- Điểm nóng chảy được đo bằng phương phâp đo mao quản trín mây ghi điểm nóng chảy ST U A R T SMP3 (B IB B Y STERILIN-Anh), Bộ m ôn Hóa hữu cơ, Khoa H óa học, Đ H K H T N , Đ H Q G H N .
- Phổ H ồng ngoại (IR) được ghi trín mây phổ F T IR M A G N A 760 (N ICO LET-ƯS), tại Viện Hoâ học-Viện K hoa học Công nghệ Việt Nam, ĩp viín với bột KBr.
- Phổ 'H -N M R được ghi trín m ây Bruker-500M Hz, tại Viện H oâ học-Viện K hoa học Công nghệ Việt N am vă tại Đại học Tổng hợp Hữu nghị Câc dđn
tộc-LB Nga. Dung môi chụp phổ lă D M SO vă CDCI3 với chất chuẩn nội lă TMS.
- Phổ M S được ghi trín mây AutoSpec Premier của hêng W A TER M IC R O M A S S vă LTQ Orbitrap XL của hêng T H E R M O scientific tại phòng thí nghiệm Hoâ vật liệu-Khoa Hoâ học-Trường Đ H K IIT N -Đ H Q G H N .
- X âc định cấu trúc bằng phư ơng phâp RSA tại Viện hoâ học cơ kim, Viện Hăn lảm Khoa học Ltí Nga.
- Hoạt tính sinh học của câc chất được tiến hănh thử nghiệm vă đọc kết quả tại phòng Sinh học thực nghiệm -V iện Họp chất thiín nhiín-Viện K hoa học vă C ông nghệ Việt N am .
3. Thực nghiệm tổng họp câc dẫn xuất
3.1. Tổng họp l,5-Bis-(2-formyphenoxy)-3-oxapentan (I)
Cho 40g KI vă 40g K2C O3 văo bình nón thể tích 250ml có lắp sinh hăn hồi
lưu vă nhiệt kế, sau đó thím 150 ml D M F vă khuấy đều. Thím từ từ 27,3g họp chất 2-hvdroxylbenzandehyde, dung dịch chuyển sang mău văng chanh, tă n s nhiệt độ lín 8 0°c. Sau khi cho từ từ 16g dichlorodiethyl ether văo dung dịch, thì tiếp tục tăng nhiệt lín 110°c vă duy trì phản ứng trong 5h. Sau khi kiểm tra bằn e sắc ký bản m ỏng thấy phản ứng đê xảy ra hoăn toăn, đế nguội hỗn hợp phản ứng đến nhiệt độ phòng rồi đô văo 1000 ml nước lạnh. Lọc hút kết tủa tạo thănh trín phễu lọc Busner, rửa kết tủa nhiều lần bằng nước. Sản phẩm (I) được kết tinh lại trone ethylacetate, thu được tinh thể hình kim, m ău trắng, có t°nc = 66-67 (°C), R/•- 0.85 (ethylaxetate:hexane = 2:1). H iệu suất phản ứng H = 83% ( 2 9 ,16a).
C H Ư Ơ N G 5: T H Ụ C N G H I Ệ M
3.2. T ố n g h ọ p a z a c r o w n e th e r chứa dị v ò n g p e r h y d r o tr ia z in e
3.2. Ị . Tổng hợp 8 .1 1 ,1 4-trioxa-22,24,25-triazatẻracyclo-[. 19.3. l.o2' 7 Oh '20] - p e n ta c o sa -2 ,4 ,6 ,15(20),16,18-hexaene-23-thione (Ha)
Cho lần lượt 3,14g (0,01 mol) chất (I); 0,76g (0,01 mol) thioure vă 3,08g
(0.04 moi) am m oniacetate vảo 20ml EtO II có lm l C H3C O O H (băng) tăm xúc tâc,
khuấy từ ở nhiệt độ phòng trong 3h. Phản ứng kết thúc (kiểm tra băng sắc ký bản m ỏng) thu được kết tủa mău trắng ngă, lọc hút trín phễu Busner, rửa kết tủa bằng
BtOH, kết tinh lại trong C H C I3 thu được tinh thể m ău trắng. Hiệu suất phân ứng
đạt 85% (3,15g), t°nc= 188-190 (°C).
3.2.2. Tông hợp 22-m ethyl-8,11,14-trioxa-22,24,25-trỉazatetracyclo- [19.3. ỉ. o2'7. Ol5 20]-p e n ta co sa -2 ,4,6,15(20), 16,18-hexaene-23-thione (Ilb)
Cho lần lượt 3,14g (0,01 moi) chất (I); 0,90g (0,01 mol) N-m ethylthioure vă
3,08g (0,04 mol) am m oniacetate văo 20ml EtO H có lm l C H3C O O H (băng) lăm
xúc tâc, khuấy từ ở nhiệt độ phòng trong 3h. Phản ứ n s kết thúc (kiểm tra bằng sắc ký bản m ỏng) thu được kết tủa mău trắng, lọc hút trín phễu Busner, rửa kết tủa
bằng EtO H , kết tinh lại trong CH CI3 thu được tinh thể m ău trắng. H iệu suất phản
ứng đạt 86% (3,3 lg), t°nc= 184-186 (°C).
3.2.3. Tổng hợp 22-allyl-8,1 ỉ, 14-írioxa-22,24,25-triazateỉracyclo-[.19.3. l.o2’1. 0Lị2flJ - p e n ta co sa -2 ,4 ,6 .1 5(20), 1 6 ,18-hexaene-23-thione (IIc)
Cho lần lượt 3,14g (0,01 mol) chất (I); l,1 6 g (0,01 mol) N-allylthioure vă
3 ,0 8 s (0,04 moi) am m oniacetate văo 20ml EtOH có lm l C H3C O O H (băng) lăm
xúc tâc, khuấy từ ở nhiệt độ phòng trona; 3h. Phản ứng kết thúc (kiểm tra bằng sắc ký bản m ỏng) thu được kết tủa mău trắng, lọc hút trín phễu Busner, rửa kết tủa
bằng EtO H , kết tinh lại trong C H C I3 thu được tinh thế m ău trắng. Hiệu suất phản
ứng đạt 78% ( 3 ,2 lg), t°nc= 164-167 (°C). (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
3.2.4. Tổng hợp 25-m ethyl-8,l 1,14-trioxa-22,24,25-triazatetracyclo-[19.3.1 .o2'7.0152n] -
p e n ta c o sa -2 ,4 ,6 ,15 (20), 16,18- hexaene-23-thỉone (Ild)
Cho lần lượt m ethylam ine am m onium acetate (4.0 g, 44 mmol), l,5-bis(2- form ylphenoxy)-3-oxapentane (1.57 g, 5.0 ininol) vă thiourea (0.38 g, 5.0 mmol) văo hỗn hợp đuna; m ôi ethanol (30 ml) vă acetic acid (1 ml). Hỗn họp được khuấy đồu tại nhiệt độ phòng trong vòng 3 ngăy. Kết thúc phản ứng (kiểm tra bằne sắc ký lóp mỏng), lọc tinh thể tạo thănh ở nhiệt độ thấp (5°C), rửa bằng dung môi ethanol vă k ế t tinh lại trong hỗn hợp ethanol vă ethylacetate (4:1) thu được 1.19 a tinh thể m ầu trắng (Ild). H iệu suất 61.8%, t°nc= 144-146 (°C).
3.2.5. Tỏng hợp 23-imino-8, Ị 1,14-trioxa-22,24,25-triazateừacyclo-[19.3. l .( f '7.Olx20] - peníacosci-2,4,6,15(20), 1 6 ,18-hexaene (M a)
Cho lần lượt 3,14g (0,01 mol) chất (I); 0,59g (0,01 mol) guanidine vă 3,08g
(0,04 moi) am m oniacetate văo 15ml EtO H có 1 ml C H3CO O H (băng) lăm xúc tâc,
khuấy từ ở nhiệt độ phòng Irons lOh. Phản ứng kết thúc (kiểm tra bằng sắc ký bản m ỏng) thu được kết tủa m ău trắng, lọc hút trín phễu Busner, rửa kết tủa bằng
BtOH. kết tinh lại trong CH CI3 thu được tinh thể m ău trắng. Hiệu suất phản ứng
đạt 55% (l,9 5 g ), t°nc= 220-221 (°C).
3.2.6. Tông hợ p 23 -im in o -2 2 -cya n o -8 ,ỉ ỉ, 14-trioxa-22,24,25-1riazatetracyclo- [1 9 .3 .1 .o2'7.o 15'20] -pentacosa-2,4,6,15(20), 16,18-hexaene (Illb)
Cho lần lượt 3,14g (0,01 mol) chất (I); 0,84g (0,01 mol) guanidinecyano vă
3,08g (0,04 mol) am m oniacetate văo 15ml EtO H có lm l C H3C O O H (băng) lăm
xúc tâc, khuấy từ ở nhiệt độ phòng trong lOh. Phản ứng kết thúc (kiểm tra bằng sắc ký bản m ỏng) thu được kết tủa m ău trắng, lọc hút trín phễu Busner, rửa kết tủa
bằng EtOH, kết tinh lại trong CH CI3 thu được tinh thể m ău trắng. Hiệu suất phản
ứ n g đạt 52% (1 ,97g), t°nc =218-220 (°C).
3.3 . Tông họp azacrown ether có chứa dị vòng perhydrodiazine
3.3. ì. Tông hợp 23-oxo~22-amido-8,l l,14-trioxa-24,25-diazatetracyclo- [1 9 .3 .I .o 2 7.0 !5'2n]-p en ta c o sa -2 ,4 ,6 ,15(20), 1 6 ,18-hexaene (IVa)
Cho lần lượt 3,14g (0,01 mol) chất (I); l,0 2 g (0,01 mol) m aloam it vă 3,08g
(0,04 mol) am m oniacetate văo 15ml E tO H có lm l C H3C O O H (băng) lăm xúc tâc,
khuấy từ ở nhiệt độ phòng trong lOh. Phản ứng kết thúc (kiểm tra bằng sắc ký bản m ỏng) thu được kết tủa m ău trắng, lọc hút trín phễu Busne, rửa kết tủa bằng EtOH,
kết tinh lại trong C IIC I3 thu được tinh thể m ău trắng. Hiệu suất phản ứng đạt 50%
(l,9 8 g ), t°nc= 184-186 (°C), R/-= 0,75 (ethylaxetate:acetone = 1:2). 3.4. T ố n g h ọ p a z a c r o w n eth er có c h ứ a dị v ò n g p ip er id o n e
3.4. ỉ. Tổng hợp 2 2 -a cetyl-8 ,11,14-trioxa-25-azatetracyclo-[19.3. ỉ.o 2'1. o 15'20] - perita co sa -2 ,4 ,6 ,15(20), 1 6 ,18-hexaen-23-one (Va)
H ò a tan từ từ 3,14g (0,01mol) chất (I); l,3m l (0,01 mol) ethylacetoaceate vă 3 ,0 8g (0,04 mol) am m oniacetate trong 20ml E tO H với lm l C H3C O O H (băng) lăm xúc tâc. H ỗn hợp được khuấy đều ở nhiệt độ phòng trong lOh. Phản ứng kết thúc (kiếm tra bằng sắc ký bản mỏng) thu được kết tủa m ău văng nhạt, lọc hút trín phễu
Busner, nra kết tủa băng EtOH, kết tinh lại trong CHCI3 thu được tinh thế mău trắng. Hiệu suất phản ứnơ dạt 47% (2,00g), t°nc = 200-201 (°C).
3.4.2. Tông hợp 2 2 -m eth yl-8 ,11, ỉ4 -trio xa -2 5 -a za tetra cyclo -[ 19.3.1. o2'1. o 15'20] - p e n ta c o sa -2 ,4 ,6 ,15(20), 16,18-hexaen-23-one (Vb)
Hỗn hợp phản ứng gồm 3,14g (0,01 mol) chất (1); lml (0,01 mol) butanone-
2 v ă 3 ,0 8 2 (0,04 mol) am m oniacetate trong 20ml EtO H với lm l C H3C O O H (bănạ)
lăm xúc tâc đượckhuấy đều ở nhiệt độ phòng trong lOh. Khi phản ứng kết thúc (k iể m tra bằng sắc ký bản mỏng), lọc kết tủa thu được trín phễu Busne, rửa kết tủa
b ằ n g EtOH, kết tinh lại trong CHCI3 thu được tinh thể m ău văng nhạt. Hiệu suất (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
p h ả n ứng đạt 56% (2,05g), t°nc= 232-233 (°C).
3.4.3. Tổng hợp 2 2-p h en yl-8 ,1 1,14-trioxa-25 -a zatetra cyclo -[ 19.3.1.02'7.o 1520] - p e n ta c o sa -2 ,4 ,6 ,15(20), 16,18-hexaen-23-one (Vc)
Hỗn hợp 3,14g (0,01 mol) chất (I); l,3 4 g (0,01 mol) m ethylbenzylketone vă
3 , 0 8íĩ (0,04 mol) am m oniacetate trons; 20ml EtO H với xúc tâc lm l C H3CO O H
(băng) được khuấy đều ở nhiệt độ phòng trong 151ì. Lọc kết tủa tạo thănh (mău v ă n a đậm) trín phễu Busner, rồi rửa bằng EtO H vă kết tinh lại trong C H C l3thu đ ư ạ c tinh thể m ău văng. Hiệu suất phản ứng đạt 50% (2,14g), t°nc= 210-212 (°C).
3.4.4. Tổng hợp 2 2 -a m id o -8 ,l l,14-trioxa-25-azatetracyclo-[19.3 .1.0 2'7,0 I5’2n] - p en ta co sa -2 ,4 ,6 ,15(20), 16,18-hexaen-23-one (Vd)
Cho lần lượt 3,14g (0,01 mol) chất (ĩ); 1,0 lg (0,01 mol) acetoacetamide vă
3 , 0 8g (0,04 mol) am m oniacetate văo 20ml EtO H có xúc tâc lm l C H3C O O H (băng)
lăm xúc tâc, hỗn hợp được khuấy đều ở nhiệt độ phòng trong 12h. Sau khi phản ứ n g kết thúc dung dịch phản ứng có m ău đỏ cam. Cô quay dưới âp suất eiảm để loạri hếl dung môi phản ứng, sau đó trung hoă bằng lOmỉ dung dịch N a 2C 0 3 IM rồi
ch iết b a n s C H C I3 (3 lần mỗi lần 30ml). Sau khi lăm khô bằng N a 2SƠ4 khan, loại
d u n g môi trong dịch chiết thu được chất rắn thô m ău đỏ cam. Ket tinh lại tro n s
C H C I3 thu được tinh thể m ău trắng. H iệu suất phản ứng đạt 40% (l,5 8 ẹ ), t°nc =
213.-215(°C).
3.4. 5. Tổng hợp 22,24 -dỉm eth yl-8,11,14-trioxa-25-azatetracyclo-[19.3. l.0 2'7.0 15'20] -pem tacosa-2,4,6,1 5 (20),16,18-hexaen-23-one (Ve)
Tương tự như câc phương phâp tống hợp trín, khi sử d ụ n s tâc nhđn diketone lă diethylketonethu được sản phẩm (Ve) với hiệu suất 3 8 % , t°nc= 2 3 8 -2 4 0 (°C).
3.4.6. Tông hợp 24-acetyl-8, ì 1,14-trioxci-24,2 7-diazapentacyclo-[. 19.5.1.122'26, o2'7. Oìx20] - o ctacosơ -2,4 ,6 ,15(20), 16,18-hexaen-28-one (Vf)
Hồn hợp gồm am m onium acetate (3.0 g, 39.0 mmol), l,5-bis(2-
fonnylphenoxy)-3-oxapentane (3.14 g, 10.0 m m ol) vă N -acetylpiperidone (1.41 g, 10.0 m m ol) trong hỗn hợp dung môi ethanol-acetic acid với tỷ lệ (ml) = 30:1, được khuấy đều ở nhiệt độ p hò n g trong 3 ngăy. Khi kết thúc phản ứng (kiểm tra bằng sắc ký lớp mỏng), lăm lạnh tại 5 °c, lọc kết tủa thu được trín phễu Busner, rửa vă kết tinh lại bằng dunơ m ôi ethanol, thu 2.54s, tinh thể m ầu trắng. Hiệu suất 58%, t°nc:= 227-229 (°C).
3.5. Chuyến hóa của azacrown ether
3 .5 .1. P hư ơ ng p h â p ch u n g tông hợp câc dđn xu ấ t oxim e của azacrow n ether
Trong bình tam giâc với thể tích lă 100ml, dung dịch gồm lOmmol azacrow n ether (V|, hoặc v e) v ă 15mmol hydroxylam ine chloride trong 50ml ethanol được đun sôi hồi lưu trong 3 tiếng. H ỗn hợp được lăm lạnh tới nhiệt độ phòng, trung hoă bằng kiềiĩi nhẹ tới pH=8 vă để qua đím, kết tủa được lọc, rửa vă lăm khô. Thu tinh thể b ăn g câch kết tinh trong ethanol.
• 3.5.2. Tổng hợp oxime 22-methyl-8,11,14-trioxa-25-azatetracyclo-[ 19.3.1.o2'1.o15'20] - p e n t a c o s a - 2 , 4 ,6 , 1 5 (2 0 ), 1 6 ,1 8 - h e x a e n - 2 3 - o n e (V ia )
Tinh thể m ầu trắng. Hiệu suất 1.53g (40%), t°nc= 224-226°C. I R (K B r, V ,
em '): 3417 (NOH), 3340 (NH). 'H - N M R (ỏ, p p m , J, H z): 0.81 (d, 3H, 3J = 5.7,
Me), 2.57 (d.d, 1H, 3J = 13.5, 2J = 2.2 , H 24e), 3.10 (s, 1H, NH), 3.30 (m, 1H, H 22),
3.35-4.25 (m, 8H vă 3H, 0 C H 2C H 20 vă H 1’21’24), 6.77 (d, 2H, 3J = 8.14, H 6’16),
6.85 (s, 2H, H 4’18), 7.09-7.20 (m, 4H, H 3’5’17’19), 9.11 (1H, s, NOH). M S (E SI,
p o sitive, m /z): 383 [ M + l ] +.
3.5.3. Tông hợp oxim e 22 ,2 4 -d im eth yl-8 ,l l,14-trioxa-25-azatetracyclo- [19.3. Ị. o2'1. 0 l5’2n]-p en ta c o sa -2 ,4,6,15(20), 16,18-hexaen-23-one (Vlb).
Tinh thể m ầu trắng. Hiệu suất 1.86ơ (47%), t°nc= 246-248°C. I R (K B r, 1), (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
c m '1): 3419 (N O H ), 3344 (NH). 'H - N M R (CDCIị, ô, p p m , J, H z): 1.19 & 1.28
(3H d, 3J = 6.7, C H 3); 2.05 (1H, s, N H ); 3.02 vă 3.48 (1H m, H 22,24); 3.52-4.10 (10H, m, 0 C H 2C H 20 , H 1’21); 6.71-7.22 (8H, m, H Ăr); 9.0 (1H, s, NOH). M S (ESI, positive, m/z): 397 [ M + l ] +.
3.5.4. Tông hợ p hydrochloride oxirne ethyl 23-0X0-8, ỉ 1,14-trioxa-25-ozatẻracyclo [19.3. LO2'7.o'5-20] pentacosa-2,4,6,ỉ 5(20),ỉ 6,18-hezaen-22-carbocylate (VIc)
Dung dịch gồm 1 g (24 m m ol) piperidone (Va), 0.25 g (3.5 mmol)
hydroxylamine chloride trong 20 ml dung môi ethanol được đun sôi hôi lưu trong
40 phút. Hỗn hợp được lăm lạnh vă tâch lọc kết tủa, rửa sạch vă kết tinh lại thu dược 0.77e (68 %) hydrochloride oxime (V Ic) ở d ạn s tinh thề m ầu trắng có t°nc= 210-21 l ° c . D ịch phản ứng vă dịch lọc được xử lý với dung dịch N a 2C 0 3 tới pH =
11. rồi chiết với ethylacetate. D ịch chiết được lăm khô b ằ n s M g S 0 4, lăm bay hơi
d u n s môi thu được 0.12 2, (11% ) oxim e (V ld ) dưới dạng tinh thể m ầu trắng có
t°nt= 195-197°c.
I R (KBr, V , e m ') : 3560 & 3397 (OH), 3186 (NH), 1732 ( 0 = C - 0 ) , 1660
( O N ) . 'H - N M R (CD CI3, ô, p p m , J, Hz): 1.05 (3H, t, 3J = 7.2, C H 2C H 3); 2.0 (1H, s, OM); 2.70 (1H, t, N H ); 3.51 (2H, q, 3J = 7.2, C H2C H 3); 3.85-4.25 (13H, m,
O C H2C H2O, H1,21 ’22’ 24); 6.81-6.95 (4H, m, H Ar); 7.20-7.30 (4H, m, H arom). M S
(E S I, p o sitive, m /z): 441 [ M + l ] +.
3.5.5. Tông hợp d ẫn x u ấ t sem icarbazone của 2 2 -m eth yl-8 ,l l,14 -trio xa -2 5 - a za te tra c y c lo -[l9.3.1,02'7.Ol5 20]p en ta c o sa -2 ,4 ,6 ,15(20), 16,18-hexaen-23-one (VII)
Đun hồi lưu h ỗ n hợp g ồ m 0,5g (1,36 m m ol) hợp chất (V b) vă 0,16g (1,36
mm ol) sem icarbazide (dạng m uối HC1) trong 20ml M eO H với lm l C H3CO O H
(băng) với thời sian 15h. Khi phản ứng kết thúc (kiểm tra bằng sắc kv bản mỏng), dung dịch chuyển san e m ău văn g đậm. Cô quay dưới âp suất giảm để loại hết dung
môi, sau đó trung hoă bằng 10ml dung dịch N a2CO j IM , rồi chiết bằn ? CH CI3 (3
lần mỗi lần 15ml), lăm khô băn g N a2S 04 kiian. c ấ t loại dung môi trong dịch chiết
thu được chất rắn m ău văng đậm. Kết tinh lại sản phẩm thô băng C H C l3thu được tinh thể m ău văng nhạt. H iệu suất phản ứng đạt 60% (0,35g), t°nc=:228-231(0C), Rf
= 0,60 (ethylaxetate:acetone = 1:1).
3.5.6. Tông hợp thio sem icarba zone 2 2 -m eth yl-8 ,1 ỉ , 14-trioxa-25-azatetracyclo- [19.3. ỉ .( ỷ ’7. o 1520] -p entacosa-2,4,6,15(20), 16,18-hexaen-23-one (VIII)
Cho từ từ 0 .9 l e (0.01 mol) thiosem icarbazide văo dune dịch chứa 3.67g (0.01 mol) azacrow n ether (V b) trong 40ml ethanol có lm l HC1 trong bình tam giâc đây phang. Hồn hợp được khuấy đều vă đun hồi lưu trong 3 tiếng, sau đó lăm lạnh. L ọc kết tủa tạo thănh, rửa b ằn g một lượng nhỏ ether vă kết tinh lại từ ethanol. Sản phẩm (V III) thu được dưó'i dạng tinh thể có m ầu văng nhạt với hiệu suất 3.652,
(83%), tHnc=206-208(°C), Rf = 0,6 (ethylacetate). IR (KBr, D, cin 1): 3300 (N il & NỈ 12 ). 1620 (cưừne. độ yếu C=N). MS {E SI, positive, m /z):. 44 ] [ M + 1 ]+.
3 .5 .7. Tông hợp sp iro {22-m eth yl-8 ,1 1, ỉ4 -trio xa -2 5 -a za te tra cyclo -[l9 .3 .1. o2'7 .Ol5'20]-p en ta co sa -2 ,4 ,6 ,15, Ỉ 7,19-hexaen-23-yl}-(4 ’-acetyl,2 ’-aceta m id o)-l, 3,4- thiadiazoline (IX)
Trong bình cầu với the tích 150ml, hỗn hợp gồm 1.5g (3.4mmol) thiosem icarbazone (V III) vă 2 ml (20m m ol) anhydride acid acetic trong 30ml toluen được đun sôi hoi lưu tro n s v ò n a 3 giờ. Hỗn họp phản ứng được lăm lạnh, bay hơi toluen vă rửa nhiều lần bane nước. Phđn tâch bột mầu văng đậm thu được bằng phương phâp sắc ký cột trín S i 0 2 (dịch rửa giải lă ethylacetate : hexan 1:1). Hợp chất (IX) tinh khiết tâch ra dưới dạng tinh thể có m ầu văng, với hiệu suất
0.85g (44%), t°nc = 201-203°c, Rf = 0,57 (ethylacetateihexane, 1:1). IR (K B r, V,
c m 1): 1628, 1647, 1685 ( O O ) , 3447 (NH). 'H - N M R (D M S O -d 6, ỗ, p p m , J, Hz):
0.51 (3H, d, 3J = 7.0, 22 - C H 3); 2.0 (6H, s, 0 = C C H 3); 2.15 (3H, s, 0 = C C H 3); 3.17, 3.31, 3.52 & 3.59 (3H, 2H, 3H, 6H, m, C H 2, CH vă NH); 6.81 & 7.22 (4H < tương ứng với m ỗi tín hiệu, m, H Ar). M S (E S I, positive, m /z): 567 [ M + l ] 1.
3.5.8. Tùng hợp dim ethyl 2-[22 ,24-dim ethyl-23-oxo-8,ỉ I,]4 -trio xa -2 5 - a za te tra c y c lo f 19.3.1. o2'7.0 ,5'2°]pentacosa-2,4,6,15(20), 16,1 S-hexaen-2 5-yl] but-2- enedioate ( X j (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Cho 0.1 lg , (0.79m m ol) dimethyl acetylenedicarboxylate vă 0.30g,
(0.79m m ol) bis(benzo)-(/?,yỡ'-dimethyl-y-piperidono)aza-14-crovvn-4 ether văo
(20ml) chloroform. H ỗn hợp phản ứng được khuấy đều ở nhiệt độ phòng trong vòng 3 ngăy, kiểm tra tiến trình phản ứng bằng sắc ký lớp mỏng. Khi phản ứng kết thúc, tinh thể tạo thănh được lọc rửa b ằn ? 40 ml chloroform vă kết tinh lại từ ethanol thu được 0 .4 l g tinh thể m ầu văn g nhạt (Xa). H iệu suất đạt 99%. T°nc = 2 3 3 -2 3 5 °c . I R (K B r, V, c m 1): 1599, 1643, 1710, 1729. ‘H - N M R (CD C Ỉ3>ô, p p m , J, III): 0.43 (d, 6H, C— C H 3 , V = 7.0), 3.00 vă 3.17 (s, 3H tương ứng, C H 3 ), 3.46, 3.54, 3.60 vă 3.68 (m, 2H, 4H, 2H vă 2H, H 22, H 24 vă O C H 2 C H 2 O C H 2 C H 2
O), 3.76 vă 3.83 (d, 1H tương ứng, H 1 vă H 21, 'J = 10.1), 6.39 vă 6.43 (m, 2H
tương ứng, H Ar), 6.49(s, 1H, 0 2C— C H - C — C 0 2 ), 6.58 (dd, 2H, V = 7.2 vă 4J = 2.0), 6.86 (tt, 2H, V = 8.4 vă V = 2.0, H Ar).
4. T h ừ h oạt tính sinh học
-/.1. H oạt tỉnh khâng vi sinh vật kiím định P hư ơng p h â p p h đ n tích
Hoạt tính khâng Vi sinh vật kiểm định được tiến hănh để đânh giâ hoạt tính khâng sinh của câc m ẫu chiết, được thực hiện trín câc phiến vi lượng 96 giếng (96- well microtiter plate) theo p h ư ơ n g phâp hiện đại của V anderBergher vă Vlietlinck (1991), vă M cKane, L., & Kandel (1996).
Câc ch ủng vi sinh vật kiím định
-Vi khuan Gr (-): E sch erich ia coli (A TC C 2 5 9 2 2 ) Pseudom onos a erug inosa (A T C C 2 5 9 2 3 )
- Vi khuan Gr (+): B acillus subtillis (ATC C 2 7 2 1 2 )
Staphylococcus aureus (ATC C 12222) - Nấm sợi: A sp erg illu s n iger (439) Fusarium oxysporum (M 42)
- N ấm m e n:C andida alb icans (ATC C 7754)
Saccharom yces cerevisiae (S H 20) C hứ ng dươ ng tín h:
+ ) Ampicilin cho vi khuẩn Gr(+) + ) Tetracylin cho vi khuẩn Gr( -)
+ ) Nystatin hoặc A m photericin B cho nấm sợi vă nấm men
K hâng sinh pha trong D M S O 100% với nồng độ thích hợp: Ampixilin: 50rnM; Tetracylin: lOmM; N ystatin: 0.04mM .
C hứ ng đm tính :
Vi sinh vật kiểm định k h ô n e trộn khâng sinh vă chất thử.
M ôi trư ờ ng nuôi cấy v i sin h vật
+) Môi trường duy trì vă bảo tồn g iố n s :
C âc loại nấm lă S aboraud Dextrose Broth(S D B )-S iam a
Câc loại vi khuẩn lă T rypcase Soya Broth(TSB)-SĨ2ina
+) Môi trường thí nghiệm
Câc loại nấm lă M y cophil(D ifco-U S )
Tiến hănh th ỉ nghiệm
Câc chủng kiểm định được hoạt hoâ vă pha loêng với nồng độ 0,5 đơn vị M cFland rồi tiến hănh thí nghiệm.
4.2. ỉ lo ạ t tính g đy độc tí băo P h ư ơ n g p h â p p h đ n tích
T heo ph ư ơn g phâp của Skehan & cs (1990) vă Likhiwitayawuid &CS
(1993) hiện đang được âp dụng tại tại Viện nghiín cứu Ưng thư Quốc gia của Mỹ (NCI) vă trường đại học Dược, Đại học tống hợp Illinois, Chicago, Mỹ. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
D òng tế băo
D òn g H ep-G 2 (Hepatocellular carcinom a-Ư ng thư gan) D ò n g Lu (Lung cancer-U ng thư phổi)
D ò n g RD (R habdosarcom a-Ư ng thư cơ vđn tim) (tại Viện V S D T Trung ương)
M ôi trư ờ n g nuôi cấ y tế băo
D M E M (Dulbecco's M odified Eagle M edium ) hoặc M E M E (M inim um Essential M ed iu m with Eagle's salt).
C ó bô sung L- alutamine, Sodium piruvat, NaHC03, PSF(Penixillin- Streptom ycinsulfate- Fungizone); N A A (Non-Essential A m ino Acids); 10% BCS
(Bovine C alfSerum );Tripsin-ED TA 0,05%; D M S O (Dimethyl Sulfoside);
TC A (Trichloro A cetic acid); TrisBase; PBS (Phosphate Buffered Saline); SRB (Sulfo R hodam ine B); Acid Acetic.
Câc d ụ n g cụ d ù n g m ột lần
Bình nuôi cấy tế băo, phiến vi lượng 96 giếng, pipet Pasteur, câc đầu tuýp cho m ic ro p ip e tte ...
Chat chuẩn d itơ ng tính:
D ùn g chất chuẩn có khả năng diệt tế băo: Ellipithine, Vinblastine hoặc Taxol phatron g D M S O .
Đ ọc trín m ây EL1SA ở bước sóng 495 -5 1 5nm.
KĨT LUẬN
1. T ô n g h ọ p đ ư ợ c sâu (0 6 ) d ầ n x u ấ t a z a c r o w n e th e r có c h ứ a dị v ò n g p e r h y d ro tr ia z in e với c ô n g th ứ c c ấ u tạo II a - c trí n s ơ đồ 2, II d th eo sơ đồ 3 vă I I I a, b th e o sơ đ ồ 4. 2. T ổ n g h ọ p dị v ò n g a z a c r o w n e th e r c h ứ a dị v ò n g p e r h y d r o d ia z in e IV th eo sơ đồ 5. 3. T ô n g h ọ p 05 h ệ d ị v ò n g a z a c r o w n e th e r c h ứ a n h đ n p ip e r id in e V a - e th eo s ơ đồ 6. 4. T rí n c ơ sở p h ư ơ n g p h â p tư ơ n g tự, tổ n g h ọ p h ệ dị v ò n g d ib e n z o - (b is p irid in o ) a z a c r o w n e th e r (V f).
5. N g h ií n c ứ u tính c h ấ t c ủ a câ c h ọ p c h ấ t a z a c r o w n tổ n g h ợ p đưọ'c v ă thu đ ư ợ c c â c sản p h ấ m m ớ i lă câ c d ẫ n x u ấ t o x im ( V I a ,b ) , s e m ic a r b a z o n (V II) vă thiosemicarbazon (V III) của chúng. Trong phản ứng cuối, t h u đ ư ợ c sản p h ẩ n sp iro (IX ).
; 6. T h ử n g h iệ m p h ả n ứ n g c ủ a câc a z a c r o w n e th e r v ớ i d im e th y l
a c e ty le n d ic a r b o x y la te ( D M A D ) t h u đ ư ợ c sản p h ẩ m N - a k y l h o â (X a ). 7. T i ế n h ă n h n g h ií n c ứ u h o ạ t tín h s in h h ọ c c ủ a câ c sản p h ă m n ă y v ă x âc
đ ịn h đ ư ợ c :
a. C â c a z a c r o w n e th e r ( l i e ; I l i a ) có h o ạ t tín h k h â n g k h u ẩ n thể h i ệ n ở vi k h u ẩ n G r a m (-) (B .S u b tillis).
b. C â c a z a c r o w n e th e r ( l i b , l i e , I H a ) có h o ạ t tín h g đ y đ ộ c tế b ă o th ể h iện trí n d ò n g R D ( u n g th ư c ơ v đ n tim ) v ă k h ô n g th ể h iệ n trí n d ò n g H e p - G 2 ( u n g t h ư g a n ) v ă L U ( u n g t h ư p h ổ i), c ò n câc