Ở Nước cất : - 1:000,00ml `
ỞpH =7,2+0,2
Đun sôi cho tan hết môi trường. Hấp tiệt trùng ở nhiệt độ 121ồC trong thời. gian 15 - phút. Để môi trường nguội đến 50ồC, sau đó đồ ra đĩa lồng, hoặc ống nghiêng.
d) Môi trường thạch KF. Streptococcal đề phân lập vi khuẩn ứfreptococcus spp.
Ở Peptone : - vơ 20,00g
Ở Cao nấm men : - : 10,00g
~ Muối clorua (NaC]) : TS 5,00g
Tu Muối glycerophotphat natri (sodium glyccrophossphate) : 10,00g
~ Đường maltozơ:. ` " 20,00g
~ Đường lactozơ : : : l 1,00g
Ở Azide natri (Sodium natri) tóc " 0,40g
Ở Tắm brom cresol: - : 0,015g
Ở Agar : - 20,00g -
~ Nước cất : : 1.000,00ml
-pH s ể =7,2+ 0,2
Đun sôi cho tan hết môi trường, Tiếp tục đun thêm 5 phút (không dùng nồi hấp). Đề môi trường nguội đến nhiệt độ 50ồC. Sau đó cho thêm 1ml dung dịch Triphenyl Tetrazolium Chioride (TTC) 1% với 100ml môi trường. Lắc nhẹ và đổ ra đĩa lồng.
e) Môi trường BAB (Thạch máu cơ bản Ặ Blood Agar Base) Ở Cao thịt (Lab-Lemco power) : 10,00g
Ở Peptone : 10,00g
- Muối clorua natri (NaC]) : ì 3,00g
Ở Nước cất : 1.000,00m1
Đun sôi cho tan hết môi trường. Hấp tiệt trùng ở nhiệt độ !21ồC trong thời gian l5.
phút. Để môi trường nguội đến nhiệt độ 50ồC. Sau đó đồ thêm 7% máu ngựa, hoặc máu thỏ vô trùng. Xoay tròn nhẹ cho máu tan đều trong môi trường và đồ ra đĩa lồng.
11.3.1.3. Môi trường thử phản ứng sinh học a) Môi trường cơ bản O/F (Oxi hóa và lên men) .
- Tripton : 2,00g
Ở Muối clorua natri (NaC]) : 5,00g ~ Muối monophotphat kali (É;HPOƯ) : 0,30g
Ộ Ở Xanh bromothimol : 0,08g
Ở Agar : l 2,008
~ Nước cất: Ở .. 1.000,00ml
_ỞpH 6,8+0,2
Đun sôi cho tan hết môi trường. Sau đó đổ môi trường vào ống nghiệm với dung tắch
4,5 ml/ống. ` ` Ề ` (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Ở Đường glucozơ : 1,00g
_ Nước cất: _. - 1000,00ml ộ
Hấp tiệt trùng môi trường O/ và dung dịch glucozơ 10% ở nhiệt độ 121C trong thời gian 15 phút. Sau đó cho vào mỗi ống môi trường O/F 0,5ml glucozơ.
b) Môi trường TSI (Thạch sắt 3 đường)
Ở Cao thịt (Lab Ở Lemco power) : 3,00g
Ở Cao nấm men : : 3,00g
~ Pepton : : 20,00g
Ở Muối clorua natri (NaCD) : 5,00g
Ở Đường lactozơ : n. 10,00g
Ở Đường saccarozơ : _ 10,00g l
Ở.Đường gìucozơ : 5,00g
~ Muối xitrat sắt (CzHẤ(OH)(COO)zFe): 0.30g
Ở Muối thiosulphat natri (NaạS;O): Ở 0.30g
Ở Phenol đô : 0,024g
Ở Agar : 12,00g
Ở Nước cất : 1.000,00m1
Đun sôi cho tan hết môi trường. Hấp tiệt trùng trong thời gian 15 phút ở nhiệt độ 121ồC. Sau đó đổ 10ml môi trường vào ống nghiệm (cỡ 15x 160mm) để nghiêng.
c) Môi trường Ủrea Ở Indol
~ Axit amin triptophan (L Ở Triptophane) : 3,00g 334
~ Muối monophotphat kali (K;HPOƯ) : 1,00g
Ở Urea : 20,00g
~ Muối diphotphat kali (KHƯPO/) : 1,00g
~ Muối clorua natri (NaCl):, 5,008
Ở Phenol đỏ : 2,50g
Ấ Ở Cền 95% : 20,00 ml
Ở Nước cất: 1.000,00m]
Sau khi triptophan đã được nghiên trong cối sứ, nhỏ từ từ cồn 95% cho đến khi tan hết. Trộn đều các hóa chất còn lại với triptophan trong bình cầu rồi đun nhỏ lửa. Điều chỉnh-
pH = 7,2. Lọc vô trùng và đổ vào các ống nghiệm. -
113.2. Môi trường nuôi cấy nấm
11.3.2.1. Môi trường PDA (Thạch đường khoai tây/Potato Dextrose Agar) ~ Cao khoai tây : 4,00g (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Ở Đường glucozơ : 20;00g
Ở AgaI : 15,00g
~ Nước cất : 1.000,00m1
ỞpH =5,6+ 0, 2 -
Đun sôi cho tan hết môi trường và hấp tiệt trùng ở nhiệt độ 121ồC trong thời gian 15 phút. Để môi trường nguội đến nhiệt độ 50ồC, cho thêm Iml axit lactic 10% vào 100ml môi trường. Sau đó đổ môi trường ra đĩa lồng, hoặc ống nghiệm.
11.3.2.2. Môi trường thạch Sabouraud Dextrose ~ Pepton nấm : 10g
Ở Đường glucozơ : .40,00g
_ Agar : 15,00g
Ở Nước cất : 1000,00ml
~pH: 5,6+0,2
Đun sôi hấp tiệt trùng ở nhiệt độ 121ồC trong thời gian 15 phút. Sau đó đồ môi trường ra đĩa lỏng hoặc ống nghiệm.
_Chú ý: Các môi trường nuôi cấy nấm, cho thêm kháng sinh Streptomicin và Penicilin nồng độ 300 mg/ắt hoặc Chloramphenicol nồng độ 200 mg/lắt môi trường.
11.4. Thuốc thử Ẽ
Ẩ1.4.1. Thuốc thử Xitocrom oxidase
Ở Tetramethil - P Ở Phenilencediamin : 1,00g
~ Cồn Isoamil : 100 ,00 ml. :
11.4.2. Thuốc thử Kovac`s
- Paradimethilamino bezaldehide : 5,00g Ở Côn Isoamil : 75,00 ml l
~ Axit clohydric (HCI) đậm đặc : 25,00 mÌ -
Hòa 5 g Paradimethilamino bezalđehide vào 75ml cồn Isoamil. Sau đó nhỏ từ từ 25 mÌ
HCI đậm đặc vào. i ? 11.4.3. Thuốc thử phản ứng Nitrạt 11.4.3.1. Dung địch AIphanaphthilamin : - Alphanaphthilamin: 0,508 Ở Axit axetic 5N : 100,00ml
Trộn đều, lọc dung dịch và bảo quản không được qua một tuần lễ. 11.4.3.2. Dung dịch axit sulfanilic
Ở Axit sulfanilic : 0,80ml
~ Axit axetic 5N : 100,00ml .
Trộn đều, lọc dung dịch và bảo quản không được quá 1 tháng.
11.4.3.3. Dung dịch Vibriostatic Ở 0/129 .
Hòa 0,5g 2,4 Diamino ~ 6/7 Disisopropil pteridin photphat (0/129) trong 10 mÌ chloroform. Ngâm các đĩa giấy làm kháng sinh đổ vào dung dịch trên, sau đó để khô, hoặc có thể dùng đĩa có sẵn 10 ng Ở 0/129 ; 150 ng 0/129.
11.5. Thuốc nhuộm
11.5.1. Thuốc nhuộm gram
11.5.1.1. Dung dịch 1 : Tắm tắnh thể (Crystal Violet) Dung dịch A (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});