Đang tải... (xem toàn văn)
(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư(Khóa luận tốt nghiệp) Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin và đánh giá tác động của chúng lên các tế bào ung thư
ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI KHOA Y DƯỢC LÊ THỊ HẢO NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO HỆ DẪN THUỐC NANO PACLITAXEL PHỐI HỢP CURCUMIN VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC ĐỘNG CỦA CHÚNG LÊN CÁC TẾ BÀO UNG THƯ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP NGÀNH DƯỢC HỌC KHÓA: QH-2012 NGƯỜI HƯỚNG DẪN TS HÀ PHƯƠNG THƯ PGS.TS DƯƠNG THỊ LY HƯƠNG Hà Nội – 2017 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến toàn thể Khoa Y Dược, Đại học Quốc Gia Hà Nội tạo điều kiện, giúp đỡ để em hồn thành khóa luận tốt nghiệp Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới thầy cô giảng dạy khơng mặt kiến thức mà cịn kinh nghiệm để em có kiến thức vững suốt năm học vừa qua Tiếp theo em xin bày tỏ tri ân lòng biết ơn sâu sắc đến: TS Hà Phương Thư – Trưởng phòng vật liệu nano Y Sinh, Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam PGS.TS Dương Thị Ly Hương – Bộ môn Dược lý – Dược Lâm Sàng, Khoa Y – Dược Đại học Quốc Gia Hà Nội Ths Đỗ Hải Đoan, Phòng vật liệu nano Y Sinh, Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Đã trực tiếp hướng dẫn, bảo tận tình tạo điều kiện tài liệu tham khảo, phịng thí nghiệm kinh phí đề tài để em hồn thành khóa luận điều kiện tốt Em xin cảm ơn đề tài cấp viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, MS VAST03.04, 2016-2017 (chủ nhiệm TS Hà Phương Thư) tài trợ kinh phí giúp em thực đề tài nghiên cứu Em xin gửi lời cảm ơn tới toàn anh chị thuộc Viện Hàn Lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam đặc biệt anh chị thuộc phòng vật liệu nano Y Sinh giúp đỡ, hỗ trợ em q trình thực đề tài khóa luận Cuối em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình, bạn bè ln quan tâm động viên, giúp đỡ em hồn thành khóa luận Dù cố gắng khóa luận em khó tránh khỏi thiếu sót Vì em mong nhận ý kiến phản hồi từ phía thầy để khóa luận thêm hồn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Sinh Viên Lê Thị Hảo DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Diễn giải CMC Nồng độ micel tới hạn CUR Curcumin DCM Dichloromethan EE% Hiệu suất mang thuốc EtOH Ethanol FDA Cục quản lý thực phẩm dược phẩm Hoa Kỳ FTIR Quang phổ hồng ngoại chuyển đổi Fourier L-LA L-lactic acid NF-κB Yếu tố nhân Kappa B PCL Poly- caprolacton PEG Poly ethylen glycol PGA Poly glycolic acid PLA Poly Lactid PLGA Poly lactic-co-glycolic acid TEM Kính hiển vi điện tử truyền qua TPGS Tocopheryl polyethylen glycol 1000 succinat DANH MỤC CÁC HÌNH STT Tên Hình Trang Hình Cơ chế nhắm đích bị động chủ động hệ phân phối thuốc có kích thước nano Hình Cấu tạo axit olic Hình ức độ biểu thụ thể olat mô thường khối u Hình ột số hệ phân phối thuốc cấu trúc nano 10 Hình Cấu trúc mixen tạo nên copolyme (dạng diblock) không mang thuốc (a) mang thuốc (b) 11 Hình Cơng thức hóa học PTX 12 Hình Cơng thức hóa học Cur 13 Hình Hình Cấu trúc L-LA Cơng thức TPGS 15 16 Hình 10 Hình 11 Cơng thức copolyme PLA-TPGS Hình ảnh hạt nano (PTX+Cur)/PLATPGS Copolyme PLA-TPGS tạo monome LLA TPGS Phổ hồng ngoại FTIR nano (Cur+PTX)PLA-TPGS-Fol với tỉ lệ khác PLA TPGS Phổ hồng ngoại FTIR (1) Cur, (2) PTX, (3) Acid folic, (4) PLA-TPGS 1:1 (5) (Cur+PTX)-PLA-TPGS-Fol với tỉ lệ PLATPGS 1:1 Hình ảnh FESEM nano (Cur+PTX)-PLATPGS-Fol với tỉ lệ khác PLA TPGS (a) 1:1, (b) 2:1, (c) 1:3, (d) 2:1, (e) 3:1 Thế zeta hạt nano (Cur +PTX) PLA-TPGSFol tỉ lệ PLA TPGS: 1:3 (a), 1:2 (b), 1:1 (c), 2:1 (d), 3:1 (e) Phương trình đường chuẩn Cur PTX 17 17 Hình 12 Hình 13 Hình 14 Hình 15 Hình 16 Hình 17 19 23 24 28 30 31 DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Trang Bảng Tỉ lệ khối lượng PLA TPGS thực nghiệm 20 Bảng Các dao động đặc trưng chất 21 Bảng Các dao động đặc trưng chất 25 Bảng Thế zeta hệ nano tỉ lệ khác PLA-TPGS 28 Bảng Hiệu suất bọc thuốc Curcumin Paclitaxel 31 Bảng Kết gây độc tế bào dòng tế bào chọn 32 MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan ung thư 1.2 Tổng quan hệ phân phối thuốc - hệ nano 1.2.1 Cơ chế hướng đích hệ phân phối thuốc nano 1.2.2 Các vật liệu dùng để tạo chất mang nano 1.3 Hệ phân phối thuốc nano mang đồng thời Paclitaxel Curcumin dựa copolyme PLA-TPGS ((Cur+PTX)-PLA-TPGS) 11 1.3.1 Paclitaxel 12 1.3.2 Curcumin 13 1.3.3 Tác dụng hiệp đồng Curcumin Paclitaxel 14 1.3.4 Tổng quan hệ micel copolyme PLA-TPGS 15 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Nguyên liệu, đối tượng nghiên cứu 19 2.2 Phương pháp nghiên cứu 19 2.2.1 Tổng hợp copolyme PLA-TPGS 19 2.2.2 Chuẩn bị dung dịch TPGS gắn với folat 21 2.2.3 Tổng hợp hạt nano (Cur + PTX)-PLA-TPGS gắn folat 21 2.2.4 Hiệu suất bọc thuốc (EE%) 22 2.2.5 Đánh giá đặc trưng vật liệu 23 2.2.6 Đánh giá tác dụng gây độc tế bào 23 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 24 3.1 Tính đặc trưng vật liệu 24 3.1.1 Quang phổ hồng ngoại chuyển đổi Fourier (FTIR) 24 3.1.2 Hình thái kích thước 27 3.2.3 Thế zeta 29 3.2 Hiệu suất bọc thuốc (EE %) 32 3.3 Thử nghiệm gây độc tế bào 33 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO ĐẶT VẤN ĐỀ Ung thư nguyên nhân gây tử vong hàng đầu giới Sự phát triển ung thư năm gần thực mối lo ngại lớn quốc gia giới thu hút quan tâm lớn, không cộng đồng khoa học, đặc biệt dược sĩ, nhà sinh học hóa học, mà cịn cộng đồng nói chung Việc chữa trị ung thư tiêu tốn nhiều công sức tiền bạc Tuy nhiên, thuốc điều trị ung thư truyền thống thường thiếu tính đặc hiệu tế bào ung thư có độ tan nước thấp Chúng tiêu diệt tế bào ung thư mà tiêu diệt tế bào khỏe mạnh thể, khơng đem lại hiệu chữa trị cao gây nên nhiều tác dụng phụ nghiêm trọng Do đó, nhu cầu cấp bách cần phát triển phương pháp điều trị ung thư khơng có tác dụng phụ đến tổ chức lành Sự phát triển vượt trội công nghệ nano thời gian gần tạo bước tiến đáng kể tất lĩnh vực khoa học công nghệ Trong ngành dược, hệ phân phối thuốc nano cho thấy ưu vượt trội so với hệ phân phối thuốc truyền thống Các hệ phân phối thuốc nano hướng đích tác dụng chọn lọc tới tế bào, khối u ung thư theo hai chế: hướng đích thụ động hướng đích chủ động, nhờ giảm thiểu tối đa tác dụng phụ thuốc đến mô lành đồng thời tăng hiệu điều trị, giảm liều thuốc cần sử dụng Song song với đó, sử dụng kết hợp loại thuốc điều trị ung thư xem hướng tiếp cận đầy tiềm Phối hợp thuốc điều trị ung thư tạo nên tác dụng hiệp đồng, giúp tăng hiệu trị liệu, giảm thiểu tác dụng phụ, giảm liều dùng, ngăn chặn giảm tượng kháng đa thuốc Paclitaxel (PTX) thuốc điều trị ung thư truyền thống chiết xuất từ vỏ Taxus brevifolia, dùng để điều trị nhiều bệnh ung thư ung thư vú, buồng trứng, phổi …[41] Tuy nhiên, việc sử dụng PTX điều trị gây nhiều tác dụng phụ nghiêm trọng phản ứng mẫn, gây độc thần kinh, mắt v.v… Điều độ tan nước thấp PTX tính chọn lọc đến tế bào khối u [26,41] Để giải vấn đề này, cần làm tăng độ tan nước PTX hạn chế tối đa tác dụng có hại đến thể Curcumin(Cur) chất polyphenol màu vàng chiết xuất từ rễ nghệ (Curcuma longa) sống phổ biến vùng khí hậu nhiệt đới Đơng Nam Á [39] Cur chứng minh khơng có tác dụng chống oxy hóa mạnh mà cịn diệt tế bào ung thư với độc tính[3,12,45] Sự kết hợp Cur PTX cho tác dụng hiệp đồng ức chế phát triển khối u Cur ngăn cản PTX hoạt hóa yếu tố nhân Kappa B, yếu tố làm bất hoạt chết theo chương trình tế bào [18] Hơn nữa, Cur cịn có khả ức chế hoạt động bơm tống thuốc P-Glycoprotein – chế tế bào ung thư kháng lại PTX – nhờ tăng hiệu trị liệu PTX Tuy nhiên Cur có độ tan nước thấp nhanh bị đào thải khỏi thể nên ứng dụng lâm sàng để điều trị ung thư bị giới hạn đáng kể [7] Bởi lý tiến hành thực đề tài “ Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin đánh giá tác động chúng lên tế bào ung thư” với mục tiêu: 1) Bào chế hệ nano sở copolyme PLA - TPGS mang đồng thời PTX Cur gắn yếu tố hướng đích olat 2) Đánh giá hiệu tác động hệ số tế bào ung thư CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan ung thư Ung thư thuật ngữ chung cho nhóm lớn bệnh ảnh hưởng đến phần thể Các thuật ngữ khác sử dụng khối u ác tính u ột đặc tính ung thư tạo nhanh tế bào bất thường phát triển vượt ngồi phạm vi thơng thường chúng, sau xâm nhập vào phận liền kề thể lây lan đến quan khác, trình thứ hai gọi di Di nguyên nhân gây tử vong ung thư Tỷ lệ ung thư có xu hướng tăng nhanh phần lớn nước giới Tổ chức Y tế giới(WHO) nhận định đại dịch xảy Ước tính năm tồn cầu có 14,1 triệu người mắc 8,2 triệu người chết ung thư, gần 70% nước phát triển tăng gấp đôi lên 14,6 triệu người vào năm 2035 Số lượng trường hợp mắc dự kiến tăng khoảng 70% thập kỷ tới Hiện khoảng 23 triệu người sống với ung thư Nếu khơng có biện pháp can thiệp kịp thời số tăng lên 30 triệu vào năm 2020 Và theo WHO, 178 quốc gia, vùng lãnh thổ có tỷ lệ mắc tử vong ung thư nhiều giới, Việt Nam đứng thứ 78 Năm bệnh ung thư phổ biến Việt Nam ung thư gan, phổi, dày, ung thư vú ung thư trực tràng [15] Các phương pháp điều trị ung thư phổ biến phẫu thuật, xạ trị hóa trị Trong hóa trị liệu, dược chất phổ biến cisplatin, mitoxantron, estramustin, doxorubicin, etoposid, vinblastin, paclitaxel,vinorelbin, kết hợp loại thuốc với sử dụng rộng rãi điều trị ung thư cải thiện chất lượng sống [8,31,34] Tuy nhiên, bên cạnh hiệu diệt tế bào ung thư, thuốc gây nhiều tác dụng không mong muốn tế bào lành Do đó, cơng tìm kiếm thuốc mới, liệu pháp điều trị mới, phối hợp ... ung thư bị giới hạn đáng kể [7] Bởi lý tiến hành thực đề tài “ Nghiên cứu chế tạo hệ dẫn thuốc nano Paclitaxel phối hợp Curcumin đánh giá tác động chúng lên tế bào ung thư” với mục tiêu: 1) Bào. .. phân phối thuốc hệ nano mang thuốc điều trị ung thư đến tế bào ung thư [47] 1.2.2 Các vật liệu dùng để tạo chất mang nano Để chế tạo hệ phân phối thuốc điều trị ung thư có khả nhắm đích tới tế bào. .. việc nghiên cứu phát triển hệ phân phối thuốc mới, loạt hợp chất tự nhiên có tác dụng chống ung thư kết hợp với loại thuốc điều trị ung thư điều trị phổ biến vào hệ phân phối thuốc nano nghiên cứu,