Phƣơng pháp nghiên cứu

Thiết kế nghiên cứu:

Trong nghiên cứu này lần này chúng tôi đánh giá hiệu quả của thuốc tẩy giun và hiệu quả bố sung viên sắt vào tháng 7/2012 nên chúng tôi dùng phƣơng pháp “nghiên cứu cắt ngang mô tả”:

- Xác định tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm giun đũa, giun tóc, giun móc của phụ nữ độ tuổi sinh sản ở hai huyện nghiên cứu tại thời điểm đầu của dự án (11/2005) và tại thời điểm cuối (7/2012) sau sáu năm can thiệp.

- Xác định tỷ lệ thiếu máu thiếu sắt qua các chỉ số Hb và SF của phụ nữ tuổi sinh sản ở hai huyện nghiên cứu tại thời điểm trƣớc can thiệp (11/2005) và sau can thiệp (7/2012).

Tất cả phụ nữ có tên trong danh sách đều đƣợc uống thuốc tẩy giun định kỳ và bổ sung viên sắt nên chúng tôi dùng phƣơng pháp nghiên cứu thứ hai là “Nghiên cứu can thiệp cộng đồng”:

- Đối với thuốc tẩy giun chúng tôi dùng Alberzadol 500mg liều duy nhất, cứ một năm một lần chị em phụ nữ đƣợc uống một liều/một lần và đều đƣợc các cán bộ Y tế hƣớng dẫn, theo dõi.

- Đối với việc dùng viên sắt-axit folic chúng tôi phát thuốc hàng tuần cho chị em. Mỗi một tuần một phụ nữ uống 01 viên duy nhất và cũng đƣợc sự hƣớng dẫn và theo dõi của cán bộ Y tế.

Thu thập số liệu qua 03 kỹ thuật xét nghiệm:

Mỗi một phụ nữ đều đƣợc làm 3 xét nghiệm, trong đó có hai xét nghiệm máu và một xét nghiệm phân, các xét nghiệm chỉ làm một lần không lặp lại:

Lấy máu mao mạch đầu ngón tay định lƣợng Hb

Dùng bông cồn 70o sát trùng đầu ngón tay định lấy máu, chờ khô rồi chích máu, chích nhanh, mạnh, dứt khoát, lau bỏ giọt máu đầu. Đƣa cuvet vào đầu giọt máu chờ giọt máu tràn ra hết vòng tròn thì dừng lại đƣa ngay vào máy định ƣợng hemoglobin (Hb) tại chỗ bằng máy HemoCue 201 của Thụy Điển.

24

Lấy máu tĩnh mạch định lƣợng SF huyết thanh

Chẩn đoán thiếu máu thiếu sắt đƣợc xác định khi có cả thiếu Hb và thiếu SF, sự có mặt này đƣợc xác định bằng cách đo nồng độ SF. SF huyết thanh là chỉ số quan trọng, khá nhạy để đánh giá tình trạng sắt. Mức SF trong huyết thanh phản ánh dự trữ sắt trong cơ thể. Định ƣợng SF là xét nghiệm có giá trị nhất vì hàm ƣợng SF thấp phản ánh giai đoạn sớm của thiếu sắt và xét nghiệm này cũng đặc hiệu nhất cho thiếu sắt của cơ thể. Trong nghiên cứu này, để đánh giá tình trạng thiếu sắt chúng tôi định ƣợng SF trên máy sinh hóa tự động Cobas 6000 của Roche/Hitachi tại khoa Sinh hóa Bệnh viện Bạch Mai.

Dùng bông cồn 70o sát trùng nơi định lấy máu (tĩnh mạch cánh tay), chờ khô rồi dùng bơm tiêm ấy khoảng 3m máu tĩnh mạch cho vào ống nghiệm không chống đông, y tâm tách ấy huyết thanh định ƣợng SF trên máy sinh hóa tự động Cobas tại Khoa Sinh hóa Bệnh viện Bạch Mai – Hà Nội.

Xác định tỷ lệ nhiễm và cƣờng độ nhiễm giun bằng xét nghiệm phân theo phƣơng pháp Kato – Katz

Nguyên tắc:

Kỹ thuật này dùng để đếm số ƣợng trứng trong phân hay còn gọi là kỹ thuật định ƣợng trứng. Dùng để đánh giá các chỉ số trong nghiên cứu (cƣờng độ nhiễm giun sán đồng thời kỹ thuật này còn dùng để đánh giá kết quả của thuốc điều trị - trƣớc và sau điều trị).

Dụng cụ và hóa chất

- Miếng bìa hình chữ nhật kích thƣớc 30 x 40 x 1,37; ở giữa có một lỗ tròn đƣờng kính 6mm, ƣới lọc, giấy lọc tròn, que xét nghiệm (que tre, que nhựa), lọ đựng phân (lọ nhựa, lọ thủy tinh), bút viết kính, lam kính (phiến kính), giấy Cellophan nhuộm màu dùng trong kỹ thuật Kato, bình đựng dung dịch sát trùng, kính hiển vi.

Kỹ thuật tiến hành theo quy trình:

- Lấy mẫu phân xét nghiệm đặt trên giấy lọc. Đậy miếng ƣới lọc mẫu phân, dùng que ép miệng ƣới lọc để phân lọt ên qua ƣới lọc.

25

- Miếng bìa hình chữ nhật đƣợc đặt trên lam kính có nhãn.

- Dùng que gạt phân đã ọc trên ƣới đƣa sang ỗ của miếng bìa hình chữ nhật sao cho đầy lỗ.

- Nhấc nhẹ miếng bìa ra khỏi phiến kính nhƣ vậy còn lại khối phân trên lam kính. Phủ giấy Ce ophan đã nhuộm màu lên mẫu phân.

- Dùng một nút cao su ép lên mặt giấy để dàn phân đều, sao cho mặt giấy tƣơng đối phẳng nhẵn.

- Sau đó đem soi dƣới kính hiển vi (vật kính 10 hoặc 40).

Phân biệt hình các loại trứng giun đũa, trứng giun tóc và trứng giun móc dựa vào hình dạng, vỏ, kích thƣớc, nhân:

Hình 2.3. Trứng giun đũa Hình 2.4. Trứng giun tóc 2.5. Trứng giun móc