Đang tải... (xem toàn văn)
Bài viết Khảo sát khả năng hấp phụ và giải phóng hoạt chất của các chất mang rắn hấp phụ hệ vi tự nhũ Cyclosporine A được thực hiện nhằm đánh giá khả năng hấp phụ và giải phóng hoạt chất Cyclosporine A ở dạng vi tự nhũ lỏng.
KHẢO SÁT KHẢ NĂNG HẤP PHỤ VÀ GIẢI PHÓNG HOẠT CHẤT CỦA CÁC CHẤT MANG RẮN HẤP PHỤ HỆ VI TỰ NHŨ CYCLOSPORINE A Huỳnh Thiện Phúc, Phạm Thị Thanh Ngân, Nguyễn Lê Hoàng Ngọc Châu Khoa Dược, Trường Đại học Cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh GVHD: ThS.DS Huỳnh Nguyễn Anh Khoa ThS.DS Bùi Nguyễn Như Quỳnh TÓM TẮT Ba loại tá dược hấp phụ gồm Florite R (calcium silicate cấu trúc xốp), Neusilin UFL2 (magnesium aluminometasilicate cấu trúc xốp) Aerosil 200 (silic dioxide) sử dụng làm chất mang rắn để khảo sát khả hấp phụ giải phóng hoạt chất cyclosporine A dạng vi tự nhũ lỏng (SMEDDS-CsA), hướng tới mục tiêu bào chế dạng thuốc rắn từ hệ phân tán lỏng Tỷ lệ hấp phụ tối đa chất mang rắn tìm cách xác định lượng SMEDDS-CsA (lỏng) nhiều có khả hấp phụ đơn vị khối lượng chất mang rắn cho tạo hỗn hợp bột tơi xốp, không vón cục Khả giải phóng hoạt chất khảo sát thơng qua phép thử độ hịa tan định lượng CsA phương pháp sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC) Kết cho thấy Florite R có khả hấp phụ nhiều SMEDDS-CsA với tỷ lệ 4,6:1 (kl/kl) Neusilin UFL2 Aerosil 200 có khả hấp phụ gần (2,5:1 kl/kl) Cả loại chất mang rắn có khả giải phóng hoạt chất tương tự hấp phụ tỷ lệ 2,5:1; 1,7:1 1,25:1 Từ khoá: Aerosil 200, Cyclosporin A, Florite R, hệ vi tự nhũ, Neusilin UFL2, SMEDDS GIỚI THIỆU Cyclosporine A (CsA) hoạt chất thân dầu (được xếp vào nhóm II hệ thống phân loại sinh dược học - BCS) [1], khả hòa tan nước dẫn đến sinh khả dụng đường uống thấp Hệ vi tự nhũ (SMEDDS) hỗn hợp đồng bao gồm dầu, chất diện hoạt, đồng diện hoạt với ưu điểm hòa tan tốt hoạt chất thân dầu CsA Khi đưa vào thể, SMEDDS tiếp xúc dịch thể đường tiêu hóa cộng với co bóp đường tiêu hóa tự hình thành vi nhũ tương làm tăng sinh khả dụng CsA [2] Do hỗn hợp SMEDDS thể lỏng nên có nhược điểm giới hạn dạng phân liều (hầu bào chế thành viên nang mềm) Để phong phú hóa, tạo điều kiện phát triển dạng bào chế khác phù hợp với điều kiện sản xuất khác nhau, thời gian gần đây, số nghiên cứu tiến hành nhằm hấp phụ SMEDDS lỏng chất mang rắn, tạo hệ phân tán vi tự nhũ rắn (S-SMEDDS) Trên thị trường tá dược dược phẩm nay, số công ty sản xuất thương mại hóa loại tá dược dùng làm chất mang rắn để hấp phụ dạng thuốc lỏng, đặc biệt dạng lỏng pha chế môi trường 807 thân dầu Trong số đó, có loại nghiên cứu sử dụng nhiều Florite R, Neusilin UFL2 Aerosil 200 Florite R có chất calcium silicate cấu trúc tinh thể xốp, cơng bố có tỷ lệ thể tích rỗng lớn giúp ổn định hoạt chất dùng làm chất mang làm kéo dài thời gian phóng thích hoạt chất [3] Neusilin UFL2 có chất magnesium aluminometasilicate (Al2O3.MgO.1,7SiO2.xH2O) cho chất hấp phụ tốt hệ vi tự nhũ dễ hình thành viên nén sau hấp phụ [4] Aerosil 200 có chất SiO2 sử dụng phổ biến làm tá dược trơn quy trình sản xuất thuốc rắn, với diện tích bề mặt riêng lớn (175 – 225 m2/g) [5] nên lựa chọn để làm chất mang rắn hấp phụ hỗn hợp lỏng Hướng đến việc rắn hóa SMEDDS-CsA lỏng nhằm tạo tiền đề cho nghiên cứu phát triển dạng bào chế rắn hoạt chất CsA, nghiên cứu thực nhằm đánh giá khả hấp phụ giải phóng hoạt chất cyclosporine A dạng vi tự nhũ lỏng NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên liệu Hoạt chất cyclosporine A (99,4%) đạt tất tiêu chuẩn theo chuyên luận Cyclosporine – USP43 (2020) [6] Neusilin UFL2 mua từ công ty Fuji Chemical Industries (Nhật), Florite R mua từ công ty Tomita Pharmaceutical (Nhật), Aerosil 200 mua từ Evomik Operation GmbH (chi nhánh Singapore) Các thành phần điều chế SMEDDS bao gồm Capmul® MCM, Cremorphor® RH 40, PEG400 có xuất xứ từ Trung Quốc Vỏ nang cứng dùng phép thử độ hịa tan có nguồn gốc từ Trung Quốc (được cung cấp Phịng thí nghiệm HUTECH) Chất chuẩn phân tích CsA (số lơ J0M382) đạt chuẩn HPLC (USP) tặng nhóm nghiên cứu Trung tâm Khoa học Cơng nghệ Dược Sài Gịn Các hóa chất dung mơi phân tích đạt chuẩn phân tích Phương pháp nghiên cứu Chuẩn bị SMEDDS-CsA Hỗn hợp SMEDDS-CsA (lỏng) có thành phần gồm Capmul® MCM - Cremorphor® RH 40 - PEG400 CsA tỷ lệ 33,3:33,3:16,7:16,7 kl/kl/kl/kl [7] pha chế cách khuấy trộn đơn giản máy khuấy từ nhiệt độ phòng vòng 12 sau bảo quản nhiệt độ phịng Khảo sát tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA chất mang rắn Cân g chất mang rắn cho vào cốc thủy tinh, sau cho từ từ SMEDDS-CsA (lỏng) vào, vừa cho vừa trộn liên tục hỗn hợp bắt đầu bị vón cục Tồn quy trình thực điều kiện nhiệt độ phịng Mỗi thí nghiệm lặp lại lần để lấy kết trung bình Tỉ lệ hấp phụ tính tỉ lệ khối lượng SMEDDS-CsA (lỏng) tối đa hấp phụ lên g chất mang rắn mà khơng tạo hỗn hợp vón Sản phẩm sau hấp phụ (S-SMEDDS-CsA) trữ nhiệt độ phịng, bao bì kín tránh sáng 808 Khảo sát khả giải phóng hoạt chất S-SMEDDS-CsA phép thử độ hòa tan Nhằm so sánh khả giải phóng hoạt chất CsA S-SMEDDS-CsA (rắn) loại chất mang rắn khác nhau, hỗn hợp S-SMEDDS-CsA (rắn) điều chế với tỷ lệ hấp phụ 2,5:1; 1,7:1 1,25:1 (kl/kl) Sau đó, hỗn hợp cân xác để lấy khối lượng tương đương 25 mg CsA đóng vào vỏ nang cứng số Tiến hành thử độ hòa tan viên nang chứa S-SMEDDS-CsA tương tự quy trình nêu USP 43 - Chuyên luận riêng viên nang cyclosporine [8] với điều chỉnh thể tích mơi trường hịa tan 500 mL; tổng thời gian khảo sát 180 phút, thông số khác không thay đổi Tại mốc thời gian 15, 30, 45, 60, 90, 180 phút, hút ml mẫu dịch hòa tan để định lượng CsA, bổ sung ml môi trường sau hút mẫu Mẫu sau lấy từ cốc thử độ hòa tan lọc qua phin lọc 0,45 µm để loại bỏ cặn rắn khơng tan trước pha lỗng định lượng HPLC Mỗi thử nghiệm tiến hành viên nang chứa S-SMEDDS-CsA Định lượng cyclosporine A phép thử độ hòa tan S-SMEDDS-CsA Được tiến hành tương tự quy trình nêu USP 43 - Chuyên luận riêng viên nang cyclosporine [8] với hệ thống sắc ký Shimadzu LC-2030C 3D Plus (Nhật); cột Phenomenex C18 4,6 mm x 25 cm, nhiệt độ lò cột 60 °C, đầu dị PDA, bước sóng phát 210 nm; tốc độ dịng mL/phút; thể tích bơm mẫu 20 µL Mẫu chuẩn pha từ chất chuẩn CsA đạt nồng độ 50 ppm Quy trình định lượng thẩm định đầy đủ tiêu theo quy định Thông tư 32/2018/TT-BYT KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA chất mang rắn Thí nghiệm thực nhằm mục tiêu điều chế S-SMEDDS-CsA (rắn) sử dụng chất mang rắn tải lượng hoạt chất cao nhất, thuận tiện cho việc phát triển dạng bào chế khác Đánh giá hỗn hợp SMEDDS-CsA (lỏng) hấp phụ lên chất mang rắn cảm quan, hỗn hợp cho bị vón hình thành hạt có đường kính lớn mm Tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA (lỏng) chất mang rắn trình bày biểu đồ Hình 809 Hình Tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA loại chất mang rắn (kl/kl) Qua khảo sát cho thấy Florite R trạng xốp, tỉ trọng nhỏ nên có tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA (lỏng) lớn (4,6:1 kl/kl) Tiếp theo Aerosil 200 Neusilin UFL2 có tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA (lỏng) gần tương đương (2,5:1 kl/kl) Kết phù hợp với công bố hãng sản xuất [3] [4] [5] 3.2 Khả giải phóng hoạt chất CsA S-SMEDDS-CsA Các biểu đồ Hình 2, Hình 3, Hình thể % CsA phóng thích so với hàm lượng 25 mg hỗn hợp S-SMEDDS-CsA điều chế từ loại chất mang rắn đóng vỏ nang số Hình Biểu đồ phần trăm cyclosporine A giải phóng mốc thời điểm Aerosil 200 theo tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA 810 Hình Biểu đồ phần trăm cyclosporine A giải phóng mốc thời điểm Florite R theo tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA Hình Biểu đồ phần trăm cyclosporine A giải phóng mốc thời điểm Neusilin UFL2 theo tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA Nhìn chung khả giải phóng hoạt chất chất mang rắn (Aerosil 200, Florite R, Neusilin UFL2) tương đương nhau, khơng có khác biệt đáng kể, tất đạt u cầu phóng thích 80 % hoạt chất CsA thời điểm 90 phút theo USP 43 - Chuyên luận riêng viên nang cyclosporine [8] Riêng loại chất mang rắn: Florite R tỉ lệ hấp phụ 2,5:1 có khả giải phóng hoạt chất nhiều nhất; Aerosil 200 tỉ lệ hấp phụ 1,25:1 có khả giải phóng hoạt chất thấp so với tỉ lệ hấp phụ lại (1,75:1 2,5:1) Neusilin UFL2 có khả giải phóng hoạt chất tương đương tỉ lệ hấp phụ khác Bên cạnh đó, khả giải phóng hoạt chất chất mang rắn thời điểm 45 phút cịn hạn chế (khơng q 80 % hoạt chất) nên dạng thuốc phóng thích tức khơng phù hợp để phát triển Để hoàn thiện 811 thêm số liệu, kết khả giải phóng hoạt chất Florite R cần nghiên cứu thêm tỉ lệ hấp phụ cao (vì Florite R có tỉ lệ hấp phụ tới khoảng 4,6 lần) KẾT LUẬN Nghiên cứu thành công việc khảo sát tỉ lệ hấp phụ (Florite R có tỉ lệ hấp phụ khoảng 4,6 lần, Aerosil 200 Neusilin UFL2 có tỉ lệ hấp phụ khoảng 2,48 lần) Khả giải phóng hoạt chất ba loại chất mang rắn (Aerosil 200, Neusilin UFL2, Florite R) gần tương đương nhau, đặt tảng cho phát triển dạng bào chế từ S-SMEDDS-CsA Tuy nhiên cần nghiên cứu thêm độ ổn định SMEDDS-CsA (lỏng) hấp phụ vào chất mang rắn khả giải phóng hoạt chất S-SMEDDS-CsA (rắn) phát triển thành dạng bào chế khác TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Chiu, Y.-Y., Higaki, K., Neudeck, B L., Barnett, J L., Welage, L S., & Amidon, G L (2003) Human Jejunal Permeability of Cyclosporin A: Influence of Surfactants on P-Glycoprotein Efflux in Caco-2 Cells [2] Sharma, V K., Koka, A., Yadav, J., Sharma, A K., & Keservani, R K (n.d.) Self-Micro Emulsifying Drug Delivery Systems: A Strategy to Improve Oral Bioavailability 13 [3] Tomita Pharmaceutical (2018) Florite https://tomitaph.co.jp/english/data/FLORITE.pdf [4] Fuji Chemical Industries (2015) Neusilin https://www.fujichemical.co.jp/english/medical/medicine/neusilin/neusilin_brochure.pdf [5] Evonik Operations GmbH (2021) Aerosil 200 https://productsre.evonik.com/www2/uploads/productfinder/AEROSIL-200-EN.pdf [6] United States of America Pharmacopeia (2020) Cyclosporine (nguyên liệu) In USP 43 Pharmacopoeia (p 1174) [7] Nguyễn An (2021) Bào chế viên nén bao phim chứa hệ phân tán vi tự nhũ cyclosporine A hàm lượng 25 mg Báo cáo khóa luận tốt nghiệp Dược sĩ Đại học - Khoa Dược - Trường Đại học Cơng nghệ TP Hồ Chí Minh [8] United States of America Pharmacopeia (2018) Chuyên luận riêng viên nang cyclosporine In USP 41 Pharmacopoeia 812 ... 808 Khảo sát khả giải phóng hoạt chất S-SMEDDS-CsA phép thử độ h? ?a tan Nhằm so sánh khả giải phóng hoạt chất CsA S-SMEDDS-CsA (rắn) loại chất mang rắn khác nhau, hỗn hợp S-SMEDDS-CsA (rắn) điều... phòng vịng 12 sau bảo quản nhiệt độ phòng Khảo sát tỉ lệ hấp phụ SMEDDS-CsA chất mang rắn Cân g chất mang rắn cho vào cốc thủy tinh, sau cho từ từ SMEDDS-CsA (lỏng) vào, v? ?a cho v? ?a trộn liên tục... rắn hoạt chất CsA, nghiên cứu thực nhằm đánh giá khả hấp phụ giải phóng hoạt chất cyclosporine A dạng vi tự nhũ lỏng NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên liệu Hoạt chất cyclosporine A
