Luận án nghiên cứu một số đặc điểm sinh học cá song vua epinephelus lanceolatus (bloch, 1790) ở giai đoạn phát triển ban đầu (phôi, ấu trùng và cá hương

MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài luận án Cá Song vua Epinephelus lanceolatus (Bloch, 1790) hay gọi cá Song vang cá Mú nghệ lồi cá rạn san hơ khổng lồ với chiều dài lên đến 2,7 m khối lƣợng đạt 400 kg (Fourmanoir Laboute, 1976) Thịt cá Song vua trắng, ngon, có giá trị dinh dƣỡng cao, có mùi thơm đặc biệt, đối tƣợng hải sản đƣợc tiêu thụ thị trƣờng truyền thống Trung Quốc, Đài Loan, Singapore nhiều nƣớc khác giới, với giá bán thị trƣờng cao từ 18 - 24 USD Cá Song vua bụng nhỏ, dày nên phi lê đơng lạnh Ngồi ra, cá Song vua có khối lƣợng từ 100 kg trở lên đƣợc dùng làm cá cảnh số thủy cung khu triển lãm phục vụ khách tham quan du lịch (Hoàng Nhật Sơn cs., 2015) Do nhu cầu ngày tăng thị trƣờng, nên tự nhiên cá Song vua bị khai thác mức sản lƣợng cá đánh bắt tự nhiên vùng biển loài cá phân bố bị giảm sút nghiêm trọng Trƣớc nguy tuyệt chủng, năm 1990 cá Song vua đƣợc đƣa vào sách đỏ IUCN, mức độ VU (A2d) Tại Việt Nam, cá Song vua nằm danh sách đối tƣợng có nguy tuyệt chủng cần đƣợc bảo vệ, ký hiệu VN 01/2000/TT - BTS Trƣớc áp lực bảo vệ nguồn lợi cá Song vua tự nhiên đảm bảo cung cấp nguồn thực phẩm cao cấp cho thị trƣờng lớn khó tính giới, nhiều quốc gia vùng lãnh thổ trọng nghiên cứu loài cá để đƣa vào sản xuất giống nhân tạo ni thƣơng phẩm, nhiên cịn nhiều hạn chế nên chƣa đạt đƣợc kết nhƣ mong đợi Các nghiên cứu giới cho thấy tỷ lệ sống ấu trùng cá Song vua đến giai đoạn cá giống cịn thấp Ngun nhân ấu trùng cá Song vua có tính ăn thịt lẫn nhau, chất lƣợng trứng, kỹ thuật ấp nở trứng, chế độ dinh dƣỡng chƣa phù hợp ảnh hƣởng điều kiện môi trƣờng Hiện nay, giới có Đài Loan chủ động đƣợc công nghệ sản xuất giống nhân tạo quy mô hàng hóa Tuy nhiên, cơng nghệ sản xuất giống đƣợc bảo mật chặt chẽ nên khơng có hoạt động chuyển giao công nghệ nhƣ trao đổi thông tin từ nƣớc bạn ngồi số cơng bố số đặc điểm sinh học sinh sản Các nƣớc khác khu vực nhƣ Malaysia, Thái Lan Indonesia có thành cơng định sinh sản cá Song vua qui mơ phịng thí nghiệm Ở Việt Nam, nghiên cứu sinh sản cá Song vua bắt đầu Năm 2004, Trung tâm khuyến ngƣ Trung ƣơng giao Viện Nghiên cứu NTTS I thực dự án: “Nghiên cứu đặc điểm sinh học, kỹ thuật nuôi thƣơng phẩm tạo đàn cá hậu bị loài cá biển kinh tế: cá Song vằn (Epinephelus fuscoguttatus), cá Song vua (E lanceolatus), cá Song chuột (Cromileptes altivelis), cá Hồng vân bạc (Lutjanus argentimaculatus), cá Chim vây vàng (Trachinotus blochii)” Cá Song vua giống đƣợc nhập từ Đài Loan (năm 2003), kích thƣớc - cm với giá 2,5 USD/con Kết năm đầu tiên, cá Song vua sinh trƣởng 3,0 kg/con/năm, đến năm thứ cá sinh trƣởng nhanh 4,0 - 5,0 kg/con/năm, năm thứ cá sinh trƣởng cao 8,0 - 9,0 kg/con/năm Cùng thời gian này, Viện Nghiên cứu NTTS I đƣợc Bộ thuỷ sản (nay Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn) phân công thực nhiệm vụ: “Bảo tồn lƣu giữ nguồn gen lồi thuỷ sản nƣớc lợ, mặn”, cá Song vua đối tƣợng ƣu tiên lƣu giữ Nhiệm vụ thu thập đƣợc cá thể cá Song vua (02 cá thể từ Cồn Cỏ - Quảng Trị, 01 cá thể từ Quảng Ninh ), sau năm ni giữ chúng đạt kích thƣớc sinh sản (kích thƣớc >1,3 m, khối lƣợng >50,0 kg) Năm 2007, cán Viện Nghiên cứu NTTS I tiến hành chuyển giới tính cá thể cá Song vua thành cá đực Kết ban đầu cho thấy, cá chuyển thành cá đực có tinh tốt hai cá có tuyến sinh dục phát triển giai đoạn III Từ nguồn cá nhập từ Đài Loan, nhiệm vụ chọn lọc cá thể có kích thƣớc lớn, khoẻ mạnh để tập trung nuôi giữ, cá đƣợc lựa chọn nuôi lƣu giữ có khối lƣợng từ 30,0 - 60,0 kg Đây đàn cá Song vua miền Bắc Việt Nam có số lƣợng, khối lƣợng đủ tiêu chuẩn để tiến hành nghiên cứu sinh sản Do độ tuổi sinh học, công nghệ sản xuất giống phức tạp, việc tiến hành sinh sản loài cá trở nên cấp thiết bỏ lỡ thời điểm phải nhiều năm gây dựng đƣợc đàn cá Song vua với tiêu chuẩn tƣơng tự Đàn cá Song vua bố mẹ Viện Nghiên cứu NTTS I ni Cát Bà, Hải Phịng độ tuổi sinh sản, phù hợp cho hƣớng nghiên cứu luận án Cho đến thời điểm Việt Nam chƣa có cơng trình nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh sản cá Song vua Do vậy, việc nghiên cứu số đặc điểm sinh học giai đoạn phát triển sớm cá Song vua cần thiết nhằm tạo sở khoa học cho nghiên cứu xây dựng qui trình kỹ thuật sản xuất giống cá Song vua Mục tiêu nội dung nghiên cứu luận án 2.1 Mục tiêu luận án Xác định đƣợc số đặc điểm sinh học giai đoạn phát triển sớm cá Song vua làm sở khoa học cho việc nghiên cứu xây dựng qui trình cơng nghệ sản xuất giống nhân tạo 2.2 Nội dung nghiên cứu luận án 2.2.1 Nội dung 1: Nghiên cứu phát triển phôi cá Song vua ảnh hưởng yếu tố nhiệt độ độ mặn đến trình phát triển phôi - Nghiên cứu diễn biến phát triển phôi cá Song vua điều kiện nhân tạo - Nghiên cứu ảnh hƣởng nhiệt độ, độ mặn đến q trình phát triển phơi 2.2.2 Nội dung 2: Nghiên cứu đặc điểm sinh học ấu trùng cá Song vua - Nghiên cứu biến đổi hình thái cấu tạo ấu trùng nở đến hết noãn hồng - Nghiên cứu hình thái ống tiêu hố, nhu cầu dinh dƣỡng ấu trùng nở sau cá mở miệng suốt trình phát triển ấu trùng - Nghiên cứu ảnh hƣởng nhiệt độ độ mặn đến thời gian biến thái, sinh trƣởng tỷ lệ sống ấu trùng 2.2.3 Nội dung 3: Nghiên cứu đặc điểm dinh dưỡng cá Song vua từ giai đoạn ấu trùng đến cá giống - Nghiên cứu ảnh hƣởng loại thức ăn khác đến sinh trƣởng tỷ lệ sống cá Song vua giai đoạn ấu trùng lên cá giống 3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án - Ý nghĩa khoa học: Hiện có Đài Loan thành cơng việc chủ động sản xuất giống nhân tạo cá Song vua Nghiên cứu số đặc điểm sinh học cá Song vua giai đoạn ấu trùng bƣớc tiến lĩnh vực khoa học công nghệ nuôi trồng thủy sản Việt Nam Luận án cung cấp thông tin phát triển phôi, ảnh hƣởng yếu tố môi trƣờng đến phát triển phơi, đặc điểm phát triển hình thái ấu trùng, ảnh hƣởng môi trƣờng đến tỷ lệ sống, sinh trƣởng thời gian biến thái nhƣ đặc tính sử dụng thức ăn cá Song vua giai đoạn ấu trùng cá hƣơng - Ý nghĩa thực tiễn: Luận án cung cấp sở khoa học, nguồn tài liệu tham khảo quan trọng cho nhà nghiên cứu sinh sản sản xuất giống loài cá Song nói chung cá Song vua nói riêng Nguồn thơng tin cịn sở xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất giống nhân tạo cá Song vua, góp phần vào việc bảo tồn nguồn lợi cá Song vua có nguy tuyệt chủng ngồi tự nhiên Tính luận án Lần luận án tiến hành nghiên cứu cơng bố đặc điểm hình thái, q trình phát triển giai đoạn phôi, ấu trùng cá hƣơng ấu trùng cá Song vua cách đầy đủ, không nghiên cứu Việt Nam mà giới Luận án có điểm cung cấp cho lĩnh vực chuyên ngành là: (1) mô tả đặc điểm phát triển cá Song vua giai đoạn sớm; (2) xác định ảnh hƣởng thức ăn đến tỷ lệ sống cá (3) ảnh hƣởng số yếu tố môi trƣờng đến sinh trƣởng phát triển cá Song vua giai đoạn phát triển ban đầu Chƣơng I TỔNG QUAN 1.1 Các nghiên cứu hệ thống phân loại, sinh trƣởng, sinh sản cá Song vua 1.1.1 Hệ thống phân loại hình thái cá Song vua Heemstra Randall (1993) công bố nghiên cứu hệ thống phân loại cá Song vua nhƣ sau: Ngành Chordata Lớp Actinopterygii Bộ Perciformes Họ Serranidae Giống Epinephelus Lồi Epinephelus lanceolatus (Bloch, 1790) Hình 1.1 Cá Song vua (photo by To, W-L) Cá Song vua có tên tiếng Anh King grouper, Giant grouper Heemstra Randall (1993); Myoung cs (2013) miêu tả: cá Song vua có thân hình bầu dục, chiều dài thể 2,4 - 3,4 lần chiều cao thân cá, 2,2 - 2,7 lần chiều dài đầu, chiều cao thân cá 1,5 - 1,75 lần chiều dày thân Chiều dài đầu 3,3 - 6,2 lần khoảng cách hốc mắt; vùng diện tích hai mắt lồi phía lƣng Xƣơng nắp mang trƣớc có hình cƣa góc lƣợn trịn, rìa xƣơng nắp mang sau lồi nhơ phía sau; đƣờng kính mắt chiều dài đầu chia cho từ 5,8 đến 14 lần; lỗ mũi gần nhau; hàm dƣới có - hàng cá đạt chiều dài 20 - 25 cm SL (SL độ dài tiêu chuẩn) tăng tới 15 - 16 hàng cá đạt chiều dài 177 cm SL; nanh mọc trƣớc hàm nhỏ khơng có Cung mang thứ có -10 lƣợc mang, xƣơng nắp mang bao phủ kín cung mang Vây lƣng có 11 tia vây cứng, 14 - 16 tia vây mềm, chiều dài tia vây cứng ngắn chiều dài tia vây mềm Vây có dạng hình trịn có tia vây cứng tia vây mềm, vây ngực có 18 - 20 tia vây mềm Chiều dài đầu 1,8 - 2,2 lần chiều dài vây ngực, vây bụng không kéo dài đến gần vây hậu môn 2,1 - 2,6 lần chiều dài đầu Vẩy đƣờng bên 54 - 62 Cá Song vua lúc nhỏ có màu vàng thể rõ rìa vây lƣng, vây đuôi, vây hậu môn vây ngực, cá trƣởng thành tồn thể có màu nâu đậm, vây màu tối 1.1.2 Đặc điểm phân bố, mơi trường sống đặc tính ăn cá Song vua Cá Song vua loài cá Song phân bố rộng, xuất vùng Ấn Độ Dƣơng Thái Bình Dƣơng, từ Biển Đỏ tới vịnh Algoa, Nam Phi, quần đảo Hawaii quần đảo Pitcairn Ở phía Tây Thái Bình Dƣơng, cá Song vua phân bố từ phía Bắc tới Nam Nhật Bản phía Nam tới Úc (Heemstra Randall, 1993) Tài liệu Heemstra Randall (1993) công bố bắt đƣợc cá Song vua độ sâu 100 m nhƣng đƣợc tìm thấy thƣờng xuyên vùng nƣớc nông, hang vùng rạn san hô quanh tàu bị đắm; cá Song vua trƣởng thành cá nhỏ đƣợc tìm thấy vùng cửa sơng Thức ăn ƣa thích cá Song vua sống vùng rạn san hô vùng đáy nhiều đá cá thể giáp xác lớn nhƣ tôm hùm, cua lớn, cá thể rùa biển kích cỡ nhỏ Khi cá Song vua sống vùng cửa sông, vũng vịnh ven bờ, thức ăn chủ yếu cá số lồi giáp xác kích cỡ lớn nhƣ cua, ghẹ, cá Ở vùng cửa sông Nam Phi, mồi thƣờng đƣợc sử dụng để bẫy cá Song vua Cua bùn Scylla serrata 1.1.3 Kích thước sinh trưởng Các báo cáo cho cá Song vua loài cá lớn vùng rạn san hô Schultz (1966) báo cáo cá thể dài 231 cm, nặng 214 kg từ Bikini Atoll (Cộng hoà Marshall) Một cá thể nặng 288 kg Queensland (Úc) đƣợc báo cáo Grant (1982) Theo Fourmanoir Laboute (1976) cá Song vua đạt tới 400 kg Tuy nhiên, tài liệu nghiên cứu sinh trƣởng cá Song vua không nhiều chƣa có nghiên cứu đầy đủ sinh trƣởng loài cá Mặc dù, báo cáo cho thấy lồi cá có tốc độ sinh trƣởng nhanh Cá Song vua ni tháng đạt 1,0 kg (Boonliptanont, 1997) Trong nghiên cứu Vatanakul cs (1999), cá Song vua có nguồn gốc tự nhiên ni Thái Lan có tốc độ sinh trƣởng lần lƣợt từ năm thứ đến năm thứ 500,99 - 646,00 g/tháng, 456,67 - 674,50 g/tháng, 650,00 - 694,16 g/tháng 507,50 - 588,57 g/tháng với thức ăn sử dụng cá tạp tỷ lệ chuyển đổi thức ăn trung bình 2,85 - 4,09 Theo Lê Xân (2006), cá Song vua nuôi vùng biển Cát Bà (Hải Phịng) sau tháng ni từ cỡ cm (0,8 g) cá đạt trung bình 56,7 g, sau 10 tháng nuôi đạt 1400 – 1500 g đạt 16000 g sau 24 tháng nuôi 1.1.4 Nghiên cứu đặc điểm sinh sản cá Song vua 1.1.4.1.Nuôi vỗ kích thích sinh sản cá bố mẹ cá Song vua Nghiên cứu cá Song vua đƣợc công bố nhóm tác giả Viện nghiên cứu ni trồng thủy sản ven biển quốc gia (Thái Lan) nghiên cứu phát triển cá bố mẹ điều kiện nuôi nhốt lồng đảo Nu Cá Song vua đƣợc chọn từ lồng nuôi thƣơng phẩm với kích thƣớc ban đầu 285,3 ± 111,58 g 441,0 ± 90,00 g Cá đƣợc ni lồng kích thƣớc: (dài 5m x rộng m x sâu 3m) = 75m3 với mật độ thả lần lƣợt con/m2 1,5 con/m2 Năm thứ quan sát thấy tinh dịch cá Song vua đực vuốt bụng cá vào mùa sinh sản Sang đến năm thứ cá đực cá thành thục với việc hình thành trứng tinh (Vatanakul cs., 1999) Nhóm tác giả thử nghiệm cho sinh sản cá Song vua việc sử dụng hai loại kích dục tố HCG Puberogen thu đƣợc kết ban đầu khả quan: cá Song vua thành thục sinh sản điều kiện nuôi nhốt với tỷ lệ trứng thụ tinh 16,1 % tỷ lệ nở 1,45 %, thu đƣợc 164.550 ấu trùng cá Song vua nở (Vatanakul cs., 1999) Trong hội nghị tổng kết nuôi trồng thủy sản Indonesia năm 2007, tác giả Santoso Djunardi đề cập tới tầm quan trọng việc cung cấp chế độ dinh dƣỡng thích hợp cho cá bố mẹ cá Song vua ni Lampung - Indonesia với việc sử dụng thức ăn cá tạp cua, có bổ sung vitamin C 150 mg/kg thức ăn vitamin E 1000 mg/kg thức ăn Hanung Santosa Sukadi (2008) báo cáo thành công việc cho cá Song vua sinh sản vào tháng với việc cấy LHRHa liều lƣợng 10 - 20 mg/kg vào thể cá vào tháng Tuy nhiên, báo cáo giới hạn mức độ cung cấp thơng tin, chƣa có nghiên cứu kết cụ thể 1.1.4.2 Nghiên cứu bảo quản tinh cá Song vua Các nghiên cứu việc sinh sản cá Song vua gặp khó khăn việc cho cá Song vua sinh sản tự nhiên phát triển đồng pha tuyến sinh dục cá đực cá Năm 2008, nhóm tác giả Trung Quốc tiến hành thí nghiệm cho sinh sản với 12 cá thể cá thể cá Song vua đực Tác giả báo cáo sau tiêm kích dục tố, cá Song vua sinh sản tự nhiên nhƣng trứng thụ tinh Trứng cá Song vua thí nghiệm thụ tinh đƣợc thụ tinh nhân tạo trứng nở sau 25 40 phút sau thụ tinh với nhiệt độ 27 ± 0,5oC, độ mặn 31 ppt, pH 7,8 (Zhang cs., 2008) Tuy nhiên, báo cáo giới hạn mức độ cung cấp thông tin kết không đƣợc công bố rộng rãi Do khó khăn việc cho sinh sản tự nhiên cá Song vua việc thành thục không đồng pha cá đực cá cái, nên thí nghiệm ảnh hƣởng yếu tố môi trƣờng lên tinh trùng nghiên cứu để bảo quản tinh cá Song vua đƣợc thực nhiều tác giả khác Liang cs (2009) thí nghiệm khả hoạt động tinh trùng cá Song vua cho thấy khả hoạt động tốt tinh trùng cá Song vua độ mặn 27,5 - 35 ppt với thời gian sống sót dài đƣợc ghi nhận 14,8 phút pH tối ƣu cho hoạt động tinh trùng 8,5 với thời gian vận động 12,7 phút thời gian sống 17,3 phút Thời gian vận động dài tinh trùng đƣợc ghi nhận thí nghiệm nhiệt độ khác 16,6 phút 29oC Kết thí nghiệm cho thấy ngƣỡng nhiệt độ thích hợp 27 - 31oC Cũng thí nghiệm này, sau đƣợc bảo quản nhiệt độ - 4oC giờ, thời gian vận động tinh trùng 18,2 phút khơng có khác biệt so với lô đối chứng kiểm tra vuốt tinh 18,4 phút Tuy nhiên, sau 120 đƣợc giữ nhiệt độ thời gian hoạt động tinh trùng 2,3 phút với tỷ lệ hoạt động tinh trùng 3,3% Các tác giả đề xuất tinh trùng nên đƣợc sử dụng sớm tốt sau đƣợc bảo quản Kết thí nghiệm có ý nghĩa quan trọng việc tìm mơi trƣờng nƣớc thích hợp cho tinh trùng Tuy nhiên, thí nghiệm thời gian bảo quản tinh khơng thuyết phục tác giả so sánh hoạt lực tinh trùng thời điểm sau vuốt tinh thời điểm 120 sau vuốt tinh Năm 2011, thí nghiệm nghiên cứu ảnh hƣởng chất bảo quản (Marine Fish Ringers, natri citrate natri chlorite) hai chất chống đông (10% dimethyl sulfoxide - DMSO 15% Trehalose) việc bảo quản tinh cá Song vua để sử dụng cho việc lai ghép với trứng cá Song chấm nâu Epinephelus coioides đƣợc tiến hành Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Thủy sản ven bờ Rayong - Thái Lan (Kiriyakit cs., 2011) Thí nghiệm đƣợc tiến hành với cá đực cá Song vua khối lƣợng 67,7 ± 10,0 kg với thời gian bảo quản tinh 10 Kết cho thấy việc sử dụng natri citrate Marine Fish Ringers cho tỷ lệ thụ tinh cao (70,54 ± 2,75% 68,17 ± 3,56%) so với sử dụng natri chlorite (57,78 ± 1,29%) Khả di chuyển sống sót tinh trùng cao tất nghiệm thức từ 67 ± tới 100% Thí nghiệm chất bảo quản gần đƣợc tiến hành Trung Quốc Fan cs (2013) Trong thí nghiệm tinh cá Song vua đƣợc bảo quản kết hợp chất chống đông khác (DMSO, methanol glycerol) nồng độ pha loãng khác Kết nghiên cứu MPRS (chứa 12% DMSO) TS - 19 (chứa 12% DMSO) chất bảo quản tốt để chống lại đông cứng tinh cá Song vua môi trƣờng nitơ lỏng Tinh trùng sau rã đơng có hoạt lực cao với tỷ lệ vận động 90,61 ± 3,03% tỷ lệ thụ tinh 92,27 ± 2,43%, kết khơng có khác biệt so với tinh trùng sử dụng để thụ tinh sau vuốt tinh mà không qua bảo quản (94,34 ± 4% 94,10 ± 1,87%) Trong thí nghiệm tinh trùng đƣợc lấy từ cá đực 16 tuổi có khối lƣợng trung bình 63,4 ± kg chiều dài trung bình 1,26 ± 0,26 mTL Tuy nhiên, kết nghiên cứu chƣa thuyết phục đƣợc nhà chuyên môn tác giả không đề cập tới thời gian bảo quản tinh, yếu tố quan trọng để đánh giá hiệu phƣơng pháp bảo quản chất bảo quản 1.1.4.3 Nghiên cứu ương ấu trùng cá Song vua Các thơng tin khơng thức nhận định Đài Loan nơi sản xuất thành cơng giống cá Song vua nhƣng có công bố tác giả Đài Loan nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản Công bố tác giả Đài Loan chủ yếu liên quan đến giai đoạn ƣơng cá hƣơng Hseu cs (2004) sử dụng 800 cá hƣơng cá Song vua có kích thƣớc tối thiểu 19 mm để nghiên cứu ăn thịt lẫn cá Song vua ƣơng từ giai đoạn cá hƣơng lên cá giống Nghiên cứu chênh lệch kích thƣớc giai đoạn cá hƣơng cá Song vua khoảng 30% nên tiến hành lọc phân cỡ cá để hạn chế việc ăn thịt lẫn Ling cs (2010) thực thí nghiệm để theo dõi phát triển phơi, thay đổi hình thái thức ăn ấu trùng cá Song vua Nghiên cứu rằng, thời gian phát triển phôi cá Song vua 18 30 phút điều kiện nhiệt độ 29 ± 0,5oC, sục khí nhẹ, độ mặn 30 ppt Q trình phát triển phơi cá Song vua đƣợc chia thành giai đoạn: giai đoạn phân chia, giai đoạn phôi nang, giai đoạn phôi vị, giai đoạn phơi thần kinh giai đoạn hình thành quan Ấu trùng nở đƣợc ƣơng bể trời với điều kiện nhiệt độ 25 - 30oC độ mặn 33 - 35ppt 72 sau nở, nỗn hồng hầu nhƣ biến ấu trùng cá Song vua bắt đầu ăn protozoa Từ ngày thứ ấu trùng ăn động vật nguyên sinh luân trùng nhỏ Từ ngày thứ ấu trùng bắt đầu ăn nauplii copepod luân trùng Sau 13 ngày từ nở, ấu trùng cá ăn chủ yếu copepod phần ăn tăng dần lên Tuy nhiên, nghiên cứu dừng lại mức độ cung cấp thơng tin chung Năm 2013, nhóm tác giả Đài Loan thực nghiên cứu để so sánh ảnh hƣởng bón phân vơ lên chất lƣợng nƣớc, thực vật phù du, động vật phù du ấu trùng cá Song vua, so với phƣơng pháp ƣơng truyền thống sử dụng luân trùng Theo tác giả mục đích việc thêm phân vơ vào để trì thức ăn tự nhiên bể ƣơng (Tew cs., 2013) Thí nghiệm sử dụng bể ƣơng hình trịn thể tích m3, nƣớc biển đƣợc cấp trƣớc thả trứng ngày, nƣớc đƣợc lọc qua túi lọc mắt lƣới 300 µm để loại bỏ trứng ấu trùng loài cá khác, với kích thƣớc mắt lƣới loài thực vật phù du động vật phù du cỡ nhỏ lọt qua cách dễ ràng, với 18.000 trứng thụ tinh đƣợc thả bể, mật độ khoảng 10 trứng/L Hàng tuần bổ sung phân vô vào bể ƣơng để trì hàm lƣợng Nitơ vơ 700 µg/L photphate 100 µg/L, ln trùng đƣợc cấp vào bể ƣơng từ ngày thứ 9, thí nghiệm đối chứng ln trùng đƣợc cấp vào bể ƣơng từ ngày thứ với mật độ 10 con/L Kết cho thấy môi trƣờng bể ƣơng kích thƣớc lồi tảo đơn bào từ 10 - 50 µm, lồi động vật phù du 50 - 100 µm, tỷ lệ sống ấu trùng bể ƣơng theo phƣơng pháp bón phân vơ 10 Anova: Single Factor SUMMARY Groups 24±0,5 28±0,5 32±0,5 35±0,5 độ mặn - Tỷ lệ nở (%) Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 1591.166203 19.27261587 Total 1610.438819 Anova: Single Factor SUMMARY Groups 24±0,5 28±0,5 32±0,5 35±0,5 Sum 71.39806544 111.4856533 157.6237463 150.9184057 Average 23.79935515 37.16188444 52.54124876 50.30613524 Variance 3.6292305 1.79846604 2.03723034 2.17138105 df MS 530.3887343 2.409076984 F 220.162634 11 P-value 5.02339E-08 F crit 4.066180557 significant difference độ mặn -Tỷ lệ ấu trùng dị hình (%) Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.32044699 0.330544555 Total 0.650991545 Sum Average 5.008951223 1.669650408 3.971588465 1.323862822 3.891200525 1.297066842 3.79523616 1.26507872 df MS 0.106815663 0.041318069 Variance 0.0184013 0.0710808 0.0264264 0.0493637 F 2.585205 P-value 0.1257581 Not significant difference 11 F crit 4.0661806 Ảnh hƣởng nhiệt độ độ mặn đến cá Song vua giai đoạn ấu trùng Anova: Single Factor SUMMARY Groups ĐC Nhiệt độ - kích thước - 20 ngày tuổi Count 30 30 30 30 25 28 31 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS df 337.5095833 79.51366667 116 417.02325 119 Anova: Single Factor SUMMARY Groups ĐC Sum 302.8 236.6 333.2 374.5 Average 10.09333333 7.886666667 11.10666667 12.48333333 MS 112.5031944 0.685462644 Variance 0.461333333 0.894298851 0.594436782 0.791781609 F 164.1273897 P-value F crit 1.40675E-41 2.682809415 significant difference Nhiệt độ - kích thước - Thời điểm biến thái Count 30 30 30 30 25 28 31 Sum 1068.1 1017 1092 1035 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups 112.30025 714.2096667 116 Total 826.5099167 119 SS df Average 35.6 33.9 36.4 34.5 MS 37.43341667 6.156979885 Variance 8.10654023 11.97931034 2.756551724 1.785517241 F P-value 2.682809415 0.070274809 6.079834166 not significant difference F crit Anova: Single Factor Độ mặn (ppt)- kích thước -20 ngày tuổi SUMMARY Groups Count 24 28 32 35 30 30 30 30 Between Groups Within Groups SS 69.4135833 82.8723333 Total 152.285916 ANOVA Source of Variation Sum 307.8 341.6 316.2 277.7 MS F 23.13786111 32.38706793 116 0.714416667 119 P-value 2.7808E15 F crit 2.682809415 significant difference Độ mặn (ppt) - kích thước -Thời điểm biến thái Count 24 28 32 35 Variance 0.715586207 0.523264368 0.833517241 0.785298851 df Anova: Single Factor SUMMARY Groups Average 10.26 11.38666667 10.54 9.256666667 30 30 30 30 Sum 1088.9 1101.1 1074.1 1068 Average 36.29667 36.70333 35.80333 35.6 Variance 6.462402 13.42723 5.040333 8.346207 MS 7.406972 8.319043 F 0.890363 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 22.22092 965.009 Total 987.2299 df 116 119 P-value 0.448425 not significant difference F crit 2.682809 Anova: Single Factor nhiệt độ -20 DAH - Tỷ lệ sống SUMMARY Groups ĐC (25 - 26.5) 25 28 31 Sum 6.472271 4.658075 9.395866 8.264413 Average 2.157424 1.552692 3.131955 2.754804 Variance 0.053284 0.073723 0.011283 0.03158 df MS 1.438417 0.042468 F 33.87093 Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 4.315251 0.339741 Total 4.654992 11 Anova: Single Factor SUMMARY Groups ĐC 25 28 31 P-value 6.78E-05 F crit 4.066181 significant difference nhiệt độ - biến thái- Tỷ lệ sống Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 1.73134 0.134712 Total 1.866052 Sum 4.415843 3.181718 6.185091 5.515208 df Average 1.471948 1.060573 2.061697 1.838403 Variance 0.010056 0.012779 0.014109 0.030413 MS 0.577113 0.016839 F 34.27229 11 P-value 6.49E-05 significant difference F crit 4.066181 Anova: Single Factor SUMMARY Groups Độ mặn -20 DAH - Tỷ lệ sống Count 24 28 32 35 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total 3 3 SS 4.65647833 0.39398108 df 5.0504594 Anova: Single Factor SUMMARY Groups 24 28 32 35 Sum 5.30220336 9.58964982 9.98401449 7.48884285 Average 1.767401 3.19655 3.328005 2.496281 Variance 0.149439926 0.018102713 0.006575769 0.022872129 MS 1.552159 0.049248 F 31.51744164 11 P-value F crit 8.82421E-05 4.066180557 significant difference Độ mặn -biến thái - Tỷ lệ sống Count 3 3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 1.5948094 0.05534819 Total 1.65015759 Sum 4.75984766 7.02910712 7.39615504 5.42460593 df 11 Average 1.586616 2.343036 2.465385 1.808202 Variance 0.003975045 0.005275521 0.002815109 0.015608423 MS 0.531603 0.006919 F 76.83764712 P-value 3.07259E-06 significant difference F crit 4.066180557 Ảnh hƣởng thức ăn đến ấu trùng cá Song vua -9 ngày tuổi Anova: Single Factor kích thước - 2DAH SUMMARY Groups CT1 CT2 CT3 Không cho ăn Count 30 30 30 24 Sum 70.88 70.89 70.9 56.62 Average 2.362666667 2.363 2.363333333 2.359166667 MS 9.50292E-05 0.021671515 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.000285088 2.383866667 df Total 2.384151754 113 Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT1 CT2 CT3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total 110 Variance 0.003689 0.006311 0.002499 0.087886 F P-value 0.004385 0.999598 F crit 2.687139 not significant difference kích thước -6DAH Count 30 30 30 SS Sum 106.12 104.25 105.56 df 0.061406667 0.731283333 87 0.79269 89 Average 3.537333333 3.475 3.518666667 MS 0.030703333 0.008405556 Variance 0.007847816 0.011384483 0.005984368 F P-value 3.601295757 0.029972977 3.152742895 significant difference F crit Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT1 CT2 CT3 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups kích thước - 9DAH Count 30 30 30 Sum 119.29 120.32 126.21 Average 3.976333333 4.010666667 4.207 df MS SS 0.929326667 5.059113333 87 5.98844 89 Total Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT1 CT2 CT3 Không cho ăn ANOVA Source of Variation 0.464663333 0.058150728 Variance 0.133686092 0.032047816 0.008718276 F P-value F crit 7.990670961 0.000651765 3.101295757 significant difference Survival rate - DAH Count 3 3 SS Sum 26.92186 27.0713 26.97037 27.17545 df Average Variance 8.973953 0.00224 9.023767 0.007452 8.990125 0.016487 9.058485 0.015775 MS Between Groups Within Groups 0.012674 0.083905 Total 0.096579 11 10 F 0.004225 0.402805 0.010488 P-value F crit 0.755047 4.066181 not significant difference Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT1 CT2 CT3 Survival rate - DAH Count Sum 103.4253 80.09424 45.96782 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 556.7009 18.8799 Total 575.5808 df MS F 278.3505 88.45929 3.14665 Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT1 CT2 CT3 Average Variance 34.47509 3.512695 26.69808 1.133275 15.32261 4.793981 P-value 3.53E-05 F crit 5.143253 significant difference Survival rate - DAH Count Sum 12.78306 10.96268 7.43768 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 4.923613604 0.431290505 Total 5.354904108 df Average 4.26102 3.654227 2.479227 Variance 0.115557 0.019935 0.080153 MS 2.461807 0.071882 F 34.24801 P-value 0.000522 significant difference 11 F crit 5.14325285 Ảnh hƣởng thức ăn đến ấu trùng cá Song vua 10 -21 ngày tuổi Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT4 CT5 CT6 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT4 CT5 CT6 Total length 15 DAH Count 30 30 30 Sum 216.58 190.78 205.53 Average 7.219333 6.359333 6.851 Variance 0.080372 0.098372 0.036251 SS 11.17006 6.234843 df MS 5.585028 0.071665 F 77.93258 87 17.4049 89 P-value 4.03E-20 F crit 3.101296 significant difference Total length 21 DAH Count 30 30 30 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 65.52363556 16.43706333 Total 81.96069889 Sum Average 370.09 12.33633333 307.39 10.24633333 338.43 11.281 df MS 32.76181778 87 0.188931762 89 Variance 0.254092989 0.255086092 0.057616207 F 173.4055585 P-value F crit 4.43106E-31 3.101295757 significant difference 12 Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT4 CT5 CT6 Survival rate - 15 DAH Count 4 ANOVA Source of Variation SS Sum 259.9095 222.5278 238.7819 Average 64.97737 55.63195 59.69549 Variance 3.988116 1.001169 3.328604 df MS F Between Groups Within Groups 175.6634 24.95367 Total 200.6171 11 Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT4 CT5 CT6 87.8317 2.77263 31.67812 P-value 8.44E-05 F crit 4.256495 significant difference Survival rate - 21 DAH Count 4 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 104.8985 38.33599 Total 143.2344 Sum 242.98 214.3429 232.4467 df Average 60.74500137 53.58572793 58.11168512 MS 52.44922608 4.259554383 11 Variance 5.60057 5.362232 1.815861 F 12.31331 P-value 0.002655 significant difference 13 F crit 4.256495 Ảnh hƣởng thức ăn đến ấu trùng cá Song vua 22 - 42 ngày tuổi Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT7 CT8 CT9 Total length 42 DAH Count Sum 30 1089 30 1064 30 1278 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 912.6888889 2208.966667 Total 3121.655556 Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT7 CT8 CT9 df 87 Average 36.3 35.46666667 42.6 Variance 53.18275862 16.53333333 6.455172414 MS 456.3444444 25.39042146 F 17.97309451 89 P-value F crit 2.9274E-07 3.101295757 significant difference Survival rate - 27 DAH Count Sum 291.6898 276.7925 225.9991 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 593.0969 32.55223 Total 625.6491 Average 72.92245 69.19812 56.49978 df Variance 1.381776 8.162231 1.306738 MS F 296.5484 81.98933 3.616915 11 P-value F crit 1.67E-06 4.256495 significant difference 14 Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT7 CT8 CT9 Survival rate - 32 DAH Count Sum 270.9039 241.36 100.6135 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups 4140.104 46.54103 Total 4186.645 11 SS df Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT7 CT8 CT9 Average 67.72597 60.34 25.15337 MS Variance 6.575545 3.196157 5.741974 F 2070.052 5.171225 400.3021 P-value F crit 1.61E-09 4.256495 significant difference Survival rate - 37 DAH Count Sum 201.7106 223.999 76.60099 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups 3156.282 38.34334 Total 3194.625 11 SS df Average Variance 50.42766 3.789500669 55.99976 6.847267691 19.15025 2.144343653 MS F 1578.141 370.4234006 4.260371 P-value 2.27E-09 4.256495 significant difference 15 F crit Anova: Single Factor SUMMARY Groups Survival rate - 42 DAH Count CT7 CT8 CT9 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 2848.061 73.11404 Total 2921.175 Sum 148.3512748 Average 37.08782 Variance 12.84853 213.748935 53.43723 6.117671 63.23362139 15.80841 5.405149 df MS 1424.03 8.123782 F 175.2916 11 P-value 6.21E-08 F crit 4.256495 significant difference Ảnh hưởng thức ăn đến ấu trùng cá Song vua 42 - 84 ngày tuổi Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT10 CT11 CT12 Total length 84 DAH Count Sum Average Variance 30 2256 75.2 18.23448276 30 3597 119.9 21.12758621 30 3358 111.9333333 59.51264368 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups 34108.95556 2867.366667 17054.47778 517.4572139 87 32.95823755 Total 36976.32222 89 SS df MS F P-value F crit 4.96408E-49 3.101295757 significant difference 16 Anova: Single Factor Survival rate - 53 DAH SUMMARY Groups CT10 CT11 CT12 Count ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups Total SS 0.04143 0.157099 Average Variance 9.616673 0.026135 9.758978 0.016469 9.669161 0.009762 df MS F P-value F crit 0.020715 1.186742 0.348795 4.256495 0.017455 0.19853 Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT10 CT11 CT12 Sum 38.46669 39.03591 38.67664 11 not significant difference Survival rate - 63 DAH Count Sum 37.24431 38.09832 37.56982 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups 0.092882 0.471839 Total 0.564722 11 SS df Average 9.311079 9.52458 9.392456 Variance 0.071752 0.043174 0.042354 MS F 0.046441 0.052427 P-value 0.885831 0.445471 4.256495 not significant difference 17 F crit Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT10 CT11 CT12 Survival rate - 73 DAH Count Sum Average Variance 35.49454 8.873634 0.01149211 36.92525 9.231312 0.043849233 36.05436 9.013591 0.006911836 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.259898 0.18676 Total 0.446657 df MS F P-value F crit 0.129949 6.262281563 0.019765 4.256495 0.020751 11 significant difference Anova: Single Factor SUMMARY Groups CT10 CT11 CT12 Survival rate -84 DAH Count Sum Average Variance 35.15332 8.788331 0.020327 36.70787 9.176967 0.044371 35.43488 8.858719 0.0308 ANOVA Source of Variation Between Groups Within Groups SS 0.343032656 0.286494248 Total 0.629526904 df MS F P-value F crit 0.171516 5.388056 0.028937 4.256495 0.031833 11 significant difference 18 ... ấu trùng 1.3 Nghiên cứu trình phát triển giai đoạn ấu trùng cá biển 1.3.1 Nghiên cứu đặc điểm hình thái ấu trùng cá Song cá biển Nghiên cứu hình thái ấu trùng nội dung quan trọng nghiên cứu sinh. .. theo, phát triển cá Song vua từ giai đoạn nở đến hết giai đoạn ấu trùng đƣợc nghiên cứu cách tỉ mỉ hình thái học, tạo sở khoa học cho nghiên cứu đối tƣợng ấu trùng cá Song vua Để tìm hiểu ảnh hƣởng... Tính luận án Lần luận án tiến hành nghiên cứu công bố đặc điểm hình thái, trình phát triển giai đoạn phôi, ấu trùng cá hƣơng ấu trùng cá Song vua cách đầy đủ, không nghiên cứu Việt Nam mà giới Luận