Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 5 pps

... làm mẫu dò E E - EcoRI - chèn - - - quang - Cố định DNA trên màng lai - - Trung hòa - - EcoRI - Công nghệ DNA tái tổ hợp 104 1 5- 2 3 kb), cosmid ( 45 kb) hay BAC (>100 ... 79,8oC + 18 ,5 (log10M) + 0 ,58 (%G + C) - 11,8 (%G + C)2 - 0 ,56 (%f ) - 820/n (2) hóa+) (%f n (theo base). Công nghệ DNA tái tổ hợp 116 V. Sàng lọc thư viện genomic DNA DNA được ... tâm (mẫu dò). , thường . 32 5. 2). (smear) trên gel (Hình 5. 3). ( 2-1 0 . - Hind - Southern blot. Công nghệ DNA tái tổ hợp 1 05 (marker gene - chèn. (kb) . vector ....

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 1 ppsx

... chính + 5 pNOH 5 P 3’ OH 5 P Mg2+ enzyme 5 P 3’ OH 5 P 3’ OH 3’ OH enzyme 3’ P + 2Pi 3’ P 5 5 3’ OH 3’ OH 5 5 Công nghệ DNA tái tổ hợp 14 - . nuclease 5 3’ ... gen xác định. Bên cạnh các giáo trình như: sinh học phân tử, nhập môn công nghệ sinh học, công nghệ tế bào, công nghệ chuyển gen… giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp sẽ giúp sinh viên tiếp ... riêng biệt bao - : enzyme Ecohexanucleotide (6 nucleotide): Công nghệ DNA tái tổ hợp 8 XbaI /37oC EcoRI /37oC 10 mM. - 1 L ( - - . - hai một . - sẽ . - -2 0oC (hoặc -8 0oC(ice...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 6 pps

... (complementary DNA) tổng hợp cDNA do. . QcDNA qua ba enzyme reverse transcriptase. (2) Biến tính và c -cDNA Công nghệ DNA tái tổ hợp 153 hóa 0 ,5 . - Vector gt10. E. coli . - Vector ... (DNA E. coli. - c đoạn nối (synthetic linkers) c DNA cùng một enzyme. 1.1. Đuôi dA:dT deoxyrinucleotide triphosphate - Công nghệ DNA tái tổ hợp 141 - Không cần . - . . - E. ... mẫu dò. - mẫu dò . mẫu dòhoànin vitromẫu dò (stringency). - mẫu dò . mẫu dòhoàn mẫu dò mẫu Công nghệ DNA tái tổ hợp 151 - trình tự . vector : - thân mRNA (pre-mRNA) hoàn...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 2 potx

... nóng chảy nó. - - t - - - - . Công nghệ DNA tái tổ hợp 42 - -tube (eppendorf tube). - 1-2 th(0 ,5 M ammonium acetate, 10 mM magnesium acetate, 1 -tube. - 37o(< - - . ... đoạn DNA có kích thước lớn hơn 2 kb thì đ áp chứ(Hình 2 .5) . 0 ,5  - Công nghệ DNA tái tổ hợp 41 - . - - -7 0o. + . - . - . (sấy ở 80oC trong điều kiện chân không từ 1-2 giờ)dấu ... tích của DNA. tách DNA trong polyac Acrylamide (% w/v) ch (nucleotide) 3 ,5 1.00 0-2 .000 5, 0 8 0 -5 00 8,0 6 0-4 00 12,0 4 0-2 00 15, 0 2 5- 1 50 20,0 6-1 00 1. 20 cm - DNA (>1...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 3 doc

... PCR - + + + + 58 0,1 20-mer) trong 25 - . : gia DNA - . Thông thường, nồng độ DNA khuôn mẫu được sử dụng trong khoảng từ 1 0-1 00 ng/ 25 L dung dịch phản ứng. - 0 ,5 ... các primer đặc hiệu 60 - : 94oC/30 giây, 54 o72oC/1 phút. - 72oC/10 phút - 4oC - Chạy đi - -2 0oC Tm (non-specific). - (priming) sự . - Tm). Primer có chiều ... Genomic DNA Trình tự gen Primer A Primer B Primer D Primer C Taq Sản phẩm PCR hai giai đoạn dạng mạch thẳng T7 terminator T7 promoter RBS 55 - Start program - 95 oC /5 phút - : 95 oC/30...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 4 pot

... 2. Tạo dòng trong bacteriophage M13 - . - tru: - E. coli - galactosidase (Z - ) gen - - -thiogalactoside (IPTG) -gal. - - - - Công nghệ DNA tái tổ hợp 97 ... - (ori). - - khởi đầu . - (promoter) để tiến hànhlai. - . - chỉ thị thể tái tổ hợp. như là: - được . - tách goại lai. - : RBS (ribosome binding sites-vùng). Công nghệ DNA tái ... NotI Khuẩn lạc trắng-thể tái tổ hợp Khuẩn lạc xanh-thể không tái tổ hợp Công nghệ DNA tái tổ hợp 79 : 4.4. Plasmid vector pBluescript II SK (+ /-) . Vector này mang vùng...

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Chương 7 pptx

... thể được kiểm soát bằng những thay đổi trong hoạt tính của β-galactosidase. Công nghệ DNA tái tổ hợp 155 Chương 7 gen tái tổ hợp trong Escherichia coli VEscherichia coliE. coli hoặc ... trong phức hợp kháng nguyên- kháng thể bắt màu với cơ chất Đĩa ELISA (microtiter plate) có 96 giếng Công nghệ DNA tái tổ hợp 166 : - 16S rRNA. - eukaryote định vị. - . 1 (Hình ... gen lacZ). Protein dung hợp có những ưu điểm sau: Gen dung hợp Protein dung hợp C N Met SD SD Promoter ATG ATG mRNA Gen B Gen A DNA Công nghệ DNA tái tổ hợp 164 3. Promoter bacteriophage...

Giáo trình công nghệ DNA tái tổ hợp

... điện di thích hợp cho DNA sợi đôi thường được dùng là Tris-acetate-EDTA (TAE), Tris-borate-EDTA (TBE) và Tris-phosphate-EDTA (TPE) ở nồng độ khoảng 50 mM và pH 7, 5- 7 ,8 (Bảng 2.2). Thường ... sau: - Hoạt tính polymerase 5 →3’. Tổng hợp DNA theo chiều 5 →3’. Cơ chất của nó là RNA hay DNA (sợi đơn hoặc sợi đôi): - Hoạt tính RNase H. Bao gồm hai hoạt tính exoribonuclease 5 →3’ ... chính. 1) Tách chiết DNA từ những sinh vật khác nhau; 2) Cắt và nối DNA ở những điểm đặc hiệu để tạo ra DNA tái tổ hợp (DNA mang các gen có nguồn gốc khác nhau), ví dụ: DNA plasmid có mang gen...

171
1,848
15

Giáo trình CÔNG NGHỆ DNA TÁI TỔ HỢP - Phụ lục ppt

... viện cDNA (cDNA library). DNA khuôn mẫu (template DNA) .(sao chép) hoặc khuếch đại DNA (PCR) . DNA polymerase. mẫu . Công nghệ DNA tái tổ hợp 184 (palindrome). Đoạn DNA mạch kép có trình ... Southern blot ) Công nghệ DNA tái tổ hợp 180 ) phương pháp như … , gen công nghệ DNA ta thích hợp hơn, có thể bằng công nghệ sinh học trước đây vị trí cao hơn công nghệ sinh học. ... phân tử DNA. Linker. Một oligonucleotide tổng hợp có hai đầu bằng, Công nghệ DNA tái tổ hợp 200 Trình tự điều hòa (regulatory sequence). Một trình tự của DNA tham gia vào quá trình điều...

giáo trình công nghệ chế biến đóng hộp phần 5 pps

... 4 ,5) - Vi khuẩn chịu nhiệt (bào tử) - Vi khuẩn không chịu nhiệt (bào tử) 2,0 - 5, 0 (1) 0,1 - 1 ,5 (1) 8 - 12 8 - 10 Sản phẩm chua (pH 4,0 - 4 ,5) - Vi khuẩn chịu nhiệt (bào tử) - Vi ... 0,01 - 0,07 (1) 0,1 - 0 ,5 (2) 8 - 10 7 - 10 Sản phẩm rất chua (pH < 4,0) Vi sinh vật không chịu nhiệt (vi khuẩn không sinh bào tử, nấm men, nấm mốc) 0 ,5 - 1,0 (3) 5 - 7 (Carla,1992) ... stearothermophilus General 7, 6-1 0,3 1, 8-4 ,7 Bacillus subtilis 52 30 General 7, 4-1 3 0, 3-0 ,76 Bacillus coagulans solution 8, 2-9 ,0 0, 2-2 ,5 Bacillus cereus General 9,7 0,00 65 Bacillus megaterium General...

Xem thêm