(Luận văn) nghiên cứu xác định tỷ lệ nhiễm và định type salmonella trên các đàn gà thịt nuôi ở các trang trại tại khu vực hà nội

HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM HỒNG THỊ LIÊN lu an va n NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH TỶ LỆ NHIỄM VÀ ĐỊNH tn to ie gh TYPE SALMONELLA TRÊN CÁC ĐÀN GÀ THỊT NUÔI p Ở CÁC TRANG TRẠI TẠI KHU VỰC HÀ NỘI d oa nl w Thú y Mã số: 60 64 01 01 ul nf va an lu Chuyên ngành: oi lm Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Phạm Hồng Ngân z at nh z m co l gm @ an Lu NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2016 n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận án hoàn toàn trung thực chưa sử dụng để bảo vệ học vị Các thơng tin trích dẫn luận án ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 25 tháng 09 năm 2016 lu Tác giả luận văn an n va to p ie gh tn Hoàng Thị Liên d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th i si LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập, nghiên cứu, thực hồn thành luận văn, tơi ln nhận giúp đỡ, ủng hộ kiến thức, tài liệu, kinh nghiệm nghề nghiệp động viên khuyến khích tinh thần thầy hướng dẫn, tơi vơ trân trọng bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc với PGS.TS Phạm Hồng Ngân Tôi xin trân trọng cảm ơn đến thầy giáo, cô giáo trường Học viện Nông Nghiệp Việt Nam, bạn lớp cao học CH23TYC, anh (chị) đồng nghiệp giúp đỡ, khuyến khích động viên lu an Tơi đặc biệt bày tỏ lòng biết ơn đến bố mẹ, chồng, anh chị em bên tôi, dành điều kiện tốt tinh thần vật chất suốt thời gian học tập nghiên cứu luận văn n va gh tn to Trong trình thực trình bày luận văn khơng thể tránh khỏi sai sót hạn chế, tơi mong nhận góp ý, nhận xét q thầy, p ie Kính chúc q thầy, cô sức khỏe! w Hà Nội, ngày 25 tháng 09 năm 2016 d oa nl Tác giả luận văn va an lu oi lm ul nf Hoàng Thị Liên z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th ii si MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục sơ đồ, biểu đồ viii lu Danh mục hình ix an Trích yếu luận văn x va n Thesis abstract .xii 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu p Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài ie gh tn to Phần Mở đầu 1.3 nl w Phần Tổng quan tài liệu Một số hiểu biết vi khuẩn Salmonella 2.1.1 Lịch sử phát Salmonella 2.1.2 Phân loại Salmonella 2.1.3 Đặc điểm hình thái, ni cấy sinh vật hóa học Salmonella 2.1.4 Các kháng nguyên Salmonella 2.1.5 Những yếu tố độc lực vi khuẩn Salmonella 2.1.6 Sức đề kháng vi khuẩn Salmonella 17 2.1.7 Tính kháng thuốc vi khuẩn Salmonella 18 2.1.8 Khả trình gây bệnh Salmonella 18 2.1.9 Chẩn đoán 20 d oa 2.1 oi lm ul nf va an lu z at nh z @ gm 2.1.10 Nguồn gốc lây nhiễm 22 l 2.1.11 Phòng bệnh 23 m co 2.1.12 Điều trị 23 Ngộ độc thực phẩm Salmonella 24 2.2.1 Ngộ độc thực phẩm 24 2.2.2 Ngộ độc thực phẩm vi khuẩn Salmonella 24 an Lu 2.2 n va ac th iii si 2.2.3 Tình hình ngộ độc thực phẩm Salmonella giới 25 2.2.4 Tình hình ngộ độc thực phẩm Salmonella Việt Nam 27 2.2.5 Các biện pháp kiểm soát Salmonella thực phẩm 28 2.3 Tình hình nghiên cứu vi khuẩn salmonella giới Việt Nam 28 2.3.1 Tình hình nghiên cứu giới 28 2.3.2 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 29 Phần Nội dung, nguyên liệu phương pháp nghiên cứu 31 lu an n va Nội dung nghiên cứu 31 3.2 Nguyên liệu nghiên cứu 31 3.2.1 Mẫu xét nghiệm 31 3.2.2 Thiết bị dụng cụ 31 3.2.3 Môi trường 31 3.2.4 Thuốc thử 31 3.2.5 Kháng huyết 32 3.2.6 Chủng chuẩn 32 3.3 Phương pháp nghiên cứu 32 3.3.1 Phương pháp điều tra 32 p ie gh tn to 3.1 nl w Phương pháp lấy mẫu 32 3.3.3 Phương pháp nuôi cấy giám định vi khuẩn Salmonella spp 34 3.4 Tiến hành xét nghiệm 36 3.4.1 Chuẩn bị mẫu 36 3.4.2 Cách tiến hành 36 3.4.3 Khẳng định sinh hóa 38 3.4.4 Khẳng định huyết & type huyết 41 3.4.5 Đọc kết 41 3.4.6 Giữ giống Salmonella 42 3.5 Kiểm soát kết xét nghiệm 42 3.6 Xác nhận định danh Salmonella 42 3.6.1 Nguyên liệu 42 3.6.2 Phương pháp tiến hành 43 3.7 Phương pháp xử lý số liệu 46 d oa 3.3.2 oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th iv si Phần Kết nghiên cứu thảo luận 47 4.1 Tình hình chăn ni gà thịt khu vực Hà Nội 47 4.1.1 Khái quát điều kiện tự nhiên, kinh tế- xã hội ảnh hưởng tới chăn nuôi gà thịt khu vực Hà Nội 47 4.1.2 Tình hình phát triển chăn ni gà thịt khu vực Hà Nội 49 4.1.3 Tình hình nhiễm Salmonella spp tronng chăn nuôi gà Hà Nội 53 4.2 Tỷ lệ phân lập kết giám định số đặc tính sinh vật, hóa học chủng Salmonella spp mẫu phân gà thịt 55 lu an 4.2.1 Tỷ lệ phân lập vi khuẩn Salmonella spp mẫu phân gà thịt 55 4.2.2 Kết giám định số đặc tính sinh vật, hóa học chủng va Salmonella spp phân lập từ mẫu phân gà thịt 58 n 4.3 Kết xác định serotype chủng vi khuẩn Salmonella spp phân lập 62 5.1 Kết luận 67 5.2 Đề nghị 67 p ie gh tn to Phần Kết luận, đề nghị 67 d oa nl w Tài liệu tham khảo 68 oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th v si DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT lu an Brain Heart Infusion FAO Food and Agriculture Organization HE Hektoen enteric LPS Lipopolysaccharide MKTTn Muller Kauffmann Tetrathionate-novobiocin MR Methyl red NA Nutrient agar RVS Rappaport Vassiliadis Soy TSI Triple sugar iron VP Voges proskauer n va BHI p ie gh tn to World Health Organization nl w WHO World Trade Organization Xylose lysine deoxycholate oi lm ul nf va an lu XLD d oa WTO z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th vi si DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Một số phản ứng sinh hóa đặc trưng phân biệt Salmonella với Arizona Citrobacter .5 Bảng 2.2 Nhóm huyết Salmonella kháng nguyên O Bảng 3.1 Cấu trúc kháng nguyên kháng huyết đặc hiệu cần ngưng kết để định type số chủng Salmonella gây bệnh quan trọng 36 Bảng 3.2 Giải thích phép thử sinh hóa 40 Bảng 3.3 Giải thích kết phép thử khẳng định 42 lu Bảng 3.4 Kháng huyết ức chế Kháng nguyên H pha 45 an Bảng 4.1 Số lượng trang trại khu vực Hà Nội từ năm 2012-2015 49 va n Bảng 4.2 Số lượng gia cầm khu vực Hà Nội từ năm 2012-2015 49 Bảng 4.4 Đặc tính sinh vật, hố học chủng Salmonella spp phân lập từ gh tn to Bảng 4.3 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella phân gà 56 p ie mẫu phân gà thịt số môi trường 60 Bảng 4.5 Biểu đặc trưng Salmonella phản ứng sinh hóa 60 nl w Bảng 4.6 Kết thử phản ứng lên men đường chủng Salmonella phân lập 61 oa Bảng 4.7 Kết xác định nhóm kháng nguyên O chủng vi khuẩn d Salmonella spp phân lập (n=22) 63 lu an Bảng 4.8 Kết xác định serotype chủng vi khuẩn Salmonella spp oi lm ul nf va phân lập (n=22) 64 z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th vii si DANH MỤC SƠ ĐỒ, BIỂU ĐỒ Sơ đồ 3.1 Sơ đồ phân lập vi khuẩn Salmonella 35 Sơ đồ 3.2 Sơ đồ phân type kháng nguyên O .43 Sơ đồ 3.3 Sơ đồ phân type kháng nguyên H .44 Sơ đồ 4.1 Các kiểu mơ hình trang trại gà thịt Hà Nội 52 Sơ đồ 4.2 Serotype S typhimurium S enteritidis theo chuỗi sản xuất thịt gà .55 lu an Biểu đồ 4.1 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella phân gà .56 va Biểu đồ 4.2 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella phân gà .57 n Biểu đồ 4.3 Kết xác định nhóm huyết Salmonella spp 63 p ie gh tn to Biểu đồ 4.4 Kết định chủng Salmonella từ mẫu phân gà thịt khu vực Hà Nội 64 d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th viii si Bảng 4.3 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella phân gà Địa điểm (Huyện, Thị Xã) Số mẫu kiểm tra Số mẫu dương tính Tỷ lệ (%) Sơn Tây 15 40,00 Quốc Oai Thạch Thất Mỹ Đức Chương Mỹ Ba Vì Tổng 18 20 15 37 15 120 5 22 27,78 25,00 13,33 8,11 6,67 18,33 lu an Kết bảng 4.3 cho thấy, 120 mẫu phân gà xét nghiệm, có 22 mẫu dương tính với vi khuẩn Salmonella, chiếm tỷ lệ 18,33% Trong đó, tỷ lệ phân lập Salmonella cao Thị xã Sơn Tây 40,00%, huyện Quốc Oai n va p ie gh tn to có số mẫu dương tính 27,78%, huyện Thạch Thất 25,00% Các huyện Mỹ Đức, Chương Mỹ, Ba Vì có số mẫu dương tính chiếm tỷ lệ 13,33%, 8,11% 6,67% d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh Biểu đồ 4.1 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella phân gà Kết phân lập phản ánh khác biệt tỷ lệ phân lập Salmonella z m co l gm @ mẫu phân gà thịt nuôi trang trại huyện, thị xã thành phố Hà Nội Trong địa điểm nghiên cứu, Thị xã Sơn Tây có tỷ lệ mẫu dương tính với Salmonella cao Trong trình khảo sát nghiên cứu 15 trại gà thịt Thị xã Sơn Tây có số trại có sở vật chất trang thiết bị (máng an Lu ăn, máng uống) cịn thơ sơ, vấn đề an tồn sinh học trại chưa thực đảm bảo Đó nguyên nhân làm tỷ lệ gà nhiễm Salmonella cao Huyện Chương Mỹ có số lượng trại gà lớn địa điểm nghiên cứu, tỷ lệ mẫu n va ac th 56 si phân gà nhiễm Salmonella chiếm tỷ lệ 3/37 trại Các trang trại gà huyện Chương Mỹ có trang bị máng ăn, máng uống đại, chuồng trại trước nhập gà vệ sinh sát trùng nghiêm ngặt, đảm bảo an toàn sinh học tuyệt đối q trình chăn ni Qua kết nghiên cứu, cho thấy mơ hình chăn ni yêu tố liên quan đến vấn đề an toàn sinh học (nguồn cung cấp gà, sát trùng vệ sinh chuồng trại, quy trình chăm sóc làm vaccine cho gà) ảnh hưởng lớn đến tỷ lệ nhiễm Salmonella trại gà thịt lu an n va p ie gh tn to w Biểu đồ 4.2 Kết phân lập vi khuẩn Salmonella phân gà d oa nl Salmonella vi khuẩn có sức đề kháng cao với ngoại cảnh, lại có khả thích ứng, gây bệnh nhiều loại động vật, phân bố rộng khắp mối đe dọa vật nuôi Tỷ lệ phân lập Salmonella trại gà triệu chứng gây bệnh Salmonella phản ánh tình trạng mang trùng đàn nguy bùng phát bệnh Salmonella gây trại gà, đồng thời việc phát Salmonella mẫu phân gà xét nghiệm mối đe dọa đến chất lượng oi lm ul nf va an lu z at nh thịt trứng gà Với đàn gà thịt nuôi theo quy mô công nghiệp nhập vào nhà máy chế biến thực phẩm có kết kiểm tra mẫu phân dương tính Salmonella có nguy ảnh hưởng đến chất lượng thịt thương phẩm sản phẩm thịt gà trình chế biến giết mổ z l gm @ Theo báo cáo Tổ chức an toàn vệ sinh thực phẩm châu Âu năm 2010, lưu hành Salmonella gia cầm từ tới 26.6 % Ở nước phát triển Mỹ, Anh, lưu hành Salmonella thịt gà 4.2 % (n=212), % (n=877) m co Sự có mặt Salmonella gia cầm Việt Nam thấp nhiều nước Đông Nam Á Thái Lan (57 %, n=754), Campuchia (88.2 %, n=152), Trung Quốc (52.2 % , n =1.152), cao sơ với Malaysia (35.5 %, an Lu n=445) n va ac th 57 si 4.2.2 Kết giám định số đặc tính sinh vật, hóa học chủng Salmonella spp phân lập từ mẫu phân gà thịt Tất chủng Salmonella spp phân lập sau nhận định sơ đặc điểm đặc trưng hình thái, tính chất ni cấy mơi trường Để có sở đánh giá định serotype, chúng tơi tiến hành nghiên cứu đặc tính sinh vật, hóa học chúng môi trường giám định Kết cho thấy 100% chủng Salmonella spp nghiên cứu mọc phát triển tốt môi trường với đặc điểm sau: - Môi trường XLD: Vi khuẩn Salmonella spp hình thành khuẩn lạc kích lu thước nhỏ, đường kính trung bình 0,5-1,5 mm, màu đen, nển mơi trường màu sáng đỏ (hình 4.8) an n va p ie gh tn to d oa nl w ul nf va an lu oi lm Hình 4.4 Salmonella môi trường XLD lớn bao trùm khuẩn lạc (hình 4.9) z at nh - Mơi trường HE: Vi khuẩn Salmonella hình thành khuẩn lạc có màu thay đổi từ xanh dương đến xanh lục, có hay khơng có tâm đen, tâm đen z - Trên môi trường TSI: Các chủng Salmonella làm mặt thạch nghiêng @ gm chuyển màu đỏ, đáy màu vàng màu đen (sản sinh H2S) (hình 4.10) m co l Kiểm tra hình thái, khả di động, tính chất bắt màu, đặc tính sinh vật, hố học 22 chủng Salmonella spp phân lập từ mẫu phân gà thịt số mơi trường trình bày bảng 4.4 an Lu n va ac th 58 si lu an n va Hình 4.5 Salmonella mơi trường HE p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu oi lm ul Hình 4.6 Salmonella môi trường TSI Lysine z at nh Qua kết bảng 4.3 4.4 cho thấy, 100% chủng Salmonella spp phân lập trực khuẩn, bắt màu Gram âm, có khả di động Tất chủng Salmonella spp phân lập có đặc tính sinh hố như: sinh H2S (trên mơi z trường TSI), không sản sinh indole, phản ứng VP, β-galactosidase ureaza cho kết âm tính, phản ứng Lysine decarboxylase dương tính (khử carboxyl @ m co l Bromocresol từ màu hồng chuyển thành màu tím gm Lysine thành Cadaverin C5H14N2 làm cho mơi trường có tính kiềm, thị an Lu n va ac th 59 si Bảng 4.4 Đặc tính sinh vật, hố học chủng Salmonella spp phân lập từ mẫu phân gà thịt số môi trường STT Môi trường nuôi cấy Đặc tính Tỷ lệ (%) Trực khuẩn 22/22 (100%) Gram (-) 22/22 (100%) + 22/22 (100%) R/Y/H2S+ 22/22 (100%) lu an n va Hình thái Nhuộm màu Di động TSI Indole - 22/22 (100%) VP - 22/22 (100%) Ureaza - 22/22 (100%) Lysine decarboxylase + 22/22 (100%) β-galactosidase - 22/22 (100%) Thử nghiệm p ie gh tn to Bảng 4.5 Biểu đặc trưng Salmonella phản ứng sinh hóa Biểu đặc trưng TSI Phần thạch nghiêng màu đỏ, đáy ống nghiệm màu vàng, nứt thạch xuất vạch đen d oa nl H2 S w Môi trường Không đổi màu nhỏ α – napthol 5% KOH 40% lu VP va an VP Không xuất vòng đỏ nhỏ thuốc thử Kovac’s Tryptophan Ureaza Urea Lysine decarboxylase Lysine decarboxylation medium Môi trường đục có màu tím β-galactosidase Đĩa giấy O.N.P.G Khơng đổi màu oi lm ul nf Indole Không đổi màu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 60 si lu an va n Hình 4.7 Các phản ứng sinh hóa vi khuẩn Salmonella Song song với trình kiểm tra đặc tính sinh vật, hóa học mơi trường đặc hiệu tiến hành thử phản ứng lên men đường p ie gh tn to (TSI/ β-galactosidase/ Lysine decarboxylase / VP/ Ureaza/ Indole) w chủng Salmonella phân lập Kết trình bày bảng 4.6 d oa nl Bảng 4.6 Kết thử phản ứng lên men đường chủng Salmonella phân lập Dương tính Tỷ lệ (%) va an Glucose Kết phản ứng lu Loại đường 22/22 Âm tính Tỷ lệ (%) nf 100 0/22 100 0/22 100 0/22 100 0/22 100 0/22 0 22/22 100 22/22 100 22/22 100 22/22 Mannitol 22/22 Dextrose 22/22 Sorbitol 22/22 Lactose 0/22 Sucrose 0/22 Salicin 0/22 oi lm ul Maltose z at nh z l gm @ m co Từ kết thấy 22/22 (100%) chủng Salmonella phân lập từ mẫu phân gà thịt có khả lên men loại đường: glucose, loại đường sau: lactose, sucrose salicin an Lu dextrose, maltose, mannitol, sorbitol Vi khuẩn khơng có khả lên men n va ac th 61 si Kết phù hợp với thang mẫu loại đường sử dụng phân lập chẩn đoán Salmonella Quinn cộng (1994) đề xuất Kết thử phản ứng lên men đường thể đặc tính chung giống Salmonella Nguyễn Thị Ngọc Liên (1997), Đặng Thị Oanh (2013) công bố Tất chủng Salmonella spp phân lập có đặc tính sinh vật, hóa học điển hình phù hợp với tiêu chuẩn để nhận định vi khuẩn Salmonella Carter Cole (1990), Nguyễn Như Thanh cộng (2001) Từ kết ban đầu cho phép tiếp tục nghiên cứu vi khuẩn Salmonella lu an n va p ie gh tn to d oa nl w an lu Hình 4.8 Hình ảnh vi khuẩn Salmonella kính hiển vi va oi lm ul nf 4.3 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH SEROTYPE CỦA CÁC CHỦNG VI KHUẨN SALMONELLA SPP PHÂN LẬP z at nh 22 chủng Salmonella spp thể đặc tính sinh vật, hố học điển hình để xác định serotype chủng vi khuẩn phương pháp huyết học Trên sở phân loại White-Kauffman (WHO, 1983), tiến hành xác định nhóm vi khuẩn Salmonella spp phân lập theo hướng dẫn z hãng Remel Kết trình bày bảng 4.7 @ l gm Kết định type kháng nguyên O theo nhóm cho thấy, chủng Salmonella spp phân lập từ mẫu phân gà thịt nuôi trang trại khu m co vực Hà Nội thuộc nhóm E1 cao nhất, chiếm tỷ lệ 12/22 (54,55%), sau nhóm D1, chiếm tỷ lệ 8/22 (36,36%) 2/22 (9,09%) khơng xác định nhóm Như vậy, chủng Salmonella phân lập từ mẫu phân gà thịt khu vực Hà an Lu Nội chủ yếu thuộc nhóm E1 D1 n va ac th 62 si Bảng 4.7 Kết xác định nhóm kháng nguyên O chủng vi khuẩn Salmonella spp phân lập (n=22) Nhóm huyết Số mẫu dương tính Tỷ lệ (%) Cấu trúc kháng nguyên O đa giá O đơn giá E1 22 100 1,3,9,10,12 12 54.55 3,10 D1 36.36 1,9,12 Ghi chú: (-) = Không xác định cấu trúc kháng nguyên lu an n va p ie gh tn to w d oa nl Biểu đồ 4.3 Kết xác định nhóm huyết Salmonella spp nf va an lu Dương tính oi lm ul Âm tính z at nh z l gm @ m co Hình 4.14 Phản ứng ngưng kết Salmonella với kháng huyết O đa giá an Lu Sau xác định nhóm huyết chủng Salmonella kháng huyết O đơn giá, tiến hành tiếp kháng huyết H pha n va ac th 63 si pha để xác định serotype vi khuẩn Salmonella phân lập Kết trình bày bảng 4.8 Bảng 4.8 Kết xác định serotype chủng vi khuẩn Salmonella spp phân lập (n=22) Kháng nguyên H Thành phần Thành phần pha pha Số mẫu (+) Tỷ lệ (%) Kết g, m - 8/22 36,36 S enteritidis e, h l, w 5/22 22,73 S meleagridis - 4/22 3/22 2/22 18,18 13,64 9,09 S suberu S amsterdam Không xác định lu g, m g, m, s - an n va gh tn to Kết bảng 4.8 cho thấy, 22 chủng Salmonella spp nghiên cứu, có chủng thuộc nhóm D1 Salmonella enteritidis chiếm tỷ lệ 36,36%; có chủng thuộc nhóm E1 S meleagridis chiếm tỉ lệ 22,73%, có chủng (18,18%) p ie S suberu chủng (13,64%) S amsterdam d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh Biểu đồ 4.4 Kết định chủng Salmonella từ mẫu phân gà thịt khu vực Hà Nội z @ Qua kết nghiên cứu cho thấy, chủng S enteritidis gm chủng Salmonella có tỉ lệ lưu hành cao trang trại gà thịt khu vực m co l Hà Nội, sau chủng S meleagridis chiếm tỷ lệ 22,73% an Lu Theo Nguyễn Thị Ngọc Liên (1997), nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh phó thương hàn vịt tỉnh Hà Tây cho biết có xuất nhóm E1 12.5% (trong có S amsterdam), nhóm D1 18.75% đại diện S n va ac th 64 si enteritidis Khi nghiên cứu tỷ lệ nhiễm Salmonella gà thịt giết mổ theo hình thức cơng nghiệp thủ cơng, Trần Thị Hanh cộng (2009) thông báo vi khuẩn S enteritidis xuất hình thức giết mổ Trần Ngọc Bích (2012), phát S enteritidis mẫu thân thịt mẫu phân nghiên cứu thủy cầm tỉnh Hậu Giang Nguyễn Viết Không cộng (2012) phát S enteritidis điểm giết mổ gia cầm quy mô nhỏ huyện ngoại thành Hà Nội Sự phát Salmonella khâu chuỗi sản xuất (Phạm Thị Ngọc lu cộng sự, 2015) kết đáng báo động vấn đề nhiễm Salmonella Kết nghiên cứu có tương đồng với tác giả serotye Salmonella gây bệnh gà Hai chủng Salmonella quan trọng gây ngộ độc thực phẩm người S enteritidis S typhimurium Như vậy, việc phát S enteritidis an n va ảnh hưởng không nhỏ đến sức khỏe người tiêu dùng p ie gh tn to mẫu nghiên cứu sở khoa học để đề biện pháp phòng ngừa, đưa giải pháp làm giảm thiểu nguy lây nhiễm Salmonella Thịt gà, trứng gà bị nhiễm Salmonella làm ảnh hưởng đến chất lượng sản phẩm (thịt, trứng), Tỷ lệ nhiễm Salmonella nghiên cứu 18,33%, điều cho w thấy q trình chăn ni gà thịt chưa thực kiểm soát tốt vấn đề Salmonella Tỷ oa nl lệ nhiễm Salmonella theo chuỗi sản xuất từ sở gà giống bố mẹ, sở ấp trứng, d trang trại gà, sở giết mổ điểm tiêu thụ 32,8%, 11%, 32,08%, lu an 43,3%, 36,9% (Phạm Thị Ngọc cộng sự., 2015) Các đàn gà thịt nuôi nf va trang trại có quy mơ lớn nguồn cung cấp cho điểm giết mổ oi lm ul nhà máy chế biến thực phẩm Như vậy, q trình chế biến giết mổ khơng kiểm soát chặt chẽ nguy gây nhiễm Salmonella vào thịt gà z at nh Theo tiêu chuẩn Việt Nam số 7046/2002 QĐ-Bộ Y tế, khơng phép có vi khuẩn Salmonella 25 gram mẫu thịt sản phẩm Tỷ lệ nhiễm vi khuẩn z Salmonella qua khảo sát cao đặc biệt cịn có diện chủng S @ gm enteritidis (chiếm 36, 36% chủng phân lập), điều cho thấy l khơng kiểm sốt tốt khâu vận chuyển, giết mổ tiêu thụ m co nguồn quan trọng truyền lây vi khuẩn Salmonella cho người tiêu dùng Vì thế, cần có quy trình giết mổ hợp lý bố trí việc bày bán thịt gia cầm nơi an Lu sẽ, khô ráo, góp phần đáng kể việc phịng ngừa vấy nhiễm vi khuẩn n va ac th 65 si Salmonella vào thân thịt gà, từ giúp hạn chế ngộ độc thực phẩm vi khuẩn Salmonella gây cho người lu an n va p ie gh tn to d oa nl w oi lm ul nf va an lu z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 66 si PHẦN KẾT LUẬN, ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Qua kết nghiên cứu thu trên, chúng tơi bước đầu có số kết luận sau: Tỷ lệ nhiễm Salmonella spp mẫu phân gà thịt nuôi trang trại khu vực Hà Nội 18,33%, tỷ lệ nhiễm Salmonella cao Thị - xã Sơn Tây 40%, huyện Quốc Oai 27,78%, huyện Thạch Thất 25%, huyện Mỹ Đức 13,33%, huyện Chương Mỹ 8,11%, huyện Ba Vì 6,67% lu Vi khuẩn Salmonella spp phân lập từ mẫu phân gà thịt mang đầy đủ đặc tính sinh vật, hố học giống Các chủng Salmonella thuộc nhóm E1 có tỷ lệ cao 54,55%, nhóm D1 36,36%, 9,09% chưa xác định nhóm an n va gh tn to - Chủng Salmonella lưu hành nhiều trang trại gà thịt khu vực Hà Nội S enteritidis 36, 36%; Sau chủng S meleagridis, S suberu, S amsterdam với tỷ lệ 22,73%, 18,18%, 13,64% ie p 5.2 ĐỀ NGHỊ oa nl w - Cần cải thiện điều kiện chăn nuôi, nâng cao an toàn sinh học chuồng trại d - Tiếp tục nghiên cứu khả kháng kháng sinh chủng phân lập được, xác định nguy lây nhiễm Salmonella trang trại gà thịt Hà Nội an lu va - Nghiên cứu lưu hành Salmonella theo mùa oi lm ul nf - Nghiên cứu lưu hành Salmonella từ trình chế biến đến vận chuyển tiêu thụ z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th 67 si TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt: Đặng Thị Oanh (2013) Nghiên cứu tỉ lệ lưu hành phân type chủng Salmonella thịt gà tươi sống bốn tỉnh miền Trung Nam Bộ Việt Nam Luận án Thạc sĩ Khoa học, Đại Học Quốc Gia Hà Nội, trang 6-9; trang 28-29 Đào Thị Thanh Thủy (2012) Xác định tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Salmonella số đặc điểm Salmonella thịt lợn tươi khu vực thành phố Thái Nguyên Luận văn Thạc sĩ Đại học Thái Nguyên tr 6- lu Đỗ Thị Huyền, Lê Quỳnh Giang, Trần Ngọc Tân, Trương Nam Hải (2008) Biểu an lượng lớn protein sefa Salmonella enterica serovar enteritidis vi va khuẩn Escherichia coli BL21 Tạp chí Cơng nghệ sinh học, số VI (2) tr 175-182 n Lương Đức Phẩm (2000) Vi sinh vật học an toàn vệ sinh thực phẩm, NXB tn to Nông Nghiệp Salmonella spp phân lập từ vịt môi trường nuôi thành phố Cần Thơ ie Nguyễn Đức Hiền cộng (2012) Tình hình nhiễm mức độ kháng thuốc p gh Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (2001) Giáo trình oa nl w Tạp chí khoa học kĩ thuật thú y, tập XIX, số tr 36-40 d vi sinh vật học thú y, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội lu Nguyễn Thị Bình Tâm, Dương Văn Nhiệm (2010) Giáo trình Kiểm nghiệm thú an Nguyễn Thị Ngọc Liên (1997) Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ học bệnh ul nf va sản, NXB Khoa học tự nhiên cơng nghệ, Hà Nội oi lm phó thương hàn vịt tỉnh Hà Tây biện pháp phòng, trị, 102 trang Nguyễn Viết Không, Phạm Thị Ngọc cộng (2012) Ô nhiễm Salmonella z at nh điểm giết mổ gia cầm quy mô nhỏ huyện ngoại thành Hà Nội Tạp chí khoa học công nghệ, kỳ 2, tháng 12/2012 tr 60-64 Nguyễn Vĩnh Phước (1978) Vi sinh vật thú y, tập II, NXB Đại học trung học z 10 @ Phạm Hồng Ngân (2010) Bài giảng vệ sinh an toàn thực phẩm nguồn gốc động vật Trường Đại Học Nông Nghiệp Hà Nội tr 45-60 12 m co l 11 gm chuyên nghiệp, Hà Nội Phạm Hồng Ngân (2010) Nghiên cứu số đặc tính gây bệnh vi khuẩn an Lu Escheria coli, Salmonella gây tiêu chảy bê giống sữa nuôi ngoại thành Hà Nội biện pháp phịng, trị Luận án tiến sĩ Nơng nghiệp Đại Học Nông Nghiệp n va ac th 68 si Hà Nội tr 36-47 13 Phạm Thị Ngọc, Trương Thị Quý Dương, Trương Thị Hương Giang (2015) Tình hình nhiễm Salmonella chuỗi sản xuất thịt gà số huyện TP Hà Nội năm 2014-2015 Tạp chí Khoa học kĩ thuật Thú y, tập XXIII, số tr 40-42 14 Tiêu chuẩn Việt Nam (TCVN 4829:2005/ SĐ 1: 2008) Vi sinh vật thực phẩm thức ăn chăn nuôi- Phương pháp phát Salmonella đĩa thạch 15 Trần Đức Hạnh, Nguyễn Quang Tuyên, Cù Hữu Phú (2011) Kết phân lập, xác định đặc tính sinh học serotype chủng Salmonella spp lợn tiêu chảy số tỉnh miền Bắc Tạp chí Khoa học kĩ thuật thú y, tập XVIII, số tr 45-50 lu an 16 Trần Ngọc Bích (2012) Khảo sát tỷ lệ nhiễm Salmonella thủy cầm sản phẩm va thủy cầm tỉnh Hậu Giang Tạp chí khoa học thú y, tập XIX, số tr 38-43 n 17 Trần Thị Hạnh, Lưu Quỳnh Hương, Trương Thị Quý Dương (2009) Kết to tn nghiên cứu tỷ lệ nhiễm Salmonella gà thịt giết mổ theo hình thức công p ie gh nghiệp thủ công Viện thú y, truy cập ngày 28/09/2016 http://www.vjol.info/index.php/kk-ty/article/viewFile/8330/7761 Andrew (1992) FAO Contsultant – FAO Food and Nutrition paper, mannal of nl w 18 Tiếng Anh: Benjamin, W H., C N Turnbough, B S Posey, and D E Briles (1985), “The lu 19 d oa food quality control – Food and Drug administration washington, USA va an ability of Salmonella typhimurium to produce siderophore enterobactin, a virulence factors”, Infect Immun., pp 392-397 nf Bradley S G (1979), “Cellular and molecular mechanism of action of bacterial oi lm ul 20 endotoxin’’, Ann Rev Microbiol., pp 69-74 Carter, G A; and J A Cole, “Diagnostic Procedures in Veterinary Bacteriology z at nh 21 and Mycology’’, California, Academic Press, pp.114-125 22 Cater, G.R and J R Cole (1990), “Diagnostic Procedures in Veterinary z Clarke, R C (1988), “Virulence of wild and mutant strains of Salmonella gm 23 @ Bacteriology and Mycology”, California, Academic Press, pp.114-115 24 m co l typhimurium in calves’’, J Med Microbiol., pp 139-146 Clarke, R C., C L Gyles (1993), Salmonella- Pathogenesis of bacterial 25 an Lu infections in aminmal, Iowa State University Press, Iowa, pp 133-153 Danan C., Fremy S., Moury F., Bohnert M.L., Brisabois A (2009), Determining n va ac th 69 si the serotype of isolated Salmonella strains in the veterinary sector using the rapid slide agglutination test Journal French Food Safety Agency, pp 13-18 26 Frost, A J., A P Bland, T S Wallis (1997), “The early dynamic response of the calf ileal ephithelium to Salmonella typhimurium”, Vet Pathol., pp 369-386 27 Gyles C.I (1994) Escherichia coli in domestic animals and humans, University of Gyelph, Canada, p.180 – 192 28 Kauffmann, F (1949), “On the serology of the Klebsiella group Acta Pathol’’, Microbiol Scand., (26), pp 381-406 29 Nagaraja, K V ; B S Pomeroy and J E Williams (1991) Paratyphoid lu an infections, Diseases of Poultry, Ames Iowa State University Press, p.99-130 va 30 Orskov, I., F Orskov, B Jann and K Jann (1997), “Serology, chemistry and n genetic of O and K antigen of E.coli”, Bacteriol.Rev., pp 667-710 Quinn, P J., M E Carter, B Markey, G R Carter (1994) Clinical Veterinary Microbiology, Wolfe Publishing, Mosby- Year Book Europe Limited, England, p ie gh tn to 31 Rahman, H., V B Singh, V D Sharma, and S D Harne (1992), “Salmonella 32 pp.209-236 nl w cytotonic and cytotonic factor, their detection in Chinese hamster ovary cells Stephen, J., and M P Osborne (1988), Pathophysiological mechanism of lu 33 d oa and antigenic relatedness”, Vet Microbiol., pp 397-398 34 va an diarrhea disease IRL press Washington D C., pp 149-169 Timoney, J F., J H Gillespie, F W Scott, J E Barlough (1988), “The nf oi lm ul Enterobacteriaceae- The Lactose Fermenters”, Hagan and Bruner’s microbiology and infectious diseases of domestic animals Ithaca and London Comstock z at nh Publishing Associates A Division of Cornel University Press, pp 61-71 z m co l gm @ an Lu n va ac th 70 si