KHẢ NĂNG DIỆT KHUẨN CỦA LÒNG TRẮNG TRỨNG GÀ

Hội nghị khoa học lần thứ – Khoa KHƯD Tiểu ban: Công nghệ sinh học KHẢ NĂNG DIỆT KHUẨN CỦA LÒNG TRẮNG TRỨNG GÀ Huỳnh Thị Bạch Yến Khoa Khoa học Ứng dụng - Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học Trường Đại học Tôn Đức Thắng TP HCM ĐẶT VẤN ĐỀ Lysozyme lòng trắng trứng chứa 129 amino acid, muramidase hydrolase-N-acetylmuramic Là enzyme diệt khuẩn phổ biến thiên nhiên enzyme diện hầu hết dịch tiết thể, mơ người, động vật Enzyme có thực vật, vi khuẩn thể thực khuẩn Lòng trắng trứng gà nguồn lysozyme dễ sử dụng Lysozyme xúc tác phản ứng thủy phân liên kết (1-4) glycosidic acid N-acetymuraminic N-acetylglucosamin VK Micrococcus luteus nhạy cảm với lysozyme nên dùng để khảo sát enzyme Ngồi lịng trắng trứng cịn có chất ovotransferrin, ovomucin… có khả diệt khuẩn kiềm khuẩn vi khuẩn gram (+) Gram (-) khác (Craig Reg, 2002) NÔI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 2.1 Đối tượng khảo sát: Trứng gà Isa Brown Số mẫu khảo sát: 215 mẫu trứng đàn gà Thời gian trữ trứng: ngày, ngày 15 ngày nhiệt độ phịng thí nghiệm 2.2 Nội dung khảo sát Định hoạt lực diệt khuẩn Micrococcus luteus lysozyme lòng trắng trứng (LAM: lysozyme activity on Micrococcus luteus) Thực theo kỹ thuật Rasmusson 1999 cải tiến Nguyên lý: Lysozyme trứng có khả cắt liên kết β (1-4) glycosidic đơn vị đường amin hóa vách tế bào vi khuẩn (VK), làm vỡ tế bào diệt khuẩn Định khả diệt khuẩn Staphylococcus aureus (BAS%: bactericide activity on Staphylococcus aureus) Escherichia coli (BAE% bactericide activity on Escherichia coli) Thực theo kỹ thuật Mirnova Kouzmina 1996 (dẫn liệu Lê Khắc Thận, 2000) Nguyên lý: Đánh giá khả diệt khuẩn dung dịch đệm có thêm khơng thêm lịng trắng trứng khảo sát, qua việc đo độ truyền suốt Ống đối chứng khơng thêm lịng trắng trứng có nhiều vi khuẩn mọc, độ truyền suốt thấp so với ống thí nghiệm có thêm lịng trắng trứng có diệt khuẩn, hỗn hợp hơn, độ truyền suốt cao 2.3 Hóa chất • Gốc vi khuẩn: Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus Escherichia coli • Huyễn dịch vi khuẩn có khoảng 2.109 VK/ml nước muối sinh lý, có độ hấp thu quang học khoảng 80% (pha nồng độ VK theo McFarland, 1964; dẫn liệu Đỗ Trung Phấn Vũ Triệu An, 1982) • Mơi trường ni cấy vi khuẩn: thạch dinh dưỡng NA (nutrient Agar) vô trùng 158 Hội nghị khoa học lần thứ – Khoa KHƯD Tiểu ban: Công nghệ sinh học • Dung dịch đệm phosphate pH 6,5 2.4 Dụng cụ vật liệu • Máy quang phổ • Máy vortex • Tủ ấm 370C • Phòng cấy vô trùng 2.5 Phương pháp tiến hành Ống đối chứng (ĐC): 0,1 ml huyễn dịch VK + 1ml dung dịch đệm Ống thí nghiệm (TN): 0,1 ml huyễn dịch VK + 1ml lòng trắng trứng Lắc trộn đều, đem đo độ truyền suốt thời điểm S0 Ống trắng dùng dung dịch đệm Sau đó, cho tất ống đo vào tủ ấm 370C 15, 30 45 phút đo độ truyền suốt thời điểm S1 Cơng thức tính kết họat lực diệt khuẩn ký hiệu là: S TN − S o TN Phần trămdiệt khuẩn= 100− 100 o S ĐC− S ĐC S0TN , S0ĐC độ truyền suốt ống thí nghiệm ống đối chứng đo trộn xong S1TN , S1ĐC độ truyền suốt ống thí nghiệm ống đối chứng đo sau để tủ ấm 15, 30 45 phút Số liệu xử lý ANOVA yếu tố phần mềm Excel Minitab Kết trình bày dạng X ± SD KẾT QUẢ THẢO LUẬN Với 215 mẫu lòng trắng trứng đàn gà thuộc giống gà Isa Brown, khảo sát khả diệt loại vi khuẩn Micrococcus luteus, Staphylococcus aureus Escherichia coli Mẫu phân chia theo đàn, trọng lượng trứng thời gian trữ trứng Kết trình bày qua bảng: Bảng Số mẫu khảo sát phân chia theo đàn, trọng lượng trứng thời gian trữ trứng Tổng Nhóm Số mẫu cộng 110 215 Đàn 105 I (49,7-58) gam 44 215 Trọng lượng trứng (gam) II (58,1 – 64) gam 117 III (64,2 – 85,2) gam 54 70 215 Thời gian trữ trứng (ngày) 70 15 75 Kết khảo sát 215 mẫu lòng trắng trứng gà Isa Brown cho thấy: Tỷ lệ diệt khuẩn (%) lysozyme Micrococcus luteus cao 25,61 ± 8,14, khác biệt có ý nghĩa thống kê (P