Đánh giá ảnh hưởng của chất xơ hòa tan từ khoai lang đến sự phát triển của vi khuẩn LACTOBACILLUS

VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Đề tài: ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT xo HÒA TAN TÙ KHOAI LANG ĐÉN sụ PHÁT TRIỀN CỦA VI KHUẤN LACTOBACILLUS Ngi hướng dẫn : ThS TRẦN HỒNG QUN Sinh viên thục : LÊ THỊ NHƯ HỒI Khóa luận tốt nghiệp K18 Lê Thị Như Hoài - Lớp 1101 LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời cảm ơn tới Ths Trần Hoàng Quyên Trung tâm thực nghiệm sản xuất chuyển giao công nghệ thực phẩm, Viện Công nghiệp thực phẩm tận tình hướng dẫn, chi bảo, giúp đỡ em suốt thời gian thực khóa luận Xin chân thành cám ơn, Ths Lê Văn Bắc, Ths Nguyễn Minh Châu tập thể cán bộ, học viên Trung tâm thực nghiệm sàn xuất chuyên giao công nghệ thực phẩm, Viện Cơng nghệp thực phẩm nhiệt tình giúp đờ, truyền đạt kinh nghiệm quý báu cho em suốt thời gian thực khóa luận Qua đầy, em xin gửi lời cảm ơn tới thầy cô giáo khoa Công nghệ Sinh học, Viện Đại học Mở Hà Nội hướng dẫn, truyền đạt kiến thức cho em suốt thời gian học tập nghiên cứu Và em xin gứi lời cảm ơn tới gia đình bạn bè cùa em khơng ngừng giúp đỡ, chiạsẻ động viên sựổt ụình J1ỌC tâp thực ,, , , A khóa luận Thư viện Viện Đại học Mớ Hả N‘ội Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2015 Sinh viên thực Lê Thị Như Hồi Khóa luận tốt nghiệp K18 Lê Thị Như Hoài - Lớp 1101 MỤC LỤC MỞ ĐÀU Error! Bookmark not defined Phần I TÔNG QUAN Error! Bookmark not defined 1.1 Chất XO’ khoai lang Error! Bookmark not defined ỉ 1.1 Khái niệm chất xơ khoai lang 1.1.2 Phân loại chất xơ khoai lang Error! Bookmark not defined Error! Bookmark not defined LI.2.1 Phân loại theo cấu trúc hóa học Error! Bookmark not defined 1.1.2.2 Phân loại theo tính tan Error! Bookmark not defined 1.1.3 Vai trò chat xơ khoai lang Error! Bookmark not defined 1.1.4: Tình hình nghiên cứu, san xuất chất xơ Việt Nam giói: Error! Bookmark not defined 1.2 Vi khuẩn Lactobacillus Error! Bookmark not defined 7.2.7.7ỉM»íỊẢ’Ị' Y iệ!Ị Y iện ĐạiL.họcMờJà^AtoMrtnot defined 1.2.2 Đặc diem hình thái, sinh lí, sinh hóa cùa vi khuẩn Lactobacillus Error! Bookmark not defined 1.2.2.1 Đặc điếm hình thái cùa vi khuan Lactobacillus: Error! Bookmark not defined 1.2.2.2 Đặc tính chức sinh học cùa vi khuan Lactobacillus [14]: Error! Bookmark not defined 1.2.2 1.3 Vai trò vi khuẩn Lactobacillus [6] Error! Bookmark not defined Một số chủng Lactobacillus tiêu biểu dưọc sử dụng sản xuất chể phẩm probiotic Error! Bookmark not defined 1.3.1 Lactobacillus acidophilus: Error! Bookmark not defined 1.3.2 Lactobacillus casei: Error! Bookmark not defined 1.3.3 Lactobacillus plantarum: Error! Bookmark not defined Khóa luận tốt nghiệp K18 Lê Thị Như Hoài - Lớp 1101 Các nghiên cứu phát triển vi khuấn Lactobacillus mơi 1.4 trường có bỗ xung chất XO' Error! Bookmark not defined Phần II VẶT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CƯU Error! Bookmark not defined 2.1 Vật liệu nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.1.1 Chủng Lactobacillus sử dụng Error! Bookmark not defined 2.1.2 Giống khoai lang sử dụng nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.1.3 Hóa chat, thiết bị mơi trường sử dụng nghiên cứu .Error! Bookmark not defined 2.2 2.1.3.1 Hóa chất: Error! Bookmark not defined 2.1.3.2 Thiết hi: Error! Bookmark not defined 2.1.3.3 Môi trường sử dụng Error! Bookmark not defined Phưưng pháp nghiên cứu Error! Bookmark not defined 2.2.1 Phuong pháp ^ậệặịnli fịìph\tháị khuẩn lục; EifiprfifBflokmark not defined 2.2.2 Xác đinh khả sinh trưởng vi khuẩn phương pháp đo mật độ quang P], Error! Bookmark not defined 2.2.3 Phương pháp xác định khả sinh axit [18] Error! Bookmark not defined 2.2.4 Phương pháp xác định khả sinh enzyme ngoại bào: [1 ] Error! Bookmark not defined 2.2.5 Phương pháp nhuộm Gram: [10] Error! Bookmark not defined 2.2.6 Phương pháp xác định đặc điếm sinh lý, sinh hóa: [10] Error! Bookmark not defined 2.2.6.1 Xác định khả lên men loại đường: Error! Bookmark not defined 2.2 Ó.2 Xác định phản ứng catalase: Error! Bookmark not defined 2.2 6.3 Xác định khả di động: Error! Bookmark not defined PHÀN III: Khóa luận tốt nghiệp K18 Lê Thị Như Hồi - Lớp 1101 KÉT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Error! Bookmark not defined Đặc điểm hình thái, sinh lý, sinh hóa chủng Lactobacillus sử dụng 3.1 Error! Bookmark not defined 3.1.1 Đặc điếm hình thái Error! Bookmark noi defined 3.1.1.1 Đặc điếm hình thái khuẩn lạc: Error! Bookmark not defined 3.1.1.2 Hình thái hào Error! Bookmark not defined 3.1.2 Đặc điếm sinh lý, sinh hóa hai chủng sử dụng Error! Bookmark not defined 3.1.2.1 Khá lên men loại đường: Error! Bookmark not defined 3.1.2.2 Phán ứng catalase: Error! Bookmark not defined 3.1.2.3 Khả di động: Error! Bookmark not defined Anh hưởng việc bo sung FOS ( fructoligosaccaride) den phát trien 3.2 hai chủng Lactobacillus sử dụng Error! Bookmark not defined 3.2.1 Khá sinh trưởng hai chủng Lactobacillus bố sung FOS: Thif-việỉì“ViệifĐạ-i4iọe-MéfỉửW?Ắ:w’arẮ: not defined3.2.2 Khả sinh axit hai chủng Lactobacillus bố sung FOS nồng độ: Error! Bookmark not defined Ảnh hưởng việc bổ sung Inulin đến phát triển hai chủng 3.3 Lactobacillus sử dụng .Error! Bookmark not defined 3.3.1 Khả sinh trưởng hai chủng Lactobacillus bo sung Inulin: Error! Bookmark not defined 3.3.2 Khá sinh axit hai chủng Lactobacillus bo sung Inulin ởcác nồng độ: Error! Bookmark not defined Đánh giá bổ sung chất xơ hòa tan từ khoai lang đến phát triển hai 3.4 chủng Lactobacillus sử dụng Error! Bookmark not defined 3.4.1 Đánh giá khả sinh trưởng Lactobacillus mơi trường bố sung chất xơ hịa tan từ khoai lang Error! Bookmark not defined 3.4.2 Đánh giá sinh axit Lactobacillus mơi trường bổ sung chất xơ hịa tan từ khoai lang Error! Bookmark not defined Khóa luận tốt nghiệp K18 3.4.3 Lê Thị Như Hoài - Lớp 1101 Đánh giá khả sinh enzyme ngoại bào Lactobacillus mơi trường bổ sung chất xơ hịa tan từ khoai lang Error! Bookmark not defined PHÀN IV: KÉT LUẬN Error! Bookmark not defined 4.1 Kết luận Error! Bookmark not defined 4.2 Kiến nghị Error! Bookmark not defined PHẢN V: TÀI LIỆU THAM KHÁO Error! Bookmark not defined PHÀN VI: PHỤ LỤC Thư viện Viện Đại học Mở Hà Nội Khóa luận tốt nghiệp K18 Lê Thị Như Hoài - Lớp 1101 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1: Cây khoai lang Error! Bookmark not defined Bàng 1.2: Chat xơ thuộc nhóm polysaccharide ( khơng phải tinh bột): Error! Bookmark not defined Hình 1.2: Vi khuẩn Lactobacillus Error! Bookmark not defined Hình 1.3: hình dạng, kích thước vi khuẩn Lactobacillus [24] Error! Bookmark not defined Hình 1.4: Hai loại đồng phân axit lactic Error! Bookmark not defined Hình 1.5: Lactobacillus acidophilus Error! Bookmark not defined Hình 1.6: Lactobacillus casei Error! Bookmark not defined Hình 1.7: Hình thái L Plantarum Error! Bookmark not defined Hình 1.8: Một so sản phâm bo sung chat xơ thị trường Error! Bookmark not defined Hình 2.1: Giống khaỉ lahg sii^ng ^kgí?^ál9Gu™Ếitìp! Bookmark not defined Hình 3.1: Đặc điếm khuẩn lạc hai chủng Lactobacillus easel (trái) Lactobacillus plantarum (phải) Error! Bookmark not defined Hình 3.2: Hình thái hai chùng Lactobacillus Error! Bookmark not defined Hình 3.3: Phàn ứng lên men loại đường hai chủng Lactobacillus Error! Bookmark not defined Hình 3.4: Phán ứng hai chúng Lactobacillus nghiên cứu với H2O2 Error! Bookmark not defined Hình 3.5: Khả di động Lactobacillus plantarum (ống 2) Lactobacillus casei (ong 3) Error! Bookmark not defined Khóa luận tốt nghiệp K18 Lê Thị Như Hoài - Lớp 1101 DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1: Diện tích sản lượng khoai lang nước ta năm gần [23]: Error! Bookmark not defined Bàng 1.2: Chat xơ thuộc nhóm polysaccharide ( khơng phải tinh bột): Error! Bookmark not defined Bàng 3.1: Giá trị đo OD hai chùng Lactobacillus môi trường MRS môi trường bổ sung FOS Error! Bookmark not defined Bảng 3.2: Hàm lượng axit hai chủng Lactobacillus sinh thời điêm nuôi cấy bổ sung FOS: Error! Bookmark not defined Bàng 3.3: Giá trị đo OD hai chủng Lactobacillus môi trường MRSB môi trường bổ sung Inulin Error! Bookmark not defined Bảng 3.4: Hàm lượng axit hai chủng Lactobacillus sinh thời diêm nuôi cấy bo sung Inulin: Error! Bookmark not defined Báng 3.5: Giá trị đo ờị cùa lĩtỉí Inkỉ tWilg MRS môi trường bố sung chất xơ hòa tan từ khoai lang: Error! Bookmark not defined Bàng 3.6: Hàm lượng axit cùa hai chủng Lactobacillus sinh thời điếm nuôi cay bố sungchất xơ hòa tan từ khoai lang: Error! Bookmark not defined Bàng 3.7: Khâ sinh enzyme ngoại bào phân giải chất cùa hai chủng Lactobacillus kiểm ngiệm: Error! Bookmark not defined Khóa luận tốt nghiệp K18 Lê Thị Như Hồi - Lớp 1101 DANH MỤC BIẾU ĐÒ Biêu đồ 1: Sinh trướng chúng Lactobacillus plantarum môi trường MRS môi trường bổ sung FOS: Error! Bookmark not defined Biêu đồ 2: Sinh trường chúng Lactobacillus casei môi trường MRS môi trường bổ sung FOS Error! Bookmark not defined Biếu đồ 3: Chủng Lactobacillus plantarum sinh trướng môi trường MRS môi trường bổ sung Inulin: Error! Bookmark not defined Biếu đồ 4: Chúng Lactobacillus casei sinh trưởng môi trường MRS môi trường bổ sung Inulin: Error! Bookmark not defined Bicu 5: Chúng Lactobacillus plantarum sinh trường môi trường MRSB môi trường bổ sungchất xơ hòa tan từ khoai lang: Error! Bookmark not defined Biêu đồ 6: Chùng Lactobacillus casei sinh trướng môi trường MRSB môi trường bổ sungchất xơ hòa tan từ khoai lang: Error! Bookmark not defined Thư viện Viện Đại học Mở Hà Nội MỎ ĐẦU Ó Việt Nam, khoai lang lương thực truyền thống đứng thứ ba sau lúa, ngô đứng thứ hai giá trị kinh tế Khoai lang nguồn thực phẩm quen thuộc phổ biến sử dụng phần ăn hàng ngày, có giá trị dinh dưỡng cao chứa nhiều caroten, vitamin, chất chống oxy hóa đặc biệt hàm lượng chất xơ cao Chất xơ khoai lang có vai trị vơ quan trọng q trình tiêu hóa hệ vi sinh vật đường ruột Chất xơ từ khoai lang khơng bị tiêu hóa dày ruột non, chúng vận chuyến gần nguyên vẹn đến ruột già, chúng có tác dụng kích thích phát triền số chủng vi sinh vật có lợi sinh sống đường ruột vi khuan Lactobacillus , Bifidobacteria giúp vi sinh vật sản sinh chất dinh dưỡng mà thể hấp thụ được, ngăn ngừa vi khuấn có hại sinh sơi đường ruột Ngồi chất xơ cịn kết nối với chất có nguy gây hại cho đường tiêu hóa đào thài ngồi Lactobacillus] llốiloạlờỉì lỉtíỉvtồậìl lỉhiệtì”Mộn^ iron's (ơb thể người mà không gây bệnh Trong song, Lactobacillus có mặt từ lâu ln song hành Trong công nghiệp thực phẩm vi khuân Lactobacillus ứng dụng để sàn xuất nhiều sàn phẩm lên men rau muối chua, yaourt, phomat Chúng đóng vai trị bảo qn thực phẩm khỏi hư hỏng, cung cấp chất dinh dưỡng cho thực phẩm tạo mùi vị đặc trưng cho sàn phấm Đặc biệt vi khuẩn Lactobacillus có vai trị vơ quan trọng hệ tiêu hóa người, chúng vi sinh vật có lợi giúp tăng cường hệ miền dịch, kìm hãm phát triển vi khuẩn, nấm gây hại, phòng chống chữa trị số bệnh liên quan đến đường tiêu hóa tiêu chày, táo bón Bởi Lactobacillus ngày trở thành yeu tố quan trọng , thiết yếu sống nguồn nguyên liệu cho đời cùa sàn phẩm probiotic phục vụ người 3.3.1 Khả sinh truỏmg hai chủng Lactobacillus bố sung Inulin: Cũng đánh giá phát triên môi trường bổ sung FOS, nghiên cứu tiến hành đánh giá phát triển cùa hai chủng Lactobacillus môi trường bố sung Inulin nồng độ 0.5%; 1%; 1,5% Bảng 3.3: Giá trị đo OD hai chủng Lactobacillus môi trường MRSB môi trưởng bổ sung Inulin Giá trị đo OD (ABS) Giờ lấy Lactobacillus easel Lactobacillus plantarum mẫu MRS 0,5% 1% 1,5% Inulin Inulin Inulin MRS 0,5% 1% 1,5% Inulin Inulin Inulin Oh 0,093 0.079 0,086 0,081 0,085 0.078 0,080 0,089 2h 0,22 0,132 0,145 0,144 0,131 0,139 0,140 0,135 4h 0,359 0,321 0,324 0,413 0.319 0,324 0,327 0,402 6h 0,524 làhMệi 0,483 0,488 1711 0.936 0.932 0,906 0.933 0.936 0,945 0.953 0,936 19h 0.955 0,958 0,963 0,935 0,984 0.988 0,984 0,971 23h 1,023 1.015 1,044 1,016 0,991 1.020 1,018 1,026 Ttovi ệlQ,Vĩệl fâS21h( )ơ>w 2611 0.906 0.91 0.916 0.899 0,920 0.924 0.929 0,933 30h 0.868 0.870 0.872 0,869 0.863 0.894 0,897 0,885 48h 0,858 0.865 0,855 0,859 0,860 0.888 0,864 0,868 52h 0,845 0.808 0,848 0,847 0,831 0,872 0,858 0,851 72h 0.803 0.802 0,818 0,81 0,774 0,779 0,800 0,790 Biếu đồ 3: Chung Lactobacillus plantarum sinh trưởng môi trường MRS môi trường bo sung Inulin: 36 Chùng Lactobacillus plantarum sinh trưởng môi trường bố sung 1% Inulin tốt nhất, đinh sinh trường lúc 23h đạt giá trị 1,044 ABS Biếu dồ 4: Chủng Lactobacillus casei sinh trưởng môi trường MRS môi trường bo sung Inulin: Trên môi trường nuôi cấy bố sung Inulin Lactobacillus casei phát triến tốt nồng độ bổ sung 1,5% Đinh sinh trường 23h đạt 1,026 ABS 37 3.3.2 Khả sinh axit hai chủng Lactobacillus bố sung Inulin ỏ’ nồng độ: Bang 3.4: Hàm lượng axit hai chủng Lactobacillus sinh thòi điểm nuôi cấy bố sung Inulin: Số gain axit lactic 100ml dịch lên men (g/100ml) Giờ lấy Lactobacillus plantarum mầu MRS Lactobacillus casei 0,5% 1% 1,5% Inulin Inulin Inulin MRS 0,5% 1% 1,5% Inulin Inulin Inulin Oh 0,387 0,387 0,396 0,396 0,378 0,387 0,387 0,396 4h 0,702 0,63 0.63 0,63 0,63 0.648 0,648 0,675 6h 0,981 0,972 0,99 0,945 0,972 0,81 0,9 0.81 17h 1,548 1.53 1.575 1,548 1,53 1,548 1,548 1,521 23h 1,62 É)^8h( )C’O WNbi 1,746 1,71 30h 1,71 1.728 1,755 1,746 1,71 1.755 1,782 1,755 48h 1,8 1,845 1,845 1,89 1.8 1,8 1,89 1,845 52h 1,935 1.89 1.98 1,935 1,935 1.89 1,98 1,935 72h 1,935 1,98 2,07 2,025 1,935 1,98 2,025 2,007 Th?!1 vi ệnhViệi Từ kết hàm lượng axit bảng 3.4 thấy hai chủng Lactobacillus kiếm nghiệm bố sung Inulin vào môi trường nuôi cấy sinh axit tốt môi trường không bổ sung ( MRS ) Cả hai chủng cho hàm lượng axit cao bo sung Inulin với nồng độ 1% với hàm lượng axit đạt 2,07g/100ml L plantarum, 2,025g/100ml L.casei 72h nuôi cấy 38 3.4 Đánh giá bố sung chất XO' hòa tan từ khoai lang đến phát triển hai chủng Lactobacillus sử dụng Chất xơ hòa tan từ khoai lang sau thu nhận , kiếm tra tính tan sử dụng nghiên cứu với hằm lượng 0,5%; 1% 1,5% 3.4.1 Đánh giá khả sinh trưởng Lactobacillus mơi trưịmg bổ sung chất XO’ hịa tan từ khoai lang Bảng 3.5: Giá trị (lo OD hai chủng Lactobacillus môi trường MRS môi trường bo sung chất XO' hòa tan từ khoai lang: Giá trị đo OD (ABS) Giờ lấy Lactobacillus casei Lactobacillus plantarum mẫu MRS 0,5% 1% 1,5% xơ xơ xơ ệi9’\°?ệi 0,127 MRS 0,5% 1% 1,5% xơ xơ xơ 0,109 0,114 Oh 0,089 0,105 2h 0,24 0,134 0,155 0,147 0,133 0,131 0,138 0,135 4h 0,350 0,358 0,467 0,454 0,315 0,324 0,345 0,402 6h 0,524 0,662 0,679 0,678 0,477 0,548 0,663 0,642 17h 0,935 1,221 1,373 1,354 0,890 1,313 1,352 1,270 19h 0,960 1,027 1,031 1,024 0,933 1,009 1,041 1,010 23h 0,947 0,990 1,016 1,012 0,934 1,031 1,025 0,990 26h 0,906 0,927 1,002 0,984 0,919 0,976 1,007 0,891 30h 0,868 0,904 0,947 0,949 0.863 0,923 0,981 0,880 48h 0,859 0,897 0,870 0.914 0,876 0,892 0,862 0,874 52h 0,847 0,881 0,864 0,906 0,829 0,888 0,840 0,869 72h 0,803 0,801 0,799 0.873 0,775 0,808 0,773 0,789 39 )c°ei Từ kết thu bảng 3.5 ta có biếu đồ thể khả sinh trưởng hai chủng Lactobacillus kiểm nghiệm sau Biểu đồ 5: Chủng Lactobacillus plantarum sinh trưởng môi trường MRSB mơi trường bố sungchất xư hịa tan từ khoai lang: Thư viện Viện Đại học Mở Hà Nội Lactobacillus plantarum phát triển mơi trường có bổ sung chất xơ hòa tan tù khoai lang tốt so với môi trường MRS Đinh sinh trưởng môi trường bơ sung chất xơ hịa tan từ khoai lang vào lúc 17h sớm so với nuôi môi trường MRS vào lúc 23h Đinh sinh trưởng nuôi mơi trường có bổ sung chất xơ hịa tan từ khoai lang cao hẳn so với môi trường MRS, đạt giá trị cao nồng độ bổ sung 1% xơ hòa tan 40 Biếu đồ 6: Chủng Lactobacillus casei sinh trưởng môi trường MRSB môi trường bổ sungchẩt xơhịa tan từ khoai lang: Trên mơi trường ni cấy có bổ sung chất xơ hịa tan từ khoai lang Lactobacillus casei dũíhg pháétóiểta tọtihdồỊiảrỉ ựên ồiẳihírbỊng MRS Đinh sinh trường cao nồng độ 1% chất xơ bố sung vào lúc 17h Từ bảng báng 3.5 hai biểu đồ nhận thấy chất xơ hòa tan từ khoai lang có ảnh hưởng tích cực đến sinh trưởng hai chủng Lactobacillus thử nghiệm Đỉnh sinh trưởng hai chủng đạt sớm vào lúc 17h cao với môi trường kiềm nghiệm MRS Hai chủng Lactobacillus sử dụng chất xơ hòa tan từ khoai lang tốt chất xơ thương mại FOS, Inulin dùng nghiên cứu so sánh đường cong sinh trưởng, thời gian đạt đỉnh sinh trường 3.4.2 Đánh giá khả sính axit Lactobacillus mơi trường bổ sung chất XO’ hịa tan từ khoai lang Trên mơi trường MRS mơi trường có bơ sung chất xơ hịa tan từ khoai lang chuẩn độ axit với NaOH (),1N với mẫu lấy thời diem nuôi cấy, thu kết 41 Bảng 3.6: Hàm lượng axit hai chủng Lactobacillus sinh thịi điếm ni cấy bố sungchất xơ hòa tan từ khoai lang: Số gam axit lactic 100ml dịch lên men (g/100ml) Giờ lấy Lactobacillus casei Lactobacillus plantarum mẫu MRS 0,5% 1% 1,5% xơ xơ xơ MRS 0,5% 1% 1,5% xơ xơ xơ Oh 0,378 0,396 0,396 0,396 0,378 0,396 0,396 0,396 411 0,702 0,765 0.81 0,9 0,63 0,72 0,9 0.9 6h 0.981 1,17 1,26 1,296 0,972 1,062 1,125 1,08 17h 1,521 1,62 1.62 1,62 1,494 1,566 1,584 1,35 2311 1,755 1,8 1,8 1,8 1.71 1,755 1.755 1,8 30h 1,8 1,98 2,025 48h 1,8 2,025 2.07 52h 1,8 1,98 1.98 2.07 1,89 1,98 2.07 2,07 72h 1,89 2,025 2,052 2,079 1.98 1,98 2,079 2,097 1.764 , 1.89 4'98, U'89 ! liu \'1 ẻn ''JP1 Đui hí )C Mơ T1 Nơi 1,935 ’ 1,935' 2,025 1.8 1,935 Khi bố sung chất xơ hòa tan từ khoai lang vào môi trường nuôi cấy, hai chùng Lactobacillus sinh axit tốt môi trường MRS Trên môi trường nuôi cấy bồ sung 1,5% chất xơ hòa tan từ khoai lang, lúc 72h hàm lượng axit thu cao nhất, với L plantarum 2,079g/100ml, L casei 2,097/lOOml, cao hàm lượng thu thời điểm môi trường bo sung FOS, Inulin Chất xơ hịa tan từ khoai lang kích thích sư phát triển, tăng cường đặc tính sinh axit lactic Lactobacillus, hai chủng Lactobacillus sử dụng tốt bổ sung chất xơ thương mại FOS, Inulin 42 3.4.3 Đánh giá khả sinh enzyme ngoại bào Lactobacillus mơi trng bố sung chất XO' hịa tan từ khoai lang Hai chủng Lactobacillus sau nuôi 2411 môi trường MRS mơi trường bố sung chất xơ hịa tan từ khoai lang nồng độ 1% tiến hành đánh giá khả sinh enzyme ngoại bào Tráng lugol sau 48h ta có kết q đường kính vịng tròn phân giải chất sau Bảng 3.7: Khá sinh enzyme ngoại bào phân giải cffchat hai chủng Lactobacillus kiếm ngiệm: Chủng Lactobacillus môi trường Hoạt tính ezyme ( D - d, mm ) MRS 10 1% xơ 12 MRS 10 Lactobacillus plantarum Lactobacillus cũ^ị ị yị ện V;jn Đại t ỌC Mở Hà Nộị Hình 3.6: Khá sinh enyme Protease hai chúng Lactobacillus 43 PHẦN IV: KÉT LUẬN 4.1 Kết luận Qua q trình thực đề tài chúng tơi thu kết quá: - Nghiên cứu ảnh hưởng chất xơ hịa tan từ khoai lang đến q trình sinh trưởng phát triển hai chủng Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei tốt môi trường dinh dưỡng MRS mơi trường có bố sung chất xơ thương mại FOS, Inulin Đỉnh sinh trưởng cao xác định 17h L plantarum L casei bổ sung 1% chất xơ hòa tan từ khoai lang đạt 1,373 ABS 1,352ABS Hàm lượng chất xơ bồ sung đề hai chủng Lactobacillus phát triển tốt 1% - Nghiên cứu ảnh hưởng cùa chất xơ hòa tan từ khoai lang đến khà sinh axit hai chúng Lactobacillus kiểm nghiệm Cá hai chúng cho hàm lượng axit cao lúc 72h môi trường bo sung 1,5% chất xơ hòa tan từ khọại lang, L plantarum , o ™„/i nn.,,1 JhtfyiSA Yte, te dLộ„UÀNòi _ đạt 2,079g/100ml, L casei đạt 2,097g/ 100ml Hàm lượng axit sinh cao môi trường MRS, bo sung FOS hay Inulin - Nghiên cứu đánh giá sinh enzyme ngoại bào Lactobacillus môi trường bồ sung chất xơ hòa tan từ khoai lang thấy ràng ni mơi trường có bố sung 1% chất xơ hòa tan từ khoai lang hai chùng Lactobacillus cho khả sinh enzyme cao L plantarum đạt 12 mm, L casei đạt 13 mm Khi bổ sung chất xơ hịa tan vào mơi trường ni cấy Lactobacillus phát triến tốt hon so với môi trường không bố sung chất xơ hay có bổ sung chất xơ thương mại 44 4.2 Kiến nghị Từ kết đạt từ nghiên cứu cho thấy chất xơ hòa tan từ khoai lang có ảnh hưởng tốt đến sinh trưởng chùng Lactobacillus Kiến nghị cần tiến hành thêm kiểm nghiệm chủng Lactobacillus hay vi khuẩn lactic nói chung đế áp dụng sàn xuất sản phấm probiotic tối ưu Thư viện Viện Đại học Mở Hà Nội 45 PHẦN V: TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt: Hoàng Văn Tuấn, Phạm Hương Sơn, Nguyễn Thị Hiền, Nguyễn Thị Lài “Nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết cám gạo đen hoạt tính vi khuan probiotic" - Tạp chí sinh học 2013, 35(3se): 195-199 Hồ Kim Vĩnh Nghi “Nghiên cứu sản xuất chất xơ thực phẩm ứng dụng làm hoạt chất sinh học bố sung vào thực phẩm thực phấm chức năng”, 2009 Lê Thùy Linh, “ Ôn tập thực phẩm chức ”, chương 2: chất xơ thực phẩm Lê Xuân Phương, Đại học Đà Năng “ Thí nghiệm vi sinh vật học”, 2008 Lương Hồng Quang_bài giảng thực phấm chức bổ sung chất xơ Trường Đại học Nông Lâm TP.HCM Nguyền Đức Duy Anh, 2005 Xác định môi trường tối ưu đế thu sinh khối enzyme cùa vi khuan Bacillus subtilis, Lactobacillus acidophilus thừ nghiệm sản xuất chế phẩm sinh học LVTN Bộ môn CNSH Tủ sách trường Đại học Nông ILam Thư viện Viện Đại học Mở Hà Nội Nguyễn Đức Lượng cộng (1996), vi sinh vật công nghiệp- tập 2, Trường Đại học Bách Khoa TP.HCM Nguyễn Văn Thanh, Trần Cát Đông ( 2009 ) “ Công nghệ sinh học dược" NXB Giáo dục Việt Nam Nguyễn Lân Dũng, Bùi Thị Việt Hà, 2009 Sinh trưởng phát triển vi sinh vật 10 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đăng Đức, Đặng Hồng Nguyên, Phạm Văn Ty, Nguyền Vĩnh Phước, Nguyễn Phùng Tiến, 1976 Một sổ phương pháp nghiên cứu vi sình vật học tập 1,2,3 NXB Khoa học kỹ thuật 11 PGS.TS Lê Văn Việt Mần, báo cáo tiểu luận công nghệ lên men sán phẩm nem chua, Đại học Bách Khoa TP.HCM 12 Tài Liệu Dinh Dưỡng Gia-Nã-Đại 2007 - Bộ Y Te Gia-Nã-Đại, số liệu thống kê Ban Y Te Aiberta 46 13 Tô Minh châu, 2000 Vi sinh vật ứng dụng chăn nuôi Tủ sách trường Đại học Nông Lâm 14 Trần Hạnh Triết, 2005 “ Nghiên cứu đặc điếm sinh trưởng phát triển cùa vi khuẩn Lactobacillus sporogenes” Đại học Nơng Lâm TP.HCM Tài liệu nước ngồi: 15 Breed s Robert, Murray D.G E, and Hitchens Parker A, 1948 Bergay’s manual deteminative bacteriology.Sixth edition, The Williams & Wilkins Company.p.305331,349-361 16 Denne Tenney (1996) “Acidophilus" Woodland Publising P.O Box 160 Pleasant Glove, UT 84062 17 Dietary Reference Intakes for Enegry, Cacbohydrate, fiber, Fat, Fatty Acids, Cholesterol, Protein, and Amio Acids (Macronutrients) (2005), Chapter 7: Dietary, Functional and Total fiber 18 Emanuel et al (2005) 19 Lactobacillus if 2PQ9|^ published bý[