NGHIÊN cứu kỹ THUẬT tạo hạt NHÂN tạo từ PHÔI cây LAN VANDA

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MƠN CƠNG NGHỆ SINH HỌC  NỘI DUNG 1: NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT TẠO HẠT NHÂN TẠO TỪ PHÔI CÂY LAN VANDA NỘI DUNG 2: KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA MYCORRHIZA TRÊN MỘT SỐ GIỐNG LAN Ngành học: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Niên khố: 2003-2007 Sinh viên thực hiện: NGUYỄN HỒNG QN Thành phố Hồ Chí Minh -2007- LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH BỘ MÔN CÔNG NGHỆ SINH HỌC  NỘI DUNG 1: NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT TẠO HẠT NHÂN TẠO TỪ PHÔI CÂY LAN VANDA NỘI DUNG 2: KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA MYCORRHIZA TRÊN MỘT SỐ GIỐNG LAN Giáo viên hƣớng dẫn TS.TRẦN THỊ DUNG Sinh viên thực NGUYỄN HỒNG QN ThS.TỪ THỊ MỸ THUẬN Thành phố Hồ Chí Minh -2007- LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LỜI CẢM ƠN Thành kính khắc ghi cơng ơn cha mẹ tận tụy suốt đời để có ngày hơm Xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến TS Trần Thị Dung ThS Từ Thị Mỹ Thuận tận tình hướng dẫn giúp đỡ em suốt thời gian thực hoàn thành luận văn tốt nghiệp Chân thành cảm ơn: - Ban Giám Hiệu trường Đại Học Nông Lâm - Quý thầy cô trường Đại Học Nông Lâm - Quý thầy cô Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học Đã tận tình truyền đạt kiến thức cho tơi suốt q trình học tập thực luận văn Xin gởi lời cảm ơn đến: KS Nguyễn Thị Thu Hằng, KS Lê Hồng Thuỷ Tiên tập thể cán nhân viên Trung Tâm Công Nghệ Sinh Học Phịng Thực Tập Bệnh Cây trường Đại Học Nơng Lâm, tất bạn bè ngồi lớp Cơng Nghệ Sinh Học 29 động viên, giúp đỡ thời gian học tập thực đề tài TP Hồ Chí Minh, Ngày 25 tháng năm 2007 Sinh viên Nguyễn Hoàng Quân ii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TĨM TẮT NGUYỄN HỒNG QN, sinh viên mơn Cơng Nghệ Sinh Học khố 29, Đại Học Nơng Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2007 ĐỀ TÀI: NỘI DUNG 1: NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT TẠO HẠT NHÂN TẠO TỪ PHÔI CÂY LAN VANDA NỘI DUNG 2: KHẢO SÁT SỰ HIỆN DIỆN CỦA MYCORRHIZA TRÊN MỘT SỐ GIỐNG LAN Giảng viên hƣớng dẫn: TS TRẦN THỊ DUNG ThS TỪ THỊ MỸ THUẬN Đề tài đƣợc tiến hành Trung Tâm Công Nghệ Sinh Học- Trƣờng Đại Học Nơng Lâm Tp Hồ Chí Minh, thời gian thực từ tháng 3/2007 đến tháng 8/2007 Nội dung 1: Nghiên cứu kỹ thuật tạo hạt nhân tạo từ phơi lan Vanda Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng nồng độ sodium alginate đến hình thành hạt nhân tạo Thí nghiệm đƣợc bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên yếu tố, gồm nghiệm thức, lặp lại lần Kết thu đƣợc nồng độ 30 g/l cho vỏ hạt nhân tạo tròn, đều, đẹp tỷ lệ nẩy mầm cao Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng mơi trƣờng tạo hạt nhân tạo Thí nghiệm đƣợc bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên yếu tố, gồm nghiệm thức, lăp lại lần Kết thu đƣợc mơi trƣờng dinh dƣỡng ½ MS, hạt nhân tạo c phơi lan Vanda cho tỷ lệ sống sót nẩy mầm cao iii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 3: Khảo sát mơi trƣờng bảo quản hạt nhân tạo Thí nghiệm đƣợc bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên yếu tố, gồm nghiệm thức, lần lặp lại Môi trƣờng MS bảo quản hạt tốt nhất, cho hạt nhân tạo có tỷ lệ nẩy mầm cao sau bảo quản Thí nghiệm 4: Khảo sát nẩy mầm hạt nhân tạo giá thể khác Thí nghiệm đƣợc bố trí theo kiểu hồn tồn ngẫu nhiên yếu tố, gồm nghiệm thức, lần lặp lại Tỷ lệ hạt nhân tạo nẩy mầm bơng gịn cao (khoảng 100%) Nội dung 2: Khảo sát diện mycorrhiza số giống lan Kết khảo sát cho thấy mycorrhiza có dạng sau: -Sợi nấm ăn màu xanh, phân nhiều nhánh ăn xuyên qua nhiều lớp tế bào -Sợi nấm cuộn tròn tế bào -Sợi nấm cuộn tròn nằm tế bào, nối với sợi nấm Giữa giống lan trồng, tỷ lệ diện mycorrhiza có khác nguồn gốc giống iv LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com SUMMARY NGUYEN HOANG QUAN, student of Biotechnological faculty chronology 29, Nong Lam University of Ho Chi Minh City, -2007 TOPIC: CONTENT 1: RESEACHING TECHNOLOGY DOES ARTIFICIAL SEED FROM SOMATIC EMBRYONIC VANDA ORCHID CONTENT 2: EXAMINING PRESENCE OF MYCORRHIZA ON SOME ORCHID GENUS Supervisor: TRAN THI DUNG, ph.D TU THI MY THUAN, M.D Topic was doen at Biotechnological Centre- Nong Lam University of Ho Chi Minh City, doen from 3-2007 to 8-2007 CONTENT 1: RESEACHING TECHNOLOGY DOES ARTIFICIAL SEED FROM SOMATIC EMBRYONIC VANDA ORCHID Experiment 1: Examining sodium alginate strength influenced artificial seed formation Experimentation was set quite accident one factor, include assays, times repetition Resulting in 30 g/l strength gave full, nice artificial seed shell and ratio of germination highly Experiment 2: Examining influence of nutritional environment artificial seed Experimentation was set quite accident one factor, include assays, times repetition v LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Resulting in ½ MS nutritional environment gave ratio of life and germination highly, consist with artificial seed from embryonic Vanda Experiment 3: Examining maintainable environment arfiticial seed Experimentation was set quite accident one factor, include assays, times repetition MS environment maintained seed better, gave germinant ratio higher after maintenance Experiment 4: Examining germination of arfiticial seed on different substances Experimentation was set quite accident one factor, include assays, times repetition Ratio of germinant arfiticial seed on the silk- coton was highest CONTENT 2: EXAMINING PRESENCE OF MYCORRHIZA ON SOME ORCHID GENUS Resulting in mycorrhiza had forms: - The hyphae was dyed with blue, divided many branches across root cells - The hyphae scrolled in one cell - Hypha cirumvolutions entered into cells, allyed each other by the hyphae The present ratio of mycorrhiza had difference among orchid genus because of growing simulant origin vi LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com MỤC LỤC Trang Trang tựa i Lời cảm ơn .ii Tóm tắt .iii Summary v Mục lục .vii Danh sách bảng x Danh sách biểu đồ xi Danh sách hình xii GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu nghiên cứu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu TỔNG QUAN TÀI LIỆU .4 2.1 Khái quát lan 2.1.1 Phân loại thực vật học .4 2.1.2 Lịch sử lan .4 2.1.3 Tình hình sản xuất lan .5 2.1.4 Đặc điểm thực vật học lan 2.1.4.1 Cơ quan dinh dƣỡng .6 2.1.4.2 Cơ quan sinh dục lan- tổ chức hoa 2.1.5 Các điều kiện cho lan 2.1.6 Các phƣơng pháp nhân giống lan 2.1.6.1 Gieo hột 2.1.6.2 Tách chiết vii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 2.2 Phƣơng pháp nuôi cấy mô lan ………………………………………… 10 2.2.1 Khái quát lịch sử nuôi cấy mô 10 2.2.2 Các phƣơng pháp nuôi cấy 10 2.2.3 Chất dinh dƣỡng môi trƣờng nuôi cấy in vitro 12 2.2.4 Các bƣớc nhân giống in vitro 14 2.2.5 Các yếu tố ảnh hƣởng nhân giống in vitro 15 2.3 Công nghệ tạo hạt nhân tạo……………………………………… 16 2.3.1 Khái niệm 16 2.3.2 Mục đích 16 2.3.3 Các nhân tố tạo hạt nhân tạo 17 2.3.3.1 Tạo phơi vơ tính 17 2.3.3.2 Cơ chế phát sinh phôi soma 18 2.3.3.3 Tạo vỏ bọc sodium alginate 19 2.3.3.4 Quy trình tạo hạt nhân tạo 21 2.4 Nấm rễ cộng sinh- mycorrhiza………………………………………… 22 2.4.1 Khái niệm 22 2.4.2 Các dạng mycorrhiza .23 2.4.2.1 Ectomycorrhiza 23 2.4.2.2 Endomycorrhiza 23 2.4.3 Tác động có ích mycorrhiza 24 2.4.3.1 Mở rộng diện tích hấp thu rễ 24 2.4.3.2 Sự trao đổi dinh dƣỡng 24 2.4.3.3 Sự hình thành chất kích thích sinh trƣởng mycorrhiza 24 2.4.3.4 Nâng cao sức chống chịu 25 2.4.3.5 Tăng khả kháng bệnh trồng 25 2.4.4 Sự xâm nhập mycorrhiza 25 VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 3.1 Đối tƣợng thí nghiệm 26 3.2 Thời gian thực 26 3.3 Nội dung nghiên cứu 26 3.4 Vật liệu nghiên cứu 27 viii LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 3.4.1 Trang thiết bị dụng cụ nghiên cứu……………………………… 27 3.4.2 Mẫu sử dụng điều kiện nuôi cấy………………………………… 27 3.4.3 Môi trƣờng sử dụng……………………………………………… 27 3.5 Phƣơng pháp nghiên cứu 28 3.5.1 Chuẩn bị mơi trƣờng……………………………………………… 3.5.2 Bố trí thí nghiệm 3.6 Xử lý số liệu 28 ……………………………………………………29 ………………………………………………………… 32 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 4.1 Nội dung 1: Nghiên cứu kỹ thuật tạo hạt nhân tạo từ phôi lan 33 4.1.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng nồng độ sodium alginate đến hình thành hạt nhân tạo 36 4.1.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hƣởng mơi trƣờng tạo hạt nhân tạo… 39 4.1.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát mơi trƣờng bảo quản…………………… 41 4.1.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát khả nẩy mầm hạt…………… 43 4.2 Nội dung 2: Khảo sát diện mycorrhiza giống lan 45 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 49 5.1 Kết luận 49 5.2 Đề nghị .50 TÀI LIỆU THAM KHẢO .51 PHỤ LỤC 53 ix LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PHỤ LỤC Thí nghiệm 1:Tỷ lệ sống sót hạt nhân tạo sau tuần One-Way Analysis of Variance -Data: tn1.ss Level codes: tn1.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1672.8675 557.62249 3.230 0442 Within groups 3452.8019 20 172.64009 Total (corrected) 5125.6693 23 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.528615 P = 0.123637 Bartlett's test: B = 1.67499 P(9.52264) = 0.0230917 Hartley's test: 21.2296 Multiple range analysis for tn1.ss by tn1.t -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 60.656667 X 62.676667 X 75.410000 X X 80.430000 X contrast difference +/- limits 2-3 12.7333 15.8279 2-4 14.7533 15.8279 2-1 -5.02000 15.8279 3-4 2.02000 15.8279 3-1 -17.7533 15.8279 * 4-1 -19.7733 15.8279 * * denotes a statistically significant difference 53 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 1:Tỷ lệ sống sót hạt nhân tạo sau tuần One-Way Analysis of Variance -Data: Tn1.ss Level codes: tn1.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level Between groups 1649.8414 549.94713 2.312 1069 Within groups 4756.3131 20 237.81565 Total (corrected) 6406.1544 23 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.566161 P = 0.0720209 Bartlett's test: B = 1.7141 P(9.94876) = 0.0190068 Hartley's test: 20.1912 Multiple range analysis for tn1.ss by tn1.t -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -3 58.020000 X 58.983333 X 70.250000 X X 78.016667 X -contrast difference +/- limits 2-3 12.2300 18.5768 2-4 11.2667 18.5768 2-1 -7.76667 18.5768 3-4 -0.96333 18.5768 3-1 -19.9967 18.5768 * 4-1 -19.0333 18.5768 * -* denotes a statistically significant difference 54 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 1:Tỷ lệ sống sót hạt nhân tạo sau tuần One-Way Analysis of Variance Data: Tn1.ss Level codes: Tn1.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1490.3449 496.78165 3.882 0245 Within groups 2559.2726 20 127.96363 -Total (corrected) 4049.6176 23 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.644031 P = 0.0191185 Bartlett's test: B = 1.47409 P(7.16388) = 0.0668539 Hartley's test: 8.17543 Multiple range analysis for tn1.ss by tn1.t Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 55.280000 X 55.586667 X 70.725000 X 71.633333 X contrast difference +/- limits 2-3 15.4450 13.6268 * 2-4 15.1383 13.6268 * 2-1 -0.90833 13.6268 3-4 -0.30667 13.6268 3-1 -16.3533 13.6268 * 4-1 -16.0467 13.6268 * * denotes a statistically significant difference 55 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 1: Tỷ lệ nẩy mầm sau tuần One-Way Analysis of Variance -Data: Tn1.nm Level codes: Tn1.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level Between groups 2740917 0913639 22.559 0003 Within groups 0324000 0040500 Total (corrected) 3064917 11 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.598765 P = 0.258378 Bartlett's test: B = 1.52419 P(2.79038) = 0.425086 Hartley's test: 15.3158 Multiple range analysis for Tn1.nm by tn1.t Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 2633333 X 3 3066667 X 5566667 X 6100000 X contrast difference +/- limits 2-3 0.25000 0.11986 * 2-4 0.29333 0.11986 * 2-1 -0.05333 0.11986 3-4 0.04333 0.11986 3-1 -0.30333 0.11986 * 4-1 -0.34667 0.11986 * * denotes a statistically significant difference 56 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 1: Tỷ lệ nẩy mầm sau tuần One-Way Analysis of Variance -Data: TN12.nm Level codes: TN12.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 2380639 0793546 5.890 0201 Within groups 1077792 0134724 -Total (corrected) 3458431 11 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.423889 P = 0.764855 Bartlett's test: B = 1.30398 P(1.75728) = 0.624276 Hartley's test: 7.37675 Multiple range analysis for TN12.nm by TN12.t -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -3 3968254 X 4262372 X 6641026 X 7160062 X -contrast difference +/- limits 1-2 -0.05190 0.21860 1-3 0.26728 0.21860 * 1-4 0.23787 0.21860 * 2-3 0.31918 0.21860 * 2-4 0.28977 0.21860 * 3-4 -0.02941 0.21860 -* denotes a statistically significant difference 57 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 2:Tỷ lệ sống sót hạt nhân tạo sau tuần One-Way Analysis of Variance Data: TN2.ss Level codes: tn2.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level Between groups 144.6845 48.22816 100 9578 Within groups 3863.6698 482.95872 -Total (corrected) 4008.3543 11 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances Cochran's C test: 0.361364 P = Bartlett's test: B = 1.03615 P(0.235114) = 0.971731 Hartley's test: 2.07152 Multiple range analysis for TN2.ss by tn2.t -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 69.486667 X 75.213333 X 3 76.106667 X 79.070000 X -contrast difference +/- limits 2-3 -0.89333 41.3896 2-4 5.72667 41.3896 2-1 -3.85667 41.3896 3-4 6.62000 41.3896 3-1 -2.96333 41.3896 4-1 -9.58333 41.3896 -* denotes a statistically significant difference 58 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 2:Tỷ lệ sống sót hạt nhân tạo sau tuần One-Way Analysis of Variance -Data: tn2.ss Level codes: tn2.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 68.09663 22.698875 317 8131 Within groups 573.17567 71.646958 Total (corrected) 641.27229 11 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.503208 P = 0.490437 Bartlett's test: B = 1.95629 P(4.44283) = 0.217447 Hartley's test: 14.7063 Multiple range analysis for tn2.ss by tn2.t -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 57.703333 X 59.106667 X 59.696667 X 3 64.076667 X contrast difference +/- limits 2-3 -4.97000 15.9417 2-4 1.40333 15.9417 2–1 -0.59000 15.9417 3-4 6.37333 15.9417 3-1 4.38000 15.9417 4-1 -1.99333 15.9417 * denotes a statistically significant difference 59 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 2:Tỷ lệ sống sót hạt nhân tạo sau tuần One-Way Analysis of Variance Data: tn2.ss Level codes: tn2.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level Between groups 308.28820 102.76273 6.689 0143 Within groups 122.90087 15.36261 Total (corrected) 431.18907 11 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances Cochran's C test: 0.834815 P = 0.0180291 Bartlett's test: B = 3.97505 P(9.1368) = 0.0275263 Hartley's test: 108.678 Multiple range analysis for tn2.ss by tn2.t -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3 36.123333 X 37.266667 X 44.843333 X 48.193333 X -contrast difference +/- limits 2-3 12.0700 7.38191 * 2-4 10.9267 7.38191 * 2-1 3.35000 7.38191 3-4 -1.14333 7.38191 3-1 -8.72000 7.38191 * 4-1 -7.57667 7.38191 * * denotes a statistically significant difference 60 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 2: Tỷ lệ nẩy mầm sau tuần One-Way Analysis of Variance Data: tn2.nm Level codes: tn2.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 2080917 0693639 8.266 0078 Within groups 0671333 0083917 -Total (corrected) 2752250 11 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.480636 P = 0.560372 Bartlett's test: B = 1.3808 P(2.13625) = 0.544614 Hartley's test: 12.4103 Multiple range analysis for tn2.nm by tn2.t Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups 3900000 X 3 4000000 X 5233333 X 7166667 X -contrast difference +/- limits 2-3 0.31667 0.17253 * 2-4 0.32667 0.17253 * 2-1 0.19333 0.17253 * 3-4 0.01000 0.17253 3-1 -0.12333 0.17253 4-1 -0.13333 0.17253 * denotes a statistically significant difference 61 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 2: Tỷ lệ nẩy mầm sau tuần One-Way Analysis of Variance -Data: TN22.nm Level codes: TN22.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1024765 0341588 5.100 0291 Within groups 0535860 0066982 -Total (corrected) 1560625 11 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.335218 P = Bartlett's test: B = 1.08099 P(0.515576) = 0.915456 Hartley's test: 2.8392 Multiple range analysis for TN22.nm by TN22.t -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 4777778 X 3 5039683 X 5379915 X 7142191 X -contrast difference +/- limits 1-2 -0.17623 0.15414 * 1-3 0.03402 0.15414 1-4 0.06021 0.15414 2-3 0.21025 0.15414 * 2-4 0.23644 0.15414 * 3-4 0.02619 0.15414 -* denotes a statistically significant difference 62 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 3: Tỷ lệ nẩy mầm hạt nhân tạo sau bảo quản One-Way Analysis of Variance -Data: TN32.nm Level codes: TN32.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 7630944 1526189 22.154 0000 Within groups 0826667 12 0068889 -Total (corrected) 8457611 17 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances -Cochran's C test: 0.51371 P = 0.163166 Bartlett's test: B = 260862 P(125.298) = Hartley's test: 7.34998E31 Multiple range analysis for TN32.nm by TN32.t -Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -4 1000000 X 1533333 X 1866667 X 3 2000000 X 2466667 X 7166667 X -contrast difference +/- limits 2-3 -0.04667 0.14769 2-4 0.05333 0.14769 2-5 -0.09333 0.14769 2-6 -0.56333 0.14769 * 2-1 -0.03333 0.14769 3-4 0.10000 0.14769 3-5 -0.04667 0.14769 * denotes a statistically significant difference 63 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 4: Tỷ lệ nẩy mầm hạt nhân tạo trê n giá thể One-Way Analysis of Variance -Data: tn4.nm Level codes: tn4.t Labels: Means plot: LSD Confidence level: 95 Range test: LSD Analysis of variance -Source of variation Sum of Squares d.f Mean square F-ratio Sig level -Between groups 1847.6009 923.80043 6.408 0324 Within groups 865.0445 144.17409 Total (corrected) 2712.6454 missing value(s) have been excluded Tests for Homogeneity of Variances Cochran's C test: 0.895096 P = 0.0330148 Bartlett's test: B = 2.50508 P(4.50812) = 0.104972 Hartley's test: 21.5492 Multiple range analysis for tn4.nm by tn4.t Method: 95 Percent LSD Level Count Average Homogeneous Groups -1 53.653333 X 68.636667 XX 3 88.630000 X contrast difference limits 2-3 -19.9933 23.9965 2-1 14.9833 23.9965 3-1 34.9767 23.9965 * * denotes a statistically significant difference 64 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Bảng số liệu Thí nghiệm 1:Tỷ lệ hạt nhân tạo sống sót chưa biến đổi arcsin alginate 20 g/l 30g/l 40 g/l 50g/l tuần 90 82 75 89 tuần 100 100 75 76 tuần 88 77 86 60 tuần 89 73 73 89 tuần 100 100 62 68 tuần 80 63 80 60 tuần 85 73 64 80 tuần 99 100 57 65 tuần 80 60 80 58 Thí nghiệm 1:Tỷ lệ nẩy mầm nồng độ alginate sau tuần 20 g/l 30 g/l 40 g/l 50 g/l lần 0,69 0,56 0,27 0,20 lần 0,64 0,58 0,36 0,27 lần 0,50 0,53 0,29 0,32 Thí nghiệm 1:Tỷ lệ nẩy mầm nồng độ alginate sau tuần 20 g/l 30 g/l 40 g/l 50 g/l Lần 0,70 0,77 0,33 0,33 Lần 0,69 0,83 0,50 0,59 Lần 0,60 0,55 0,36 0,36 65 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 2: Tỷ lệ sống sót mơi trường dinh dưỡng chưa biến đổi arsin MS 1/2 MS 1/4 MS 1/8 MS tuần 0,83 1,00 1,00 0,65 tuần 1,00 0,83 0,80 0,67 tuần 0,90 0,75 0,82 1,00 tuần 0,91 0,70 0,79 0,90 tuần 0,65 0,69 0,78 0,60 tuần 0,64 0,73 0,86 0,60 tuần 0,45 0,60 0,33 0,38 tuần 0,40 0,57 0,37 0,36 tuần 0,64 0,50 0,34 0,36 Thí nghiệm 2: Tỷ lệ hạt nhân tạo nẩy mầm sau tuần MS 1/2 MS 1/4 MS 1/8 MS lần 0,45 0,8 0,33 0,4 lần 0,67 0,73 0,5 0,35 lần 0,45 0,62 0,37 0,42 Thí nghiệm 2: Tỷ lệ hạt nhân tạo nẩy mầm sau tuần MS 1/2 MS 1/4 MS 1/8 MS Lần 0,48 0,73 0,43 0,45 Lần 0,54 0,80 0,58 0,58 Lần 0,59 0,62 0,50 0,40 66 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Thí nghiệm 3: Tỷ lệ hạt nhân tạo nẩy mầm sau bảo quản Không dinh Nước Nước dưỡng cất đường Lần 0,24 0,18 0,3 0,1 0,11 0,7 Lần 0,22 0,08 0,2 0,1 0,4 0,73 Lần 0,1 0,2 0,1 0,1 0,23 0,72 Agar Agar đường MS Thí nghiệm 4: Tỷ lệ hạt nhân tạo nẩy mầm chưa biến đổi arcsin MS Cầu giấy Bông gòn 0,60 0,87 1,00 0,73 0,80 0,83 0,62 0,92 1,00 67 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... nghệ tạo hạt nhân tạo 2.3.1 Khái niệm Năm 1978, Murashige phát kỹ thuật hạt nhân tạo Năm 1987, Redenbaugh cộng phát triển thành công kỹ thuật tạo hạt nhân tạo Về bản, hạt nhân tạo giống hạt tự... dung nghiên cứu Nội dung 1: Nghiên cứu kỹ thuật tạo hạt nhân tạo từ phôi lan Vanda Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng nồng độ sodium alginate đến hình thành hạt nhân tạo Phôi soma đem bọc vỏ hạt. .. thực từ tháng 3/2007 đến tháng 8/2007 Nội dung 1: Nghiên cứu kỹ thuật tạo hạt nhân tạo từ phôi lan Vanda Thí nghiệm 1: Khảo sát ảnh hƣởng nồng độ sodium alginate đến hình thành hạt nhân tạo Thí