Luận văn nghiên cứu khả năng nhân nhanh loài lan hài bóng (paphiopedilum vietnamense) bằng phương pháp in vitro

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - HOÀNG THỊ HẠNH Tên đề tài NGHIÊN CƢ́U KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LỒI LAN HÀI BĨNG (Paphiopedilum vietnamense) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hê ̣ đào ta ̣o : Chính quy Chuyên ngành : Công nghê ̣ sinh ho ̣c Khoa : CNSH-CNTP Khoá học : 2013-2017 Thái Nguyên, năm 207 c ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - HOÀNG THỊ HẠNH Tên đề tài NGHIÊN CƢ́U KHẢ NĂNG NHÂN NHANH LỒI LAN HÀI BĨNG (Paphiopedilum vietnamense) BẰNG PHƢƠNG PHÁP IN VITRO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hê ̣ đào ta ̣o : Chính quy Chuyên ngành : Công nghê ̣ sinh ho ̣c Khoa : CNSH-CNTP Khoá học : 2013-2017 Giảng viên hƣớng dẫn 1: GS TS Ngô Xuân Bình Giảng viên hƣớng dẫn 2: ThS Nguyễn Thi Ti ̣ n ̀ h Thái Nguyên, năm 2017 c i LỜI CẢM ƠN Đƣợc sự đồng ý của Ban giám hiệu nhà trƣờng , Ban chủ nhiê ̣m khoa Công nghê ̣ sinh ho ̣c và Công nghê ̣ thƣ̣c phẩ m, thời gian thƣ̣c tâ ̣p tố t nghiê ̣p em đã thƣ̣c hiê ̣n đề tài : “Nghiên cứu khả nhân nhanh lồi lan Hài Bóng (Paphiopedilum vietnamense) phƣơng pháp in vitro ” Trang đầ u tiên của khoá luâ ̣n này em xin gƣ̉i lời cảm ơn tớ i Ban giám hiê ̣u nhà trƣờng , Ban chủ nhiê ̣m khoa Công nghê ̣ Sinh ho ̣c và Công nghê ̣ Thƣ̣c phẩ m cùng các thầ y cô giáo Khoa đã ta ̣o điề u kiê ̣n thuâ ̣n lơ ̣i cho em hoàn thành đề tài nghiên cứu này Đặc biệt, em xin bày tỏ l òng biết ơn sâu sắc , em xin gƣ̉i lời cảm ơn chân thành tới thầy giáo GS TS Ngơ Xn Bình và giáo ThS Ngũn Th ị Tình, giảng viên khoa Cơng nghê ̣ Sinh ho ̣c và Công nghê ̣ Thƣ̣c phẩ m đã tâ ̣n tình chỉ bảo , giúp đỡ và hƣớng dẫn em thời gian thƣ̣c hiê ̣n đề tài Đồng thời, em xin cám ơn tha ̣c si ̃ Ma Thi ̣Hoàn giúp đỡ và tạo điều kiện tốt nhấ t cho em ś t quá trình thƣ̣c tâ ̣p tớ t nghiê ̣p Cuố i cùng , em xin cảm ơn gia đin ̀ h đã ta ̣o điề u kiê ̣n vâ ̣t chấ t và là chỗ dƣ̣a tinh thầ n cho em suố t thời gian thƣ̣c tâ ̣p , cảm ơn bạn bè hết lòng động viên, giúp đỡ suốt thời gian qua Trong quá trình thƣ̣c tâ ,̣p cũng nhƣ là quá trình làm báo cáo thực tập thời gian có hạn nên đề tài không tránh khỏi sai sót Em rấ t mong nhâ ̣n đƣơ ̣c nhƣ̃ng ý kiế n đóng góp của thầ y cô và các ba ̣n để đề tài của em đƣơ ̣c hoàn thiê ̣n Lời cuố i em xin kính chúc các thầ y , cô giáo nhà trƣờng , khoa Công nghê ̣ Sinh ho ̣c và Công nghê ̣ thƣ̣c phẩ m , cùng các bạn đồng nghiệp sức khoẻ , thành công cuộc sống Em xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày tháng năm 2017 Sinh viên thƣc̣ hiêṇ Hoàng Thị Hạnh c DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Các nhóm lan Hài Việt Nam theo thứ hạng bảo tồn của Tổ chức Bảo tồn Thiên nhiên Quố c tế (IUCN)[1] .8 Bảng 3.1 Thiế t bi,dụng cụ nghiên cứu .24 ̣ Bảng 4.1 Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của nồ ng đô ̣, thời gian khƣ̉ trùng của HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng (sau ngày nuôi cấy) 34 Bảng 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của một số môi trƣờng đến khả tái sinh chời lan Hài Bóng (sau tuần ni cấy) 36 Bảng 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của đèn LED đỏ đến khả kéo dài chời lan Hài Bóng (sau tuần nuôi cấy) 38 Bảng 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ BA đến khả nhân nhanh chời lan Hài Bóng (sau tuần ni cấy) 40 Bảng 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Bóng (sau tuần ni cấy) 42 Bảng 4.6 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của dịch chiết chuối dịch chiết khoai tây đến khả nhân nhanh của chồi (sau tuần nuôi cấy) 44 Bảng 4.7 Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng củ a nồ ng đô ̣ NAA đế n khả rễ lan hài Bóng (sau tuần ni cấ y) .45 Bảng 4.8 Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của NAA kế t hơ ̣p với than hoa ̣t tin ́ h đế n khả rễ lan Hài Bóng (sau tuần ni cấ y) .47 Bảng 4.9: Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng một số chế phẩm đế n khả bật chời lan Hài Bóng (Sau tuần) .50 Bảng 4.10 Kết ảnh hƣởng của thời điểm tách chời đến sinh trƣởng của chời lan Hài Bóng 52 Bảng 4.11 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của thời điểm tách chồi đến tỷ lệ sống của chời lan Hài Bóng (Sau tháng ni trồng) 53 c DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 2.1: Hình ảnh về lan Hài Bóng .12 Hình 3.1: Sơ đờ nghiên cứu ảnh hƣởng của mợt số chất kích thích sinh trƣởng đến khả tái sinh, nhân nhanh chồi rễ của lan HàiBóng 26 Hình 4.1: Biể u đồ kết nghiên cứu ảnh hƣởng của nồ ng đô ̣, thời gian của HgCl đến khả tạo vật liệu vô trùng (sau ngày ni cấy) .35 Hình 4.2: Mợt số hình ảnh tạo vật liệu vơ trùng 36 Hình 4.3: Biểu đờ kết nghiên cứu ảnh hƣởng của một số môi trƣờng đến khả tái sinh chời lan Hài Bóng 37 Hình 4.4: Mợt số hình ảnh ảnh hƣởng của môi trƣờng nuôi cấy đến khả tái sinh chồi lan Hài Bóng (sau tuần ni cấy) 38 Hình 4.5: Biểu đờ kết ảnh hƣởng của đèn LED đỏ đến khả kéo dài chời lan Hài Bóng 39 Hình 4.6: Mợt số hình ảnh ảnh hƣởng của đèn LED đến khả kéo dài chồi lan Hài Bóng (sau tuần ni cấy) 39 Hình 4.7: Biểu đồ kết nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Bóng 41 Hình 4.8: Biểu đờ kết nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chời lan Hài Bóng .42 Hình 4.9: Mợt số hình ảnh ảnh hƣởng của BA kết hợp với Kinetine đến khả nhân nhanh chời lan Hài Bóng (sau tuần ni cấy) 43 Hình 4.10: Biểu đồ kết nghiên cứu ảnh hƣởng của dịch chiết chuối dịch chiết khoai tây đến khả nhân nhanh chời lan Hài Bóng .44 Hình 4.11: Biểu đờ kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của nồ ng đô ̣ NAA đế n khả rễ lan Hài Bóng (sau tuần nuôi cấ y) .46 Hình 4.12: Mợt số hình ảnh ảnh hƣởng của nồng độ NAA đến khả rễ lan Hài Bóng 47 Hình 4.13: Biểu đồ kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của NAA kế t hơ ̣p với than hoa ̣t tính đến khả rễ lan Hài Bóng (sau tuần nuôi cấ y) 48 c Hình 4.14: Mợt số hình ảnh ảnh hƣởng của NAA kết hợp với than hoạt tính đến khả rễ lan Hài Bóng (sau tuần ni cấy) 49 Hình 4.15: Biểu đồ kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng một số chế phẩm đế n khả bật chồi lan Hài Bóng (sau tuần theo dõi) 50 Hình 4.16: Mợt số hình ảnh lan Hài Bóng chƣa phun thuốc chế phẩm 51 Hình 4.17: Mợt số hình ảnh chời lan Hài Bóng (sau 20 ngày phun chế phẩm) 51 Hình 4.18: Mợt số hình ảnh chời lan Hài Bóng (sau tuần phun chế phẩm) 51 Hình 4.19 Biểu đờ kết ảnh hƣởng của thời điểm tách chồi đến sinh trƣởng của chồi lan Hài Bóng ( sau tháng) 52 Hình 4.20: Biểu đồ kết ảnh hƣởng của thời điểm tách chồi riêng lẻ đến tỷ lệ sống của chồi lan Hài Bóng 53 Hình 5.1: Sơ đờ quy trình nhân giống lan Hài Bóng phƣơng pháp in vitro….56 Hình 5.2: Sơ đờ quy trình nhân giống lan Hài Bóng phƣơng pháp tách chời 57 c DANH MỤC CÁC TƢ̀, CỤM TỪ VIẾT TẮT B5 : Gambrorg’s BA : 6-Benzyladenine BT : Bình thƣờng Cs : Cơ ̣ng sƣ̣ CT : Công thƣ́c CV : Coeficient of Variation Đ/C : Đối chứng Kinetin : 6-Furfurylaminopurine KT : Khoai tây LED : Light emitting diodes LSD : Least Singnificant Difference Test MS : Murashige & Skoog’s, 1962 MT : Môi trƣờng NAA : α-Naphthalene acetic acid ND : Nƣớc dƣ̀a PLB : Protocorm like body RE : Robert Ernst TN : Thí nghiệm THT : Than hoa ̣t tính c MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC BẢNG ii DANH MỤC CÁC HÌNH iii DANH MỤC CÁC TƢ̀, CỤM TỪ VIẾT TẮT v MỤC LỤC vi Phần MỞ ĐẦU 1.1.Đặt vấn đề .1 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3.Yêu cầu của đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài Phần TỔNG QUAN TÀI LIÊU ̣ .4 2.1 Tổ ng quan về lan Hài 2.1.1 Phân loa ̣i và nguồ n gố c .4 2.1.2 Đặc điểm hình thái 2.1.3 Sinh thái 2.1.4 Hiện trạng lan Hài Việt Nam 2.2 Giới thiê ̣u về giố ng lan Hài Bóng 10 2.2.1 Nguồ n gố c và sƣ̣ phân bố 10 2.2.2 Hình thái 11 2.2.3 Các điều kiện để nuôi trồng giống lan Hài Bóng 13 2.2.4 Vai trị của ánh sáng LED đến khả sinh trƣởng của trờng………13 2.2.5 Các phƣơng pháp nhân giống vơ tính lan Hài Bóng……………………… 15 2.3 Cơ sở khoa ho ̣c của nuôi cấ y mô tế bào thƣ̣c vâ ̣t .15 2.3.1 Tính toàn của tế bào thực vật 15 2.3.2 Sƣ̣ phân hoá tế bào 16 2.3.3 Sƣ̣ phản phân hoá tế bào 16 2.3.4 Mô ̣t số yế u tố ảnh hƣởng đế n quá trình nuôi cấ y mô tế bào thƣ̣c vâ ̣t .16 2.3.5 Môi trƣờng dinh dƣỡng 17 c 2.4 Tình hình nghiên cứu về ni cấy mơ lan Hài thế giới và nƣớc .21 2.4.1 Tình hình nghiên cứu về ni cấy mơ lan Hài thế giới 21 2.4.2 Tình hình nghiên cƣ́u về nuôi cấ y mô lan Hài nƣớc .23 Phần ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CƢ́U .24 3.1 Vâ ̣t liê ̣u, hoá chất và thiết bị nghiên cứu 24 3.1.1 Đối tƣợng, vâ ̣t liê ̣u nghiên cƣ́u 24 3.1.2 Hoá chất sử dụng .24 3.1.3 Thiế t bi,̣ dụng cụ nghiên cứu 24 3.2 Phạm vi, điạ điể m và thời gian nghiên cƣ́u 24 3.2.1 Phạm vi nghiên cứu 24 3.2.2 Điạ điể m nghiên cƣ́u 25 3.2.3 Thời gian nghiên cƣ́u 25 3.3 Nô ̣i dung nghiên cƣ́u 25 3.4 Phƣơng pháp nghiên cƣ́u 26 3.4.1 Chuẩ n bi ̣môi trƣờng nuôi cấ y in vitro 26 3.4.2 Phƣơng pháp nghiên cƣ́u 26 3.4.3 Phƣơng pháp bố trí thí nghiê ̣m 27 Phần KẾT QUẢ NGHIÊN CƢ́U VÀ THẢO LUẬN 34 4.1 Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của nồ ng đô ̣ , thời gian của chấ t khƣ̉ trùng HgCl2 đến khả ta ̣o vâ ̣t liê ̣u vô trùng 34 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của một số môi trƣờng đến khả tái sinh chời lan Hài Bóng 36 4.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng của đèn LED đỏ đến khả kéo dài chời lan Hài Bóng .38 4.4 Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của nồng độ m ột số Cytokinine một số chất hữu tự nhiên đế n khả nhân nhanh chờ i lan Hài Bóng 40 4.4.1 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi của lan Hài Bóng 40 c 4.4.2 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Bóng 42 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của nờng đợ NAA than hoạt tính đến khả rễ lan Hài Bóng 45 4.5.1 Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của nồ ng đô ̣ NAA đế n khả rễ của lan Hài Bóng 45 4.5.2 Nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của NAA kế t hơ ̣p với than hoa ̣t tính đế n khả rễ của lan Hài Bóng .47 4.6 Kết nghiên cứu khả nhân nhanh lan Hài Bóng phƣơng pháp tách chồi .49 4.6.1 Kết nghiên cứu ảnh hƣởng của một số chế phẩm đến khả bật chồi lan Hài Bóng 49 4.6.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng của thời điểm tách chồi đến tỷ lệ sống của chời lan Hài Bóng 53 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHI 55 ̣ 5.1 Kế t luâ ̣n 55 5.1.1 Kết nhân giống lan Hài Bóng phƣơng pháp in vitro .55 5.1.2 Kết nghiên cứu nhân giống lan Hài Bóng phƣơng pháp tách chời 57 5.2 Kiế n nghi 58 ̣ TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 c PHỤ LỤC KẾT QUẢ XƢ̉ LÝ SỐ LIỆU Thí nghiệm 1: Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của nồ ng đô ̣, thời gian của chấ t khƣ̉ trùng HgCl2 đến khả tạo vật liệu vô trùng (sau ngày nuôi cấy) BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMSKN FILE LLL 6/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua nong do, thoi gian cua Hgcl2 den kha nang tao vat lieu vo trung VARIATE V003 TLMSKN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 11768.2 1307.57 165.67 0.000 * RESIDUAL 20 157.852 7.89262 * TOTAL (CORRECTED) 29 11926.0 411.242 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMSN FILE LLL 6/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua nong do, thoi gian cua Hgcl2 den kha nang tao vat lieu vo trung VARIATE V004 TLMSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 31616.1 3512.90 268.60 0.000 * RESIDUAL 20 261.575 13.0788 * TOTAL (CORRECTED) 29 31877.6 1099.23 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMSN FILE LLL 6/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua nong do, thoi gian cua Hgcl2 den kha nang tao vat lieu vo trung VARIATE V004 TLMSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 31616.1 3512.90 268.60 0.000 * RESIDUAL 20 261.575 13.0788 * TOTAL (CORRECTED) 29 31877.6 1099.23 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE LLL 6/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua nong do, thoi gian cua Hgcl2 den kha nang tao vat lieu vo trung VARIATE V005 TLMC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF c MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT * RESIDUAL 13193.8 1465.97 20 250.312 12.5156 117.13 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 29 13444.1 463.589 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LLL 6/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua nong do, thoi gian cua Hgcl2 den kha nang tao vat lieu vo trung MEANS FOR EFFECT CT CT NOS TLMSKN TLMSN TLMC 0.000000 100.000 0.000000 16.5567 83.4433 3 28.8900 65.5567 5.55330 41.1100 38.8900 20.0000 52.2200 36.6667 11.1133 58.8867 24.4433 16.6667 43.3333 12.2233 44.4467 65.5533 16.5567 17.8900 59.9967 4.44333 35.5510 10 31.1100 0.000000 0.000000 68.8900 SE(N= 3) 1.62200 2.08796 2.04252 5%LSD 20DF 4.78484 6.15942 6.02536 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LLL 6/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua nong do, thoi gian cua Hgcl2 den kha nang tao vat lieu vo trung F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 30) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |CT % | | | | | TLMSKN 30 39.766 20.279 2.8094 TLMSN 30 38.211 33.155 3.6165 9.5 0.0000 TLMC 30 22.545 21.531 3.5377 15.7 0.0000 c | 7.1 0.0000 Thí nghiệm 2: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số môi trƣờng đến khả tái sinh chồi lan Hài Paphiopedilum vietnamense BALANCED ANOVA FOR VARIATE TMBC FILE MTC 29/ 5/17 16:17 :PAGE anh huong cua mot so moi truong den kha nang tai sinh choi lan Hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V003 TMBC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 30.9167 10.3056 20.61 0.001 * RESIDUAL 4.00000 500000 * TOTAL (CORRECTED) 11 34.9167 3.17424 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLTS FILE MTC 29/ 5/17 16:17 :PAGE anh huong cua mot so moi truong den kha nang tai sinh choi lan Hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V004 TLTS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 343.559 114.520 20.62 0.001 * RESIDUAL 44.4223 5.55278 * TOTAL (CORRECTED) 11 387.982 35.2711 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MTC 29/ 5/17 16:17 :PAGE anh huong cua mot so moi truong den kha nang tai sinh choi lan Hai Paphiopedilum vietnamense MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TMBC 15.6667 20.0000 17.3333 18.6667 TLTS 52.2200 66.6667 57.7800 62.2200 SE(N= 3) 0.408248 1.36049 5%LSD 8DF 1.33126 4.43641 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MTC 29/ 5/17 16:17 :PAGE anh huong cua mot so moi truong den kha nang tai sinh choi lan Hai Paphiopedilum vietnamense F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TMBC TLTS GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 17.917 12 59.722 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.7816 0.70711 3.9 0.0005 5.9389 2.3564 3.9 0.0005 c | | | | Thí nghiệm 3: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng đèn LED đỏ đến khả kéo dài chồi lan Hài Paphiopedilum vietnamense BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE L01 25/ 5/17 10:56 :PAGE VARIATE V003 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.16000 2.16000 981.81 0.000 * RESIDUAL 880009E-02 220002E-02 * TOTAL (CORRECTED) 2.16880 433760 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SLM FILE L01 25/ 5/17 10:56 :PAGE VARIATE V004 SLM SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.50000 1.50000 4.50 0.091 * RESIDUAL 1.33333 333333 * TOTAL (CORRECTED) 2.83333 566667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE L01 25/ 5/17 10:56 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 CCC 2.34000 3.54000 SLM 1.66667 2.66667 SE(N= 3) 0.270803E-01 0.333333 5%LSD 4DF 0.106149 1.30659 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE L01 25/ 5/17 10:56 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CCC SLM GRAND MEAN (N= 6) NO OBS 2.9400 2.1667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.65860 0.46904E-01 1.6 0.0002 0.75277 0.57735 26.6 0.1005 c | | | | Thí nghiệm 4: kết nghiên cứu ảnh hƣởng nồng độ BA đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Paphiopedilum vietnamense BALANCED ANOVA FOR VARIATE TCTD FILE BAC 11/ 5/17 16:52 :PAGE anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh choi lan hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V003 TCTD LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2076.93 519.233 865.39 0.000 * RESIDUAL 10 6.00002 600002 * TOTAL (CORRECTED) 14 2082.93 148.781 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE BAC 11/ 5/17 16:52 :PAGE anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh choi lan hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V004 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.30244 575610 881.03 0.000 * RESIDUAL 10 653336E-02 653336E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.30897 164927 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAC 11/ 5/17 16:52 :PAGE anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh choi lan hai Paphiopedilum vietnamense MEANS FOR EFFECT CT CT NOS TCTD HSNC 32.3333 1.06000 46.6667 1.55667 3 65.0000 2.16667 56.6667 1.89000 39.0000 1.30000 SE(N= 3) 0.447214 0.147573E-01 5%LSD 10DF 1.40919 0.465009E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAC 11/ 5/17 16:52 :PAGE anh huong cua nong BA den kha nang nhan nhanh choi lan hai Paphiopedilum vietnamense F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TCTD HSNC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 47.933 15 1.5987 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 12.198 0.77460 1.6 0.0000 0.40611 0.25560E-01 1.6 0.0000 c | | | | Thí nghiệm 5: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng nồng độ BA kết hợp với Kinetin đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Paphiopedilum vietnamense BALANCED ANOVA FOR VARIATE TCTD FILE BAK1 7/ 5/17 18:51 :PAGE anh huong cua nong BA ket hop voi Kinetin den kha nanh nhan nhanh choi lan hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V003 TCTD LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1672.00 418.000 216.21 0.000 * RESIDUAL 10 19.3334 1.93334 * TOTAL (CORRECTED) 14 1691.33 120.810 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE BAK1 7/ 5/17 18:51 :PAGE anh huong cua nong BA ket hop voi Kinetin den kha nanh nhan nhanh choi lan hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V004 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.85691 464227 211.65 0.000 * RESIDUAL 10 219334E-01 219334E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.87884 134203 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BAK1 7/ 5/17 18:51 :PAGE anh huong cua nong BA ket hop voi Kinetin den kha nanh nhan nhanh choi lan hai Paphiopedilum vietnamense MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TCTD 55.6667 61.6667 85.6667 74.3333 64.3333 HSNC 1.85667 2.05667 2.83333 2.46666 2.13333 SE(N= 3) 0.802775 0.270391E-01 5%LSD 10DF 2.52957 0.852012E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BAK1 7/ 5/17 18:51 :PAGE anh huong cua nong BA ket hop voi Kinetin den kha nanh nhan nhanh choi lan hai Paphiopedilum vietnamense F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TCTD HSNC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 68.333 15 2.2780 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 10.991 1.3904 2.0 0.0000 0.36634 0.46833E-01 2.1 0.0000 c | | | | Thí nghiệm 6: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng dịch chiết chuối dịch chiết khoai tây đến khả nhân nhanh chồi lan Hài Paphiopedilum vietnamense BALANCED ANOVA FOR VARIATE TCTD FILE KL1 30/ 5/17 0:27 :PAGE VARIATE V003 TCTD LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2494.93 623.733 935.61 0.000 * RESIDUAL 10 6.66659 666659 * TOTAL (CORRECTED) 14 2501.60 178.686 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE KL1 30/ 5/17 0:27 :PAGE VARIATE V004 HSNC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.77215 693037 935.59 0.000 * RESIDUAL 10 740747E-02 740747E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.77956 198540 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KL1 30/ 5/17 0:27 :PAGE MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TCTD 38.3333 53.0000 54.3333 76.6667 65.6667 HSNC 1.27778 1.76667 1.81111 2.55556 2.11889 SE(N= 3) 0.471402 0.157135E-01 5%LSD 10DF 1.48540 0.413140E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KL1 30/ 5/17 0:27 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TCTD HSNC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 57.600 15 1.9200 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 13.367 0.81649 1.4 0.0000 0.44558 0.27217E-01 1.4 0.0000 c | | | | Thí nghiệm 7: Kế t quả nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của nồ ng đô ̣ NAA đế n khả rễ lan hài Paphiopedilum vietnamense (sau 30 ngày nuôi cấy) BALANCED ANOVA FOR VARIATE SMRR FILE RR 8/ 5/17 8:57 :PAGE anh huong cua nong NAA den kha nang re cua lan hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V003 SMRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 687.600 171.900 143.25 0.000 * RESIDUAL 10 12.0000 1.20000 * TOTAL (CORRECTED) 14 699.600 49.9714 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMRR FILE RR 8/ 5/17 8:57 :PAGE anh huong cua nong NAA den kha nang re cua lan hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V004 TLMRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 7836.61 1959.15 147.11 0.000 * RESIDUAL 10 133.179 13.3179 * TOTAL (CORRECTED) 14 7969.79 569.270 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE RR 8/ 5/17 8:57 :PAGE anh huong cua nong NAA den kha nang re cua lan hai Paphiopedilum vietnamense MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SMRR 3.00000 21.3333 18.3333 13.0000 7.33333 TLMRR 10.0000 70.0000 60.0000 43.3333 23.3333 SE(N= 3) 0.632456 2.10696 5%LSD 10DF 1.99289 6.63912 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE RR 8/ 5/17 8:57 :PAGE anh huong cua nong NAA den kha nang re cua lan hai Paphiopedilum vietnamense F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SMRR TLMRR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 12.600 15 42.221 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 7.0690 1.0954 8.7 0.0000 23.859 3.6494 8.6 0.0000 c | | | | Thí nghiệm 8: Kết nghiên cƣ́u ảnh hƣởng của NAA kế t hơ ̣ p với than hoa ̣t tính đến khả rễ lan hài Paphiopedilum vietnamense BALANCED ANOVA FOR VARIATE SLR FILE THT41 30/ 5/17 1:15 :PAGE anh huong cua NAA ket hop voi than hoat tinh den kha nang re lan Hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V003 SLR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3982.67 995.667 403.65 0.000 * RESIDUAL 10 24.6664 2.46664 * TOTAL (CORRECTED) 14 4007.33 286.238 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMRR FILE THT41 30/ 5/17 1:15 :PAGE anh huong cua NAA ket hop voi than hoat tinh den kha nang re lan Hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V004 TLMRR LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 803.121 200.780 14.27 0.000 * RESIDUAL 10 140.726 14.0726 * TOTAL (CORRECTED) 14 943.847 67.4177 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE THT41 30/ 5/17 1:15 :PAGE anh huong cua NAA ket hop voi than hoat tinh den kha nang re lan Hai Paphiopedilum vietnamense MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 SLR 36.0000 48.3333 81.6667 71.6667 55.6667 TLMRR 67.7767 81.1100 88.8900 83.3333 74.4433 SE(N= 3) 0.906759 2.16584 5%LSD 10DF 2.85723 6.62464 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THT41 30/ 5/17 1:15 :PAGE anh huong cua NAA ket hop voi than hoat tinh den kha nang re lan Hai Paphiopedilum vietnamense F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SLR TLMRR GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 58.667 15 79.111 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 16.919 1.5706 2.7 0.0000 8.2108 3.7513 4.7 0.0005 c | | | | Thí nghiệm 9: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng số chế phẩm đến khả bật chồi lan Hài Bóng BALANCED ANOVA FOR VARIATE TSM FILE TT 1/ 6/17 15:11 :PAGE anh huong cua mot so che pham den kha nang bat choi lan Hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V003 TSM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 8384.92 2794.97 508.18 0.000 * RESIDUAL 44.0001 5.50002 * TOTAL (CORRECTED) 11 8428.92 766.265 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLBC FILE TT 1/ 6/17 15:11 :PAGE anh huong cua mot so che pham den kha nang bat choi lan Hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V004 TLBC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 9.31657 3.10552 508.18 0.000 * RESIDUAL 488884E-01 611105E-02 * TOTAL (CORRECTED) 11 9.36546 851406 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TT 1/ 6/17 15:11 :PAGE anh huong cua mot so che pham den kha nang bat choi lan Hai Paphiopedilum vietnamense MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 TSM 2.66667 69.0000 62.3333 57.6667 HSNC 0.888889E-01 2.30000 2.07778 1.92222 SE(N= 3) 1.35401 0.451333E-01 5%LSD 8DF 4.41528 0.147175 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TT 1/ 6/17 15:11 :PAGE anh huong cua mot so che pham den kha nang bat choi lan Hai Paphiopedilum vietnamense F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE TSM HSNC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 47.917 12 1.5972 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 27.681 2.3452 4.9 0.0000 0.92272 0.78173E-01 4.9 0.0000 c | | | | Thí nghiệm 10: Kết nghiên cứu ảnh hƣởng thời điểm tách chồi đến sinh trƣởng phát triển chồi lan Hài Paphiopedilum vietnamense BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V003 SL LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 166666E-04 166666E-04 0.05 0.823 * RESIDUAL 126666E-02 316666E-03 * TOTAL (CORRECTED) 128333E-02 256666E-03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DL FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V004 DL SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 311289E-18 311289E-18 0.00 0.996 * RESIDUAL 459999E-02 115000E-02 * TOTAL (CORRECTED) 459999E-02 919998E-03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE RL FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V005 RL SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 166667E-04 166667E-04 0.00 0.953 * RESIDUAL 175333E-01 438333E-02 * TOTAL (CORRECTED) 175500E-01 351000E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL1 FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V006 SL1 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 192667E-01 192667E-01 44.46 0.004 * RESIDUAL 173334E-02 433336E-03 * TOTAL (CORRECTED) 210000E-01 420000E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DL1 FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V007 DL1 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 326667E-02 326667E-02 2.13 0.218 c * RESIDUAL 613336E-02 153334E-02 * TOTAL (CORRECTED) 940003E-02 188001E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE RL1 FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V008 RL1 LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 666666E-04 666666E-04 0.01 0.904 * RESIDUAL 178667E-01 446667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 179333E-01 358667E-02 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL3 FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V009 SL3 LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 109350 109350 24.67 0.009 * RESIDUAL 177333E-01 443333E-02 * TOTAL (CORRECTED) 127083 254167E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DL3 FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V010 DL3 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 180267 180267 19.45 0.013 * RESIDUAL 370667E-01 926667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 217333 434667E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE RL3 FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE VARIATE V011 RL3 SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 120417 120417 26.08 0.008 * RESIDUAL 184666E-01 461666E-02 * TOTAL (CORRECTED) 138883 277767E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE 10 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 SL 2.54333 2.54000 DL 2.32000 2.32000 c RL 1.17467 1.17333 SL1 2.62333 2.73667 SE(N= 5%LSD 3) 4DF CT SE(N= 5%LSD 0.102740E-01 0.195789E-01 0.382245E-01 0.120185E-01 0.402719E-01 0.767450E-01 0.149832 0.471101E-01 NOS 3 3) 4DF CT DL1 2.34667 2.39333 RL1 1.24333 1.25000 SL3 3.02333 3.29333 DL3 4.17000 4.51667 0.226078E-01 0.385861E-01 0.384418E-01 0.555778E-01 0.886178E-01 0.151249 0.150684 0.217853 NOS 3 RL3 2.23667 2.52000 SE(N= 3) 0.392286E-01 5%LSD 4DF 0.153768 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE STPT1 29/ 5/17 11:15 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SL DL RL SL1 DL1 RL1 SL3 DL3 RL3 GRAND MEAN (N= 6) NO OBS 2.5417 2.3200 1.1750 2.6800 2.3700 1.2467 3.1583 4.3433 2.3783 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.16021E-010.17795E-01 0.7 0.8230 0.30331E-010.33912E-01 1.5 0.9957 0.59245E-010.66207E-01 5.6 0.9525 0.64807E-010.20817E-01 0.8 0.0037 0.43359E-010.39158E-01 1.7 0.2176 0.59889E-010.66833E-01 5.4 0.9045 0.15943 0.66583E-01 2.1 0.0089 0.20849 0.96264E-01 2.2 0.0128 0.16666 0.67946E-01 2.9 0.0082 c | | | | 11 Thí nghiệm 11: Kết ảnh hƣởng thời điểm tách chồi riêng lẻ đến tỷ lệ Sống chồi BALANCED ANOVA FOR VARIATE TMNT FILE TL11 28/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua thoi diem tách mam den ty le song cua mam lan Hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V003 TMNT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 24.0000 24.0000 72.00 0.002 * RESIDUAL 1.33334 333334 * TOTAL (CORRECTED) 25.3333 5.06667 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE TL11 28/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua thoi diem tách mam den ty le song cua mam lan Hai Paphiopedilum vietnamense VARIATE V004 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 266.800 266.800 71.96 0.002 * RESIDUAL 14.8297 3.70742 * TOTAL (CORRECTED) 281.630 56.3259 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TL11 28/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua thoi diem tách mam den ty le song cua mam lan Hai Paphiopedilum vietnamense MEANS FOR EFFECT CT CT NOS TMNT 3 TLMS 22.3333 26.3333 74.4433 87.7800 SE(N= 3) 0.333334 1.11167 5%LSD 4DF 1.30660 4.35750 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TL11 28/ 5/17 18:11 :PAGE anh huong cua thoi diem tách mam den ty le song cua mam lan Hai Paphiopedilum vietnamense F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE (N= 6) NO OBS TMNT TLMS GRAND MEAN STANDARD DEVIATION SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 24.333 2.2509 0.57735 81.112 7.5051 1.9255 c C OF V |CT | | | 2.4 0.0019 2.4 0.0019 | PHỤ LỤC  Một số chế phầm sử dụng phƣơng pháp tách chồi Một số hóa chất sử dụng giai đoạn nhân nhanh Một số hóa chất sử dụng giai đoạn tạo hoàn chỉnh c