hhU v6u Ci\a h a t samn d : %
4 . 2 , :Ì. 1 ;JđQ j^:? q^n ^^^t -^J^^^eoHad^sc 025 d l ^ ạ.l6t h a t rnu^j -;^ifffi,
'VQ "^^ kSt qua tiiu d*^^© a trt^n Ciiuag
t S i da su d\fxìi2 ^^^ 36 o . ^ ỉ t r a t ^I t u ìxgt mwap d^ng, ^ o h ciilSt diđo oiìo aio k§ qua ©Ot s^^-^ephidex ^^9 o
oa© dl'&u klffl nijU te Juf?f© ^ni^ tron--« onc c3ug t r l n h ©8ag b5 truxJc day / ^ 5 , 9 3 , 9 i , iU3, 1-^5j7 i ©3t dts7© ©.*?» b^iag vc?l d ^ a d t r a t n a t r i 0 , o a i , păi 3,1 va r u t ^'I bang g r a d i e n t nftag d§ i J a ^ , Kgt qua ©ho thSy aau khi da h i p thu *3^h ( ^ t , ăaSa ^I*^ aiU ygu oúJ «^j-oii c h i ĩ t kh^ng
bi pciao hSp thu ^ ^ y 0^ ^ Q^<^S <^ ^^^^ 0,3.1* Pi^u năy ohuDg to ©a© ^ ohiSn phlăn cMnh ^ ^ ©uO dj.©h ©xilSt h g t mucfp d'5ng l ă niiltig p o l i p e p t l t oo tfnh gl'Eni caof ti© do
00 0j( I f o lan vJi oiiflt t r a o d3i ion o di"%u kij^n p-^ 3»1.
]?.;inh vi vpy c-o nrn chung t 3 i da năng ph ©uQ Aiag dj©h
dfm ©on b^ag vo xut ©ni8t If^J 4,0» Kgt qua da ta©h duy©
5 dinh 'J^'IA ( h . <•), ^a© dinh năy du^c ^cy ui^u l ă - ^ I I - I | - J I , - I I I , - i V -VQ -V tuo© oaoh goi ton t r o n g ©a© tóng b6 truc?© day / ' ' 9 3 , 3:*, 103J7» *>inh ùC^ii^ d^j^r© r u t xu5ng
0 uftng d? ^^a-1 j , U a , dinh - O i i - I l t 0 , 2 3 , d i n h - i J 2 i - I I I • ^
a , » M dinh ^Oii-IV I o,40^i va d i n h -J^i-V t ^,49 J . Kĩt qua oh© taSy trorig a8 CJ© dinn il-'i năy tiil ^^CTl-II, MOH-III va -^i^^íI-IV Cui Sa t a l 33,2/, tSug aS hogt d§ r u t xudng ovt» t^i^c b i ? t ^-Ciđl^IV ©hlỈa t J i 47,5/», no l ă
TI ©hu yĩu oua hpt mtr'p d-*ng, Oao d i n h ^iOn-J ^ ^Ofl^ll
ohi ohi Sta myt phl^n v&t nho tĩng atf i l ' ' cua oa© dinh
( 4 t ^ / i ) , vi -^^y oao t a f nr^hlfka vfe aau olii tpp t t u n g văo o«o dinh ©o -Ì-IJI ©ao, t r w c hSt l ă *^i02I-«IV,
« 39 -
il
^ 4
l
WcTi-i «crii Mcn-E M c n - ^ McTt-S:
I 1 u—'"{ y ! / • ^ o,-^ 0,X \ \ \ A"\ Thĩ ffch rut j mi ZÒ ••i5 iO
ii4m)^« 3|e k§ qua ©^t 3F«3©pi|is«iac '^^5 d^oh ©iiiSt ĩ<^ Cua h^t isoóp diliga
^jrt ©a klob tmiJo ^^«1 x 1^0^ a© du^©
©te b&ag vói d ^ xitr^^t u ^ t r i 0 , 0 2 ^ , pă 4»0« Hut ouiSt blog g r a ^ i o u t nOng
41^ ^ a ^ l , '^ha o:^© poan dôa ^ , T5©
d^ Ciiay 30^1 ĐiS,
..»«p««M»* Protein» x... ...x ^'I^ ..««««iiM» ilQag dO i^^đl,
s ĩ 00 t@ tim a l ^ ^ t i n h apOh oua -^wlI^Xl^ « I I I
«va «JLV da su d^ng piiucmg pxiop d l ^ di t r ^ ^^0 (ndng d5 g e l 7,'-? » p i ^ , 3 ) kh3ne ©o va oc ocf ch3t. KSt qua duyo t r l n h bay a h l n h 3 .
Val ^ u a n g .^ep d i ^ di trSo * ^ kiiSng ©ó ©j chSt
©ij© thSy t kiii d i f o di t u (-) Mng ( t ) djujh ©hiSt ^ ' ^
- 40 •
MOTI-Ii (il, 3đ, B) ^ . . J T I ^ I I ( h . 3 a ^ , 0) d^u oiil òhe m^t bjng p r o t o i n w i d$ d i d^ng diftì di glìn nhu
nhau {^^^ a , 3 ) . K^d diì*n d i tu t-t) sang(-.), <ìloh I c n ©Ot (h, 3đ, ă) ©ung ©,^o tagt a5 bang p r o t o i n . liVJTl-JV (h,3a2» »0 có 2 baag - at}t bing 0^9^ ©h^m va
mgt bang nua ohoy nhanh hcm, -^O-II-II va ^^CTI-III kh3ng cho bang p r o t e i n năo,
9 Ì phat h i ^ bang p3?otcin năo t r " n o5t g e l l ă co
HA va dh kahtìg diuh thcm k 6 t qua dlfn di 0 t r " n chung t o i da su d^fi^ 2 r)hu0n[4 p^j-ap aou :
a ) Phucmg pxiâp di^n di t r ^ n ^AG knOng co co oh3t^ voi mol mau tlGn h*anh dlfn di trtfe 2 ©Qt g e l , *^au khi
oh«y diC« ă± xong, Di§t ©$t gỉl khang mìagtn ma ©^^t thăoh
tung aoott 0 , 4 ©m, Dónh n a t ttmg phTSo c n t vai 100 ^ 1
dpA photphat 0,07 *•!» ph 7,6 lĩy djoh trong va piiat uifn
TI A bang i^huung n..ap khuSoh tan tr^ dia thpnh, GI5t g e l ©on 1?1 dung dh xa© djnh bJiig p r o t e l n niiu 0 t r " n , KSt qua eao thfSy, 0 o i i i ^ dl^^ di t u C-) song i^y/ 1 ^ ôt
cho 2 vung ^lA - mvt wng iSig v?i b:tug p r o t e i n có ' ^ 0 , 3
va aijt vung ung vĩi himg p r o t e i n H^ >,5, ịiOTI«.II ©ung
©ho 2 ^ n g SIA tucmg t y d4.ch l e a 091« ^ A O T U I I ©© m^t vung ^ I ^ ung vói bJag p r o t o i n R» 0 , 3 . ị:OTI-JV khSng 00 vung ^ I ^ năo, 0 c h i ^ dlTu ^1 tu (+) song (-•> § ^^^ ohi
dvttfo puat ulỈn 0 m§u dj.©h Ion ©Jt ve ^ a - I V . aă h a i dSu okd ©o tayt vung '^^^^ uăn cung vi t r ^ t n n c 5 t g e l .
b) Phutmg piiap difn di t r " n WG ©© ©a c h 3 t . Voi phucfug pnap năy ca© ©yt g ^ sau k u i cheiy dl^n di xong
dủ© i S y r^f u V0l dung d}.oh t r i p x i n pha t r o n g d^xn
Trls-HOl 0,1 /.'i, pii ci, 1 co CIÚQ OQOI^ 0,02 i^, Tripxin BQ
thuy phrhi co ciiSt co trong g o l , va cao p r o t e i n khOng phai l ă T I , ó* nhimg vi t r i 00' H t i d p x i n 00 04. tpo phc'o voi
©hSt klm hSn, vi v2y ccf ohfit 0 vung g e l do kiiong bJ, phSn
g i a i , kiii nhu^rri uiău b*dng ffiai^^o don vùn(; uăy au bat rđu
- 41 -
H^n^ ?- '>ifo ai^trrìa sol p o l l a o r i l a a i t 7,5,J p«i u , 3 teii5ag oo •flă 00 co òifit câc oiaS piiăa -iJ'SI-Il,
a) Gel kiìfmg oo co ohSt
b) 6«ạ 00 ocf chat
A, li^on (Xiiĩt *iOi, đuOH-ii, 0. M a n - i n I 0, ^1021-1V lA I A s »**«• e 1 ^ r^ ...> f^ĐS . j
« 42 •
^ lón yk wxms d§ mău oua w a g 3 0 ! oo n păhn năo
phan aoh hăa lugpng oia i l a -4 tvC dó. K i t qua thl
af'.M^n oho tii5y, khi alga fli t i (-)ean6 (+> dich l ^ a e $ t (h. 3 b i , A) oho 3 blng i3 w'i ooe giă t r * »., j
3»3 I 0,5 -«Q 0,7 troog dó b-1ng Rf 0,7 r 8 t mio -^ .ă, iaOíI-Ii (il, 3b, B) eó 2 bang n - n v t bing r ^ t QUO
^ BA, «^ 0,-^ va a j t bing 1<«, d t ^ , H^ 0 , 9 . .-lOTl-llI
( h , 3 b , , a) oùng có 2 tĩSng "I - m^t b-lng i m i , dpia, ?
% 0 , 3 -se tđt bang r ĩ t nho TO tn&, R^ 0 , ^ , Kiii difn di
tur ( • ; gang (-) bilng TI chi daye pùat iiifo a m§u d;ịoh
1 ^ o$t ve ..ai"I«IV, trong dó dJ.oh Icn oSt ( h . 3 b , , A) ©0 2 bang JI • m^t bang Ic^i, d0ia, ch^y o h ^ (ky *4^u l a b ^ 0) -va :nvt bang nho h<m va ci*giy nhanh hon (ky
h i ^ l a bang n ) . aOZI^iv (h,?b^.» ^)m. co a g t b^^ig i^l . co ©ung d$ <^i d^ng difn '11 vc?i b ^ g 0 ôa dj-ch l^m ©Ot.
Aera x o t toeo b^ k5t (lua di^n di chung tòt tnSy t
• ihuaVBg f^iap (a) tuy o© m e «bo phep phat aij^n
bttM( ^ d0a i^±m htm nmmg l ^ l có d§ oh.{nh xâ© va d$ nh^y kóm hcfn ro r ^ t phtfcrnG phap ( b ) , ^^ th^ txong thi nĩsiillm nay, 0 piitwmg ph3p ( b ) , mìi© d?iu ohi ap d^jng
Ivtgng mail chS» d i f n eli co 5JIA ^ja© aan e phisong piiap (a)
t& 10*4i0 i)in nhung da ohat Ì I Ì ; Ì I thStai duiyo bSng H R^
Q,7 va hrnđ n chay ^^ wfo ^ o «&a d],©h 1 ^ ©;t, va
bSng 'il H 0^5 (J cttau i^^MJI-JII, i-^hủfm« i^iap (o) ©hi ciio
b l S t vung gca 00 ^ 9 t r o n g kxil do phucmg phap (b) oho ptiĩp phat uitto tn^'o t i S p t i t r f » dO iSti ©uă buog ^'1
t r ^ ©3t g o l ,
•f 03n ou vQO d$ d i d^ng d Ĩ ^ di ©ung nhu ©i^iăng d$
mkìx ©uă ©ao bSng ^ ©uQ co© «^0^- có tah k ĩ t lu^n rhag
tóng 21 Rj 0 , 5 , bang *?! H^ 0 , 3 va b?iig o choy Ve ©yp© ÌB&
l ă l^u l\z0t tvxmg ìSag rk ^^Ó^I-JI, ÔI-III v& iOìI-IY
tpSn al^e ky dB i:ìP-3ephadex C25. B^Ajg i l 8^ 0,TJ v© bSng n ©hpy vfe 0^0 ăn ©o l e l ă iBn Iw^t tỉcmc ung -VT! Cxl-I
« 43 «
nay qua tuSp n ^ cìiung t 3 l dura oó - l i ^ clTn n ủii ouu trong tei^ điifta năy, s^ có .^t ©oQ b jug *I i^, 0,? ty m^u *^^1*X-Ii V3 bcing ^ *^ 0^5 o m ^ ^ J J J U I I ©©' l e do
au 1 ^ fa§t lugrog rfit nho oua dinh 09 v5o dinh kla khi tooh r i ^ c^o dinh năy, .^ĩt qua tiif or^ifcta ©ung ©on
òio thSy ^ J i ^ - H , ^.*JxX-.Ili yă -^wH-JV d:^ QUìxa dòag
nhSt V& mgt di&i d i , ©Sn ,4iat du^© t i n h ©poh t i S p ,
> -x^t cawp d ^ chi«a '^ H (troug dó ©o "^JII^IV)
00 tinh kíSm ©aô 0 ph a , 3 v3n t£ch di£^ Awng v^ eh^y
v6 Oì/o aa tzoug ;iipn tr^s&ng, Tinh difit uay rfit f t gj^p
o ©a© '^ ©m y6u cua hpt bBu bf» vi v§y .*OiI-IV -ySn eo hSm lu^mg oao nìiSt trong atf oa© "il cua hot miop d^g
BO l ă d5i tuysig ciìlnh tì?ong u ^ i T n ©i^ ©uă ©hung t^i^
••^•^.^ ^^ it,Y cBa e s t ,^ftQẻg ^f^ - - l : £ L
Il imí «mn iiiiipirw tmiMmmmemitmimỈmmmmmmm^
%Q v&o agr khlog dinh scy b^ V& trpug lyxmg plUto tur cua oao ^1 h^t ottpc?? d^og a trfh (phfin 4,2,1) aS
hy voug ring cao *OfI^ii^ - I I I va -JV ÌQ đfg^© tìnìk ajoh
«gt paBn quo ojt 'iP-^phadex ^^'5 ©o thỉ l^n nhung pro-
tein trpng luayftig phan t u lem, kii^ng 00 2IA nfxx ©hung t51 da ti8n hănh t i u rlt.ng ©a© ditih (dG'xL^) năy» 08 d^© a
4^0 va iSn l u y t ©iio aa© ky qua ©^t 'Jephadex <^75,
iCfit qua a ^nh 4 va baog 4 ©ho ttxSy m5i mgt ©bS phla k^ii a-^o ky qaa ©2* ^nhndox 375 (Xùa oao '^ dinh pro-
tein (-a va - b ) , trong do tìii ©o dinh liiu hai (-b) l ă ©o HA, Tuy vgy» dinh protein thu tuiSt ou^ ^^^^'l-il (h, 4a) v& ^ a -iCxUix (h«4b) 1?) rSt riho, vi vgy d^ apoh
duo ©a 2 ohi phIm năy 33U khi sa© ky quo ©vt ^ej^adex
Qri9 dfeu trlng lou k.3ng dang kỉ, Troag k^il dó dQ ôoh
oja .JTi-lV i p i ting iSn kaoaog -#5 iSn nr!a da l o g ! d i diiyo m^t phito protoin ku3ng 00 nA dađ k*^ (h,4o,IVa),
• 44 *
T^n^l nhủ€ms :^uf'p difn 41 tr^n ^^^5 khSng co 00
OhSt okio tiiSy 0 ohl^u difn di •& U ) ^ u i g ( - ) .liah
aCil-IVa (h.53,S) va *^^OM«IVb ( h , 5 a , 8 ) dfeu ©xio mjt
bang p r o t e i n , nv^i a ^ t b:&^ năy IBn lisgt t u ^ a ; mg vh
m§t tron£^ 3 bang p r o t e i n ©uă ăGUJlN trutte kui aio
ky qua o j t Senhadex ^=^73 (h.Sn, A)^
Kgt qua dig* a i tr^n i*AQ ©ó ©a ciiSt ©ao thfly ohi
00' bìing p r o t e i n cua diuh :-*CTl-pIVb ( h . 5 b , <3) i% ©©' a j t b3ng tL ©ó cune vi t r ^ trfn ©St gel voi bang ^I dgry
nhSt cua i i a m : V ban dSu ( h , 5 a , A), DÌ'&U do c^umg to MOTI-JV Qh|la du^e fi»u kiii yc^o ky qua ©Qt ^ephadex 375
co tu^ da du9^o t i n h a&tăx»
i a i t i a ^ , ->o ky qua o$t ^^opheidcx ^7!? ©a© ©n6 a« ^ÌQ.-X.JX} b» •^CiX«JLXX f o, ACÌJ^JLY
OSt ©o liích thi^© 1t35 X 135aBi, Gao di^Ssi k i ^ th£ u , : h i ^ -Ki ky hitHi nhu ghi 1/ hinh U
10 T I I 0 ?• • } > • ( 0 1 ) ^00 Zùù T/7e:* f/ch rcct ^ mi •r20 • .\S • s . K
. 45 . 10 10 ^ *> . ^ ^ -iOO 2.0Q ThS' tìch f'ut j m.L T 2 0 ^ X h \0^ 200 Thâ tfch rat y mi
- 46 «
hlnh g- Bign di trcn gel poliaorilamit 7,5.{
p^i U,3 ka<?ug co -va oó <^J zh^t "iOi:I-IV,
a) Gel kiioriỉ; oo co ch^t b) Gel có co chat
A, UGil-IV ojagn dug?o tu hx^o eao ky qua ©vt
SP-i>ephatex ^25,
0. ^onjcvb»
D, MOn^Y aau kiii alto ky Sk I n o ,
' • • • • t r \ 1 m ^: e IBÌĨ^ ei- ^ 4B ..JxX^IV,
s ĩ ti§p Ivo khang dinh m^t ca©h hoăn toăn ©h:fc
©han d$ t i n h g^ch ou^ ^^3^1-1 V thu dugfc sau khi s^^o ky qua c^t ^ h ^ d ^ c G75 da au d^^ng phucmg phap al© ky a l l ì ^ qua o$t Trlpxin-^ephaiosa 4ii, S3y l ă phu^tig
piiâp 00 tfnh dìlo hipu rSt ©ao dffi v0t oao "^ va r S t hay dxjpgo aling tTOOp; ôo teJ- 0^5^*11^ t i n h sQoh oao 1?I,
» 47 -•
c^t 'trlpxio-. ^epharoea ^K S8t quo xa© dinh nrotein va ^ 1 ^ ©ua ^oh paan hSp tnu t u c § t ©a© ky a i ly© ©ho thfiy
hopt d) n % g ©ua oiiS 0hdik năy któng t ă i g l^^n so v ^ boa dBu ( b w g 4 ) , Bitju năy I iSn nua ©hung to ^^OAX*IV ©© t h ỉ
da d^ng aiỉStm
• 0
K8t qua difn di t r % 1*^0 fchSog co o0 ehSt dung dich
oh*t klm ham nh«to du^o aau kni s'© ky qua ©$t T r i p x l n - S^>liaro«a 4i^ ©ho th5y đSt h i j n th«« Q§t l ^ g protein
o«yl» bSng m ( h , 5 a , J) va Wgig năy oung co ^ A ( h , 3 b , i>
V ^ m)» DSjr oó th^ l ă dgng h i t ^ ohinh ©^o ^3^X*IV, k^ iii^u l ă .i3Tl-j:V*^ vi t r o a g ÙÌI^ÌU trwcmg hsfp O ' ^ » ^ 3 ,
103, «S^Ji^ kiii t i 6 n amh aio ky a l lỷc ©a© «I qua ©Jt
Tripxio-Sepharogsa thuong x l y ra h l ^ tuffng t r i p x i n tr*'*n ©yt tiiuy phSD oBu p o p t i t -j?-|-r,- trong trung tam phan ung
Oua ©ả9t klt9 hm dUng ti;^i t^o n?o d^og hlfii ohinh oua no, ^fDg n i ^ ohinh c^a *^^ g l f o g veri d^ng tgt nuifn (clging bau
dfttt) iA a:l%u t^Eih ©hit nhu hôt d } , trptag lu(ftig phSn tu» tính d^o hifii , , , nhuDg tic l i e o kSt p o p t i t giua ©ao e x i t
amln ? | va ^^ 14 ©It dtrfe đ trong ph*^ tu ©0 t h ^ mjt
n x ^ • **^3 va utijt mióla -300*" t u So« "^1 v^y t u y thujo p^i
laSi t r u ^ g «ă no me tfob diCu «^^^cmg hôo t i o h di^n Sm leni hfili ăgng bao iBu, Nhu t r ^ o da thSy ^^^^STUY l a m-Jt ©atiou
0 măi tn.Wig d l ^ r^i co ph ìi^3 va no <^uynn ve eypo ăn t r o n g
d i ^ tnjoFUg, l^ìxis v^'j 0 ii^i tn.'ong p*i B,3 uoom • ^^h^ ©ủ^ dfng hi0u ©hioh se bj. ©huy^ tamoh dging trung zioa (-^'^i^ìt do do d^ng hi£^u ohiuh ©ua ^aXI-JV ©© t{oh difn te lom hcm
d^Qg t)^ miilkit nói ©âeh k ^ o l ă t^oh d l ^ ducmg ketnhcm« vi v$y k h i dlf^ di se ©huy^ v^ ©at<:>t ©h^tt hOttf
d i xa© dj^nh chi© ©h^^ am b-mg m mSi t^ tuănh ©o phai l ă dyng h i f u ©hlnh oua ĐHlJiY nay kh^ng onung t o i dH tit!^
tiăah t a l n^iiffs h i f u ©hinh i l nay try© t l 5 p b ^ g t r l p x i o 0 ptt 3 , 4 5 , thao phumg phap om ^^©heohtor 'm Bcrger C^'^J
( x i a phlta 3,2«3)4 Txoag d l ^ k l ^ uăy t r i p x i n se thiiy phan
©Su p o p t i t mi^^2^^ t£ong t n u i g tda pban i n g ouP «^'^Ôl^lT de
tyo l . ă n h d ^ g hi^u ©hinh oiia no\ ^ 5 t qua k i ^ t r ^ b ^ ^
piăxmg phap dlf$n d i t r a ?^0 ( c a l ^ ^ t u ( • ) aang ( - ) ) cho thSy
- 48 -
bSng v) có c^Klg dO di d^ng difn 'Il vĩl -lOTI-IV ( h , 5 a , A ) ,
bang thu- 2 (h.óa,B,bang t j có cu;Vi vi t r i ' vai t r i p x i n ( h , 5 a , 0 ) va bati^; cu5i cunf', ch§y chSn han ca (h,6ajB,baag m). Troug s5 năy ohi có bSng v va bang m l ă có TIĂii,6b,B),
Tiii nghi&a da ciiung miuh rang buai^ m l a sau phlm duiyo t§»o thanh ciò tao clync cua t r i p x l a tr?^n ..iCII-IV -VB l a dgng hifu chiuh Oua nó. Hai bing protein i ^ ©ó l'IA cua ^vioa-lT
nhgn dir?o sau k h i sac ky a i l'^cc ( h , 5 a , D va h^Slô^^) cuiah
gitili 9^ i ă ^ a di trt^-B g e l p o l i a o r i l a c i i t 7,5/J pd £5,3 ichong co va co ccf ciiSt san phSm hifu chinh cua •-OTI^IV.
a . Gỉl kuoug co co chSt b» Gel co co OiiSt
Ạ iuaXI-JV trutte khi hifu chinh B. ^ivJTX-IV sau kni hifu chinh C. Tripxin
e
I
i
» 49 «
l a a ^ e t^ nxilăx va dgng hifu cuiuh ©iia e W ^•3* ^1«
iCSt quo nr^ìí^ ouu o t r ' a ©ho paĩp kSt l a ^ riteg
^iOil-XV tuu ^'4«?c aau kA*i 9 ^ ky quo o§t ^^ephadax ^>
l ă rn^t ch6 puăa '^5 da duy© t i u h ^©n (nòu co In© ^ TI
kij'o t.*l aau k.ii aio ky ai l^o ae Oi-{ìn ótiajrc * b i n g ) , Cbang t o i t l ĩ n ịmih l o ^ i nuidl ohe [ìhkst ^ J I l - I V bSug
piaicrag phep 0^© I:y ^iU® c^t i^ojahadex - .
Toăn b§ qua t r t n n t i u h s^oh -"^Tl-iV dupgr© tóm t l t
0* hi^c: ^ ' ^ ẻ rjy co 1, ^ua d?^ eó th^ tu-i^ r^n^:^ qui
t l n b ooch Cao 'I năy bno ^^M 1 c h i ỉ t r a t cao ^1 t u h j t
btii|rj 'un^:: d{.oii a Tlt s^o -y «i|oi-t c - l ĩ t li^t qua ÓSf''^^'-»