Đang tải... (xem toàn văn)
Giao trinh tu tuong B� GIÁO D C VÀ ĐÀO T�O TRƯ�NG Đ�I H�C TÂY NGUYÊN TR�N TH� PHƯƠNG H�NH TÌM HI U S" T�O MÔ S$O VÀ PHÁT SINH HÌNH THÁI CÂY MƯ%P Đ&NG���������� � ������� L TRONG NUÔI C)Y �� ����� LU*N[.]
B GIÁO D C VÀ ĐÀO T O TRƯ NG Đ I H C TÂY NGUYÊN TR N TH PHƯƠNG H NH TÌM HI U S" T O MƠ S$O VÀ PHÁT SINH HÌNH THÁI CÂY MƯ%P Đ&NG L TRONG NUÔI C)Y LU*N VĂN TH C SĨ SINH H C BUÔN MA THU T, NĂM 2010 B GIÁO D C VÀ ĐÀO T O TRƯ NG Đ I H C TÂY NGUYÊN TR N TH PHƯƠNG H NH TÌM HI U S" T O MƠ S$O VÀ PHÁT SINH HÌNH THÁI CÂY MƯ%P Đ&NG l TRONG NUÔI C)Y Chuyên ngành: Sinh h c th c nghi m Mã s : 60.42.30 LU N VĂN TH%C SĨ SINH H(C Ngư5i hư8ng d;n khoa h?c: TS NguyDn Du Sanh BUÔN MA THU T, NĂM 2010 i L I CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên c u c a riêng Các s li u, k!t qu# nêu lu$n văn trung th'c chưa ñư)c cơng b b+t kỳ m-t cơng trình khác Ngư/i cam ñoan Tr n Th Phương H nh ii L I C M ƠN Đ hoàn t t lu n văn này, em xin chân thành c m ơn Th0y TS Nguy2n Du Sanh, ngư i th y ñã dìu d!t em t" nh#ng bu%i đ u em m'i t(t nghi)p đ+i h,c, t n tình hư'ng d-n, đ.ng viên lúc khó khăn, truy3n đ+t nh#ng ki4n th5c, nh#ng kinh nghi)m q báu q trình làm ñ3 tài h,c t p cu.c s(ng Su(t th i gian qua, th y ñã gi ng d+y cho em r t nhi3u ki4n th5c, em ngày hi u thêm có ni3m tin vào b n thân trình lên l'p Th0y TS Lê Thương, Cô TS Võ Th8 Phương Khanh, Cô Ths Nguy2n Th8 Thu, Th0y PGS.TS Nguy2n Anh Dũng, th0y cô B- môn SHCS, SHTN, SHTV ñã gi ng d+y, t n tình giúp ñ> t+o ñi3u ki)n thu n l?i cho em h,c t p công tác Th0y TS Phan Văn Tân, ñã gi ng d+y, bAi dư>ng nh#ng ki4n th5c sinh lý thCc v t, giúp em t p làm quen v'i nghiên c5u khoa h,c truy3n ñ+t kinh nghi)m s(ng th t b% ích Các th0y, H-i ñ@ng ñã ñ,c, nh n xét ñưa nh#ng ý ki4n quí báu v3 lu n văn Th0y PGS TS Bùi Trang Vi t, ñã t+o ñi3u ki)n thu n l?i th i gian em h,c t p làm lu n văn t+i trư ng Đ+i h,c KHTNTPHCM Th0y Hoang, cô Hương, cô Tú, cô Xuân, th0y Ki t, ch8 HiDn, anh Ki t, Ch8 Hương bEn lFp cao hHc K18, trư/ng ĐEi hHc KHTNTPHCM ñã giúp ñ> su(t th i gian làm lu n văn Ch8 Tuy!n, anh SM, ch8 Thanh, B n, Đ8nh, Vũ Duyên, anh Hu , Duyên anh ch8 lFp cao hHc SHTN K2 ñã ñ.ng viên, giúp ñ> trình h,c t p làm ñ3 tài t(t nghi)p Các th0y O phịng Đào tEo sau ĐEi hHc ñã t+o ñi3u ki)n thu n l?i th i gian h,c t p iii Cu(i cùng, xin chân thành c m ơn ñ4n ba Tư/ng, mQ Tham, mQ Đơng ln u thương, chăm sóc C m ơn gia đình ch8 Lan, gia ñình ch8 HRng C m ơn anh Th#o, ngư i b+n đ i ln M bên chia sN, đ.ng viên, giúp ñ> em C m ơn con, Anh Tu+n ni3m tin, thương yêu cho mO ph n ñ u Tr n Th Phương H nh iv DANH SÁCH CÁC CH 2,4RD : 2,4Rdichlorophenoxyacetic acid AIA : IndolR3acetic acid BA : Benzyladenine CĐHH : Cư ng đ hơ h p ĐTD : Đ(t tZ di)p (ñ(t thân mang tZ di)p) TD : TZ di)p HD : Tr] h+ di)p MS : Murashige Skoog (1962) GTTLT : Gia tăng tr,ng lư?ng tươi GTTLK : Gia tăng tr,ng lư?ng khô VI T T T v M CL C M! Đ"U Tính c p thi4t M]c tiêu cca ñ3 tài Ý nghĩa khoa h,c Ý nghĩa thCc tifn Chương T%NG QUAN TÀI LI)U 1.1Gi'i thi)u chung v3 mư'p ñ!ng 1.1.1 Vh trí phân lo+i 1.1.2 Đic tính sinh h,c 1.1.2.1 Mô t hình thái 1.1.2.2 Đi3u ki)n s(ng phân b( 1.1.2.3 Sâu b)nh 1.1.3 Thành ph n tác d]ng h?p ch t tC nhiên cca mư'p ñ!ng 1.2 SC t+o mơ sOo phát sinh hình thái 1.2.1 SC t+o mô sOo 1.2.2 SC phát sinh hình thái 1.2.3 Vai trị cca ch t đi3u hòa sinh trưMng thCc v t 1.2.3.1 Auxin 1.2.3.2 Cytokinin 10 1.2.3.3 SC ph(i h?p auxin cytokinin phát sinh quan 11 1.2.2.4 Giberelin 12 1.2.2.5 Acid abcisic (ABA) 12 1.2.2.6 Ethylen 12 1.2.3 M.t s( y4u t( khác nh hưMng ñ4n sC phát sinh hình thái thCc v t 13 1.2.3.1 Tu%i cca mô c y 13 vi 1.2.3.2 Ánh sáng 13 1.2.3.3 Nhi)t ñ 13 1.3 Tình hình nghiên c5u th4 gi'i nư'c 13 1.3.1 Tình hình nghiên c5u th4 gi'i 13 1.3.2 Tình hình nghiên c5u nư'c 15 Chương N+I DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊM C.U 2.1 N.i dung nghiên c5u 16 2.2 V t li)u nghiên c5u 16 2.3 Phương pháp nghiên c5u 18 2.3.1 Thí nghi)m khZ trùng m-u c y 18 2.3.2 Thí nghi)m t+o mơ sOo t" nguAn m-u cca mư'p đ!ng 18 2.3.3 Thí nghi)m t+o chAi t" mô sOo t+o rf t" nh#ng chAi thu nh n 24 2.3.4 Thí nghi)m kh thích 5ng cca ngồi vư n ươm 26 2.3.5 Đo cư ng đ hơ h p 26 2.3.6 XZ lý s( li)u 26 Chương K T QU 3.1 rnh hưMng cca nAng ñ ch t khZ trùng th i gian khZ trùng lên m-u h.t mư'p ñ!ng 27 3.2 SC t+o mô sOo 28 2.1 SC hình thành tăng trưMng mơ sOo t" nguAn m-u 28 3.2.1.1 SC hình thành tăng trưMng cca mơ sOo t" 28 3.2.1.2 SC hình thành tăng trưMng cca mô sOo t" l'p msng ñ(t tZ di)p 31 3.2.1.3 SC hình thành tăng trưMng cca mô sOo t" l'p msng tZ di)p 34 3.2.1.4 SC hình thành tăng trưMng cca mô sOo t" l'p msng tr] h+ di)p 37 3.2.2 SC thay đ%i hình thái q trình t+o mơ sOo 41 3.2.3 SC thay ñ%i cư ng ñ hô h p (CĐHH) theo th i gian cca mô sOo đư?c hình thành t" nguAn m-u 41 vii 3.2.3.1 SC thay đ%i cư ng đ hơ h p (CĐHH) theo th i gian cca mô sOo ñư?c hình thành t" 42 3.2.3.1 SC thay đ%i cư ng đ hơ h p (CĐHH) theo th i gian cca mơ sOo đư?c hình thành t" l'p msng đ(t tZ di)p 43 3.2.3.1 SC thay đ%i cư ng đ hơ h p (CĐHH) theo th i gian cca mơ sOo đư?c hình thành t" l'p msng tZ di)p 44 3.2.3.1 SC thay ñ%i cư ng ñ hô h p (CĐHH) theo th i gian cca mơ sOo đư?c hình thành t" l'p msng tr] h+ di)p 45 3.2.3 SC gia tăng tr,ng lư?ng tươi tr,ng lư?ng khơ cca mơ sOo đư?c hình thành t" nguAn m-u 47 3.3 SC phát sinh chAi 48 3.3.1 SC hình thành tăng trưMng cca c]m chAi t" mơ sOo 48 3.3.2 SC thay ñ%i hình thái trình phát sinh chAi 52 3.4 SC phát sinh rf 54 3.4.1 SC hình thành tăng trưMng rf 54 3.2.2 SC thay đ%i hình thái trình phát sinh rf 56 3.5 SC thích 5ng cca in vitro vư n ươm 57 Chương BI)N LU3N 4.1 SC hình thành mơ sOo 58 4.1.1 SC thay đ%i hình thái trình t+o sOo 58 4.2 Các bi4n ñ%i sinh lý trình hình thành mơ sOo 58 4.2 SC phát sinh chAi t" mô sOo cca mư'p ñ!ng 59 4.2.1 SC thay đ%i hình thái sC phát sinh chAi 59 4.3.3 Các bi4n đ%i sinh lý q trình phát sinh chAi 60 4.3 SC phát sinh rf t" chAi mư'p ñ!ng 61 4.3.1 rnh hưMng cca AIA sC phát sinh rf 61 4.3.2 SC thay đ%i hình thái trình phát sinh rf 61 Thí nghi+m 2: 0nh hư2ng c3a ch7t điQu hịa sinh trư2ng thSc vTt lên sS hình thành tăng trư2ng mơ sXo tY ngu4n mAu SS hình thành tăng trư2ng mô sXo tY !" # $ " - %% &%' (() % '(* +,+ %, ((' % / &) +, & !" '%& %% *) && )+ " %%+ % %%+ +) &%) - 2(( % / *( &) '(% +, % ,,& %% %)% ), , % %,* % %,* , ,2& + !" # # $ $ " - % +(, % * &% &,& + %) )) ((, / *) &) % 2&2 +, & )', %% &&2 (% %,% )2 % )2 %' ,%' ) !" # $ " - & )+( % / ,( &) & ,), +, & (') %% )& % , !" # $ " - & ()& % / )' &) + ++ +, + &)) (' )%, & &*% %+) 22 + )& & ' &() & %)2 , SS hình thành tăng trư2ng mơ sXo tY lDp m[ng ñCt t9 di@p !" # $ " - %% &*) (', % %* '(* % / &) +, & !" # $ (*) & ( %% %( ( +%+ % % % &,% % &%( " - + & ( % &% / )( &) & &,' +, % +*+ %% %&, +' 2*+ '2 % '2 &2 *2 %&( +( '2) + !" # $ " - / ** ) !" # $ " - / !" # $ " - % &) + % ), +, + &2' %% &(* %%, *)+ % & * () +&, %&2 ,&+ & + &)' 2& , % &'* % &) % + + ++ +, + *( %% +), % *( %' 2*2 +*% '* &+) *( + *%% % / % & &) + '(& +, 2&% ) '% % SS hình thành tăng trư2ng mô sXo tY lDp m[ng t9 di@p !" # $ % " %% *'* % - % *( %(+ % % / & &) + +, ', %% ' " +% % +% ( ('* ) - ,) % , % *,% %&2 *) &) + & !" # $ / + !" # $ " - 2'* 2, &, %2 +, ,(+ %% ,) %2 ) % % % + '% %* *+( ,'+ % ,' / *( &) + 2*& +, $ & ,% %% %'2 ,, %'( " %%& % %%& ++ %+& %() ,* +(, ) !" # - % (+( % / '% &) & %+& +, & %% %'* )) &) % 2& %) * , !" # $ " - 2& % ((' % / % & &) & %2& +, *&2 &( (& + & )2 (2, ) % SS hình thành tăng trư2ng mô sXo tY lDp m[ng hB di@p cFt d\c !" # $ " - %% *,* 2** % % '' + * *&) 2(, % / &) +, & !" # $ %, " * - %% %) 2*' % * + ,'+ ('* %)+ % %) / )( &) & %(( +, 2* %% 2% %' '** % %( , '22 & %*( + !" # $ " - %( *% &+ 2,% % 2, / ** &) + *)' +, ) %% ,, + +2 %% 2% % 2% + +2% *( + %+ ) !" # $ " - ,)+ % ,) / )+) &) %' % +' +, *&& %% 22 ) % ) , !" # $ " - *%' % *& / % & &) ) '&) +, + %, )+% (( %2 '*, ++ SS hình thành tăng trư2ng mơ sXo tY lDp m[ng hB di@p cFt ngang !" # $ " - %% *,* 2** % % '' + * *&) 2(, % / &) +, & !" # $ %, " * - %% %) 2*' % * + ,'+ ('* %)+ % %) / )( &) & %(( +, 2* %% 2% %' '** % %( , '22 & %*( + !" # $ " - %( *% &+ 2,% % 2, / ** &) + *)' +, ) %% ,, + +2 %% 2% % 2% + +2% *( + %+ ) !" # $ " - ,)+ % ,) / )+) &) %' % +' +, *&& %% 22 ) % ) , !" # $ " - *%' % *& / % & &) ) '&) +, + %, )+% (( %2 '*, ++ SS thay ñ]i CĐHH c3a mơ sXo có ngu4n gCc tY ni c7y mơi trư=ng có khơng b] sung auxin (2,4`D hay AIA) cytokinin (BA) theo th=i gian & !" # $ % " - / + !" # $ " - &)& ( %% %+' )+ %*) * &*' % * &*' &' &%+ (& (2+ ' %% 2& ), )) , %2 & % ,) % &( %2) '&& ( %' +%) 2' *(+ ) '** % ) '** %' +%( %,( (), ' %( ((+ *, % & / , +&) %* %)2 &( ' 2)+ ( ' (2 &) +%* " %& % %& +& *&* - 2' ,') ' ) !" # $ / !" # &22 ' ,*+ &+ &2, * +* & '' %+ &( ++ ,+) ( + *&2 %' %) " % +'+ % % +'+ , ,)' - &+ %,% ' & '() %) '( , & &,' $ / )% ' & +* 2)+ &( +2' & , SS thay đ]i CĐHH c3a mơ sXo có ngu4n gCc tY lDp m[ng đCt t9 di@p ni c7y mơi trư=ng có khơng b] sung auxin (2,4`D hay AIA) cytokinin (BA) theo th=i gian & !" # $ %2, ')( ( %' )&' ,* ) ) ))% % ))% % +*) %2, ) ' ' & 2*2 2) ) ' " - / )& %*& &* &( &'& +' ( +% +*2 '' *%+ &% (*' % &% (*' 2& %)+ &2 ) % ' +& ,, (& +, + !" # $ " - & +&% / * *+ &'( ),+ &( 2+ '% ( * ( & %%, (* % (* &* ',2 ,+ +*, ' 2*& %( %)' ) !" # $ " - / (2( , * !" # $ " - , & & +,) +)' &( , *(( ( , 2)) &, 2%& ( 2%, % ( 2%, )+ 2+% )% %') ' , %)' &+ +2 / )) ' & ,, & * &( && &,, SS thay ñ]i CĐHH c3a mơ sXo có ngu4n gCc tY lDp m[ng t9 di@p ni c7y mơi trư=ng có khơng b] sung auxin (2,4`D hay AIA) cytokinin (BA) theo th=i gian & !" # $ " - / + !" # $ " - ** +)2 ( ' ,() +, ,%2 & %2, % & %2, ' ()2 *, %'% ' ( +(' +' '+* ) ') & '& %', &( '+ 2), ( ( &() + &** % ,(* % % ,(* ,& % '& )' ' % &,2 ++ )%% &)& / %+( & '( *') &( %' ''' ( & (( *++ %&* % %&* ) * %' *2% ' & +), * ,&+ ) !" # $ " - * +) + * ,+% / &+) & &, %&& &( ' &++ ( (%, ) ,,+ & (' % (' )'* )(+ ' %+, ' % %* , 2% & , !" # $ " - / ) %' & %& &,% &( +%& & % SS thay ñ]i CĐHH c3a mơ sXo có ngu4n gCc tY lDp m[ng tra hB di@p cFt d\c di@p ni c7y mơi trư=ng có không b] sung auxin (2,4`D hay AIA) cytokinin (BA) theo th=i gian & !" # $ " - %, '&& ( % *,' &') % &') %, ,+' ' % ()& ) ++2 * & % '% ( & &+ (+% &( &% ,+* ( & +(+ , 2(2 %)* % %)* +,% &% +'( ' & 2*) +2) !" # $ " - / ') + ) &( () !" # $ " - & ) , &( +)* ( * , &) ( & * % & * * * ' *2* & 2&% +' +), %) , ',, & %& & & &( + ()+ ( )+' %& &'% % &'% **& + 22+ ' ),' !" # $ " - ,2 )& / , )%+ ) *( / + + / * &2' & %% &%% &( )( )% &(+ +2+ % &2 +( +%' Thí nghi+m 3: nh hư/ng c1a ch2t đi3u hịa sinh trư/ng lên s6 hình thành ch9i "5 !" # $ +(&) ))) %) &' +%* " %&2& (*2 - &22% )2' %+ & ) *&' / )*++ +++ + %,* **' '2,* **' )) ,& +%% %) + *+* )& +2 * )+ % * )+ '+ ,', )) ''% %+ + ),& +' ') / & 22* + ,) (*' )) "5 !" # $ " - % %&2& (*2 % *** ' (% , ' % &(' &2' '( Thí nghi+m 4: nh hư/ng c1a ch2t đi3u hịa sinh trư/ng lên s6 hình thành r; !" # $ " - / - ,&( & )*2+ *++ '2 22* "5 ,&(& (++ ,+*( !" # ) %+&+ &++ % %,& 2'% ,&( & 2% 2& + %,'* (%% %'+ &&% % ' 22* %) $ +* ,'' ) ( +(* 2* ) ) " +2 ++, % +2 ++, &2 2+% % &,+ + )%' & ((, - / % +() % +' ('& %) %+( '& SS thay đ]i CĐHH c3a mơ sXo có ngu4n gCc tY lDp m[ng tra hB di@p cFt ngang theo th=i gian ni c7y mơi trư=ng có không b] sung auxin (2,4`D hay AIA) cytokinin (BA) theo th=i gian & !" # $ %& +*( " - / %% '%' % + ,2 !" # $ " - +, ( % +*, & *)% &( % ,2 % %%2 + + ' % )** & ()) &) & , & && )%) &( %) 2(& ( % 2+& 2+ ' % ,&' % % ,&' ,( , %+ %2) ' % 2), +,' &, / , %*2 & %( '2* &( + *&+ ( )%) % %' +,( 2&( % 2&( % *(+ %(2 + () ' +'* %% + ) & ) !" # $ " - &,( / * %% & % *+) &( % ('2 ( &&% % ,(' %'+ +2( % +2( & 2* %%' % 2%* ' & & % )2) &+& , !" # $ " - / & *2& & ) *)' &( +,% %+' BMT, năm 2010 Ngư i th6c hi+n Trbn Thc Phương HBnh Ngư i hư=ng d>n khoa h?c Ch1 t@ch hAi ñ9ng TS Nguyen Du Sanh TS Võ Thc Phương Khanh 51 TÀI LI U THAM KH O Ti ng Vi t Nguy n Minh Đ c, Tr n Th Vy C m (2002), “kh o sát hoá h$c h%p ch't có tác d*ng sinh h$c t+ h,t mư.p ñ0ng”, Nghiên c u y h c, Y h c Thành ph H Chí Minh, t1p 6(1) Dương Cơng Kiên (2003), Nuôi c y mô th c v t II, Nhà xu't b n Đ,i h$c Qu=c Gia TP HCM Võ Th B,ch Mai (2004), S phát tri$n ch i r%, Nhà xu't b n Đ,i h$c Qu=c Gia TP HCM Dương T'n NhEt (2007), Công ngh& sinh h c th c v t công tác nhân gi ng ch n t*o gi ng hoa, Nhà xu't b n Nông NghiGp Dương T'n NhEt (2010), M,t s phương pháp, h& th ng m/i nghiên c u Công ngh& sinh h c th c v t, Nhà xu't b n Nông NghiGp Nguy n Du Sanh (1999), S tăng trư1ng c2 c3 ng (Panicum repens L.), lu1n án tiLn sĩ Sinh h$c, Đ,i h$c Qu=c Gia TP HCM Mai Tr n Ng$c TiLng (2001), Th c v t c p cao, Nhà xu't b n Đ,i h$c Qu=c Gia TP HCM ViGn Dư%c liGu (1990), Cây thu c Vi&t Nam, Nhà xu't b n Khoa h$c KP thu1t, Hà NQi 10 Bùi Trang ViGt (2000), Sinh h c t9 bào, Nhà xu't b n Đ,i h$c Qu=c Gia TP HCM 11 Bùi Trang ViGt (2000), Sinh lý th c v t ñ*i cương, ph>n 2: Phát tri$n, Nhà xu't b n Đ,i h$c Qu=c Gia TP HCM Ti ng Anh 12 Agarwal M., Kamal R.(2006), ”Studies on flavonoid production using in vitro cultures of Momordica charantia L”, Department of Botany, Government P G College, Chimanpura, Jaipur, India, 52 www.cababstractsplus.org/abstracts/Abstract.aspx?AcNo=20073097823 – 13 Al Munsur1 M.A.Z., Haque M.S., Nasiruddin K.M and Hossain M.S (2009), ”In vitro Propagation of Bitter Gourd (Momordica charantia L.) from Nodal and Root Segments”, Department of Biotechnology, Bangladesh Agricultural University,Mymensingh, Bangladesh, baptcb.org/ptc/Full_article/ptc19_1_05.pdf 14 Begley TP., Mean A.R.,O’Malley B.W., Riddiford L., Tashjan A.H (2005), Plant Hormon, Publish by Springer Protocols, London 15 George E.F., Hall M.A and Klerk GdJ (2008), Plant Propagation by Tissue Culture 3rd Edition Springer, The Netherland 16 George E.F., Puttock D.J.M and George H.J (1987), Plant culture media, Fomulations and USAS, vol 17 Li Z (2004), “Study on the inducing callus of Momordica charantia L and optimizing the culture conditions”, Coll Of biological engineering, Xihua University, China.jst.go.jp/F/C2433A/07A1159304.html Z 9k – 18 Taiz L., Zeiger E (1991), Plant Physiology, The Benjamin/Cumming Publising Company, Inc California, 565p 19 Thiruvengadam M., varisai mohamed S., yang C H., javabalan N (2006), “Development of an embryogenic suspension culture of bitter melon (Momordica charantia L.)”, cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=17799260 Z 20 Yang M., Zhao M., Zeng Y., Lan L., Chen F (2004), “Establishment of in vitro regeneration system of bitter melon (Momordica charantia L.)”, cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=15814890 – 21 www.asuzacfoods.com.vn/Khoqua.htm 22 www.cimsi.org.vn/tapchi/Duoclieu/2002/so5.htm Z 23k 22 www.medinet.hochiminhcity 24 www nhandan.org.vn/tinbai/ 21 53 25 www.pharmedicsa.com/upload/bantin/22Z9/006.htm 26 rnd.vista.gov.vn:9000/ /kq_chitiet_du.asp? 27.www.suckhoedoisong.vn/ /sandxuatdthuocdtudnguondgocdthiendnhienddidtatd 28 vi.wikipedia.org/ /Chi_Mư/p_ñang 29 http://en.wikipedia.org/wiki/Plant_morphogenesis