Phát hiện các dòng có tế bào chất bất dục

Một phần của tài liệu Nghiên cứu, ứng dụng chỉ thị phân tử ADN nhằm xác định gen CMS, gen duy trì, gen phục hồi phục vụ chọn tạo giống lúa lai ba dòng (Trang 54)

Việc phát hiện các dòng tế bào chất bất dục có ý nghĩa rất quan trọng trong hệ thống lúa lai ba dòng.Việc phát hiện ra các dòng bất dục tế báo chất đã giúp cho các nhà chọn giống khắc phục được nhược điểm lớn nhất của lúa lai ba dòng là hiện tượng đồng tế bào chất.

Để phát hiện những dòng có tế bào chất bất dục, chúng tôi tiến hành phản

ứng PCR sử dụng cặp mồi pcms trên tổng số 81 giống lúa địa phương dùng để

tạo ra các tổ hợp F1 đã nghiên cứu.

Với việc sử dụng cặp mồi pcms sẽ giúp cho ta phát hiện được những giống

có chứa tế bào chất bất dục dạng “WA”. Chỉ những giống nào có chứa gen quy định tế bào chất bất dục thì sẽ được nhân lên đoạn nhân lên này có kích thước 365 nu, còn những giống không có thì sẽ không được nhân lên. Sau khi tiến hành

phản ứng PCR và điện di sản phẩm chúng tôi phát hiện 3 giống có vệt băng ADN, và để kiểm tra xem vệt băng được nhân lên có chính xác là gen quy định tế bào chất bất dục không chúng tôi điện di các mẫu đó cùng với đối chứng và ladder. Kết quả được thể hiện ở hình 3.

Ghi chú: 1: ladder; 2: Kim 32A (đối chứng dương); 3: II 32B (đối chứng âm); 4: 10582; 5: 10489; 6: Vũ di3; 7: SC1; 8: 21-13-3-2; 9:10645; 10:10097; 11:C47; 12: Khang dân; 13: 10592

Qua hình 3, chúng ta thấy 3 giống có vết băng ADN được nhân lên có kích thước đúng với kích thước của gen quy định tế bào chất bất dục.

Như vậy, với việc sử dụng cặp mồi pcms chúng tôi đã phát hiện được 3

giống trên tổng số 81 giống lúa địa phương nghiên cứu. Đó là các giống 10582,

SC1, Khang dân. Từ kết quả nayg chúng ta có thể sử dụng cặp mồi pcms này để

tìm các giống có chứa tế bào chất bất dục dạng “WA” trong tập đoàn giống lúa địa phương Việt Nam.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu, ứng dụng chỉ thị phân tử ADN nhằm xác định gen CMS, gen duy trì, gen phục hồi phục vụ chọn tạo giống lúa lai ba dòng (Trang 54)