Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.Nghiên cứu đa dạng sinh học của họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae tại khu bảo tồn thiên nhiên Copia và Vườn Quốc gia Xuân Sơn.BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI NGUYỄN ĐÌNH VIỆT NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG SINH HỌC CỦA HỌ NẤM TÚI CLAVICIPITACEAE, CORDYCIPITACEAE, OPHIOCORDYCIPITACEAE TẠI K.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI NGUYỄN ĐÌNH VIỆT NGHIÊN CỨU ĐA DẠNG SINH HỌC CỦA HỌ NẤM TÚI CLAVICIPITACEAE, CORDYCIPITACEAE, OPHIOCORDYCIPITACEAE TẠI KHU BẢO TỒN THIÊN NHIÊN COPIA VÀ VƢỜN QUỐC GIA XUÂN SƠN Chuyên ngành: Vi sinh vật Mã số: 9.42.01.07 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Hà Nội - 2023 Công trình hồn thành tại: TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS TS Dƣơng Minh Lam GS.TS Trƣơng Xuân Lam Phản biện 1: PGS TS Dƣơng Văn Hợp Đại học Quốc Gia Hà Nội Phản biện 2: PGS TS Khuất Hữu Trung Viện Di Truyền Nông Nghiệp Phản biện 3: PGS TS Bùi Thị Việt Hà Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Trường họp Trường Đại học Sư phạm Hà Nội vào hồi … … ngày … tháng… năm 2023 MỞ ĐẦU Nấm ký sinh côn trùng dùng để lồi nấm lây nhiễm, ký sinh, gây hại tiêu diệt ký chủ côn trùng Nhóm nấm ký sinh trùng có tính đa dạng sinh học cao, có mặt ngành nấm Nhưng đa dạng họ nấm Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae Hypocreales, ngành nấm túi Ascomycota Hiện họ nấm Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae ghi nhận có 99 chi với 1468 loài ký sinh thực vật, nấm, luân trùng, động vật; 40 chi 1092 loài nấm ký sinh đối tượng côn trùng Dù lịch sử nghiên cứu 120 năm nhóm nấm ký sinh côn trùng Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae thu hút quan tâm ý nhiều nhà khoa học giới dạng sinh học tiềm ứng dụng Tại Việt Nam nơi có điều kiện khí hậu nhiệt đới gió mùa, đa dạng động, thực vật Các điều kiện tự nhiên phù hợp cho sinh trưởng phát triển loài nấm Tuy nhiên, nghiên cứu nấm ký sinh trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae cịn Phần lớn nghiên cứu tiến hành theo hướng nghiên cứu đa dạng thành phần loài dựa phân loại hình thái, nghiên cứu ứng dụng nấm ký sinh côn trùng nông nghiệp, y dược Tập hợp cơng trình nghiên cứu tính đến năm 2022 Việt Nam đ cơng bố 16 chi, 82 lồi nấm túi ký sinh côn trùng thuộc họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae với số nghiên cứu tại: Vườn Quốc gia (VQG) Tam Đảo, VQG Pù Mát, VQG Hoàng Liên, VQG Cát Tiên, Tây Nguyên; Mặc dù năm gần đây, đ có thêm nhiều cơng trình nghiên cứu nấm túi ký sinh côn trùng liệu Việt Nam nhóm nấm cịn Khu Bảo tồn thiên nhiên (KBTTN) Copia, tỉnh Sơn La Vườn Quốc Gia (VQG) Xuân Sơn, tỉnh Phú Thọ hai khu rừng có tổng diện tích lớn, có nhiều đỉnh núi cao Ngoài nghiên cứu Nguyễn Thị Thuỳ Vân nấm ký sinh trùng có khả sinh tổng hợp CODs, chưa có cơng trình nghiên cứu đa dạng sinh học của nấm túi ký sinh côn trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae công bố Xuất phát từ lý trên, đ tiến hành nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu đa dạng sinh học họ nấm túi Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae khu bảo tồn thiên nhiên Copia Vƣờn Quốc gia Xuân Sơn” Mục tiêu nghiên cứu Đánh giá mức độ đa dạng sinh học nấm túi họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae KBTTN Copia VQG Xuân Sơn, Phú Thọ Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu - Đối tượng: Các loài nấm túi họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae ký sinh côn trùng nhện - Phạm vi nghiên cứu: KBTTN Copia - Sơn La VQ Xuân Sơn - Phú Thọ Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu đa dạng hình thái định loại tới lồi dựa so sánh hình thái sinh học phân tử - Nghiên cứu mối quan hệ di truyền loài, chi 03 họ nấm nghiên cứu dựa phân tích trình tự ITS, LSU, RPB1 - Đánh giá tính đa dạng sinh học nấm túi họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae KVNC Những đóng góp luận án - Danh sách 33 taxon nấm túi ký sinh côn trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae KBTTN Copia, huyện Thuận Châu, tỉnh Sơn La VQ Xuân Sơn, tỉnh Phú Thọ Bản sở liệu miêu tả hình ảnh, mẫu vật trình tự đoạn gene taxon tìm thấy khu vực nghiên cứu; - Đề tài đ định danh 25 loài nấm, bổ sung loài ghi nhận Việt Nam (Ophiocordyceps campes, Ophiocordyceps xuansonae, O multiperitheciata, Cordyceps bassiana, C cicada, Isaria fumosorosea, Lecanicillium kalimantanense, Leptobacillium leptobactrum, Metacordyceps yongmunensis), loài cho khoa học Ophiocordyceps xuansonae, chủng xác định đến chi chi nấm ký sinh côn trùng Simplicillium, Leptobacillium ghi nhận Việt Nam - Đề tài đ đánh giá ảnh hưởng điều kiện sinh thái đến số lượng, phân bố loài nấm VQ Xuân Sơn Copia Cấu trúc luận án Luận án gồm 148 trang, bao gồm phần sau: Mở đầu: trang Chương Tổng quan vấn đề nghiên cứu: 36 trang Chương Nguyên vật liệu phương pháp nghiên cứu: 13 trang Chương Kết Thảo luận: 93 trang Kết luận Kiến nghị: trang Tài liệu tham khảo: Luận án tham khảo 25 tài liệu tiếng Việt, 189 tài liệu tiếng nước ngoài, 06 trang Web Phụ lục: Luận án có phụ lục kết thu mẫu phân tích số đa dạng khu vực nghiên cứu 4 Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Trong chương này, vấn đề liên quan đến nghiên cứu luận án đ tổng quan Đó là: (1.1) Đa dạng hệ thống phân loại nấm nấm ký sinh côn trùng; (1.2) Tình hình nghiên cứu lồi nấm ký sinh côn trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae giới; (1.3) Nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae Việt Nam; (1.4) Đặc điểm khu vực nghiên cứu Trong phần (1.1) Đa dạng hệ thống phân loại nấm nấm ký sinh côn trùng giới thiệu giới nấm nấm ký sinh côn trùng (mục 1.1.1), vai trị Vai trị hình thái, sinh học phân tử hóa học định loại nấm túi, nấm côn trùng (mục 1.1.2) đ trình bày từ trang đến trang 12 Trong phần (1.2) tình hình nghiên cứu lồi nấm ký sinh côn trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae giới, nội dung nghiên cứu vị trí phân loại số lượng chi, loài họ nấm Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae (mục 1.2.1) Đặc điểm hình thái nấm túi ký sinh côn trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae (mục 1.2.2) Các đặc điểm sinh thái nấm túi họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae (mục 1.2.3) Cá h p h t h h tá h hi t t n m t i h Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae (mục 1.2.4) Nghiên cứu đa dạng nấm ký sinh côn trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae giới (mục 1.2.5) trình bày cụ thể từ trang 11 đến trang 34 Trong phần (1.3) nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae Việt Nam, hướng nghiên cứu Việt Nam trình bày từ trang 34 đến trang 38 Phần (1.4) đặc điểm khu vực nghiên cứu gồm phần đặc điểm khu bảo tồn thiên nhiên Copia Vườn Quốc gia Xuân Sơn trình bày từ trang 38 đến trang 40 5 Chƣơng 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Trong chương vật liệu nghiên cứu trình bày mục (2.1), gồm có nội dung: vật liệu nghiên cứu, dụng cụ thiết bị, loại môi trường sử dụng nghiên cứu đ trình bày Các phương pháp nghiên cứu (mục 2.2) chia thành phương pháp sau: 2.2.1 Cá ph ơng pháp nghiên ứu thự ị 2.2.1.1 Ph ơng pháp phân hi sinh ảnh r ng 2.2.1.2 Ph ơng pháp phân hi ộ o nghiên ứu 2.2.1.3 Cá n thu mẫu KVNC 2.2.1.4 Ph ơng pháp thu thập xử lý mẫu 2.2.2 Cá ph ơng pháp vi sinh 2.2.2.1 Ph ơng pháp phân lập n m 2.2.2.2 Ph ơng pháp bảo quản hủng giống 2.2.2.3 Ph ơng pháp bảo quản mẫu vật 2.2.2.4 Ph ơng pháp nuôi y thu sinh khối 2.2.2.5 Ph ơng pháp nuôi y n m l m kính 2.2.2.6 Ph ơng pháp phân tí h ặ iểm hình thái, ịnh loại mẫu 2.2.3 Ph ơng pháp sinh h phân tử 2.2.3.1 Tách DNA 2.2.3.2 Phản ứng PCR 2.2.3.3 Phân tí h trình tự DNA xây dựng ây phát sinh lồi 2.2.4 Cá ơng thứ tốn h 2.2.5 Sơ nghiên ứu tổng quát luận án Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Đa dạng chủng nấm nấm túi họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae KVNC 3.1.1 Phân lập định danh nấm ký sinh côn trùng Trong thời gian từ tháng 12 năm 2015 đến tháng 12 năm 2019 đ tiến hành 57 lần thu mẫu, có 35 lần thu mẫu KBTTN Copia 22 lần VQ Xuân Sơn Từ 1881 mẫu thu thực địa đạt tiêu chu n cho nghiên cứu đ định danh 13 chi nấm, phân lập 120 chủng nấm để sử dụng cho phân tích hình thái, 41 chủng nấm sử dụng nghiên cứu sinh học phân tử giúp xác định mối quan hệ di truyền taxon h trợ định loại đến lồi 3.1.2 Đặc điểm hình thái số loài nấm họ Ophiocordycipitaceae, Cordycipitaceae, Clavicipitaceae ghi nhận Việt Nam Từ 1881 mẫu vật thu thực địa đ phân lập 120 chủng nấm, phân tích đặc điểm hình thái đ định danh 13 chi nấm Trong họ Ophiocordycipitaceae có lồi chi (Ophiocordyceps campes, Ophiocordyceps sphecocephala, Ophiocordyceps nutans, Ophiocordyceps pseudolloydii, Ophiocordyceps unilateralis, Ophiocordyceps myrmecophila, Purpureocillium lilacinum), họ Cordycipitaceae có 10 loài chi (Cordyceps bassiana, Cordyceps cicada, Cordyceps militaris, Cordyceps takaomontana, Beauveria bassiana, Isaria fumosorosea, Isaria amoene-rosea, Isaria tenuipes, Isaria cicadae, Gibellula pulchra), họ Clavicipitaceae có lồi chi (Metacordyceps yongmunensis, Metarhizium anisopliae, Conoideocrella luteorostrata, Hypocrella calendulina) 3.1.3 Đặc điểm hình thái taxon chưa định loại Có 13 chủng nấm xác định đến chi gồm: Ophiocordyceps sp.1, Ophiocordyceps sp.13, Ophiocordyceps sp.2, Ophiocordyceps sp.3, Cordyceps sp.4, Cordyceps sp.5, Cordyceps sp.7, Isaria sp.6, Isaria sp.8, Simplicillium sp.9, Lecanicillium sp.10, Leptobacillium sp.11, Hypocrella sp.12 3.1.4 hận x t chung v đặc điểm hình thái cấu tr c hiển vi nấm t i họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae Trong trình thu thập phân tích mẫu KVNC đề tài đ rút số nhận x t đặc điểm hình thái cấu trúc hiển vi họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae sau: Nơi xu t ký hủ; Vị trí xu t h t nền; Kí h th ủ h t nền; Màu sắ ủ h t nền; Về hình dạng h t nền; Về vị trí xu t thể quả; Hình dạng thể quả; T i bào tử (As i), bào tử t i (As ospores) 3.2 Mối quan hệ di truyền loài nấm túi họ Clavicipitaceae, Cordycipitaceae, Ophiocordycipitaceae KVNC 3.2.1 ối quan h di tru n taxon họ Cordycipitaceae Phát sinh loài dựa đoạn DNA, đ xác định taxon Beauveria bassiana XS39, Beauveria bassiana XS35, Beauveria bassiana CPA66 chi nấm Beauveria; Isaria cicadae XS56, Isaria cicadae CPA60, Isaria amoene-rosea CPA44, Isaria fumosorosea XS69, Isaria tenuipes XS26, Isaria amoene-rosea CPA44, Isaria sp.6, Isaria sp.8 chi nấm Isaria; loài Gibellula pulchra XS100 chi nấm Gibellula, Cordyceps bassiana CPA13, Cordyceps cicadae CPA80, Cordyceps militaris CPA70, Cordyceps takaomontana CPA61, Cordyceps takaomontana XS76, Cordyceps sp.5, Cordyceps sp.7, Cordyceps sp.4 chi nấm Cordyceps, Leptobacillium leptobactrum chi Leptobacillium, Lecanicillium kalimantanense chi Lecanicillium, Simplicillium sp.9 chi Simplicillium thuộc họ Cordycipitaceae 3.2.2 ối quan h di tru n taxon chi Ophiocordyceps, Purpureocillium họ Ophiocordycipitaceae Phân tích đặc điểm hình thái phân tích phát sinh lồi đ xác định tên loài Ophiocordyceps sphecocephala XS78, Ophiocordyceps nutans CPA50, Ophiocordyceps nutans XS58, Ophiocordyceps campes CPA51, Ophiocordyceps pseudolloydii XS65, Ophiocordyceps unilateralis XS70, Ophiocordyceps xuansonae XS154, Purpureocillium lilacinum XS77, Purpureocillium lilacinum CPA7; Các mẫu CPAV2, CPAV3 trạng thái vơ tính hữu tính lồi O multiperithecia taxon chưa xác định đến tên loài Ophiocordyceps sp.2, thuộc họ Ophiocordycipitaceae 3.2.3 ối quan h di tru n taxon họ Clavicipitaceae Phân tích đặc điểm hình thái phân tích phát sinh lồi đ xác định taxon Hypocrella calendulina XS147, Hypocrella sp.12, Conoideocrella luteorostrata XS18, Metacordyceps yongmunensis XS155, Metarhizium anisopliae XS68 thuộc họ nấm Clavicipitaceae 8 3.2.4 Danh lục taxon nấm t i họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae khu vực nghiên cứu Bảng 3.2 Danh lục taxon họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae hu vực nghiên cứu Số lƣợng mẫu STT Tên loài Xuân Copia Sơn Họ Ophiocordycipitaceae G.H.Sung, J.M.Sung, Hywel-Jones & Spatafora (2007) Chi Ophiocordyceps Petch (1931) Ophiocordyceps sphecocephala (Klotzsch ex Berk.) 478 G.H Sung, J.M Sung, Hywel-Jones & Spatafora 2007 Ophiocordyceps nutans (Pat.) G.H Sung, J.M Sung, 52 Hywel-Jones & Spatafora Ophiocordyceps pseudolloydii (H.C Evans & Samson) G.H Sung, J.M Sung, Hywel-Jones & Spatafora 2007 Ophiocordyceps unilateralis (Tul & C Tul.) Petch Ophiocordyceps campes Tasan, Thanakitp & Luangsa1 ard (2020)* Ophiocordyceps myrmecophila (Ces.) G.H Sung, J.M 10 Sung, Hywel-Jones & Spatafora 2007 O multiperitheciata* 10 Ophiocordyceps sp 10 Ophiocordyceps xuansonae** Chi Purpureocillium Luangsa-ard, Hywel-Jones, Houbraken & Samson (2011) 10 Purpureocillium lilacinum (Thom) Luangsa-ard, 51 135 Houbraken, Hywel-Jones & Samson Họ Cordycipitaceae Kreisel ex G.H.Sung, J.M.Sung, Hywel-Jones & Spatafora (2007) Chi Beauveria Vuill (1912) 194 38 11 Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vuill 1912 Chi Cordyceps Fr., 12 Cordyceps bassiana Z.Z Li, C.R Li, B Huang & M.Z Fan 2001* 13 Cordyceps cicada (Miq.) Massee* 14 15 Cordyceps militaris (L.) Fr Cordyceps takaomontana Yakush & Kumaz 42 27 50 STT 16 17 18 Tên loài Cordyceps sp.4 Cordyceps sp.5 Cordyceps sp.7 Số lƣợng mẫu Xuân Copia Sơn 15 Chi Gibellula 19 Gibellula pulchra (Sacc.) Cavara Chi Isaria Persoon in Roemer, 1794 30 20 Isaria amoene-rosea Henn 1902 30 45 21 Isaria cicadae Miq 1838 18 22 Isaria fumosorosea Wize 1904 * 395 111 23 Isaria tenuipes Peck 1878 24 Isaria sp.6 25 Isaria sp.8 Chi Simplicillium W Gams & Zare, Nova Hedwigia 73(1-2): 38 (2001) 26 Simplicillium sp.9 Chi Lecanicillium W.Gams & Zare (2001) 27 Lecanicillium kalimantanense* Chi Leptobacillium 28 Leptobacillium leptobactrum* Họ Clavicipitaceae (Lindau) Earle (1901) Chi Metarhizium Sorokīn, 1879 29 Metarhizium anisopliae (Metschn.) Sorokīn Chi Metacordyceps G.H.Sung, J.M.Sung, Hywel-Jones & Spatafora (2007) 30 Metacordyceps yongmunensis G.H Sung, J.M Sung & Spatafora, in Sung, Hywel-Jones, Sung, Luangsa-ard, Shrestha & Spatafora, (2007)* Chi Hypocrella Sacc., 1878 31 Hypocrella calendulina Hywel-Jones & Mongkols 85 Mycol (2009) 10 32 Hypocrella sp.12 Chi Conoideocrella 33 Conoideocrella luteorostrata (Zimm.) D Johnson, G.H Sung, Hywel-Jones & Spatafora (2009) 834 1047 Tổng số mẫu 15 25 Tổng số taxon Ghi chú: * Loài ghi nhận ho Việt N m ** Loài 10 3.2.5 Ghi nhận cho khu h nấm i t am Trong nghiên cứu này, ghi nhận thêm chi lần tìm thấy Việt Nam Leptobacillium Zare & W Gams; Simplicillium W Gams & Zare; Kết đ đưa tổng số chi họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae tìm thấy Việt Nam lên 19 chi (Bảng 3.2) Có Lồi ghi nhận cho Việt Nam: Ophiocordyceps campes, O multiperitheciata, Ophiocordyceps xuansonae, Cordyceps bassiana, C cicada, Isaria fumosorosea, Lecanicillium kalimantanense, Leptobacillium leptobactrum, Metacordyceps yongmunensis 3.3 Đa dạng sinh thái nấm túi họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae KVNC 3.3.1 Đa dạng taxon họ nấm Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae Kết số lượng tỉ lệ phần trăm taxon chi họ nấm Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae khu vực nghiên cứu thể Bảng 3.4 Kết nghiên cứu (Bảng 3.2, 3.4) xác định có chi Purpureocillium, Beauveria, Leptobacillium, Lecanicillium, Gibellula, Conoideocrella, Metacordyceps, Metarhizium có taxon chiếm 3,03 ; Chi Hypocrella có taxon chiếm 6,06 , chi Cordyceps có taxon chiếm 21,21 , chi Isaria có taxon chiếm 18,18 , chi Ophiocordyceps có taxon chiếm 27,27 o sánh với nghiên cứu v nấm ký sinh côn trùng i t am So sánh số lượng loài 13 chi nấm họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae KVNC nghiên cứu VQ Tam Đảo, VQ Cát Tiên, VQ Pù Mát, VQ Hoàng Liên, VQ Chư Yang Sin, Núi Langbian - Đà Lạt, KBTTN Mường Phăng, VQ Cát Tiên (Bảng 3.5) o sánh số lượng loài với nghiên cứu số vùng khu vực có điều kiện khí hậu, địa hình tương đồng với KVNC họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae (Bảng 3.6) Mặc dù thời gian phạm vi nghiên cứu so với công bố khu vực Đông Nam khu vực khác giới kết nghiên cứu chúng tơi hồn tồn phù hợp với nghiên cứu trước Kết thu KVNC lần 11 đ xác định mức độ đa dạng cao loài nấm túi ký sinh côn trùng khu vực Châu Ngoài ra, kết nghiên cứu đ xác định chi Cordyceps, Ophiocordyceps có số lượng lồi cao nhất, tiếp chi nấm Hypocrella, Metarhizium Điều hoàn toàn phù hợp với kết nghiên cứu vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới giới 3.3.2 Đa dạng sinh học loài Kết số đa dạng sinh học thể bảng 3.7 Bảng STT 10 11 12 13 h số đa dạng sinh học chi Số lƣợng TÊN KHOA HỌC Số mẫu Ch số (H ) taxon Ophiocordycipitaceae G.H Sung et al Ophiocordyceps 574 0,56 Purpureocillium 186 0,23 Cordycipitaceae Kreisel ex G.M Sung et al Beauveria 232 0,26 Cordyceps 145 0,29 Gibellula 1 0,004 Isaria 631 0.53 Lecanicillium 1 0,004 Simplicillium 1 0,004 Leptobacillium 1 0,004 Clavicipitaceae (Lindau) Earle ex Rogerson Hypocrella 95 0,17 Conoideocrella 0,02 Metarhizium 0.013 Metacordyceps 0.0073 Tổng 1881 33 Ghi ch : H số đa dạng Shannon Ch số (Cd) 0,0657 0,0098 0,0152 0,0021 0,0000003 0.074 0,0000003 0,0000003 0,0000003 0,0021 0,00002 0.000005 0.000001 Cd số mức độ chiếm ưu Như vậy, kết đa dạng sinh học bảng 3.7 hoàn toàn phù hợp với mức độ đa dạng cơng bố giới (Bảng 3.6) Ngồi ra, kết lần kh ng định khả phân bố rộng loài Ophiocordyceps, Cordyceps, Beauveria, Purpureocillium, Hypocrella đa dạng sinh học KVNC xuất chi nấm Leptobacillium, Simplicillium, Lecanicillium 12 3.3.3 Đa dạng sinh học theo Trong trình nghiên cứu từ tháng 12 năm 2015 – 6/2019 đề tài đ thu 1881 mẫu nấm ký sinh côn trùng họ Cordycipitaceae, Clavicipitaceae, Ophiocordycipitaceae có 834 mẫu thu KBTTN Copia, 1047 mẫu thu VQ Xuân Sơn Đa dạng sinh học đánh giá số: fi - T lệ phần trăm xuất mẫu (loài), số đa dạng loài Shannon (H ), số mức độ chiếm ưu (Cd) số đánh giá mức độ tương đồng loài điểm thu mẫu (SI) Kết số đa dạng thể (Bảng 3.8 Bảng 4.7 - 4.12PL8) Copia: chi Isaria (fi=54,56), Beauveria (fi=23,26), Cordyceps (fi=13,43), chi Purpureocillium (fi = 6,12), Ophiocordyceps (fi = 2,64) H = 1.66, Cd= 0.291 Xuân Sơn: chi Ophiocordyceps (fi = 52,72), chi Isaria (fi = 16,81), chi Purpureocillium (fi = 12,89), chi Beauveria (fi = 3,63), chi Cordyceps (fi = 3,15), Hypocrella (fi = 9,07), Conoideocrella (fi = 0,76), Metarhizium (fi = 0,38), Metacordyceps (fi = 0,19), chi Gibellula, Simplicillium, Leptobacillium, Lecanicillium có fi = 0,10 H = 1,91, Cd= 0,25 3.3.4 Đa dạng theo mùa Tại KBTTN Copia kết thu mẫu thời gian từ tháng 12 năm 2015 đến tháng năm 2019, thể bảng số liệu (Bảng 4.7PL4, 4.8PL4) với 834 mẫu nấm 15 taxon, có 707/834 mẫu có trạng thái sinh sản vơ tính 127/834 mẫu nấm có trạng thái sinh sản hữu tính Về số l ng mẫu thu, trạng thái sinh sản hữu tính vơ tính ủ taxon năm thể hình 3.34 bảng 4.7PL4: 13 Hình 3.34 ố lượng mẫu thu từ năm 2015 đến năm 2019 opia Số l ng mẫu thu ủ tháng năm thể hình 3.35 bảng 4.8 – PL4: Hình 3.35 ố lượng mẫu thu tháng năm opia Tại VQ Xuân Sơn kết thể qua bảng 4.9.PL4, 4.10.PL4 với thời gian thu mẫu vào năm 2017, năm 2018, tháng năm 2019 Số lượng mẫu thu 1047 mẫu, 682 mẫu nấm có trạng thái sinh sản vơ tính, 365 mẫu nấm có trạng thái sinh sản hữu tính Về số l ng mẫu thu, trạng thái hữu tính vơ tính ủ taxon năm thể bảng 4.9.PL4 hình 3.36: 14 Hình 3.36 Số lượng mẫu thu từ năm 2017 đến năm 2019 Xuân Sơn Số l 4.11.PL4: ng mẫu ủ tháng thể hình 3.37 bảng 4.10.PL4, Hình 3.37 Số lượng mẫu thu tháng năm Xuân Sơn 3.3.5 Ảnh hư ng sinh cảnh đến đến đa dạng taxon Kết nghiên cứu số lượng mẫu thu chi sinh cảnh thể qua bảng 3.9, bảng 4.12PL4 15 Bảng 3.9 Ảnh hư ng sinh cảnh đến đa dạng taxon Tên chi Ophiocordyceps Purpureocillium Beauveria Cordyceps Gibellula Isaria Simplicillium Lecanicillium Leptobacillium Hypocrella Conoideocrella Metarhizium Metacordyceps Tổng số t xon ủ sinh ảnh Tổng số mẫu thu Tỷ lệ % Chỉ số H' Chỉ số Cd ố lượng fi mẫu 22 1.17 115 55 6.11 2.93 11 0.58 10 Dạng sinh cảnh ố ố ố ố lượng fi lượng fi lượng fi lượng fi mẫu mẫu mẫu mẫu 0 0 411 21.84 141 7.49 574 51 2.71 120 6.38 15 0.8 186 12 0.64 67 3.56 28 1.49 10 0.53 232 0 57 3.03 29 1.55 0.21 145 0.05 0 444 23.59 152 8.08 24 1.28 631 0.05 1 0.05 1 0.05 40 2.13 55 2.92 95 0.43 0.21 0.11 22 10 203 12 619 798 249 1881 10.79 0.38 0.005 0.64 0.03 0.00004 32.91 0.8 0.045 42.42 1.16 0.046 13.24 0.49 0.005 100 Ghi chú: (1) - R ng tự nhiên KBTTN Copi ; (2) - N ơng rẫy KBTTN Copia; (3) - R ng phụ hồi s u háy KBTTN Copi ; (4) - R ng tự nhiên n i t Xuân Sơn; (5) - R ng tự nhiên n i vôi Xuân Sơn; (6) Tổng số mẫu thu KBTTN Copi Xuân Sơn 3.3.6 Đa dạng v ếu tố độ cao nấm ký sinh côn trùng họ Bảng 3.10 Đa dạng taxon theo ếu tố độ cao Độ cao thu mẫu STT Tên taxon (1) (2) (3) (4) (6) Số lƣợng mẫu thu đƣợc Ophiocordyceps sphecocephala 149 215 82 32 478 Ophiocordyceps nutans 41 10 61 16 Độ cao thu mẫu STT Tên taxon (1) (2) (3) (4) (6) Số lƣợng mẫu thu đƣợc Ophiocordyceps pseudolloydii 1 Ophiocordyceps unilateralis 1 Ophiocordyceps campes 1 Ophiocordyceps myrmecophila 10 10 O.multiperitheciata 2 Ophiocordyceps sp.2 10 10 Ophiocordyceps xuansonae 10 10 10 Purpureocillium lilacinum 11 Beauveria bassiana 12 Cordyceps bassiana 13 Cordyceps cicada 14 Cordyceps militaris 15 Cordyceps takaomontana 16 Cordyceps sp.4 17 Cordyceps sp.5 2 18 Cordyceps sp.7 1 19 Gibellula pulchra 20 Isaria amoene-rosea 21 Isaria cicadae 22 Isaria fumosorosea 23 Isaria tenuipes 10 24 Isaria sp.6 25 Isaria sp.8 26 Simplicillium sp.9 1 27 Lecanicillium kalimantanense 1 28 Leptobacillium leptobactrum 1 29 Metacordyceps yongmunensis 75 50 50 11 186 14 55 163 232 1 27 42 69 50 15 15 45 41 50 30 30 30 75 18 18 112 343 506 1 2 17 Độ cao thu mẫu STT Tên taxon (1) (2) (3) (4) (6) Số lƣợng mẫu thu đƣợc 30 Metarhizium anisopliae 4 31 Hypocrella sp.12 10 10 32 Hypocrella calendulina 80 85 33 Conoideocrella luteorostrata 5 Tổng số taxon 11 14 13 14 Tổng số mẫu 286 504 450 641 Tỷ lệ % 15.2 26.79 23.92 34.08 Ch số H 0.48 0.85 0.85 0.84 Ch số Cd 0.01 0.02 0.01 0.04 1881 Ghi chú: (1) - 100 < Độ cao