Đang tải... (xem toàn văn)
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y I CH N M NGHIÊN CỨU TỶ LỆ NHIỄM, KIỂU GEN CAGA, VACA CỦA HELICOBACTER PYLORI Ở BỆNH NHÂN VIÊM DẠ DÀY MẠN NGƢỜI DÂN TỘC THIỂU SỐ TỈNH LÀO CAI VÀ ĐẮK[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y I CH N M NGHIÊN CỨU TỶ LỆ NHIỄM, KIỂU GEN CAGA, VACA CỦA HELICOBACTER PYLORI Ở BỆNH NHÂN VIÊM DẠ DÀY MẠN NGƢỜI DÂN TỘC THIỂU SỐ TỈNH LÀO CAI VÀ ĐẮK LẮK LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y I CH N M NGHIÊN CỨU TỶ LỆ NHIỄM, KIỂU GEN CAGA, VACA CỦA HELICOBACTER PYLORI Ở BỆNH NHÂN VIÊM DẠ DÀY MẠN NGƢỜI DÂN TỘC THIỂU SỐ TỈNH LÀO CAI VÀ ĐẮK LẮK Chuyên ngành: Nội khoa Mã số: 72 01 07 LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS TS V V PGS TS Ph HÀ NỘI - 2020 Khi Q ố H i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu Luận án thu thập trung thực chưa công bố cơng trình nghiên cứu khoa học Tơi xin cam đoan thơng tin trích dẫn Luận án rõ nguồn gốc i, tháng 07 năm 2020 Nghiên cứu sinh B i Ch N m ii LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn kính trọng em xin trân trọng cảm ơn Đảng ủy, Ban Giám đốc ọc viện môn - hoa u n , thầ giáo, cô giáo h ng au đ i học, i ti u h a đ tận tình giảng d , hướng dẫn, giúp đỡ em q trình học tập, nghiên cứu hồn thành uận án Em xin trân trọng cảm ơn h Giáo sư - Tiến s Giáo sư - Tiến s han uốc ăn hi n h oàn, người thầ đ trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ em suốt thời gian nghiên cứu hồn thành uận án Tơi xin trân trọng cảm ơn hoa Y - Đ i học Oita - Nhật Bản, ệnh viện Đa hoa hu ện: Bát Xát, Mường hương, apa, ăn àn, imacai, ắc tỉnh hu ện Eaka, Buôn Hồ tỉnh Đắk ắk đ t o điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn cán ọc viện u n , ác s , giảng vi n sinh vi n đ tham gia hám ệnh thực thuật cận m sàng cho người d n c ng đ h trợ, giúp đỡ tr nh điều tra, thu thập số liệu để tơi hồn thành uận án nà Cảm ơn gia đ nh, đồng nghiệp, người b n thân thiết đ giúp đỡ, đ ng viên, khích lệ, chia sẻ h hăn thời gian tơi học tập hoàn thành Luận án i, tháng 07 năm 2020 Nghiên cứu sinh B i Ch N m iii MỤC LỤC TRANG PHỤ BÌA LỜI C M ĐO N i LỜI CẢM ƠN ii CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH x ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan vi khuẩn Helicobacter pylori 1.1.1 Lịch sử phát Helicobacter pylori 1.1.2 Hình thái Helicobacter pylori Đặc tính sinh học Helicobacter pylori 1.1.4 Cơ hế gây bệnh Helicobacter pylori viêm dày mạn 1.1.5 Diễn biến tự nhiên viêm dày mạn nhiễm Helicobacter pylori 1.1.6 Dịch tễ học Cơ hế lây truyền Helicobacter pylori 10 1.1.8 Các yếu tố độc lực Helicobacter pylori 13 Cá phƣơ g pháp hẩ đ hiễm Helicobacter pylori 20 1.2 Tổng quan viêm dày mạn 23 1.2.1 Khái niệm nguyên nhân gây viêm dày mạn 23 1.2.2 Phân loại 24 1.3 Một số đặ điểm dân số nghiên cứu 30 1.3.1 Tại tỉnh Lào Cai 30 Cá ố Đắ Lắ 34 ghi ứ g g i ƣớ i đế đề i ghi ứu 35 1.4.1 Các nghiên cứu ƣớc 35 iv 1.4.2 Các nghiên cứu H.pylori gƣời dân tộc thiểu số Việt Nam 36 CHƢƠNG 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 Đối ƣợng nghiên cứu 38 2.1.1 Tiêu chuẩn chọn bệnh nhân 38 2.1.2 Tiêu chuẩn loại trừ 38 Nơi iến hành qui trình lấy mẫu 39 2.1.4 Khía cạ h đạ đức củ đề tài 40 Phƣơ g pháp ghi ứu 40 2.2.1 Thiết kế nghiên cứu 40 Phƣơ g pháp ghi ứu 41 2.2.3 Các tiêu nghiên cứu 52 2.2.4 Xử lý số liệu 53 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 56 Xá định tỷ lệ nhiễm H.pylori, kiểu gen cagA, vacA, hình ảnh nội soi dày mơ bệnh học bệnh nhân viêm dày mạ dân tộc thiểu số tỉ h L Đặ điể h C i gƣời Đắk Lắk 56 g ủ đối ƣợng nghiên cứu 56 3.1.2 Tỷ lệ nhiễm H.pylori gƣời dân tộc thiểu số 57 3.1.3 Ph ố p cagA ủ H.pylori 60 ố p vacA Ph ủ H.pylori 61 3.1.5 Hình ảnh nội soi 63 Đặ điểm mô bệnh học 66 3.2 Khảo sát mối liên quan kiểu gen cagA, vacA H.pylori với hình ảnh nội soi dày mô bệnh học bệnh nhân viêm dày mạ gƣời dân tộc tiểu số tỉ h L C i Đắk Lắk 71 3.2.1 Liên quan kiểu gen cagA, vacA H.pylori với hình ảnh nội soi dày 71 3.2.2 Liên quan kiểu gen cagA, vacA H.pylori với mô bệnh học 77 v CHƢƠNG : BÀN LUẬN 88 4.1 Xá định tỷ lệ nhiễm H.pylori, kiểu gen cagA, vacA, hình ảnh nội soi dày mô bệnh học bệnh nhân viêm dày mạ dân tộc thiểu số tỉ h L 4.1.1 Đặ điể Tỷ ệ hiễ h g ủ C i gƣời Đắk Lắk 88 ệ h h ghi ứ 88 H.pylori 90 4.1.3 Phân bố týp cagA H.pylori bệnh nhân viêm dày mạn 95 4.1.4 Phân bố týp vacA s/m H.pylori bệnh nhân viêm dày mạn 98 4.1.5 Hình ảnh nội soi 101 4.1.6 Đặ điểm mô bệnh học 102 4.2 Mối liên quan kiểu gen cagA, vacA H.pylori với hình ảnh nội soi dày mơ bệnh học bệnh nhân viêm dày mạ dân tộc thiểu số tỉ h L C i gƣời Đắk Lắk 107 4.2.1 Liên quan kiểu gen cagA, vacA H.pylori với hình ảnh nội soi dày 107 4.2.2 Liên quan kiểu gen cagA, vacA H.pylori với mô bệnh học 110 KẾT LUẬN 119 KHUYẾN NGHỊ 121 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦ ĐỀ TÀI LUẬN ÁN TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC vi CÁC CHỮ VIẾT TẮT Phần viết đầy đủ Phần viết tắt BN : Bệnh nhân CĐN : Bạch cầ nhân CĐNTT : Bạch cầ đa nhân trung tính cagA : Cytotoxin Associated gen A DDTT : Dạ dày - tá tràng DSR : Dị sản ruột HMMD : Hóa mơ miễn dịch H.pylori : Helicobacter pylori KT : Kháng thể KN : Kháng nguyên LS : Loạn sản MBH : Mô bệnh học NMDD : Niêm mạc dày NC : Nghiên cứu OLGA : Oprerative Link for Gastritis Assesment (Liên kết hoạt độ g để đá h giá i dày) PCR : Polymerase Chain Reaction (Phản ứng chuỗi polymerase ) SNP : Single Nucleotide Polymorphism (Tí h đ hì h e ide ) TNF : Tumor necrosis factors (yếu tố hoại tử u) UTDD : U g hƣ dày vacA : Vacuolating Cytotoxin gen A VDDM : Viêm dày mạn VMTHĐ : Viêm mạn tính hoạ động VMTKHĐ : Viêm mạn tính khơng hoạ động vii DANH MỤC BẢNG Bảng Tên bảng g y ắ Trang g hƣ dày 1.1 Tỷ lệ nhiễm H.pylori 1.2 Kh 3.1 Ph 3.2 Tỷ lệ gƣời dân tộc thiểu số theo tỉnh 57 3.3 Tỷ ệ phá hiệ H.pylori theo tỉnh 57 3.4 Tỷ ệ phá hiệ H.pylori theo nhóm tuổi 58 3.5 Tỷ ệ phá hiệ H.pylori theo dân tộc 58 3.6 Tỷ ệ phá hiệ H.pylori theo giới 59 3.7 Liên quan giữ ỷ ệ hiễm H.pylori với tổ hƣơ g dày qua nội soi 59 3.8 Tỷ ệ 3.9 Tỷ ệ vacA, vacA s1m1 vacA s1m2 ủ H.pylori 61 g đá h giá OLG 29 ố đối ƣợng nghiên ph ố he h ổi giới 56 p cagA ủ H.pylori 60 3.10 Phân bố týp vacA theo dân tộc 62 3.11 Hình ảnh tổ hƣơ g dày qua nội soi 63 3.12 Tổ hƣơ g dày qua nội soi phân theo nhóm tuổi 64 3.13 Tổ hƣơ g dày qua nội soi phân theo dân tộc 65 3.14 Đặ điểm viêm teo, dị sản ruột mứ độ hoạ động viêm bệnh nhân viêm dày mạn 66 3.15 Tỷ lệ viêm teo, dị sản ruột theo nhóm tuổi 67 3.16 Mứ độ viêm teo theo nhóm tuổi 67 3.17 Li giữ hiễ H.pylori ới đị h h i 3.18 Li giữ ì h g hiễ H.pylori ới ứ độ i 3.19 Li giữ 3.20 Li giữ e 68 e dị sản ruột 68 ậ độ hiễ H.pylori ới viêm teo, dị sản ruột 69 ậ độ hiễ H.pylori ới ứ độ viêm dày qua mô bệnh học 69 3.21 Liên quan H.pylori mứ độ thâm nhiễm bạch cầu 70 viii Bảng Tên bảng Trang 3.22 Mối liên quan giữa kiểu gen cagA H.pylori với hình ảnh nội soi dày 71 3.23 Mối liên quan giữa kiểu gen cagA H.pylori tỉ h Đắk Lắk với hình ảnh nội soi dày 73 3.24 Mối liên quan giữa kiểu gen vacA s/m H.pylori với hình ảnh nội soi dày 74 3.25 Mối liên quan giữa kiểu gen vacA s/m H.pylori tỉ h Đắk Lắk với hình ảnh nội soi dày 75 3.26 Mối liên quan giữa kiểu gen vacA s/m H.pylori tỉnh Lào Cai với hình ảnh nội soi dày 76 3.27 Liên quan mứ độ viêm teo, dị sản ruột, mậ độ H.pylori viêm dày hoạ động với týp cagA 77 3.28 Liên quan mứ độ viêm teo, dị sản ruột, mậ độ H.pylori viêm dày hoạ động với týp cagA Đắk Lắk 78 3.29 Li giữ p cagA ới ổ hƣơ g g h 3.30 Li giữ p cagA Đắk Lắk ới ổ 3.31 Li giữ p cagA ới ổ hƣơ g Mô bệnh học vùng hang vị 81 3.32 Li giữ p cagA Đắk Lắk ới ổ hƣơ g 3.33 Li giữ p vacA m ới ổ 3.34 Li giữ p vacA m bệ h h hƣơ g ị 79 hƣơ g g h ị 80 g hang vị 82 ệnh học 83 Đắk Lắk ới ổ hƣơ g mô bệnh học 84 3.35 Li hƣơ g 3.36 Li giữ p vacA m bệnh nhân Lào Cai ới ổ ệnh học 85 giữ p vacA m ới ổ hƣơ g mô bệnh học vùng thân vị 86 3.37 Li giữ p vacA m ới ổ hƣơ g ệnh học vùng hang vị 87 ix DANH MỤC BIỂU ĐỒ, SƠ ĐỒ Biểu đồ Tên biểu đồ 3.1 Hình ảnh tổ 3.2 Tổ Sơ đồ Trang hƣơ g dày qua nội soi theo giới 63 hƣơ g dày qua nội i g địa lý 65 Tên sơ đồ Trang 2.1 Vị trí lấy mẫu bệnh phẩm tỉnh Lào Cai Đắk Lắk 39 2.2 Sơ đồ nghiên cứu viêm dày mạ gƣời dân tộc tỉnh Lào Cai Đắk Lắk 55 x DANH MỤC HÌNH Hình Tên hình Trang 1.1 Hình ảnh mơ học viêm dày mạn Helicobacter pylori 1.2 Nhiễm Helicobacter pylori 1.3 Cấu trúc gen cagA, cagA Phƣơ g T y, cagA Đ 1.4 Tá động CagA VacA tế bào biểu mô dày 17 1.5 Cơ hế động VacA tế bào biểu mô dày 19 1.6 Vị trí lấy sinh thiết 28 2.1 Hệ thống máy nội soi GIF-180 Olympus Nhật Bản 41 2.2 Máy PCR Nanodrop 1000 củ H g The hế bệnh sinh g Á 15 S ie ifi áy đọc kết điện di khoa Sinh học phân tử 42 2.3 Máy ph í h ge ABI Prism 310 Gentic Analyzer T ƣờ g đại học Oita Nhật Bản 42 2.4 Các vị trí sinh thiết 43 2.5 Th g hì 2.6 Hình ảnh kết Urease- e ; ƣơ g í h: 3.1 Kết trình tự amino acid CagA týp Đ g Á ủ hệ hố g ph ại Syd ey ập hậ 45 ẫu 2, 3, 47 g g ì h nghiên cứu 72 3.2 Kết trình tự amino acid CagA týp Phƣơ g T y g g ì h nghiên cứu 72 ĐẶT VẤN ĐỀ Nhiễm Helicobacter pylori (H.pylori) đế y đ đƣợc khẳ g định nguyên nhân chủ yếu gây viêm dày mạn (VDDM) loét dày - tá tràng đặc biệt (DDTT) g hƣ dày (UTDD) [1], [2] Ch đến nay, Tổ chức Y tế giới (WHO) đ xếp H.pylori tác nhân số gây UTDD Tỷ lệ g, nhiễm H.pylori cao tất loại nhiễ đến 50% dân số giới nhiễm H.pylori [3], [4], [5] Một số nghiên đ há rằng, chủng tộc khác có tỷ lệ nhiễ tỷ lệ nhiễm cao gấp đ i gƣời da trắng Tỷ lệ y h , gƣời d đe g h y đổi theo điều kiện sống khác vùng miền khác phát triển có tỷ lệ nhiễ hơ ốc gia ƣớ é đ ng ƣớ đ phát triển[6], [7], [8] Việt Nam quốc gia có tỷ lệ nhiễm H.pylori cao cộ g đồng (khoảng 70%) Tại Việt Nam đ nhiều cơng trình nghiên cứu H.pylori, bao gồm dịch tễ học, yếu tố g y g y hiễm, yếu tố độc lực (virulence factors ) vi khuẩn H.pylori, hiệu điều trị diệt trừ H.pylori bằ g phá đồ khác tình hình kháng thuốc H.pylori Tuy nhiên, hầu hết nghiên cứu tập tộc Kinh, đ d h h đ đ g i h ống g đối ƣợ g gƣời dân g đồng thành thị Các nghiên gƣời dân tộc thiểu số hạn chế khiêm tốn Gầ đ y, ột số nghiên cứu dịch tễ học, yếu tố g y H.pylori, hƣ g phần lớn tập g đối ƣợng trẻ e y ệnh gƣời dân tộc thiểu số tỉnh phía Bắc Việt Nam [9] Các nghiên cứu tỷ lệ nhiễm yếu tố độc lực H.pylori gƣời lớ d h h số hƣ gƣời dân tộc thiểu Vì vậy, việ xá định tỷ lệ nhiễm H.pylori, yếu tố liên quan xá định yếu tố độc lực H.pylori nhóm dân tộc thiểu số cần thiết, để góp phần tìm hiểu hế bệnh sinh giúp cho việ đề xuất biện pháp điều trị dự phịng có hiệu Hiện với phát triển công nghệ sinh học phân tử đ minh vai trò gây bệnh vi khuẩn có liên quan với ge hứng i h độc lực gđ vi khuẩn, ọng là: Kháng nguyên (KN) gây độc tế bào A (Cytotoxin-associated gen A: cagA) độc tố gây không bào vacA (Vacuolating cytotoxin associated gen A: vacA) Các chủng H.pylori mang gen cagA dƣơ g í h g y độc tế bào chiếm tỷ lệ cao thể bệnh nặ g hƣ é TT, UT Bệnh nhân (BN) nhiễm H.pylori có hai gen cagA dƣơ g í h vacA dƣơ g í h tỷ lệ gây bệ h ò đ hơ , hững chủng vi khuẩn mang gen cagA âm tính gây bệ h hơ [13] Tại Việ N , đ hiề g ì h ghi ứ ề yế ố độ ự ủ H.pylori hƣ: CagA, vacA BN VDDM, loét DDTT UTDD Tuy nhiên, ghi ứ y ới hỉ ập g gƣời Ki h ại h h phố Các nghiên cứu H.pylori gƣời dân tộc thiểu số vùng cao cịn hƣ he i N ớn , đƣợc đồng ý Bộ khoa học Công nghệ Việt Nam, giúp đỡ củ T ƣờ g Đại học Oita (Nhật Bản) đ tác nghiên cứu khoa học h phép hực hiệ đề tài hợp g phƣơ g Việt Nam Nhật Bả Đ y hƣơ g ì h Nghị đị h hƣ quốc gia nhằm nghiên cứu tỷ lệ nhiễm nhiễm H.pylori yếu tố độc lực H.pylori Việ N ƣ i h gƣời dân tộc thiểu số vùng The , hƣ g đƣợc hƣơ g ì h hợp đ i đ ựa chọn khu vự để nghiên cứu: Tỉnh Lào Cai (miền Bắc Việt Nam) tỉnh Đắk Lắk (miền Trung Việ N ), hiề gƣời dân tộc thiểu số sinh sống[14] Vì vậy, chúng tơi thực hiệ đề tài: “Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm, kiểu gen cagA, vacA Helicobacter pylori bệnh nhân viêm dày mạn người dân tộc thiểu số tỉnh Lào Cai Đắk Lắk” Đề tài thực với mục tiêu hƣ : Xác định tỷ lệ nhiễm, kiểu gen cagA, vacA H.pylori, hình ảnh n i soi d dày mô bệnh học bệnh nhân viêm d dày m n người dân t c thiểu số tỉnh Lào Cai Đắk Lắk Khảo sát mối liên quan kiểu gen cagA, vacA H.pylori với hình ảnh n i soi d dày mô bệnh học bệnh nhân viêm d dày m n người dân t c thiểu số tỉnh Lào Cai Đắk Lắk 3 CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan vi khuẩn Helicobacter pylori 1.1.1 Lịch sử phát Helicobacter pylori Ngƣời phát loại vi sinh vật giố g hƣ i h ẩn tuyến dày có kèm theo viêm niêm mạc dày (NMDD) nhà giải phẫu bệnh gƣời Đức phát 88 S đ Barron J.H cs tiếp tục thông báo phát ƣơ g ự loại xoắn khuẩn sống dày gƣời [15] Tuy nhiên, phải đợi đến cơng trình có tính thuyết phục Warren J.R Marshall B.J chứng minh đƣợc vai trò gây viêm loét DDTT 98 , M H.pylori [16] Từ đến cuối 98 , ƣờng thực nghiệ g h đ ắ đầu tìm cách phân lập vi khuẩn ới nuôi cấy thành công H.pylori môi Đầu tiên, tác giả gọi loại xoắn khuẩn có lơng Campylobacter pylori có nhiề đặc tính chung với nhóm Campylobacter Song nghiên cứu kỹ hơ ề đặc tính di truyền vi khuẩn gƣời ta nhận thấy khơng hồn tồn giố g vậy, vi khuẩ đƣợ S G dwi hƣ Campylobacter, đổi tên Helicobacter pylori (helix: xoắn, bacter: khuẩn, pylori: hang môn vị) Về phân loại theo hệ thống vi khuẩn học, giống Hecolibacter giống thuộc phân lớp Epsilon ngành Proteobacteria, có loại Helicobacter đƣợc phát hiện, nhiên có loại H.pylori, H.cinaedi, H.heilmanni có d y gƣời, đ hủ yếu H.pylori, H.heilmanni chiếm khoảng 1-8% Hiệ ì đƣợc 21 loài thuộc giống Hecolibacter ƣ gụ yđ động vật khác nhau, ngồi cịn tìm thêm số lồi thuộc giố g y hƣ g hỉ có H.pylori thủ phạm bệnh DDTT [16] Việc phát vi khuẩn H.pylori đ h y đổi ản hiểu biết bệnh sinh loét viêm teo mạn tính NMDD Hiện H.pylori có vai trị chủ yếu nguyên nhân sinh bệnh VDDM, loét DDTT ò đƣợc xếp vào nhóm I tác nhân gây UTDD [17], [18] 1.1.2 Hình thái Helicobacter pylori H.pylori có hình dạng mảnh, cong xoắn nhẹ hình chữ S, đƣờng kính từ 0,3 - 1,0 µm, dài từ 1,5 - µ , di độ g đƣợc nhờ - lông mảnh xuất phát mộ đầu (khác với H.fennelliae, H.cinaedi số Helicobacter khác có lơng mảnh h i đầu), bắt màu Gram âm nhuộm Gram, màu tím đỏ nhuộm Hematoxylin - Eosin, màu xanh sẫm nhuộm Giemsa Diff - Q i , đe đậm tiêu nhuộm Warthin - Starry màu da cam nhuộm huỳnh quang Acridin orange [19] Hình 1.1 Hình ảnh mơ học viêm dày mạn Helicobacter pylori * guồn: Theo Maharjan S cs, 2017 [19] 1.1.3 Đặc tính sinh học Helicobacter pylori H.pylori vi khuẩn gram âm vi khí, hoặ g điều kiện khơng thuận lợi điều trị số kháng sinh, H.pylori chuyển thành dạng hình cầu H.pylori hƣờng nằ dƣới lớp chất nhầy phủ bề mặt NMDD, bám mặt chui sâu vào khe tế bào biểu mô dày [6] H.pylori có lơng mộ đầu, tận đĩ , ấu trúc không gặp loại Campylobacter khác Nhờ vào lông mà H.pylori di chuyển nhanh chóng lớp chất nhầy đặc nhữ g động tác quẫy y đặc biệt Phần lại bề mặt H.pylori nhẵn 5 T g i ƣờng ni cấy có kháng sinh, H.pylori có dạng hình í h hƣớc khác Các tác giả h đ cầu với nhiề số lại cho rằ g đ hể đề kháng, nhấ hi điều trị số kháng hơ sinh Với thể hình cầu H.pylori tồn khơng thuận lợi Goodwin gọi đ y g i ƣờng hể ngủ H.pylori Ngƣời ta thấy mảnh sinh thiết NMDD để g hể thối hóa, h g đƣợc bảo quản tốt i ƣờng phù hợp, dễ chuyển thành dạng cầu khó mọc ni cấy [21] i ƣờng g hí ƣờ g ì h hƣờng, khó cấy chuyể ƣ giữ H.pylori loại vi khuẩn khó ni cấy, phát triển yế h g hƣờ g M i ƣờng nuôi cấy tối ƣ h ự phát triển H.pylori điều kiện vi khí (với O2 5%, CO2 7%, H2 8%, N2 70%, 10% khí khác) nhiệ độ 370C Thời gi để H.pylori mọc thành khuẩn lạ điển hình sau 48 Trong hầu hết vi sinh vật khác bị chết tro g i ƣờng toan H.pylori lại phát triển tốt nhờ hệ men urease cực mạnh Men protein có tính kháng nguyên (KN) cao H.pylori gƣời bệnh Urease có trọ g ƣợng phân tử 500-600 KDa Urease có nhiều loại vi khuẩn, vi khuẩ đƣờng ruộ , hƣ g H.pylori có mộ ƣợng urease lớn gấp h g ần vi khuẩn khác, men urease xúc tác thủy phân urea thành amoniac cacbamate, s đ e ại đƣợc thủy phân tiếp thành amoniac axit cacbonic (H2CO3) Chính amoniac làm kiề làm chuyển màu chất thị pH từ để M h g g h i ƣờng đỏ cánh sen, đề xuấ phƣơ g pháp phá H.pylori xét nghiệm urease từ mảnh sinh thiết NMDD (Clo-test) Màng H.pylori hoạ độ g hƣ ớp ngụy trang, giúp vi khuẩn tránh tế bào miễn dịch cho phép kéo dài hiệ dai dẳng ƣợng nhiễm trùng y gƣời Hiệ đ xá định có nhấ ge đảm nhiệm việc tổng hợp urease H.pylori Đ ge e , , C, gen A, B gen cấu trúc, gen F, G, H , E, F, G, H I T gđ ge điều hoà [22] 1.1.4 Cơ chế gây bệnh Helicobacter pylori viêm dày mạn Cá ệ h hi ị hiễ DDTT, UTDD d ự ƣơ g giữ ƣờ g H.pylori g y ệ h h g g i ƣờ g xi d y, hờ hệ hố g i dí h gƣời ệ h hƣ i H.pylori ối i h ẩ , ậ hủ ố ƣớ (Hì h di h yể dí h dày, loét ề ề á yế i H.pylori ố g đƣợ ặ ế hụ hể ậ ố iể ,3 g iế độ ố g y ệ h (Hình 1.2) [23] d y hủ hờ yế ố Hình 1.2 Nhiễm Helicobacter pylori chế bệnh sinh * guồn: Theo Kao C.Y cs, (2016) [23] V gi i đ đầ e e để ph hủy i ƣờ g xi ị hiễ , e e d y gƣời ệ h, H.pylori iế g d y h h h i h ẩ , giúp Tiếp he , H.pylori iế ph hi ớp hầy ị i c, hờ đ ố g ph ph ip e ỏ g (Hì h hờ g hị đƣợ ) i c hủy g hơ ; hờ hì h g x ắ ố i Cá , di h yể x y i g ƣơ g giữ H pZ L ớp đáy, pH h ả g 7,0 i ị ế dí h i h ẩ yế iể ớp hầy để đế ố dí h ủ ( ọ g hấ ) i h ẩ đƣợ ới ế i h ẩ , S ả iể Nhờ ự ới hụ hể ề ặ ế , N P, Hp 60, p , p , ệ h g ị ố gx ấ ởi h độ g dày [23] C ối g H.pylori iế hƣơ g ề hủ, iế p ặ ớp iể h ầ dẫ đế C hiề hủ iế độ ệ h i gi H.pylori iế hởi độ g iễ dị h ậ í hh ét [23] h ặ d H.pylori í h hí h ế hế g y ệ h Mộ ậ ố hấ g y ệ h hí h d gồ : Urease, phospholipase, alcohol dehydrogenase, vacA, cagA, carbonic anhydrase, superoxide di iể ả cagA, vacA g y ổ ƣơ g giữ H.pylori h ầ hấ d H.pylori iế , h gồ d y ei h h ố ầ , e id e, f id e p e, e, yế ố h h ei h h h ầ đ ậ g ự h g tính ( CĐNTT) [2] Nhiễ gen H.pylori í h hí h ế y ằ g ựx đ , i e iề i hập ủ á i hối ) hép ủ i e, dẫ đế đáp ứ g i h ầ hạ e e d H.pylori iế (IL) iề hy hủ gi g í h í h hí h ế ớp i iể g đáp ứ g i hể hiệ Th i e e i hƣ IL-2, 6, TNF (tumor necrosis factor - yế gi ố g y h ại ại hỗ [2], [24] 1.1.5 Diễn biến tự nhiên viêm dày mạn nhiễm Helicobacter pylori ộ VDDM ả đời Nhiễ đƣợ ì h i H.pylori hƣờ g hẩ đ , 80% ƣờ g hợp hiề gi i đ , iế ắ phải hỏ gi i đ iể ấp, hiế đ , hầ hế BN ẽ h yể thành VDDM, hể h g iệ g [25] é d i hi g ốđ Vi dầ d y d H.pylori ắ đầ h ị, ới hì h ả h i h h g i h ộ (DSR), iễ ậ h iế g ủ Nế loé ới i d y h dễ ị H.pylori ò i ộ dẫ đế i độ ự y iễ dị h) BN é h h g iế g BN iế é d y, e d y, SR, LS h g đƣợ điề ấp ẽ h yể hiễ đáp ứ g hủ yế ị, dễ ị đ e , dị ả ả (LS) UTDD [26] hủ ( đị ge h g ị ị hủ yế h ặ ộ hời gi dày VDDM không teo H.pylori h g ị, h h i ị iệ , g, h ả g 1% VDDM (M ịh ặ i ối 0% i xi hƣờ g i xi hấp hƣờ g i ừ, hầ hế BN hiễ gđ i h ẩ g UT H.pylori gi i đ ạ h g ị diễ hể dẫ đế ế -Associated Lymphoid Tissue - M LT), 0% i h h é d y y ph iế đế i e đ ổ h yể g [25] % ẽ iế iể thành UTDD [25] 1.1.6 Dịch tễ học H.pylori vi khuẩn có tỷ lệ lây nhiễm phổ biến giới [27] hđ y h g Mặc dù nhiễm trùng H.pylori phát hiệ công bố củ M tễ họ đ h W e , hƣ g hững nghiên cứu dịch ọi gƣời ngạc nhiên "hầ nhiễm trùng H.pylori" [16] Ở hƣ ột nửa dân số giới bị ƣớc cơng nghiệp phát triển, trung bình có khoảng 20-30% dân số bị nhiễm khuẩ y 60 Tuy nhiên, tần suất nhiễm H.pylori h hững g h h ới 50% tuổi g h y đổi theo châu lục khác g h y đổi theo vùng miền châu lục quố gi g ỷ lệ nhiễm H.pylori khác Tại châu Á, dựa xét nghiệm huyết họ , đƣợ điều tra quần thể lớn, kết nghiên đ h iết tần suất nhiễm H.pylori khác quốc gia khác khác vùng miền quốc gia (ví dụ: Singap e, M y i ) Điều kiện kinh tế, ... DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y I CH N M NGHIÊN CỨU TỶ LỆ NHIỄM, KIỂU GEN CAGA, VACA CỦA HELICOBACTER PYLORI Ở BỆNH NHÂN VIÊM DẠ D? ?Y MẠN NGƢỜI DÂN TỘC THIỂU SỐ TỈNH LÀO CAI VÀ ĐẮK LẮK... định tỷ lệ nhiễm, kiểu gen cagA, vacA H .pylori, hình ảnh n i soi d d? ?y mô bệnh học bệnh nhân viêm d d? ?y m n người dân t c thiểu số tỉnh Lào Cai Đắk Lắk Khảo sát mối liên quan kiểu gen cagA, vacA. .. sinh sống[14] Vì v? ?y, chúng tơi thực hiệ đề tài: ? ?Nghiên cứu tỷ lệ nhiễm, kiểu gen cagA, vacA Helicobacter pylori bệnh nhân viêm d? ?y mạn người dân tộc thiểu số tỉnh Lào Cai Đắk Lắk? ?? Đề tài thực