Bài viết Biểu hiện của P53 ở các giai đoạn phát triển khác nhau trong diễn tiến từ u tuyến quy ước đến ung thư tuyến đại trực tràng đánh giá trên tiêu bản hematoxylin và eosin và hóa mô miễn dịch, so sánh biểu hiện của p53 trên u tuyến quy ước giữa các trường hợp xâm nhập và các trường hợp giả xâm nhập.
HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 BIỂU HIỆN CỦA P53 Ở CÁC GIAI ĐOẠN PHÁT TRIỂN KHÁC NHAU TRONG DIỄN TIẾN TỪ U TUYẾN QUY ƯỚC ĐẾN UNG THƯ TUYẾN ĐẠI-TRỰC TRÀNG Lê Minh Huy1, Trần Thị Bảo Thư2 TÓM TẮT 12 Đặt vấn đề: U tuyến quy ước đại-trực tràng tiền thân quan trọng phần lớn ung thư biểu mơ đại-trực tràng Có chứng mạnh lâm sàng mô bệnh học cho khoảng 80% ung thư biểu mô đại-trực tràng (CRC) phát sinh từ u tuyến quy ước (CCA) trước Trong vài trường hợp khó xác định tình trạng giả xâm nhập thật hay giả xâm nhập u tuyến lam HE Vì việc khảo sát biểu p53 CCA phương pháp HMMD mẫu vùi nến hỗ trợ việc xác định tình trạng xâm nhập hay giả xâm nhập u tuyến quy ước đại - trực tràng mà mô bệnh học khó xác định Mục tiêu: Đánh giá tiêu hematoxylin eosin hóa mơ miễn dịch, so sánh biểu p53 u tuyến quy ước trường hợp xâm nhập trường hợp giả xâm nhập Phương pháp: Mô tả hàng loạt ca, hồi cứu trường hợp chẩn đoán carcinôm xâm nhập u tuyến giả xâm nhập khoa Giải phẫu bệnh- Bệnh viện Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh từ tháng 1/2018 Bộ môn Mô Phôi-Giải Phẫu Bệnh-Đại Học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh Bệnh Viện Đa Khoa Long An Chịu trách nhiệm chính: Lê Minh Huy Email: leminhhuy@ump.edu.vn Ngày nhận bài: 25.09.2022 Ngày phản biện khoa học: 03.10.2022 Ngày duyệt bài: 24.10.2022 86 đến 11/2020 Sau khảo sát lại mơ học tiến hành nhuộm hóa mơ miễn dịch đánh giá biểu p53 (sử dụng kháng thể Monoclonal Mouse Anti-human p53 protein Clone DO - Ventana) Đối chiếu biểu p53 hình thái mơ bệnh học 14 trường hợp carcinôm xâm nhập trường hợp giả xâm nhập Kết quả: Trong 94 trường hợp khảo sát, có 26 trường hợp ung thư biểu mơ u tuyến loạn sản mức độ cao với biểu p53, trường hợp biểu hoàn toàn, 13 trường hợp biểu mức p53 trường hợp biểu trung bình, khơng có trường hợp biểu yếu Trong 40 trường hợp loạn sản cấp độ cao, có trường hợp biểu yếu, 27 trường hợp biểu trung bình, trường hợp biểu mức Trong 28 trường hợp loạn sản mức độ thấp, 22 trường hợp có biểu yếu kiểu hoang dã trường hợp có mức độ nghiêm trọng trung bình Cả trường hợp giả xâm nhập có biểu mức độ từ yếu đến trung bình ổ giả xâm nhập Kết luận: Có khác biệt rõ biểu p53 trường hợp nghịch sản độ thấp, nghịch sản độ cao, carcinom niêm mạc carcinôm xâm nhập Những trường hợp carcinôm xâm nhập chủ yếu biểu mức biểu hiện, nghịch sản độ thấp độ cao có khác biệt rõ qua HMMD nhuộm p53 Độ nghịch sản cao biểu p53 mạnh mẽ biểu hồn tồn Từ khóa: u tuyến quy ước đại - trực tràng, carcinôm xâm nhập, giả xâm nhập, p53 TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 521 - THÁNG 12 - SỐ ĐẶC BIỆT - 2022 SUMMARY EXPRESSION OF P53 AT DIFFERENT STAGES OF DEVELOPMENT DURING COLORECTAL ADENOMA ADENOCARCINOMA Background: Conventional colorectal adenomas are an important precursor to most colorectal carcinomas There is strong clinical and histopathological evidence that approximately 80% of colorectal carcinoma (CRC) arise from prior conventional adenomas (CCAs) In some cases it is difficult to determine the invasion or pseudo-invasion of the superior adenoma on the HE lame Therefore, surveying the expression of p53 on CCA by IHC method on paraffin blocks can support diagnosis of associated invasive conditions that are difficult to identify histopathologically Objectives: Evaluation on Hematoxyline and eosin and IHC slides, comparing the expression of p53 in conventional adenomas with and without infiltrative status Methods: Describe a series of cases retrospective description of cases diagnosed as conventional adenomas with invasive carcinomas and seudo- invasive on the background of adenomas at the adenomas at Department of Pathology, university medical center, HCM city, from January 2018 until 11/2020 After that, histological examination and immunohistochemical staining were performed to assess the expression of p53 (using Ventana's Monoclonal Mouse Anti-human p53 protein Clone DO - antibody) Compare the expression of p53 with the images histopathology in 14 cases of invasive carcinoma and cases cases of pseudo-invasion Results: In 94 cases surveyed, there were 26 cases of high-grade dysplastic adenocarcinoma with p53 expression, cases of complete loss of expression, 13 cases of p53 overexpression and cases of p53 overexpression There were no cases of weak expression in 26 cases of high-grade dysplastic adenocarcinoma In 40 cases of highgrade dysplasia, there were cases of weak expression, 27 cases of moderate expression, cases of overexpression Of the 28 cases of lowgrade dysplasia, 22 had wild-type weakness and had moderate severity All cases of pseudoinvasion showed mild to moderate severity in the foci of pseudo-invasion Conclusions: There is a clear difference in p53 expression between cases of low-grade dysplasia, high-grade dysplasia, intramucosal carcinoma and infiltrative carcinoma Invasive carcinoma cases are mainly overexpressed or lost, there is a clear difference between lowgrade and high-grade dysplasia by p53-stained HMMD The higher the degree of dysplasia, the stronger the expression of p53 or complete loss of expression Keywords: colorectal adenoma, invasion carcinoma, pseudo-invasion, p53 I ĐẶT VẤN ĐỀ Theo tổng hợp số liệu Tổ chức nghiên cứu ung thư quốc tế GLOBOCAN 2018, tính giới tỷ lệ mắc ung thư đại- trực tràng (UTĐTT) đứng thứ giới sau ung thư phổi ung thư vú, tỷ lệ tử vong ung thư đại- trực tràng đứng thứ sau ung thư phổi (1) UTĐTT phịng ngừa thơng qua chương trình tầm soát phát sớm tiền ung thư, điều địi hỏi mơ tả tồn diện tổn thương tiền ung thư bao gồm tổn thương dạng cưa u tuyến quy ước (Conventional colorectal adenoma CCA) U tuyến quy ước đại-trực tràng công nhận tổn thương tiền ung thư quan trọng phần lớn ung thư biểu mô đạitrực tràng (Colorectal adenocarcinoma – CRC)(5).Sinh học phân tử giải thích rõ 87 HỘI THẢO KHOA HỌC GIẢI PHẪU BỆNH – TẾ BÀO BỆNH HỌC VIỆT NAM LẦN THỨ 10 chế sinh ung đại-trực tràng: II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU chuỗi đột biến gen, đột biến Đối tượng nghiên cứu cuối tìm thấy UTĐTT đột Hồi cứu 94 trường 26 biến gen đè nén u TP53 nhánh ngắn nhiễm trường hợp chẩn đốn carcinơm xâm sắc thể số 17(6,7) Các nghiên cứu Mỹ cho nhập (niêm mạc, niêm mạc) u thấy khả định hướng, phát dự tuyến nghịch sản độ cao, 40 trường hợp u báo sớm CRC thông qua việc xét nghiệm tuyến nghịch sản độ cao khoa Giải Phẫu biểu p53 Những nghiên cứu trước Bệnh- Bệnh Viện Đại Học Y Dược Tp HCM CCA nêu rằng, gen đột biến từ tháng 1/2018-11/2020 TP53 phát xem Những trường hợp sinh thiết trọn kiện trước hình thành CRC polyp chẩn đốn u tuyến nghịch sản TP53 dịng hoang dại có thời gian bán độ cao carcinôm tuyến u tuyến hủy ngắn, dạng đột biến có thời gian bán hủy nghịch sản độ cao, có đầy đủ tiêu dài hơn, tích tụ nhiều nhân tế bào hematoxylin eosin khối nến Bệnh không biểu tính trạng trội thể nhân khơng có bệnh lý ung thư khác hoang dại Vì tượng tích lũy đột kèm biến gen TP53 biểu mức qua Phương pháp nghiên cứu: phương pháp hóa mơ miễn dịch (IHC) Đánh giá phân loại mô bệnh học ứng dụng rộng rãi để phát bất thường tiêu hematoxylin eosin, sau tiến TP53 tổn thương u Sự biểu q hành nhuộm hóa mơ miễn dịch p53 mức TP53 u tuyến quy ước thường Thiết kế nghiên cứu: gặp tổn thương nghịch sản độ cao ác Nghiên cứu thực theo phương tính Vì việc khảo sát biểu thức mô tả cắt ngang, hồi cứu TP53 u tuyến nghịch sản độ cao Phương pháp chọn mẫu: phương pháp HMMD mẫu vùi nến, Chọn mẫu thuận tiện, tồn có chủ hỗ trợ sớm cho việc xác định tình trạng xâm đích lấn kèm mà mơ bệnh học khó xác định, từ Đánh giá biểu p53: hỗ trợ tiên lượng điều trị Xuất phát từ Sử dụng kháng thể đơn dịng Monoclonal thực tế chúng tơi tiến hành nghiên cứu với Mouse Anti-human p53 protein Clone DO-7 mục tiêu sau: khảo sát biểu p53 máy nhuộm tiêu tự động u tuyến quy ước nguy cao đại- trực BenchMark Ventana Đánh giá biểu tràng so sánh biểu p53 u p53 (18, 19) tuyến quy ước có khơng có tình trạng xâm nhập(4,6,7) Biểu p53 Kí hiệu - Mất biểu (CA) (–): % nhân TB u bào bắt màu, tế bào bên nguyên bào sợi tế bào lympho dương tính rải rác - Bắt màu khu trú, bắt màu yếu (wild-type) (1+): >0 % đến 50% nhân dương tính lan tỏa mạnh) Y đức: Qua nghiên cứu, tổng số 94 trường hợp Đề tài Hội Đồng Y Đức Đại ghi nhận trường hợp biểu hiện, Học Y Dược TP HCM thông qua, 31 trường hợp biểu yếu, 37 trường hợp định số 765/HĐĐĐ-ĐHYD ngày 24 tháng 10 biểu mức trung bình 17 trường hợp năm 2020 biểu mức Tỷ lệ kiểu hình thể qua biểu đồ Với phương III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU pháp đánh giá biểu p53 3.1 Các kiểu hình miễn dịch p53 nghiên cứu này, dựa kết mẫu nghiên cứu nghiên cứu: Số lượng tế bào phản Nghiên cứu khảo sát kiểu ứng miễn dịch đánh giá bán định lượng hình miễn dịch p53 u tuyến đại- trực 10 quang trường đại diện khối tràng theo dạng biểu tỷ lệ % tế u (được chọn ngẫu nhiên) độ phóng đại cao bào dương tính, dạng phân bố đậm độ bắt (x 400) nhà nghiên cứu Tỷ lệ số TB màu Tương ứng với kiểu hình: (1) dương tính số tế bào âm tính tổng số biểu hiện, (2) biểu yếu, (3) biểu 100 tế bào quang trường trung bình, (4) biểu mức, lan tỏa Biểu đồ 1: Tỷ lệ kiểu hình p53 mẫu nghiên cứu 3.2 Mối liên quan kiểu hình kiễn dịch p53 loại mô học, độ nghịch sản Bảng Mối liên quan kiểu hình kiễn dịch p53 loại mơ học, độ nghịch sản Kiểu hình p53 Q mức Mất biểu Yếu Trung bình (mạnh, lan Đặc điểm P tỏa) Tỷ lệ Tỷ lệ Tỷ lệ Tỷ lệ Số ca Số ca Số ca Số ca (%) (%) (%) *%) LG 0 22 75,9 24,1 0 Độ HG 0 22,5 27 67,5 10 nghịch