Đang tải... (xem toàn văn)
Bé GI¸O DôC Vµ §µO T¹O Bé N¤NG NGHIÖP Vµ PTNT TR¦êNG §¹I HäC THUû LîI NguyÔn ¸nh TuyÕt NGHI£N CøU KH¶ N¡NG LO¹I Bá MéT Sè KIM LO¹I NÆNG (VµNG, NIKEN) TRONG §ÊT CñA VI KHUÈN ¦A AXIT PH¢N LËP §¦îC T[.]
Bộ GIáO DụC Và ĐàO TạO Bộ NÔNG NGHIệP Và PTNT TRƯờNG ĐạI HọC THUỷ LợI - - Nguyễn ánh Tuyết NGHIÊN CứU KHả NĂNG LOạI Bỏ MộT Số KIM LOạI NặNG (VàNG, NIKEN) TRONG ĐấT CủA VI KHUẩN ƯA AXIT PHÂN LậP ĐƯợC Từ RáC THảI KHAI KHOáNG (Mỏ THIếC Hà THƯợNG, TỉNH THáI NGUYÊN) LUậN VĂN THạC Sĩ Hà Nội - 2014 Bộ GIáO DụC Và ĐàO TạO Bộ NÔNG NGHIệP Và PTNT TRƯờNG ĐạI HọC THUỷ LợI - - Nguyễn ánh Tuyết NGHIÊN CứU KHả NĂNG LOạI Bỏ MộT Số KIM LOạI NặNG (VàNG, NIKEN) TRONG ĐấT CủA VI KHUẩN ƯA AXIT PHÂN LậP ĐƯợC Từ RáC THảI KHAI KHOáNG (Mỏ THIếC Hà THƯợNG, TỉNH THáI NGUYÊN) Chuyên ngành : Khoa häc M«i trêng M· sè : 60 - 85 - 02 LN V¡N TH¹C SÜ Ngêi híng dÉn khoa häc : TS Hå Tó Cêng PGS TS Lª Đình Thành Hà Nội - 2014 LI CM N Trc hết, với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, tơi xin bày tỏ lịng cảm ơn chân thành tới: TS Hồ Tú Cường, cán nghiên cứu Viện Công nghệ mơi trường PGS.TS Lê Đình Thành, giảng viên Trường Đại học Thủy Lợi, trực tiếp hướng dẫn tơi tận tình, cho tơi kiến thức kinh nghiệm quý báu, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi q trình thực hiện, hồn thành luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Lãnh đạo Khoa Môi trường, trường Đại học Thủy lợi, cảm ơn thầy cô giáo khoa, trường dạy cho kiến thức, kỹ quan trọng Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới Lãnh đạo Phịng Vi sinh vật mơi trường, Lãnh đạo Viện Công nghệ môi trường tạo điều kiện thuận lợi cho học tập nghiên cứu Tôi chân thành cảm ơn đồng nghiệp tôi, cán Phịng Vi sinh vật mơi trường giúp đỡ ủng hộ để tơi hồn thành tốt luận văn Tơi xin cảm ơn gia đình, người thân bạn bè động viên giúp đỡ thời gian qua Hà Nội, tháng 11 năm 2014 Học viên Nguyễn Ánh Tuyết LỜI CAM ĐOAN Tên là: Nguyễn Ánh Tuyết Mã số học viên: 128440301018 Lớp: 20MT Chuyên ngành: Khoa học môi trường Mã số: 60-85-02 Khóa học: K20 Tơi xin cam đoan luận văn tơi thực hướng dẫn TS Hồ Tú Cường PGS.TS Lê Đình Thành với đề tài nghiên cứu luận văn “Nghiên cứu khả loại bỏ số kim loại nặng (Vàng, Niken) đất vi khuẩn ưa axit phân lập từ rác thải khai khoáng (mỏ thiếc Hà Thượng, tỉnh Thái Nguyên) ” Đây đề tài nghiên cứu mới, không trùng lặp với đề tài luận văn trước đây, khơng có chép luận văn Nội dung luận văn thể theo quy định, nguồn tài liệu, tư liệu nghiên cứu sử dụng luận văn trích dẫn nguồn Nếu xảy vấn đề với nơi dung luận văn này, tơi xin chịu hoàn toàn trách nhiệm theo quy định./ NGƯỜI VIẾT CAM ĐOAN Nguyễn Ánh Tuyết MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: Ô NHIỄM MÔI TRƯỜNG TỪ KHAI THÁC, CHẾ BIẾN KHOÁNG SẢN VÀ PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ CHẤT THẢI KHAI KHOÁNG TRONG ĐẤT 1.1 Khai thác chế biến khoáng sản Việt Nam 1.2.1 Ngành khai thác khoáng sản 1.2.2 Hiện trạng khai thác chế biến số khoáng sản 1.2.3 Cơng nghệ khai thác chế biến khống sản Việt Nam 1.2.4 Ô nhiễm điển hình khai thác chế biến khống sản 10 1.2 Hiện trạng khai thác chế biến khoáng sản Thái Nguyên 14 1.2.1 Khai thác chế biến khoáng sản Thái Nguyên 14 1.2.2 Ơ nhiễm mơi trường hoạt động khai thác chế biến khoáng sản Thái Nguyên 16 1.3 Xử lý chất thải khai khoáng đất 23 1.3.1 Nghiên cứu giới 23 1.3.2 Nghiên cứu Việt Nam 30 1.3.3 Tổng quan vi khuẩn ưa axit 31 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG, PHẠM VI, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 34 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 34 2.1.2 Địa điểm thu mẫu phạm vi nghiên cứu 35 2.2 Dụng cụ thiết bị nghiên cứu 37 2.3 Các phương pháp nghiên cứu 38 2.3.1 Phương pháp phân lập vi khuẩn truyền thống 38 2.3.2 Phương pháp nhuộm Gram 39 2.3.3 Phương pháp soi kính hiển vi 41 2.3.4 Phương pháp phân tích kim loại nặng 41 2.3.5 Phương pháp sinh học phân tử 41 2.3.5 Xác định đặc điểm chủng vi khuẩn ưa axit phân lập 44 2.3.6 Đánh giá khả loại bỏ Vàng, Niken đất chủng vi khuẩn phân lập 45 2.3.7 Phương pháp tính hiệu suất nghiên cứu khả loại bỏ kim loại nặng 46 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ 48 3.1 Tình hình nhiễm mỏ thiếc Hà Thượng – Thái Nguyên 48 3.2 Phân lập vi khuẩn 50 3.2.1 Phân lập vi khuẩn ưa axit 50 3.2.2 Định tên vi khuẩn 52 3.2.3 Hình thái vi khuẩn 54 3.3 Đặc điểm vi khuẩn ưa axit phân lập 57 3.3.1 Đặc điểm sinh trưởng chủng vi khuẩn ưa axit 57 3.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ tới sinh trưởng 60 3.3.3 Ảnh hưởng pH tới sinh trưởng 62 3.4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố tới khả loại bỏ kim loại vàng niken chủng vi khuẩn ưa axit phân lập 64 3.4.2 Định hướng xử lý kim loại nặng đất 72 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 75 TÀI LIỆU THAM KHẢO 77 DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 1.1 Trữ lượng số loại khoáng sản Việt Nam (Đơn vị: tấn) Bảng 2.1 Đặc điểm mẫu thu mỏ thiếc Hà Thượng, tỉnh Thái Nguyên………………………………………………………………… 37 Bảng 2.2 Một số tiêu kim loại mẫu đất sử dụng nghiên cứu loại bỏ……………………………………………………………… .35 Bảng 2.3 Thành phần PCR………………………………… ………… 42 Bảng 2.4 Chu trình PCR ……………………… ………………………43 Bảng 3.1 Một số tiêu vi sinh vật mẫu thu mỏ thiếc Hà Thượng………………………………………………………………… …48 Bảng 3.2 Một số tiêu kim loại nặng mẫu thu mỏ thiếc Hà Thượng……………………………………………… ……………… 49 Bảng 3.3 Sự thay đổi pH dịch nuôi cấy qua lần cấy chuyển (mỗi tuần lần)…………………………….………………………………… 51 Bảng 3.4 Sự thay đổi pH dịch nuôi cấy (ban đầu 4,5) cấy ngược trở lại chủng vi khuẩn phân lập được…………………………………… … 52 DANH MỤC HÌNH Trang Hình 1 Khai thác khoáng sản lộ thiên gây ảnh hưởng tiêu cực tới môi trường sức khỏe người ………………………………………… 17 Hình Một số mỏ khai thác khoáng sản thuộc tỉnh Thái Nguyên…… 36 Hình Ảnh điện di gen 16S rADN mẫu NKT (giếng 2), mẫu ĐBDX (giếng 3), giếng đoạn ADN chuẩn với số kích thước tương ứng ………………………… 52 Hình Cây phát sinh hai chủng vi khuẩn ưa axit ĐBDX, NKT dựa trình tự 16S rADN…………………………………………… 53 Hình 3 Khuẩn lạc vi khuẩn ưa axit……………………………… 55 Hình Hình thái vi vi khuẩn ưa axit phân lập được…………… .56 Hình Đường cong sinh trưởng chủng vi khuẩn ưa axit….… 58 Hình Khả làm giảm pH môi trường nuôi cấy chủng vi khuẩn ưa axit…………………………………………………………… 59 Hình Ảnh hưởng nhiệt độ tới khả sinh trưởng chủng vi khuẩn ưa axit phân lập được………………………………………… 60 Hình Ảnh hưởng pH tới sinh trưởng chủng vi khuẩn ưa axit phân lập được……………………………… ……………… ….63 Hình Khả loại bỏ kim loại nặng vi khuẩn ưa axit môi trường không bổ sung chất…………………………………… …66 Hình 10 Khả loại bỏ kim loại vi khuẩn ưa axit mơi trường có bổ sung chất…………………………………………….… 66 Hình 11 Ảnh hưởng mật độ tế bào vi khuẩn ưa axit phân lập từ mẫu NKT (Acidithiobacillus thiooxidans) tới khả loại bỏ Ni………… 67 Hình 12 Ảnh hưởng mật độ tế bào vi khuẩn ưa axit phân lập từ mẫu ĐBDX (Acidithiobacillus ferrooxidans) tới khả loại bỏ … 68 Hình 13 Ảnh hưởng mật độ tế bào vi khuẩn ưa axit phân lập từ mẫu BCHC tới khả loại bỏ Ni…………………………………… 68 Hình 14 Ảnh hưởng tỷ lệ mẫu tới khả loại bỏ Ni chủng vi khuẩn ưa axit phân lập (sau 14 ngày)…….……… ………71 MỞ ĐẦU Tính cấp thiết ý nghĩa đề tài nghiên cứu Thời gian qua, nước ta đạt thành tựu quan trọng phát triển kinh tế, riêng ngành cơng nghiệp khai thác khống sản có nhiều đóng góp to lớn Tuy nhiên, bên cạnh thành tựu khơng thể phủ nhận việc khai thác khoáng sản để lại hậu nặng nề môi trường, việc khai thác đào xới, tuyển quặng gây thu hẹp diện tích đất canh tác, tích tụ chất thải rắn lòng hồ kênh mương, quặng đuôi sau khai thác thường tập trung vào khu vực bãi rác quặng đuôi không qua khâu xử lý gây ảnh hưởng tiêu cực tới môi trường sinh thái đời sống người Trong nhiễm kim loại nặng đất mối quan tâm người làm nhiệm vụ bảo vệ mơi trường mà tồn xã hội Trong khuôn khổ nghiên cứu luận văn quan tâm đến hai kim loại niken (Ni) vàng (Au) đất Ni số kim loại nặng gây ảnh hưởng nghiêm trọng tới sức khỏe người tiềm ứng dụng phổ biến nó, cịn kim loại Au khơng gây ảnh hưởng tới sức khỏe mà nguồn kim loại có giá trị lớn mặt kinh tế ứng dụng cho nhiều mục đích khác Vì cần có biện pháp xử lý phù hợp để đáp ứng hai mục tiêu, vừa loại bỏ để tránh gây nhiễm, vừa thu hồi để phục vụ cho mục đích kinh tế khác Hiện nay, việc sử dụng vi sinh vật đánh giá phù hợp cho xử lý kim loại nặng giá thành thấp, vận hành đơn giản thân thiện với mơi trường Vi sinh vật có vai trị quan trọng giai đoạn chuyển hố sinh học kim loại, chúng thúc đẩy nhanh trình phân giải quặng đi, làm giảm pH mơi trường tạo dịng chảy axit qua tách ion kim loại từ đất chuyển vào môi trường nước Các vi khuẩn ưa axit nhân tố 72 khơng gian trao đổi chất thuận lợi hàm lượng kim loại rửa giải môi trường lớn 3.4.2 Định hướng xử lý kim loại nặng đất Trong khuôn khổ luận văn thí nghiệm loại bỏ kim loại nặng (vàng, niken) dừng lại quy mơ phịng thí nghiệm Kết bước đầu cho thấy hiệu xử lý tương đối cao với niken đạt 60% Xuất phát từ kết luận văn đề xuất mơ hình xử lý kim loại nặng quy mô pilot thực địa Tuy nhiên, để triển khai mơ hình quy mơ pilot thực địa cần bổ sung thêm số nghiên cứu tiềm loại bỏ số kim loại nặng khác khỏi đất chủng vi khuẩn ưa axit phân lập Đối với vùng đất ô nhiễm kim loại nặng cần xây dựng hệ thống bể xử, đất ô nhiễm đưa vào bể, bổ sung nước vào bể tạo độ ẩm tới pha loãng phù hợp (tốt với tỷ lệ 1:3 nghiên kết nghiên cứu đưa ra), chủng vi khuẩn ưa axit cấy vào bể việc bổ sung thêm chất cho sinh trưởng để nâng cao hiệu suất loại bỏ kim loại Bể ni ủ đồng thời với q trình xử lý diễn thời gian Theo thời gian trình trao đổi chất vi khuẩn ưa axit diễn hình thành dịng chảy axit chu trình đây: 73 Trong đó: Các bước hoạt động vi khuẩn Acidithiobacillus gạch chân Bước oxi hóa biểu diễn đường nét liền Bước khử biểu diễn nét đứt Dịng chảy axit hình thành tách kim loại nặng đất chuyển vào nước Nước bể xử lý thu hồi sang bể riêng, quy trình thu hồi xử lý kim loại nặng nước diễn Các kim loại quý có giá trị tận dụng thu hồi Nước sau thu hồi tách kim loại cân lại pH trước xả thải tận dụng quay vịng lại bể xử lý nên không gây ô nhiễm thứ cấp Đất sau xử lý kim loại nặng phục hồi hồn ngun trở lại Như vậy, thấy nhiều ưu điểm phương pháp xử lý đất ô nhiễm kim nặng vi khuẩn ưa axit như: xử lý triệt để kim loại để phù hợp cho việc tái thiết đất với quy trình vận hành tương đối đơn 74 giản mà không gây ô nhiễm thứ cấp cho môi trường phương pháp khác, phù hợp cho xử lý chất thải nhà máy mạ kim loại có hàm lượng kim loại cao có mặt kim loại q, vậy, ưu điểm bật phương pháp tái thu hồi lại kim loại có giá trị đất nhiễm phục vụ cho mục đích khác Tuy nhiên, phương pháp tránh khỏi nhược điểm như: phù hợp áp dụng với khu vực có diện tích nhỏ phải bốc dỡ đất xử lý bể, cần thời gian cho sinh trưởng vi khuẩn cấy vào đất, trì bổ sung vi khuẩn để đảm bảo mật độ cho trình xử lý 75 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Qua kết phân tích mẫu thu mỏ thiếc Hà Thượng cho thấy khu vực bị ô nhiễm chung kim loại Đồng, nước bị nhiễm Asen, đất bị nhiễm Chì Tính đa dạng hệ vi sinh vật khu mỏ thấp Đã phân lập chủng vi khuẩn ưa axit: Acidithiobacillus thiooxidans từ mẫu NKT, Acidithiobacillus ferrooxidans từ mẫu ĐBDX, chủng từ mẫu BCHC chưa định tên Cả chủng vi khuẩn hình que, chủng phân lập từ NKT vi khuẩn Gram âm, hai chủng lại vi khuẩn Gram dương Các vi khuẩn phân lập sinh trưởng tối ưu nhiệt độ 30oC pH4 Cả chủng có khả loại bỏ kim loại Niken đất, khơng có khả loại bỏ Vàng, chủng Acidithiobacillus ferrooxidans phân lập từ mẫu ĐBDX có hiệu suất loại bỏ cao so với hai chủng lại Các yếu tố chất, mật độ tế bào, tỷ lệ đất xử lý có ảnh hưởng tới hiệu suất loại bỏ kim loại chủng vi khuẩn ưa axit phân lập Vi khuẩn ưa axit có hiệu suất loại bỏ cao mơi trường có bổ sung chất, mật tế bào 10% cho hiệu suất loại bỏ cao sau 21 ngày thí nghiệm so với mật độ 50% 100% Tỷ lệ pha loãng đất cao (1:3) cho hiệu suất loại bỏ kim loại Niken cao với hai tỷ lệ pha lỗng cịn lại (1:1 1:2) 76 KIẾN NGHỊ Cần kiểm sốt trì giữ giống chủng vi khuẩn ưa axit đẫ phân lập được, định tên chủng vi khuẩn phân lập từ mẫu BCHC Cần quan tâm nghiên cứu thêm đặc tính sinh lý sinh hóa chủng vi khuẩn ưa axit để tạo điều kiện nâng cao hiệu suất loại bỏ kim loại Nghiên cứu sâu yếu tố ảnh hưởng khác nguồn dinh dưỡng, nồng độ kim loại ảnh hưởng tới sinh trưởng hiệu suất loại bỏ kim loại nặng chủng vi khuẩn ưa axit Tiến hành thử nghiệm khả loại bỏ vi khuẩn ưa axit phân lập với kim loại khác để đánh giá tiềm ứng dụng chúng 77 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Bùi Văn Cường, Tăng Thị Chính (2010), Ảnh hưởng hàm lượng Nitơ photpho đất đến khả cộng sinh nấm Abuscular mycorrhiza ngô hiệu xử lý đất nhiễm chì, Tạp chí Khoa học cơng nghệ, 48, trang 73-79 Đặng Đình Kim ( 2007) Nghiên cứu sử dụng thực vật để cải tạo đất bị ô nhiễm kim loại nặng vùng khai thác khống sản, Tạp chí Khoa học công nghệ Hội bảo vệ thiên nhiên môi trường Việt Nam (2004), Tài nguyên môi trường sống NXB Chính trị quốc gia Hà Nội Hội đồng nhân dân tỉnh Thái Nguyên (2007), Tóm tắt quy hoạch thăm dò, khai thác, chế biến sử dụng quặng sắt, quặng titan địa bàn tỉnh thái nguyên giai đoạn 2007-2015, 16 trang Hội đồng Nhân dân huyện Đại Từ (2011), Nghị Hội đồng nhân dân huyện Đại Từ năm 2011 10 trang Lê Văn Khoa (chủ biên), Nguyễn Xuân Cự, Lê Đức, Trần Khắc Hiệp, Trần Cẩm Vân (2000), Đất Môi Trường, Nxb Giáo Dục Sở Tài nguyên Môi trường tỉnh Thái Ngun (2009), Kế hoạch hành động kiểm sốt nhiễm tỉnh Thái Nguyên, 106 trang Trung tâm phát triển công nghệ điều tra tài nguyên tỉnh Thái Nguyên (2002) Báo cáo “Điều tra, đánh giá môi trường nước hồ Núi Cốc, đề xuất giải pháp bảo vệ môi trường sử dụng có hiệu lịng hồ”, 146 trang 78 10 Trần Văn Tựa, Đặng Đình Kim (2012), Nghiên cứu khả sinh trưởng tích lũy Asen, Chì Cadimi cải xanh Brassia juncea, Tạp chí Khoa học cơng nghệ, 50, trang 245–255 Tiếng Anh 11 Acar YB, Alshawabkeh AN, Principles of electrokinetic remediation (1993), Environmental Science & Technology, 27, pp 263-290 12 Alam GM, Tokunaga S, Maekawa T (2001), Extraction of arsenic in a synthetic arsenic contaminated soil using phosphate, Chemosphere, 43(8), pp 103-146 13 Aresta M, Dibenedetto A, Fragale C, et al (2008), Thermal desorption of polychlorobiphenyls from contaminated soils and their hydrodechlorination using Pd- and Rh-supported catalysts, Chemosphere, 70(6), pp 105-175 14 Bayat, O., Sever, E., Bayat, B., Arslan, V., Poole, C (2009), Bioleaching of zinc and iron from steel plant waste using Acidithiobacillus ferrooxidans Apply Biochem Biotechnol, 152(1), pp 117–269 15 Bosecker K (2001), Microbial leaching in environmental clean-up programmes, Hydrometallurgy, 59(2-3), pp 245-304 16 Bùi Thị Kim Anh, Đặng Đình Kim, Trần Văn Tựa, Đỗ Tuấn Anh (2011), Phytoremediation potential of indigenous plants from Thai Nguyen province, Vietnam Digestion, 32, pp 257–289 17 Consuelo Gomez, Klaus Bosecker (2010), Leaching Heavy Metals from Contaminated Soil by Using Thiobacillus ferrooxidans or Thiobacillus thiooxidans, Geomicrobiology Journal 79 18 Dong-Jin Kim, Debabrata Pradhan, Kyung-Ho Park1, Jong-Gwan Ahn1 and Seoung-Won Lee2 (2008) Effect of pH and Temperature on Iron Oxidation by Mesophilic Mixed Iron Oxidizing Microflora, Advanced Material Engineering Division, School of Engineering, pp 305-350 19 Ehsan S, Prasher SO, Marshall WD (2007), Simultaneous mobilization of heavy metals and polychlorinated biphenyl (PCB) compounds from soil with cyclodextrin and EDTA in admixture, Chemosphere, 68(1), pp 150-226 20 Fan DF, Huang SS, Liao QL, et al (2007), Restoring experiment on Cadmium polluted vegetable lands with attapulgite of varied dose, Jiangsu Geology, 31(4), pp.323-354 21 Fu JH (2008), The research status of soil remediation in China, Annual meeting of Chinese society for environmental sciences, pp.156-176 22 Gao, J., Zhang, C.G., Wu, X.L., Wang, H.H., Qiu, G.Z (2007), Isolation and identification of a strain of Leptospirillum ferriphilum from an extreme acid mine drainage site, Microbiol, 57(2), pp 171–176 23 Gonza’lez – Toril, E., Gon’mez, F., Malki (2006), The Isolation and study of Acidophilic Microorganisms Method in Microbiology, 05, pp 471-476 24 Hallberg, K., Hedrich, S., Johnson, D.(2011), Acidiferrobacter thiooxydans, gen nov sp Nov; an acidophilic, thermo-toleraet, facultatively anaerobic iron – and sulfur – oxidizer of the family Ectothiorhodospiraceace, Extremophiles: life under extreme conditions, 9, pp 271-279 25 Helmut Brandl Microbial Leaching of Metals Switzerland Environment Protection Engineering Zürich, 80 26 Hong Peng, Yu Yang, Xuan Li, Guanzhou Qiu, Xueduan Liu, Jufang Huang and Yuehua Hu (2006) Structure Analysis of 16S rDNA Sequences from Strains of Acidithiobacillus ferrooxidans, Journal of Biochemistry and Molecular Biolog, 39, pp 178-217 27 Joanna willner, Agnieszka fornalczyk (2013), Extraction of metals from electronic waste by bacterial leaching, 39 28 Jordan, M., Acidophilic bacteria – their potential mining and environmental applications, Minerals Enginerring, 12, pp.169-11 29 K Harneit, A Goksel, D Kock, et al (2006), Adhesion to metal sulfide surfaces Acidithiobacillus by cells of thiooxidans and Acidithiobacillus ferrooxidans, Leptospirillum ferrooxidans Hydrometallurgy, 83, pp 245 – 328 30 Kou YG, Fu XY, Hou PQ, et al (2008) The study of lead accumulation of earthworm in lead pollution soil, Environmental Science and Management, 33(1), pp 62-95 31 Lee M, Paik IS, Do W, et al (2007), Soil washing of As- contaminated stream sediments in the vicinity of an abandoned mine in Korea, Environmental Geochemistry and Health, 29(4), pp 319-348 32 Li GD, Zhang ZW, Jing P, et al (2009) Leaching remediation of heavy metal contaminated fluvio-aquatic soil with tea-saponin, Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering, 25(10), pp 231-236 33 Li J, Zhang GN, Li Y (2010), Review on the remediation technologies of POPs, Hebei Environmental Science, 8, pp 65-73 35 Lv LL, Jin MY, Li BW, et al (2009), Study on remediation of the soil contaminated with cadmium by applying four minerals, Journal of Agriculture University of Hebei, 32(1), pp.15-47 81 36 M Lambert, B.A Leven, and R.M Green, New Methods of Cleaning Up Heavy Metal in Soils and Water Innovative, Environmental science and technology briefs for citizens, 13 37 Ou-Yang X, Chen JW, Zhang XG (2010), Advance in supercritical CO2 fluid extraction of contaminants from soil, Geological Bulletin of China, 29(11): 165-194 38 Qian SQ, Liu Z (2000), An overview of development in the soilremediation technologies, Chemical Industrial and Engineering Process, 4, pp 10-14 39 Satoshi wakai, Kentaro yamamoto, Tadayoshi kanao, Tsuyoshi sugio and Kazuo kamimura (2006) Discrimnation among the three Acidithiobacillus species, A.ferrooxidans, A.thiooxidans, A.caldus, baseed on Restriction Fragment Length Polymorphism Analysis of the 16s-23S DNA Intergenic spacer Region, Okayama University, 95, pp 7-102 40 Schippers, A (2007), Microorganisms involved in bioleaching and nucleic acid – based molecular methods for their inentification and quantification, Chapter 1, pp 3-33 41 S Donahue Dr.Auburn, heavy metal soil contamination, soil quality – urban technical, No.3 42 Sugio, T., Wakabayashi, M., Kanao, T., Takeuchi, F., (2008), Isolation and characterization of Acidithiobacillus ferrooxidans strain D3-2 active in copper bioleaching from a copper mine in Chile, Biosci Biotechnol Biochem, 72(4), pp 998–1004 43 Swartzbaugh JT, Weisman A, Gabrera-Guzman D (1990), The use of electrokinetics for hazardous waste site remediation Journal of Air and Waste, Management Association, 40(12), pp 1670-1710 82 44 Tampouris S, Papassiopi N, Paspaliaris I (2001) Removal of contaminant metals from fine grained soils, using agglomeration, chloride solutions and pile leaching techniques, Journal of Hazardous Materials, 84(2-3), pp 297-616 45 Tokunaga S, Hakuta T (2002), Acid washing and stabilization of an artificial arsenic-contaminated soil, Chemosphere, 46(1), pp.31-77 46 Tsuyoshi sugio, Chitoshi domatsu, Tatsuo tano and Kazutami imai (1984) Role of Ferrous Ions in Synthetic Cobaltous Sulfide Leaching of Thiobacillus ferrooxidans American Society for Microbiology, 48, pp 461509 47 Vanessa Nessner Kavamura 1, Elisa Esposito (2010) ,Biotechnological strategies applied to the decontamination of soils polluted with heavy metals, Biotechnology Advances, 28, pp 61–89 48 Zhang YF, Sheng JC, Lu QY (2004), Review on the soil remediation technologies, Gansu Agricultural Science and Technology,10, pp 36-46 49 Zhou DM, Hao XZ, Xue Y, et al (2004), Advances in remediation technologies of contaminated soils, Ecology and Environmental Sciences, 13(2), pp 234-247 50 Zhou, Q., Bo, F., Hong Bo, Z (2007), Isolation of a strain of Acidithiobacillus caldus and its role in bioleaching of chalcopyrite, World Journal of Microbiology and Biotechnology, 9, pp.1217-1225 51 Wang DD, Li HX, Hu F, et al (2007), Role of earthworm-straw interactions on phytoremediation of Cu contaminated soil by ryegrass, Acta Ecologica Sinica, 27(4), pp 1292-1390 83 52 Wang HF, Zhao BW, Xu J, et al (2009), Technology and research progress on remediation of soils contaminated by heavy metals, Environmental Science and Management, 34(11), pp.15-49 53 Watanabe ME (1997), Phytoremediation on the brink of commercialization, Environmental Science & Technology, 31(4), pp 182-395 84 PHỤ LỤC Trình tự ADN vi khuẩn ưa axit phân lập A: Adenine G: Guanine C: Cystonine T: Thymine >Acidithiobacillus thiooxidans CATGCAGTTCGAACGGTAACAGGTCTTTCGGATGCTGACGAGTG GCGGACGGGTGAGTAAAGCGTAGGAATCTGTCTTTTAGTGGGGG ACAACCCAGGGAAACTTGGGCTAATACCGCATGAGCCCTGAGG GGGAAAGCGGGGGATCTTCGGACCTCGCGCTGAAAGAGGAGCC TGCGTCCGATTAGCTAGTTGGCGGGGTAAAGGCCCACCAAGGCG ACGATCGGTAGCTGGTCTGAGAGGACGACCAGCCACACTGGGA CTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAA TTTTTCGCAATGGGGGCAACCCTGACGAAGCAATGCCGCGTGGA TGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGTCCTTTCGTGGGGGACGAA AAGGCGGGTCCTAATACGGTCTGCTGTTGACGTGAACCCAAGAA GAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGA GGGTGCAAGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGGGCGCGT AGGCGGTACGTTAGGTCTGCCGTGAAATCCCCGGGCTCAACCTG GGAATGGCGGTGGAAACCGGCGCACTAGAGTATGGGAGAGGGT GATGGAATTCCAGGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATCTGGA GGAACATCAGTGGCGAAGGCGGTCACCTGGCCCAATACTGACG CTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTAGATACCCT GGTAGTCCACGCCCTAAACGATGAATACTAGATGTTTGGTGCTT AACGTGCTGAGTGTCGTAGCTAACGCGATAAGTATTCCGCCTGG GAAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGG CCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGATGCAACGCG AAGAACCTTACCTGGGCTTGACATGTCCGGAATCCTGCAGAGAT GTGGGAGTGCCCTTCGGGGAATCGGAACACAGGTGCTGCATGGC TGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAAC GAGCGCAACCCTTGTCCTTAGTTGCCAGCGGTTCGGCCGGGCAC TCTAGGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATG 85 ACGTCAAGTCCTCATGGCCTTTATGTCCAGGGCTACACACGTGC TACAATGGCGCGTACAGAGGGAGGCCAACCCGCGAGGGGGAGC AGACCCCAGAAAGCGCGCCGTAGTTCGGATTGCAGTCTGCAACT CGACTGCATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATG CCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCAC ACCATGGGAGTAGATTGTACCAGAAGCGGCTAGCTCAACCTTCG GGAGGGCGGTCACCACGGTATG >NKT: Acidithiobacillus thiooxidans TGCTACACATGCAGTCGAACGGCAGCACGGGTGCTTGCACCTGG TGGCGAGTGGCGGACGGGTGAGTAATGCGTAGGAATCTGTCCA ATAGTTTGGGACAACCCAGGGAAACTTGGGCTAATACCGGATAC GTCCTGAGGGAGAAAGCGGGGGATCTTCGGACCTCGTGCTATTG GAGGGGCCTACGTTCGATTAGCTAGTTGGCAGGGTAAGGGCCTA CCAAGGCGACGATCGATAGCTGGTCTGAGAGGACGATCAGCCA CACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCA GTGGGGAATTTTTCGCAATGGGGGCAACCCTGACGAAGCAATGC CGCGTGAATGAAGAAGGCCTTCGGGTTGTAAAGTTCTTTCGTGG GAGACGAAAAGGTAATCGCTAATATCGGTTACTGTTGACGTGAA CCCAAGAAGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGT AATACGGAGGGTGCGAGCGTTAATCGGAATCACTGGGCGTAAA GGGCGCGTAGGCGGTGGGTTACGTCTGCCGTGAAATCCCCGGGC TCAACCTGGGAATGGCGGTGGAAACGGGCTGACTAGAGTATGG GAGAGGGTGATGGAATTCCAGGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGA GATCTGGAGGAACATCAGTGGCGAAGGCGGTCACCTGGCCCAA TACTGACGCTGAGGCGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGGATTA GATACCCTGGTAGTCCACGCCCTAAACGATGGATACTAGATGTT TGGTGCCTTAGGTGCTGAGTGTCGTAGCTAACGTGATAAGTATC CCGCCTGGGAAGTACGGCCGCAAGGTTAAAACTCAAAGGAATT 86 GACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAT GCAACGCGCAGAACCTTACCTGGGCTTGACATCCAGAGAATCCT GCAGAGATGTGGGAGTGCCTTCGGGAACTCTGAGACAGGTGCTG CATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCC CGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCCTAGTTGCCAGCGGTTCGGCC GGGCACTCTAGGGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTG GGGATGACGTCAAGTCCTCATGGCCTTTATGTCCAGGGCTACAC ACGTGCTACAATGGCGCGTACAGAGGGAAGCGAGACCGCGAGG TGGAGCAGACCCCAGAAAGCGCGCCGTAGTTCGGATTGCAGTCT GCAACTCGACTGCATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATC AGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCC CGTCACACCATGGGAGTGGATTGTACCAGAAGCAGCTAGCCTAA CCTTCGGGGGGGCGGTACCACGGTA