Luận án Tiến sĩ Sán lá phổi Paragonimus heterotremus và Paragonimus westermani ở Việt Nam hình thái, phân tử, sinh học và chẩn đoán miễn dịch

i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - LƢU ANH TÚ SÁN LÁ PHỔI Paragonimus heterotremus VÀ Paragonimus westermani Ở VIỆT NAM: HÌNH THÁI, PHÂN TỬ, SINH HỌC VÀ CHẨN ĐOÁN MIỄN DỊCH LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC HÀ NỘI – 2018 ii BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - LƢU ANH TÚ SÁN LÁ PHỔI Paragonimus heterotremus VÀ Paragonimus westermani Ở VIỆT NAM: HÌNH THÁI, PHÂN TỬ, SINH HỌC VÀ CHẨN ĐOÁN MIỄN DỊCH LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Chuyên ngành: Ký sinh trùng học Mã số: 62.42.01.05 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Phạm Ngọc Doanh TS Bùi Khánh Linh Hà Nội – 2018 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu chúng tơi Các số liệu kết nêu luận án trung thực, chưa sử dụng luận án khác Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Tác giả ii LỜI CẢM Ơ N Trước tiên, cho phép bày tỏ lời cảm ơn sâu sắc tới TS Phạm Ngọc Doanh TS Bùi Khánh Linh - giảng viên hướng dẫn khoa học, tạo điều kiện tối đa truyền dạy kiến thức, kinh nghiệm, hướng dẫn thực đề tài viết luận án, đồng thời động viên suốt trình thực luận án Xin trân trọng cảm ơn Quỹ Phát triển khoa học công nghệ quốc gia (NAFOSTED) tài trợ kinh phí cho đề tài mã số 106.12-2012.52 106-NN.052016.17 để thực nội dung nghiên cứu Tôi xin trân trọng cảm ơn Học Viện Khoa học Công nghệ, Ban lãnh đạo Viện Sinh thái Tài nguyên sinh vật, Phòng Quản lý tổng hợp, thầy cô Viện Sinh thái TNSV động viên tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành luận án Tơi xin trân trọng cảm ơn ThS Hồng Văn Hiền tập thể cán Phòng Ký sinh trùng học, Viện Sinh thái TNSV tận tình giúp đỡ tạo điều kiện cho thực thí nghiệm Tơi xin trân trọng cảm ơn Ban lãnh đạo Bệnh viện Phổi Trung ương giúp đỡ, động viên tơi suốt q trình thực luận án Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy giáo, cô giáo, nhà khoa học, đồng nghiệp, bạn bè Viện sinh thái Tài nguyên sinh vật quan tâm, động viên dẫn cho tơi để tơi hồn thành luận án Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình ln chỗ dựa vững cho tơi suốt q trình thực luận án Tôi xin chân thành cảm ơn vợ cho thêm sức mạnh, động lực để tơi vượt qua khó khăn Hà Nội, ngày tháng năm 2018 Tác giả iii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Viết tắt Viết đầy đủ/nghĩa tiếng Việt CO1 Cytochrome c oxidase subunit mitochondrial gene Gien ty thể CO1 ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay Kỹ thuật hấp thụ miễn dịch liên kết enzym dot-ELISA dot-ELISA ELISA điểm giấy DNA Deoxyribonucleic acid ITS2 Internal transcribed spacer Đoạn chèn hệ gen nhân ITS2 16S rDNA 16S ribosomal DNA/ Gien ty thể 16S PCR Polymerase Chain Reaction Phản ứng khuyếch đại gien MC Metacercaria LC Lào Cai YB Yên Bái QT Quảng Trị SLP Sán phổi iv MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT iii MỤC LỤC iv DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN 1.1 Khái quát chung sán phổi 1.1.1 Lịch sử phát hiện, hình thái, cấu tạo phân loại sán phổi 1.1.2 Vòng đời phát triển sán phổi 1.1.3 Dịch tễ học bệnh sán phổi 11 1.1.4 Đặc điểm lâm sàng tổn thương bệnh sán phổi 13 1.1.5 Chẩn đoán bệnh sán phổi 14 Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết enzyme (ELISA): 16 1.1.6 Điều trị bệnh sán phổi 17 1.1.7 Phòng bệnh sán phổi 18 1.2 .Tình hình nghiên cứu hai lồi Paragonimus heterotremus Paragonimus westermani giới 19 1.2.1 Tình hình nghiên cứu lồi Paragonimus heterotremus 19 1.2.2 Tình hình nghiên cứu lồi Paragonimus westermani 20 1.3 Tình hình nghiên cứu sán phổi bệnh sán phổi Việt Nam 21 CHƢƠNG ĐỐI TƢỢNG, ĐỊA ĐIỂM VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 2.1 Đối tƣợng, địa điểm thời gian nghiên cứu 25 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 25 2.1.3 Địa điểm nghiên cứu 25 2.1.4 Thời gian nghiên cứu 26 2.2 Phương pháp tiếp cận thiết kế thí nghiệm 26 v 2.3 Phương pháp nghiên cứu 27 2.3.1 Xét nghiệm cua thu metacercaria sán phổi 27 2.3.2 Điều tra tỷ lệ cường độ nhiễm metacercaria sán phổi cua suối địa điểm nghiên cứu 29 2.3.3 Nghiên cứu hình thái metacercaria 29 2.3.4 Nghiên cứu đa dạng di truyền phân tử loài Paragonimus heterotremus Paragonimus westermani 30 2.3.5 Gây nhiễm cho vật chủ 31 2.3.6 Nghiên cứu hình thái sán phổi trưởng thành 31 2.3.7 Xác định vai trò vật chủ chứa 32 2.3.8 Xác định vật chủ tự nhiên sán phổi 32 2.3.9 Nghiên cứu sức sống metacercaria 35 2.3.10 Nghiên cứu phản ứng dot-ELISA chẩn đoán bệnh sán phổi 36 2.3.10.1 Nguyên vật liệu hóa chất 36 2.3.10.2 Quy trình thực dot-ELISA 36 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 40 3.1 Kết xác định phương pháp xét nghiệm cua điều tra tình hình nhiễm metacercaria cua suối địa điểm nghiên cứu 40 3.1.1 Xác định phương pháp xét nghiệm cua tìm metacercaria sán phổi 40 3.2 Đa dạng hình thái metacercaria di truyền phân tử sán phổi 47 3.2.1 Đa dạng hình thái metacercaria di truyền phân tử lồi P westermani 47 3.2.2 Đa dạng hình thái metacercaria di truyền phân tử loài P heterotremus 54 3.3 Một số đặc điểm sinh học sán phổi Paragonimus heterotremus Paragonimus westermani 59 3.3.1 Vật chủ trung gian thứ 59 3.3.2 Vật chủ ngồi tự nhiên sán phổi 69 3.3.3 Sự phát triển sán phổi vật chủ chứa vật chủ 72 3.3.4 Sức sống metacercaria sán phổi điều kiện khác 81 3.4 Thiết lập phản ứng dot-ELISA chẩn đoán nhanh bệnh sán phổi 85 3.4.1 Độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng 85 3.4.2 Xác định nồng độ kháng nguyên thời gian phản ứng 37°C 87 vi 3.4.3 Xác định thời gian phản ứng điều kiện nhiệt độ 20°C 88 3.4.4 Xác định thời gian phản ứng điều kiện nhiệt độ 10°C 89 3.4.5 Xác định thời gian phản ứng điều kiện nhiệt độ 4oC 90 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .94 KẾT LUẬN 94 Phƣơng pháp xét nghiệm cua tình hình nhiễm metacercaria sán phổi cua suối 94 Đa dạng hình thái di truyền Paragonimus heterotremus Paragonimus westermani 94 Một số đặc điểm sinh học Paragonimus heterotremus Paragonimus westermani 94 Kỹ thuật dot-ELISA chẩn đoán miễn dịch 95 KIẾN NGHỊ 95 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN .97 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ 98 TÀI LIỆU THAM KHẢO .99 vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Những đề chưa giải loài sán phổi Bảng 2.1 Các cặp mồi sử dụng để nhân trình tự đích nghiên cứu ả g Bả g ả g Metacercaria thu với thời gian lắng cặn khác So sánh thời gian xét nghiệm ng phương pháp ép giã-lọc cua So sánh số lượng metacercaria thu từ phương pháp xét nghiệm cua Bảng 3.4 Tỷ lệ cường độ nhiễm metacercaria sán phổi địa điểm nghiên cứu Bảng 3.5 Tỷ lệ cường độ nhiễm loài sán phổi cua suối Bảng 3.6 Hình dạng kích thước dạng metacercaria lồi P westermani Bảng 3.7 Sai khác vị trí nucleotide trình tự gen 16S dạng diploid triploid P westermani Bảng 3.8 Khoảng cách di truyền mẫu ốc thu từ Việt Nam so với loài thuộc giống Gammatricula dựa vào trình tự gen CO1 Bảng 3.9 Kích thước ấu trùng sán phổi thể ốc Bảng 3.10 Tỷ lệ nhiễm ấu trùng sán phổi ốc địa điểm nghiên cứu Bảng 3.11 Vật chủ ốc loài sán phổi nước Việt Nam ả g Kết gây nhiễm metacercaria P westermani cho chuột bạch ả g Kích thước metacercaria nang sán non thu từ chuột bạch thí nghiệm sau gây nhiễm 30 ngày Bảng 3.14 Kết gây nhiễm P westermani cho động vật ni Bảng 3.15 Kích thước sán thu từ phổi m o sau 170-180 ngày gây nhiễm Bảng 3.16 Sức sống metacercaria điều kiện nhiệt độ phòng (25-30oC) nước muối sinh lý Bảng 3.17 Sức sống metacercaria dung dịch nước muối sinh lý 4oC mật độ khác Bảng 3.18 Độ nhạy độ đặc hiệu phản ứng dot-ELISA Bảng 3.19 Thời gian phản ứng ELISA điều kiện nhiệt độ khác viii DANH MỤC CÁC HÌNH VÀ ĐỒ THỊ Hình 1.1 Hình dạng chung sán phổi Paragonimus Hình 1.2 Hình dạng chung metacercaria sán phổi Paragonimus Hình 1.3 Hình dạng chung cercaria sán phổi Paragonimus Hình 1.4 Hình dạng trứng sán phổi Paragonimus Hình 1.5 Vịng đời phát triển lồi Paragonimus westermani Hình 2.1 Địa điểm nghiên cứu Hình 2.2 Sơ đồ nội dung nghiên cứu Hình 2.3 Sơ đồ thí nghiệm xác định vật chủ trung gian thứ Hình 2.4 Sơ đồ thí nghiệm xác định vật chủ Hình 2.5 Chuẩn bị nhỏ huyết đối chứng kháng ngun lên giấy nitrocellulose Hình 3.1 Các lồi cua suối bắt địa điểm nghiên cứu Hình 3.2 Metacercaria sán phổi tìm thấy cua suối thu Quảng Trị Hình 3.3 Metacercaria sán phổi tìm thấy cua suối thu Yên Bái Lào Cai Hình 3.4 Paragonimus westermani metacercaria thu từ cua suối bắt Yên Bái Hình 3.5 Các dạng P westermani metacercaria thu từ cua suối tỉnh Quảng Trị Hình 3.6 Mối quan hệ tiến hóa phân tử quần thể P westermani dựa trình tự ITS2 xây dựng b ng phương pháp Maximum Likelihood Hình 3.7 Mối quan hệ tiến hóa phân tử quần thể P westermani dựa trình tự gen 16S xây dựng b ng phương pháp Maximum Likelihood Hình 3.8 Metacercaria lồi P heterotremus thu từ n Bái Lào Cai Hình 3.9 Metacercaria lồi P heterotremus thu từ Quảng Trị Hình 3.10 Mối quan hệ tiến hóa phân tử quần thể P heterotremus dựa trình tự ITS2 xây dựng b ng phương pháp Maximum Likelihood Hình 3.11 Mối quan hệ tiến hóa phân tử quần thể P heterotremus dựa trình tự CO1 xây dựng b ng phương pháp Maximum Likelihood Hình 3.12 Ốc nhiễm ấu trùng Microcercaria Hình 3.13 Trình tự CO1 lồi ốc nhiễm microcercaria thu từ Quảng Trị tương đồng cao (99%) với loài S quangtriensis 97 NHỮNG ĐÓNG GÓP MỚI CỦA LUẬN ÁN Đề tài luận án lần thực nội dung nghiên cứu đóng góp kết sau: Phát loài P heterotremus miền Trung P westermani miền Bắc Xác định đa dạng hình thái kích thước metacercaria loài P westermani P heterotremus Tuy nhiên, quần thể loài miền Bắc miền Trung có độ tương đồng cao di truyền Xác định quần thể P westermani Việt Nam thuộc nhóm 2n Xác định xác vật chủ trung gian thứ loài SLP P westermani, P heterotremus P proliferus ốc S quangtriensis, Triculinae gen sp.1, Triculinae gen sp.2, tương ứng Ấu trùng lồi SLP phân biệt b ng chiều dài ruột số lượng cercaria redia Xác định mèo rừng (Prionailurus bengalensis) đóng vai trị vật chủ ngồi tự nhiên lồi sán phổi P westermani, P heterotremus P skrjabini Da Krong, Quảng Trị Gây nhiễm thí nghiệm xác định chó nhà không bị nhiễm P westermani Mèo nhà bị nhiễm mức độ mẫn cảm thấp so với P heterotremus Xác định chuột nhắt trắng đóng vai trị vật chủ chứa vòng đời phát triển loài P westermani P heterotremus Việt Nam, xác định sán non vật chủ chứa phát triển tiếp đến trưởng thành vật chủ Xác định sức sống metacercaria sán phổi không phụ thuộc vào dung dịch nuôi, nhiệt độ, mà phụ thuộc vào mật độ metacercaria Mật độ metacercaria thấp metacercaria sống lâu Trong nước muối sinh lý nhiệt độ 4oC, metacercaria sống tới 12 tháng Đã xác định độ nhạy, độ đặc hiệu kỹ thuật dot-ELISA, đồng thời xác định thời gian phản ứng điều kiện nhiệt độ khác nhau, sử dụng để chẩn đốn nhanh bệnh SLP ngồi thực địa, kể thời tiết lạnh 98 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ Lƣu Anh Tú, Hồng Văn Hiền, Bùi Khánh Linh, Phạm Ngọc Doanh, 2017 So sánh phương pháp ép giã-lọc cua tìm ấu trùng sán phổi Hội nghị Sinh thái tài nguyên sinh vật lần thứ 7, tr 2000-2004 Lƣu Anh Tú, Phạm Ngọc Doanh, Hoàng Văn Hiền, Đỗ Trung Dũng, Nguyễn Thị Hợp, 2016 Sự phát triển khả gây bệnh loài sán phổi Paragonimus westermani động vật thí nghiệm Tạp chí Sinh học, 38(2):133139 Doanh PN, Hien HV, Tu LA, Nonaka N, Horii Y, Nawa Y., 2016 Molecular identification of the trematode Paragonimus in faecal samples from the wild cat Prionailurus bengalensis in the Da Krong Nature Reserve, Vietnam Journal of Helminthology 90(6):658-662 Doanh PN, Tu LA, Bui TD, Loan TH, Nonaka N, Horii Y, Blair D, Nawa Y., 2016 Molecular and morphological variation of Paragonimus westermani in Vietnam with records of new second intermediate crab hosts and a new locality in a northern province Parasitology 143(12):1639-46 99 TÀI LIỆU THAM KHẢO Blair D, Xu XB and Agatsuma T, Paragonimiasis and the genus Paragonimus, Advance in Parasitology, 1999, 42:113–222 Blair D, Agatsuma T, and Wang W, Paragonimiasis, In World class parasites, volum 11 Food-borne parasitic zoonoses: Fish and plant-borne parasites, ed, K, D, Murrell and B, Fried, Springer, New York, 2007, 117-150 Cao Văn Viên, Lê Minh Tuấn, Nguyễn Công Phúc, Tẩn Cù Páo, Lê Trung Thỏa CTV, Một s kết nghiên cứu bước đầu bệnh sán phổi (Paragonimiasis) Sìn Hồ - Lai Châu, Tạp chí Y học thực hành, 1994, 2:4-6 Cao Văn Viên, Một s kết nghiên cứu dịch tễ, ký sinh trùng, bệnh học phòng ch ng bệnh sán phổi Sìn Hồ - Lai Châu, Kỷ yếu Hội nghị khoa học công nghệ - môi trường lần thứ V tỉnh miền núi phía Bắc, 1997, 81-84 Nguyễn Thị Lê, Lê Đăng Hà, Cao Văn Viên, Phát hai loài sán phổi thuộc gi ng Paragonimus Braun, 1899 (Paragonimidae Dolfus, 1939) huyện Sìn Hồ Lai Châu", Tạp chí Sinh học, 1997, 19(1):5-7 Nguyễn Thị Lê, Đặng Tất Thế, Phạm Ngọc Doanh, Tình hình nhiễm metacercaria sán phổi cua su i thuộc huyện Sìn Hồ - Lai Châu, Y học Việt Nam, 1997, 2:35- 40 Nguyễn Văn Đề, Kiều Tùng Lâm, Lê Văn Châu cs., Nghiên cứu bệnh sán sán dây Tạp chí Phịng chống bệnh ký sinh trùng sốt rét, 1998a, 2:2933 Nguyễn Văn Đề, Lê Đình Cơng, Đặng Thanh Sơn cs., Nghiên cứu bước đầu dịch tễ học, bệnh học điều trị bệnh sán phổi Sìn Hồ (tỉnh Lai Châu) Tạp chí Y học phịng dịch, 1998b, 8:66 Nguyễn Văn Đề, Đặng Thanh Sơn, Lê Thị Chuyên et al., Tình hình nhiễm giun sán xã miền núi tỉnh Lào Cai Tạp chí Phịng chống bệnh ký sinh trùng sốt rét, 1999, 2:73-76 10 Nguyễn Văn Đề, Đặng Thanh Sơn, Lê Thị Chuyền cs., Thông báo s ổ bệnh sán phổi phát tỉnh miền núi phía Bắc, Thơng tin phịng chống Sốt rét bệnh Ký sinh trùng, 2000a, 2:32 11 Nguyễn Văn Đề, Lê Văn Châu, Đặng Thanh Sơn cs., Nghiên cứu dịch tễ, bệnh học, chẩ điều trị bệnh sán phổi tỉnh phía bắc Việt 100 Nam Thơng tin nghiên cứu khoa học 1996-2000 Viện Sốt rét, ký sinh trùng côn trùng Trung ương, 2000 : 560-594 12 De NV, Murrell KD, Cong LD, Cam PD, Chau LV, Toan ND, Dalsgaard A, The food-borne trematodes zoonoses of Vietnam Southeast Asian J Trop Med Publ Health, 2003, 34(1): 12-34 13 Phạm Ngọc Doanh, Nguyễn Thị Lê, Đặng Tất Thế, Sự phát triển sán phổi Parago imus heterotremus tro g thể động vật tác hại chúng Tạp chí Sinh học, 1999, 21 (2b):76 - 82 14 Phạm Ngọc Doanh, Nguyễn Thị Lê, Đặng Tất Thế, Sự phân b sán phổi vật chủ trung gian tỉnh Tây Bắc, Tạp chí Sinh học, 2002, 24(1):1422 15 Doanh PN, Shinohara A, Horii Y, Habe S, Nawa Y, The DT, Le NT, Morphological and molecular identification of two Paragonimus spp., of which metacercariae concurrently found in a land crab, Potamiscus tannanti, collected in Yenbai Province, Vietnam, Parasitol Res, 2007,100:1075–1082 16 Doanh PN, Shinohara A, Horii Y, Habe S, Nawa Y & Le NT, Description of a new lung fluke species, Paragonimus vietnamensis sp nov, (Trematoda: Paragonimidae), found in Central Viet Nam, Parasitology Research, 2007, 101:1495-1501 17 Doanh PN, Shinohara A, Horii Y, Habe S, Nawa Y & Le NT, Discovery of Paragonimus proliferus in Central Viet Nam and their molecular phylogenetic status among genus Paragonimus, Parasitology Research, 2008, 102:677-683 18 Doanh PN, Shinohara A, Horii Y, Habe S, Nawa Y, Discovery of Paragonimus westermani in Viet Nam and its molecular phylogenetic status in P westermani complex, Parasitol Res, 2009,104:1149–1155 19 Doanh PN, Shinohara A, Horii Y, Yahiro S, Habe S, Vannavong N, Strobel M, Nakamura S & Nawa Y, Morphological differences and molecular similarities between Paragonimus bangkokensis and P harinasutai, Parasitology Research, 2009b, 105:429-439 20 Doanh PN, Dung DT, Thach DT, Horii Y, Shinohara A, Nawa Y, Human paragonimiasis in Viet Nam: epidemiological survey and identification of the 101 responsible species by DNA sequencing of eggs in patients' sputum, Parasitol Int, 2011;60(4):534-537 21 Doanh PN, Hien HV, Nonaka N, Horii Y, Nawa Y Co-existence of Paragonimus harinasutai and Paragonimus bangkokensis metacercariae in fresh water crab hosts in central Viet Nam with special emphasis on their close phylogenetic relationship Parasitol Int 2012, 61(3):399-404 22 Doanh PN, Horii Y, Nawa Y, Paragonimus and paragonimiasis in Vietnam: an update, Korean J Parasitol, 2013,51:621-627 23 Doanh PN, Thaenkham U, An PT et al., Metacercarial polymorphism and genetic variation of Paragonimus heterotremus (Digenea: Paragonimidae), and a re-appraisal of the taxonomic status of Paragonimus pseudoheterotremus, Journal of Helminthology, 2015, 89(2):182-188 24 Doanh PN, Hien HV, An PT, Tu LA, Development of lung fluke, Paragonimus heterotremus, in rat and mice, and the role of paratenic host in its life cycle, Tạp chí sinh học, 2015, 37(3): 265-271 25 Miyazaki I, An illustrated book of helminthic zoonoses, Tokyo : International Medical Foundation of Japan, 1991, 494pp 26 Blair D, Paragonimiasis, In Digenetic trematodes, ed, R, Toledo and B, Fried, Springer, New York, 2014, 115-152 27 Kong Y, Doanh PN, Nawa Y, Paragonimus, In Biology of Foodborne Parasites, ed, L, Xiao, U, Ryan and Y, Feng, CRC Press, 2015 28 Agatsuma T, Iwagami M, Sato Y, Iwashita J, Hong SJ, Kang SY, Ho LY, Su KE, Kawashima K, Abe T, The origin of the triploid in Paragonimus westermani on the basis of variable regions in the mitochondrial DNA J Helminthol, 2003, 77(4):279-285 29 Blair D, Nawa Y, Mitreva M, Gene diversity and genetic variation in lung flukes(genus Paragonimus), Transactions of the Royal Society of Tropical Medicine and Hygiene, 2016, 10(1):6-12 30 Nakamura-Uchiyama F, Mukae H, Yukifumi N, 2002 Paragonimiasis: a Japanese perspective Clin Chest Med, 23:409– 420 31 Nonaka N, Sano T, Inoue T, Armua MT, Fukui D, Katakura K & Oku Y, Multiplex PCR system for identifying the carnivore origins of feces for an 102 epidemiological study on Echinococcus multilocularis in Hokkaido, Japan, Parasitology Research, 2009, 106:75–83 32 Kim JS An ecological study of Paragonimus in Malaysia Kisaengchunghak Chapchi 1978, 16(1):47-53 33 Amunarriz M, Intermediate host of Paragonimus in the eastern Amazonic region of Ecuador Tropical Medicine Parasitology, 1991, 42(3):164 - 166 34 Hu WQ, Zhou SH, Long ZP, Discovery of the first intermediate host of Paragonimus heterotremus Chinese Journal of Parasitology & Parasitic Diseases, 1994, 12(1):34 - 36 35 Wilke T, Davis GM, Gong X, Liu HX Erhaia (Gastropoda: Rissooidea): phylogenetic relationships and the question of Paragonimus coevolution in Asia Am J Trop Med Hyg, 2000, 62(4):453-459 36 Liu L, Huo GN, He HB, Zhou B, Attwood SW, A phylogeny for the pomatiopsidae (Gastropoda: Rissooidea): a resource for taxonomic, parasitological and biodiversity studies BMC Evol Biol, 2014, 14(1):29 37 Odermatt P, Habe S, Maichanh S, Tran DS, Duong V & Zhang W, Paragonimiasis and its intermediate hosts in a transmission focus in Laos peop e’s Democratic Repub ic Acta Tropica, 2007, 103:108-115 38 Habe S, Doanh PN, Yahiro S, Vannavong N, Barennes H, Odermatt P, Dreyfuss G, Horii Y, Nawa Y, Paragonimus paishuihoensis metacercariae in freshwater crabs, Potamon lipkei, in Vientiane Province, Lao PDR Korean J Parasitol, 2013, 51(6):683-687 39 Habe S, Lai KPF, Agatsuma T, Yang CKO and Kawashima K, Crab hosts for Paragonimus westermani (kerbert, 1878) in Malaysia Jpn J Trop Med Hyg., 1993, 21(3):137-142 40 Habe S, Lai KPF, Agatsuma T, Growth of Malaysian Paragonimus westermani (Kerbert, 1878) in mammals and the mode of transmission of the fluke among mammals, Japanese Journal of Tropical Medicine and Hygiene, 1996, 24:225-232 41 Miyazaki I and Habe S, A newly recognised mode of human infection with lung flukes, Paragonimus westermani Parasitology, 1976, 62:646-648 (Kerbert, 1878), Journal of 103 42 Yoshida A, Matsuo K , Moribe J, Venison, another source of Paragonimus westermani infection, Parasitology International, 2016, 65(6): 607–612 43 Singh TS, Sugiyama H, Umehara A, Hiese S & Khalo K, Paragonimus heterotremus infection in Nagaland: A new focus of Paragonimiasis in India, Indian Journal of Medical Microbiology, 2009, 27:123-127 44 Singh TS, Devi KR, Singh SR, A case of cutaneous paragonimiasis presented with minimal pleuritis, Tropical Parasitology, 2012, 2(2):142-144 45 Singh TS, Mutum SS, Razaque MA, Pulmonary paragonimiasis: clinical features, diagnosis and treatment of 39 cases in Manipur Trans R Soc Trop Med Hyg, 1986, 80(6):967-971 46 Singh TS, Mutum S, Razaque MA, Singh YI, Singh EY, Paragonimiasis in Manipur Indian J Med Res, 1993, 97:247-252 47 Devi KR, Narain K, Bhattacharya S, Negmu K, Agatsuma T, Blair D, Wickramashinghe S, Mahanta J, Pleuropulmonary paragonimiasis due to Paragonimus heterotremus: molecular diagnosis, prevalence of infection and clinicoradiological features in an endemic area of northeastern India Trans R Soc Trop Med Hyg, 2007, 101(8):786-92 48 Singh TS, Hiromu S, Devi KR, Singh WA, First case of Paragonimus westermani infection in a female patient in India, Indian J Med Microbiol, 2015, 33(l):156-159 49 Zhang XL, Wang Y, Wang GX, Distribution and clinical features of Paragonimiasis skrjabini in three Gorges Reservoir Region, Parasitology International, 2012, 61(4):645-649 50 Lane MA, Marcos LA, Onen NF, Paragonimus kellicotti flukes in Missouri, USA, Emerging Infectious Diseases, 2012, 18(8):1263-1267 51 Nawa Y and Nakamura-Uchiyama F, Paragonimus and paragonimiasis in Japan In Asian Parasitology, vol.1 Food-borne helminthiasis in Asia FAP journal, Japan, 2005, 125-131 52 Zhou P, Chen N, Zhang RL, Food-borne parasitic zoonoses in China: perspective for control Trends Parasitol, 2008, 24:190–196 104 53 Boland JM, Vaszar LT, Jones JL, Pleuropulmonary infection by Paragonimus westermani in the United States: a rare cause of eosinophilic pneumonia after ingestion of live crabs Am J Surg Pathol, 2011, 35(5):707–713 54 Diaz JH, Paragonimiasis acquired in the United States: native and nonnative species Clin Microbiol Rev, 2013, 26:493–504 55 Nkouawa A, Okamoto M, Mabou AK, Paragonimiasis in Cameroon: mo ecu ar ide tificatio serodiag osis a d c i ica ma ifestatio s Trans R Soc Tropical Med Hyg, 2009, 103:255–261 56 Zhong HL, He LY, Xu ZB, Recent progress in studies of Paragonimus and paragonimiasis control in China Chinese Med J, 1981, 94:483–494 57 Xu ZB, Studies on clinical manifestations, diagnosis and control of paragonimiasis in China Southeast Asian J Trop Med Public Health, 1991, 22:345–348 58 Eke RA, Nwosu UM, Enwereji EE, Paragonimiasis reemergence in Nigeria: predisposing factors and recommendations for early intervention and everlasting eradication ISRN Infect Dis 2013, doi: 10.5402/2013/257810 59 Devi KR, Narain K, Mahanta J, Nirmolia T, Blair D, Saikia SP, Agatsuma T, Presence of three distinct genotypes within the Paragonimus westermani complex in northeastern India, Parasitology, 2013,140:76–86 60 Odermatt P, Veasna D, Zhang W, Vannavong N, Phrommala S, Habe S, Barennes H, Strobel M Rapid identification of paragonimiasis foci by lay informants in Lao People's Democratic Republic PLoS Negl Trop Dis 2009, 3(9):e521 doi: 10.1371/journal.pntd.0000521 61 Mukae H, Taniguchi H, Matsumoto N, Clinicoradiologic features of pleuropulmonary Paragonimus westermani on Kyusyu Island, Japan Chest , 2001,120:514–520 62 Slesak G, Inthalad S, Basy P, Ziehl-Neelsen staining technique can diagnose paragonimiasis PLoS Negl Trop Dis, 2011, 5:e1048 63 Kim TS, Han J, Shim SS, Pleuropu mo ary parago imiasis: CT fi di gs i 31 patients Am J Roentgenol, 2005, 185:616–62 105 64 Sadun EH, Buck AA, Paragonimiasis in South Korea—immunodiagnostic, epidemiologic, clinical roentgenologic and therapeutic studies Am J Trop Med Hyg, 1960, 9:562–599 65 Itoh M and Sato S, Multi-dot enzyme-linked immunosorbent assay for serodiagnosis of trematodiasis Southeast Asian J Trop Med Public Health, 1990, 21:471–474 66 Chen JX, Chen M, Ai L, A protein microarray for the rapid screening of patients suspected of infection with various food-borne helminthiases PLoS Negl Trop Dis, 2012, 6:e1899 67 Qiu XG, Nakamura-Uchiyama F, Nawa Y, Itoh M, A tool for mass-screening of paragonimiasis: an enzyme-linked immunosorbent assay with urine samples Trop Med Health 2016, 44:19 doi: 10.1186/s41182-016-0019-4 eCollection 2016 68 Chang ZS, Wu B, Blair D, Gene sequences for identification of Paragonimus eggs from a human case, Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2000, 18:213–215 69 Fischer PU, Curtis KC, Marcos LA, Molecular characterization of the North America u g fluke Parago imus ke icotti i Missouri a d its deve opme t in Mongolian gerbils Am J Trop Med Hyg, 2011, 84:1005–1011 70 Maleewong W, Intapan PM, Wongkham C, Detection of Paragonimus heterotremus in experimentally infected cat feces by antigen-capture ELISA and by DNA hybridization, Journal of Parasitology, 1997, 83:1075–1078 71 Chen MX, Ai L, Zhang RL, Sensitive and rapid detection of Paragonimus westermani infection in humans and animals by loop-mediated isothermal amplification LAMP Parasitology Research, 2011, 108:1193–1198 72 Zhao GH, Li J, Blair D, Biotechnological advances in the diagnosis, species differentiation and phylogenetic analysis of Schistosoma species Biotechnol Adv, 2012, 30:1381–1389 73 Zhang J, Zhang XL, Huang FS, Systematic teaching method to enhance the effectiveness of training for paragonimiasis Pathog Glob Health, 2013, 107:11–14 106 74 Patrick SL, Turabelidze G, Marx H, Human paragonimiasis after eating raw or undercooked crayfish—Missouri, July 2006-September 2010, Morbidity and Mortality Weekly Report, 2010, 59:1573–1576 75 Arias SM, Salazar LM, Casas E, Paragonimus sP in crabs and awareness of the educational community to aquatic ecosystems in La Miel and La Clara, Caldas, Antioquia, Biomedica, 2011, 31(2):209-215 76 Sanpool O, Intapan PM, Thanchomnang T, Janwan P, Nawa Y, Blair D, Maleewong W, Molecular variation in the Paragonimus heterotremus complex in Thailand and Myanmar Korean J Parasitol 2013, 51(6):677-681 77 Nawa Y, Thaenkham U, Doanh PN, Paragonimus westermani and Paragonimus species, In Encyclopedia of Food Safety, Volume 2: Hazards and Diseases, 1st edition, ed, Y, Motarjemi, Elsevier, 2014, 179-188 78 Thaenkham U & Waikagul J, Molecular phylogenetic relationship of Paragonimus pseudoheterotremus Southeast Asian Journal of Tropical Medicine and Public Health, 2008, 39: 217–221 79 Miyazaki I, Two types of the lung fluke which has been called Paragonimus westermani (Kerbert, 1878), Med, Bull, Fukuoka Univ, 1978, 5:251-63 80 Tabuchi KT, Takahashi S, Adachi A, family case of paragonimiasis westermani following ingestion of raw deer meat, Shonika Rinsho, 2010, 63:1798-1802 81 Sugiyama H, Shibata M, Arakawa K, Risk for paragonimiasis westermani infection through venison, Infectious Agents Surveillance Report, 2016, 37:36 82 Monzel R Une observation de distomiase pulmonaire en Cochinchine Quelque notes sur les accident toxques dus a de parasites animaux de l'intestin Ann Hyg et Med Colon 1906;9:258–262 83 Nguyễn Thị Lê, Danh mục loài sán ký sinh chim thú Việt Nam Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, 1995, 250 tr 84 Kino H, De NV, Vien HV, Chuyen LT & Sano M, Paragonimus heterotremus Chen et Hsia,1964 found from a dog in Vietnam, Japanese Journal of Parasitology, 1995,44:470-472 107 85 Le TH, De NV, Blair D, McManus DP, Kino H, Agatsuma T, Paragonimus heterotremus Chen et Hsia, 1964 in Vietnam: A molecular identification and relationships of isolates from different hosts and geographical origins, Acta Trop, 2006, 98:25-33 86 Sohn WM, Ryu JS, Min DY, Song HO, Rim HJ, Vonghachack Y, Ouakhasith D, Banouvong V, Indochinamon ou (Crustacea: Potamidae) as a new second intermediate host for Paragonimusharinasutai in Luang Prabang Province, Lao PDR Korean J Parasitol., 2009, 47(1):25-29 87 Sugiyama H, Shibata K, Morishima Y, Muto M, Yamasaki H, Kawakami Y, Current status of lung fluke metacercarial infection in freshwater crabs in the Kawane area of Shizuoka Prefecture, Japan J Vet Med Sci., 2013, 75(3):249-53 88 Đặng Ngọc Thanh, Thái Trần Bái, Phạm Văn Miên, Định loại động vật không ươ g s g ước Bắc Việt Nam, Nxb KHKT, Hà Nội, 1980 89 Đặng Ngọc Thanh Hồ Thanh Hải, Giáp ác ước Động vật chí Việt Nam Nxb Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, 2001 90 Đặng Ngọc Thanh, Hồ Thanh Hải, Động vật chí Việt Nam tập 5, Giáp xác ước ngọt, Nhà xuất Khoa học kỹ thuật, Hà Nội, 2006 91 Đặng Ngọc Thanh, Hồ Thanh Hải, T m cua ước Việt Nam Nhà xuất Khoc học tự nhiên công nghệ, 2012, 166-246 92 Bowles J, Blair D, McManus DP, A molecular phylogeny of the human schistosomes, Mol Phylogenet Evol, 1995, 4:103-109 93 Bowles J, McManus DP, Rapid discrimination of Echinococcus species and strains using a polymerase chain reaction-based RFLP method, Mol Biochem Parasitol, 1993, 57:231–240 94 Tamura K, Stecher G, Peterson D, Filipski A, Kumar S, MEGA6: Molecular Evolutionary Genetics Analysis Version 6.0 Mol Biol Evol 2013, 30(12):2725–2729 95 Nguyễn Thị Lê, Phạm Văn Lực, Hà Duy Ngọ, Nguyễn Văn Đức, Nguyễn Thị Minh Giun sán ký sinh gia súc Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, 1996, 296tr 108 96 Sadaow L, Intapan PM, Boonmars T, Morakote N, Maleewong W Susceptibility of laboratory rodents to Trichinella papuae Korean J Parasitol, 2013, 51(6): 629-632 97 Đặng Ngọc Thanh, Hồ Thanh Hải, Phân loại phân họ c Triculinae (Hydrobiidae - Prosobranchia) Việt Nam Tạp chí Sinh học, 2006, 28(1):8–18 98 Ho Thanh Hai and Dang Ngoc Thanh, Contribution to the study on Triculinae snail group (Pomatiopsidae - mollusca) in Tay nguyen highland, Vietnam Journal of Biology, 2010, 32(4):14-18 99 Hồ Thanh Hải, Đặng Ngọc Thanh, Hai loài c thuộc nhóm Triculinae (Pomatiopsidae - Prosobranchia) miền bắc Việt Nam Tạp chí Sinh học, 2012, 33:17–23 100 Islam Z, Alam MZ, Akter S, Roy BC and Mondal MMH Distribution patterns of vector snails and trematode cercaria in their vectors in some selected areas of Mymensingh J Environ Sci & Natural Resources, 2012, 5(2): 37- 46 101 Folmer O, Black M, Hoeh W, Lutz RA, Vrijenhoek RC DNA primers for amp ificatio of mitocho dria cytochrome c o idase subunit I from diverse metazoan invertebrates Molecular Mar Biol Biotech 1994;3:294–299 102 Hứa Văn Thước cộng Nghiên cứu s đặc điểm dịch tễ, sinh thái, hình thái ấu trùng sán phổi trung gian truyền bệnh (cua su i) s tỉnh phía bắc giáp trung qu c Tạp chí Y học thực hành TP HCM, 2007, 11(2):136 103 Agatsuma T, Habe S & Ho LY, Genetic variability of the diploid and triploid of Paragonimus westermani in China and their differentiation, pp 33–59 in Kawashima, K, (Ed,) Paragonimus in Asia: biology, genetic variation and speciation (II), Fukuoka, Shunpposha Photographic Printing Co, Ltd, 1989, 33-59 104 Park GM, Lee KJ, Im KI, Park H, Yong TS, Occurrence of a diploid type and a new first intermediate host of a human lung fluke, Paragonimus westermani, in Korea, Experimental Parasitology, 2001, 99:206–12 105 Sugiyama H, Morishima Y, Binchai S, Rangsiruji A and Ketudat P, New form of Paragonimus westermani discovered in Thailand: morphological 109 characteristics and host susceptibility Southeast Asian J Trop Med Public Health, 2007, 38(1), 87-91 106 Blair D, Agatsuma T, Watanobe T, Okamoto M, Ito A, Geographical genetic structure within the human lung fluke, Paragonimus westermani, detected from DNA sequences, Parasitology, 1997, 115 (4):411-417 107 Iwagami M, Ho LY, Su K, Lai PF, Fukushima M, Nakano M, Blair D, Kawashima K, Agatsuma T, Molecular phylogeographic studies on Paragonimus westermani in Asia, J Helminthol, 2000, 74:315-22 108 Iwagami M, Rajapakse RPVJ, Paranagama W, Okada T, Kano S, Agatsuma T, Ancient divergence of Paragonimus westermani in Sri Lanka, Parasitol Res, 2008, 102:845–52 109 Waikagul J, A new species of Paragonimus (Trematoda: Troglotrematidae) from a cat infected with metacercariae from mountain crabs Larnaudia larnaudii, Journal of Parasitology, 2007, 93(6):1496-1500 110 Hu W, Study on the life cycle of Paragonimus heterotremus, Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 1998, 16:347–352 (in Chinese with English abstract) 111 Singh TS, Sugiyama H, Rangsiruji A & Devi KR, Morphological and molecular characterizations of Paragonimus heterotremus, the causative agent of human paragonimiasis in India Southeast Asian Journal of Tropical Medicine and Public Health, 2007, 38:82–86 112 Blair D, Chang Z, Chen M, Cui A, Wu B, Agatsuma T, Iwagami M, Corrlis D, Fu C & Zhan X, Paragonimus skrjabini Chen, 1959 (Digenea: Paragonimidae) and related species in eastern Asia: a combined molecular a d morpho ogica approach to ide tificatio a d ta o omy Systematic Parasitology, 2005, 60:1–21 113 Binchai S, Rangsiruji A, Ketudat P, Morishima Y, Sugiyama H, Molecular systematic of a new form of Paragonimus westermani discovered in Thái Lan, Southeast Asian J Trop Med Public Health, 2007, 38(1):92-96 114 Davis GM, Chen CE, Kang ZB et al., Snail hosts of Paragonimus in Asia and the Americas, Biomedical and Environmental Sciences, 1994, 7:369-382 110 115 Iwagami M, Rajapakse RP, Yatawara L, Kano S, Agatsuma T, The first intermediate host of Paragonimus westermani in Sri Lanka Acta Trop, 2009, 109(1):27-29 116 Chai JY, Sohn WM, Chung HL, Hong ST & Lee SH, Metacercariae of Pharyngostomum cordatum found from the European grass snake, Rhabdophis tigrina, and its experimental infection to cats, Korean Journal of Parasitology, 1990, 28:175-81 117 Manh ND, Dang NX & Nghia NX, Conservation importance of mammal fauna in Da Krong Nature Reserve, Quang Tri province, Vietnam, Vietnam Journal of Biology, 2009, 31:42-50 118 Habe S, Experimental studies on the mode of human infection with the lung fluke, Paragonimus westermani (in Japanese with English abstract) Jpn J Parasitol, 1978, 27(3): 261-292 119 Shibahara T, Studies on the lung fluke, Paragonimus westermani - diploid type - in northern part of Hyogo prefecture, Japan II Experimental oral infection with metacercariae to dogs and cats, with reference to morphological characteristics of adult worms and eggs Jpn J Parasitol., 1983, 32(4): 293-304 120 Habe S, A newly recognized paratenic host of Paragonimus spp Jpn J Trop Med Hyg., 1983, 11(1): 1-6 121 Landmann H, Ngu DV and Thai DD, Paragonimiasis in Vietnam (in German), Wochenschrqt fur die Gesumre Medizin, 1961,16:1355-64 122 Fan PC, Lu H, Lin LH, Experimental infection of Paragonimus westermani in mice and rats Korean J Parasitol, 1993, 31(2):91-7 123 Saxton T and Fried B, An update on metacercarial excystment of trematodes Parasitol Res, 2009, 105(5):1185-1191 124 Maleewong W, Intapan PM, Wongkham C, Pajongthanasaris M, Morakote N, Tapchaisri P, Chaicumpa W A dot-ELISA test using monoclonal antibodypurified antigens for the diagnosis of paragonimiasis caused by Paragonimus heterotremus Southeast Asian J Trop Med Public Health 1997, 28(3):621-3 111 125 Pappas MG, Hajkowski R, Hockmeyer WT, Standardization of the dot enzyme linked immunosorbent asay (dot-ELISA) for human visceral leishmaniasis Am J Trop Med Hyg, 1984, 33:1005-1011 126 Kumar S, Band AH, Samantaray JC A dot enzyme linked immunosorbent asay for detection of antibodies against Entamoeba histolytica J Immunol Methods, 1985, 83:125-133 127 Londner MV, Rosen G, Sintov A, Spina DT The feasibility of a dot enzyme linked immunosorbent asay (dot-ELISA) for the diagnosis of Plasmodium falciparum antigens and antibodies Am J Trop Med Hyg, 1987, 36:240-245 128 Shaheen HI, Kamal KA, Farid Z., Dot enzyme linked immunosorbent asay (dot-ELISA) for the rapid diagnosis of human fascioliasis J Parasitol, 1989, 75:549-552 129 Su X, Prestwood AK A dot-ELISA mimicry Western blot test for the detection of swine trichinellosis J Parasitol, 1991, 77:76-82 130 Zhang YQ, Hou LP, Gui SH, The significance of dot-ELISA in the diagnosis of paragonimiasis Chinese journal of internal medicine, 1986, 25(11):679-81 131 Bùi Khánh Linh, Nguyễn Cơng Thịnh, Đồn Hữu Hoàn, Nghiên cứu thiết lập phươ g pháp dot-ELISA để chẩ bệnh sán gan lớn động vật ni Tạp chí Sinh học, 2005, 27(3A):37-40 132 Crowther JR The ELISA guidebook Methods Mol Biol, 2000, 149:III-IV, 1-413