Đang tải... (xem toàn văn)
KHOA HỌC CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỬU KHẢ NẢNG TÁI SINH //V VỄTRO VÀ SINH TRUỦNG, PHÁT TRIỂN EX VITRO CÂY HỔNG MÚN THIÊN NGA [Anthurium scherzerianum Schott] Phan Xuân Huyên1’ *, Đinh Văn Khiêm1, 1 Viện Nghiê[.]
KHOA HỌC CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỬU KHẢ NẢNG TÁI SINH //V VỄTRO VÀ SINH TRUỦNG, PHÁT TRIỂN EX VITRO CÂY HỔNG MÚN THIÊN NGA [Anthurium scherzerianum Schott] Phan Xuân Huyên1’ *, Đinh Văn Khiêm1, Nguyễn Thị Thanh Hằng1, Nguyễn Thị Phượng Hồng1 TĨM TẮT Cây hồng mơn thiên nga (Authuríum scherzerianum Schott) giống hoa nhập nội, có giá trị kinh tế cao Hiện nước ta chưa có công bố nhân giống in vitro nuôi trồng hoa hồng môn thiên nga Nghiên cứu khả tái sinh in vitro sinh trưởng, phát triển ex vitro hồng môn thiên nga cho thấy, môi trường MS bổ sung 0,3 mg/1 - 0,5 mg/1 BA kết họp 0,1 mg/1 2,4-D phù họp đến hình thành callus từ non (khối lượng tưoi callus 0,19 g/mẫu - 0,20 g/mẫu, tỷ lệ mẫu tạo callus 80%) Môi trường MS bổ sung 1,5 mg/1 BA phù họp đến biệt hóa chồi từ callus (chiều cao chồi 2,98 cm, số chồi 25,10 chồi/mẫu, số mẫu biệt hóa chồi 100%) Môi trường MS bổ sung mg/1 -1 mg/1 IBA thích họp tạo rễ in vitro (tỷ lệ mẫu tạo rễ 100%) Vụn xơ dừa giá thể tốt để chuyển cấy mô điều kiện ex vitro (chiều cao 7,14 cm, chiều dài rẽ 3,92 cm, tỷ lệ sống 94,44%) Giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10% phân dè phù họp cho sinh trưởng, phát triển hoa điều kiện ex vitro (chiều cao 22,42 cm, số hoa 1,30 hoa/chậu, tỷ lệ sống hoa 100%) Khí hậu Đà Lạt - Lâm Đồng phù họp cho trồng hồng môn thiên nga, phát triển tốt, hoa sau tháng trồng đồng loạt hoa sau 12 tháng trồng Cây sinh trưởng tốt hoa nhiều sau 24 tháng trồng (chiều cao 37,13 cm, số hoa 3,2 hoa/chậu), sau 36 tháng trồng (chiều cao 47,79 cm, số hoa 4,4 hoa/chậu) Từ khóa: Cày hồng mơn thiên nga, chiều cao cây, chiều dài rễ, giá thể, môi trường MS, sinh trưởng phát triển ĐẶT VẤN BỀ Đà Lạt - Lâm Đồng có điều kiện tự nhiên thích họp cho nhiều loại hoa sinh trưởng, phát triển trở thành trung tâm trồng hoa nước Trong đó, hồng mơn thiên nga (Ạnthurium scherzerianum Schott) giống hoa nhập nội, có nguồn gốc từ Bắc Mỹ, có giá trị kinh tế cao, chậu hoa có giá từ vài trăm ngàn đồng đến vài triệu đồng hoa quanh năm, hoa đẹp, bền chậu hoa chơi nhiều năm Do đó, việc nghiên cứu nhân giống phát triển hóa loại có giá trị cần thiết Hiện giói có nhiều cơng bố nghiên cứu nhân giống in vitro hồng môn thiên nga [4], [5], [6], [15], nước ta chưa có cơng bố Phương pháp nhân giống vơ tính truyền thống cách tách chiết ngồi vườn ươm khơng tạo số lượng lớn giống để trồng quy mô công nghiệp, khơng đồng nhất, thường bị nhiễm bệnh thối hóa, sinh trưởng yếu cho hoa chất Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Email: phanxuanhuyen 1974@gmail.com 24 lượng, ứng dụng công nghệ sinh học, nuôi cấy mơ tế bào thực vật nhân giống vơ tính in vitro hồng môn thiên nga khắc phục hạn chế nhân giống vơ tính truyền thống Bài báo tiến hành nghiên cứu hình thành callus từ non, tái sinh chồi từ callus, tạo rẽ in vitro, chuyển cấy mơ ngồi vườn ươm sinh trưởng phát triển hồng môn thiên nga điều kiện ex vitro Nghiên cứu khả tái sinh in vitro sinh trưởng, phát triển ex vitro hơng mơn thiên nga góp phần cung cấp liệu khoa học nhân giống vơ tính m vitro hồng môn thiên nga, hướng đến cung cấp giống cấy mô cho người sản xuất VẬT UỆU VÀ PHUONG PHÁP NGHlâl cúu 2.1 Vật liệu nghiên cứu Vật liệư Chậu hồng môn thiên nga trường thành nuôi trồng Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên (Hình la), non (Hình lb) lấy từ chậu rửa nước xà phòng, sau khử trùng cồn 70° thịi gian phút, rửa lại mẫu nước cất vô trùng lần Tiếp theo, non khử trùng dung dịch NaOCl 2% thời gian phút, rửa lại mẫu nước cất vơ trùng lần NƠNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIÊN NÔNG THÔN - KỲ - THÁNG 4/2022 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ [11] Lá non sau khử trùng cắt thành trường MS bổ sung mg/1, 0,1 mg/1, 0,5 mg/1, mẫu có kích thước Cm X cm, mẫu (Hình mg/1 IBA, g/1 than hoạt tính, 30 g/1 sucrose, 10 g/1 lc) sử dụng làm nguồn vật liệu cho thí nghiệm agar, pH 5,8 Mỗi nghiệm thức cấy 60 mẫu, thu số Mòi trường MS 10] sử dụng cho thí liệu sau tháng ni cấy, theo dõi chiều cao chồi nghiệm nhân giống hy vitro, tùy theo mục đích (cm), chiều dài rễ (cm), tỷ lệ mẫu tạo rễ (%) đánh thí nghiệm mà bo sung chất điều hịa sinh giá cảm quan hình thái trưởng như: BA (6-benzyl adenin), IBA (Indole-3butyric acid), 2,4-D (2,4-Dichlorophenoxy acetic acid) Giá thể nghiênỉ cứu chuyển cấy mơ ngồi vườn ưom vụnjxơ dừa, dớn trấu hun Điều kiện Đối vơi thí nghiệm in vitro, thời gian chiếu sáng |giờ/ngày, cường độ ánh sáng 34 ụmol.m'2.snhiệt đô 25 ± 2°c độ ẩm khơng khí 75% - 85% Thí nghiệm điều kiện ex vitro thực nhà màng co mái nylon trắng che mưa Thời gian địa điểm Thòi gian thực từ tháng 1/2017 - 12/2020 Địa điểm thực Phịng Cơng nghệ thực vật, Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên I 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Khảo sát ảnn hưởng nồng độ BA kết họp 2,4-D đến hình thành callus in vitro Những mẫu non (Hình lc) cấy mơi trường MS bổ sung mg/1, 0,1 mg/1, 0,3 mg/1, 0,5 mg/1, 0,7 mg/1,1 mg/1 ỀA kết họp 0,1 mg/1 2,4-D, 30 g/1 sucrose, 10 g/1 agar, pH 5,8 Mỗi nghiệm thức cấy 20 mẫu, thu số liệu sau tháng nuôi cấy, theo dõi khối lượng tươi mậu (g/mẫu), tỷ lệ mẫu hình thành callus (%) đái ih giá cảm quan hình thái callus 2.2.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA đến biệt hóa chồi in vitro từ callus Từ thí nghiệm chọn mơi trường hình thành callus tốt ni (nẫu (Hình lc) tạo mẫu callus để làm vật lieu cho thí nghiệm Những mẫu callus (Hình le) đưpc cấy môi trường MS bổ sung mg/1, 0,5 mg/1, mg/1, 1,5 mg/1, mg/1 BA, 30 g/1 sucrose, 10 g/1 agar, pH 5,8 Mỗi nghiệm thức cấy 20 mẫu, thu số liệu sau tháng nuôi cấy, theo dõi số mẫu callus biệt hóa chồi (%), chiều cao chồi (cm), số chồi/mẫu va đánh giá cảm quan hình thái chồi 2.2.3 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ IBA đến tạo rễ in vitro Cắt chồi biệt hóa từ callus đồng kích thước chiều cao khoảng 1,5 cm cấy môi 2.2.4 Khảo sát ảnh hường giá thể đến thích nghi sinh trưởng cấy mô điều kiện ex vitro Những in vitro có đầy đủ thân rễ, có chiều cao khoảng 3,5 cm (Hình 2a) trồng giá thể vụn xơ dừa, dớn 50% vụn xơ dừa + 50% dớn Mỗi nghiệm thức trồng 90 cây, thu số liệu sau tháng nuôi trồng, theo dõi chiều cao (cm), chiều dài rễ (cm), tỷ lệ sống (%) đánh giá cảm quan hình thái 2.2.5 Khảo sát ảnh hưởng giá thể đến sinh trưởng, phát triển điều kiện ex vitro Những cấy mô thích nghi điều kiện ex vitro tháng tuổi có chiều cao cm - cm trồng vào chậu giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10% phân dê giá thể 70% dớn + 20% trấu hun + 10% phân dê Phun phân Nitrophoska (2 g/1) định kỳ 10 ngày/lần, phun thuốc phòng trừ sâu, bệnh Kasuran (3 g/1) Radiant (1 ml/1) định kỳ 15 ngày/lần Mỗi nghiệm thức trồng 90 chậu, trồng cây/chậu (chiều cao chậu 14 cm, đường kính chậu 18 cm), thu số liệu sau 12 tháng nuôi trồng, theo dõi chiều cao (cm), số hoa/cày, tỷ lệ sống (%), tỷ lệ hoa (%) đánh giá cảm quan hình thái 2.3 Xử lý số liệu Số liệu thí nghiệm xử lý phần mềm thống kê SPSS (bản 15.0) Duncan’s test vàT-test [2], với p< 0,05 KÉT QUÃ NGHIÊN cúu VÀ THẢO LUẬN 3.1 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA kết họp 2,4-D đến hình thành callus in vitro Khả hình thành callus từ mẫu sau tháng nuôi cấy thể bảng Kết cho thấy, nồng độ BA kết họp với 0,1 mg/1 2,4-D có ảnh hưởng tích cực đến hình thành callus mẫu lá, mẫu cấy môi trường không bổ sung chất điều hịa sinh trưởng khơng hình thành callus Các mơi trường bổ sung chất điều hịa sinh trưởng thúc đẩy mẫu tạo callus, nhiên nồng độ BA khác NĨNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIEN nóng thôn - KỲ - THÁNG 4/2022 25 KHOA HỌC CƠNG NGHỆ tỷ lệ hình thành callus khác Nghiệm thức bổ sung 0,3 mg/1 0,5 mg/1 BA tốt (Hình Idj, ld2, Ids) vói khối lượng tươi mẫu tương ứng 0,20 g/mẫu 0,19 g/mẫu, tỷ lệ mẫu hình thành callus hai nghiệm thức đạt 80% Kết thí nghiệm cho thấy, nồng độ BA thấp khối lượng tươi mẫu tỷ lệ mẫu hình thành callus tăng, nồng độ BA tăng cao tiêu giảm Điều giải thích, nồng độ BA thấp kích thích tăng khối lượng tươi mẫu tỷ lệ mẫu hình thành callus, nồng độ BA tăng cao xảy trình ngược lại ức chế khối lượng tươi mẫu tỷ lệ mẫu hình thành callus nhân giống in vitro Hiện nước ta chưa có công bố nghiên cứu tạo callus từ mẫu hồng mơn thiên nga, giói có nhiều cơng bố Kết thí nghiệm phù họp vói kết Hamidah cs (1997) [6] tiến hành nghiên cứu phát sinh phôi xô ma tái sinh hồng môn thiên nga in vitro sử dụng kết họp BA 2,4-D cho tỷ lệ mẫu hình thành callus 73% Hamidah cs (1997) [6] cho thấy, sử dụng độc lập IAA, IBA, NAA 2,4-D tỷ lệ mẫu tạo callus thấp hơn, tương ứng 62% - 64,5%, 63% - 64%, 55% - 56,5% 65% - 66,5% Nghiên cứu tương đồng với nghiên cứu Geier (1987) [4] nhân giống in vitro hồng môn thiên nga thơng qua ni cấy mẫu Ngồi số nghiên cứu tạo callus từ mẫu hồng môn cắt cành (Anthurium andreanum Tropical’) [10], sử dụng BA kết họp vói 2,4-D cho tỷ lệ mẫu tạo callus đạt 77,33%, hồng môn cắt cành đạt 79,48% [14], Đặc điểm hình thái mẫu cho thấy, môi trường không bổ sung chất điều hịa sinh trưởng mẫu khơng tạo callus, chuyển sang màu vàng chết; mơi trường có bổ sung nồng độ BA kết họp vói 0,1 mg/1 2,4-D callus hình thành xung quanh mẫu lá, dạng tròn, màu trắng ngà Chất điều hòa sinh trưởng BA cytokinin có tác dụng kích thích phân chia tế bào, cịn 2,4-D thuộc nhóm auxin thường sử dụng nghiên cứu tạo callus Như vậy, môi trường MS bổ sung 0,3 mg/1 - 0,5 mg/1 BA kết họp 0,1 mg/1 2,4-D tốt đến hình thành callus in vitro từ hoa hồng môn thiên nga Bảng Ảnh hưởng nồng độ BA kết họp 2,4-D đến hình thành callus in vitro sau tháng nuôi cấy BA (mg/1) 2,4-D (mg/1) Khối lượng tươi callus (g/mẫu) Tỷ lệ mẫu hình thành callus (%) 0,0 0,0 o,lld 0,1 0,1 0,14c 55 0,3 0,1 0,20a 80 0,5 0,1 0,19a 80 0,7 0,1 0,16b 75 1,0 0,1 0,13c 65 Hình thái mâu Mẫu không tạo callus, nhiều mẫu chuyển sang màu vàng chết Callus hình thành xung quanh mẫu lá, dạng trịn, màu trắng ngà Callus hình thành xung quanh mẫu lá, dạng tròn, màu trắng ngà Callus hình thành xung quanh mẫu lá, dạng ưịn, màu trắng ngà Callus hình thành xung quanh mẫu lá, dạng trịn, màu trắng ngà Callus hình thành xung quanh mẫu lá, khối tròn, màu trắng ngà Ghi chú: * Những chữ khác (a, b, ) cột biểu diễn khác có ý nghĩa vói p< 0,05 Duncan’s test 3.2 Khảo sát ảnh hưởng nồng độ BA chồi, tỷ lệ đạt 100% Tuy nhiên nghiệm thức khác vói nồng độ BA khác biệt hóa đến biệt hóa chồi in vitro từ callus sinh trưởng chồi khác Mầu callus nghiệm Khả biệt hóa sinh trưởng chồi từ callus thức bổ sung 1,5 mg/1 BA biệt hóa sinh trưởng sau tháng ni cấy thể bảng Kết chồi tốt nhất, vói 25,10 chồi/mẫu chiều cao chồi cho thấy, chất điều hịa sinh trưởng BA có ảnh hưởng 2,98 cm (Hình lộ Trong đó, mẫu nghiệm thức tốt đến biệt hóa sinh trưởng chồi từ callus Tất khơng bổ sung chất điều hịa sinh trưởng biệt mẫu callus nghiệm thức biệt hóa hóa 4,20 chồi/mẫu chiều cao chồi 1,54 cm Kết 26 NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIEN nồng thôn - KỲ - THÁNG 4/2022 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ rằng, tăng nồng độ BA từ mg/1 - 1,5 mg/1 số chồi biệt hóa tăng lên chiều cao chồi tăng lên, nhjung nồng độ BA tăng lên mg/1 tiêu nỉày giảm Như cho thấy, nồng độ BA thấp lách thích mẫu callus biệt hóa chồi tăng chiều cao chồi, nồng độ BA tăng cao ức chế bịệt hóa chồi sinh trưởng chồi Về đặc điểm hìnhịthái chồi: mơi trường khơng bổ sung chất đjều hịa sinh trưởng, chồi khỏe có màu xanh đậm, sinh trưởng chậm; môi trường bổ sung 0,5 mg/1 BA, chồi khỏe có màu xanh mượt, sinh trưởng chậm; mô|i trường từ mg/1 - 1,5 mg/1 BA, chồi khỏe có màu xanh mượt, sinh trưởng nhanh mơi trường bổ sung mg/1 BA, chồi có màu xanh mượt, sinh trưởnLg nhanh có tượng mọng nước Kết phù họp với nghiên cứu Wang cs (2002) [15] nghiên cứu biệt hóa chồi từ callus mẫu hồng mơn thiên nga sử dụng BA độc lập nồng độ 0,5 mg/1, mg/1, 1,5 mg/1 mg/1 có số chồi biệt hóa tương ứng chồi/mẫu, chồi/mẫu, 18 chồi/mẫu 14 chồi/mẫu Phan Xuân Huyên cs (2015) [11] nhân giống in vitro hồng môn mini BA nồng độ 1,5 mg/1 tốt đến tái sinh chồi từ callus lá, vói 13,90 chồi/mẫu Trần Thị Ngọc Lan Trần Thị Hồn Anh (2017) [14] thơng qua ni cấy mẫu tạo callus từ hồng môn cắt cành (Anthurium andraeanurrì) cho chồi biệt hóa cao mơi trường bổ sung 1,5 mg/1 BA, với 18,54 chồi/mẫu Như vậy, môi trường MS bổ sung 1,5 mg/1 BA tốt đến biệt hóa chồi in vitro từ callus hồng môn thiên nga Bảng Ảnh hưởpg nống độ BA đến biệt hóa chổi in vitro từ callus sau tháng nuôi BA (mg/1) Số chồi> 'mẫu callu s Chiều cao chồi (cm) Tỷ lệ mẫu callus tạo chồi (%) 0,0 4,20 l,54e 100 0,5 12,0 d l,97d 100 1,0 16,2( )c 2,50b 100 1,5 25,1( >a 2,98a 100 2,0 19,6( lb 2,14c 100 Hình thái chồi Chồi có màu xanh đậm, sinh trường chậm chồi khỏe Chồi có màu xanh mượt, sinh trưởng chậm chồi khỏe Chồi có màu xanh mượt, sinh trưởng nhanh chồi khỏe Chồi có màu xanh mượt, sinh trưởng nhanh chồi khỏe Chồi có màu xanh mượt, sinh trưởng nhanh có tượng mọng nước Ghi chú: * Nhưng chư khác (a, b, ) cột biểu diễn khác có ý nghĩa với p< 0,05 Duncan’s test 3.3 Khảo sát ảnh hường nồng độ IBA nghiệm thức có khác nhau, xử lý thơng kê số liệu khơng có khác biệt đến tạo rễ in vitro Khâ nâng tạo rê in vitro hồng môn thiên nga sau tháng nuôi cấy thể bảng Kết cho thấy, tất mẫu môi trường bổ sung không bổ sung chất điều hịa sinh trưởng tạo rễ, vói tỷ lệ 1( 0% (Hình lgi, lg2, lg3, lg4) Tuy nhiên, nghiệm thức vói nồng độ IBA khác có ảnh hưởng đến chiều dài rê cây, nồng độ IBA tíng dần mg/1, 0,1 mg/1, 0,5 mg/1 mg/1 chi ều dài rễ giảm xuống, tương ứng 2,47 cm, 2,42 cm, : 1,24 cm 1,98 cm Nguyên nhân tăng nồr Ig độ IBA ức chế tăng trưởng chiều dài re Theo số liệu chiều cao Đặc điểm hình thái cho thấy, tất nuôi cấy môi trường sinh trưởng tốt, gốc bị vàng héo, mọc mói có màu xanh đậm Hiện nước ta chưa có cơng bố nghiên cứu tạo rẽ in vitro hồng mơn thiên nga, giói có nhiều cơng bố [6], [5] Kết hồng môn thiên nga dễ dàng tái sinh rễ in vitro môi trường không bổ sung chất điều hòa sinh trưởng auxin Kết phù họp vói nhiều nghiên cứu cơng bố như: tỷ lệ tạo rễ in vitro đạt 100% môi trường khơng bổ sung chất chất điều hịa sinh trưởng hồng mơn cắt cành - Anthurium NƠNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NỊNG THƠN - KỲ - THÁNG 4/2022 27 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ andraeanum Tropical’ [14], hồng mơn mini [11], sâm bố [12] lan gấm [13], Như vậy, môi trường MS bổ sung mg/1 - mg/1 IBA thích họp đến tạo rễ in vitro hồng môn thiên nga 3ảng Ảnh hường nồng độ IBA đến tạo rễ in vitro sau tháng nuôi cấy IBA (mg/1) Chiều cao chồi (cm) 0,0 3,63a* 2,47a 100 0,1 3,61a 2,42a 100 0,5 3,53a 2,24b 100 1,0 3,50a l,98c 100 Chiều dài rễ Tỷ lệ mâu tạo (cm) rễ (%) Hình thái Cây sinh trưởng tốt, gốc bị vàng héo, mọc có màu xanh đậm Cây sinh trưởng tốt, gốc bị vàng héo, mọc có màu xanh đậm Cây sinh trưởng tốt, gốc bị vàng héo, mọc có màu xanh đậm Cây sinh trưởng tốt, gốc bị vàng héo, mọc có màu xanh đậm Ghi chú: *Những chữ khác (a, b, ) cột biểu diên khác có ý nghĩa vớiP< 0,05 Duncan’s test cứu chuyển cấy mô ngồi vườn ưom cơng đoạn quan trọng nuôi cấy mô thực vật Cây cấy mô thường nuôi cấy môi trường thạch chuyển điều kiện ex vitro rẻ phải thích nghi giá thể mói, hon nữa, độ ẩm điều kiện in vitro cao ổn định hon điều kiện ex vitro Do đó, cấy mơ thường bị héo chết chuyển từ điều kiện in vitro điều kiện ex vitro, thời gian đầu chuyển cấy mô điều kiện ex vitro cần phun sưong đảm bảo độ ẩm cho cần trồng giá thể thích họp Kết cho thấy, giá thể vụn xơ dừa tốt nhất, vói tỷ lệ sống đạt 94,44%, chiều cao đạt 7,14 cm, chiều dài rễ 3,92 Hình Nghiên cứu khả tái sinh in vitro sinh cm (Hỉnh 2b) Giá thể dón nhất, tỷ lệ sống đạt trường phát triển ex vitro hồng môn thiên nga 77,78%, chiều cao đạt 4,98 cm, chiều dài rẽ 3,16 (Anthurium scherzerianum Schott) cm Giá thể 50% vụn xơ dừa + 50% dớn hon giá Ghi chú: a Cây hồng môn thiên nga trưởng thể vụn xơ dừa tốt giá thể dón, với tỷ lệ thành hoa; b Lá non cày hóng mơn thiên nga sống 87,78%, chiều cao 6,12 cm, chiều dài rễ để đưa vào ống nghiệm; c Mẫu non làm vật liệu 3,80 cm Điều giá thể vụn xơ dừa tơi xốp, nghiên cứu tái sinh callus in vitro; dlr dp d3 Callus thơng thống, giữ ẩm thích họp cho thích hình thành mơi trường MS bổ sung 0,3 mg/1 - nghi sinh trưởng giai đoạn đầu chuyển 0,5 mg/1 BA kết hợp 0,1 mg/12,4-D; e Mẫu callus điều kiện ex vitro làm vật liệu nghiên cứu tái sinh chồi in vitro; í Chồi Về đặc điểm hình thái cây: Cây trồng giá tái sinh từ callus môi trường MS bổ sung 1,5 thể vụn xơ dừa sinh trưởng tốt, khỏe có màu mg/1 BA; glt g2, g-Ị, g4 Tạo rễ in vitro môi trường xanh đậm; giá thể dón cày sinh trưởng MS bổ sung Omg/1; 0,1 mg/1; 0,5 mg/1; mg/1 IBA phần gốc có màu vàng; cịn giá thể 50% vụn xơ 3.4 Khảo sát ảnh hưởng giá thể đến thích nghi sinh trưởng cấy mơ điều kiện ex vitro Khả thích nghi sinh trưởng hồng môn thiên nga cấy mô sau tháng chăm sóc điều kiện ex vitro thể bảng Nghiên 28 dừa + 50% dớn sinh trưởng bình thường có màu xanh đậm Hiện nước ta chưa có cơng bố nghiên cứu chuyển hồng môn thiên nga điều kiện ex vitro giói có công bố Hamidah cs (1997) [6] chuyển cấy mơ điều kiện nhà kính thành cơng Vụn xơ dừa giá thể NÔNG NGHIỆP VẰ PHÁT TRIEN nông thôn - KỲ - THÁNG 4/2022 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ sử dụng để nghiên cứu chuyển cấy mô điều kiện ex vitro cho tỷ lệ sống đạt 95% -100% như: hồng môn cắt cành - Anthurium andraeanum “Tropical’ [7], hồng niôn mini [11], sàm bố [12] lan gấm [13], Như vậy, giá thể vụn xơ dừa tốt để chuyển hồng mơn thiên nga cấy mơ ngồi vườn ươm Bảng Ảnh hường giá thể đến thích nghi sinh trưởng cấy mô điều kiện ex vitro sau tháng nuôi trổng Giá thể Chiều cao (cm) Chiều dài rễ (cm) Tỷ lệ sống (%) Vụn xơ dừa 7,14a 3,92a 94,44 Dớn 4,98c 3,16b 77,78 50% vụn xơ dừa + 50 dớn 6,12b 3,80a 87,78 _ Hình thái Cây sinh trưởng tốt, khỏe có màu xanh đậm Cây sinh trưởng kém, yếu phần gốc có màu vàng Cây sinh trưởng bình thường có màu xanh đậm Ghi chú: *Những chữ khác (a, b) cột biểu diễn sựkhácnhau cóýnghĩa với p< 0,05 Duncan’s test sau 12 tháng nuôi trồng Tuy nhiên, trồng giá thể khác nên sinh trưởng, phát triển khác Trên giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10% phân dê sinh trưởng tốt hon, chiều cao đạt 22,42 cm; giá thể 70% dớn + 20% trấu hun + 10% phân dê chiều cao đạt 18,59 cm Theo số liệu số hoa/cây hai nghiệm thức có khác nhau, xử lý thống kê số liệu khơng có khác biệt Hình Nghiên cứu khậ tái sinh in vitro sinh trưởng phát triển ex vitro hồng môn thiên nga (Anthurium scherzerianum Schott) Ghi chú: a Cây hồng môn thiên nga cấy mơ; b Khả thích nghi Vi sinh trưởng cấy mô giá thể vụn xơ dừa sau thảng nuôi trồng; c Sự sinh trưởng, phát triển giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10% phân dê sau tháng nuôi trồng; d Sự sinh trưởng, phát triển giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10%phàn dê sau 12 tháng nuôi trồng; e, f Sự sinh trưởng, phát triển giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10%phân dê sau 24 tháng 36 tháng nuôi trồng 3.5 Khảo sát ảnh hiưởng giá thể đến sinh trưởng, phát triển điều kiện ex vitro Khả sinh trượng, phát triển hoa hồng môn thiên nga sau 12 tháng nuôi trồng chăm sóc thể bảng Kết cho thấy, tỷ lệ sống hai nghiện) thức đạt 100% hoa Đặc điểm hình thái cho thấy, giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10% phân dê sinh trưởng phát triển tốt, khỏe, hoa/cây - hoa/cây; giá thể 70% dơn + 20% trấu hun + 10% phân dê sinh trưởng phát triển kém, yếu, hoa/cây Kết cho thấy, khí hậu Đà Lạt - Lâm Đồng phù họp cho trồng hồng thiên nga Cây thích nghi điều kiện ex vitro trồng vào chậu, sinh trưởng, phát triển tốt hoa sau tháng trồng (Hình 2c) đồng loạt hoa sau 12 tháng trồng (Hình 2d); hoa nhiều sau 24 tháng (chiều cao 37,13 cm, số hoa 3,2 hoa/cây) (Hình 2e) 36 tháng (chiều cao 47,79 cm, số hoa 4,4 hoa/cây) (Hình 2f) trồng Hiện nước ta chưa có cơng bố nghiên cứu nuôi trồng hoa hồng môn thiên nga, giới có cơng bố [1], [3], [8], Như vậy, hoa hồng môn thiên nga nuôi trồng giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10% phân dê sinh trưởng, phát triển tốt hon giá thể 70% dớn + 20% trấu hun + 10% phân dê NƠNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIÊN nơng thơn - KỲ - THÁNG 4/2022 29 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ Bảng Ảnh hưởng giá thể đến sinh trưởng, phát triển điều kiện ex vitro sau 12 tháng nuôi trồng Giá thể Chiều cao (cm) Số hoa/cây Tỷ lệ sống (%) Tỷ lệ hoa (%) 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10% phân dê 22,42a l,30a 100 100 70% dớn + 20% trấu hun +10% phân dê 18,59b l,20a 100 100 Hình thái Cây sinh trưởng, phát triển tốt, khỏe, hoa/cây - hoa/cây Cây sinh trường, phát triển kém, yếu, hoa/cây - hoa/cây Ghi chú: * Những chư khác (a, b, ) cột biểu diễn khác có ý nghĩa với p< 0,05 T-test KẼT LUẬN VÀ KẾV NGHỊ TÀI LIỆU THAM KHẠO Môi trường MS bổ sung 0,3 mg/1 - 0,5 mg/1 BA kết họp 0,1 mg/1 2,4-D phù họp đến hình thành callus in vitro từ mẫu (khối lượng tươi callus 0,19 g/mẫu - 0,20 g/mẫu, tỷ lệ mẫu tạo callus 80%) Cuquel F L., Polack s w., Favaretto N., Possamai J c (2012) Fertigation and growing media for production of Anthurium cut flower Horde Bras., 30: 279 - 285 Môi trường MS bổ sung 1,5 mg/1 BA phù họp đến biệt hóa chồi in vitro từ callus (chiều cao chồi 2,98 cm, số chồi 25,10 chồi/mẫu, số mẫu biệt hóa chồi 100%) Duncan D B (1955) Multiple range and F tests Biometrics, 11:1 - 42 Môi trường MS bổ sung mg/1 - mg/1 IBA thích họp đến tạo rễ in vitro (tỷ lệ mẫu tạo rễ 100%) Giá thể vụn xơ dừa phù họp để chuyển cấy mô điều kiện ex vitro (chiều cao 7,14 cm, chiều dài rễ 3,92 cm, tỷ lệ sống 94,44%) Giá thể 70% vụn xơ dừa + 20% trấu hun + 10% phân dê phù họp cho sinh trưởng tốt hoa điều kiện ex vitro (chiều cao 22,42 cm, số hoa 1,30 hoa/cây, tỷ lệ sống hoa 100%) Khí hậu Đà Lạt - Lâm Đồng phù họp nuôi trồng hồng môn thiên nga, hoa sau tháng trồng đồng loạt hoa sau 12 tháng trồng tiếp tục sinh trưởng hoa nhiều sau 24 tháng (chiều cao 37,13 cm, số hoa 3,2 hoa/cây) 36 tháng trồng (chiều cao 47,79 cm, số hoa 4,4 hoa/cây) Tiếp tục nghiên cứu hồn thiện quy trình nhân giống in vitro, quy trình trồng ex vitro trồng hồng mơn thiên nga quy mơ lớn LỊICÀMON Các tác giả xin chân thành cảm on Viện Nghiên cứu Khoa học Tây Nguyên, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam hỗ trợ nghiên cứu 30 Dufour L., Guerin V (2003) Growth, developmental features and flower production of Anthurium andreanum Lind, in tropical conditions Set Horde., 98: 25 - 35 Geier T (1987) Micropropagation of Anthurium scherzerianum: propagation schemes and plant conformity Acta Hortic., 212: 439 - 444 Geier T (1988) Ploidy variation in callus and regenerated plants of Anthurium scherzerianum Schott Acta Hortic., 226: 293 - 298 Hamidah M., Ghani A., Karim A., Debergh p (1997) Somatic embryogenesis and plant regeneration in Anthurium scherzerianum Plant Cell, Tissue and Organ Cult., 48:189 -193 Hoàng Thị Như Phương, Trần Tuấn Đạt, Trần Văn Minh (2014) Nhân giống in rVírơhoa hồng mơn (Anthurium andreanuirì) Tạp chí Nông nghiệp PTNT, 2: 74 - 80 Lalnunmawia F., Khawlhring N (2011) Cultivation ofAnthurium in Mizoram, India: present scenario and future prospect Sci Vis., 11 (4): 203 207 Murashige T., Skoog F (1962) Areivsed medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue Plant Physiol, 15: 473 - 497 NỊNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIÊN NƠNG THƠN - KỲ - THÁNG 4/2022 KHOA HỌC CÔNG NGHỆ 10 Phạm Thị Sướng, Nguyễn Bá Nam, Hoàng Thanh Tùng, Hà Thị]Mỹ Ngân, Nguyễn Thị Nhật Linh, Dương Tấn Nhựjt (2013) Hồn thiện quy trình vi nhân giống hồng mơn (Anthurium andreanum Tropical’) Hội nghị khoa học công nghệ sinh hole toàn quốc 2013,1033 -1037 11 Phan Xuân Huyên, Nguyễn Thị Thanh Hằng, Hoàng Văn Cưong, Đỉnh Văn Khiêm, Nguyễn Thị Phượng Hoàng (2015)1 Vi nhân giống hoa hồng mơn mini (Anthurium sp.) Kỷ yếu hội thảo cơng bó khoa học họp tác đôi tác khoa học công nghệ tỉnh Tây Nguyên, trang: 160 -165 12 Phan Xuân huyên, Huỳnh Thị Ngoan, Nguyễn Thị Phượng Hoàng (2017) Nghiên cứu nhàn giống in vitro sâm bố (Hibicus sagittifolius Kurz) thông qua nuôi cấy chồi ngủ đốt thân Tạp chi Khoa học Nông nghiệp Việt Nam, 15 (5): 664 - 672 13 Phan Xuân Huyên, Trần Thị Hoàn Anh, Nguyên Thị Phượng Hoàng, Nguyễn Thị Thanh Hằng, Đinh Văn Khiêm, Hoàng Văn Cương (2018) Nghiên cứu nhân giống in vitro ảnh hường phân bón đến sinh trưởng lan gấm (Anoectochilus formosanus Hayata) Lâm Đồng Tạp chi Dược liệu, 23 (1): 52 - 59 14 Trần Thị Ngọc Lan, Trần Thị Hoàn Anh (2017) Vi nhân giống hồng mơn (Anthurium anđraeanunì) qua ni cấy lóp mỏng tế bào Tạp chí Cơng nghệ Sinh học, 15 (2): 319 - 326 15 Wang L M., Wang X G., Li J Y., Li J., Zhang H M (2002) Tissue culture and rapid propagation of Anthurium scherzerianum and Philodendron enbesoens cv Red Emerald of modem ornamental aroid Acta Agric Bor Sin., 17 (1): 213 - 218 I STUDY ON ABILITY OF IN VITRO REGENERATION AND EX VITRO DEVELOPMENT GROWTH OF Anthurium scherzerianum Schott Phan Xuan Huyen1, Dinh Van Khiem1, Nguyen Thi Thanh Hang1, Nguyen Thi Phuong Hoang1 Tay Nguyen Institute for Scientific Research, Vietnam Academy ofScience and Technology Summary Anthurium scherzetianum Schott is an imported flower plant with high economic value Currently, in our country, there is no publication of in vitro propagation and cultivation of Anthurium scherzerianum This paper investigated ;ability of in vitro regeneration and ex vitro development growth of Anthurium scherzerianum The ■results showed that MS medium supplemented with 0.3 mg/1 - 0.5 mg/1 BA combined with 0.1 mg/1 2,4-E were suitable for callus formation from young leaves (fresh weight of callus 0.19 g/explant - 0.20 g/explant, the rate of callus formation 80%) MS medium supplemented with 1.5 mg/1 BA was suitable for the regeneration of shoots from callus (shoot height 2.98 cm, 25.10 shoots/explant, explant number of shoot regeneration 100%) MS medium supplemented with mg/1 -1 mg/1 IBA were suitable for in vitro formation (rate of root explant 100%) Coconut fiber powder was the best substrate for transfer of cultivated - tissue plants to the greenhouse (plant height 7.14 cm, root length 3.92 cm, survival rate 94.44%) The substrate of 70% coconut fiber powder + 20% charred rice husk + 10% goat dung was suitable for good development growth of plants and flowered in ex vitro conditions (plant height 22.42 cm, 1.30 flowers/pot, survival and flowerii 1g rate 100%) The climate of Da Lat - Lam Dong was suitable for cultivation of Anthurium scherzeri anum Schott, the plants grew well after months of cultivation and all flowered after 12 months of cultivation Plants grew well and flowered more after 24 of cultivation (plant height 37.13 cm, number of flowers 3.2 flowers/pot), after 36 months of cultivation (plant height 47.79 cm, number of flowers 4.4 flowers/pot) Keywords: Anthurium scherzerianum Schott, develpoment growth, MS medium, plant height, root length, substrate Người phản biện: PGS.TS Nguyễn Thị Kim Lý Ngày nhận bài: 02/8/2021 Ngày thông qua phan biện: 6/9/2021 Ngày duyệt đăng: 13/9/2021 NỊNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIÊN NƠNG THƠN - KỲ - THÁNG 4/2022 31 ... hoa /cây hai nghiệm thức có khác nhau, xử lý thống kê số liệu khơng có khác biệt Hình Nghiên cứu khậ tái sinh in vitro sinh trưởng phát triển ex vitro hồng môn thiên nga (Anthurium scherzerianum Schott) ... Nghiên cứu khả tái sinh in vitro sinh cm (Hỉnh 2b) Giá thể dón nhất, tỷ lệ sống đạt trường phát triển ex vitro hồng môn thiên nga 77,78%, chiều cao đạt 4,98 cm, chiều dài rẽ 3,16 (Anthurium scherzerianum. .. sau 24 tháng 36 tháng nuôi trồng 3.5 Khảo sát ảnh hiưởng giá thể đến sinh trưởng, phát triển điều kiện ex vitro Khả sinh trượng, phát triển hoa hồng môn thiên nga sau 12 tháng ni trồng chăm sóc