VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VN VIỆN CƠNG NGHỆ SINH HỌC CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Hà Nội, ngày 30 tháng 10 năm 2017 THÔNG TIN VỀ LUẬN ÁN ĐƯA LÊN MẠNG Tên đề tài luận án: Nghiên cứu thiết kế chuyển gen AGPopt tổng hợp nhân tạo vào sắn (Manihot esculenta Crantz) Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật Mã số: 62 42 01 12 Họ tên Nghiên cứu sinh: ĐỖ HẢI LAN Họ tên cán hướng dẫn: GS.TS Lê Trần Bình, PGS.TS Lê Văn Sơn Cơ sở đào tạo: Viện Công nghệ sinh học, Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam TÓM TẮT NHỮNG KẾT LUẬN MỚI CỦA LUẬN ÁN Quy trình tái sinh sắn xây dựng thành công thông qua phôi soma từ đỉnh chồi thùy non giống sắn KM140 KM94 Việt Nam hình thành mơi trường MS có bổ sung picloram 12 mg/l tái sinh chồi môi trường chứa BAP 0,3 mg/l Quy trình chuyển gen vào sắn thơng qua A tumefaciens thử nghiệm thành công với gen gus vào phôi soma, kết thu đạt hiệu chuyển gen 0,9 % Trên sở trình tự glgC E.coli K12, gen AGPopt tổng hợp nhân tạo mã di truyền tối ưu phù hợp biểu thực vật, đồng thời bổ sung đột biến thay G336D Cấu trúc gen AGPopt thiết kế vào vector chuyển gen pBI121 kiểm tra khả biểu hiện, làm tăng hoạt tính enzim AGPase hàm lượng tinh bột thuốc Cấu trúc gen AGPopt chuyển thành công vào sắn KM94 thông qua phơi soma Bước đầu kiểm tra 5/6 dịng sắn có mặt gen nptII AGPopt kỹ thuật PCR Người hướng dẫn khoa học GS.TS Lê Trần Bình PGS.TS Lê Văn Sơn Nghiên cứu sinh Đỗ Hải Lan XÁC NHẬN CỦA VIỆN CÔNG NGHỆ SINH HỌC VIETNAM ACADEMY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY INSTITUTE OF BIOTECHNOLOGY Socialist Republic of Vietnam Independence - Freedom - Happiness PhD THESIS BRIEF Hanoi, Month 10 Date 30 2017 (For publication on Internet) Topic: Construction and transformation of AGP synthesized gene (AGPopt) into cassava plant (Manihot esculenta Crantz ) Major: Plant Physiology No.: 62 42 01 12 Full name of PhD Student: DO HAI LAN Full name of Instructor: Prof PhD Le Tran Binh Assoc Prof PhD Le Van Son Location of Research: Institute of Biotechnology, Vietnam Academy of Science and Technology FINDINGS AND CONCLUSIONS In vitro tissue culture and plant regeneration via somatic embryogenesis using shoot apex and young leaves have been optimized for two local cassava varieties KM140 and KM94, suitable for genetic transformation Somatic embryo was produced on MS medium supplied with 12 mg/l picloram and germinated with the present of 0,3 mg/l BAP The genetic transformation procedure for studied cultivars was optimized using GUS gene with the efficiency of 0.9% Plant expression optimization of G336D mutated bacterial AGPase linked to a signal peptide and a tail of c-myc, KDEL was synthetized and constructed into a transformation vector named pBI121AGPopt AGPopt gene was proved to expression efficiently in model plants (tobacco) via Southern blot, AGPase activity and starch content increase pBI121AGPopt vector have been transformed into KM94 cassava variety and resulted PCR positive regenerated plants Further analysis to prove the transformation events are going on Instructor Prof PhD Le Tran Binh Assoc Prof PhD Le Van Son PhD Student Đỗ Hải Lan CONFIRMATION OF INSTITUTE OF BIOTECHNOLOGY ... publication on Internet) Topic: Construction and transformation of AGP synthesized gene (AGPopt) into cassava plant (Manihot esculenta Crantz ) Major: Plant Physiology No.: 62 42 01 12 Full name of PhD... transformation vector named pBI12 1AGPopt AGPopt gene was proved to expression efficiently in model plants (tobacco) via Southern blot, AGPase activity and starch content increase pBI12 1AGPopt vector have been... culture and plant regeneration via somatic embryogenesis using shoot apex and young leaves have been optimized for two local cassava varieties KM140 and KM94, suitable for genetic transformation