Thông tin tài liệu
MỞ ĐẦU 1.TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI Ở Việt Nam, tổng số 3.948 lồi thuốc có khoảng 87,1% loài mọc tự nhiên, tập trung chủ yếu quần xã rừng, số lại trồng Mỗi năm ngành Y dược tiêu thụ 30-50 dược liệu loại phục vụ chữa bệnh làm nguyên liệu cho công nghiệp dược xuất Trong số đó, 2/3 lượng dược liệu khai thác từ nguồn thuốc mọc tự nhiên trồng nước, nhu cầu thuốc nước lớn Năm 2016, Viện Dược liệu công bố tổng số 5117 loài thuốc phát [1] Sâm Núi Dành loài thuốc phân bố chân Núi dành thuộc huyện Tân Yên, tỉnh Bắc Giang Hiện cho thấy nhu cầu sử dụng dược liệu tăng mạnh thời gian gần nên Sâm Núi Dành bị khai thác ạt, dẫn đến nguồn nguyên liệu trở nên cạn kiệt Theo Sách đỏ Việt Nam (2007), loài xếp mức độ bị nguy cấp nơi cư trú chúng bị thu hẹp rừng thường xuyên bị chặt phá; loài bị khai thác nhiều để làm thuốc dẫn đến cạn kiệt [2] Một nguyên nhân khác dẫn đến cạn kiệt nguồn gen quý Sâm Núi Dành khó nhân giống Hạt nảy mầm khó nảy mầm điều kiện tự nhiên, vùng phân bố Sâm không đa dạng Việc bảo tồn loài sâm quý mức báo động, cần chung tay góp sức cấp, ngành người dân địa phương Một mục tiêu quan trọng đề tài nhân giống vơ tính lồi Sâm Núi Dành nhằm lưu giữ, bảo tồn nguồn gen quý loài Sâm nguy bị tuyệt chủng khai thác ạt Việc đáp ứng nhanh bền vững nguồn giống Sâm Núi Dành có chất lượng tốt yêu cầu cấp bách Nguồn cung cấp giống chủ yếu phương pháp nhân giống truyền thống: giâm cành, gieo hạt hệ số nhân giống đạt thấp, hạt gần khơng nảy mầm ngồi tự nhiên Để cải thiện hệ số nhân giống Sâm này, chúng tơi nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống cho loài Sâm Núi Dành Nghiên cứu thực nhằm thiết lập quy trình nhân giống vơ tính lồi Sâm Núi Dành có nguồn gốc từ tỉnh Bắc Giang Nuôi cấy mô tế bào thực vật công cụ hữu hiệu cho việc nhân giống bảo tồn Nó cho phép thời gian ngắn nhất, nhân nhanh với quy mô lớn có độ đồng cao, bệnh giữ đặc tính di truyền bố mẹ Xuất phát từ thực tiễn chúng tơi tiến hành thực đề tài: “Nghiên cứu, đánh giá xây dựng quy trình nhân giống cho lồi Sâm Núi Dành (Callerya speciosa (Champ ex Benth) Schot) phân bố địa bàn tỉnh Bắc Giang” MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI - Nghiên cứu, điều tra, thu thập mẫu Sâm địa bàn tỉnh Bắc Giang Xác định xác tên loài Sâm Núi Dành phương pháp sinh học phân tử xác định thành phần số hoạt chất củ Sâm Núi Dành độ tuổi khác - Xây dựng quy trình nhân giống cho loài Sâm Núi Dành phương pháp giâm hom công nghệ in-vitro Ý NGHĨA CỦA ĐỀ TÀI - Đề tài cung cấp dẫn liệu khoa học bước đầu nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống vơ tính cho lồi Sâm Núi Dành - Các kết nghiên cứu đề tài tài liệu tham khảo việc nghiên cứu, giảng dạy có giá trị cho lĩnh vực công nghệ sinh học nhân giống trồng phương pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1.NGUỒN GỐC VÀ ĐẶC ĐIỂM CỦA SÂM NÚI DÀNH Sâm Núi Dành đối tượng chưa nghiên cứu nhiều Việt Nam giới Vì vậy, việc tiếp cận kết nghiên cứu hạn chế, việc định hướng tài liệu tham khảo ngồi nước khó khăn Sâm Núi dành biết đến qua số báo tác giả Trần Đình Dũng, Trung tâm Khoa học Cơng nghệ Môi trường huyện Tân Yên, tỉnh Bắc Giang Theo viết tác giả, sách “Đại Nam thống chí”, có ghi: “Tên nỏ sản xuất n Thế Sâm Nam sẵn đỉnh núi Chung Sơn Cỏ thi có Chung Sơn” Núi Chung Sơn nhắc tới Núi Dành, phần lớn thuộc xã Liên Chung phần lại thuộc địa phận xã Việt Lập, huyện Tân Yên Những câu chuyện quanh loài Sâm quý người dân sinh sống chân Núi dành kể lại Theo ông Nguyễn Văn Được, 72 tuổi thôn Hậu, nhà chân Núi dành cho biết: “Núi dành xưa toàn de với giàng giàng, lần Lý trưởng kiếm củ sâm mừng lắm, góc vườn nhà tơi cịn khóm sâm, năm đốt từ mọc rễ củ nên củ khơng lớn, nhân thử giống Sâm Núi dành không thành công, nhiều lần thử du nhập giống sâm khác trồng khơng sống có lẽ thời tiết thổ nhưỡng khơng hợp” Ơng Ngun Khắc Lư, 62 tuổi, thôn Hậu, xã Liên Chung tâm sự, gần hai chục năm trước ông nhận đất trồng rừng chân Núi dành Trong lần cuốc đất thấy bật lên củ nhỏ, mùi thơm, nếm thử thấy mát, vốn gia đình có nghề làm thuốc Đơng y nên ơng Lư biết gặp may tìm thấy gốc Sâm Núi dành ơng giữ gìn từ Theo ông Lư, loại sâm phải 10 năm tuổi dùng hữu dụng Những bệnh thông thường ho cảm sốt, đau đầu, trẻ nhỏ dùng chút khỏi [3] Bằng phương pháp mơ tả đặc điểm hình thái, tác giả Đồng Thị Kim Cúc cộng sự, xác định Sâm Núi Dành thuộc họ đậu (Fabaceae), chi Callerya có tên khoa học Callerya speciosa (Champ.) Schot., [4] Đặc điểm nông sinh học: Thân: Sâm Núi Dành thuộc dạng dây leo trườn, thường dài m hơn, cành non có lơng màu bạc; Rễ củ nạc, có lớp vỏ bên ngồi cứng, bên lõi màu vàng nhạt, mùi thơm dịu vị mát Lá kép lông chim lẻ, trục dài 6-15 cm, mang 3-7 chét; chét hình bầu dục dài hay trái xoan, cỡ 3-8 x 1-3 cm, mặt có lơng tơ màu trắng, gân bên có 5-6, mặt xanh thẫm, mặt xanh nhạt Hoa: Cụm hoa chùm, mọc đầu cành hay nách lá, dài đến 30 cm, cuống hoa đài có lơng nhung trắng Hoa to, mọc đơn độc đốt trục cụm hoa, dài 2,5-3 cm Đài hình chng, mảnh dính với nhau, cỡ x 12 cm, mặt ngồi có lơng, mép có răng; tràng cánh không nhau, tiền khai hoa cờ: cánh cờ (ở trên) lớn nhất, có màu sắc đẹp cùng, cánh bên nhỏ hơn, cánh thìa dính lại với đáy tạo thành cấu trúc tương tự thuyền mang kèm nhị nhụy Cánh hoa màu trắng ngà, cánh cờ khơng có lơng, bên gốc có cục chai Nhị 10, dính lại với phần nhị thành bó bao quanh nhụy, rời Bầu nhụy lớn, ô, mang dãy noãn, phát triển tạo Bầu hình thn, dài nhị Quả đậu, dẹp, cỡ 9-18 x 1,2-1,6 x 0,7-0,8 cm, có lơng nâu phủ dầy Hạt 2-3, hình trứng, cỡ cm Củ sâm có lớp vỏ bên ngồi cứng, bên lõi màu vàng nhạt, mùi thơm dịu có vị Sinh học, sinh thái: Mùa hoa tháng 6-8, tháng 9-12 [4] Giá trị sử dụng: Rễ củ đào năm tuổi, phơi khô, thái mỏng, tẩm nước gừng mật ong, vàng dùng làm thuốc; có tác dụng trị đau vùng lưng, khớp, thông kinh hoạt lạc, bổ nhuận phế, chữa thể suy nhược, ăn, ho nhiều đờm, nhức đầu, bí tiểu tiện [5] 1.2 THÀNH PHẦN HĨA HỌC MỘT SỐ LỒI THUỘC CHI CALLERYA Ting Yin cộng phân lập flavonoid millettiaspecoside A, millettiaspecoside B, millettiaspecoside C, millettiaspecoside D, khaephuoside B, seguinoside K, ablbrissinoside B từ phân đoạn n-butanol dịch chiết cồn củ Callerya speciosa (Champ.) [6], [7] Zong XK cộng phân lập thêm chất từ dịch chiết cồn 95o củ Callerya speciosa: Isoliquitigenin, maackiain, pterocarpin, medicarpin, homopterocapain [8] Ping Ding cộng phân lập thêm 13 chất từ phân đoạn ether ethyl acetat dịch chiết củ M speciosa: docosanoic acid, tetracosane, octadecane, hexacosanoic acid, β-sitosterol acetate, β-sitosterol, syringin, maackiain, ormononetin, ψ-baptigenin, rotundic acid, pedunculoside daucosterol Trong có β-sitosterol acetate, syringin, ψ-baptigenin, rotundic acid pedunculoside chất lần cơng bố có mặt [9] Wang Cheng – wen định lượng hàm lượng flavonoid tổng dịch chiết chloroform rễ củ Millettia speciosa lên đến 5,52 mg/g dược liệu [10] Jun Cheno cộng phân lập isoflavon glycosid từ thân loài Callerya nitida (Millettia nitida var hirsutissima) gồm: formononetin 7O-b-D-(6-ethylmalonyl)- glucopyranoside (hirsutissimiside A); 5Omethylgenistein 7-O-a-L- rhamnopyranosyl-(1→6)-b-D-glucopyranoside (hirsutissimiside B); retusin 7,8-di- O-b-Dglucopyranoside (hirsutissimiside C) [11] Ito Chihiro cộng phân lập isoflavonoid từ dịch chiết aceton thân hạt loài Callerya atropurpurea (Millettia atropurpurea) gồm: isoformonotein, sayanedine, prunetin, formonotein, auriculasin, millepurone, vestitol millepurpan [12] Fang Song-Chwan cộng phân lập flavonoid từ thân loài Callerya reticulata var reticulata (Millettia reticulata Benth.) gồm: (-) epicatechin; narigenin; 5,7,3’,5’- tetrahydroxy flavone; formononetin; isoliquirtigenin genistein [13] Theo Đỗ Tất Lợi, loài M speciosa có chứa tinh bột alkaloid [14] 1.3.TỔNG QUAN PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU PHÂN LOẠI THỰC VẬT DỰA TRÊN CHỈ THỊ PHÂN TỬ 1.3.1 Tổng quan trình tự bảo tồn gene thực vật Hệ thống hóa q trình thăm dị, mơ tả giải thích tính đa dạng giới sinh vật Vào năm 1758, Linnaeus xây dựng hệ thống phân loại mang tính thứ tự trước phát triển học thuyết tiến hóa Sự xuất phát triển kỹ thuật phân tử mà đặc biệt phản ứng chuỗi polymer hóa – PCR [15] hình thành nên lượng lớn liệu sẵn sàng cho việc giải trình tự DNA kỹ thuật làm nảy sinh đặc trưng nhận dạng DNA Nhiều dạng đặc điểm mang tính thơng tin, đặc biệt trình tự DNA ứng dụng nghiên cứu mối quan hệ phát sinh q trình tiến hóa thực vật Các thực vật bậc cao mang ba gene: gene nhân, gene ty thể gene lạp thể Tỷ lệ thay nucleotide gene xảy không đồng Tỷ lệ thay nucleotide gene đánh giá thông qua việc quan sát thay nucleotide hàng loạt thực vật hai mầm [16] Bộ gene ty thể có mức độ thay nucleotide thấp nhất, trung bình khoảng (0,2 - 1,1) × 10-9 thay cho vị trí năm Bộ gene lạp thể có mức độ thay nhanh hợn chút ít, khoảng (1,1 – 2,9) × 10-9 thay cho vị trí năm Trái lại, gene nhân có tỷ lệ thay nucleotide nhanh gấp 150 lần so với gene ty thể (đến 31,5 × 10-9 thay cho vị trí năm Nghiên cứu đánh giá tỷ lệ thay nucleotide dựa liệu trình tự từ lúa ngơ cho kết tương tự Wolfe cộng Tỷ lệ thay nucleotide khác so với tiến hóa nhanh chóng phân tử ty thể động vật Trong lịch sử tương đối ngắn hệ thống học phân tử, lúc đầu nhà nghiên cứu tập trung tương đối nhiều vào gene lục lạp, nhiên điều thay đổi khảo sát sau chuyển hướng sang trình tự gene nhân [17] 1.3.2 Bộ gene lục lạp Bộ gene lục lạp đa số thực vật cạn thơng thường đặc trưng phân tử dạng vịng Bộ gene bé số ba gene, khoảng 135-160kb [18] với hai phân đoạn lặp đảo [inverted repeat (IR) segments] chia phần phân tử lại thành vùng LSC (large single-copy region) vùng SSC (small single-copy region) Thành phần, kích thước, cấu trúc trình tự gene lục lạp xác định có mức độ bảo tồn cao nghiên cứu tiến hóa [19] Tính bảo tồn cao thay đổi cấu trúc, cách xếp hay thành phần liên quan mạnh mẽ đến quan hệ phát sinh Các phần khác gene tiến hóa theo tỷ lệ khác tương đối chậm mức độ trình tự nucleotide Những vùng khơng mã hóa gene lục lạp tiến hóa nhanh vùng mã hóa [16] Các đột biến DNA lục lạp thường thay nucleotide hay xếp lại Các đột biến tăng đoạn hay đoạn tích lũy vùng không mang mã xảy với tỷ lệ ngang với thay nucleotide kiểu đột biến làm tăng cường tính đa dạng vùng không mang mã Phần lớn gene lục lạp loại gene đơn gene nhân thành viên họ đa gene Tính bảo tồn cao DNA lục lạp thực ưu sử dụng để xây dựng lại mối quan hệ phát sinh q trình tiến hóa mức độ từ loài đến chi đến họ thực vật [20],[17] Có thể thấy gene mã hóa khơng mã hóa lục lạp thường sử dụng nghiên cứu quan hệ phát sinh sau: 1.3.3 Các trình tự bảo tồn gene nhân Bộ gene nhân có kích thước lớn số ba gene thực vật (1.1 × 106 đến 110 × 106 kbp) bao gồm nhiều gene Phần lớn nổ lực nghiên cứu quan hệ phát sinh thị phân tử sử dụng trình tự DNA ribosome nhân Cấu trúc DNA ribosome đơn vị lặp đơn, đơn vị lặp lại đến hàng ngàn lần gene Bộ gene nhân chứa vùng mã có cấu trúc bao gồm khoảng trống bên vùng mã (ETS), gene 18S mã hóa cho tiểu đơn vị nhỏ gene 26S mã hóa cho tiểu đơn vị lớn vốn phân cách gene nhỏ 5,8S Các khoảng trống vùng phiên mã (ITS1 ITS2) tách rời gene vừa đề cập Chiều dài ba vùng mang mã giống thực vật: gene 18S khoảng 1800bp, 26S khoảng 3300bp gene 5,8S khoảng 160bp Ngược lại, chiều dài khoảng trống gene biến động từ đến 8kb Họ gene rDNA chứa vùng bảo tồn cao 18S, 26S sử dụng để suy luận quan hệ phát sinh mức độ phân loại cao Các đoạn tiến hóa nhanh vùng ITS thích hợp so sánh lồi chi gần nhau, chí so mức độ quần thể Các trình tự 18S rDNA thường sử dụng rộng rãi trình tự 26S Cho dù hai vùng có dải ứng dụng rộng kích thước 3000bp 26S rDNA cản trở nhà nghiên cứu, đặc biệt việc giải trình tự tồn gene Trái lại, kích thước 18S rDNA khoảng 1800bp giúp cho ưu tiên lựa chọn để khuếch đại PCR giải trình tự Thực tế cho thấy hình thể quan hệ phát sinh sử dụng trình tự 18S rDNA đồng dạng với quan hệ phát sinh sử dụng trình tự rbcL nhiều mức độ phân loại thực vật hạt kín Cho dù có tiềm việc xây dựng quan hệ phát sinh thực vật, vùng 18S rDNA chưa tận dụng hệ thống học thực vật hạt kín [17] Gene 26S rDNA thường lưu ý ứng viên cho việc thay gene 18S rDNA Khi so sánh nhận thấy tồn gene 26S rDNA tiến hóa nhanh gấp từ 1,6 đến 2,2 lần cung cấp đặc điểm mang tính thơng tin nhiều lần so với 18S rDNA Gene 5,8S rDNA dễ dàng khuếch đại giải trình tự sử dụng mồi định vị gene 18S 26S rDNA Gene 5,8S rDNA sử dụng để suy luận quan hệ phát sinh tính bảo tồn cao kích thước bé (164-165bp) Tỷ lệ vị trí mang thơng tin tiềm cho phân tích quan hệ phát sinh thực vật có hạt tương đương với gene 18S rDNA Vùng ITS: ITS1 phân cách gene 18S rDNA với gene 5,8S rDNA ITS phân cách gene 5,8S rDNA với gene 26S rDNA Vùng ITS hữu cách rộng rãi 700bp thực vật có hoa [21] Vùng ITS chứa trình tự bảo tồn cao nên nhiều mồi tổng thể thiết kế cho việc khuếch đại giải trình tự mơ tả Các trình tự ITS1 ITS2 vốn giàu GC làm cho việc giải trình tự trở nên khó khăn Khó khăn việc giải trình tự biến động theo nhóm thực vật việc cho thêm DMSO hay BSA vào PCR hay phản ứng giải trình tự việc bổ sung mang lại hiệu cao [22] Việc trình tự ITS từ nhiều họ thực vật hạt kín trình tự ITS1 ITS2 đa dạng trình tự gene rDNA Các trình tự ITS biến động cách hiệu cho phép giải câu hỏi quan hệ phát sinh taxon có quan hệ họ hàng gần Theo đó, nhiều báo thể thành công việc xây dựng lại lịch sử tiến hóa sử dụng trình tự ITS [23],[24] Hơn nữa, vùng ITS di truyền theo kiểu từ cha mẹ khiến cho sử dụng để thăm dò lai chéo [25] 1.3.4 Kết nghiên cứu ADN mã vạch kiểm định giống nhân sâm Tại Hàn Quốc, việc sử dụng thị phân tử phân loại chi Panax triển khai nhiều đạt nhiều kết mang tính ứng dụng cao Trường đại học tổng hợp Hàn Quốc Thư viện BAC (bacterial artificial chromosome) gồm 106.368 dòng với chiều dài trung bình khoảng 98,61kb[26] Từ thư viện BAC nhà khoa học thiết kế thị phân tử SSR thành công việc xác định thị phân tử đặc hiệu phân biệt giống sâm Hàn Quốc giới Trường đại học Chung Ang Hàn Quốc nghiên cứu khác loài nhân sâm thị phân tử RAPD Kết mồi OP-5A cho băng đơn ADN với mẫu nhân Mồi thị RAPD13B khác loài sâm [27] Trường đại học William & Mary Mỹ nghiên cứu đa dạng di truyền Sâm Mỹ nghiên cứu chọn giống Sâm thị phân tử [28] Năm 2011, Lee cộng phát triển thị SCAR dẫn xuất từ ISSR để nhận dạng chủng sâm P.ginseng có đặc tính tốt phục vụ cho chọn giống 34 số 85 mồi ISR hình thành locus đa hình Các mồi UBC-821, UBC-868 UBC-878 làm nảy sinh băng đa hình chủng P.ginseng cho phép phân biệt chúng với mẫu P.quinquefolius P.notoginseng [29] Tác giả Hongtao Wang – Trung tâm nghiên cứu sản xuất Sâm Hàn Quốc nghiên cứu xác định thị phân tử đặc hiệu phân biệt giống sâm Chunpoong với giống Sâm khác Giống sâm Chunpoong giống nhập nội chất lượng cao chất lượng cao số chín giống nhân sâm Hàn Quốc Trung tâm nghiên cứu quy trình kiểm định giống Chunpoong thị phân tử sử dụng trình tự ADN ty lạp thể (COX2) vị trí intron I intron II Chỉ thị phân tử SNP đặc hiệu nghiên cứu dùng phân biệt giống nhân sâm Chunpoong với giống nhân sâm khác cách đơn giản xác [30] Từ năm 2012 đến Trung tâm Ươm tạo Hỗ trợ doanh nghiệp Khoa học công nghệ hợp tác nghiên cứu giải trình tự hệ gen lục lạp Sâm Ngọc Linh với Trường đại học Quốc gia Seuol Hàn Quốc Cuối năm 2015 tác giả Nguyễn Văn Binh, cán Trung tâm nghiên cứu giải trình tự hồn thiện genome lục lạp Sâm Ngọc Linh [31] Kết đóng vai trị quan trọng việc nghiên cứu mối quan hệ di truyền Sâm Ngọc Linh với loài khác họ Araliaceae sở liệu cho việc thiết kế thị phân tử đặc trưng cho loài 1.4 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ NHÂN GIỐNG VƠ TÍNH TRÊN CÂY SÂM NGỌC LINH Nguyễn Ngọc Dung tác giả nghiên cứu nhân giống vô tính Sâm Ngọc Linh đường sinh học thơng qua tái sinh từ mô sẹo [32] Năm 2010, Dương Tấn Nhật cộng tiến hành 10 Thí nghiệm giâm hom Sâm Núi Dành a b c d e f Thí nghiệm mơi trường rễ khác a) MT: 1/2MS + IBA b) MT: 1/2MS + IBA c) MT: MS + 1,5IBA d) MT: MS + NAA e) MT: 1/2MS + 1,5 NAA f) MT: MS + 0,5NAA PHỤ LỤC Bảng 3.19 Kết Blast trình tự nucleotid vùng gen ITS mẫu S1 NCBI (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) Accession KC441034 KF294872 KF294868 AF467031 AF467027 Description Callerya speciosa voucher YC_11211269_MT01 internal transcribed spacer 2, partial sequence Callerya reticulata voucher Tang Shaoqing 201152906 (GNU) internal transcribed spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and 26S ribosomal RNA gene, partial sequence Callerya eurybotrya voucher Tang Shaoqing 201161501(GNU) internal transcribed spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and 26S ribosomal RNA gene, partial sequence Callerya reticulata specimen-voucher Liston 877 (OSC) small subunit ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed spacer 1, 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and large subunit ribosomal RNA gene, partial sequence Callery a eurybotrya specimenvoucher Tao 578 (KUN) small subunit ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed spacer 1, 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and large subunit ribosomal RNA gene, partial sequence Ma x scor e Total score Quer y cover E value Iden t 623 623 54% 0.0 99% 819 819 96% 0.0 91% 808 808 96% 0.0 90% 721 721 96% 0.0 89% 688 688 96% 0.0 88% Bảng 3.20 Kết Blast trình tự nucleotid vùng gen ITS mẫu S2 NCBI (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) Accession Description Callerya KC441034.1 speciosa Max score Total score Query cover E value Ident 608 608 53% 0.0 99% voucher YC_11211269_MT01 internal transcribed spacer 2, partial sequence Callerya reticulata voucher Tang Shaoqing 201152906 (GNU) internal transcribed KF294872.1 spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and 26S ribosomal RNA gene, partial 817 817 97% 0.0 90% 806 806 97% 0.0 90% 719 719 97% 0.0 88% sequence Callerya eurybotrya voucher Tang Shaoqing 201161501(GNU) internal KF294868.1 transcribed spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and 26S ribosomal RNA gene, partial sequence AF467031.1 Callerya reticulata specimenvoucher Liston 877 (OSC) small subunit ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed spacer 1, 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and large subunit ribosomal RNA gene, partial sequence Callerya eurybotrya specimenvoucher Tao 578 (KUN) small subunit ribosomal RNA gene, AF467027.1 partial sequence; internal transcribed spacer 1, 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, 686 686 97% 0.0 87% complete sequence; and large subunit ribosomal RNA gene, partial sequence Bảng 3.21 Kết Blast trình tự nucleotid vùng gen ITS mẫu S3 NCBI (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) Tot Accessio n AF46703 3.1 KF29487 2.1 KF29486 8.1 Description Quer y cover E value Iden t 477 84% 0.0 88% 627 91% 8e176 92% 621 91% 4e174 91% Max score al scor e 477 Callerya speciosa specimen-voucher Yu-Xi Team 1029 (KUN) small subunit ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed spacer 1, Callerya reticulata voucher Tang Shaoqing 201152906 (GNU) internal transcribed spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene and 627 internal transcribed spacer 2, complete sequence; and 26S ribosomal RNA gene, partial sequence Callerya eurybotrya voucher Tang Shaoqing 201161501(GNU) internal transcribed spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and 26S ribosomal RNA 621 gene, partial sequence Callerya reticulata specimen-voucher Liston 877 (OSC) small subunit ribosomal RNA gene, partial sequence; AF46703 1.1 internal transcribed spacer 1, 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and large subunit ribosomal 582 582 84% 566 566 84% 2e162 93% RNA gene, partial sequence AF46702 7.1 Callerya eurybotrya specimenvoucher Tao 578 (KUN) small subunit ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed spacer 1, 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and large subunit ribosomal RNA gene, partial sequence 2e157 92% Bảng 3.22 Kết Blast trình tự nucleotid vùng gen ITS mẫu S4 NCBI (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) Accession Description Callerya speciosa specimenvoucher Yu-Xi Team 1029 (KUN) small subunit ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed AF467033.1 spacer 1, 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and large subunit ribosomal RNA gene, partial sequence Callerya reticulata voucher KF294872.1 Tang Shaoqing 201152906 (GNU) internal transcribed Max Total Query E Ident score score cover value 488 676 488 676 77% 95% 0.0 0.0 88% 90% spacer 1, partial sequence; 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and 26S ribosomal RNA gene, partial sequence Callerya eurybotrya voucher Tang Shaoqing 201161501(GNU) internal transcribed spacer 1, partial KF294868.1 sequence; 5.8S ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and 26S ribosomal RNA gene, partial sequence 660 660 95% 0.0 89% 597 597 98% 7e167 87% 566 566 77% 3e157 91% Callerya reticulata specimenvoucher Liston 877 (OSC) small subunit ribosomal RNA gene, partial sequence; internal transcribed spacer 1, 5.8S AF467031.1 ribosomal RNA gene and internal transcribed spacer 2, complete sequence; and large subunit ribosomal RNA gene, partial sequence Callerya eurybotrya specimenvoucher Tao 578 (KUN) small subunit ribosomal RNA gene, AF467027.1 partial sequence; internal transcribed spacer 1, 5.8S riboso S1 S2 S3 S4 T T T T T T T T T T T T C C C C A A A A C C C C C C C C A A A A A A A A C C C C C C C C G G G G G G G G A A A A G G G G G G G G C C C C C C C C C C C C G G G G G G G G C C C C T T T T C T C C A C A A C C C C G G G G G G G G S1 S2 S3 S4 A A A A C C C C G G G G G G G G T T T T C C C C T T T T G G G G T T T T G G G G A A A A C C C C G G G G C C C C C C C C C C C C A A A A G G G G G G G G C C C C A A A A A G G A A A A A C C C C G G G G T T T T G G G G C C C C S1 S2 S3 S4 C C C C C C C C T T T T C C C C A A A A A A A A C C C C T T T T A A A A A A A A T T A T G G G G G G G G C C C C T T T T T T T T C C C C G G G G G G G G G G G G C C C C G G G G C C C C A A A A A A A A C C C C T T T T T T T T S1 S2 S3 S4 G G G G C C C C G G G G T T T T T T T T C C C C A A A A A A A A A A A A G G G G A A A A C C C C T T T T C C C C G G G G A A A A T T T T G G G G G G G G T T T T T T T T C C C C C A A A C C C C G G G G G G G G G G G G A A A A S1 S2 S3 S4 C C C C T T T T A A A A G G G A A A A A T T T T A A A A T T T T C C C C T C C C G G G G T T T T T T T T G G G G C C C C C C C C G G G G A A A A G G G A A A A A G G G G T T T T C C C C A A A A T T T T T T T T C C C C T C T C S1 S2 S3 S4 G G G G T T T T A A A A T T T T A C C C G G G G C C C C G G G G T T T T G G G G T T T T C C C C A A A A A A A A G G G G G G G G C C C C G G G G C C C C C C C C G G G G C C C C C C C C C C C C G G G G C C C C C C C C G G G G S1 S2 S3 S4 G G G G A A A A C C C C C C C C A A A A C C C C C C C C G G G G T T T T C C C C T T T T C C C C C C C C G G G G G G G G G G G G C C C C C C C C G G G A A A A A C C C C G G G G G G G G G G G G G G G G G G G G C C C C G G G G S1 S2 S3 S4 G G G G G G G G C C C C G G G G G G G G G G G G G G G A A A A A A A A A C C C C A A A A C C C C A A A A C C C C T T T T G G G G C C C C G G G G T T T T G G G G G G G G C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C C T T T T S1 S2 S3 S4 C C C C C C C C G G G A A A A A G G G G C C C C C C C C C C C C G G G G A A A A G G G G G G G G G G G G A A A A G G G G A A A A G G G G G G G G A A A A T T T T G G G G C C C C G G G G G G G G C C C C G G G G C C C C T T T T S1 S2 S3 S4 G G G G T T T T C C C C A A A A G A A A A A A A C C C C A A A A G G G G A A A A T T T T T C C C G G G G C C C C C C C C G G G G G G G G T T T T G G G G A A A A C C C C T T T T G G G G C C C C T T T T G G G G C A A C A A A A Hình Đoạn so sánh trình tự nucleotide vùng ITS mẫu Sâm PHỤ LỤC KẾT QUẢ XỬ LÝ SỐ LIỆU BẰNG PHẦN MỀM IRRISTAT 5.0 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTBC FILE BB315 30/8/19 23:22 :PAGE ANH HUONG CUA KI DEN KHA NANG TAI SINH CHOI VARIATE V003 CDTBC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= KI$ 1.99333 498333 83.06 0.000 * RESIDUAL 10 600000E-01 600000E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.05333 146667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BB315 30/8/19 23:22 :PAGE ANH HUONG CUA KI DEN KHA NANG TAI SINH CHOI MEANS FOR EFFECT KI$ KI$ KI0.2 KI0.4 KI0.6 KI0.8 KI1 NOS 3 3 CDTBC 10.2667 10.5333 10.7000 10.2000 9.63333 SE(N= 3) 0.447214E-01 5%LSD 10DF 0.140919 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BB315 30/8/19 23:22 :PAGE ANH HUONG CUA KI DEN KHA NANG TAI SINH CHOI F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CDTBC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 10.267 STANDARD DEVIATION C OF V |KI$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.38297 0.77460E-01 0.8 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE BB318A 7/9/19 23:40 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHAN CHOI VARIATE V004 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= BA$ 16.1008 4.02519 875.02 0.000 * RESIDUAL 10 460009E-01 460009E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 16.1468 1.15334 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTB FILE BB318A 7/9/19 23:40 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHAN CHOI VARIATE V005 CCTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= BA$ 450666 112667 4.97 0.018 * RESIDUAL 10 226666 226666E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 677332 483809E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BB318A 7/9/19 23:40 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHAN CHOI MEANS FOR EFFECT BA$ BA$ BA2 BA2.5 BA3 BA3.5 BA4 NOS 3 3 HSNC 3.25000 5.14000 6.15000 6.02000 5.16000 CCTB 9.46667 9.80000 10.0000 9.80000 9.70000 SE(N= 3) 0.391582E-01 0.869226E-01 5%LSD 10DF 0.123389 0.273896 MEANS FOR EFFECT IBA$ IBA$ IBA.0.2 NOS 15 HSNC 5.14400 CCTB 9.75333 SE(N= 15) 0.000000 0.000000 5%LSD 0DF 0.000000 0.000000 MEANS FOR EFFECT BA$*IBA$ BA$ BA2 BA2.5 BA3 BA3.5 BA4 IBA$ IBA.0.2 IBA.0.2 IBA.0.2 IBA.0.2 IBA.0.2 NOS 3 3 HSNC 3.25000 5.14000 6.15000 6.02000 5.16000 CCTB 9.46667 9.80000 10.0000 9.80000 9.70000 SE(N= 3) 0.000000 0.000000 5%LSD 0DF 0.000000 0.000000 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BB318A 7/9/19 23:40 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHAN CHOI F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC CCTB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 5.1440 15 9.7533 STANDARD DEVIATION C OF V |BA$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0739 0.67824E-01 1.3 0.0000 0.21996 0.15055 1.5 0.0184 |IBA$ | | | 0.0000 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE BB318B 7/10/19 23:45 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHANH CHOI |BA$*IBA$| | | | | | | 0.0000 0.0000 VARIATE V004 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= BA$ 15.6556 3.91391 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 345326E-01 345326E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 15.6902 1.12073 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTB FILE BB318B 7/9/19 23:45 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHANH CHOI VARIATE V005 CCTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= BA$ 1.45733 364333 10.51 0.001 * RESIDUAL 10 346667 346667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.80400 128857 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BB318B 7/9/19 23:45 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHANH CHOI MEANS FOR EFFECT BA$ BA$ BA2 BA2.5 BA3 BA3.5 BA4 NOS 3 3 HSNC 3.39000 5.32000 6.54000 4.62333 5.10333 CCTB 9.53333 9.60000 10.3667 9.96667 9.63333 SE(N= 3) 0.339277E-01 0.107497 5%LSD 10DF 0.106907 0.338726 MEANS FOR EFFECT IBA$ IBA$ IBA.0.4 NOS 15 HSNC 4.99533 CCTB 9.82000 SE(N= 15) 0.000000 0.000000 5%LSD 0DF 0.000000 0.000000 MEANS FOR EFFECT BA$*IBA$ BA$ BA2 BA2.5 BA3 BA3.5 BA4 IBA$ IBA.0.4 IBA.0.4 IBA.0.4 IBA.0.4 IBA.0.4 NOS 3 3 HSNC 3.39000 5.32000 6.54000 4.62333 5.10333 CCTB 9.53333 9.60000 10.3667 9.96667 9.63333 SE(N= 3) 0.000000 0.000000 5%LSD 0DF 0.000000 0.000000 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BB318B 7/9/19 23:45 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHANH CHOI F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 15) NO STANDARD DEVIATION C OF V |BA$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | |IBA$ | | |BA$*IBA$| | | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | HSNC 15 4.9953 1.0586 0.58764E-01 1.2 0.0000 0.0000 CCTB 15 9.8200 0.35897 0.18619 1.9 0.0015 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSNC FILE BB318C 7/9/19 23:52 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHANH CHOI | 0.0000 0.0000 VARIATE V004 HSNC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= BA$ 14.8282 3.70704 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 124668E-01 124668E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 14.8406 1.06005 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCTB FILE BB318C 7/9/19 23:52 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHANH CHOI VARIATE V005 CCTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= BA$ 642667 160667 7.09 0.006 * RESIDUAL 10 226667 226667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 869333 620952E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BB318C 7/9/19 23:52 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHANH CHOI MEANS FOR EFFECT BA$ BA$ BA2 BA2.5 BA3 BA3.5 BA4 NOS 3 3 HSNC 3.28333 4.80000 6.36667 5.30333 5.05667 CCTB 9.63333 9.73333 10.2000 9.73333 9.66667 SE(N= 3) 0.203853E-01 0.869227E-01 5%LSD 10DF 0.642348E-01 0.273896 MEANS FOR EFFECT IBA$ IBA$ NOS HSNC CCTB IBA.0.6 15 4.96200 9.79333 SE(N= 15) 0.000000 0.000000 5%LSD 0DF 0.000000 0.000000 MEANS FOR EFFECT BA$*IBA$ BA$ IBA$ NOS HSNC CCTB BA2 IBA.0.6 3.28333 9.63333 BA2.5 IBA.0.6 4.80000 9.73333 BA3 IBA.0.6 6.36667 10.2000 BA3.5 IBA.0.6 5.30333 9.73333 BA4 IBA.0.6 5.05667 9.66667 SE(N= 3) 0.000000 0.000000 5%LSD 0DF 0.000000 0.000000 - | ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BB318C 7/9/19 23:52 :PAGE ANH HUONG CUA BA VA IBA DEN NHAN NHANH CHOI F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSNC CCTB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 4.9620 15 9.7933 STANDARD DEVIATION C OF V |BA$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0296 0.35308E-01 0.7 0.0000 0.24919 0.15055 1.5 0.0059 |IBA$ | | | 0.0000 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SRTB FILE BB318A 11/9/19 16:12 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA IBA DEN RA RE |BA$*IBA$| | | | | | | 0.0000 0.0000 VARIATE V003 SRTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 266227 665567E-01 525.45 0.000 * RESIDUAL 10 126667E-02 126667E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 267493 191067E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTB FILE BB318A 11/9/19 16:12 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA IBA DEN RA RE VARIATE V004 CDTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 924760 231190 62.82 0.000 * RESIDUAL 10 368000E-01 368000E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 961560 686829E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BB318A 11/9/19 16:12 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA IBA DEN RA RE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ MS0.5IBA MS1IBA MS1.5IBA MS2IBA MS2.5IBA NOS 3 3 SRTB 0.473333 0.680000 0.883333 0.723333 0.626667 CDTB 1.72333 2.22000 2.45000 2.14333 1.93333 SE(N= 3) 0.649787E-02 0.350238E-01 5%LSD 10DF 0.204750E-01 0.110361 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BB318A 11/9/19 16:12 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA IBA DEN RA RE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 15) STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | | | SRTB CDTB NO OBS 15 0.67733 15 2.0940 BASED ON TOTAL SS 0.13823 0.26207 BASED ON % | RESID SS | 0.11255E-01 1.7 0.0000 0.60663E-01 2.9 0.0000 | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SRTB FILE BB318B 11/9/19 16:32 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA IBA DEN RA RE VARIATE V003 SRTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.54487 886217 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 446679E-02 446679E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.54933 253524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTB FILE BB318B 11/9/19 16:32 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA IBA DEN RA RE VARIATE V004 CDTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.39684 599210 889.91 0.000 * RESIDUAL 10 673335E-02 673335E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.40357 171684 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BB318B 11/9/19 16:32 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA IBA DEN RA RE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ 1/2MS0.5IBA 1/2MS1IBA 1/2MS1.5IBA 1/2MS2IBA 1/2MS2.5IBA NOS 3 3 SRTB 1.53667 2.63667 2.14667 1.64000 1.27333 CDTB 4.12667 4.54333 3.96333 3.54333 3.44667 SE(N= 3) 0.122022E-01 0.149815E-01 5%LSD 10DF 0.384495E-01 0.472072E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BB318B 11/9/19 16:32 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA IBA DEN RA RE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SRTB CDTB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.8467 15 3.9247 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.50351 0.21135E-01 1.1 0.0000 0.41435 0.25949E-01 0.7 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SRTB FILE BB317 11/9/19 1:37 :PAGE ANH HUONG CUA NAA DEN KHA NANG RA RE VARIATE V003 SRTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 313373 783433E-01 135.07 0.000 * RESIDUAL 10 580003E-02 580003E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 319173 227981E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTB FILE BB317 11/9/19 1:37 :PAGE ANH HUONG CUA NAA DEN KHA NANG RA RE VARIATE V004 CDTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 602973 150743 196.62 0.000 * RESIDUAL 10 766671E-02 766671E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 610640 436171E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BB317 11/9/19 1:37 :PAGE ANH HUONG CUA NAA DEN KHA NANG RA RE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ MS0.5NAA MS1NAA MS1.5NAA MS2NAA MS2.5NAA NOS 3 3 SRTB 0.320000 0.470000 0.606667 0.753333 0.576667 CDTB 1.54333 1.72333 1.94667 2.13667 1.84000 SE(N= 3) 0.139045E-01 0.159861E-01 5%LSD 10DF 0.438135E-01 0.503729E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BB317 11/9/19 1:37 :PAGE ANH HUONG CUA NAA DEN KHA NANG RA RE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SRTB CDTB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 0.54533 15 1.8380 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.15099 0.24083E-01 1.4 0.0000 0.20885 0.27689E-01 1.5 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE SRTB FILE BB318 11/9/19 15:39 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA NAA DEN RA RE VARIATE V003 SRTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.90677 726693 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 800004E-03 800004E-04 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.90757 207684 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDTB FILE BB318 11/9/19 15:39 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA NAA DEN RA RE VARIATE V004 CDTB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 6.04077 1.51019 ****** 0.000 * RESIDUAL 10 240042E-02 240042E-03 * TOTAL (CORRECTED) 14 6.04317 431655 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BB318 11/9/19 15:39 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA NAA DEN RA RE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ 1/2MS0.5NAA 1/2MS1NAA 1/2MS1.5NAA 1/2MS2NAA 1/2MS2.5NAA NOS 3 3 SRTB 0.643333 1.21000 1.91667 1.22667 0.810000 CDTB 2.32667 2.54667 3.81333 2.43000 1.94000 SE(N= 3) 0.516399E-02 0.894506E-02 5%LSD 10DF 0.162719E-01 0.281862E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BB318 11/9/19 15:39 :PAGE ANH HUONG CUA MT VA NAA DEN RA RE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SRTB CDTB GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 1.1613 15 2.6113 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.45572 0.89443E-02 0.8 0.0000 0.65700 0.15493E-01 0.6 0.0000 | | | | ... tài: ? ?Nghiên cứu, đánh giá xây dựng quy trình nhân giống cho loài Sâm Núi Dành (Callerya speciosa (Champ ex Benth) Schot) phân bố địa bàn tỉnh Bắc Giang? ?? MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI - Nghiên cứu, điều tra,... in-vitro - Công việc 1: Nghiên cứu phương pháp nhân giống loài Sâm Núi Dành vùng địa phương pháp giâm hom - Cơng việc 2: Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống cho loài Sâm Núi Dành phương pháp nuôi... số nhóm chất củ Sâm Núi Dành - Cơng việc : Phân tích định tính số nhóm chất loài Sâm Núi Dành 2.2.3 Nội dung 3: Nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống vơ tính cho loài Sâm Núi Dành phương pháp
Ngày đăng: 15/01/2023, 14:46
Xem thêm:
