Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.

Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.Nghiên cứu độ an toàn và hiệu quả của chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua chỉ tiêu về độc tính và chỉ số miễn dịch IgA trên động vật thực nghiệm.

i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài nghiên cứu luận văn cơng trình nghiên cứu dựa tài liệu, số liệu tơi tự tìm hiểu nghiên cứu Chính vậy, kết nghiên cứu đảm bảo trung thực khách quan Đồng thời, kết chưa xuất nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực sai tơi hồn chịu trách nhiệm Tác giả Tạ Thị Ngọc Anh ii LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng, lời cảm ơn sâu sắc đến TS Hoàng Văn Vinh PGS TS Phí Quyết Tiến – người thầy tận tâm hướng dẫn, dạy tận tâm, động viên tạo điều kiện thuận lời cho suốt thời gian học tập trình làm việc Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học, Đại học quốc gia Hà Nội Tôi xin cảm ơn ban lãnh đạo Viện đồng nghiệp phòng Sinh học Phân tử Ứng dụng, Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học, ĐHQGHN tạo điều kiện giúp đỡ, truyền kinh nghiệm, đưa lời khun chân thành góp ý bổ ích suốt thời gian tơi hoạt động nghiên cứu phịng Tơi xin trân trọng cảm ơn ban Lãnh đạo Học viện, thầy, cô giáo thuộc Khoa Công nghệ sinh học Phịng Đào tạo Học viện Khoa học Cơng nghệ, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện cho tơi q trình học tập Học viện Luận văn hoàn thành Viện Vi sinh vật Công nghệ Sinh học, ĐHQGHN phối hợp nghiên cứu Trung tâm nghiên cứu y dược học Quân sự, Học viện Quân Y Luận văn hỗ trợ kinh phí thực nằm khuôn khổ đề tài khoa học công nghệ cấp quốc gia "Nghiên cứu đánh giá vai trò cải thiện tích cực hệ vi sinh vật đường ruột tăng cường miễn dịch chế phẩm probiotic”, mã số ĐTĐL.CN-61/19 Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn tới tồn thể gia đình, người thân bạn bè quan tâm, khích lệ, động viên tơi trình học tập nghiên cứu iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 CHẾ PHẨM PROBIOTIC 1.1.1 Định nghĩa lịch sử nghiên cứu probiotic 1.1.2 Tiêu chuẩn chủng vi sinh vật sử dụng để phát triển probiotic 1.1.3 Chế phẩm BaciMix 1.1.4 Tình hình nghiên cứu chế phẩm probiotic chứa chi Bacillus 1.2 ĐÁNH GIÁ TÍNH AN TỒN CỦA CHẾ PHẨM PROBIOTIC TRÊN MƠ HÌNH ĐỘNG VẬT 1.2.1 Mơ hình động vật thí nghiệm 1.2.2 Thử nghiệm độc tính cấp 10 1.2.3 Thử nghiệm độc tính bán trường diễn 11 1.3 VAI TRỊ KÍCH THÍCH MIỄN DỊCH CỦA CHẾ PHẨM PROBIOTIC 12 1.3.1 Vai trò probiotic với hệ miễn dịch 12 1.3.2 Chỉ số kháng thể miễn dịch Ig A 14 CHƯƠNG PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 17 2.1.1 Chế phẩm nghiên cứu 17 2.1.2 Động vật thí nghiệm 17 2.1.3 Hóa chất thiết bị nghiên cứu 17 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.2.1 Sơ đồ nghiên cứu 18 iv 2.2.2 Phương pháp xác định độc tính cấp 19 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu độc tính bán trường diễn 20 2.2.4 Thí nghiệm đánh giá IgA mơ hình chuột khỏe mạnh chuột bị tiêu chảy 22 2.2.5 Phương pháp xác định số Immoglubin A 24 2.2.6 Xử lý kết phân tích thống kê 26 CHƯƠNG KẾT QUẢ 27 3.1 KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH CẤP 27 3.1.1 Kết theo dõi lâm sàng 27 3.1.2 Kết theo dõi khối lượng thể chuột 28 3.1.3 Quan sát dấu hiệu ngộ độc 29 3.1.4 Kết mô bệnh học 30 3.2 KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM ĐỘC TÍNH BÁN TRƯỜNG DIỄN 31 3.2.1 Kết theo dõi tình trạng chung 31 3.2.2 Kết khối lượng thể 31 3.2.3 Kết huyết học 32 3.2.4 Kết sinh hóa 36 3.2.5 Kết mô bệnh học 42 3.3 ẢNH HƯỞNG CỦA CHẾ PHẨM BACIMIX TỚI CHỈ SỐ KHÁNG THỂ IgA 45 3.3.1 Ảnh hưởng đến số IgA mơ hình chuột khỏe mạnh 46 3.3.2 Ảnh hưởng đến số IgA mơ hình chuột bị tiêu chảy kháng sinh 47 3.3.3 Kết mô bệnh học đường ruột chuột 48 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 52 PHỤ LỤC 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 61 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Tên đầy đủ Tên tiếng Việt CFU Colony-Forming Unit Đơn vị hình thành khuẩn lạc DNA Deoxyribonucleic acid Axit deoxyribonucleic ĐVTN Động vật thí nghiệm EFSA European Food Safety Authority Cơ quan An toàn thực phẩm châu Âu FAO Food and Agriculture Organisation Tổ chức lương thực nông nghiệp liên hợp quốc FDA Food and Drug Administration Cục quản lý Thực phẩm Dược phẩm Hoa kỳ GRAS General Recornized as Safe PCR Polemerase Chain Reaction VSV WHO Phản ứng chuỗi polymerase Vi sinh vật World Health Organization Tổ chức Y tế giới vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thơng tin chủng có chế phẩm BaciMix Bảng 1.2 Ngoại suy liều tương đương loài Bảng 2.1 Động vật thí nghiệm 17 Bảng 2.2 Thời điểm nội dung xét nghiệm 18 Bảng 2.3 Thí nghiệm độc tính cấp 19 Bảng 2.4 Thí nghiệm độc tính bán trường diễn 21 Bảng 2.5 Thí nghiệm đánh giá IgA mơ hình chuột khỏe mạnh 22 Bảng 2.6 Thí nghiệm đánh giá IgA mơ hình chuột tiêu chảy 23 Bảng 3.1 Theo dõi lâm sàng chuột thử nghiệm độc tính cấp 27 Bảng 3.2 Mô bệnh học gan chuột cống trắng 44 Bảng 3.3 Mô bệnh học thận chuột cống trắng 44 Bảng 3.4 Mô bệnh học lách chuột cống trắng 45 Bảng 3.5 Mô bệnh học ruột chuột cống trắng 49 vii DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Sơ đồ hướng dẫn FAO/WHO (2001) cho chủng vi sinh vật probiotic dùng cho thực phẩm Hình 1.2 Chế phẩm BaciMix Hình 1.3 Minh họa chế tác động probiotic đến đường ruột 13 Hình 1.4 Cấu trúc trình hình thành IgA tiết 15 Hình 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 18 Hình 2.2 Hình ảnh chuồng ni phân lơ thử nghiệm 20 Hình 2.3 Hình ảnh chuột cống trắng khỏe mạnh lô nghiên cứu đánh giá IgA 22 Hình 2.4 Hình ảnh lấy máu vị trí tim chuột thí nghiệm 24 Hình 2.5 Hình ảnh minh họa xử lý mẫu máu 24 Hình 2.6 Hình ảnh mổ giải phẫu chuột 24 Hình 2.7 Hình ảnh ruột chuột 24 Hình 2.8 Bộ Kit IgA ELISA đặc hiệu chuột 25 Hình 3.1 Khối lượng thể chuột nhắt trắng biểu 28 Hình 3.2 Phần trăm tăng khối lượng chuột nhắt trắng 29 Hình 3.3 Hình ảnh đại thể gan, lách, thận chuột cống nghiên cứu 30 Hình 3.4 Khối lượng thể chuột 28 ngày 31 Hình 3.5 Số lượng hồng cầu chuột cống trắng 32 Hình 3.6 Số lượng huyết sắc tố chuột cống trắng 33 Hình 3.7 Số lượng bạch cầu chuột cống trắng 34 Hình 3.8 Số lượng tiểu cầu chuột cống trắng 35 Hình 3.9 Hoạt độ AST chuột cống trắng 37 Hình 3.10 Hoạt độ ALT chuột cống trắng 38 Hình 3.11 Nồng độ Bilirubin chuột cống trắng 39 Hình 3.12 Nồng độ cholesterol chuột cống trắng 40 Hình 3.13 Nồng độ creatinin chuột cống trắng 41 Hình 3.14 Hình ảnh đại thể gan, lách, thận chuột cống nghiên cứu 42 Hình 3.15 Hình ảnh mô bệnh học gan, lách, thận chuột cống nhóm nghiên cứu 43 Hình 3.16 Hàm lượng IgA chuột cống trắng 46 Hình 3.17 Hàm lượng IgA chuột cống trắng bị tiêu chảy 47 Hình 3.18 Hình ảnh mơ bệnh học manh tràng chuột cống 48 MỞ ĐẦU Ngày nay, việc sử dụng chế phẩm sinh học, bao gồm chế phẩm probiotic, để hỗ trợ cho điều trị số bệnh đường tiêu hoá số bệnh lý khác ngày phổ biến Chế phẩm probiotic biết đến chế phẩm chứa vi sinh vật sống, sử dụng với lượng thích hợp, mang lại lợi ích sức khỏe cho vật chủ Chi Bacillus chi vi sinh vật nghiên cứu sử dụng vai trò probiotic nhiều Trong đó, hai lồi Bacillus subtilis Bacillus coagulans đánh giá theo tiêu theo khuyến cáo FAO/ WHO chủng vi sinh vật sử dụng vai trò probiotic nhiều nghiên cứu Các chủng thuộc loài xem lựa chọn lý tưởng để phát triển chế phẩm probiotic khả tạo bào tử tồn mơi trường khắc nghiệt hệ tiêu hóa điều kiện cần sử dụng nhiệt độ cao Các chế phẩm probiotic chứa đơn chủng đa chủng vi sinh vật nghiên cứu phát triển ứng dụng lĩnh vực chăm sóc bảo vệ sức khỏe Để có tác dụng mong muốn, chế phẩm probiotic phải đáp ứng số yêu cầu cần thiết tính an tồn, mật độ lợi khuẩn, độ sống sót, khơng bị tạp nhiễm… Tuy nhiên, nghiên cứu chế phẩm probiotic đa chủng Việt Nam tính an tồn hiệu sử dụng cịn khiêm tốn Kế thừa kết nghiên cứu trước (tuyển chọn chủng vi khuẩn probiotic Bacillus subtilis Bacillus coagulans lên men thu sinh khối hai chủng vi khuẩn Viện Vi sinh vật Công nghệ sinh học, Đại học Quốc gia Hà Nội), tiến hành thực luận văn “Nghiên cứu độ an toàn hiệu chế phẩm probiotic đa chủng BaciMix thông qua tiêu độc tính số miễn dịch IgA động vật thực nghiệm” nhằm cung cấp thông tin tính an tồn phần hiệu chế phẩm mơ hình động vật thí nghiệm hướng tới mục tiêu ứng dụng chế phẩm thực tế Mục tiêu luận văn: Đánh giá độ an toàn hiệu chế phẩm probiotic mơ hình động vật thí nghiệm sử dụng chế phẩm probiotic BaciMix gồm hai loài Bacillus subtilis BS 304.04 Bacillus coagulans BC 304.06 Nội dung luận văn bao gồm: Nghiên cứu, đánh giá độc tính cấp độc tính bán trường diễn mơ hình động vật thực nghiệm sử dụng chế phẩm probiotic BaciMix (gồm hai loài B subtilis BS 304.04 B coagulans BC 304.06) Xác định biến động số Immunoglobulin A huyết động vật thực nghiệm sử dụng chế phẩm probiotic BaciMix CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 CHẾ PHẨM PROBIOTIC 1.1.1 Định nghĩa lịch sử nghiên cứu probiotic Probiotic tiếng Hy Lạp, theo FAO/WHO (2001) gồm vi sinh vật sống, đưa vào thể với số lượng thích hợp có lợi cho sức khỏe vật chủ [1] Những nghiên cứu probiotic bắt đầu vào kỷ 20 Vào năm 1900, bác sỹ người Pháp tên Henry Tisser quan sát thấy phân đứa trẻ mắc bệnh tiêu chảy có vi khuẩn lạ hình trứng hình chữ Y đứa trẻ khỏe mạnh Sau năm 1907, Elie Metchnikoff – nhà khoa học người Nga đạt giải Nobel chứng minh việc tiêu thụ Lactobacillus hạn chế nội độc tố hệ vi sinh vật đường ruột [2] Năm 1930, nhà khoa học người Nhật tên Minoru Shirota phân lập vi khuẩn lactic từ phân em thiếu nhi khỏe mạnh Cùng năm đó, nhà khoa học đại học Havard phát vi khuẩn đường ruột đóng vai trị định q trình tiêu hóa, giúp tiêu hóa thức ăn, cung cấp số vitamin chất dinh dưỡng khác mà thể vật chủ không tự sản xuất Sau năm, đồ uống lên men – đặt tên “Yakult” từ sữa cho hỗ trợ sức khỏe đường ruột (intestinal health) sản xuất Khái niệm chung probiotics phổ biến Châu Á nhiều năm sản phẩm lên men từ sữa probiotic giới thiệu Châu Âu vào năm 80 kỉ 20 [2] 1.1.2 Tiêu chuẩn chủng vi sinh vật sử dụng để phát triển probiotic Có yêu cầu quan trọng cho chủng vi khuẩn probiotic theo khuyến cáo FAO/WHO (Food and Agriculture Organisation/ World Health Organization) là: (i) an tồn; (ii) chủng vi sinh vật tồn phát triển hệ tiêu hóa vật chủ; (iii) ức chế vi sinh vật có hại cho vật chủ; (iv) chủng vi sinh vật làm tăng hiệu trao đổi chất khả miễn dịch vật chủ [1] An toàn: Một yêu cầu tiên vi sinh vật probiotic phải an toàn cho vật chủ Theo khuyến cáo tổ chức y tế giới (WHO), vi sinh vật an toàn cho sản xuất probiotic cần có nguồn gốc, tên khoa học rõ ràng 50 sinh (P < 0,05) Ngoài ra, theo Adrian C nhóm nghiên cứu phân tích mô bệnh học tất lô chuột cho thấy, lơ chuột bị bệnh có mơ ruột tổn thương nghiêm trọng lô chuột điều trị mô ruột bị tổn thương giảm [36] Trong kết hình ảnh chúng tơi lơ nghiên cứu chưa thấy khác biệt rõ rệt báo cơng bố Điều giải thích nghiên cứu Adrian C kéo dài 11 ngày nên kết mô ruột tổn thương rõ ràng nghiên cứu kéo dài ngày Nghiên cứu Siegfried H nhóm nghiên cứu (2016) cho thấy nhiều chủng probiotic lợi khuẩn kích thích sản sinh IgA thơng qua tế bào B, giúp trì khả miễn dịch dịch thể cách liên kết với kháng nguyên IgA huyết tăng khoảng 10% sau động vật thí nghiệm cho uống chế phẩm probiotic [24] Kết nghiên cứu của cho thấy số IgA tăng lô cho uống chế phẩm probiotic Cụ thể, mơ hình chuột khỏe mạnh, IgA máu lô trị, lô đối chứng lô chứng 6,67 (ng/ml), 6,43 (ng/ml) 3,02 (ng/ml) (Giá trị lô trị lô đối chứng tương đương cao 2,2 lần so với lô chứng) IgA ruột lô trị, lô đối chứng lô chứng 0,37 (ng/ml), 0,42 (ng/ml) 0,11 (ng/ml) (giá trị lô trị xấp xỉ lô đối chứng gấp 3,3 lần lô chứng) Mặc dù chênh lệch IgA ruột lô nhỏ sợ chênh lệch IgA máu lô chênh lệch có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Năm 2022, tác giả Somaye M cộng có nghiên cứu tổ hợp chế phẩm chứa B subtilis B coagulans mơ hình chuột nhiễm khuẩn đường ruột Kết nghiên cứu đưa sau ba tuần chuột bị bệnh uống chế phẩm dấu hiệu bệnh giảm, không nhữngtác động mầm bệnh mô bệnh học giảm mà quần thể vi sinh vật ruột cịn trì [38] Kết chúng tơi hồn tồn tương đồng với kết nhóm David S cs (2022) tác giả thử nghiệm chế phẩm tổ hợp chế phẩm Bacillus chứa B subtilis B coagulans mơ hình chuột (khỏe mạnh vàrối loạn tiêu hóa kháng sinh Vancomycin) xét nghiệm số IgA máu ruột bẳng kit ELISA giống với nghiên cứu Kết rằng, trình sử dụng chế phẩm probiotic tế bào B T 51 có di chuyển tăng số IgA dẫn đến tăng khả bảo vệ khỏi rối loạn VSV đường ruột kháng sinh [36] Như vậy, kết số IgA máu, ruột hình ảnh mơ bệnh học cho thấy, chế phẩm BaciMix có kích thích tích cực số miễn dịch không gây tổn thương đường ruột 52 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ - Chế phẩm BaciMix chưa xác định LD50 chuột nhắt trắng với liều cao 400x109 CFU/kg/24h chế phẩm không gây độc đường uống - Chế phẩm BaciMix cho chuột cống trắng theo đường uống 28 ngày không tác động đến tăng trọng chuột thí nghiệm tất liều nghiên cứu Các số huyết học, hóa sinh nằm giới hạn cho phép, hình ảnh giải phẫu gan, thận lách khơng có sai khác so với đối chứng - Chế phẩm BaciMix chuột cống trắng theo đường uống với liều 1,68x109/kgTLC /24h (ngoại suy liều người 6x109 CFU/50kg/24h) làm tăng lượng IgA máu niêm mạc ruột chuột khỏe mạnh Hình ảnh giải phẫu ruột khơng xuất tổn thương Chế phẩm BaciMix chuột cống trắng theo đường uống với liều 1,68 x109 CFU/kg thể trọng chuột mơ hình chuột bị tiêu chảy kháng sinh làm tăng số IgA máu niêm mạc ruột 53 KIẾN NGHỊ - Đánh giá tính an tồn sử dụng lâu dài số lượng mẫu lớn hơn, thời gian theo dõi dài 60 ngày 90 ngày; - Đánh giá thêm hiệu kích thích miễn dịch sử dụng qua số kháng thể miễn dịch khác chế phẩm BaciMix mơ hình động vật từ làm sở cho đánh giá người 54 PHỤ LỤC Bảng Kết theo dõi khối lượng thể chuột lơ Lơ ĐC Khối lượng trung bình chuột thí nghiệm (XFĐ) 17,50,84 Ngày Ngày Ngày P Ngày 13 18,000,94 19,301,49 20,501,58 23,302,31 >0,05 18,001,05 18,201,03 20,001,33 21,301,25 24,402,17 >0,05 18,001,43 18,401,43 21,101,73 21,401,84 23,802,39 >0,05 18,100,99 18,300,95 20,101,37 21,561,27 24,101,97 Bảng Kết tỷ lệ % tăng cân nặng chuột nhắt trắng lơ Khối lượng trung bình chuột thí nghiệm P Lơ Liều XFĐ Ngày Ngày Ngày Ngày 13 ĐC 100 2,86 10,29 17,14 33,14 >0,05 100x109 100 1,11 11,11 18,33 35,56 >0,05 200x109 100 2,22 11,67 18,89 32,22 >0,05 400x109 100 1,10 11,05 18,78 33,15 >0,05 Bảng Trọng lượng chuột cống trắng Chỉ tiêu Thời điểm XFĐ (a) Cân Sau 02 tuần nặng (b) (g) Sau 04 tuần (c) Pa-b,b-c,c-a Chứng (1) 157,90 ± 26,53 198,60 ± 15,41 214,00 ± 13,26 0,05 8,32 ± 0,47 8,11± 0,48 8,17 ± 0,57 >0,05 Pa-b,b-c0,05 Pa-b,b-c0,05 Pa-b,b-c0,05 Chứng (c) Pa-b,b-c,c-a Bảng Lượng huyết sắc tố chuột cống trắng Chỉ tiêu HGB (G/dL) Thời điểm XFĐ (a) Sau 02 tuần (b) Sau 04 tuần (c) Pa-b,b-c,c-a Lô ( X ± SD), n = 10 P1-2,2Lô trị Lô trị Chứng 3,3-1 (1,68 x109 (8,4 x109 (1) CFU/kg) (2) CFU/kg) (3) 15,68 ± 0,97 15,74±0,93 15,65±1,14 >0,05 13,6 ± 0,87 13,72±0,82 14,05±0,55 >0,05 15,01 ± 0,83 14,56 ± 0,77 15,59 ± 0,88 >0,05 Pa-b,bc0,05 Pa-b,bc0,05 8,05 ± 1,81 6,87± 1,27 6,72 ± 0,96 Pa-c 0,05 Pa-b>0,05 Bảng Số lượng tiểu cầu chuột cống trắng Chỉ tiêu Tiểu cầu (G/L) Thời điểm XFĐ (a) Sau 02 tuần (b) Sau 04 tuần (c) Pa-b,b-c,c-a Nhóm nghiên cứu ( X ± SD), n = 10 Lô trị Lô trị Chứng (1,68 x10 (8,4 x109 (1) CFU/kg) (2) CFU/kg) (3) 403,6 ± 438,2±158,79 456,9±161,16 79,19 538,5 ± 538,9±93,99 574,2±95,78 125,76 528,3 ± 114,10 490,7 ± 124,27 524 ± 75,49 Pa-b,a-c0,05 Pa-b0,05 Pa-b0,05 P1-2,2-3,3-1 >0,05 >0,05 >0,05 57 Bảng Hoạt độ AST chuột cống trắng Chỉ tiêu AST (U/l) Thời điểm XFĐ (a) Sau 02 tuần (b) Sau 04 tuần (c) Pa-b,b-c,c-a Nhóm nghiên cứu ( X ± SD), n = 10 Lô trị Lô trị Chứng (1,68 x10 (8,4 x109 (1) CFU/kg) (2) CFU/kg) (3) 115,00 ± 108,07±20,26 102,14±18,33 48,85 122,61 ± 123,56±22,16 113,09±18,93 31,72 108,31 ± 25,45 120,21 ± 20,49 108,09 ± 23,9 >0,05 >0,05 >0,05 P1-2,2-3,3-1 >0,05 >0,05 >0,05 Bảng Hoạt độ ALT chuột cống trắng Chỉ tiêu Thời điểm ALT (U/l) XFĐ (a) Sau 02 tuần (b) Sau 04 tuần (c) Pa-b,b-c,c-a Nhóm nghiên cứu ( X ± SD), n = 10 Lô trị Lô trị Chứng (8,4 x109 (1,68 x10 (1) CFU/kg) CFU/kg) (2) (3) 37,19±7,8 31,94 ± 9,67 33,41±14,43 67,37±12, 70,47 ± 13,12 66,49±17,94 20 52,06 ± 25,90 67,93 ± 16,04 53,86 ± 10,63 Pa-b,a-c 0,05 Pa-b,a-c 0,05 Pa-b,a-c 0,05 >0,05 58 Bảng 10 Nồng độ Bilirubin chuột cống trắng Chỉ tiêu Thời điểm XFĐ (a) Bilirubin (umol/L) Sau 02 tuần (b) Sau 04 tuần (c) Pa-b,b-c,c-a Nhóm nghiên cứu ( X ± SD), n = 10 Lô trị Lô trị Chứng (1,68 x109 (8,4 x109 (1) CFU/kg) CFU/kg) (3) (2) 2,52 ± 3,32±1,46 3,79±1,61 1,30 3,82 ± 3,38±0,72 3,52±0,55 0,57 2,75 ± 0,67 2,81 ± 0,37 2,95 ± 0,36 Pa-c,b-c Pb-c 0,05 a-c,a-b Pb-c0,05 P1-2,2-3,3-1 >0,05 >0,05 >0,05 Bảng 11 Nồng độ cholesterol chuột cống trắng Chỉ tiêu nghiên cứu Cholester ol (mmol/L) Thời điểm Xét nghiệm Nhóm nghiên cứu ( X ± SD), n = 10 P12,23,3-1 Chứng (1) Lô trị (1,68 x109 CFU/kg) (2) Lô trị (8,4 x109 CFU/kg) (3) XFĐ (a) 1,44 ± 0,13 1,54±0,33 1,49±0,33 >0,05 Sau 02 tuần (b) 1,31 ± 0,18 1,32±0,26 1,28±0,24 >0,05 Sau 04 tuần (c) 1,61 ± 0,35 1,44 ± 0,26 1,53 ± 0,16 >0,05 Pa-b,bc0,05 Pa-b0,05 Pb-c0,05 Pa-b,b-c,c-a 59 Bảng 12 Nồng độ creatinin chuột cống trắng Lô ( X ± SD), n = 10 Chỉ tiêu Thời điểm XFĐ (a) Creatini n (µmol/L Sau 02 tuần (b) ) Sau 04 tuần (c) Pa-b,b-c,c-a Chứng (1) Lô trị (1,68 x109 CFU/kg) (2) Lô trị (8,4 x109 CFU/kg) (3) 42,31 ± 2,93 40,81±3,55 41,78±10,6 >0,05 44,62 ± 4,5 46,74±5,37 44,25±4,80 >0,05 69,86 ± 6,20 68,65± 5,48 64,82 ± 4,53 >0,05 Pa-c,b-c 0,05 Pa-c,b-c