưng n năm 2017 34 Bảng 4.3 Kết bẫy Phytophthora/Pythium từ đất vùng rễ nghệ bệnh thối gốc rễ thu Chí Tân – Khoái Châu – Hưng Yên năm 2017 (sau bẫy ngày) 35 Bảng 4.4 Đặc điểm hình thái mẫu Pythium Py1 phân lập nghệ bệnh thối gốc rễ Khoái Châu – Hưng Yên năm 2017 37 lu Bảng 4.5 an Đặc điểm hình thái mẫu Pythium Py2 phân lập nghệ va bệnh thối gốc rễ Khoái Châu – Hưng Yên năm 2017 39 n Bảng 4.6 Quá trình hình thành giải phóng động bào tử mẫu Pythium to tn Py2 40 Đặc điểm hình thái mẫu nấm Fusarium phân lập nghệ bệnh thối gốc rễ Khoái Châu – Hưng Yên năm 2017 42 Bảng 4.8 Kết lấy nhiễm nấm Fusarium nghệ 43 p ie gh Bảng 4.7 w Kết lây nhiễm nhân tạo nấm loài Pythium nghệ 45 nl Bảng 4.9 d oa Bảng 4.10 Kết giải trình tự mẫu nấm Pythium gây bệnh thối gốc rễ an lu Khoái Châu – Hưng Yên năm 2017 46 Bảng 4.12 Kết tìm kiếm Ngân hàng gen (GeneBank) dựa trình tự va u nf ITS mẫu Py1 Py2 48 ll Bảng 4.12 Diễn biến bệnh thối gốc rễ nghệ Chí Tân – Khối Châu – Hưng m oi n năm 2017 49 z at nh Bảng 4.13 Ảnh hưởng mật độ trồng đến bệnh thối gốc rễ nghệ Hưng Yên 50 z Bảng 4.14 Ảnh hưởng thời vụ trồng đến bệnh thối gốc rễ nghệ Hưng @ Yên 51 gm Bảng 4.15 Hiệu lực ức chế sinh trưởng thuốc hóa học vi khuẩn đối kháng l m co Pythium aphanidermatum Phytopythium helicoides môi trường nhân tạo 53 an Lu Bảng 4.16 Ảnh hưởng số thuốc hóa học đến bệnh thối gốc rễ nghệ 55 n va ac th vii si DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Sơ đồ minh họa cụm gen rDNA sinh vật nhân thật 16 Hình 4.1 Triệu chứng bệnh thối rễ nấm Pythium sp 30 Hình 4.2 Triệu chứng bệnh thối gốc rễ nấm Pythium sp 31 Hình 4.3 Triệu chứng cháy nghệ 31 Hình 4.4 Triệu chứng ban đầu bệnh thán thư nghệ 32 Hình 4.5 Mẫu nghệ nhiễm bệnh mức độ triệu chứng khác Chí Tân – Khoái Châu - Hưng Yên (2017) 33 Hình 4.6 Bẫy Phytophthora/Pythium từ đất vùng rễ nghệ bệnh thối gốc rễ thu Chí Tân – Khối Châu – Hưng n năm 2017 cánh hoa lu an hồng, bầu táo 36 n va Hình 4.7 Đặc điểm hình thái mẫu Pythium Py1 38 Hình 4.9 Q trình hình thành giải phóng động bào tử mẫu Pythium Py2 41 gh tn to Hình 4.8 Đặc điểm hình thái mẫu Pythium Py2 39 p ie Hình 4.10 Bọc giả (false-heads) cành sinh bào tử (phialide) nấm Fusarium sp nghệ 42 nl w Hình 4.11 Kết lây nhiễm nhân tạo nấm loài Pythium nghệ 45 oa Hình 4.12 PCR nhân vùng ITS mẫu Pythium Py1 Py2 phân lập từ d nghệ bệnh thối gốc rễ thu Khoái Châu – Hưng Yên năm 2017 47 lu an Hình 4.13 Hiệu lực ức chế sinh trưởng thuốc hóa học vi khuẩn đối kháng u nf va Pythium aphanidermatum Phytopythium helicoides môi trường nhân tạo 54 ll oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th viii si TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Lê Thị Thuỷ Tên luận văn: “Nghiên cứu thành phần bệnh nấm hại gừng nghệ Hà Nội phụ cận” Ngành: Bảo vệ thực vật Mã số: 60 62 01 10 Tên sở đào tạo: Học Viện Nơng Nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu: Xác định thành phần nấm hại mức độ gây hại chúng gừng nghệ, khảo sát hiệu lực ức chế nấm bệnh thuốc hố học vi khuẩn đối kháng mơi trường nhân tạo lu an n va p ie gh tn to Phương pháp nghiên cứu: Nội dung nghiên cứu đề tài: điều tra thành phần, mức độ gây hại, quy luật phát sinh phát triển nấm bệnh gây hại nghệ Đồng thời thử nghiệm hiệu lực vi khuẩn đối kháng thuốc hoá học nấm bệnh môi trường nhân tạo hiệu lực thuốc hóa học ngồi đồng ruộng Nguồn mẫu bệnh thu thập Hưng Yên, Quảng Ninh Hà Nội, giống nghệ sử dụng nghệ vàng Trung tâm thuốc Hà Nội d oa nl w Phương pháp sử dụng nghiên cứu bao gồm phương pháp: điều tra thành phần bệnh hại (thu mẫu, xác định nguyên nhân gây bệnh, bẫy nấm đất, đếm bào tử, lây nhiễm nhân tạo, bảo quản mẫu bệnh, giám định nấm hình thái kỹ thuật PCR); Điều tra mức độ gây hại, quy luật phát sinh phát triển bệnh, đánh giá khả đối kháng vi khuẩn có ích; Đánh giá hiệu lực số thuốc hoá học nấm bệnh u nf va an lu Kết kết luận ll Xác định thành phần bệnh hại nghệ Hà Nội, Quảng Ninh Hưng Yên: Bệnh thối gốc rễ nấm Pythium sp., bệnh thán thư nấm Collectotrichum sp., bệnh cháy nấm Curvularia sp oi m z at nh z Phát loài gây bệnh thối gốc rễ nghiêm trọng nghệ Hưng Yên Phytopythium helicoides Pythium aphanidermatum @ m co l gm Thử nghiệm thuốc hóa học Metaxyl 500WP, Tachigaren Ridomil Gol 68WP ngồi đồng cho thấy loại thuốc có khả phòng trừ bệnh thối gốc rễ Phytopythium helicoides Pythium aphanidermatum gây hại Trong mang lại hiệu phòng trừ bệnh hại nghệ cao thuốc Metaxyl 500WP an Lu n va ac th ix si Bệnh thối gốc rễ nghệ tăng dần theo giai đoạn sinh trưởng thời vụ trồng Càng cuối giai đoạn sinh trưởng bị nhiễm bệnh nặng, điển hình vào đợt điều tra vào tháng 12, tháng trước thu hoạch nghệ, thời vụ trồng nghệ 20-4 bị nhiễm nâm Pythium spp nặng với tỷ lệ bệnh lên đến 43,4% Hai thời vụ trồng nghệ sớm vào ngày 15 tháng tháng bị nhiễm bệnh tỷ lệ bệnh công thức thấp thời vụ muộn tỷ lệ bệnh cao 24.4% 29,3% Như vậy, hiệu phịng trừ khơng cao thời vụ trồng nghệ sớm từ 15 tháng giảm ảnh hưởng bệnh thối gốc rễ so với thời vụ muộn lu trồng vào đầu tháng cuối tháng an 4.2.8 Thử nghiệm khả ức chế sinh trưởng loài Pythium va n aphanidermatum Phytopythium helicoides thuốc hóa học vi khuẩn Trong thí nghiệm này, khả ức chế sinh trưởng loài Pythium ie gh tn to đối kháng điều kiện invitro p Phytopythium gây bệnh nghệ đánh giá điều kiện invitro với w loại thuốc hóa học lồi vi khuẩn đối kháng oa nl Hai thuốc hóa học Hymexazol Ridomil Gold 68WG Hymexazol sử d dụng thí nghiệm dạng tinh khiết, đặc hiệu Pythium, thành phần hoạt an lu chất thuốc Tachigaren 30SL đăng ký Việt Nam Ridomil Gold 68WG u nf va thuốc khuyến cáo đặc hiệu cho nhóm nấm trứng Hai vi khuẩn đối kháng Achromobacter xylosoxidans (mẫu N2) ll oi m Alcaligenes faecalis (mẫu HT1) Trung tâm NCBC nhiệt đới phân lập năm z at nh 2017, đánh giá hiệu lực chứng tỏ có khả ức chế cao nấm gây bệnh Phytophthora, Sclerotium Colletotrichum z Thí nghiệm thực đĩa Petri với lần lặp lại với nồng độ gm @ thuốc Kết thí nghiệm trình bày Bảng 4.15 Hình 4.11 l Kết thí nghiệm cho thấy: m co  Thuốc Ridomil Gold 68WG có khả ức chế tuyệt đối sinh trưởng loài Pythium/Phytopythium gây bệnh nồng độ xử lý 1.2; 2.4 an Lu 4.8 g/L tương ứng với nồng độ khuyến cáo 0.5x; 1x 2x n va ac th 52 si  Thuốc Hymexazol có hiệu lực ức chế 0% đối Pythium aphanidermatum nồng độ xử lý 10, 25 50 ppm Quan sát đĩa thí nghiệm với loài cho thấy, nấm phát triển kín đĩa giống cơng thức đối chứng, tản nấm mọc thưa sát bề mặt mơi trường Hymexazol có hiệu lực ức chế cao, 72 – 73%, loài Phytopythium helicoides nồng độ xử lý  Cả loài vi khuẩn đối kháng Achromobacter xylosoxidans (N2) Alcaligenes faecalis (HT1) khơng có khả ức chế sinh trưởng loài Pythium/Phytopythium Cả loài nấm gây bệnh phát triển vượt qua vạch vi khuẩn đối kháng mực kín đĩa giống đĩa đối chứng sau ngày thí nghiệm lu Bảng 4.15 Hiệu lực ức chế sinh trưởng thuốc hóa học vi khuẩn đối kháng Pythium aphanidermatum Phytopythium helicoides an n va môi trường nhân tạo p ie Nồng độ Đơn vị 1.2 g/L 2.4 g/L 4.8 10.0 100 Đường kính tản (cm) Hiệu lực ức chế (%) 100 100 100 g/L 100 100 ppm 2.5 72.2 25.0 ppm 2.5 72.2 2.4 73.3 9 0 9 Đường kính tản (cm) oa nl w d Ridomil Gold 68WG (Syngenta) va an lu oi m ppm Hiệu lực ức chế (%) z at nh z Achromobacter xylosoxidans (N2) 50.0 ll Hymexazol, tinh khiết, (Sigma) Phytopythium helicoides u nf Thuốc/vi khuẩn đối kháng gh tn to Pythium aphanidermatum m co lý) l Đối chứng (không xử gm @ Alcaligenes faecalis (HT1) trưởng kín đĩa an Lu Ghi chú: Thí nghiệm đánh giá sau ngày ni cấy sau ngày nấm đĩa đối chứng sinh n va ac th 53 si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z l gm @ m co Hình 4.13 Hiệu lực ức chế sinh trưởng thuốc hóa học vi khuẩn đối kháng Pythium aphanidermatum Phytopythium helicoides an Lu môi trường nhân tạo n va ac th 54 si 4.2.9 Khả ức chế sinh trưởng số loại thuốc hóa học nấm Pythium spp đồng ruộng Theo kết điều tra nhóm BVTV trung tâm thuốc Hà Nội, bệnh thối gốc rễ phát sinh từ giai đoạn tỷ lệ bệnh thấp, bệnh bị hại nặng bước vào giai đoạn hình thành củ Kết hợp với điều tra định kỳ theo dõi xác định thời điểm thực thí nghiệm vào đầu tháng 8, giai đoạn mẫm cảm nghệ với bệnh thối gốc rễ Do để góp phần vào quy trình phịng trừ tổng hợp loại tác nhân tiến hành thí nghiệm thử thuốc để khảo sát đánh giá hiệu lực số loại thuốc chứa hoạt chất phòng trừ Pythium spp hoạt chất metalaxyl, mancozeb, hymexazon kết thí nghiệm thể bảng 4.16 lu an Bảng 4.16 Ảnh hưởng số thuốc hóa học n va đến bệnh thối gốc rễ nghệ tn to Tỷ lệ bệnh (%) Trước phun Sau phun 14 ngày 26,7 Sau phun ngày Sau phun 21 ngày 29,8 14,7 18,0 Tachigaren 30 L 12,0 28,7 35,3 42,7 Ridomil Gold 68 WP 9,3 44,0 52,7 40,0 13,3 61,3 71,3 83,3 Mataxyl 500 WP w p ie gh Công thức d oa nl va an lu Nước lã ll u nf Qua bảng kết cho thấy: Ở công thức xử lý thuốc hiệu phịng trừ bệnh thối gốc rễ cao so với với công thức đối chứng sau phun ngày, 14 ngày 21 ngày, nhiên công thức thuốc khác oi m z at nh ảnh hưởng khác đến bệnh thối gốc rễ nghệ z Hiệu phòng trừ thuốc thể rõ sau ngày phun cơng thức xử lý Mataxyl 500 WP liều lượng 1,6g/ 1l nước có tỉ lệ bệnh sau ngày phun 18,0%, sau đến cơng thức tưới gốc thuốc Tarchigaren 30L có tỉ lệ bệnh sau ngày 28,7% công thức sử dụng thuốc Ridomil Gold 68WG có tỉ lệ bệnh sau ngày 44,0% Trong cơng thức đối chứng tỷ lệ bệnh tiếp tục tăng cao sau ngày theo dõi, cao 60% Sau phun 14 ngày, hiệu lực loại thuốc thí nghiệm bắt đầu giảm dần thuốc Mataxyl 500 WP có hiệu lực phịng trừ cao với tỉ lệ bệnh 26,7 % m co l gm @ an Lu n va ac th 55 si đối chứng 71,3% Sau 21 ngày theo dõi loại thuốc sử dụng hiệu lực hồn tồn Từ kết khảo sát phịng trừ nấm bệnh số thuốc đồng ruộng rút kết luận bị nhiễm bệnh thối gốc rễ Pythium spp gây nên sử dụng thuốc Mataxyl 500 WP thuốc có hoạt chất metalaxyl với hàm lượng cao dùng để phun vào gốc kiểm sốt bệnh nấm gây ra, bên cạnh để hiệu phòng trừ cao hơn, nên phun nhắc lại sau 14 ngày để hiệu lực thuốc trì lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 56 si PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Thành phần bệnh hại nghệ bệnh thối gốc rễ nấm Pythium spp., bệnh thán thư nấm Colletotrichum sp., bệnh đốm nấm Curvularia sp Trong bệnh nấm hại quan trọng nghệ bệnh thối gốc rễ Kết điều tra thành phần bệnh hại gừng vào vụ Xuân năm 2017 Lạng Sơn Hà nội, không phát thấy bệnh hại Đã phân lập loài nấm Fusarium sp loài Pythium (được ký lu hiệu Py1 Py2) từ nghệ bị bệnh thối gốc rễ Khoái Châu – Hưng Yên an Thí nghiệm lây nhiễm nhân tạo cho thấy có lồi Pythium có khả n va gây bệnh tn to Phân tích hình thái giải trình tự vùng ITS xác định loài Pythium gh gây bệnh thối gốc rễ nghệ Khoái Châu – Hưng Yên Pythium p ie aphanidermatum Phythopythium helicoides Điều tra đồng ruộng cho thấy tỷ lệ bệnh thối gốc rễ nghệ Khoái nl w Châu - Hưng Yên tăng dần theo thời gian sinh trưởng Mật độ trồng d oa thời vụ trồng có ảnh hưởng đến mức độ nhiễm bệnh an lu Trong điều kiện invitro, thuốc Ridomil Gol 68WP có khả ức chế va sinh trưởng tuyệt đối loài Pythium PhytoPythium; thuốc Hymexazol có u nf khả ức chế sinh trưởng loài Pythium Phytopythium ll Thử nghiệm thuốc hóa học Metaxyl 500WP, Tachigaren Ridomil m oi Gol 68WP đồng cho thấy loại thuốc có khả phịng trừ bệnh z at nh thối gốc rễ nấm Pythium spp gây hại Trong mang lại hiệu phịng trừ bệnh hại nghệ cao thuốc Metaxyl 500WP z gm @ 5.2 ĐỀ NGHỊ Vì thời gian nghiên cứu đề tài có hạn, nên số lượng mẫu l thu chưa nhiều chưa đa dạng Thời vụ, điều kiện ngoại cảnh m co chưa phù hợp với điều kiện thực tế gây bệnh Vì cần tiếp tục thực đề an Lu tài, tiến hành thu thập thêm mẫu tiếp tục lây nhiễm để khẳng định kết đề tài n va ac th 57 si Bố trí thêm công thức lây bệnh tăng số lượng lây để xác định xác tác nhân gây bệnh mức độ hại chúng Lây nhiễm lại mẫu nấm cho nghệ hồng hoa thời vụ để so sánh tính độc mẫu nấm với Khuyến cáo hộ nông dân sử dụng đúng, sử dụng luân phiên loại thuốc trừ nấm hại nghệ vụ lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 58 si TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT: Đỗ Huy Bích cộng tác viên (2004) Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, Tập II, NXB Khoa học kỹ thuật Đỗ Tất Lợi, 2006 Những thuốc vị thuốc Việt Nam NXB y học Hà Viết Cường, Phạm Thị Thu Thuỷ, Nguyễn Xuân Trường, Cao Thị Hiền Chi, Đinh Văn Lộc (2016) Phát Pythium helicoides gây bệnh thối gốc rễ hồng hoa Hà Nội Tạp chí KHCNNN (4) Lester W Burgess, Timothy E Knight, Len Tesoriero, Phan Thúy Hiền, 2009 lu an Cẩm nang chẩn đoán bệnh Việt Nam Lester W.Burgess, TS Fiona Benyon, TS Nguyễn Kim Vân, TS Ngô Vĩnh n va to Viễn, ThS Nguyễn Thị Ly, KS Trần Nguyễn Hà, KS Đặng Lưu Hoa, 2001 Nguyễn Bá Hoạt, 2010 Tiềm trạng nguồn tài nguyên dược liệu Việt Nam p ie gh tn Bệnh nấm đất hại trồng – Nguyên nhân biện pháp phòng trừ Nguyễn Kim Vân cs (2006) “Nguyên nhân gây bệnh hại hạt giống lúa, ngô, nl w oa đậu tương, lạc, rau số tỉnh phía bắc Việt Nam biện pháp phịng trừ” d Tạp chí KHKT Nơng nghiệp, IV(6) tr 39-47 lu Nguyễn Quốc Bình, 2015 Đặc điểm hình thái số loài chi nghệ an u nf va (Curcuma) có tác dụng làm thuốc Tây Nguyên Hội nghị Khoa học toàn quốc sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ ll Nguyễn Thành Hiếu công ty, 2012 Nghiên cứu xác định tác nhân đặc oi m z at nh điểm sinh học tác nhân gây bệnh thối rễ vú sữa Hội thảo quốc gia Bệnh hại thực vật Việt Nam 20-23/4/2012 Nguyễn Thế Hinh (2014) Nghiên Cứu Sâu Bệnh, Cỏ Dại Trong Hệ Thống z 10 @ gm Trồng Xen Cây Mạch Môn (Ophiopogon japonicus Wall.) Với Cây Trồng Khác Nguyễn Thị Minh Tâm, 2012 Chuyên đề: Nghiên cứu tình hình sản xuất nhu m co 11 l Tại Tỉnh Phú Thọ Luận án TS Viện KHNN Việt Nam cầu dược liệu Việt Nam – Dự án “Đánh giá tiềm tổ chức áp dụng mơ an Lu hình trồng dược liệu địa bàn tỉnh Sóc Sơn” n va ac th 59 si 12 Nguyễn Văn Bá, Cao Ngọc Diệp, Nguyễn Văn Thành (2005) Giáo trình nấm học, NXB Đại học Cần Thơ, Cần Thơ 13 Nguyễn Văn Tuất, 2002 Phương pháp chuẩn đoán giám định nấm vi khuẩn hại trồng, NXB Nơng nghiệp 14 Phạm Hồng Hộ, 2003 Cây có vị thuốc Việt Nam Nhà xuất Trẻ 15 Viện BVTV (1997) Phương pháp nghiên cứu bảo vệ thực vật tập1, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội 16 Võ Văn Chi, 2005 Giáo trình dược liệu – Trường Trung cấp Y dược Mekong 17 Vũ Triệu Mân (2007) Giáo trình bênh chun khoa, NXB Nơng Nghiệp, Hà Nội, Việt Nam lu TÀI LIỆU TIẾNG ANH: an n va 18 Agrios G N (2005) Plant Pathology Academic Press, USA 19 Anoop K and R Suseela Bhai (2014) Evaluation of antagonistic potential of to tn indigenous trichoderma isolates against Pythium aphanidermatum (edson) fitz pp.99-105 p ie gh Causing rhizome rot in turmeric (Curcuma Longa L.) Journal of Science 4(2) Bala K., G P Robideau, C A Lévesque, A W A M de Cock, Z G Abad, A w 20 oa nl M Lodhi (2010) Phytopythium Abad, de cock, Bala, Robideau & Lévesque, gen Nov and Phytopythium sindhum Lodhi, Shahzad & Lévesque, sp nov d Burgess L.W., B A Summerell, S Bullock, K P Gott and D Backhouse va 21 an lu Persoonia, 24 pp.136–137 edition) Australia, 123p m Burgess L.W., Knight T.E., Tesoriero L and Phan H.T (2008) Diagnostic oi 22 ll u nf (1994) Laboratory Mannual for Fusarium Research Univ of Sydney (3rd z at nh manual for plant diseases in Vietnam, ACIAR Monograph No 129, 210pp ACIAR: Canberra Burgess L.W., T E Knight, L Tesoriero and H T Phan (2008) Diagnostic z @ 23 gm manual for plant diseases in Vietnam, ACIAR Monograph No 129, 210pp Burgess, L.W., B.A Summerell, S Bullock, K.P Gott, and D Backhouse m co 24 l ACIAR: Canberra an Lu (1994) Laboratory Mannual for Fusarium Research Univ of Sydney (3rd edition) Australia, 123p n va ac th 60 si 25 CABI (2017) Pythium aphanidermatum (damping-off) Wallingford, UK: CAB International http://www.cabi.org/cpc/datasheet/46141 26 Chen X R., B B Liu, Y P Xing, B P Cheng, M L Liu, Y H Tong and J Y Xu (2016) Identification and characterization of Phytopythium helicoides causing stem rot of Shatangju mandarin seedlings in China European Journal of Plant Pathology, 146(4) pp.715-727 27 De Cock A W A M., A M Lodhi, T L Rintoul, K Bala, G P Robideau and Z Gloria Abad (2015) Phytopythium: molecular phylogeny and systematics Persoonia pp.25–39 28 Donalt C E and O K Riberio (2005) Phytophthora diseases Worldwide APS Press, St Paul, Minnesota, 562p lu an 29 Huang J H (2009) First report of root rot of Tibouchina semidecandra caused n va by Pythium helicoides in Taiwan Plant Pathol Bull pp 51-56 Kandiannan K (2008) Agriculture Technology information Centre Indian Institute of Spices Research tn to 30 Kala and C Parker (1997) Pythium aphanidermatum, Soilborne plant pathogens class project NC State University U S 728p p ie gh 31 32 Lewis J.A and R D Lumsden (1984) Reduction of pre-emergence damping-off w oa nl of peas caused by Pythium ultimum with calcium oxide Canadian Journal of d Plant Pathology Lin YS and Lo CT (1988) Control of Pythium damping off and root rot of an lu 33 Luong, T M., Huynh, L M T., Hoang, H M T., Tesoriero, L A., Burgess, L u nf 34 va cucumber with S-H mixture as soil amendment Plant Protection Bulletin, Taiwan ll W., Phan, H T., & Davies, P (2010) First report of Pythium root rot of m oi chrysanthemum in Vietnam and control with metalaxyl drench Australasian 35 Martin F.M (1992) z at nh Plant Disease Notes, 5(1) pp.51-54 Pythium, in Methods for Research on Soilborne z PhytoPathogenic Fungi, edited by L.L Singleton, J.D Mihail and C.M Rush gm Moulin F, P Lemanceau and C Alabouvette (1996) Suppression of Pythium l 36 @ APS Press St Paul, MN pp.39-49 m co root rot of cucumber by a fluorescent pseudomonad is related to reduced root colonization by Pythium aphanidermatum Journal of PhytoPathology, 144(3) an Lu pp.125-129; 36 ref n va ac th 61 si 37 Muthusamy M, C K S Rajagopalan and P Vidhyasekaran (1973) Control of damping-off of tomato Indian Journal of Agricultural Sciences 38 Sarathi V., R.S Kumar and P Selvam (2014) Studies on rhizome rot pathogen in Curcuma longa International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences (8) pp.296 – 302 39 Sawant I.S, A.N Mukhopadhyay (1991) Integration of metalaxyl with Trichoderma harzianum for the control of Pythium damping-off in sugarbeet Indian PhytoPathology 40 Siddiqi M R (1986) Tylenchida: parasites of plants and insects CABI, 80p http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/Type/s_rolfs.htm lu 41 van der Plaats-Niterink A J (1981) Monograph of the genus Pythium (Vol 21, an pp 1-242) Baarn: Centraalbureau voor Schimmelcultures va 42 Wang K X., Y L Xie, G Q Yuan, Q Q Li, and W Lin (2015) First Report n tn to of Root and Collar Rot Caused by Phytopythium helicoides on Kiwifruit gh (Actinidia chinensis) Plant Disease, 99(5) 725p Wu WenShi (1998) The effects of bioagent-amended potting medium to p ie 43 control Rhizoctonia solani, Phytophthora capsici and Pythium nl w aphanidermatum for cultivating healthy horticultural crops Plant Pathology Yang X., P A Richardson, H A Olson and C X Hong (2013) Root and stem d lu 44 oa Bulletin, 7(1) pp.54-65; 36 ref va an rot of begonia caused by Phytopythium helicoides in Virginia Plant Disease, Yin X., X Z Li, J J Yin and X Wu (2016) First Report of Phytopythium ll 45 u nf 97(10) pp.1385-1385 z at nh 100(2) 532p oi m helicoides Causing Rhizome Rot of Asian Lotus in China Plant Disease, z m co l gm @ an Lu n va ac th 62 si Phụ Lục Kết xử lý thống kê thí nghiệm đồng ruộng BALANCED ANOVA FOR VARIATE TM FILE SLT 14/11/17 11: :PAGE Anh huong mat den benh thoi re tren Nghe tai Hung yen VARIATE V003 TM LN SOURCE OF VARIATION DF lu SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 1.34889 674444 1.91 0.261 CT$ 15.3689 7.68444 21.78 0.009 * RESIDUAL 1.41111 352778 * TOTAL (CORRECTED) 18.1289 2.26611 BALANCED ANOVA FOR VARIATE FM FILE SLT 14/11/17 11: :PAGE Anh huong mat den benh thoi re tren Nghe tai Hung yen an VARIATE V004 FM va LN SOURCE OF VARIATION DF n p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 7.24222 3.62111 3.97 0.113 CT$ 139.629 69.8144 76.49 0.002 * RESIDUAL 3.65112 912780 * TOTAL (CORRECTED) 150.522 18.8153 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SM FILE SLT 14/11/17 11: :PAGE Anh huong mat den benh thoi re tren Nghe tai Hung yen nl w SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 3.12666 1.56333 0.95 0.461 CT$ 157.687 78.8433 47.88 0.003 * RESIDUAL 6.58668 1.64667 * TOTAL (CORRECTED) 167.400 20.9250 BALANCED ANOVA FOR VARIATE EM FILE SLT 14/11/17 11: :PAGE Anh huong mat den benh thoi re tren Nghe tai Hung yen d LN oa VARIATE V005 SM ll u nf va an lu oi m LN SOURCE OF VARIATION DF z at nh VARIATE V006 EM z SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 828890 414445 0.12 0.892 CT$ 57.7489 28.8744 8.14 0.041 * RESIDUAL 14.1911 3.54778 * TOTAL (CORRECTED) 72.7689 9.09611 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SLT 14/11/17 11: :PAGE Anh huong mat den benh thoi re tren Nghe tai Hung yen m co l gm @ an Lu MEANS FOR EFFECT NL - n va ac th 63 si NL NOS 3 TM 5.16667 6.03333 5.26667 FM 12.8333 10.6667 12.0667 SM 24.7667 25.3333 23.9000 EM 33.6333 33.7667 33.0667 SE(N= 3) 0.342918 0.551598 0.740871 1.08747 5%LSD 4DF 1.34416 2.16214 2.90405 4.26265 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 3 30-90 40-60 50-50 TM 3.66667 6.13333 6.66667 FM 7.43333 11.1333 17.0000 SM 18.7667 27.2000 28.0333 EM 37.0333 32.1667 31.2667 SE(N= 3) 0.342918 0.551598 0.740871 1.08747 5%LSD 4DF 1.34416 2.16214 2.90405 4.26265 - lu ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SLT 14/11/17 11: :PAGE Anh huong mat den benh thoi re tren Nghe tai Hung yen an F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - va VARIATE n GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 5.4889 11.856 24.667 33.489 |CT$ | | | 0.0089 0.0015 0.0028 0.0406 | | | | p ie gh tn to TM FM SM EM STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.5054 0.59395 10.8 0.2615 4.3377 0.95540 8.1 0.1128 4.5744 1.2832 5.2 0.4614 3.0160 1.8836 5.6 0.8920 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 64 si Thí nghiệm thời vụ: BALANCED ANOVA FOR VARIATE TM FILE SLT 14/11/17 11:36 :PAGE Anh huong thoi vu den benh thoi goc re tren cay nghe tai Hung Yen VARIATE V003 TM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 962222 481111 0.60 0.593 CT$ 107.909 53.9544 67.49 0.002 * RESIDUAL 3.19777 799444 * TOTAL (CORRECTED) 112.069 14.0086 BALANCED ANOVA FOR VARIATE FM FILE SLT 14/11/17 11:36 :PAGE Anh huong thoi vu den benh thoi goc re tren cay nghe tai Hung Yen VARIATE V004 FM lu LN SOURCE OF VARIATION DF an n va ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 4.64889 2.32445 0.60 0.596 CT$ 283.709 141.854 36.33 0.004 * RESIDUAL 15.6178 3.90445 * TOTAL (CORRECTED) 303.976 37.9969 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SM FILE SLT 14/11/17 11:36 :PAGE Anh huong thoi vu den benh thoi goc re tren cay nghe tai Hung Yen p VARIATE V005 SM LN SOURCE OF VARIATION DF d oa nl w SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 15.5755 7.78777 5.91 0.065 CT$ 561.229 280.614 212.94 0.001 * RESIDUAL 5.27112 1.31778 * TOTAL (CORRECTED) 582.076 72.7594 BALANCED ANOVA FOR VARIATE EM FILE SLT 14/11/17 11:36 :PAGE Anh huong thoi vu den benh thoi goc re tren cay nghe tai Hung Yen u nf va an lu DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 14.3889 7.19445 1.41 0.345 CT$ 589.029 294.514 57.66 0.002 * RESIDUAL 20.4311 5.10779 * TOTAL (CORRECTED) 623.849 77.9811 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SLT 14/11/17 11:36 :PAGE Anh huong thoi vu den benh thoi goc re tren cay nghe tai Hung Yen oi SOURCE OF VARIATION m LN ll VARIATE V006 EM z at nh z l gm @ NL NOS 3 TM 9.06667 9.50000 8.70000 FM 19.6333 18.5000 17.9000 SM 29.2667 31.9333 32.1667 EM 31.8667 34.0333 31.0333 an Lu m co MEANS FOR EFFECT NL - n va ac th 65 si SE(N= 3) 0.516218 1.14083 0.662767 1.30484 5%LSD 4DF 2.02346 4.47179 2.59790 5.11467 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ TV1 TV2 TV3 NOS 3 TM 8.56667 13.5667 5.13333 FM 11.6000 19.1000 25.3333 SM 23.2000 28.2667 41.9000 EM 24.2333 29.3333 43.3667 SE(N= 3) 0.516218 1.14083 0.662767 1.30484 5%LSD 4DF 2.02346 4.47179 2.59790 5.11467 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SLT 14/11/17 11:36 :PAGE Anh huong thoi vu den benh thoi goc re tren cay nghe tai Hung Yen F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - lu VARIATE an GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 9.0889 18.678 31.122 32.311 va n TM FM SM EM |CT$ | | | 0.0018 0.0042 0.0005 0.0022 | | | | p ie gh tn to STANDARD DEVIATION C OF V |NL SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.7428 0.89412 9.8 0.5932 6.1642 1.9760 10.6 0.5961 8.5299 1.1479 3.7 0.0651 8.8307 2.2600 7.0 0.3449 d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 66 si