D. 4Pm l^ í IraP ; Ira lG du^óc tron ngay tr fdc khi dán^
K. Thuóc thú Polin Gio calte au pha loánn; vdi nudc t h e o t i l e 1 : 1
Gac t h i í t h u ó c t h ú t r e n p h á n ú n g v d i p r o t e i n c h o s a n phára c o mau x a n h d ^ m ' - v á l á raot phúdng p h á p e ó do n h a y c a o t r o n g v i f e x a c d i n h p r o t e i n . + Lap d u d n g c h u a n p r o t e i n : DÚn(< p i p e t h ú t 0 , 1 - 0 , 9 m l d u n g d i c h ^Tlburain h u y é t t h a n h b ó 0 , 5 r a g / m l v á o 9 ^n^r^ n g h i e r a c ó d á n h a ó t h ú t i / t ú 1 - 9 . Gho v a o raoi ong 5ml d u n g d i c h D, s a u d ó tham n u d c c a t den c u n g mot t h é t í c h l á 9 m l . L'ie d é u , d é yen I 5 p h ú t , bó s u n g t h e m v á o
moi o n g Iral d u n g d i c h E, l á c d é u d é y é n 3 0 p h ú t .
!-.'lau s o s a n h k h é n g c ó p r o t e i n : 5ml d u n g d i c h D, 4ral HjO, I m l d u n g d i c h E .
Do mat do q u a n g D d biT'dc s ó n g 750nm. K é t quá di/dc t r i n h
b á v d b á n g 2 2 v á h i n h 2 3 -
Bang 2 2 '• - jCáy di/ng d'/dap; c h u á n p r o t e i n .
' ["íáu : 1 : 2 : 3 : ^ : 5 : b : 7 : 8 : 9
ra álbumin: : : : • • * ' * j
huyét thanb:0,05 : 0,1 :0,15 :G,2 :0,2,5 :0,3 :0,35 :0,4 :0,¿í5' bo (mg)
0 , 2 r 0 , 1 -- + o o , ^2'-> O, 7 p i ^ o t a i n ^ "^ Dúdng chuan p r o t e i n . Hinh 23 : I I I . 4 . 1 . 2 - 5ác_dinji^jiôt_dô phinngg pháp H e i n k e l (1956) / " 3 _ 7 .
•^ Nguyen t á e : Xac dinh 1 ^'ón;^, t i n h b o t b i phan "¡iái di/a
t r e n ed sd xac d i n h raúc do giarn cúdng do mau eua hon hdp phan ling v d i dung d i c h i o t .
oón v i h o a t dong enzira 1 a l u d a \ enzira co kha nanr.; phan
g i á i 1 mg t i n h bot s a u 30 p h ú t c5 '30 C.
+ Oách t i é n hanh : Gho vao ong nghifra ] ral dunpj d i c h t i n h b o t 1 , 1 ral duncí; d i c h NaGl 0,1'^'', vá 2inl dunp. d i c h dem p h o t p h a t
0,05]vT, pX{ f^.O, l á c d é u , n;iú 3 30*^0 t r o n g 15 - -G phút dé dung d i c h l a t den ^;0 G. Théra váo hon hdp 1 ral enzira dá d a t den 30 l,
Lac d é u , t i é p t u c giiT" ó 30 G dúng 30 p h ú t . Lay ónp; nghifm r a
khoi t u ara, ebo n g a y v a o 5 mi dung d i c h a x i t s u n f o s a l i s i l i c 20!í de lara ngúng phán ú n g , sau v a i p h u t t h i l o e .
oong song v d i raáu t h i nghiem lara máu so s á n b , cnn\^., tudng
tu nhú t r e n nbifng cho dung d i c h a x i t s u n f o s a l i s i l i c vao t r i ' d c r o i uidi cho dung d i c h e n z i m .
Lay 1 ral d i c h l o e cua raau t b í nghiera cung nh"' mau so lánh
cho v á o óng nghiera, thém 9ral dung d i c h i o t ph-i loráng l"^/" l á n .
6o raau d b^./dc s o n g 5bOnrạ Lav h i e u só doc dídc tr'^ri ^náv {úr^
raáu so s á n b vá t h i nghiera, d ó i c h i é u vdi dúdng con;-, t i e u c n u á n , t i n h só rag t i n h b o t dá b i p b a n g i á i .
+ HÓa ehát :
1- Dung dich NaGl 0,1^',.
2. Dung dich axit sunfosalisilic 20'/..
^ 3. Dung dicb iot : hóa tan Ig iot tronr, :;ral Jung dich ^ó chúa 2g KI,^thém nudc cát váo den 300ral. M Í dúng pha íoáng •dung dich nky 150 lan.
4. Dung dich dfm photphat 0,05ívl, pH : b,0.
5. Dung dich tinh bot tieu chuan P^ : cari tinh bot, Ig (B.D.H.soluble), tron vdi ir>Til nnúc cat, thera BCral ñu-'.'íc cát dang sol, khuáy déu, néu can tién tuc dun aéi dé nh^n dude dung dich trong suót, dé nguoi, cho váo hinh dinh raúc lOOral va théra núdc cát cho den vach.
+ T|p dúdng chuan xác dinh ho;>t dô-amiJazạ
Lay 2, 4, 6, 8 vá lOral dunr5 dich tinh bot 1-Y, cho váo 5 ong nphifm, sau dó théra nw'dc cát váo den ] ^ml.
^' Lay ^.',lml dung dich tinh bot d moi &n- nghifm tren thém váo dó : 0,lral dung dich NaGl 0,1?{., o, .-ral dung dich dfra, 0,1 ral nudc cát, 0,5[nl dung dich axit sunfosalisilic :_'0'', lác dau va thera 9rnl dung dich iot dá pha loáng 150 l.-ln. Do raa t ^uang tren raáy GEGIL 5 bú^5c sóng 560nrạ Dan,, dich so oánb co taánh phán tUdng txi nhúng khong có tinh bot. lét quá dude chi ra d báng
23- vá hinh 24
Eang 23 : Xay d^ng dúdn?^ chuaa ho«it df t<-arailBK:a
I ; : : ; : :
; J"au ; 1 ; 2 ; - 3 : ^- i 5 |
m tinh bot
(m(í)
0,2 0,4 T I P. 1,0
56 o o,n5 i^nii^ rOf,
:",1"2 : 0,1^8
'u: k e t qua d b a n g t a xạy dt/ng dúdng chuna x-^c ^inh họjt do enzira o < - a ; n i l a z a .
D 5 6 0 0 , 1 2 ' 0 , 1 2 ' 0,06 G,5 1 , ^ t i n h b o t ^ Hinh ¿ 4 - Dí'dnp c h u á n x á c d-inh h o n t do c < - ' r n i l ' - i z n . I I I . 4 . 1 . 3 — x á c d i n h c á c a r a i n o a x j t : / 75__/ •í- Hguyén t á e v a hoa c h a t : Thém 0 , 2 m l r j i n h y d r i n ' ( c o nonf^ do l a ::^fn^^/rai ph.-t t r o n g dera a x i t a x é t i c - a x é t a t , pH : 5 / ~ 5 ^ / , v a o 1 ral oLitjg d i c h a m i n o a x i t . Dunf-;; d i c i i dúdc d o t n o n g d' IGO (; t r o n g 10 p h ú t , s a n pham t a o t h a n b e o mau t i r a d o i v d i t a t c-i a m i n o a x i t t n í p r u l i n . Lara l a n b va l o quarir^ d bí'dc s o n g 570mi c h o t;^ t ca c a e a m i n o a x i t
t r ú p r o l i n d o 3 440nra . ^^'^ot d\fóng c h u a n ;La diíóc xạv di/ng c h o
c á c a n i n o a x i t k b a c n h a u . - j i d i h a n l o nhạy l a 0 , l | H r a o l . •f Lap dúdng c h u a n e n e a m i n o a x i t :
T r o n g v i f e k h á o sn t si/ ú c c h e , c h u n g t o i co d u n g a x i t
a s p a c t i c cvtn^, nh\i c á c a s p a c t a t . d á t h i é m , Tjan 3 dny tronf^ v i e c
d á n h g i á hám l i f d n g c á c a m i n o a x i t , chúnfr t o i dá s ú d u n g HpAsp x.av íMfnp; dúdnp' chu:-jn.
KÚt v á o 5 on'jj n g h i e m t h e o th'^ t\f 0 , 2 ;