Kích thích tính kháng lưu dẫn bị ảnh hưởng bởi các nòi nấm cháy lá pot

Mừng Xuân Giáp thân 2004 Thông tin khoa học Số 16 1 ðại học An Giang 01/2004 Kích thích tính kh Kích thích tính khKích thích tính kh Kích thích tính kháng lưu dẫ áng lưu dẫáng lưu dẫ áng lưu dẫn n n n b bb bò òò ò ảnh hư ảnh hư ảnh hư ảnh hưở ởở ởng b ng bng b ng bở ởở ởi c i ci c i các nòi ác nòi ác nòi ác nòi n nn nấ ấấ ấm m m m ch chch chá áá áy l y ly l y lá áá á Ths. Nguyễn Thị Thanh Xn Ở ðẦU Bệnh cháy lá do nấm Pyricularia grisea là bệnh phân bố rộng và gây tác hại nghiêm trọng (Ou,1983; P.V. Kim, 2000). Biện pháp giống kháng có chỉ có hiệu quả trong một số vùng và trong một thời gian ngắn. ðối với xử dụng nơng dược gây ảnh hưởng xấu đến mơi trường và sức khỏe cộng đồng và gây hiện tượng kháng thuốc (P.V. Dư và ctv, 1999; Tuzun and Kloepper, 1995). ðể hạn chế các vấn đề trên, các nhà khoa học nghiên cứu biện pháp “kích thích tính kháng ở cây trồng” một biện pháp sinh học hứa hẹn trong chiến lược quản lý dịch hại tổng hợp. ðối với nước ta, kích thích tính kháng là lãnh vực nghiên cứu mới nhưng đã cho thấy khả năng phòng trừ bệnh cháy lá trong điều kiện nhà lưới và ngồi đồng (SAR một hướng đi mới trong phòng trị bệnh cháy lá lúa của Nguyễn Phú Dũng đã đăng trong thơng tin khoa học số 15). Tuy nhiên, khi lập lại các thí nghiệm trên, một số thí nghiệm khơng cho kết quả tương tự. Giả thuyết có thể nòi nấm khác nhau đã gây ra hiện tượng trên. Vì vậy, đề tài ”Khảo sát ảnh hưởng của nòi nấm Pyricularia grisea lên khả năng kích thích tính kháng khi xử lý với clorua đồng và acibenzolar-s-methyl” nhằm chứng minh cho vấn đề này. PHƯƠNG TIỆN - PHUƠNG PHÁP Nguồn nấm bệnh tấn cơng gồm 4 chủng thu thập ở 3 tỉnh ðồng Bằng Sơng Cửu Long: Chủng OM, CT, S82, S118 thu thập tại Viện lúa Ơ mơn (Cần Thơ), Cần Thơ, Sóc Trăng, Cà Mau năm 2002. Các chủng nấm được phân lập và định nòi theo bộ định nòi của Nhật (Kiyosawa, 1976)gồm các nòi: nòi 122,6, 103,4, 102,6, 44,4. Giống OMCS2000: ngâm 24 giờ trong các dung dịch kích kháng (clorua đồng 0.05mM, acibenzolar-s-methyl 300ppm) và đối chứng nước cất, sau đó đem ủ 60 giờ. Hạt đã nẩy mầm tốt đem gieo thành hàng trong chậu (10x13x10cm). Bón phân theo cơng thức 150-40-10. Phun tấn cơng bởi bốn nòi trên vào 16 ngày sau khi gieo, mật số 50.000 bào tử/ ml. Ghi nhận kết quả tỉ lệ bệnh theo phương pháp Pinnschmidt,H.O và ctv., 1994, vào 7 ngày và 14 ngày sau khi tấn cơng (NSTC). Thu mẫu phân tích enzyme catalase ở các thời điểm: 12, 16, 20, 24, 28, 32, 36 giờ sau tấn cơng (GSTC). Ly trích thành phần sinh hóa trong dịch cây, Uớc lượng protein trong mẫu theo phương pháp Bradford (1976). Phân tích hoạt tính enzim catalase theo Adam và ctv (1995). KẾT QUẢ THẢO LUẬN Các tác nhân kích kháng khác nhau có mức độ phản ứng rất khác nhau về tỉ lệ diện tích lá nhiễm bệnh đối với các nòi nấm. Khi bị tấn cơng bởi nòi độc: 122,6, nghiệm thức xử lý clorua đồng và acibenzolar-s-methyl có tỉ lệ diện tích lá bệnh thấp khác biệt so với đối chứng (bảng 1). Hiệu quả giảm bệnh của nghiệm thức xử lý clorua đồng đạt 82%, còn acibenzolar-s- methyl đạt 61%. Trong khi đó, các chất kích kháng lại khơng thể hiện hiệu quả kích kháng khi cây lúa được tấn cơng với nòi 102,6 cũng có độ độc tương tự nòi 122,6. ðối với hai nòi M Mửứng Xuaõn Giaựp thaõn 2004 Thoõng tin khoa hoùc S 16 2 i hc An Giang 01/2004 gõy hi nh: nũi 44,4 v 103,4, cng khụng cú s khỏc bit v t l din tớch lỏ bnh gia cỏc nghim thc cú x lý kớch khỏng v ủi chng vo 7 NSTC. thi ủim 14NSTC, kh nng kớch khỏng ca cõy b tn cụng bi nũi 122,6 vn duy trỡ ủc cỏc nghim thc cú x lý tỏc nhõn kớch khỏng l clorua ủng v acibenzolar-s-methyl vi hiu qu gim bnh ln lt l 83 % v 71% Khi cõy lỳa b tn cụng bi nũi 102,6, acibenzolar-s-methyl th hin kh nng kớch thớch tớnh khỏng bnh vi hiu qu gim bnh ủt 62,6%, cũn clorua ủng khụng th hin s kớch thớch tớnh khỏng bnh ủi vi nũi nm ny. Khi tn cụng bi hai nũi: 44,4 v 103,4, khụng cú s khỏc bit gia cỏc nghim thc cú x lý kớch khỏng v ủi chng v t l din tớch lỏ nhim bnh. (Thớ nghim lp li hai ln cho kt qu tng t). Bng 1: nh hng clorua ủng, acibenzolar-s-methyl lờn t l din tớch bnh khi tn cụng vi 4 nũi nm, vo thi ủim 7 v 14NSTC. T l din tớch bnh (%), 7 NSTC T l din tớch bnh (%), 14 NSTC Cht kớch khỏng Nũi 122,6 Nũi 44,4 Nũi 102,6 Nũi 103,4 Nũi 122,6 Nũi 44,4 Nũi 102,6 Nũi 103,4 Clorua ủng 1,2 b 0,5 a 2,8 a 0,4 a 3,8 b 0,8 a 7,4 a 1,0 a Acibenzolar. 2,6 b 0,2 a 1,8 a 0,5 a 6,7 b 0,6 a 3,4 b 1,7 a i chng 6,7 a 0,2 a 3,3 a 0,9 a 23,0 a 0,5 a 9,1 a 1,5 a Hỡnh 1: Mc nhim bnh chỏy lỏ lỳa khi b nũi 122,6 (N1) tn cụng: Cu: cõy lỳa cú x lý clorua ủng; Dc: i chng: khụng x lý, Bi: Cõy lỳa cú x lý acibenzolar-s-methyl. Cht kớch khỏng clorua ủng v acibenzolar-s-methyl cú kh nng kớch thớch tớnh khỏng bnh trờn cõy lỳa. Tuy nhiờn, biu hin ca cỏc cht kớch khỏng tựy thuc vo cỏc nũi nm gõy bnh. Trong thớ nghim ny chỳng ta thy, cht kớch khỏng ch cú hiu qu ủi vi cỏc nũi nm ủc vi ging OMCS2000. i vi cỏc nũi khụng ủc v nhng nũi trung gian, biu hin nhim trung bỡnh, cht kớch khỏng cú th biu hin hoc khụng biu hin kh nng kớch thớch tớnh khỏng bnh. Biu hin hiu qu kớch khỏng cng th hin qua hot tớnh ca enzym catalase. Catalase l enzym phõn gii hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) thnh O 2 v H 2 O. H 2 O 2 l mt trong nhng thnh phn ca phn ng t v ca cõy. Vỡ vy, mc catalase(hiu OD) cng cao, cõy sinh ra H 2 O 2 cao ủ t v dn ủn phn ng khỏng bnh ủc kớch thớch. Mừng Xuân Giáp thân 2004 Thông tin khoa học Số 16 3 ðại học An Giang 01/2004 Hoạt tính catalase ở cây được kích kháng bởi clorua đồng và acibenzolar-s-methyl tấn cơng các nòi nấm khác nhau tăng giảm ở các thời điểm khác nhau (Hình 1) Theo Rusterucci và ctv.(1996), catalase tương quan thuận với khả năng kích kháng có thể do sự tăng hàm lượng những chất có khả năng oxy hóa cao (H 2 O 2 ,OH - , O 2 - ) sinh ra khi có mầm bệnh tấn cơng và có liên quan đến phản ứng siêu nhạy cảm, ngăn chặn sự phát triển của mầm bệnh. Như vậy, catalase tăng nhanh ở đây có thể liên quan đến phản ứng gợi lên sự dẫn truyền tín hiệu dẫn đến kích thích tính kháng bệnh (Huckelhoven và ctv. 1999) hoặc catalase có thể sử dụng H 2 O 2 để oxi hóa các chất độc khác. Hình 2: Diễn biến hoạt tính catalase giữa các nghiệm thức xử lý kích kháng được tấn cơng với các nòi nấm. KẾT LUẬN Sự biểu hiện khả năng kích kháng của clorua đồng và acibenzolar-s-methyl tuỳ thuộc vào nòi nấm (Pyricularia oryzae) tấn cơng gây bệnh. Clorua đồng có khả năng kích kháng khi bị tấn cơng bởi nòi 122,6 và khơng có khả năng kích kháng khi bị tấn cơng bởi nòi 44,4, 102,6 và 103,4. Trong khi, acibenzolar-s-methyl có khả năng kích kháng khi bị tấn cơng bởi nòi 122,6 và 102,6 nhưng khơng có khả năng kích kháng khi bị tấn cơng bởi nòi 44,4 và 103,4. Khả năng kích kháng được biểu hiện bằng sự giảm bệnh cháy lá so với đối chứng mà còn thể hiện sự tăng hoạt tính enzyme catalase khi bị tấn cơng bởi các nòi tương ứng. ðỀ NGHỊ Qua kết quả nghiên cứu trên cho thấy cần đánh giá hiệu quả kích kháng của các tác nhân kích kháng với nhiều nòi khác nhau của nấm cháy lá Pyricularia grisea đặc biệt là các nòi phổ biến ở các địa phương. Ngồi ra cũng cần quan tâm đến giống lúa trong mối tương tác với các nòi nấm bệnh ở từng địa phương để sử dụng biện pháp kích kháng có hiệu quả  TÀI LIỆU THAM KHẢO - ADAM, A. L.,C. S. BESTWICK, B. BARNA AND J. W. MANSFIELD. 1995. Enzymes regulating the accumulation of active oxygen species during the hypersensitive reaction of bean to Pseudomonas syringae pv phaseolicola. Planta 197:240-249. - BRADFORD, M. M. 1976. Arapid and sensitive method for quantitation of microgram quatities of protein utilizing the principle of protein -dye binding. Anal. Biochem.72, 248- 254. - HAMMERSCHMIDT. R AND P. YANG- CASHMAN,1995. Induced resistance in Cucurbits.pp. 63-86.In Induced Resistance to Disease in Plants, Hammerschmidt, R.; and Kúc, J. (Eds). Kluwer academic publishers. 3 4 5 6 12 16 20 24 28 32 36 giờ sau tấn cơng Tỉ lệ bệnh (%) Clo rua đồng Acibenzolar. ðối chứng Nòi 102,6 3 4 5 6 12 16 20 24 28 32 36 giờ sau tấn cơng Tỉ lệ bệnh (%) Clorua đồng Acibenzolar. ðối chứng Nòi 103,4 3 4 5 6 12 16 20 24 28 32 36 Giờ sau tấn cơng Tỉ lệ bệnh (%) Clorua đồng Acibenzo lar. ðối chứng Nòi 44,4 3 4 5 6 12 16 20 24 28 32 36 Giờ sau tấn cơng Tỉ lệ bệnh (%) Clorua đồng A cibenzolar. ðối chứ ng Nòi 122,6 Mửứng Xuaõn Giaựp thaõn 2004 Thoõng tin khoa hoùc S 16 4 i hc An Giang 01/2004 - HUCKELHOVEN, R., J. FODOR, PREIS and K.H. KOGEL. 1999. Hypersensitive cell death and papilla formation in barley attacked by the powdery mildrew fungus are associated with hydrogen peroxide but not with salicylic acid accumulation. Plant Physiology 119: 2151-1260. - KIYOSAWA SHIGEHISA, 1976. Pathogenic variations of Pyricularia oryzae and their use in genetic and breeding studies. Sarao journal 8(1), 53-67 - OU, S.H., 1983. Bnh hi lỳa. Nh xut bn nụng nghip. - PHAM VAN DU, NGUYEN BE SAU, TRAN THI NGOC BICH and PHAM VAN KIM 1999. Studies on systemic acquired resistance in rice using abiotic factor against leaf blast and other serious rice pathogens. Report in 2 nd worshop of "systemic acquired resistance" ecofriendly strategy for managing in rice and pear millet . 5pp. - PHM VN KIM, 2000. Cỏc nguyờn lý v bnh hi cõy trng. Khoa Nụng Nghip, Trng i Hc Cn Th. Ti liu lu hnh ni b. - PINNSCHMIDT, H.O., P. S. TENG and LUOYONG, 1994. Methodogy for quantifying rice yield effects of blast. Pp. 381-408. In rice blast disease, Zeigler, R.S., S. A. Leong and P.S. Teng. CAB international Press. - TUZUN. S AND J. KC, 1989. Induced systemic resistane to blue mold of tobacco, 177- 200, In: blue mold of tobacco, Mckeen, W.E.{Ed.}(American Phytopathological Society Press: St. Paul, Minnesota) - TUZUN. S and J. KLOEPPER, 1995. Practical application and implementation of induced resistance.pp. 152-168.In: Induced Resistance to Disease in Plants Hammerschmidt, R.; and Kỳc, J. (Eds). . Kluwer academic publishers. . Giang 01/2004 Kích thích tính kh Kích thích tính khKích thích tính kh Kích thích tính kháng lưu dẫ áng lưu dẫáng lưu dẫ áng lưu dẫn n n n b bb bò òò ò ảnh hư ảnh hư ảnh hư ảnh hưở ởở ởng. năng kích kháng khi bị tấn cơng bởi nòi 122,6 và khơng có khả năng kích kháng khi bị tấn cơng bởi nòi 44,4, 102,6 và 103,4. Trong khi, acibenzolar-s-methyl có khả năng kích kháng khi bị tấn. kháng khi bị tấn cơng bởi nòi 122,6 và 102,6 nhưng khơng có khả năng kích kháng khi bị tấn cơng bởi nòi 44,4 và 103,4. Khả năng kích kháng được biểu hiện bằng sự giảm bệnh cháy lá so với đối chứng