KHẢO sát điều KIỆN NUÔI cấy nấm MEN RHODOTOR ULA SP TRÊN môi TRƯỜNG bán rắn

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÌNH DƯƠNG KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN CNSH ĐỀ TÀI: KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY NẤM MEN RHODOTOR ULA SP TRÊN MÔI TRƯỜNG BÁN RẮN LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com GVHD: Th.S NGUYỄN MINH KHANG Th.S TRƯƠNG HUỲNH HUY SVTH: NGUYỄN THANH TRÚC BÌNH DƯƠNG – 2009 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÌNH DƯƠNG KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC NGUYỄN THANH TRÚC KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY NẤM MEN ROHODOTO RULA SP TRÊN MÔI TRƯỜNG BÁN RẮN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC: CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC PHẨM LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC Th.S Nguyễn Minh Khang Th.S Trương Huỳnh Huy Bình Dương – 2009 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Chương MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ Xã hội ngày phát triển kéo theo phát triển ngành khoa học kỹ thuật Công nghệ sinh học trở thành ngành quan tâm hàng đầu giới nói chung Việt Nam nói riêng Cơng nghệ sinh học phát triển nhanh chóng tạo cách mạng sinh học ngành nông nghiệp công nghiệp thực phẩm, làm thay đổi phương thức sản xuất ngành y dược, lượng khai khoáng bảo vệ môi trường Đối với Việt Nam, đất nước nông nghiệp việc ứng dụng xử lý tái chế nguồn phế phụ phẩm từ động vật thực vật ngành sản xuất nông nghiệp công nghệ thực phẩm, biến đổi nguồn nguyên liệu rẻ tiền để tạo sản phẩm có chất lượng cao, giảm nguy ô nhiễm môi trường mang lại hiệu kinh tế cho xã hội Vitamin A có vai trị quan trọng đời sống người vật nuôi Nguồn nguyên liệu thực vật vi sinh vật xem nguồn cung cấp dồi sắc tố carotenoid nói chung tiền vitamin A nói riêng Và giống nấm men có khả tổng hợp sắc tố carotenoid chủ yếu beta-caroten Rhodotorula sp Beta-caroten hợp chất có hoạt tính sinh học cao có vai trị quan trọng người động vật Các nhà khoa học chứng minh tỷ lệ beta-caroten thức ăn gắn liền với việc giảm nguy nhiều bệnh ung thư, trẻ hóa da, giảm tỷ lệ tử vong bệnh tim mạch,… Với lợi ích vậy, ứng dụng trình lên men bán rắn từ phụ phẩm dồi rẻ tiền ngành cơng nghiệp thực phẩm, nơng nghiệp,… Đây mục tiêu đề tài “Khảo sát điều kiện nuôi cấy nấm men Rhodotorula sp môi trường bán rắn” 1.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU - Lựa chọn mơi trường bán rắn thích hợp cho việc ni cấy nấm men đỏ Rhodotorula sp - Tối ưu hóa thành phần môi trường nuôi cấy - Thử nghiệm sản xuất kiểm tra hàm lượng beta-caroten chế phẩm từ nấm men đỏ Rhodotorula sp môi trường tối ưu 1.3 MỤC ĐÍCH ĐỀ TÀI LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Khảo sát điều kiện tối ưu cho phát triển nấm men đỏ Rhodotorula sp môi trường bán rắn thông qua việc tận dụng nguồn nguyên vật liệu phụ phẩm rẻ tiền từ ngành nông nghiệp, công nghiệp, công nghiệp thực phẩm,… để thu lượng sinh khối cao LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Canh trường giai đoạn sấy khô Chế phẩm beta-caroten dạng bột mịn LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Chế phẩm beta-caroten đóng gói dán nhãn LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com PHỤ LỤC CÁC BẢNG PHÂN TÍCH VÀ XỬ LÝ SỐ LIỆU 4.1 CÁC BẢNG PHÂN TÍCH 4.1.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát mơi trường ni cấy bán rắn thích hợp 4.1.1.1 Bảng phân tích ANOVA ANOVA Table for Mat te bao by Moi truong Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 7.80803 3.90402 Within groups 0.79345 0.264483 14.76 0.0280 Total (Corr.) 8.60148 4.1.1.2 Bảng Trắc nghiệm LSD Multiple Range Tests for Mat te bao by Moi truong Method: 95.0 percent LSD Moi truong Count Mean Homogeneous Groups 4.36 X 4.76 X 2 6.955 X Contrast Difference +/- Limits - *-2.595 1.63667 - -0.4 1.63667 - *2.195 1.63667 * denotes a statistically significant difference LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 4.1.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng pH thời gian ngâm gạo 4.1.2.1 Bảng phân tích ANOVA Analysis of Variance for Mat te bao - Type III Sums of Squares Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value MAIN EFFECTS A:pH 4.81125 1.60375 9.30 0.0006 B:Thoi gian 15.1233 7.56167 43.84 0.0000 3.105 18 0.1725 RESIDUAL TOTAL (CORRECTED) 23.0396 23 All F-ratios are based on the residual mean square error 4.1.2.2 Bảng Trắc nghiệm LSD Multiple Range Tests for Mat te bao by pH Method: 95.0 percent LSD pH Count LS Mean Homogeneous Groups 5.86667 X 6.33333 X 6.36667 X 7.11667 X Contrast Difference +/- Limits - *0.75 0.503784 - *0.783333 0.503784 - *1.25 0.503784 - 0.0333333 0.503784 - 0.5 0.503784 - 0.466667 0.503784 · denotes a statistically significant difference Multiple Range Tests for Mat te bao by Thoi gian Method: 95.0 percent LSD Thoi gian Count LS Mean Homogeneous Groups - LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 30 5.7625 X 5.9625 X 24 7.5375 X Contrast Difference +/- Limits 24 - 30 *1.775 0.43629 24 - *1.575 0.43629 30 - -0.2 0.43629 * denotes a statistically significant difference 4.1.3 Tối ưu hóa mơi trường ni cấy 4.1.3.1 Tối ưu tỉ lệ cơm bổ sung vào thành phần môi trường ni cấy bán rắn a Bảng phân tích ANOVA ANOVA Table for Mat te bao by Ti le com tam Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 4.336 1.084 Within groups 0.325 0.065 16.68 0.0043 Total (Corr.) 4.661 b Bảng trắc nghiệm LSD Multiple Range Tests for Mat te bao by Ti le com tam Method: 95.0 percent LSD Ti le com tam Count Mean Homogeneous Groups 100 7.5 X 95 8.1 XX 80 8.7 XX 85 9.0 X LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 90 9.35 X Contrast Difference +/- Limits 100 - 80 *-1.2 0.655374 100 - 85 *-1.5 0.655374 100 - 90 *-1.85 0.655374 100 - 95 -0.6 0.655374 80 - 85 -0.3 0.655374 80 - 90 -0.65 0.655374 80 - 95 0.6 0.655374 85 - 90 -0.35 0.655374 85 - 95 *0.9 0.655374 90 - 95 *1.25 0.655374 * denotes a statistically significant difference Multiple Range Tests for Mat te bao by Ti le com tam Method: 95.0 percent LSD Ti le com tam Count Mean Homogeneous Groups 100 13.56 X 95 14.065 XX 80 14.605 XX 85 14.885 X 90 15.16 X Contrast Difference +/- Limits 100 - 80 *-1.045 0.555092 100 - 85 *-1.325 0.555092 100 - 90 *-1.6 0.555092 100 - 95 -0.505 0.555092 80 - 85 -0.28 0.555092 80 - 90 -0.555 0.555092 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 80 - 95 0.54 0.555092 85 - 90 -0.275 0.555092 85 - 95 *0.82 0.555092 90 - 95 *1.095 0.555092 * denotes a statistically significant difference 4.1.3.2 Tối ưu tỉ lệ lõi bắp bổ sung vào thành phần mơi trường ni cấy bán rắn a Bảng phân tích ANOVA ANOVA Table for Mat ta bao by Ti le loi bap Analysis of Variance Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 38.885 12.9617 0.63 0.1575 Within groups 82.30 0.0005 Total (Corr.) 39.515 b Bảng trắc nghiệm LSD Multiple Range Tests for Mat ta bao by Ti le loi bap Method: 95.0 percent LSD Ti le loi bap Count Mean Homogeneous Groups 30 4.1 20 5.9 7.15 10 10.15 X X X X Contrast Difference +/- Limits - LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com - 10 *-3.0 1.10187 - 20 *1.25 1.10187 - 30 *3.05 1.10187 10 - 20 *4.25 1.10187 10 - 30 *6.05 1.10187 20 - 30 *1.8 1.10187 * denotes a statistically significant difference 4.2 CÁC BẢNG XỬ LÝ SỐ LIỆU 4.2.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát mơi trường ni cấy bán rắn thích hợp Kết khảo sát mơi trường lên men bán rắn Môi trường Mật độ tế bào Log (CFU/g) 3,0 108 3,82 4,1 108 4,90 7,2 108 6,86 7,6 108 7,05 4,3 108 5,07 3,6 108 4,45 Trung bình 4,36 6,96 4,76 Kết theo dõi phát triển nấm men theo ngày Thời điểm Môi trường (Ngày) (CFU/g) 2,46 108 3,13 3,23 108 4,07 1,65 108 1,74 2,92 108 3,72 3,49 108 4,34 1,99 108 2,39 4,06 108 4,87 7,62 108 7,06 3,56 108 4,41 3,39 108 4,24 6,37 108 6,43 2,85 108 3,64 Log Môi trường (CFU/g) Log Môi trường (CFU/g) Log LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 4.2.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng pH thời gian ngâm gạo Kết khảo sát ảnh hưởng pH thời gian ngâm gạo STT pH nước ngâm Thời gian ngâm Mật độ tế bào nấm men Log (Giờ) (CFU/g) 6,8 108 6,7 2 6,5 108 6,5 24 12,5 108 8,8 24 12,6 108 8,8 30 5,6 108 5,9 30 5,7 108 6,0 5,5 108 5,9 5,4 108 5,8 24 8,9 108 7,6 10 24 8,4 108 7,4 11 30 5,2 108 5,7 12 30 5,4 108 5,8 13 5,3 108 5,7 14 5,5 108 6,0 15 24 8,4 108 7,4 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 16 24 9,1 108 7,7 17 30 5,1 108 5,7 18 30 4,9 108 5,5 19 5,2 108 5,7 20 4,8 108 5,4 21 24 5,8 108 6,1 22 24 6,5 108 6,5 23 30 5,5 108 5,9 24 30 5,0 108 5,6 Kết ảnh hưởng pH ngâm gạo đến mật độ nấm men phát triển q trình ni cấy pH nước ngâm Mật độ tế bào nấm men (CFU/g) Log 8,3 108 7,4 6,5 108 6,5 6,3 108 6,4 5,5 108 5,9 Kết ảnh hưởng thời gian ngâm gạo đến mật độ tế bào nấm men phát triển q trình ni cấy Thời gian ngâm Mật độ tế bào nấm men (Giờ) (CFU/g) 5,8 108 6,1 24 9,0 108 7,6 30 5,3 108 5,8 Log LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 4.2.3 Tối ưu hóa mơi trường ni cấy 4.2.3.1 Tối ưu tỉ lệ cơm bổ sung vào thành phần môi trường nuôi cấy bán rắn Kết thí nghiệm tối ưu hóa thành phần cơm Tỉ lệ cơm Mật độ tế bào nấm men (%) (CFU/g) 80 11,6 108 8,5 80 12,9 108 8,9 85 13,4 108 9,0 85 13,5 108 9,0 90 15,4 108 9,5 90 14,0 108 9,2 95 11,2 108 8,4 95 9,5 108 7,8 100 8,8 108 7,6 10 100 8,5 108 7,4 STT Log Trung bình 8,7 9,0 9,35 8,1 7,5 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com 4.2.3.2 Tối ưu tỉ lệ lõi bắp bổ sung vào thành phần môi trường nuôi cấy bán rắn Kết thí nghiệm tối ưu hóa tỉ lệ lõi bắp Tỉ lệ lõi bắp Mật độ tế bào nấm men (%) (CFU/g) 8,4 108 7,4 7,2 108 6,9 10 19,1 108 10,2 10 18,5 108 10,1 20 5,9 108 6,2 20 5,0 108 5,6 30 3,7 108 4,5 30 2,9 108 3,7 STT Log Trung bình 7,15 10,15 5,9 4,1 LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com ... dụng trình lên men bán rắn từ phụ phẩm dồi rẻ tiền ngành công nghiệp thực phẩm, nông nghiệp,… Đây mục tiêu đề tài ? ?Khảo sát điều kiện nuôi cấy nấm men Rhodotorula sp môi trường bán rắn? ?? 1.2 NỘI... Rhodotorula sp môi trường tối ưu 1.3 MỤC ĐÍCH ĐỀ TÀI LUAN VAN CHAT LUONG download : add luanvanchat@agmail.com Khảo sát điều kiện tối ưu cho phát triển nấm men đỏ Rhodotorula sp môi trường bán rắn. .. add luanvanchat@agmail.com TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÌNH DƯƠNG KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC NGUYỄN THANH TRÚC KHẢO SÁT ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY NẤM MEN ROHODOTO RULA SP TRÊN MÔI TRƯỜNG BÁN RẮN LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI