3. Hoạt ựộng sinh sả nở bò cái
2.2. Nội dung
2.2.1. Nghiên cứu chỉ tiêu chất lượng tinh bò HF phân biệt giới tắnh nhập khẩu từ Hoa Kỳ.
Nghiên cứu một số chỉ tiêu số lượng, chất lượng tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh bao gồm các chỉ tiêu sau:
+ Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông (%). + Tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông (%). + Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình sau giải ựông (%).
+ Số lượng tinh trùng trong một cọng rạ (triệu/cọng rạ).
+ Vận tốc chuyển ựộng của tinh trùng sau giải ựông (ộm/giây). + độ dài ựường ựi của tinh trùng (ộm).
2.2.2. Nghiên cứu tỷ lệ thụ thai lần ựầu trên ựàn bò cái HF
Nghiên cứu tỷ lệ thụ thai lần ựầu tiên trên ựàn bò cái HF ở các ựộ tuổi sinh sản khác nhau (bò tơ, lứa thứ nhất, lứa thứ hai, lứa thứ ba và lứa thứ tư) khi phối giống TTNT với tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh gồm các chỉ tiêu sau:
+ Tỷ lệ thụ thai lần ựầu trên ựàn bò cái HF ở các ựộ tuổi sinh sản khác nhau (bò tơ, lứa thứ nhất, lứa thứ hai, lứa thứ ba và lứa thứ tư).
+ Tỷ lệ thụ thai lần ựầu trên ựàn bò cái HF của từng bò ựực giống.
2.2.3. Nghiên cứu tỷ lệ bê cái sinh ra và ựánh giá hiệu quả kinh tế khi sử dụng tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh
+ Tỷ lệ bê cái sinh ra theo từng bò ựực giống
+ Hiệu quả kinh tế khi sử dụng tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh
2.3. Phương pháp
2.3.1. Phương pháp nghiên cứu một số chỉ tiêu số lượng, chất lượng tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh
Lấy ngẫu nhiên 9 liều tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh của mỗi bò ựực giống ở các lô sản xuất khác nhau. Tiến hành giải ựông ở 37 ựộ C trong 30 giây, sau ựó xác ựịnh một số chỉ tiêu số lượng, chất lượng tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh như sau:
Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông, số lượng tinh trùng trong một cọng rạ, vận tốc chuyển ựộng của tinh trùng sau giải ựông (ộm/giây), ựộ dài ựường ựi của tinh trùng ựược xác ựịnh bằng phần mềm CASA trên máy Sperm Version (hãng Minitube).
Tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông ựược xác ựịnh bằng phương pháp nhuộm mầu với eosin và ựếm trên kắnh hiển vi 500 tinh trùng rồi tắnh toán bằng phép tắnh số học thông dụng.
Số lượng tinh trùng sống
Tỉ lệ tinh trùng sống (%) = 500 X 100
Tỷ lệ tinh trùng kỳ hình ựược xác ựịnh bằng phương pháp nhuộm mầu với eosin và ựếm trên kắnh hiển vi 500 tinh trùng rồi tắnh toán bằng phép tắnh số học thông dụng.
Số lượng tinh trùng kỳ hình
K (%) = 500 X 100
2.3.2. Phương pháp nghiên cứu tỷ lệ thụ thai lần ựầu trên ựàn bò cái HF
Nghiên cứu tỷ lệ thụ thai lần ựầu trên ựàn bò cái HF ở các ựộ tuổi sinh sản khác nhau (bò tơ, lứa thứ nhất, lứa thứ hai, lứa thứ ba và lứa thứ tư) khi phối giống TTNT với tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh.
Tiến hành theo dõi phát hiện ựộng dục và phối giống TTNT với tinh bò HF phân biệt giới tắnh của 7 bò ựực giống cho các bò cái HF các ựộ tuổi sinh sản khác nhau (bò tơ, lứa thứ nhất, lứa thứ hai, lứa thư ba và lứa thứ tư), Các bò cái HF khỏe mạnh, sinh sản bình thường, có khối lượng tương ựồng ở từng ựộ tuổi sinh sản và ựược chăm sóc nuôi dưỡng theo cùng một tiêu chuẩn của cơ sở. Các dẫn tinh viên thực hiện phối giống TTNT có tay nghề cao, tuổi nghề từ 3 năm trở lên. Sau 90 ngày phối giống, tiến hành khám qua trực tràng xác ựịnh có thai hay không và ựánh giá tỷ lệ phối giống lần một có chửa ựược tắnh bằng công thức:
Số bò cái có chửa Tỷ lệ phối giống lần một có chửa (%) =
Số bò cái ựược phối giống ừ 100
2.3.3. Phương pháp nghiên cứu tỷ lệ bê cái sinh ra và ựánh giá hiệu quả kinh tế khi sử dụng tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh khi sử dụng tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh
Tiếp tục chăm sóc nuôi dưỡng và theo dõi các bò cái thắ nghiệm cho tới khi bò ựẻ, xác ựịnh tỷ lệ bê cái sinh ra theo công thức:
Số bò bê cái
Tỷ lệ bê cái sinh ra (%) = x 100 Tổng số bê sinh ra
đánh giá hiệu quả kinh tế khi sử dụng tinh bò HF dạng cọng rạ phân biệt giới tắnh bằng cách tắnh tỷ lệ bê con sinh ra khi phối giống bằng tinh phân biệt giới tắnh và tinh thường nhập khẩu từ Hoa Kỳ, số lượng tinh là 1.000 liều ựối với cả tinh thường và tinh phân giới. Chi phắ thụ tinh nhân tạo và các chi phắ liên quan ựến quá trình thụ tinh (trừ chi phắ tinh) ựược quy bằng nhau giữa 2 nhóm bò sửa dụng tinh phân giới và tinh thường và quy về giá trị bằng 0.
đơn giá của tinh thường và tinh phân giới là ựơn giá ựang ựược áp dụng ở thị trường hiện nay với với ựơn giá tịnh thường từ $7-$10 và ựơn giá tinh phân giới từ $35-$45 và lấy trung bình là 190.000 ựồng và 800.000 ựồng tương ứng với tinh thường và tinh phân giới.
đơn giá bán bò ựược tắnh theo giá trị trường trung bình hiện nay là 12.000.000 ựồng/bê cái và 2.600.000 ựồng/bê ựực.
Tỷ lệ thụ thai của tinh bò phân biệt giới tắnh theo kết quả nghiên cứu trình bày ở phần 3. Tỷ lệ thụ thai của tinh bò thường tại Mộc Châu theo Phùng Thế Hải và Cs (2012) là 91,91%.
Tỷ lệ bê con chết sau sinh hoặc tỷ lệ thai chết lưu ựược loại bỏ trong cả hai phương pháp tắnh này.
2.4. Xử lý số liệu
để ước tắnh các giá trị trung bình bình phương nhỏ nhất (LSM: Least Square Mean) của các biến số theo các lớp ựược xử lý bằng mô hình tuyến tắnh tổng quát Proc GLM trong chương trình SAS 9.1 (2004). Các phân lớp về cá thể, ựộ tuổi sinh sản và tương tác giữa chúng ựược xử lý là những ảnh hưởng của lớp hay ảnh hưởng ổn ựịnh. Mức ựộ khác nhau của các giá trị LSM ở mức P≤0,05 ựược xem là có ý nghĩa so sánh về mặt thống kê.
Các số liệu có bản chất là tỷ lệ phần trăm (hoạt lực tinh trùng sau giải ựông, tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông, tỷ lệ tinh trùng kỳ hình sau giải ựông, tỷ lệ thụ thai lần ựầu) trước khi xử lý ựược chuyển dạng ựể tắnh toán theo Y=Degrees (asin(sqrt(x/100))). Sau khi tắnh toán xong, kết quả ựược chuyển dạng trở lại.
đánh giá về ảnh hưởng của cá thể bò ựực và ựộ tuổi sinh sản của bò cái ựến tỷ lệ thụ thai lần ựầu sử dụng mô hình phân tắch:
yijk = ộ + ai + bj + + eijk
Trong ựó:
yijk là tỷ lệ thụ thai lần ựầu. ộ: là trung bình tổng thể.
ai:là ảnh hưởng của cá thể bò ựực thứ i (i =7).
bj: là ảnh hưởng của ựộ tuổi sinh sản của bò cái (j=6). eijk: là sai số ngẫu nhiên.
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Một số chỉ tiêu chất lượng tinh bò phân biệt giới tắnh dạng cọng rạ sau khi giải ựông khi giải ựông
Chất lượng tinh bò sau giải ựông là yếu tố quan trọng nhất ựánh giá chất lượng sinh sản của ựực giống. Tinh bò ựông lạnh sau khi giải ựông có chất lượng tốt thì khả năng thụ thai mới cao, ngược lại thì tỷ lệ thụ thai sẽ thấp hoặc dẫn ựến bò cái không thể thụ thai do chất lượng tinh trùng sau giải ựông quá thấp không ựáp ứng yêu cầu ựể quá trình thụ thai xảy ra. để ựánh giá chất lượng tinh bò sau giải ựông thì các yếu tố quan trọng như : số lượng tinh trùng, hoạt lực tinh trùng, tỷ lệ tinh trùng sống, tỷ lệ tinh trùng kỳ hình, vận tốc của tinh trùng.
để ựánh giá chất lượng tinh trùng sau giải ựông chúng tôi tiến hành ựánh giá một số chỉ tiêu chi tiết như sau:
3.1.1. Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông
Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông là số lượng tinh trùng có khả năng tiến thẳng sau quá trình ựông lạnh tinh. Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông là chỉ tiêu quan trọng quyết ựịnh tới kết quả thụ thai ở bò cái trong công tác TTNT, nếu hoạt lực tinh trùng sau giải ựông cao thì tỷ lệ thụ thai cao và ngược lại. Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông chịu ảnh hưởng của nhiều yếu tố như chất lượng tinh tươi ựưa vào sản xuất tinh, kỹ thuật sản xuất tinh, môi trường pha loãng, sức kháng ựông của tinh trùng (yếu tố cá thể), kỹ thuật giải ựông... Kết quả ựánh giá hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh ựược trình bày ở bảng 3.1.
Qua bảng 3.1 cho thấy, trung bình hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh ựạt 34,47%. Trong ựó cao nhất là hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của bò ựực giống HF số hiệu 551HO00486, ựạt 39,12%. Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông thấp nhất là của bò ựực giống HF số hiệu 551HO00433, chỉ ựạt tương ứng là 29,21% (P<0,05).
Bảng 3.1: Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh
đVT: %
Số hiệu bò ựực giống n Mean SE
151HO00433 9 29,21c 0,22 551HO00419 9 36,67ab 0,32 551HO00426 9 35,99ab 0,13 551HO00432 9 30,99bc 0,16 551HO00457 9 34,35b 0,19 551HO00486 9 39,12a 0,11 551HO00590 9 34,95b 0,20 Trung bình 63 34,47 0,18
Ghi chú: Trong cùng một cột, các giá trị trung bình có chữ cái khác nhau là khác nhau có ý nghĩa thống kê (P<0,05).
Tác giả Mostari và cs (2005), cho biết hoạt lực của tinh trùng sau giải ựông của tinh bò HF không phân biệt giới tắnh ựạt từ 56,67% tới 59,22%. Ở Việt Nam, Lê Bá Quế (2007) nghiên cứu trên bò ựực giống HF trưởng thành nhập khẩu từ Hoa Kỳ, hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của tinh bò HF ựông lạnh không phân biệt giới tắnh ựạt 45,61% và hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của các bò ựực giống khác nhau là có sự khác biệt tùy thuộc vào sức kháng ựông của tinh trùng của từng cá thể.
Theo tiêu chuẩn Việt Nam TCVN 8925:2012 quy ựịnh hoạt lực tinh trùng trong một cọng rạ 0,25 ml hoặc 0,5ml của tinh bò ựông lạnh không phân biệt giới tắnh tối thiểu cần ựạt 40%. Tuy nhiên, theo tiêu chuẩn của Hoa Kỳ, hoạt lực tinh của tinh trùng sau giải ựông có sự khác biệt so với quy ựịnh của Việt Nam.
29,21 36,67 35,99 30,99 34,35 39,12 34,95 34,47 0 5 10 15 20 25 30 35 40 433 419 426 432 457 486 590 Trung bình Số hiệu bò ựực giống
Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông
Biểu ựồ 3.1. Hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh
Như vậy, hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh thấp hơn so với tinh thường và thấp hơn so với quy ựịnh ựối với tinh bò không phân biệt giới tắnh. đồng thời, hoạt lực tinh trùng sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh cũng có sự khác nhau giữa các bò ựực giống HF khác nhau, nguyên nhân do sức kháng ựông của tinh trùng của từng cá thể là khác nhau.
Nguyên nhân do việc sản xuất tinh bò phân biệt giới tắnh ựược tiến hành qua nhiều bước như nhuộm huỳnh quang, chiếu tia laser, tách tinh trùng X, Y bằng ựiện trường và thiết bị lệch ựiện áp cao tầnẦkhiến cho sức sống và sức hoạt ựộng của tinh trùng giảm ựi. Do vậy, hoạt lực sau giải ựông của tinh bò phân biệt giới tắnh thấp hơn so với tinh bò không phân biệt giới tắnh.
3.1.2. Tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông
Tinh trùng sống là tinh trùng còn hoạt ựộng ựược ở trạng thái di ựộng, có thể di ựộng tiến thẳng, di ựộng vòng quanh hoặc dao ựộng. Tỷ lệ tinh trùng sống
khác hoạt lực tinh trùng, hoạt lực tinh trùng là chỉ tiêu ựánh giá tỷ lệ tinh trùng sống có hoạt ựộng tiến thẳng còn tỷ lệ tinh trùng sống là tắnh toàn bộ tinh trùng còn sống trong ựó bao gồm những trinh trùng hoạt ựộng tiến thẳng, tinh trùng vận ựộng vòng quanh và tinh trùng không vận ựộng tiến thẳng mà chỉ dao ựộng. Tỷ lệ tinh trùng sống có ảnh hưởng rất lớn ựến sức hoạt ựộng của quần thể tinh trùng, nếu tỷ lệ tinh trùng sống cao, sức hoạt ựộng của tinh trùng thường sẽ cao và ngược lại. Cũng có trường hợp tỷ lệ tinh trùng sống cao nhưng hoạt lực tinh trùng không cao, vì số lượng tinh trùng hoạt ựộng tiến thẳng ắt hơn số lượng tinh trùng không hoạt ựộng tiến thẳng. Kết quả ựánh giá tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh ựược trình bày ở bảng 3.3.
Bảng 3.2: Tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh dạng cọng rạ
đVT: %
Số hiệu bò ựực giống n Mean SE
151HO00433 9 69,60a 0,91 551HO00419 9 48,86c 0,87 551HO00426 9 71,90a 0,85 551HO00432 9 51,19c 0,77 551HO00457 9 41,67d 0,96 551HO00486 9 69,89a 0,61 551HO00590 9 58,34b 0,55 Trung bình 63 58,78 0,79
Ghi chú: Trong cùng một cột, các giá trị trung bình có chữ cái khác nhau là khác nhau có ý nghĩa thống kê (P<0,05).
Qua bảng 3.2. cho thấy, trung bình tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông của tinh bò phân biệt giới tắnh ựạt 58,78%. Bò ựực HF số hiệu 551HO00426 có tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông cao nhất ựạt 71,90%. Thấp nhất là bò ựực HF số hiệu 551HO00457, tỷ lệ tinh trùng sống chỉ ựạt 41,67%.
Nghiên cứu trên tinh dịch của bò HF nhập từ Hoa Kỳ về Việt Nam, Lê Bá Quế (2007) cho biết tỷ lệ tinh trùng sống ựạt trung bình 78,68%. Tác giả Al-
Badry (2012) khi nghiên cứu tinh ựông lạnh bò Friesian nuôi tại Iraq cho biết khi giải ựông tỷ lệ tinh trùng sống ựạt 77,11%.
Trong quá trình làm lạnh ựể ựông băng kiểm tra khoảng 10 - 50% tinh trùng bị chết do quá trình ựông băng xảy ra (Theo Maria, 1995 trắch từ Hà Văn Chiêu, 1999). Theo Maria (1995) trắch từ Hà Văn Chiêu (1999) sau khi giải ựông còn khoảng 50% ựến 90% tinh trùng sống ựược nhờ khả năng chịu lạnh của chắnh bản thân tinh trùng và tác dụng hỗ trợ của các chất hóa học có trong môi trường pha loãng tinh dịch. đường có tác dụng cân bằng áp suất thẩm thấu, chống ựông và là nguồn năng lượng cho tinh trùng hoạt ựộng sau giải ựông (Dương đình Long, 1978); vì cấu trúc hóa học của ựường có nhiều nhóm hydroxyl ựể tạo mối liên kết hydrogen trong cấu trúc của tế bào tinh trùng. Các Lipoprotein, lecitin trong lòng ựỏ trứng gà có tác dụng như một chất chống ựông cho tinh trùng. Chất ựệm Tris có tác dụng giữ nguyên màng tinh trùng trong quá trình ựông lạnh và thúc ựẩy trao ựổi chất sau giải ựông. Glycerol trong môi trường pha tinh có tác dụng như một chất chống ựông, chắnh vì có khả năng thẩm thấu qua màng tế bào, có khả năng hòa tan trong nước mạnh nên có tác dụng như là một dung môi cho các chất tan khác trong môi trường pha loãng, làm hạn chế sự tạo tinh thể nước và thúc ựẩy quá trình thủy tinh hóa tạo hạt nhỏ tránh sự giãn nở của tinh thể nước ựồng thời có tác dụng ngấm vào tinh trùng thay thế nước nội bào bị thoát ra ngoài giúp tinh trùng không bị teo do mất nước. đây là một vấn ựề ựã ựược nhiều nhà khoa học nghiên cứu ựể giảm ảnh hưởng xấu cho tinh trùng trong quá trình sản xuất tinh ựông lạnh nhằm nâng cao hiệu quả chăn nuôi bò ựực giống.
69,6 48,86 71,9 51,19 41,67 69,89 58,34 58,78 0 10 20 30 40 50 60 70 80 433 419 426 432 457 486 590 Trung bình Số hiệu bò ựực giống
Tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông
Biểu ựồ 3.2: Tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh dạng cọng rạ
Như vậy, kết quả tỷ lệ tinh trùng sống sau giải ựông của tinh bò HF phân biệt giới tắnh thấp hơn tỷ lệ tinh trùng sống trong tinh dịch bò HF và trong tinh bò HF không phân biệt giới tắnh là do tác ựộng bất lợi của quá trình tách lọc tinh