ĐẶT VẤN ĐỀ 1 SỞ Y TẾ TỈNH ĐIỆN BIÊN TRUNG TÂM KIỂM NGHIỆM THUỐC MỸ PHẨM THỰC PHẨM ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ TÊN ĐỀ TÀI KHẢO SÁT PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG VIÊN NÉN CIMETIDIN BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮ.
SỞ Y TẾ TỈNH ĐIỆN BIÊN TRUNG TÂM KIỂM NGHIỆM THUỐC - MỸ PHẨM - THỰC PHẨM ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ TÊN ĐỀ TÀI KHẢO SÁT PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG VIÊN NÉN CIMETIDIN BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Chủ nhiệm đề tài: NGUYỄN VĂN TOÁN Đồng chủ nhiệm: NGUYỄN TRỌNG HẠNH MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan cimetidin 1.2 Tổng quan sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 1.3 Các phương pháp định lượng cimetidin 14 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1 Đối tượng nghiên cứu 17 2.2 Hóa chất thiết bị 17 2.3 Nội dung phương pháp nghiên cứu 18 2.4 Thời gian địa điểm nghiên cứu 19 Chƣơng 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LU N 20 3.1 Xây dựng phương pháp định lượng viên nén bao film cimetidin sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 20 3.2 Thẩm định phương pháp định lượng 21 3.3 So sánh, đánh giá phương pháp định lượng cimetidin theo DĐVN V với phương pháp HPLC 35 3.4 Đề xuất quy trình định lượng viên nén bao film Cimetidin sắc ký lỏng hiệu cao: 38 3.5 Nhận xét chung 40 BÀN LU N 40 KẾT LU N 41 KHUYẾN NGHỊ .40 ĐẶT VẤN ĐỀ Hiện thị trường thuốc nước ta phát triển mạnh mẽ sôi động, nhiều dạng bào chế đời Trong nhóm thuốc điều trị bệnh dày tá tràng nhiều người quan tâm, bệnh thường gặp sống Chính lẽ thị trường có nhiều dạng bào chế Cimetidin như: Viên nén, viên nén bao film Vì phương pháp kiểm tra chất lượng cần thiết Theo DĐVN V, định lượng chế phẩm viên nén Cimetidin phương pháp đo quang phổ tử ngoại, khả kiến Phương pháp dễ thực hiện, tốn hiệu phương pháp chưa cao lần định lượng tiến hành mẫu, độ xác kết ph thuộc vào tay nghề kiểm nghiệm viên Trong đó, Dược điển Mỹ (USP 37) đưa phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao định lượng Cimetidin chế phẩm viên nén bao film Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) phương pháp ưu việt lĩnh vực kiểm nghiệm thuốc Nó cho phép định lượng với cỡ mẫu lớn phương pháp HPLC đòi hỏi điều kiện sắc ký phải đảm bảo phù hợp hệ thống sắc ký Trung tâm Kiểm nghiệm tỉnh Điện Biên có hệ thống máy sắc ký lỏng hiệu cao đại đáp ứng yêu cầu kiểm tra chất lượng thuốc giai đoạn Tuy nhiên việc khảo sát tìm điều kiện sắc ký phù hợp với yêu cầu phép thử định lượng tiêu chuẩn viên nén viên nén bao film Cimetidin - Dược điển Mỹ USP 37 phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao đảm bảo độ đúng, độ xác cần thiết Kết giúp Trung tâm Kiểm nghiệm tỉnh Điện Biên xây dựng thêm phương pháp định lượng viên nén bao film Cimetidin Xuất phát từ yêu cầu thực tế đó, dựa số tài liệu tham khảo Chúng tiến hành nghiên cứu đề tài “Khảo sát phương pháp định lượng viên nén bao film Cimetidin sắc ký lỏng hiệu cao” với m c tiêu sau: Khảo sát, đánh giá điều kiện sắc ký phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao để định lượng viên nén bao film Cimetidin Đề xuất quy trình định lượng viên nén bao film Cimetidin phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao 3.Trung tâm Kiểm nghiệm tỉnh Điện Biên áp d ng phương pháp định lượng viên nén bao film Cimetidin sắc ký lỏng hiệu cao Giúp tiến hành định lượng đồng thời với cỡ mẫu lớn, tiết kiệm hóa chất, chất chuẩn thời gian phân tích mẫu Chƣơng 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ CIMETIDIN 1.1.1 Cơng thức hóa học [6] * Cơng thức cấu tạo: Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo Cimetidin * Công thức phân tử Cimetidin: C10H16N6S * Khối lượng phân tử: *Tên Khoa học: 2-cyano-1-methyl-3-[2-[[(5-methylimidazol-4- yl)methyl]thio]ethyl]guanidin 1.1.2 Tính chất hóa lý Cimetidin + Bột kết tinh trắng gần trắng, dạng base tan nước, tan acid vơ lỗng pKa = 6,8 + Nhân thơm: Hấp th xạ tử ngoại (định tính phương pháp quét phổ UV, đo độ hấp th riêng, SKLM; định lượng phương pháp đo quang, HPLC) + Tính base: Tan acid vơ cơ, ứng d ng pha chế phẩm tiêm; định tính phản ứng với thuốc thử chung alcaloid (acid silicovolframic); định lượng phương pháp đo acid môi trường khan + Tác d ng với acid citric anhydrid acetic 1.1.3 Dƣợc lý chế tác dụng Cimetidin ức chế cạnh tranh với histamin th thể H2 tế bào bìa dày, ức chế tiết dịch acid (khi đói) ngày đêm dày tiết dịch acid kích thích thức ăn, histamin, pentagastrin, cafein insulin Lượng pepsin dày sản xuất giảm theo Sau uống, Cimetidin nhanh chóng hấp thu, hàm lượng máu đạt mức tối đa sau 45 - 90 phút Nửa đời Cimetidin khoảng Dùng uống tiêm (tĩnh mạch bắp) cho khoảng thời gian tương tự hàm lượng thuốc có hiệu điều trị máu Sau dùng liều 300 mg, - sau, nồng độ thuốc máu cao nồng độ cần thiết để ức chế 80% tiết dịch acid dày Cimetidin đào thải chủ yếu qua nước tiểu Sau tiêm phần lớn thuốc (khoảng 75%) đào thải dạng không biến đổi sau 24 Sau uống, thuốc đào thải chủ yếu dạng chuyển hóa sulfoxid; uống liều đơn, 48% thuốc đào thải nước tiểu sau 24 dạng không biến đổi 1.1.4 Chỉ định - Loét tá tràng tiến triển - Ðiều trị trì loét tá tràng với liều thấp sau ổ loét lành - Ðiều trị ngắn hạn loét dày tiến triển lành tính - Ðiều trị chứng trào ngược dày thực quản gây loét - Ðiều trị trạng thái bệnh lý tăng tiết dịch vị hội chứng Zollinger Ellison, bệnh đa u tuyến nội tiết - Ðiều trị chảy máu tiêu hóa loét dày tá tràng - Phịng chảy máu đường tiêu hóa người có bệnh nặng 1.1.5 Chống định thận trọng: - Mẫn cảm với Cimetidin Thận trọng: - Cimetidin tương tác với nhiều thuốc, dùng phối hợp với loại thuốc phải xem xét kỹ - Trước dùng Cimetidin điều trị loét dày phải loại trừ khả ung thư, dùng thuốc che lấp triệu chứng gây khó chẩn đốn Giảm liều người bệnh suy gan, thận Truyền nhanh tĩnh mạch, Cimetidin gây loạn nhịp tim giảm huyết áp 1.1.6 Tác dụng không mong muốn (ADR) * Thường gặp, ADR >1/100 - Tiêu hóa: Ỉa chảy - Thần kinh: Ðau đầu, chóng mặt, ngủ gà, lú lẫn hồi ph c được, trầm cảm, kích động, bồn chồn, ảo giác, phương hướng - Nội tiết: Chứng to vú đàn ông điều trị tháng lâu * Ít gặp, 1/100 > ADR > 1/1000 - Nội tiết: Chứng bất lực dùng liều cao kéo dài năm, hồi ph c - Da: Phát ban - Gan: Tăng enzym gan tạm thời, tự hết ngừng thuốc - Thận: Tăng creatinin huyết * Quá mẫn: Sốt, dị ứng kể sốc phản vệ, viêm mạch mẫn * Hiếm gặp, ADR < 1/1000 - Tim mạch: Mạch chậm, mạch nhanh, chẹn nhĩ - thất tim Truyền nhanh tĩnh mạch làm tăng histamin huyết thanh, gây loạn nhịp tim giảm huyết áp - Máu: Giảm bạch cầu đa nhân, bạch cầu hạt, giảm tiểu cầu, giảm bạch cầu trung tính, giảm tồn thể huyết cầu, thiếu máu không tái tạo Các thuốc kháng histamin H2 gây giảm tiết acid nên giảm hấp th vitamin B12 dễ gây thiếu máu - Gan: Viêm gan mãn tính, vàng da, rối loạn chức gan, viêm t y, khỏi ngừng thuốc - Thận: Viêm thận kẽ, bí tiểu tiện - Cơ: Viêm đa - Da: Ban đỏ nhẹ, hói đầu r ng tóc * Hướng dẫn cách xử trí ADR Hầu hết tác d ng không mong muốn qua sau ngừng thuốc ngày Thời kỳ mang thai Thuốc qua thai, chưa có chứng nguy hại đến thai nhi, thời kì mang thai, nên tránh dùng Cimetidin Thời kỳ cho bú Thuốc tiết qua sữa tích lũy đạt nồng độ cao nồng độ huyết tương người mẹ Tuy tác d ng ph đứa trẻ chưa ghi nhận không nên dùng Cimetidin thời kỳ cho bú 1.1.7 Liều lƣợng cách dùng: Cimetidin dùng uống tiêm Dù đường nào, tổng liều thường không 2,4 g/ngày Ðường uống: Liều ban ngày, uống thuốc vào bữa ăn và/hoặc trước lúc ngủ Người lớn: Loét dày, tá tràng: Dùng liều 800 mg/ngày vào buổi tối trước lúc ngủ tuần loét tá tràng tuần loét dày Liều trì 400 mg vào trước lúc ngủ Ðiều trị chứng trào ngược dày - thực quản:400 mg/lần, lần/ngày (vào bữa ăn trước lúc ngủ), dùng từ đến tuần Hội chứng Zollinger - Ellison:400 mg/lần, lần/ngày, tăng tới 2,4 g/ngày Stress gây loét đường tiêu hóa trên:Uống cho qua ống thông dày 200 - 400 mg, tiêm tĩnh mạch 200 mg/lần, cách đến lần Ðể đề phịng nguy hít phải dịch vị gây mê:Cho người bệnh uống 400 mg, 90 đến 120 phút trước gây mê, cần sau cho uống nhắc lại Ðể giảm bớt phân giải chế phẩm bổ sung enzym t y, người bệnh suy t y dùng Cimetidin 0,8 - 1,6 g/ngày chia làm lần, uống 60 đến 90 phút trước bữa ăn Ðường tiêm (được định chảy máu tiêu hóa loét dày tá tràng): Tiêm tĩnh mạch: 200 mg, tiêm chậm phút, - tiêm nhắc lại Nếu cần liều lớn người bệnh có rối loạn tim mạch truyền tĩnh mạch Nếu truyền cách quãng, dùng 400 mg từ 30 phút tới Nếu truyền liên t c tốc độ 50 - 100 mg/ Liều tiêm bắp 200 mg, - lần Người bệnh suy thận: Liều dùng tùy thuộc vào độ thải creatinin, độ thải - 15 ml/phút liều 200 mg/lần, lần/ngày; > 15 - 30 ml/phút, liều 200 mg/lần, lần/ngày; > 30 - 50 ml/phút, 200 mg/lần, lần/ngày; > 50 ml/phút, liều bình thường Trẻ em:Kinh nghiệm lâm sàng dùng Cimetidin điều trị cho trẻ em 16 tuổi cịn Cần phải cân nhắc nguy lợi ích trước định cho trẻ em Trong trường hợp cần thiết trẻ sơ sinh: 10 - 15 mg/kg/ngày với trẻ đủ tháng chức thận bình thường Liều cho trẻ em tuổi: 20 - 25 mg/kg/ngày chia làm nhiều lần Liều cho trẻ lớn: 30 mg/kg/ngày chia - lần Trẻ bị suy thận, liều phải giảm xuống tới 10 - 15 mg/kg thể trọng/ngày chia cách Những năm gần đây, để loại trừ vi khuẩn H pylori việc định điều trị thường phối hợp kháng histamin H2 (hoặc chất ức chế bơm proton) với số kháng sinh 1.1.8 Tƣơng tác thuốc Cimetidin tương tác với nhiều thuốc có số tương tác có ý nghĩa lâm sàng Cimetidin thường làm chậm đào thải tăng nồng độ thuốc máu Ða số tương tác liên kết Cimetidin với cytochrom P450 gan dẫn đến ức chế chuyển hóa oxy hóa microsom tăng nồng độ huyết tương thuốc chuyển hóa enzym Một số chế tương tác khác, thí d ảnh hưởng hấp thu, cạnh tranh với đào thải ống thận thay đổi lượng máu qua gan đóng vai trò thứ yếu Metformin: Cimetidin ức chế tiết metformin ống thận, làm tăng nồng độ thuốc huyết tương Warfarin: Cimetidin ức chế chuyển hóa warfarin, làm tăng tác d ng thuốc, gây tăng nguy chảy máu Nên tránh phối hợp Quinidin: Cimetidin ức chế thải quinidin khoảng 30% gây tăng hàm lượng chất huyết tương Cần theo dõi nguy thay đổi điện tâm đồ Procainamid: Cimetidin làm giảm đào thải procainamid chất chuyển hóa N - acetyl procainamid qua thận gây tăng nồng độ chất huyết tương Do làm tăng nguy loạn nhịp procainamid, gây tử vong Lidocain: Trong tiêm truyền lidocain, Cimetidin dùng gây ức chế chuyển hóa lidocain nồng độ lidocain huyết tương tăng tới mức gây độc Propranolol: Cimetidin làm tăng nồng độ propranolol huyết tương cách ức chế chuyển hóa qua gan lần đầu chất này, làm tăng khả d ng sinh học propranolol dẫn đến tăng nguy chậm nhịp tim Nifedipin: Tăng tác d ng hạ huyết áp Phenytoin: Cimetidin làm tăng nồng độ phenytoin cách ức chế chuyển hóa chất Nên tránh phối hợp Acid valproic: Cimetidin làm tăng nồng độ acid valproic huyết tương Nên tránh phối hợp Theophylin: Cimetidin làm giảm chuyển hóa theophylin Nên tránh phối hợp này, cần thiết phải điều chỉnh liều theo phylin ngừng Cimetidin Các muối, oxyd hydroxyl magnesi, nhôm, calci làm giảm hấp thu Cimetidin uống Vì nên dùng cách Q liều xử trí Cimetidin dùng từ 5,2 tới 20 g/ngày ngày liền không gây nguy hiểm, nồng độ huyết tương tới 57 mg/ml (nồng độ tối đa đạt huyết tương sau dùng 200 mg 1microgam/ml) Tuy nhiên 12 g sinh số tác d ng không mong muốn như: giãn đồng tử, loạn ngơn, mạch nhanh, kích động, phương hướng, suy hô hấp Xử lý: Rửa dày, gây nôn điều trị triệu chứng Không cần dùng thuốc lợi tiểu khơng có kết 1.1.9 Một số biệt dƣợc Cimetidin: Dạng thuốc hàm lượng Chế phẩm đơn thành phần: Viên nén, viên nén bao film 200 mg, 300 mg, 400 mg, 800 mg; viên sủi 200 mg, 300 mg, 400 mg, 800 mg; siro uống: ml tương đương 200 mg, 300 mg; thuốc tiêm: ống ml Cimetidin hydroclorid chứa tương đương 300 mg Cimetidin; dịch truyền 400 mg 100 ml natri clorid 0,9% 1.2 TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (HPLC) [1], [3], [4], [5] 1.2.1 Khái niệm Sắc ký lỏng trình tách xảy cột tách với pha tĩnh chất rắn pha động chất lỏng (sắc ký lỏng-rắn) Mẫu phân tích chuyển lên cột tách dạng dung dịch Cơ chế trình sắn ký lỏng hấp ph , phân bố, trao đổi, ion hay loại trừ theo kích cỡ Sắc ký lỏng hiệu cao (High Performance Liquid ChromatographyHPLC) phương pháp phổ biến sử d ng để định tính định lượng phân tích kiểm nghiệm Ra đời từ năm 1967-1968 sở phát triển cải tiến từ phương pháp sắc ký cột cổ điển Sắc ký lỏng hiệu cao phương pháp chia tách pha động chất lỏng pha tĩnh chứa cột chất rắn phân chia dạng tiểu phân chất lỏng phủ lên chất mang rắn, hay chất mang biến liên ... Cimetidin sắc ký lỏng hiệu cao? ?? với m c tiêu sau: Khảo sát, đánh giá điều kiện sắc ký phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao để định lượng viên nén bao film Cimetidin Đề xuất quy trình định lượng viên. .. dựng phương pháp định lượng viên nén bao film cimetidin sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 20 3.2 Thẩm định phương pháp định lượng 21 3.3 So sánh, đánh giá phương pháp định lượng cimetidin. .. MỸ PHẨM - THỰC PHẨM ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHOA HỌC CẤP CƠ SỞ TÊN ĐỀ TÀI KHẢO SÁT PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG VIÊN NÉN CIMETIDIN BẰNG PHƢƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Chủ nhiệm đề tài: NGUYỄN VĂN TOÁN