Đang tải... (xem toàn văn)
Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)Đồ án tốt nghiệp: Phân lập chất từ phân đoạn TID của cao Ethyl Acetate điều chế từ hạt Me (Tamarindus Indica L.)
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM KỸ THUẬT TP HỒ CHÍ MINH KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC PHÂN LẬP CHẤT TỪ PHÂN ĐOẠN TI-D CỦA CAO ETHYL ACETATE ĐIỀU CHẾ TỪ HẠT ME (TAMARINDUS INDICA L.) MÃ SỐ KHÓA LUẬN: HC.19.12 Sinh viên thực hiện: NGUYỄN THANH TRÚC Mã số SV: 15128073 Giáo viên hƣớng dẫn: TS.PHAN THỊ ANH ĐÀO ThS.NGUYỄN XUÂN HẢI Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 22 tháng 07 năm 2019 LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian từ bắt đầu làm luận văn, nhận đƣợc quan tâm, hỗ trợ, giúp đỡ thầy cơ, gia đình bạn bè xung quanh Để hồn thành q trình nghiên cứu hoàn thiện luận văn này, lời xin chân thành cảm ơn sâu sắc đến TS Phan Thị Anh Đào thuộc Khoa Cơng nghệ Hóa học Thực phẩm – Trƣờng Đại học Sƣ phạm Kỹ thuật TP HCM ThS Nguyễn Xuân Hải – Trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên TP HCM Cô thầy tận tình hƣớng dẫn, truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm cho tơi suốt q trình nghiên cứu để tơi hồn thiện luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn Thầy, Cô trƣờng ĐH Sƣ phạm Kỹ thuật Tp HCM, đặc biệt Thầy, Cơ Khoa Cơng nghệ Hóa học Thực phẩm truyền đạt vốn kiến thức quý báu cho tơi suốt thời gian học tập trƣờng Ngồi xin cảm ơn cô Nguyễn Thị Mỹ Lệ, chun viên Phịng Thí nghiệm Khoa Cơng nghệ Hóa học Thực phẩm – Trƣờng ĐH Sƣ phạm Kỹ thuật Tp HCM Cô tạo điều kiện giúp đỡ nhiều việc sử dụng thiết bị dụng cụ phục vụ cho trình nghiên cứu Sau xin gửi lời cảm ơn đến gia đình, bạn bè ln động viên, giúp đỡ tơi suốt q trình làm luận văn i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan tồn nội dung đƣợc trình bày khóa luận tốt nghiệp tơi thực Tơi xin cam đoan nội dung đƣợc tham khảo khóa luận tốt nghiệp đƣợc trích dẫn xác đầy đủ theo qui định Thành phố Hồ Chí Minh, ngày 22 tháng năm 2019 Ký tên ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN I LỜI CAM ĐOAN II MỤC LỤC III DANH MỤC BẢNG V DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ SƠ ĐỒ VI DANH MỤC CHỮ CÁI VIẾT TẮT VII TÓM TẮT VIII MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Mô tả thực vật 1.1.1 Phân loại khoa học 1.1.2 Phân bố sinh thái 1.1.3 Thành phần hóa học dinh dƣỡng T.indica 1.1.4 Những nghiên cứu dƣợc học 10 1.1.5 Định hƣớng nghiên cứu 13 CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM 15 2.1 Hóa chất thiết bị 15 2.1.1 Hóa chất 15 2.1.2 Thiết bị 15 2.2 Phƣơng pháp trích ly phân lập hợp chất tự nhiên 16 2.2.1 Nguyên liệu 16 2.2.2 Điều chế loại cao 16 2.2.3 Phân lập hợp chất hữu từ hạt Tamarindus indica L 17 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 21 3.1 Khảo sát cấu trúc hợp chất phân lập từ hạt me 21 3.1.1 Khảo sát cấu trúc hóa học hợp chất TT01 21 3.1.2 Khảo sát cấu trúc hợp chất TT02 22 3.2 Tìm hiểu hoạt tính sinh học TT01 TT02 26 iii 3.2.1 Hoạt tính sinh học TT01 26 3.2.2 Hoạt tính sinh học TT02 26 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 27 TÀI LIỆU THAM KHẢO 28 PHỤ LỤC 30 iv DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Thành phần hóa học hạt me Bảng 1.2 Các hợp chất T indica Bảng 2.1 Khối lƣợng thu suất loại cao điều chế từ bột hạt Tamarindus indica L 17 Bảng 2.2 Kết sắc ký cột cao ethyl acetate hạt Tamarindus indica L 18 Bảng 2.3 Kết sắc ký cột cao phân đoạn TI-D 18 Bảng 2.4 Kết sắc ký cột cao phân đoạn TI-D3 19 Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR hợp chất TT01 so sánh với chất acid 4hydroxybenzoic [21] (trị số ngoặc J tính Hz) 22 Bảng 3.2 Số liệu phổ hợp chất TT02 so sánh với quercetin (trị số ngoặc J tính Hz) 24 v DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ SƠ ĐỒ Hình 1.1 Ảnh minh họa me Hình 1.2 Ảnh minh họa me hạt me Hình 1.3 Cấu trúc số hợp chất steroid, terpen chất béo từ T Indica Hình 1.4 Cấu trúc số hợp chất polyphenol flavonoid từ T indica 10 Hình 3.1 Acid 4–hydroxybenzoic (TT01) 21 Hình 3.2 Quercetin (TT02) 22 Hình 3.3 Tƣơng quan HMBC (mũi tên) COSY (kẻ đậm) hợp chất TT02 24 Sơ đồ 2.1 Q trình trích ly cao MeOH 16 Sơ đồ 2.2 Sơ đồ phân lập chất TT01 từ phân đoạn TI-D3.2 chất TT02 từ phân đoạn TI-D3.3 20 vi DANH MỤC CHỮ CÁI VIẾT TẮT A : Acetone CHCl3 : Chloroform d : doublet (mũi đôi) DEPT : Distortionless enhancement by polarization transfer DMSO : Dimethyl sulfoxide DPPH : 2,2-diphenylpicrylhydrazyl E : Ethyl acetate GC : Sắc ký khí H : n-hexane HMBC : Heteronuclear multiple bond correlation HSQC : Heteronuclear single quantum coherence IC50 : Nồng độ mẫu mà ức chế 50 % gốc tự IR : Infrared spectroscopy (phổ hồng ngoại) J : Hằng số ghép M : Methanol MS : Mass spectrometry NMR : Nuclear magnetic resonance (cộng hƣởng từ hạt nhân) s : Singlet (mũi đơn) SKC : Sắc ký cột TLC : Thin layer chromatography (sắc ký mỏng) TSP : Tamarind seed polysaccharide TSPA : Acetyl Tamarind Seed Polysaccharide TSPS : Sulfated Tamarind Seed Polysaccharide UV : Ultraviolet (tử ngoại) vii TÓM TẮT Hạt me phụ phẩm ngành sản xuất bánh, kẹo, mứt, nƣớc ép,… từ thải bỏ lƣợng lớn chất thải gây ô nhiễm môi trƣờng Trong khi, hạt me nguồn nguyên liệu giàu hợp chất polyphenol với hoạt tính sinh học cao, việc tận dụng phế phụ phẩm không giảm nguy nhiễm mơi trƣờng mà cịn góp phần tăng việc ứng dụng thực vật vào sản xuất Để phân lập hợp chất tự nhiên có hạt me, nghiên cứu điều chế cao phân đoạn ethyl acetate từ cao thô methanol ban đầu Từ cao ethyl acetate, sắc ký cột với hệ dung môi chạy cột chloroform: methanol thu đƣợc bảy phân đoạn đƣợc đánh số từ A đến G Trong bảy phân đoạn, phân đoạn D cho vết tách rõ, tơi chọn cao từ phân đoạn D để cô lập hợp chất tinh khiết từ hạt me Bằng phƣơng pháp sắc ký nhƣ SKC, SKLM; phân lập xác định đƣợc cấu trúc hai hợp chất TT01 (91 mg): 4-hydroxylbenzoic hợp chất TT02 (5 mg): quercetin viii MỞ ĐẦU Ngày với phát triển khoa học, y học, nhiều loại bệnh đƣợc phát nghiên cứu thành công phƣơng thuốc điều trị Ðể đáp ứng đƣợc hết nhu cầu chăm sóc sức khoẻ nguời bệnh, nhà duợc liệu nghiên cứu, tổng hợp đƣợc nhiều loại thuốc đặc trị với quy mô công nghiệp Tuy nhiên, sau thời gian sử dụng số loại thuốc tổng hợp lại có tác dụng phụ khơng mong muốn Chính nguời có xu hƣớng trở lại với thiên nhiên, từ cỏ phân tích, giải mã thành phần hố học nhƣ dƣợc tính chất với mong muốn tìm phuong thuốc an tồn cho sức khoẻ nguời tiêu dùng Mặt khác, nuớc ta nuớc nhiệt đới gió mùa, có khí hậu nóng ẩm nên nguồn thực vật tự nhiên phong phú đa dạng Vì lý mà việc nghiên cứu thành phần hóa học cỏ ngày đƣợc đẩy mạnh Cây me thuộc chi Tamarindus họ Đậu (Fabaceae) có giá trị sử dụng cao, phận me đƣợc dùng sống hàng ngày Trong phận me, hạt me không nguồn dinh dƣỡng giàu protein (13-27%), chứa lƣợng lớn acid amin thiết yếu, nhƣ isoleucine, leucine, lycine, methionine, phenylalanin, valine mà nguồn cung cấp acid béo thiết yếu, khoáng chất đặc biệt canxi, photpho kali tƣơng đối cao so với loại đậu khác Các nghiên cứu ngồi nƣớc thành phần hóa học tập trung vào polysaccharide hạt me mà chƣa trọng tới thành phần có hoạt tính sinh học nhƣ polyphenol Từ kết sàng lọc hoạt tính chống oxy hóa tyrosinase 60 loại phụ phẩm Việt Nam (2014-2016) nhóm tác giả P.T.A Đào cộng sự[1] phát cao chiết ethanol từ hạt me có hoạt tính cao tƣơng ứng giá trị IC50 phép thử ức chế gốc tự DPPH 6,91 µg/mL, phép thử ức chế H2O2 113,8 µg/mL, tổng hàm lƣợng flavonoid 848,8 CE/100 g mẫu Đây phát quan trọng, lý cần thiết để nghiên cứu sâu thành phần hóa học hạt me nhằm góp phần mở rộng khả ứng dụng hạt me Việt Nam thực tiễn Phụ lục a Phổ 1H-NMR hợp chất TT02 32 Phụ lục 3.b Phổ 1H-NMR hợp chất TT02 33 Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất TT02 34 Phụ lục 4.a Phổ 13C-NMR hợp chất TT02 35 Phụ lục 5.Phổ DEPT-NMR hợp chất TT02 36 Phụ lục 5.a Phổ DEPT-NMR hợp chất TT02 37 Phụ lục 6.Phổ HSQC-NMR hợp chất TT02 38 Phụ lục 6.a Phổ HSQC-NMR hợp chất TT02 39 Phụ lục 7.Phổ HMBC-NMR hợp chất TT02 40 Phụ lục 7.a Phổ HMBC-NMR hợp chất TT02 41 Phụ lục 7.b Phổ HMBC-NMR hợp chất TT02 42 Phụ lục 7.c Phổ HMBC-NMR hợp chất TT02 43 Phụ lục 8.Phổ COSY-NMR hợp chất TT02 44 Phụ lục 8.a Phổ COSY-NMR hợp chất TT02 Phụ lục 8.b Phổ COSY-NMR hợp chất TT02 45 S K L 0 ... học hạt me nhằm góp phần mở rộng khả ứng dụng hạt me Việt Nam thực tiễn Với lý nêu trên, chọn đề tài " phân lập chất từ phân đoạn TI-D cao ethyl acetate điều chế từ hạt me (Tamarindus indica L.)" ... H:E PHÂN ĐOẠN TID1 107mg PHÂN ĐOẠN TID2 69mg PHÂN ĐOẠN TI-D3 786mg PHÂN ĐOẠN TID4 147mg PHÂN ĐOẠN TID5 363mg Sắc ký cột silica gel Hệ dung môi C:M PHÂN ĐOẠN TID3 .1 121mg PHÂN ĐOẠN TID3 .2 146mg PHÂN... - Phân lập, xác định cấu trúc định danh hợp chất hữu từ cao ethyl acetate Do vậy, lựa chọn đề tài ? ?Phân lập hợp chất từ hạt me (Tamarindus indica L.)? ?? giúp nghiên cứu sâu thành phần hóa học hạt