- Cân chính xác khoảng 100mg amoxicilin, cho vào bình định mức 100ml,
thêm 80ml đệm phosphat pH 6,8, siêu âm 15 phút, bổ sung vừa đủ 100ml bằng đệm được dung dịch gốc 1000µg/ml.
- Từ dung dịch gốc, pha loãng bằng đệm để được các dung dịch chuẩn có
nồng độ 50, 100, 150, 200, 250, 300µg /ml.
- Đo độ hấp thụ (D) của các dung dịch trên tại λmax.
- Xây dựng phương trình hồi quy tuyến tính, vẽ đồ thị tương quan giữa độ
hấp thụ và nồng độ dược chất [11], [26].
2.4.2.3.Khảo sát độ đúng và độ chính xác của phương pháp định lượng amoxicilin bằng đo quang amoxicilin bằng đo quang
- Nguyên tắc
Độ đúng: khảo sát ảnh hưởng của các thành phần còn lại trong công thức
lên độ hấp thụ của amoxicilin trong dịch định lượng hay thử hòa tan. Nguyên tắc là thêm chính xác một lượng chất chuẩn đã biết nồng độ vào hỗn dịch chứa các tá dược trong viên sao cho nồng độ DC nằm trong khoảng tuyến tính, đem lọc, ta thu được mẫu thử. Tiến hành đo quang ở λmax, dựa vào độ hấp thụ của dung dịch chuẩn và dung dịch thử mà tính được lượng DC tìm thấy trong mẫu thử.
Độ chính xác (độ lặp lại): là mức độ thống nhất của các kết quả thử riêng
biệt theo quy trình thử nghiệm được áp dụng lặp lại trên cùng mẫu, được đánh giá bằng độ lệch chuẩn tương đối RSD của 6 phép thử song song.
- Tiến hành:
Mẫu chuẩn: dung dịch amoxicilin 150µg/ml trong đệm phosphat pH 6,8.
Hỗn dịch TD: cân các thành phần trong CT (với lượng tương ứng trong viên) ngoại trừ amoxicilin,phân tán vào 1000ml đệm phosphat pH 6,8.
Mẫu thử:
Mẫu 1: thêm vào bình định mức 100ml với 10ml dung dịch amoxicilin chuẩn 1mg/ml trong đệm phosphat pH 6,8 (tương đương 10mg amoxicilin chuẩn), thêm 20ml hỗn dịch tá dược, bổ sung đệm phosphat pH 6,8 vừa đủ (hỗn dịch tá dược được pha loãng theo đúng tỷ lệ khi định lượng và thử hòa tan). Lọc, ta thu được dung dịch amoxicilin trong dung dịch tá dược có nồng độ 100µg/ml.
Mẫu 2:làm tương tự mẫu 1 để thu được dung dịch amoxicilin 150µg/ml.
Mẫu 3: làm tương tự mẫu 1 để thu được dung dịch amoxicilin 200µg/ml. Mỗi mẫu được pha lại 6 lần và đem đo quang ở bước sóng 272nm.