tt-hc3b3a-sinh-c491e1baa1i-cc6b0c6a1ng-2013

THỰC HÀNH HĨA SINH ĐẠI CƯƠNG NỘI DUNG • I THỰC NGHIỆM VỀ PROTEIN – 1.1 Các phản ứng màu – 1.2 Khảo sát số lý tính protein • II THỰC NGHIỆM VỀ ENZYME – 2.1 Phản ứng Tromer – 2.2 Thủy phân tinh bột amylase – 2.3 Ảnh hưởng nhiệt độ đến hoạt tính enzyme – 2.4 Ảnh hưởng pH đến hoạt tính enzyme – 2.5 Tính đặc hiệu enzyme I THỰC NGHIỆM VỀ PROTEIN 1.1 Các phản ứng màu Phản ứng Biure • Ngun lý: – Trong mơi trường kiềm, chất chứa từ hai liên kết peptide trở lên tạo phức chất màu tím hồng với Cu++ (muối đồng) Phản ứng Biure Các bước tiến hành • Lấy 0.1g ure • Đun nhẹ lửa đèn cồn • Để nguội thu Biure • • • • • 1: Biure 2: ml lòng trắng trứng 3: ml sữa tươi 4: ml gelatin 1% Cho vào ống 1ml NaOH 10% • Cho vào ống 1-2 giọt CuSO41% • Lắc so sánh màu giải thích kết ????? • Ứng dụng: – Phát protein – Định lượng protein ????? ????? Phn ng Xanthoprotein ã Nguyờn lý: ã Các protein có chứa aa mạch vòng nh: Phe, Tyr, Trp, dới tỏc dng HNO3 đặc, b nit húa mu vng, gặp môi trờng kiềm mạnh muối có màu da cam Thủy phân tinh bột amylase • Nguyên lý: – Tinh bột polysaccharide gồm nhiều đơn vị α-Dglucose nối với nhờ liên kết α-1,4- liên kết α1,6-glycoside Tinh bột khơng có nhóm aldehyde tự phân tử, nên không cho phản ứng tromer âm tính – Khi tinh bột bị amylase nước bọt thủy phân, giải phóng đường đơn glucose tự cho phản ứng tromer dương tính Các bước tiến hành • Điều chế dung dịch amylase – Sóc miƯng b»ng níc cÊt – NgËm mét Ýt níc cÊt khoảng 1-3 phót, khÏ cư ®éng lìi ®Ĩ trén ®Ịu níc bät víi níc cÊt, råi cho qua phƠu có bơng giấy lọc, läc vµo èng  dd amylase Amylase TN: 3ml tinh bột 1%, 2ml amylase ĐC: 3ml tinh bột 1%, 2ml nước cất TN ĐC Nhỏ lên phiến sứ dãy lugol 1% Chú ý: + Không nhỏ đầy + dãy TN, dãy ĐC