1.2.6.1. Giới thiệu về phương pháp trắc quang phân tử UV-VIS
Phương pháp trắc quang phân tử UV-VIS là phương pháp dựa trên sự so sánh cường độ màu của dung dịch nghiên cứu với cường độ màu của dung dịch tiêu chuẩn có nồng độ xác định.
Cơ sở lý thuyết của phương pháp là định luật Lambert - Beer: I = Io.10-ε.l.C (1.5) Mật độ quang: D = lgII 0 = ε.l.C (1.6) Hay: D = K.C (1.7) Trong đó: I0: cường độ ánh sáng tới.
I: cường độ ánh sáng ló.
l: bề dày của cuvet đựng dung dịch, đo bằng cm. C: nồng độ dung dịch, đo bằng mol/l.
D: mật độ quang. K: hệ số tỷ lệ, K = ε.l.
ε: hệ số tắt phân tử hay hệ số hấp thụ phân tử, ε là đại lượng xác định, phụ thuộc vào bản chất của chất hấp thụ, vào bước sóng λ của bức xạ đơn sắc và vào nhiệt độ.
Sơ đồ khối tổng quát của một thiết bị đo quang được thể hiện trên hình 1.4 như sau:
Hình 1.4. Sơ đồ khối tổng quát của một thiết bị đo quang
1.2.6.2. Các phương pháp phân tích định lượng
Phương pháp đường chuẩn
Nguyên tắc của phuơng pháp:
- Chuẩn bị một dãy dung dịch chất chuẩn cần phân tích có nồng độ chính xác tăng dần: C1, C2, C3, C4, C5,…
- Thêm thuốc thử phân tích, tạo môi trường phù hợp.
- Xây dựng đồ thị D = f (C) theo dạng tuyến tính bậc một: y = a.x + b
Hình 1.5.Đường chuẩn của phương pháp đo quang
Chuẩn bị dung dịch phân tích trong điều kiện tương tự như dung dịch chuẩn, đưa vào máy đo mật độ quang Dx, dựa vào phương trình của đồ thị để xác định Cx. Phương pháp thêm chuẩn
Lấy một lượng dung dịch phân tích có nồng đô Cx vào bình định mức 1 và 2. Thêm vào bình 2 một lượng chính xác dung dịch chất chuẩn phân tích có nồng độ Cch. Thực hiện phản ứng tạo màu ở cả hai bình trong các điều kiện tối ưu đã chọn hoàn toàn như nhau. Đem đo mật độ quang của cả hai dung dịch ở bước sóng tối ưu và trong cùng một cuvet.
Đo mật độ quang Dx cho dung dịch phân tích có nồng độ Cx được giá trị: Dx = K.Cx
Đo mật độ quang D cho dung dịch có nồng độ Cx + Cch được giá trị: D = K.(Cx + Cch)
Dùng phương pháp này có thể loại trừ được hoàn toàn về thành phần cũng như cấu trúc vật lý của các chất tạo thành mẫu, ảnh hưởng của các ion lạ có trong dung dịch phân tích.