HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN VĂN KHỞI ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ CHỌN TẠO CÁC DÒNG ĐẬU TƯƠNG KHÁNG BỆNH GỈ SẮT (Phakopsora pachyrhizi Sydow) NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP – 2018 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN VĂN KHỞI ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ CHỌN TẠO CÁC DÒNG ĐẬU TƯƠNG KHÁNG BỆNH GỈ SẮT (Phakopsora pachyrhizi Sydow) Chuyên ngành: Di truyền chọn giống trồng Mã số: 62 01 11 Người hướng dẫn khoa học: GS.TS Phan Hữu Tôn TS Nguyễn Thanh Tuấn HÀ NỘI – 2018 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi, kết nghiên cứu đƣợc trình bày luận án trung thực, khách quan chƣa sử dụng bảo vệ để lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận án đƣợc cám ơn, thơng tin trích dẫn luận án đƣợc ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng .năm 2018 Tác giả luận án Nguyễn Văn Khởi i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành luận án, tơi nhận đƣợc hƣớng dẫn, bảo tận tình thầy cô giáo, giúp đỡ, động viên bạn bè, đồng nghiệp gia đình Nhân dịp hồn thành luận án, cho phép tơi đƣợc bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới GS.TS Phan Hữu Tơn TS Nguyễn Thanh Tuấn tận tình hƣớng dẫn, dành nhiều công sức, thời gian tạo điều kiện cho tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, Ban Quản lý đào tạo, Bộ môn Di truyền chọn giống trồng, Khoa Nông học – Học viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình giúp đỡ tơi trình học tập, thực đề tài hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn tập thể lãnh đạo Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm, đồng nghiệp thuộc Bộ môn Công nghệ Sinh học, Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ q trình thực thí nghiệm luận án Xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ động viên, khuyến khích tơi suốt q trình hồn thành luận án Tác giả luận án Nguyễn Văn Khởi ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình x Trích yếu luận án xi Thesis abstract xiii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.3 Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu 1.4 Tính đóng góp luận án 1.5 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 2.1 Tình hình sản xuất đậu tƣơng 2.1.1 Tình hình sản xuất giới 2.1.2 Tình hình sản xuất đậu tƣơng Việt Nam 2.1.3 Một số yếu tố hạn chế sản xuất đậu tƣơng Việt Nam 2.2 Bệnh gỉ sắt, phân bố tầm quan trọng 2.2.1 Triệu chứng bệnh 2.2.2 Phạm vi tác hại bệnh gỉ sắt 2.2.3 Tƣơng tác ký chủ - thể gây bệnh 2.2.4 Đa dạng tính biến chủng nấm Phakopsora pachyrhizi Sydow 2.2.5 Các phƣơng pháp đánh giá bệnh 13 2.3 Đánh giá nguồn gen đậu tƣơng 15 2.4 Di truyền tính kháng bệnh gỉ sắt đậu tƣơng thị phân tử liên kết 18 2.4.1 Di truyền tính kháng hiệu lực kháng gen 18 2.4.2 Chỉ thị phân tử liên kết với gen kháng bệnh gỉ sắt đậu tƣơng 21 iii 2.5 Ứng dụng thị phân tử chọn tạo giống trồng 24 2.5.1 Chỉ thị phân tử ADN 24 2.5.2 Ứng dụng thị phân tử ADN chọn tạo giống trồng 26 2.6 Một số thành tựu chọn tạo giống đậu tƣơng kháng bệnh gỉ sắt 30 PHẦN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 3.1 Địa điểm nghiên cứu 33 3.2 Thời gian nghiên cứu 33 3.3 Vật liệu nghiên cứu 33 3.4 Nội dung nghiên cứu 36 3.4.1 Nội dung Đánh giá vật liệu khởi đầu phục vụ công tác lai tạo chọn lọc dòng đậu tƣơng suất cao, kháng bệnh gỉ sắt 3.4.2 36 Nội dung Lựa chọn thị phân tử ADN liên kết chặt với gen kháng bệnh gỉ sắt đậu tƣơng 36 3.4.3 Nội dung Lai tạo chọn lọc dòng đậu tƣơng kháng bệnh gỉ sắt 36 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 37 3.5.1 Đánh giá vật liệu khởi đầu phục vụ công tác lai tạo chọn lọc dòng đậu tƣơng suất cao, kháng bệnh gỉ sắt 37 3.5.2 Lựa chọn thị phân tử liên kết chặt với gen kháng bệnh gỉ sắt 42 3.5.3 Lai tạo chọn lọc dòng đậu tƣơng kháng bệnh gỉ sắt 43 3.5.4 Phƣơng pháp xử lý số liệu 46 PHẦN KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 47 Kết đánh giá vật liệu khởi đầu phục vụ công tác lai tạo chọn lọc dòng đậu tƣơng suất cao, kháng bệnh gỉ sắt 47 4.1.1 Đặc điểm hình thái, nơng sinh học suất mẫu giống đậu tƣơng 47 4.1.2 Phát nguồn gen đậu tƣơng kháng gỉ sắt thị phân tử ADN 59 4.1.3 Xác định gen kháng hữu hiệu với bệnh gỉ sắt đậu tƣơng Việt Nam 63 4.1.4 Lựa chọn bố mẹ định hƣớng lai tạo 66 4.2 Kết lựa chọn thị phân tử liên kết với gen quy định tính kháng 67 4.2.1 Đa hình mẫu giống đậu tƣơng sử dụng thị phân tử liên kết với gen quy định tính kháng bệnh gỉ sắt 68 4.2.2 Xác định độ liên kết thị phân tử ADN với gen kháng gỉ sắt 69 4.3 Lai tạo chọn lọc dòng đậu tƣơng theo mục tiêu 71 iv 4.3.1 Thiết lập tổ hợp lai đậu tƣơng theo mục tiêu 72 4.3.2 Kết chọn tạo dòng đậu tƣơng kháng bệnh gỉ sắt ứng dụng MAS 73 4.3.3 Kết lai backcross chọn lọc MABC 91 PHẦN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 97 5.1 Kết luận 97 5.2 Đề nghị 98 Danh mục cơng trình cơng bố có liên quan đến luận án 99 Tài liệu tham khảo 100 Phụ lục 116 v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ ADN Axit desoxiribonucleic AFLP Amplified Fragments Length Polymorphism (Đa hình chiều dài đoạn ADN nhân chọn lọc) AUDPC Area Under Disease Progess Curve (Chỉ số nhiễm bệnh tích lũy theo thời gian) BNN&PTNT Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn bp Base pair (Cặp nucleotide) cM Centi Morgarn (Đơn vị chiều dài đồ di truyền) CTAB Cetyltrimethylammonium bromide CTP Cây thực phẩm dNTPs Deoxynucleotide Triphosphates Đ/c Đối chứng FAO Food and Agriculte Organization of the United Nations (Tổ chức Lƣơng thực Nông nghiệp Liên hiệp quốc) MABC Marker Assisted Backcrossing (Lai lại nhờ thị phân tử) MAS Marker Assisted Selection (Chọn lọc nhờ thị phân tử) NST Nhiễm sắc thể KL Khối lƣợng KKN Khảo kiểm nghiệm PCR Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chuỗi trùng hợp) TCN Tiêu chuẩn ngành TGST Thời gian sinh trƣởng RAPD Random Amplified Polymophic DNA (Đa hình đoạn ADN khuếch đại ngẫu nhiên) RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism (Đa hình chiều dài đoạn phân cắt giới hạn) SNP Single Nucleotide Polymorphism (Đa hình Nucleotide đơn) SSR Simple Sequence Repeats (Những trình tự lặp lại đơn giản) STS Sequence Tagged Site (Vị trí trình tự đƣợc đánh dấu) WVRDC World Vegetable Research Development Center (Trung tâm nghiên cứu phát triển rau màu giới) vi DANH MỤC CÁC BẢNG TT Tên bảng Trang 2.1 Tình hình sản xuất đậu tƣơng giới qua số năm 2.2 Tình hình sản xuất đậu tƣơng Việt Nam qua số năm 2.3 Chủng Phakopsora pachyrhizi phân lập đƣợc số quốc gia 11 2.4 Nguồn gen đậu tƣơng kháng bệnh gỉ sắt châu Á (ASR) đƣợc công bố 17 2.5 Chỉ thị phân tử liên kết với gen kháng bệnh gỉ sắt đậu tƣơng đƣợc công bố 22 3.1 Danh sách mẫu giống đậu tƣơng nghiên cứu 34 3.2 Danh sách thị phân tử liên kết gen kháng gỉ sắt đậu tƣơng 35 3.3 Danh sách mẫu nấm gỉ sắt phân lập sử dụng lây nhiễm nhân tạo 36 4.1 Phân nhóm theo đặc điểm hình thái mẫu giống đậu tƣơng Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.2 Phân nhóm theo tiêu sinh trƣởng phát triển mẫu giống đậu tƣơng vụ xuân 2013, Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.3 58 Kết phát gen kháng bệnh gỉ sắt ứng dụng thị phân tử ADN vụ Xuân 2013 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.6 61 Kết đánh giá tính kháng/nhiễm bệnh gỉ sắt nhiễm bệnh nhân tạo năm 2013 Từ Liêm, Hà Nội 4.7 55 Chất lƣợng hạt mẫu giống đậu tƣơng vụ Xuân 2013 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.5 50 Phân nhóm theo khối lƣợng 1000 hạt mẫu giống đậu tƣơng vụ Xuân 2013 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.4 48 62 Phản ứng với bệnh gỉ sắt mẫu giống đậu tƣơng vật liệu mang gen kháng 64 4.8 Mẫu giống đậu tƣơng bố mẹ lai tạo có nơng sinh học tốt suất cao 66 4.9 Mẫu giống đậu tƣơng bố mẹ lai tạo kháng bệnh gỉ sắt 67 4.10 Phân ly kiểu gen kháng xác định thị phân tử hệ F2 70 4.11 Kết phân tích kiểu gen kháng thị phân tử kết hợp với đánh giá kiểu hình nhiễm bệnh nhân tạo quần thể phân ly F2 4.12 70 Một số kết xác định thị phân tử liên kết với gen kháng gỉ sắt đậu tƣơng đƣợc công bố 71 vii 4.13 Các tổ hợp lai đậu tƣơng đƣợc thiết lập vụ xuân 2013 xuân 2014 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.14 Kết chọn cá thể F2 tốt mang gen kháng từ tổ hợp lai Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm vụ Thu Đông 2013 4.15 77 Đặc điểm sinh trƣởng, phát triển chống chịu dòng chọn lọc Xuân 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.19 84 Đặc điểm nơng sinh học dịng đậu tƣơng triển vọng Hè 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.24 85 Năng suất yếu tố cấu thành dòng đậu tƣơng triển vọng Hè 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.26 84 Mức độ nhiễm sâu bệnh đồng ruộng dòng đậu tƣơng triển vọng Hè 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.25 82 Đặc điểm hình thái dịng đậu tƣơng triển vọng Hè 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.23 81 Đánh giá kiểu hình kháng bệnh gỉ sắt dòng đậu tƣơng triển vọng Hè 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.22 79 Kết kiểm tra lại gen mục tiêu dòng triển vọng hệ F7 vụ Hè 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.21 78 Năng suất yếu tố cấu thành dòng đậu tƣơng chọn lọc Xuân 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.20 75 Đặc điểm hình thái dịng đậu tƣơng chọn lọc vụ Xuân 2015 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 4.18 74 Kết chọn lọc vƣờn dòng đậu tƣơng kháng bệnh gỉ sắt hệ F5 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm vụ Thu Đông 2014 4.17 73 Kết chọn lọc vƣờn dòng đậu tƣơng kháng bệnh gỉ sắt hệ F3, F4 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm vụ Xuân Hè 2014 4.16 72 86 Một số đặc điểm giống đậu tƣơng Đ9 Đ10 vụ Thu Đông 2015 Xuân 2016 Viện Cây lƣơng thực Cây thực phẩm 87 4.27 Một số đặc điểm hình thái giống đậu tƣơng khảo nghiệm 88 4.28 Đặc điểm sinh trƣởng phát triển giống đậu tƣơng khảo nghiệm vụ đông 2015 xuân 2016 88 viii 155 Walker D.R., Boerma H.R and D.K Harris (2011) Evaluation of USDA soybean germplasm accessions for resistance to soybean rust in the southern United States Crop Science, 51: 678–93 156 Walker D.R., D.K Harris, Z.R King, Z Li, H.R Boerma, J.B Buckley, D.B Weaver, E.J Sikora, E.R Shipe, J.D Mueller, J.W Buck, R.W Schneider, J.J Marois, D.L Wright and R.L Nelson (2014) Evaluation of soybean germplasm accessions for resistance to Phakopsora pachyrhizi populations in the southeastern USA 2009-2012 Crop Sci, 54: 1673–1689 157 Yamanaka N., N.G Lemos and H Akamatsu (2010) Development of classification criteria for resistance to soybean rust and differences in virulence among Japanese and Brazilian rust populations Tropical Plant Pathology, 35: 153–162 158 Yamanaka N., N.G Lemos, M Uno, H Akamatsu, Y Yamaoka, R.V Abdelnoor, A.L Braccini and K Suenaga (2013) Resistance to Asian soybean rust in soybean lines with the pyramided three Rpp genes Crop Breed Appl Biotechnol, 13: 75–82 159 Yamanaka N., M Morishita, T Mori and N.G Lemos (2015) Multiple Rpp-gene pyramiding confers resistance to Asian soybean rust isolates that are virulent on each of the pyramided genes Tropical Plant Pathology, 40(5): 283–290 160 Yamaoka Y., F Yukiyoshi, K Makoto, K Keizo, Y Kengo and H Hiroshi (2002) Pathogenic races of Phakopsora pachyrhizi on soybean and wild host plants collected in Japan Journal of General Plant Pathology, 68: 152–166 161 Yamaoka Y., N Yamanaka, H Akamatsu and K Suenaga (2014) Pathogenic races of soybean rust Phakopsora pachyrhizi collected in Tsukuba and vicinity in Ibaraki, Japan Journal of General Plant Pathology, 80: 184–188 162 Yan J., X Yang, T Shah, J Li, M Warburton, Y Zhou, J.H Crouch and Y Xu (2009) High-through put SNP genotyping with the Golden Gate assay in maize Molecular Breeding, 25: 441–451 163 Yang W and D.M Francis (2005) Marker-assisted selection for combining resistance to bacterial spot and bacterial speck in tomato Journal of the American Society for Horticultural Science, 130(5): 716-721 164 Yeh C.C (1983) Physiological races of Phakopsora pachyrhizi in Taiwan Journal of Agricultural Research in China, 32: 69–74 165 Yong B F., W Gregory, Peterson and Malcolm (2007) Genetic diversity of Canadian Soybean Cultivars and Exotic Germplasm Revealed by SSR marker Crop Sicence, 47(5): 765 - 772 114 166 Yorinori J.T., W.M Paiva, R.D Frederick, L.M Costamilan, P.F Bertagnolli, G.E Hartman, C.V Godoy and J J Nunes (2005) Epidemics of soybean rust (Phakopsora pachyrhizi) in Brazil and Paraguay from 2001 to 2003 Plant Dis, 98: 675-677 167 Zhanglin C., T.E Carter, J.W Burton and W Randy (2000) Phenotypic Diversity of Modern Chinese and North American Soybean Cultivars Crop Sci, 41(6): 1954-1967 168 Zhou X, E Thomas, J.R Carter and Z Cui (2002) Genetic diversity patterns in Japanese soybean cultivars based on coefficent of Parentage Crop Sicence, 42: 123 – 131 115 PHỤ LỤC BẢNG Bảng Đặc điểm hình thái mẫu giống đậu tƣơng Xuân 2013 Stt Mẫu giống 10 11 12 13 15 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 OMDN112 PI647083 DT96 Parent Cúc BH nâu Nhƣ khê DT 95 MAC 01 Dòng OT OMDN29 PI647082 ĐT 26 PI647084 Dòng OT Dòng OT Cao Bằng U8325 C5C6 HL203 Dịng OT CLVR 64 104 Tím DT2001 HL07-5 HL07-2 DT2008 HL07-15 104 Trắng D43 Chandra DT90 ĐT2000 ĐVN12 DT2007 ĐVN11 Dạng TN Trứng TN Trứng Trứng TN Trứng TN TN Trứng TN Trứng TN Trứng Trứng Trứng TN Trứng TN Trứng TN Trứng TN TN Trứng Trứng TN Trứng Trứng TN Trứng Trứng Trứng TN Màu hoa Tím Tím Trắng Trắng Tím Trắng Tím Tím Tím Tím Trắng Trắng Trắng Tím Tím Trắng Trắng Tím Tím Trắng Tím Trắng Trắng Trắng Tím Trắng Trắng Tím Tím Trắng Trắng Tím Trắng Tím 116 Màu vỏ chín Xám Vàng Vàng Vàng Xám Vàng Xám Xám Xám Xám Xám Xám Xám Xám Xám Vàng Xám Xám Xám Xám Xám Xám Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Xám Xám Xám Vàng Vàng Màu hạt Vàng Vàng Vàng Vàng Nâu vàng Vàng Vàng Vàng Nâu Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Nâu Nâu Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Nâu Vàng Vàng Vàng Vàng Màu rốn hạt Đen Nâu Nâu Nâu Đen Nâu Nâu Vàng Đen Nâu Vàng Đen Vàng Đen Đen Nâu Nâu Đen Đen Vàng Nâu Nâu Vàng Vàng Vàng Nâu Nâu Nâu Vàng Nâu Nâu Nâu Nâu Vàng Kiểu sinh trƣởng HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH Stt Mẫu giống 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 LS16 Đ9804 LS14 Đ2501 ĐVN10 TL2901 Đ2101 TL2902 Đ2102 Đ8 ĐT92 Đ2601 TL7 ĐT20 AK03 ĐH4 VX-1 DT84 Nhất tiến HLLS DT99 M103 ĐT22 HLĐN1 HLĐN29 PI457023 L098-11 MTĐ750 Dòng 1-2 MTĐ652-5 PI200492 PI230970 PI462312 PI459025B PI200256 V74 ĐT12 Dạng TN Trứng TN Trứng TN Trứng Trứng Trứng Trứng Trứng TN Trứng Trứng Trứng Trứng TN Trứng Trứng Trứng TN Trứng Trứng Trứng Trứng Trứng Trứng TN Trứng TN Trứng TN Trứng Trứng Trứng Trứng Trứng Màu hoa Tím Trắng Tím Trắng Tím Tím Trắng Tím Trắng Tím Trắng Trắng Tím Trắng Tím Tím Tím Tím Tím Trắng Tím Trắng Tím Tím Tím Tím Trắng Trắng Trắng Trắng Trắng Tím Tím Tím Trắng Trắng Màu vỏ chín Vàng Xám Vàng Xám Xám Vàng Xám Vàng Xám Xám Vàng Xám Vàng Xám Xám Xám Vàng Xám Xám Xám Vàng Xám Xám Xám Vàng Vàng Xám Xám Vàng Xám Xám Vàng Xám Xám Xám Xám Ghi chú: TN: Trứng Nhọn; HH: Hữu Hạn 117 Màu hạt Vàng Nâu Vàng Nâu Vàng Vàng Nâu Vàng Nâu Vàng Vàng Nâu Nâu Nâu Vàng Vàng Vàng Nâu Nâu Nâu Vàng Nâu Vàng Vàng Vàng Vàng Nâu Nâu Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Vàng Màu rốn hạt Đen Nâu Đen Nâu Vàng Đen Nâu Nâu Nâu Nâu Vàng Nâu Vàng Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Đen Nâu Nâu Nâu Đen Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Nâu Kiểu sinh trƣởng HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH HH Bảng Đặc điểm sinh trƣởng phát triển mẫu giống đậu tƣơng Xuân 2013 Stt Mẫu giống OMDN112 PI647083 DT96 Parent Cúc BH nâu Nhƣ khê DT 95 MAC 01 Dòng OT 10 OMDN29 11 PI647082 12 ĐT 26 13 PI647084 14 Dòng OT 15 Dòng OT C.Bằng 16 U8325 17 C5C6 18 HL203 19 Dịng OT 20 CLVR64 21 104 Tím 22 DT 2001 23 HL07-5 24 HL07-2 25 DT2008 26 HL07-15 27 104 Trắng 28 D43 29 Chandra 30 DT90 31 ĐT2000 32 ĐVN12 33 DT2007 34 ĐVN11 35 LS16 36 Đ9804 37 LS14 38 Đ2105 39 ĐVN10 TG gieo – mọc 9 11 11 10 9 9 9 9 10 TG gieo – hoa 42 44 54 43 47 43 53 49 47 44 62 47 63 44 44 57 105 11 10 10 10 11 9 9 9 9 11 10 11 11 10 10 10 10 10 51 56 47 49 46 44 53 43 48 44 40 43 42 42 69 42 46 47 40 46 43 43 47 85 100 81 85 91 86 100 91 98 90 91 81 83 91 110 81 87 93 87 94 84 91 85 CC đóng (cm) 11,2 13,1 13,9 11,0 13,7 12,1 13,6 10,6 13,9 10,2 8,6 11,2 8,9 10,1 9,8 Số cành cấp (cành) 2,5 1,9 2,2 2,8 1,8 2,1 2,1 2,4 1,9 2,6 2,0 2,5 1,8 2,6 2,3 Đốt/ thân ( đốt) 15,5 13,5 12,5 10,8 14,1 14,5 14,3 10,7 13,6 13,0 11,6 12,9 10,7 13,8 11,9 Đƣờng kính thân (mm) 6,27 6,32 6,09 4,08 5,61 5,82 7,13 6,49 5,77 6,12 4,56 6,43 5,12 6,56 5,89 62,1 13,9 3,2 14,1 5,67 51,0 55,1 47,3 55,6 54,3 68,2 56,5 56,4 52,5 62,0 51,6 53,2 46,1 53,0 68,2 56,0 50,8 48,6 52,3 54,5 48,6 56,8 47,8 10,5 12,4 10,0 10,1 11,8 13,6 12,0 10,7 11,2 11,7 12,2 9,6 10,1 10,4 12,2 12,1 13,6 8,5 11,6 13,2 9,8 12,3 8,5 2,0 1,8 2,6 2,1 2,5 2,4 2,6 3,0 2,6 2,1 2,3 3,0 1,7 2,3 2,1 2,1 2,1 2,2 1,7 2,3 2,6 2,0 1,8 13,8 12,6 12,1 13,6 14,1 13,8 13,1 12,0 11,8 14,5 14,1 13,4 12,9 12,9 14,7 12,7 13,5 13,7 14,6 12,1 10,6 13,6 14,5 5,76 5,47 5,12 5,19 6,11 6,89 5,45 6,13 6,20 5,75 5,12 6,02 5,64 4,76 7,05 5,82 7,15 6,18 6, 56 6,32 5,25 6,02 5,16 CC Tổng thân TGST (ngày) (cm) 85 52,4 91 56,1 101 56,2 81 48,0 88 59,7 83 65,6 97 51,0 90 50,2 81 45,3 85 51,3 101 39,5 92 52,5 103 42,0 91 46,3 91 49,3 118 Stt Mẫu giống 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 TL2901 Đ2101 TL2902 Đ2102 Đ8 ĐT92 Đ2601 TL7 ĐT20 AK03 ĐH4 VX-1 DT84 N.Tiến HLLS DT99 M103 ĐT22 HLĐN1 HLDN29 PI457023 L098-11 MTĐ750 Dòng 1-2 MTĐ652-5 PI200492 PI230970 PI462312 PI459025B PI200256 V74 ĐT12 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 TG gieo – mọc 11 9 9 9 9 11 11 TG gieo – hoa 44 43 44 40 43 52 46 43 42 43 42 46 47 67 110 9 10 10 11 10 10 10 11 11 11 11 10 9 43 40 42 40 40 51 44 47 47 47 63 63 61 59 64 40 43 81 86 88 91 97 92 90 92 83 90 105 105 110 109 110 94 82 CC đóng (cm) 12,7 11,1 8,6 13,6 11,2 9,5 12,0 11,2 9,3 10,3 12,0 12,1 13,5 Số cành cấp (cành) 2,7 2,7 2,7 3,1 2,5 2,1 3,2 3,1 2,7 2,7 2,0 1,5 3,1 Đốt/ thân ( đốt) 13,7 15,3 13,5 11,4 11,6 10,5 15,1 15,2 12,4 10,9 15,5 10,5 15,1 Đƣờng kính thân (mm) 4,79 5,11 4,65 6,06 6,25 5,84 5,90 5,04 6,12 6,34 5,14 6,67 7,15 70,5 13,8 3,1 15,3 5,21 47,5 56,2 46,3 52,0 54,8 40,2 53,0 47,1 48,9 51,0 27,1 39,8 32,6 29,4 29,8 55,9 40,1 9,0 10,7 8,5 9,8 10,2 8,3 12,0 9,0 8,4 9,6 8,1 9,4 10,1 8,8 12,2 12,8 13,6 2,4 2,1 1,8 2,0 2,6 1,6 2,4 3,0 2,1 2,8 3,0 3, 2, 3,1 3,1 2,6 2,1 13,5 12,5 10,7 11,5 12,9 9,3 13,4 11,3 10,5 12,2 9,5 8,5 9,2 8,7 8,8 10,7 12,4 5,34 5,15 6,14 5,78 6,21 4,68 6,14 5,78 6,33 5,78 3,78 3,62 5,11 5,15 4,06 5,56 7,15 CC Tổng thân TGST (ngày) (cm) 83 55,1 90 56,8 85 42,1 83 51,3 85 52,4 103 43,8 83 55,0 87 58,6 89 48,5 82 52,1 87 55,7 93 55,1 85 66,5 119 Bảng Mức độ bị hại sâu bệnh mẫu giống đậu tƣơng Xuân 2013 Stt Mẫu giống 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 OMDN112 Dòng DT96 Parent Cúc BH nâu Nhƣ khê DT 95 MAC 01 Dòng OT OMDN29 PI647082 ĐT 26 PI647084 Dòng 4OT Dòng 3OT C Bằng U8325 C5C6 HL203 Dịng 2OT CLVR 64 104 Tím DT 2001 HL07-5 HL07-2 DT2008 HL07-15 104 Trắng D43 Chandra DT90 ĐT2000 ĐVN12 DT2007 ĐVN11 LS16 Đ9804 LS14 Sâu (%) Sâu đục (%) Lở cổ rễ (%) 3,15 5,50 3,85 4,40 5,28 6,36 6,07 3,66 6,76 5,50 6,15 3,17 3,60 5,50 4,40 6,50 6,00 5,20 5,50 6,15 3,82 4,17 3,60 5,50 6,15 2,51 4,40 3,82 2,85 2,58 5,25 6,37 6,00 6,15 4,67 3,82 4,40 1,75 2,21 2,05 3,30 4,50 2,13 1,30 1,87 2,67 2,05 3,25 2,90 2,75 3,00 1,85 3,56 2,05 2,50 2,80 2,13 3,10 1,87 1,60 2,48 2,05 1,75 3,10 4,00 2,05 2,75 2,50 2,13 1,30 2,15 2,21 3,12 4,10 3,99 5,45 5,80 5,60 6,67 3,2 3,75 1,50 6,80 4,85 5,10 5,45 3,20 2,35 6,15 3,34 2,10 2,55 3,20 2,36 4,15 3,42 3,25 4,10 5,15 6,05 4,30 5,10 6,11 4,40 4,70 4,08 6,53 5,15 3,10 3,25 5,20 120 Bệnh Sƣơng mai (điểm) 3 3 3 1 3 1 1 3 1 3 Bệnh gỉ sắt (điểm) Chống đổ (điểm) 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 3 1 4 3 1 1 1 Stt Mẫu giống 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 Đ2105 ĐVN10 TL 2901 Đ2101 TL2902 Đ2102 Đ8 ĐT92 Đ2601 TL7 ĐT20 AK03 ĐH4 VX-1 DT84 N Tiến HLLS DT99 M103 ĐT22 HLĐN1 HLĐN29 PI457023 L098-11 MTĐ750 Dòng 1-2 MTĐ652-5 PI200492 PI230970 PI462312 PI459025B PI200256 V74 ĐT12 Sâu (%) Sâu đục (%) Lở cổ rễ (%) 5,50 6,00 3,85 3,60 3,82 4,40 5,22 2,58 6,15 3,05 3,60 6,34 2,58 6,05 6,57 4,62 3,82 2,55 4,40 6,15 5,50 6,05 3,60 5,50 2,58 3,82 2,66 5,25 6,34 6,17 3,60 3,82 3,54 2,50 2,05 2,05 3,50 4,00 2,85 2,5 3,20 1,80 1,75 3,10 2,13 1,87 1,30 2,21 1,87 2,90 2,20 2,65 3,15 4,00 2,78 1,90 2,05 3,10 2,76 2,05 2,56 2,13 1,34 1,87 1,75 1,30 4,20 3,15 2,85 3,18 4,12 3,70 3,18 2,16 3,01 1,10 3,20 5,32 6,05 3,97 7,42 1,68 2,16 1,75 4,16 3,20 4,00 4,18 3,20 5,18 2,85 2,90 1,90 3,25 5,11 2,67 2,11 3,15 4,95 Bệnh Sƣơng mai (điểm) 1 3 3 1 1 1 3 1 1 3 Bệnh gỉ sắt (điểm) Chống đổ (điểm) 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 4 Ghi chú: Mức độ nhiễm sâu, bệnh hại đƣợc đánh giá đồng ruộng điều kiện tự nhiên 121 Bảng Năng suất yếu tố cấu thành suất mẫu giống đậu tƣơng Xuân 2013 Stt Mẫu giống 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 OMDN112 PI647083 DT96 Parent Cúc BH nâu Nhƣ khê DT 95 MAC 01 Dòng OT OMDN29 PI647082 ĐT26 PI647084 Dòng 4OT Dòng OT C Bằng U8325 C5C6 HL203 Dòng OT CLVR 64 104 Tím D2001 HL07-5 HL07-2 DT2008 HL07-15 104 Trắng D43 Chandra DT90 ĐT2000 ĐVN12 DT2007 ĐVN11 LS16 Đ9804 Tổng số quả/cây (quả) 22,6 25,2 29,3 19,1 24,7 25,0 24,5 38,3 28,6 36,3 17,2 45,7 25,0 11,8 22,9 35,9 19,9 29,2 28,3 42,4 37,7 37,1 30,3 26,4 32,2 39,7 12,1 26,5 24,7 29,4 35,5 25,2 21,8 32,5 12,8 41,7 Tỷ lệ (%) 73,5 89,6 92,0 79,6 82.3 69,8 92,6 82,6 71,1 90,4 80,2 91,4 86,1 90,9 81,1 80,2 91,5 90,1 83,5 80,5 90,8 70,1 80,2 90,6 90,1 91,3 80,1 83,2 82,8 91,1 90,1 82,7 90,2 80,7 81,1 91,1 122 Tỷ lệ hạt (%) 17,7 10,0 24,4 20,1 10,3 10,8 14,2 15,3 20,2 10,6 10,7 20,6 13,6 10,1 10,8 13,5 21,3 11,2 21,0 22,2 20,3 22,4 36,3 22,8 31,8 21,4 31,0 10,1 11,6 22,1 13,4 21,9 20,1 23,2 22,1 40,2 Tỷ lệ hạt (%) 11,7 18,4 10,0 8,3 17,0 14,9 14,3 21,1 17,0 16,8 10,7 16,0 11,1 5,3 15,2 18,7 14,0 16,0 16,5 14,9 17,6 9,9 20,0 22,1 14,5 15,4 6,9 15,4 15,5 9,0 20,5 6,8 14,3 13,4 6,9 12,1 M1000 hạt (g) Năng suất cá thể (g) 110 119 163 120 120 125 157 130 110 145 105 188 120 135 120 152 130 167 132 145 172 170 158 156 169 173 152 110 120 154 167 168 171 165 150 169 2,4 3,3 5,6 2,0 3,4 2,9 5,8 5,9 3,4 5,9 4,1 10,5 3,5 6,2 7,6 6,5 5, 6,4 7,6 6,5 6,9 6,6 8,5 6,2 6,3 10,0 7,6 6,9 3,2 5,9 8,2 4,5 7,0 6,8 6,6 11,6 Stt Mẫu giống 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 LS14 Đ2105 ĐVN10 TL 2901 Đ2101 TL2902 Đ2102 Đ8 ĐT92 Đ2601 TL7 ĐT20 AK03 ĐH4 VX-1 DT84 N Tiến HLLS DT99 M103 ĐT22 HLĐN1 HLĐN29 PI457023 L098-11 MTĐ750 Dòng 1-2 MTĐ652-5 PI200492 PI230970 PI462312 PI459025B PI200256 V74 ĐT12 Tổng số quả/cây (quả) 30,3 44,6 33,6 33,2 38,5 27,3 43,9 47,0 47,1 36,7 43,6 28,1 41,3 35,0 29,3 32,6 33,0 27,2 38,7 33,3 14,8 37,8 39,9 37,4 32,7 27,4 30,6 32,9 29,7 18,8 23,8 12,7 29,0 32,4 Tỷ lệ (%) 90,1 93,0 81,2 82,4 90,6 86,9 90,8 92,4 90,8 81,8 90,9 80,1 91,1 90,1 81,0 91,0 91,8 82,9 91,0 83,0 90,1 90,7 80,1 82,7 90,1 82,7 80,2 70,1 80,5 76,4 82,1 78,9 90,2 87,3 123 Tỷ lệ hạt (%) 12,6 41,3 21,4 11,1 40,4 24,8 31,4 41,0 24,3 30,1 40,7 21,0 41,7 31,1 23,0 41,5 12,0 20,4 41,3 20,8 21,1 26,3 11,1 21,6 18,4 21,0 16,7 5,2 13,3 13,5 6,4 10,9 21,7 30,1 Tỷ lệ hạt (%) 22,2 9,3 18,9 23,1 18,9 11,8 19,0 13,6 17,9 19,9 8,3 11,0 13,8 8,9 14,1 8,6 8,5 19,2 8,8 14,1 8,7 16,6 16,9 14,3 23,4 18,7 18,5 25,1 20,9 23,6 33,1 34,5 17,2 19,0 M1000 hạt (g) Năng suất cá thể (g) 140 176 171 134 170 135 160 185 162 169 173 163 165 165 157 185 130 164 162 165 157 169 126 132 132 132 125 130 114 110 156 132 155 166 8,0 11,0 8,2 7,2 10,9 6,7 7,4 10,7 9,3 8,6 11,4 5,8 10,3 9,2 6,8 10,2 4,7 6,4 11,9 4,2 8,2 8,9 6,3 6,6 8,3 3,2 7,6 4,4 4,6 3,3 6,7 4,3 8,4 7,5 PHỤ LỤC HÌNH ẢNH Vƣờn lai tạo giống đậu tƣơng Lây nhiễm nhân tạo chủng nấm gỉ sắt dòng đậu tƣơng triển vọng Xác định gen đậu tƣơng kháng bệnh gỉ sắt ứng dụng thị phân tử 124 Thí nghiệm đánh giá vƣờn dịng chọn Thí nghiệm so sánh dòng đậu tƣơng triển vọng vụ hè 2015 125 Dòng đậu tƣơng triển vọng VD1-2-1 (Đ9) Dòng đậu tƣơng triển vọng VD1-9-1 (Đ10) 126 Khảo nghiệm Quốc gia giống đậu tƣơng Đ9 Đ10 Khảo nghiệm sản xuất giống đậu tƣơng Đ10 127 KẾT QUẢ XỬ LÝ NĂNG SUẤT THỰC THU CÁC DÒNG TRIỂN VỌNG BALANCED ANOVA FOR VARIATE NSTT FILE DTKHOI 21/ 9/17 20:40 :PAGE VARIATE V003 NSTT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ================================================================ GIONG$ 13 138.291 10.6378 4.48 0.000 * RESIDUAL 28 66.5400 2.37643 -* TOTAL (CORRECTED) 41 204.831 4.99589 -TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE DTKHOI 21/ 9/17 20:40 :PAGE MEANS FOR EFFECT GIONG$ -GIONG$ VD1-1-1 VD1-1-2 VD1-2-1 VD1-2-2 VD1-3-1 VD1-3-7 VD1-4-4 VD1-9-1 VD1-10-1 VD1-10-3 VD1-10-4 VD1-12-2 VD1-13-2 DT84 NOS 3 3 3 3 3 3 3 NSTT 23.5000 22.4000 25.0000 18.9000 21.8000 25.1000 22.2000 25.8000 23.2000 21.8000 25.2000 22.2000 21.2000 22.5000 SE(N= 3) 0.890024 5%LSD 28DF 2.27820 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE DTKHOI 21/ 9/17 20:40 - :PAGE3 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE NSTT GRAND MEAN (N= 42) NO OBS 42 22.914 STANDARD DEVIATION C OF V |GIONG$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.2351 1.5416 9.4 0.0005 128 | | | |